способ диагностики целиакии у детей раннего возраста

Формула изобретения

Способ диагностики целиакии у детей раннего возраста, включающий биохимическое исследование биологического материала у больных с длительной неинфекционной диареей, отличающийся тем, что проводят качественное определение индикана в моче и при положительной реакции диагностируют целиакию.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследования целиакии у детей.

Известно, что целиакия протекает с синдромом мальабсорбции белков злаков (глиадина и др.). Клинически схожим с целиакией синдромом является мальабсорбция углеводов - дисахаридазная недостаточность (в первую очередь лактазная).

Основными лабораторными тестами в диагностике целиакии являются: нарушение всасывания белков и жиров, в меньшей степени нарушение всасывания углеводов, повышенное содержание в сыворотке крови иммуноглобулина A в период обострения. Основными лабораторными тестами в диагностике дисахаридазной недостаточности являются: плоская сахарная кривая с непереносимыми дисахаридами, идентификация повышенного количества непереносимых углеводов в кале [1].

Указанные методы являются трудоемкими и применяются в настоящее время по принципу клинических показаний к комплексному лабораторному обследованию ребенка. Скринирующих лабораторных методов, определяющих показания к целенаправленному лабораторному обследованию детей при целиках, не описано. Вследствие этого количество методов обследования при подозрении на целиакию достаточно велико.

В качестве способа скринирующей лабораторной экспресс-диагностики целиакии предлагается определение индиканурии.

Известно, что индиканурия является результатом интенсивного разложения в организме - опухоли, эмпиемы, бронхоэктазии, абсцессы, а также интенсивного гниения белковых веществ в кишечнике - стенозы кишечника, инвагинация, тиф, интенсивные запоры [2, 4]. У здоровых детей индикан в моче качественными методами не выявляется [2]. Для диагностики синдрома мальабсорбции при целиакии у детей определение индикана в моче не описано.

Целью изобретения является определение наличия индиканурии при целиакии как скринирующего лабораторного теста экспресс-диагностики мальабсорбции белка при этом заболевании. Метод качественного определения индикана в моче известен [2, 3, 4].

Метод определения индикана в моче.

Индикан представляет собой калиевую соль индоксилсерной кислоты. В практических лабораторных чаще применяют качественное исследование (обнаружение) индикана в моче. Наиболее распространенной является проба Обермейера, основанная на образовании синего и красного индиго.

Проба Обермейера. Индикан превращают в индоксил, в результате окисления которого образуется синего индиго (индиготин) и красное индиго (индигорубин).

Реактивы: Ацетат свинца 100 г/л; хлорное железо, хлористоводородная кислота концентрированная, отн. плотность 1,19; реактив Обермайера: 0,4 г хлорного железа и 100 мл концентрированной хлористоводородной кислоты; хлороформ.

Ход определения индикана. Несколько миллилитров мочи (например, 4 мл) смешивают с раствором ацетата свинца в соотношении по объему 1:120 (например, 0,4 мл), фильтруют. Смешивают 2 мл фильтрата с реактивом Обермейера в соотношении 1:1, через 15 мин прибавляют 1 мл хлороформа.

Оценка результатов. Обычно при индиканурии слой хлороформа окрашивается в голубой или синий цвет. При отсутствии индиканурии слой хлороформа прозрачный. При голубой окраске реакция оценивается знаком "+", при сине-голубой "++", при темно-синей "+++".

Примечание. При наличии солей йода в моче (йодсодержащие медикаменты) образуется красно-фиолетовая окраска хлороформа, которая исчезает после прибавления нескольких капель раствора тиосульфата натрия (200 г/л).

Указанная цель изобретения достигается применением метода определения индикации в любой порции мочи в случае доказательства ее положительного результата, т.е. наличия индиканурии.

Объектом исследования является ребенок любого, но преимущественно грудного и раннего возраста, с признаками синдрома мальабсорбции. Показанием к обследованию является наличие длительной (более 3 недель) диареи неинфекционного генеза (стул более 3 раз в сутки) и/или дисфункции кишечника (полифекалия, вздутие живота, боли в животе). Условием обследования является отсутствие гнойно-воспалительных заболеваний у ребенка, особенно затяжных форм воспалительных заболеваний бронхов и легких. В этих случаях индиканурия может быть обусловлена гнилостным распадом белков в очагах бактериального воспаления. Следует иметь ввиду, что при другом синдроме мальабсорбции, муковисцидозе у детей индиканурия может быть обусловлена длительным течением бактериального воспаления может быть обусловлена дополнительным течением бактериального воспаления в бронхолегочной ткани.

Всего определение индикана в моче проведено у 64 детей. Из них здоровых детей в возрасте преимущественно до 1 года было 23. Ни в одном случае индиканурия обнаружена не была.

Детей с цилиакией было 11 (до 1 года - 3, от 1 до 2 лет - 3, и от 2 до 3 лет - 5). У всех детей обнаружена индиканурия, качественное выражение которой соответствовало обозначению "+ + +".

С непереносимостью лактозы, в связи с дифференциальной диагностикой, обследовано 30 детей: от 1,5 мес до 6 мес - 21, от 6 мес до 1 года - 6, от 1 до 2 лет - 3. Ни в одном случае индиканурия не обнаружена.

Пример 1.

Олег У., поступил в детскую городскую больницу г. Ставрополя в возрасте 1 года до 6 мес. Ребенок от первой беременности, протекавшей с нефропатией II степени и дисфункцией родовой деятельности. Масса тела при рождении 3100, рост 50 см. Находился в отделении патологии новорожденных по поводу перинатальной энцефалопатии. В возрасте 5 мес перенос острый энтероколит, в возрасте 6 мес. диагностирован дисбактериоз кишечника, в возрасте 10 и 11 мес болел острыми респираторными вирусными инфекциями и обструктивным бронхитом. В возрасте 1 г перенос дизентерию (тир Флекснер), после которой появились признаки настоящего заболевания.

При поступлении состояние средней тяжести, обусловленное гипотрофией III степени (масса тела 7600 г). Гипотрофия имеет алиментарный генез: аппетит плохой, стул 2 раза в сутки, обильный, кашицеобразный (полифекалия), сероватого цвета без примесей. На фоне гипотрофиии определяется значительно увеличенный, вздутый газами живот, отвисший книзу. Заболеваний, вызванных бактериальным воспалением, нет. Рентгенологически - симптомом "чашеобразования" в кишечнике. В копрограмме умеренное количество нейтрального жира и значительное - омыленного. В крови умеренная железодифицитная анемия. Определение углеводов и молочной кислоты в кале: лактозы нет, моносахариды (глюкоза с галактозой) - 1,9 г/л кала, молочная кислота - 3,6 ммоль/л кала. Лактозотолерантый тест - прирост глюкозы превышает 1,1 ммоль/л. Содержание электролитов пота не превышает 50 ммоль/л. В моче определяется значительное количество индикана, оцениваемое качественной реакцией на "+ + +". Диагноз: целиакия, осложнение гипотрофия III степени, железодефицитная анемия. Назначена аглиадиновая диета, эффект от которой проявился через 8 дней исчезновением полифекалии. Выписан через 2 мес со значительным улучшением, гипотрофией II степени и рекомендацией соблюдать аглиадиновую диету в течение 2 лет. Индикан в моче при выписке не обнаружен.

Пример 2.

Катя Ж. , в возрасте 2,5 мес поступила в детскую больницу г. Ставрополя по поводу респираторной вирусной инфекции и длительной диареи. Девочка от первой беременности, протекавшей с токсикозом и нефропатией. Родилась в условиях слабой родовой деятельности с массой тела 3450 г и ростом 51 см. В ближайшее время лечилась по поводу перинатальной энцефалопатии. Находится на естественном вскармливании.

Начиная с родильного дома, у ребенка наблюдался неустойчивый стул от 2 до 7 раз в сутки. В период заболевания ОРВИ при поступлении в больницу стул наблюдался после каждого кормления грудью: кашицеобразный, реже водянистый, зеленоватого цвета, со слизью, иногда с пеной. Во время кормления - урчание в животе и его вздутие, частый отказ от еды через 3 - 5 мин после начала кормления. Признаки ОРВИ в виде субфебрильной температуры и насморка.

При объективном обследовании определена гипотрофия II степени (масса тела 4000 г), психомоторное развитие соответствует возрасту. Живот вздут, болезнен при пальпации. Другой существенной патологии не найдено.

При дополнительном лабораторном исследовании выявлены следующие данные. При биохимическом исследовании кала: реакция Бенедикта - углеводов 10 - 15 г/л кала, лактоза - 6,7 г/кала, моносахариды (глюкоза с галактозой) - 4,2 г/л кала, молочная кислота - 36,4 ммоль/л кала; крахмала, сахарозы и фруктозы в кале нет. Лактозотолерантный тест (нагрузка лактозой 2 г/кг массы тела): глюкозы крови натощак - 3,6 ммоль/л, через 30 мин после нагрузки лактозой - 3,7 ммоль/л, через 60 мин - 3,9 ммоль/л. Индикан в моче - отрицательная реакция.

Диагноз: непереносимость лактозы; сопутствующий - острая респираторная вирусная инфекция легкой формы; осложнение - гипотрофия II степени. Проведена коррекция питания: 3 кормления грудным молоком заменены смесью на соевой основе "Симилак-изомил". Проводилось лечение гипотрофии внутривенным введением аминокислот (аминон) парентеральным введением витаминов; энтеральная ферментотерапия не применялась. Стул стал реже, до 3 раз в сутки, в кале исчезли слизь и пена, консистенция стала кашицеобразной. Количество углеводов в кале значительно уменьшилось: лактоза - 2,6 г/л, глюкоза с галактозой - 2,5 г/л, молочная кислота - 15,9 ммоль/л. Выписана со значительным улучшением, прибавкой массы тела, рекомендовано смешанное вскармливание с использованием смесей на соевой основе.

Таким образом, применяемый способ качественного определения наличия индиканурии у детей при соблюдении клинических условий обеспечивает.

доказательство синдрома мальсорбции белка, в частности наличие целиакии, диагноз который может уточняться в дальнейшем известными клиническими и лабораторными методами, применяемыми строго целенаправленно;

Исключение синдрома мальабсорбции углеводов (дисахаридазной недостаточности):

сокращение количества лабораторных методик, в частности, для диагностики непереносимости углеводов;

возможность скринирующей лабораторной экспресс-диагностики целиакии в любой лаборатории, в том числе в поликлинической;

быстрота скринирующей лабораторной диагностики целиакии.

Источники информации.

1. Изачик Ю.А. Синдром мальабсорбции у детей. М., 1991 с. 215 - 217.

2. Тодоров Й. Клинические лабораторные исследования в педиатрии. София, 1963 с. 129 - 131.

3. Колб В.Г., Камышников В.С. справочник по клинической химии, 2-е изд., перераб. и дополн. Минск, 1982 с. 100 - 102.

4. Лабораторные методы исследования в клинике. /Под ред. В.В.Меньшикова/. М., 1987 с. 224-224.