комплекс включения 3-морфолиносиднонимина или его соли, или его таутомерного изомера с циклодекстрином или производным циклодекстрина, способ его получения и содержащая его фармацевтическая композиция, способ получения фармацевтической композиции и способ лечения стенокардии и ишемической болезни человека

Формула изобретения

1. Комплекс включения 3-морфолиносиднонимина или его соли, или его таутомерного изомера с циклодекстрином или производным циклодекстрина, преимущественно - или -циклодекстрином, гидроксипропил--циклодекстрином, гептакис-2,6-диметил--циклодекстрином, гептакис-2,3,6-три-о-метил--циклодекстрином, ионным водорастворимым циклодекстриновым полимером (СДР SI) с мол.м. менее 10000.

2. Способ получения комплекса включения 3-морфолиносиднонимина или его соли, или его таутомерного изомера с циклодекстрином или производным циклодекстрина, преимущественно -циклодекстрином, гидроксипропил--циклодекстрином, гептакис-2,6-диметил--циклодекстрином, гептакис-2,3,6-три-о-метил--циклодекстрином, взаимодействием 3-морфолиносиднонимина или его соли, или его таутомерного изомера с циклодекстрином или производным циклодекстрина, преимущественно, -циклодекстрином, гидроксипропил--циклодекстрином, гептакис-2,6-диметил--циклодекстрином, гептакис-2,3,6-три-о-метил--циклодекстрином, соответственно, в водной среде с последующим выделением комплекса из раствора путем удаления воды.

3. Фармацевтическая композиция, включающая производное сиднонимина и фармацевтически приемлемые целевые добавки, отличающаяся тем, что в качестве производного сиднонимина она содержит комплекс включения, охарактеризованный в п.1.

4. Способ получения фармацевтической композиции, включающий смешение производного сиднонимина с фармацевтически приемлемыми целевыми добавками, отличающийся тем, что в качестве производного сиднонимина используют эффективное количество комплекса включения, охарактеризованного в п.1.

5. Способ лечения стенокардии и ишемической болезни человека введением в организм производного сиднонимина, отличающийся тем, что в качестве производного сиднонимина используют комплекс включения, охарактеризованный в п.1, в дозе 6-800 мг в день.

Приоритет по признакам:

28.03.90 - признаки, касающиеся комплекса включения 3-морфолиносиднонимина или его соли с производным циклодекстрина, способа получения этого комплекса включения, фармацевтической композиции, включающей указанный комплекс, способа ее получения и способа лечения с использованием указанного комплекса;

27.06.90 - признаки, касающиеся комплекса включения таутомерного изомера 3-морфолиносиднонимина с производным циклодекстрина, способа получения этого комплекса включения, фармацевтической композиции на его основе, способа получения указанной фармацевтической композиции и способа лечения с использованием указанного комплекса.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к комплексам включения 3-морфолино сиднонимина (SIN-1) или его соли, или его таутомерной формы "А" с открытым кольцом (SIN-1A: N-нитро-N-морфолино-аминоацетонитрил) с производным циклодекстрина, к способу их получения, а также к фармацевтическим композициям, содержащим их в качестве активного компонента.

Форма с открытым кольцом "А" играет важную роль, ее образование преобладает при освобождении радикала NO (окись азота).

Молзидомин (N-этоксикарбонил-3-морфолино-сиднонимин, SIN-10) является хорошо известным средством против стенокардии. В терапии он широко применяется для лечения и предупреждения ангиоспазмов в случае сердечной недостаточности, в состоянии инфаркта сердца. Терапевтический эффект Молзидомина можно приписать его первому активному метаболиту 3-морфолин-синдонимина, который генерируется в основном в печени в результате ферментативного гидролиза и последующего действия фермента декарбоксилазы. Таким образом, SIN-1 обладает терапевтическими преимуществами по сравнению также с Молзидомином, т.е. его эффект наступает быстрее и является более определенным.

Его недостатком является применение только в виде внутривенных инъекций.

Производные сиднонимина исключительно чувствительны к воздействию света. При облучении искусственным или естественным светом, даже в течение короткого промежутка времени они быстро разлагаются. В процессе фотолиза образуются фармакологически неактивные, но безвредные продукты разложения, в частности, морфолин, аммиак, этиловый спирт, двуокись углерода. Целью некоторых патентов является фотостабилизация производных сиднонимина путем введения различных добавок. (ЕПВ N 206219 и к патенту GFR N 3.346.638).

Отрицательного эффекта фоточувствительности можно избежать при хранении в соответствующих условиях сухого вещества, а также раствора (в плотно закрытой темной колбе, обернутой черной бумагой).

Производные сиднонимина чувствительны к экстремальным значениям pH и быстро разлагаются. Конечным продуктом химического и метаболического разложения Молзидомина является SIN-1C (цианометиленаминоморфолин), неактивный метаболит. При использовании SIN-1 в качестве медикамента возникают проблемы химической стабильности. Вещество быстро разлагается в нейтральном водном растворе, чувствительно к значению pH и стабильно только в сильнокислой среде (pH 1-2). При pH выше 2 оно быстро разлагается до неактивного метаболита SIN-1C, что связано с потерей терапевтической активности. Трансформация SIN 1 SIN-1C является результатом катализируемого основаниями каталитического разложения. Процесс сильно зависит от величины pH, т.е. для того, чтобы степень разложения достигла 10% (SIN-1C), необходимо 53 с при pH 8, 15 ч при pH 6, 67 дней при pH 4 и 13 лет при pH 1-2 (Chem. Pharm. Bull. 19/6, 1079, 1971).

SIN-1 также разлагается в разбавленном водном растворе при хранении в рассеянном свете уже через 1-3 дня. Разложение можно проследить непосредственно по УФ-спектру. Максимум поглощения сдвигается постепенно с 2911 до 2781 нм, тогда как величина поглощения возрастает непрерывно, что согласуется с литературными данными: величина _max для SIN-1 составляет 2911 нм, удельный коэффициент поглощения А^1% = 520, тогда как для SIN-1C _max 2781 нм, его молярный коэффициент поглощения = 17000A^1%_1см = 1220.

При пероральном введении SIN-1 неэффективен, при pH 1-2 находится в сильно ионизованном состоянии, которое предпочтительно в смысле химической стабильности, но с другой стороны не благоприятствует ресорбции из желудочно-кишечного тракта. В свете изложенныз фактов SIN-1 при движении из кишечника при более высоких значениях pH быстро превращается в неактивный метаболит SIN-1C. Этому превращению благоприятствуют низкие дозы SIN-1, поскольку при низких концентрациях (порядка /мл гидролитическое разложение более явно выражено).

SIN-1 поступает на рынок в виде гидрохлорида для внутривенного ведения в виде ампул с лиофилизиронным порошком, содержащих по 2 мг активного ингредиента и 40 мг сорьита. Содержимое ампулы нужно перед использованием растворить в 1 мл дистиллированной воды.

Известно, что образование комплекса с декстрином подходящим способом стабилизации различных агентов по отношению к действию тепла, света и к основному или кислотному гидролизу. (Srejtly: Cyclodextrin Technolohy, Kluwer, Dordrecht, 1988, pp. 211-217).

Задачей изобретения является получение такого нового агента, с помощью которого можно затруднить трансформацию SIN 1 SIN 1C даже в нейтральном водном растворе и, соответственно, при физиологических значениях pH.

Поставленная задача достигается новым комплексом включения 3-морфолино-синдонимина или его соли, или его таутомерного изомера с циклодекстрином или производным циклодекстрина, преимущественно, или циклодекстрином, гидроксипропил- -циклодекстрином, гептакис-2,6-диметил- -циклодекстрином, гептакис-2,3,6-три-о-метил- -циклодекстрином, ионным водорастворимым циклодекстриновым полимером (CDPSI) мол.м. менее 10000.

Было определено, что циклодекстрины сами по себе эффективно стабилизируют разбавленные водные растворы, полученные из композиций для инъекций, содержащих SIN-1.

Новый комплекс включения получают взаимодействием 3-морфолино-синдонимина или его соли, или его таутомерного изомера с циклодекстрином или производным циклодекстрина, преимущественно -циклодекстрином, гидроксипропил- -циклодекстрином, гептаким-2,6-диметил- - циклодекстрином, гептакис-2,3-6-три-о-метил- -циклодекстрином, соответственно, в водной среде с последующим выделением комплекса из раствора путем удаления воды.

Задачей изобретения также является создание новой стабильной фармацевтической композиции на основе синдонимина для стабильного применения в виде инъекций, перорально или местно.

Поставленная задача достигается фармацевтической композицией, содержащей комплекс включения 3-морфолино-синдонимина или его соли, или его таутомерного изомера с циклодекстрином или производным циклодекстрина, преимущественно -циклодекстрином, гироксипропил- - циклодекстрином, гептокис-2,3,6-три-о-метил- -циклодекстрином, ионным водорастворимым циклодекстриновым полимером (CDPSI) мол.м. менее 10000, в качестве активного компонента. Данная композиция получается путем смешивания комплекса включения с фармацевтически приемлемыми целевыми добавками.

Новая фармацевтическая композиция эффективна при лечении стенокардии и ишемической болезни человека, путем введения в организм комплекса включения в дозе 6-800 мг в день.

Наличие взаимодействия между SIN-1 и циклодекстринами доказано с помощью следующей последовательности испытаний.

Из композиции для инъекций, содержащих SIN--1, готовят водный раствор концентрации около 10 г г/мл и растворяют в полученных растворах при перемешивании 20-40 мг циклодекстрина или производного циклодекстрина.

Растворы хранят при комнатной температуре (20-200^oC) при рассеянном освещении и через определенные промежутки времени (ежедневно) снимают УФ-спектры растворов в интервале 220-350 нм. Для контроля используют, соответственно только водный раствор, 0,05 н. раствор хлористоводородной кислоты. Проверяют pH раствора циклодекстринов с целью определить не изменяют ли существенно циклодекстрин и, соответственно его производное значения pH воды. Значение pH используемых растворов циклодекстринов большей концентрации отличаются от pH дистиллированной воды только в пределах 0,2. Сдвиг спектра УФ подавляет добавление CDPSI, растворимого ионного полимера -циклодекстрина (средняя мол.м. 3500, содержание -CD 54%, содержание COO : 4,2%) (патент Венгрии N 191.101). Сдвиг спектра не выявляется даже после хранения в течение 2 недель, тогда как сохранявшиеся в аналогичных условиях водные растворы превращались практически полностью в SIN 1C за 2-3 дня.

Явно выражен также замедляющий, затрудняющий разложение эффект Димеба (DIMEB = 2,6-ди-о-метил- -циклодекстрин). В присутствии 20 мг/мл Димеба на спектре раствора после хранения и продолжение 6 дней выявлен сдвиг всего лишь около 1 нм. Исследован также стабилизирующий эффект Тримеба (TRIMEB = 2,3,6-три-о-метил- -циклодекстрин), -CD, -CD и гидроксипропил- - CD. Ряд эффективности, выведенный из величин сдвигов УФ-спектра, выглядит следующим образом:

CDPSI >> Димеб > Тримеб > -CO HP CD.

Из оценки влияния, которое указывают различные циклодекстсрины на гидролитическое разложение SIN-1 и, в частности, CDPSI можно сделать вывод о наличии комплексного взаимодействия.

В описанной серии испытаний циклодекстрины и, соответственно, их производные использовались в очень большом избытке (10 г г/мл SIN-1 против 20 мг/мл циклодекстрина).

Последовательность испытаний повторяют в том же порядке, но CDPSI вводят только в 10-кратном, 20-кратном избытке, что соответствует массовому соотношению SIN-1 : CDPSI в комплексе, содержащем, соответственно, 10, 5% активного ингредиента. Низкая терапевтическая доза SIN-1 позволяет использовать комплекс, содержащий менее 5% активного ингредиента, что соответствует молярному соотношению SIN-1 : CDPSI = 1:2. В таком диапазоне концентраций стехиометрическое измерение не дает описательной картины, по этой причине степень разложения определяется тонкослойной хроматографией следующим образом.

Порцию раствора 10 л л добавляют по каплям на силикагелевую пластинку Kieselgel 60F₂₅₄ (10x10 см, фирма Merck). Подвижная смесь, циклогексан : этилацетат в отношении 1:1. Ванну со смесью растворителей выдерживают в течение 30 мин для насыщения. На пластинку добавляют также по каплям эталонный раствор. После нанесения пятна пластинку высушивают в токе холодного воздуха, защищая от света, и оставляют до подъема подвижной фазы на высоту 15 см. В это время ванна с растворителя находится в темном месте. После испарения растворителя пластинку визуально исследуют в УФ-свете с длиной волны 254 нм. SIN-1 представляется при R_f 0,05, а SIN 1C - при R_f 0,36. В каждом случае обнаружено, что в растворах, содержащих CDPSI, интенсивность пятна SIN 1C визуально меньше, чем в водных растворах.

Поскольку превращение SIN-1 в неактивный метаболит в значительной степени зависит от величины pH, измерения проводятся в фосфатных буферах с pH 6,4, 7,0 и 7,6, согласно фармокопее. В каждом случае сравнивают буфер и буферные растворы, содержащие 20 мг/мл CDPSI, все они подвергаются УФ-спектроскопии после соответствующего разбавления водно-спиртовой смесью, исследуют интенсивность продукта разложения SIN-1 с помощью тонкослойной хроматографии.

Результаты спектрофотометрических измерений сведены в табл. 1.

Уменьшение максимального значения длины волны примерно на 13 нм (с 291 по 278 нм) соответствует полному разложению SIN до SIN 1C.

В буфере с pH 6,4 в присутствии CDPSI даже через 6 дней = 7 нм в противоположность контрольной величине = 12 нм. Воспроизводимость УФ-максимума в данных условиях находится в пределах 0,5 нм, и таким образом разницу можно считать значительной. Через один день хранения разницу все еще можно было измерить, напротив при pH 7,6 стабилизирующий эффект CDPSI едва ли превалирует более длительный период времени.

В подвергавшихся тестам растворах молярное отношение SIN 1 : CDPSI составляет около 1 : 2, что является необходимым минимумом для комплексообразования в растворе. Стабилизирующий эффект в растворе 10-кратного избытка (10 мг/мл) соответствующего молярному отношению 1:1 -CDPSI едва имеет место. Степень разложения можно также проследить с помощью тонкослойной хроматографии. Интенсивность пятна SIN 1C, выявленного при R_f 0,36 в буфере с pH 6,4, отличается заметно даже после хранения в продолжение недели, в буфере с pH 7,0 и 7,6 после хранения в течение 1 дня наблюдается ощутимое различие в интенсивности пятна SIN 1 при R_f 0,04. В буфере с pH 7,0 все еще заметен неизменный SIN 1, тогда как при pH 7,6 он практически не определялся.

Равновесие диссоциации комплекса в растворе можно сместить за счет добавления избытка циклодекстрина. При введении предельно большого избытка (1000, 2000-кратного) на спектре композиций для инъекций выявлен сдвиг всего + 1 нм, - в дистиллированной воде после хранения в течение 1 недели, в то время как контрольный раствор практически разлагается.

Количественные изменения степени разложения проводятся также методом ЖХВР.

Условия разделения SIN 1 - SIN 1C методом ЖХВР

Оборудование: модуль подачи растворителя Bechman 114 М, детектор переменной длины волны 165, интегратор Hewlett-Packard 3396A.

Колонка: колонка для аналитических целей Ultrasphere ODS 4,6 х 150 нм, 5

Элюент: 0,05 М ацетат натрия, мл - 700

Ацетонитрил, мл - 300

Тетрагидрофуран, мл - 2

Скорость течения, мл/мин - 1

Давление, бар - 120

Длина волны измерения, нм - 278, 290

Объем образца, л - 20

Чувствительность, А - 0,1

Скорость движения бумаги, см/мин - 0,5

Время удерживания, мин - SIN1: 2,9, SIN 1C: 4,2

Результаты.

1. Растворы SIN 1 концентрации 0,5 мг/мл в фосфатном буфере хранили, защищая от света, при комнатной температуре. Для образования комплекса вводят 50 мг/мл (100-кратное количество) CDPSI. После хранения в течение 5 недель снимают хроматограммы ЖХВР.

Анализ хроматограмм приведен в табл. 2.

CDPSI, вводимый в 100-кратном массовом избытке (в молярном соотношении около 10: 1) в значительной степени затрудняет разложение SIN 1. Полученный результат находится в соответствии с результатами тонкослойной хроматографии.

2. Испытания проводятся также в фосфатном буфере с pH 7 с аналогичными концентрациями (0,5 мг/мл SIN 1 и 50 мг/мл CDPSI).

Исследуют хроматограммы, полученные после хранения в течение 4 дней.

Анализ хроматограмм приведен в табл. 3.

Можно считать доказанным, что в пределах применяемых концентраций CDPSI затрудняет даже при pH 7 превращение SIN 1 в SIN 1C, которое представляет собой неактивный метаболит.

Далее мы провели испытания на стабильность инъекции SIN 1 в разбавленном водном растворе.

Из ампулы, в которой содержится лиофилизированный порошок SIN 1, был приготовлен водный раствор концентрации 50 г/мл, после чего было добавлено 20 мг/мл CDPSI. Растворы хранились при комнатной температуре и время от времени в них определялось количество продукта разложения SIN 1C.

Анализируют хроматограммы, снятые через 1, 4, 11 дней (см. табл. 4)

Причем, комплексы SIN 1 с циклодекстринами, в частности с CDPSI, комплекс после приготовления содержит значительные количества промежуточного продукта SIN 1A. Процесс превращения SIN 1 SIN 1 S 1C в присутствии циклодекстринов исследовали также в 0,02 М ацетатном буфере при pH 5,5. Удивительно, но наиболее явно выраженным оказался эффект -CD, более чем в 7 раз большее количество SIN 1A было обнаружено в присутствии -CD, чем в контроле. (SIN 1A определяли с помощью ЖХВР).

Исследуя биологический эффект композиций согласно изобретению, обнаруживают, что в то время как SIN 1, вводимый перорально в дозе 1 мг/мл, не обладает активностью, (кардиозащитная активность на крысах 11%) при пероральном введении, помимо этого активного ингредиента, SIN 1 - CDPSI кардиозащитная активность составляет 42,2%.

Хорошую биологическую активность комплекса SIN 1 - CDPSI в испытаниях на кардиозащитную активность после перорального введения можно приписать присутствию в твердом комплексе SIN 1A. Образование "A"-формы, которая играет ключевую роль в возникновении биологического эффекта, невозможно при pH среды кишечника, она может возникнуть m-vitro из соединения SIN 1A в результате выдержки при щелочных pH. При растворении CDPSI-комплекса в дистиллированной воде в полученном растворе можно определить значительные количества SIN 1A.

По-видимому, превращение SIN 1 - SIN 1A промотируется циклодекстринами, и в то же время очень неустойчивый, чувствительный к кислороду SIN 1A стабилизируется комплексообразованием, которое приводит к замедлению превращения SIN 1 SIN 1C . Более мягкое начало и большая продолжительность действия обусловлена замедленным выделением окиси азота из связанного в комплекс SIN 1.

В табл. 5 приводится содержание комплексов SIN 1 с различными декстринами, полученных согласно примеру 2, которое измеряется непосредственно после получения с помощью ЖХВР. Как стандарт используют физическую смесь SIN 1 того же состава, приготовленную таким же способом с лактозой.

Результаты и выводы.

Релаксирующие эффекты комплексов SIN 1-циклодекстрин и нормального SIN 1 исследуют при концентрации 1 или 2 М.

Все четыре комплекса релаксируют длительное сокращение деполяризованных калиевых скоплений с максимальным эффектом 43-53%. SIN 1 (1 М) оказывается несколько более эффективным - релаксация 58%.

Максимальная релаксация зарегистрирована для комплексов SIN 1 в интервале 23 - 32 мин после употребления, тогда как T/max для SIN 1 наступает через 18 мин. Эта разница статистически значительна. Продолжительность действия, измеренная как T/2, оказывается больше в случае комплексов с циклодекстрином (62 - 88 мин), чем для SIN 1 (47 мин). Эта разница оказывается также статистически заметной. Таким образом, комплексы SIN 1 - циклодекстрин демонстрируют более мягкое начало и большую продолжительность действия, чем нормальный SIN 1.

В связи с тем, что, как предполагают, релаксирующий эффект SIN 1 обусловлен выделением окиси азота в результате процесса окислительного разложения можно сделать вывод о замедлении процесса разложения в результате образования комплексов SIN 1 с циклодекстринами. Таким образом, более мягкое начало и большая продолжительность действия обусловлены, по-видимому, замедленным выделением окиси азота из комплексов SIN 1-циклодекстрин.

В качестве производного циклодекстрина комплексы включения по изобретению содержат преимущественно ионный водорастворимый полимер циклодекстрина (CDPSI) (мол. м. < 10000), гептакис-2,6-диметил- -циклодекстрин (Димеб), гептакис-2,3,6-три-O-метил- -циклодекстрин (Тримеб) и - или -циклодекстрин.

Для получения твердого комплекса включения можно использовать также гидроксипропил- -циклодекстрин.

Комплексы включения по изобретению получают по реакции взаимодействия 3-морфолино-сиднонимина или его солей в растворителе с производным циклодекстрина и при желании комплекс выделяют из раствора путем удаления воды либо очень энергичным размалыванием смеси 3-морфолино-сиднонимина или его солей и производного циклодекстрина.

Выделять комплекс из раствора можно путем лиофилизации, сушкой с распылением, выпариванием под вакуумом при низких температурах и вакуумной сушкой.

Растворяют SIN 1 с 1-40 ммолями CDPSI или Димеба в 1-500 мл дистиллированной воды, что рассчитывается на 1 ммоль активного ингредиента, после чего осуществляют обезвоживание, как указывалось выше. Молярное отношение полимера CDPSI вычисляется на - CD. Таким образом, при введении полимера с содержанием -CD 50% и средней мол. м. 3500 состав комплекса с соотношением 1:1 соответствует примерно 8%, а молярное отношение 2:1 - примерно 4,5%. Взаимодействие комплекса в растворе иллюстрируется тестом на проникновение через мембрану.

Используют целлофановую мембрану visking - типа (средний диаметр под 24 . В донорную ячейку помещают водный раствор SIN 1 концентрации 1 мг/мл, тогда как в приемном отделении аппарата с мембраной находится дистиллированная вода. Растворы перемешивают магнитной мешалкой и выдерживают при 371^oC. Через соответствующие промежутки времени отбирают пробы раствора и измеряют концентрацию SIN 1, проникшего из донорной ячейки, с помощью УФ-спектроскопии.

Испытания повторяют в присутствии различных циклодекстринов при различных концентрациях в донорном отделении элемента.

Промежутки времени, необходимые для диффузии 50% SIN 1 в присутствии CDPSI при различных концентрациях, перечислены в табл. 6

Комплексы включения, полученные согласно изобретению, могут использоваться в производстве фармацевтических композиций, соответственно для стабильного применение в виде инъекций, перорально или местно.

Дозы комплексов включения согласно изобретению могут меняться в зависимости от возраста, веса тела и состояния субъекта, способа применения, количества приемов и т.п., но колеблются от 6 до 600 мг в день, предпочтительно составляют 10-400 мг в день.

Эффект замедленного выделения преобладает, в частности в случае использования фармацевтической композиции в виде таблеток, предназначенных для приема один раз в день, микрокапсул и мазей, очень подходящих, соответственно, для введения через кожу. Фармацевтические композиции согласно изобретению готовят обычным способом. Используют адъюванты и носители, применяемые обычно для изготовления фармацевтических препаратов.

Подробности изобретения иллюстрируют приведенные ниже примеры, которыми не ограничивается изобретение.

Примеры. 1 Получение комплекса SIN 1-CDPSI в результате лиофилизации.

Растворяют в 200 мл дистиллированной воды 15 г (6,6 ммолей) полимера CDPSI, после чего к раствору добавляют 1,1 г (5,3 ммоля) SIN1-HCL. Материалы растворяются почти мгновенно, получается чистый прозрачный раствор, который немедленно замораживают и удаляют воду путем лиофилизации, следя, чтобы по ходу всех процессов вещество подвергалось минимальному по возможности воздействию света.

Рекомендуется, следовательно, заворачивать перегонный куб в черную бумагу. Полученный продукт представляет собой очень светлый рыхлый порошок с содержанием активного ингредиента по данным спектрофотометрии: 6,50,5%, что соответствует молярному отношению около 1:1.

Тест, доказывающий факт комплексообразования: термогравиметрия (ТС), дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) и термический анализ (ТА) показали наличие характерных различий между SIN 1 в составе физических смесей SIN 1 - CDPSI и в комплексе SIN 1 - CDPSI. При температурах 60 - 110^oC из активного агента SIN 1 удаляется около 8% неорганического вещества, возможно, что это вода. Разложение при плавлении вещества начинается при 170-180^oC, носит взрывной характер и в очень узком температурном интервале из системы удаляет 70% введенного агента.

В интервале температур 220-230^oC разложение замедляется, до 350^oC можно зарегистрировать 87% потерю веса. Для идентификации активного ингредиента, не входящего в состав комплекса, можно использовать пик на кривой ДСК в интервале температур 190-200^oC и пик на кривой подъема температуры при 190^oC, вызывающий даже в атмосфере аргона экзотермическое изменение энтальпии.

Кривые термического анализа физической смеси SIN 1 - CDPSI, приготовленных непосредственно перед измерением, можно рассматривать как наложение кривых исходных веществ.

Кривые комплекса демонстрируют значительные расхождения по сравнению с описанными, указанные пики разложения SIN 1 не проявляются, что означает, что действительно SIN 1 образует комплекс включения с CDPSI.

Рентенограммы порошков.

Согласно данным рентгеновской дифрактометрии структура комплекса SIN 1 - CDPSI аморфна. Характерные рефлексы SIN 1 исчезают, известная аморфная структура CDPSI. Степень кристалличности SIN 1, подвергнуто аналогичной обработке, но без CDPSI, хотя и снижается, но переход к полностью аморфной структуре невозможен только в результате лиофилизации. В дифрактограмме комплекса отсутствуют пики отражения 2, относящиеся к слабо кристаллизованной форме и характерные для свободного (не связано в комплекс) SIN 1.

2. Получение комплекса SIN 1 - CDPSI путем лиофилизации

Растворяют в 200 мл дистиллированной воды 15 г полимера CDPSI (6,6 ммолей) (содержание - CD 53%, содержание COO^- 4,2%). В полученном растворе растворяют 0,7 г (3,3 ммоля) SIN 1, после чего раствор подвергают обработке согласно методике примера 1.

Содержание активного ингредиента в полученном продукте составляет 4,50,2, что соответствует молярному отношению приблизительно 1:2.

3. Получение комплекса SIN 1 - CDPSI с высоким и контролируемым содержанием SIN 1A

Полученный продукт подвергают второй сушке по методике, описанной в примере 2, с целью удаления связанной в комплекс воды. Продукт сушат при 60^oC под вакуумом в течение 3 ч (до постоянного веса). Потери при сушке: 4,50,2%.

В процессе нагрева содержание SIN 1A возрастает примерно в пять раз, оно увеличивается с 1,08 до 5,1%, причем отношение SIN 1A/SIN 1C также изменяется благоприятно (с 10 до 17). Хранение высушенных комплексов при комнатной температуре в защищенном от света месте в течение более чем 3 мес не приведет практически к изменению содержания SIN 1A и отношения SIN 1A/SIN 1C.

В контрольном (не подвергнутом тепловой обработке) образце при хранении содержание SIN 1A также возрастает с 1,08 до 1,9%, в то же время соотношение SIN 1A/SIN 1C упало (изменяется от 10 до 3).

Получение комплекса SIN 1 - CDPSI с высоким содержанием SIN 1A и контролируемым составом возможно при кратковременной тепловой обработке лиофилизированного комплекса SIN 1 - CDPSI.

4. Получение комплекса SIN 1 - Димеб.

Растворяют в 100 мл дистиллированной воды 14 г Димеба (10,3 ммолей) (содержание влаги 2%). При перемешивании к раствору добавляют 1,03 г (5 ммолей) SIN 1. Полученный прозрачный раствор, защищенный от действия света, подвергают обработке, описанной в примере 1. продукт представляет собой рыхлый белый порошок с содержанием активного ингредиента 6,50,2%, что соответствует молярному отношению SIN 1:Димеб=1:2.

5. Получение мази для применения через кожу с содержанием SIN 1 10 мг и мази - 1/2 г

В 20 мл дистиллированной воды растворяют 151 мг комплекса SIN 1 - Димеб, полученного по методике примера 3 (содержание активного ингредиента 6,5%). К раствору, защищенному от действия света, добавляют при интенсивном перемешивании 50 мг KLUCHEL - HF (гидроксипропилцеллюлозы). Таким образом получают вязкий с трудом перемешиваемый раствор, который выдерживают при комнатной температуре в течение одного дня.

В результате образуется прозрачный гель, в 2 г которого содержится 10 мг SIN 1.

6. Таблетки SIN 1 с содержанием активного ингредиента 2 мг на таблетку.

80 мг комплекса SIN 1 - CDPSI, содержание активного ингредиента 2,5%, 40 мг кукурузного крахмала, 128 мг молочного сахара, 2 мг стеарата магния, общий вес таблетки: 250 мг.

Таблетки готовят обычным способом, а именно непосредственным прессованием.