способ определения содержания кальция в биологических объектах
| Классы МПК: | G01N33/52 использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги G01N33/48 биологических материалов, например крови, мочи; приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) G01N21/64 флуоресценция; фосфоресценция |
| Автор(ы): | Петров В.К., Кузин В.П., Пустовалов А.П., Воронков И.Ф., Гулькин А.В. |
| Патентообладатель(и): | Рязанский государственный медицинский университет им.акад.И.П.Павлова |
| Приоритеты: |
подача заявки:
1994-03-01 публикация патента:
27.03.1997 |
Использование: медицина. Сущность изобретения: в способе определения содержания кальция в биологических объектах с помощью флюориметра, в малых навесках органов и тканей используется в качестве реактива на ионы кальция 8-хинолилгидрозон 8-оксихональдинового альдегида (ХОА), комплекс которого дает интенсивность флуоресценции, прямо пропорциональную концентрации ионов кальция. Навески кровеносных сосудов, органов и тканей предварительно сжигаются в муфельной печи, затем в парах азотной кислоты и затем полученные соли азотной кислоты растворяют деионизированной водой.
Формула изобретения
Способ определения содержания кальция в биологических объектах, включающий обработку раствора пробы химическим реактивом и измерение спектральной характеристики полученного раствора, отличающийся тем, что в качестве реактива используют 8-хинолилгидрозон 8-оксихинальдинового альдегида, регистрируют флуоресценцию комплекса реактива с ионами кальция на длине волны 522 нм при возбуждении ультрафиолетовым светом и по измеренной интенсивности свечения, пропорциональной концентрации ионов кальция, определяют содержание кальция в пробе.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к медицине, биологии, в частности к лабораторной диагностике, медико-биологическим исследованиям. Известны способы определения концентрации кальция в сыворотке крови, в других биологических жидкостях и растворах атомной абсорбционной спектрофотометрией, с помощью кальцийселективных электродов, методом пламенной фотометрии, с применением реактива глиоксальбис (2-оксианилина) (ГБОА) и другие, причем наиболее простым и доступным считают способ с применением мурексид-глицинового реактива. Известные способы приемлимы для молярных, децимолярных концентраций кальция в растворах, в частности способ определения кальция с применением мурексид-глицинового реактива рассчитан на концентрацию кальция в стандартном растворе в 0,25 ммоль/л. Для микромолярных концентраций кальция в растворах известные способы не пригодны из-за их низкой чувствительности и не дают возможность, в частности, определить содержание кальция в кровеносных сосудах, эритроцитах, малых навесках органов и тканей. Сущность изобретения заключается в следующем: раствор пробы обрабатывают химическим реактивом с измерением затем спектральной характеристики полученного раствора; в качестве реактива используют 8-хинолилгидрозон 8-оксихинальдинового альдегида (ХОА), регистрируют флуоресценцию комплекса реактива с ионами кальция на длине волны 522 нм при возбуждении ультрафиолетовым светом; по измеренной интенсивности свечения, пропорциональной концентрации ионов кальция, определяют содержание кальция в пробе. Способ осуществляется следующим образом. Навески кровеносных сосудов, органов или тканей, эритроцитов высушивают, сжигают в муфельной печи и затем в парах азотной кислоты. Полученные соли азотной кислоты растворяют бидистиллированной водой. Растворы исследуют флуорометрически с первичным светофильтром УФС-6 (возбуждение ультрафиолетовыми лучами) и с вторичным светофильтром с максимумом пропускания на длине волны 522 нм, используя флуориметры, например, типа "ИФ-1" или "БИАН". Для этого к 1 мл рабочего раствора добавляют 4 мл децинормального раствора КОН и 0,2 мл 0,02%-ного ацетонового раствора ХОА. Чувствительность способа до 0,25 мкмоль/л.Класс G01N33/52 использование соединений или составов для колориметрического, спектрофотометрического или флуорометрического анализа, например реактивной бумаги
Класс G01N33/48 биологических материалов, например крови, мочи; приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры)
Класс G01N21/64 флуоресценция; фосфоресценция