хелаты гадолиния и способ их получения

Формула изобретения

1. Хелаты гадолиния с соединением общей формулы



где А является группой общей формулы



где R водород, бензил;

Х гидроксил или группа NR₁R₂, где R₁ водород или метил, а R₂ гидрокси(С₁ С₆) алкильная группа, необязательно содержащая до 5 гидроксильных групп;

В₁ В₂ В₃ являются группами СН₂СООН, причем необязательно В₁ или В₂ А или В₁ В₂ А,

или их солей с N алкилглюкамином.

2. Хелаты по п. 1, отличающиеся тем, что соединения имеют общую формулу



где R и Х имеют указанные значения.

3. Хелаты по п.2, отличающиеся тем, что соединения имеют общую формулу



где R имеет указанные значения;

Х является ОН, NHCH(CHOH)₂, -NHCH₂CH(OH)CH₂OH-, NHCH₂CH(OH).CH(OH)CH₂OH.

4. Хелаты по пп. 1 3, отличающиеся тем, что гадолиний является радиоизотопом ⁶⁸ Gd.

5. Хелаты по пп. 1 3 или 4, отличающиеся тем, что соединения выбирают из группы, состоящей из 2-(1,4,7,10-тетрааза-4-)1-карбокси-2-бензилоксиэтил(-7,10-ди) карбоксиметил(-циклододекан-1-ил)-3-бензилокси-пропионовой кислоты, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4-)1-карбокси-2-гидроксиэтил)-7, 10-ди-(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил)-3-гидроксипропионовой кислоты, 2-(1,4,7,10-тетрааза-7-)1-карбокси-2-бензилоксиэтил)-4, 10-ди-(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил)-3-бензилоксипропионовой кислоты, 2-(1,4,7,10-тетрааза-7-)1-карбокси-2-гидроксиэтил(-4, 10- ди)карбоксиметил(-циклододекан-1-ил)-3-гидроксипропионовой кислоты, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7-ди)1-карбокси-2- бензилоксиэтил(10-карбоксиметил-циклододекан-1-ил)-3- бензилоксипропионовой кислоты, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7-ди)1-карбокси-2- гидроксиэтил(-10-карбоксиметил-циклододекан-1-ил)-3- гидроксипропионовой кислоты, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)- циклододекан-1-ил)-3-бензилоксипропионовой кислоты, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)- циклододекан-1-ил)-3-гидроксипропионовой кислоты, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3- бензилокси-N-(2-гидроксиэтил)-пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1- ил)-3-гидрокси-N-(2- гидроксиэтил)-пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-бензилокси- N-(1,3-дигидроксиизопропил)-пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3- гидрокси-N-(1,3-дигидроксиизопропил)-пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-бензилокси- N-(2,3-дигидроксипропил)-пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-гидрокси- N-(2,3-дигидроксипропил)-пропионамида, 2- (1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три)карбоксиметил (-циклододекан-1-ил)-3-бензилокси-N- (2-гидроксиэтил)-пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три) карбоксиметил(-циклододекан-1-ил)-3-гидрокси -N-(2-гидроксиэтил)-пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7,10- три)карбоксиметил(-циклододекан-1-ил)- 3-бензилокси-N-(1,3-дигидроксиизопропил)- пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три)карбоксиметил (-циклододекан-1-ил)-3-гидрокси-N-(1,3-дигидроксиизопропил)- пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три)карбоксиметил(- циклододекан-1-ил)-3-бензилокси-N-(2,3-дигидроксипропил)- пропионамида, 2-(1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три)карбоксиметил(- циклододекан-1-ил)-3-гидрокси-N-(2,3-дигидроксипропил)- пропионамида, или их солей с N-метилглюкамином.

6. Способ получения хелатов гадолиния с соединением общей формулы I



где А группа общей формулы II



где R водород, бензил;

X гидрокси или группа NR₁R₂, где R₁ водород или метил, R₂ гидрокси(С₁ С₆)алкильная группа, необязательно содержащая до 5 гидроксигрупп,

В₁ В₂= В₃ группы -СН₂СООН, причем необязательно В₁ или В₂ А или В₁ В₂ А,

или их солей с N-алкилглюкамином, отличающийся тем, что соль или оксид гадолиния подвергают взаимодействию с соединением общей формулы I или его солью с последующей, если необходимо, нейтрализацией полученного продукта N-низшим алкилглюкамином.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к хелатам соединений, представляющих собой новые макроциклические хелатообразователи, являющиеся производными 1,4,7,10-тетрааза-циклододекана общей формулы I

где А представляет собой группу формулы

-C в которой R является водородом или линейной или разветвленной С₁-С₅алкильной группой или бензильной группой, которая может быть моно- или полизамещенной в ароматическом кольце галогеном, гидрокси-группой, карбокси-группой, карбамоилом, алкоксикарбонилом, сульфамоилом, низшим алкилом, низшим гидроксиалкилом, аминогруппой, ациламиногруппой, ацилом, гидроксиацилом или группой формулы Н(OCH₂CH₂)_1-4-, Ме(ОCH₂CH₂)_1-4 или Et(OCH₂CH₂)_1-4, где Х представляет собой группу O-R₁, в которой R₁является водородом или С₁-С₅ алкилом, гидроксиалкилом, алкоксиалкилом, алкоксигидроксиалкилом или полиоксаалкильной группой, имеющей 1-15 атомов кислорода и 3-45 атомов углерода, или Х представляет собой группу -NR₂R₃, в которой R₂ и R₃ могут быть одинаковыми или различными, являются С₁-С₆ алкилом, гидроксиалкилом, алкосиалкилом или алкоксигидроксигидроксиалкилом, имеющими вплоть до 5 гидроксильных групп и В₁, В₂ и В₃, которые могут быть одинаковыми или различными, имеют те же значения, что и А, или они являются водородом или группой формулы

-C в которой R представляет собой водород или линейную или разветвленную С₁-С₅ алкильную группу, Y представляет собой группу O-R₅, в которой R₅является водородом или С₁-С₅ алкилом, гидроксиалкилом, алкоксиалкилом, алкоксигидроксиалкилом, или полиоксаалкильной группой, содержащей 1-15 атомов кислорода и 3-45 атомов углерода, или Y представляет собой группу -NR₆R₇, где R₆ и R₇, которые могут быть одинаковыми или различными, являются водородом или С₁-С₆ алкилом, гидроксиалкилом, алкоксиалкилом или алкоксигидроксиалкилом, имеющими вплоть до 5 гидроксильных групп, причем названные производные представляют собой, если требуется, соли с подходящими органическими или неорганическими основаниями, и комплексным солям названных хелатообразователей с подходящими ионами металлов в кислой, основной или нейтральной форме или, если требуется, нейтрализованных неорганическими или органическими кислыми или основными ионами, и, в конце концов, химически конъюгированными с макромолекулами или связанными с подходящими носителями.

Изобретение относится также к способу получения соединений общей формулы I и их комплексных солей.

Хелатообразователи по изобретению и их комплексные соли могут иметь широкую область применения. Неограничивающими примерами использования названных хелатообразователей являются извлечение, разделение и селективная экстракция ионов металлов даже при очень низких концентрациях, их терапевтическое применение в качестве дезинтоксифицирующих агентов в случаях нечаянного попадания в организм металлов или радиоизотопов или другие примеры, очевидные для специалиста. В такого рода применениях хелатообразователи могут быть использованы непосредственно или часто будучи ковалентно или нековалентно связанными с макромолекулами или нерастворимыми поверхностями, или же будучи включенными в структуры, которые могут доставлять их к определенным центрам. В частности, комплексные соли хелатообразователей формулы I с ионами металлов с атомными номерами от 20 до 31, 39, 42, 43, 44, 49 или 57 до 83, необязательно в виде солей с физиологическими биосовместимыми ионами органических или неорганических кислот, или органических или неорганических оснований, или аминокислот, поразительно подходят для использования в качестве контрастирующих агентов при медицинской диагностике в медицинской радиологии и в ЯМР, ЭПР, рентгеновском и/или ультразвуковом методах исследованиях. В целях оптимизации диагностики названные производные могут быть ковалентно или нековалентно связаны с биомолекулами, макромолекулами или агрегатами молекул, характеризующимися тем, что они могут селективно концентрироваться в исследуемом органе или ткани. При этом визуализация внутренних структур живых объектов становится все более и более надежной в медицинской диагностике. В числе наиболее новых методик следует упомянуть использование радиоизотопов в качестве внутренних радиоактивных меток в организме. Одной из наиболее важных проблем, связанных с использованием радиоизотопов, является селективность их распределения, в то время как другим важным аспектом является их выделение за приемлемый промежуток времени. Другая методика визуализации связана с использованием ультразвука для измерения различия в отражениях на границах раздела тканей с различной плотностью. Введение подходящего количества плотного нерадиоактивного элемента или иона металла может привести к такому различию в отражении, что можно выделить даже малые, иначе не обнаруживаемые поражения. В третьей диагностической методике для создания внутренних изображений человеческого тела используют ядерный магнитный резонанс. В данной области разработка контрастирующих агентов имеет особое значение по следующим причинам:

а) для повышения специфичности диагностики;

b) для обнаружения незначительных поражений на более ранней стадии;

с) для более точного определения распространения опухолевой массы;

d) для улучшения соотношения сигнал/шум и укорочения времени формирования изображений, что позволяет также более эффективно использовать оборудование;

е) для увеличения контраста между теми смежными областями (например, брюшной или тазовой), где особенно трудно получить качественные изображения;

f) для получения полезной информации по течению крови и тканевой перфузии.

Что касается ЯМР-диагностики, то контрастные среды, содержащие парамагнитные комплексные соли лантанидов и переходных металлов были уже описаны, например, в патенте США N 4639365 и ЕР 71564 и в патентных заявках DE 3401052, ЕР-А 135125, ЕР-А 130934, DE 3324236, ЕР-А124766, ЕР-Ф 165728, WO 87/02893, ЕР-А 230893. Однако все до сих пор разработанные контрастирующие агенты для ЯМР характеризуются рядом проблем в плане их способности влиять на время релаксации рассматриваемых атомных ядер, их часто недостаточной селективности при связывании иона металла, их стабильности, их селективности по отношению к исследуемому органу или их биологической переносимости. Тенденция многих комплексов обменивать центральный ион металла на важные для организма металлы, присутствующие в следовых количествах, или ионы, например Са²⁺, которые in vivo присутствуют в относительно больших количествах (смотри работу Мея П.М. Современное состояние проблемы использования хелатообразователей в медицине, стр. 233) дополнительно ограничивает возможности их использования. Фактически в случае недостаточной стабильности комплекса организм может лишиться жизненно важных металлов, присутствующих в нем в следовых количествах, и получить нежелательные и токсичные тяжелые металлы, такие, как Gd, Eu или Dy. Хотя и справедливо, что токсичность комплекса часто, но не всегда, ниже, чем токсичность свободного парамагнитного иона, верно также и то, что комплексообразование обычно приводит к понижению эффективности магнитной релаксации, ответственной за некоторые контрастирующие эффекты.

Следовательно, еще остается несколько нерешенных проблем, связанных с оптимальным контрастирующим агентом. Эти проблемы, в основном, касаются сильного влияния на время релаксации соответствующих ядер; высокой стабильности комплекса как в растворе так и в организме; достаточной растворимости в воде; специфичности распределения в различных частях организма; подходящей скорости выделения из исследуемого органа и ткани.

Одними из наиболее исследованных парамагнитных ионов металлов являются ионы Gd³⁺ особенно там, где они связаны в комплекс с хелатообраователем диэтилентриаминопентауксусной кислотой (DTRA) (Рунге и др. (1984), Am.J.Radiol. v. 141, р. 1209 и Вейнман и др. (1984), Am. I. Radiol. 142, р.619). Названный комплекс в виде соли с D(-)N-метилглюкамином считается в настоящее время одним из наиболее удовлетворительных с точки зрения активности, токсичности и его использования вообще.

Несмотря на эти положительные черты, данное соединение не может еще рассматриваться как полностью отвечающее требованиям к оптимальному контрастирующему агенту по различным причинам, среди которых, например, та, что Gd-DTRA-N-метил-D-глюкамин слишком быстро удаляется из потока крови и из пораженных участков тканей при исследовании. Это уменьшает время, имеющееся в распоряжении для получения изображений, что важно с диагностической точки зрения. Кроме того, диффузия контрастирующего агента между здоровой и пораженной частью часто настолько велика, что контраст между этими двумя участками может быть слишком слабым. Для преодоления этих трудностей к проблеме подходили многими путями, среди которых наиболее интересными являются следующие.

а) Изучали другие хелатообразователи, в частности макроциклические хелатообразователи, из которых наиболее эффективным оказался 1,4,7,10-тетраазациклододекан-N, N", N"", N"""-тетрауксусная кислота (DOTA). Однако его комплексы характеризуются проблемами, аналогичными рассмотренным на примере DTРA.

b) Гадолиний и его хелатообразователи химически конъюгировали с макромолекулами, такими, как, например, белки (альбумин и т.д.), иммуноглобулины, или с целлюлозой, или с другими полимерными матрицами. С одной стороны это обычно улучшало релаксацию Gd, но с другой стороны это обязательно сопровождалось суб-оптимальной дозировкой из-за ограничений в растворимости, токсичности и плотности замещения макромолекул. Кроме того, когда один из лигандных центров хелатообразователей используют для образования химической связи с макромолекулой, обычно также происходит снижение стабильности получающегося в результате комплекса.

Хелатообразователи формулы I показали превосходную способность захватывать ионы металлов даже в очень разбавленных растворах. Важным примером названного свойства является способность захватывать ион Cu²⁺ и из его водных растворов с помощью 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)циклододекан-1-ил] -3-бензи- локсипропионовой кислоты, способ получения которой приведен в примерах 2 и 3.

Что касается их использования в диагностике, то комплексы металлов с хелатообразователями, являющиеся предметом изобретения, оказались на удивление подходящими, например, в отношении требований к контрастирующему агенту, используемому в методе ЯМР. Среди таких комплексов наиболее важное значение имеют комплексы Gd³⁺, которые отличаются присущей им превосходной стабильностью, релаксацией и селективностью по отношению к исследуемому органу или ткани.

Эти соединения имеют широкую область применения, допуская введение внутрисосудистым путем (например, внутривенное, внутриартериальное, внутрикоронарное, интравентикулярное и т.д. введение), а также внутриоболочечным, интраперитонеальным, внутрилимфатическим, внутриполостным и интрапаренхимным путями. Для введения через рот или тонкий кишечник подходят как растворимые, так и плохо растворимые соединения, что, следовательно, особенно пригодно для визуализации желудочно-кишечного тракта. При паренхимном введении их предпочтительно используют в виде стерильной водной суспензии или раствора, чей рН может изменяться в пределах, например, от 6,0 до 8,5. Названные стерильные водные растворы или суспензии могут быть введены с концентрациями, изменяющимися от 0,002 до 1,0 моль/л.

Названные рецептуры также могут быть лиофилизованы и поставляться в таком виде, что позволяет их вновь составлять непосредственно перед использованием. При использовании в желудочно-кишечном тракте или при инъекции в полости тела названные агенты могут применяться в виде суспензии или раствора, содержащего добавки, необходимые, например, для повышения вязкости.

При пероральном введении рецептуры могут быть составлены в соответствии с препаративными методами, обычно используемыми в фармации, причем составы необязательно покрывают с поверхности, так чтобы обеспечить дополнительную защиту против кислой среды в желудке, препятствуя таким образом выделению хелатных ионов металлов, которое происходит, в частности, при значениях рН, типичных для желудочных соков. Другие наполнители, такие, как подслащивающие или ароматизирующие агенты, могут добавляться в соответствии с известными фармацевтическими методиками приготовления рецептур. Суспензии или растворы комплексных солей также могут выпускаться в виде аэрозолей для использования в аэрозольной бронхографии.

Некоторые из комплексных соединений по изобретению обладают поразительной специфичностью, проявляющейся в том, что они особенно концентрируются в печени, в селезенке или после внутрилимфатического, интрапаренхимного, внутримышечного или подкожного введения, в лимфатических сосудах или в лимфатических узлах. Возникающий в результате контраст между исследуемым органом и смежными тканями позволяет лучше визуализировать названный орган методом ЯМР.

Что касается их применения в диагностике, то комплексы металлов с хелатообразователями, являющиеся предметом изобретения, могут также использоваться в качестве контрастирующих агентов в медицинской радиологии и электронномм парамагнитном резонансе или эхографии. В этих случаях, однако, центральные металлические ионы в хелатных комплексах являются, соответственно, радиоизотопом, например ⁵¹Cr, ⁶⁸Ca, ¹¹¹Ln, ^99mTc, ¹⁴⁰La, ¹⁶⁸Yb, или не радиоизотопом, способным изменять благодаря плотности своих растворов, скорость проходящих и отраженных ультразвуковых волн.

В соединениях общей формулы I A предпочтительно является -гидрокси- -пропионовой, -метокси- -пропионовой или -бензилокси- -пропионовой группой, необязательно этерифицированной или предпочтительно замещенной амидным остатком, который может быть свободным, моно- или ди-замещеным алкилом, гидроксиалкилом, алкоксиалкилом или алкоксигидроксиалкилом.

R может быть предпочтительно водородом или линейной, или разветвленной алкильной группой, такой, как метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, или бензильной, или замещенной бензильной группой, как показано в формуле I. R Также может быть ацильной или гидроксиацильной группой. R Также может быть полиоксаэтиленовой группой формулы H(OHCH₂CH₂)_2-4-, Mt(OCH₂CH_2)2-4-, Et(OCH₂CH₂)_2-4, где Х может быть гидроксильной группой или также группой -O-R₁, где R₁ является, как определено в формуле 1. Неограничивающими примерами R₁ являются следующие: метил, этил, изопропил, 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 1,3-дигидроксиизопропил, полиоксаалкил. Х может быть предпочтительно также гидроксиалкиламиногруппой формулы -N₂R₃, в которой R₂ и R₃являются, как определено в формуле 1. Неограничивающими примерами названных групп являются следующие: амино-, 2-гидроксиэтиламино-, 2-гидроксипропиламино-, 2,3-дигидроксипропиламино-, 1,3-дигидроксиизопропиламино-, 1,3-дигидрокси-2-метилизопропиламино-, 2,3,4-тригидрокси-1-бутиламино-1,3,4-тригидрокси-2-бутиламино, 1,3-дигидрокси-2-гидроксиметилизопропиламино-, N-метил-N-2-гидроксиэтиламино-, N-метил-N-2,3-дигидроксипропиламино-, N-метил-N-1,3-дигидроксиизопропиламино-, N-метил-N-2,3,4,5,6-пентагидроксигексиламино-, N-2-гидроксиэтил-N-2,3-дигидроксипропиламино-, N-2-гидроксиэтил-N-1,3-дигидроксиизопропиламино-, бис-(2-гидроксиэтил)амино-, N,N-бис-(2,3-дигидроксипропил)амино-, N, N-бис-(1,3-дигидроксиизопропил)-амино-группы.

В соединениях общей формулы I группы В₁, В₂, В₃ предпочтительно являются ацетатной или -пропионовой группой, в конечном счете этерифицированной или замещенной амидным остатком, который может быть в свободной форме или моно-, или дизамещенным алкильной, гидроксиалкильной, алкоксиалкильной или алкоксигидроксигидроксиалкильной группами. R₄ предпочтительно может быть водородом или линейным, или разветвленным низшим алкилом, предпочтительно метилом. Неограничивающими примерами R₄ являются следующие: водород, метил, линейный или разветвленный пропил, бутил и пентил, как определено в формуле I. Y предпочтительно может быть гидроксильной группой или группой -О-R₅, в которой R₅ имеет значения, определенные в формуле I. Неограничивающими примерами R₅ являются следующие: метил, этил, изопропил, 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 1,3-дигидроксиизопропил, полиоксаалкил. Y предпочтительно может быть также гидроксиалкиламиногруппой формулы -NR₆R₇, в которой R₆ и R₇ имеют значения, определенные в формуле 1. Неограничивающими примерами названных групп являются следующие: амино-, 2-гидроксиэтиламино-, 2-гидроксипропиламино, 2,3-дигидроксипропиламино-, 1,3-дигидроксиизопропиламино-, 1,3-дигидрокси-2-метилизопропиламино-2,3,4-тригидрокси-1-бути- ламино-, 1,3,4-тригидрокси-2-бутиламино-, 1,3-дигидрокси-2-гидроксиметилизопро- пиламино-, N-метил-N-2-гидроксиэтилами- но-, N-метил-N-2,3-дигидроксипропиламино-, N-метил-N-1,3-дигидроксиизопропиламино-, N-метил-N-2,3,4,5,6-пентагидроксигексиламино-, N-2-гидроксиэтил-N-2,3-дигидроксипропиламино-, N-2-гидроксиэтил-N-1,3, дигидроксиизопропиламино-, N-бис-(2-гидроксиэтил)амино-, N-бис-(2,3-дигидроксипропил)амино-, N-бис- (1,3-дигидроксиизопропил)аминогруппы.

Ионами металлов, пригодными для образования комплексных солей с хелатообразователями общей формулы I, являются, главным образом, двух- или трехвалентные ионы элементов, имеющих атомные номера, лежащие в интервале от 20 до 31, 39, 42, 43, 44, 49 или от 57 до 83 и особенно предпочтительными являются Fe²⁺, Fe³⁺, Cu²⁺, Cr³⁺, Gd³⁺, Eu³⁺, Dy³⁺ или Mn²⁺. Среди радиоизотопов металлов особенно предпочтительными являются ⁵¹Cr, ⁶⁸Ga, ¹¹¹Ln, ^99mTc, ¹⁴⁰La, ¹⁶⁸Ib.

Предпочтительные анионы неорганических кислот включают ионы такие, как хлориды, бромиды, иодиды или другие ионы, такие, как сульфат. Преимущественные анионы органических кислот включают ионы кислот, которые обычно используются в фармации для образования солей с основаниями, такие, как ацетат, сукцинат, цитрат, фумарат, малеат. Предпочтительные катионы неорганических оснований включают ионы щелочных металлов, таких, как литий, калий и натрий, причем последний является особенно предпочтительным. Предпочтительные катионы органических оснований включают первичные, вторичные и третичные амины, такие, как этаноламин, диэтаноламин, морфолин, глюкамин, N,N-диметиглюкамин и N-метилглюкамин, причем последний предпочтителен. Предпочтительные катионы аминокислот включают, например, катионы лизина, аринина и орнитина.

Неограничивающими примерами макромолекул, пригодных для конъюгирования с хелатными комплексами по изобретению, являются следующие: биомолекулы, такие, как гормоны (инсулин), простагландины, стероидные гормоны, аминосахара, пептиды, белки (альбумин, сывороточный альбумин человека), липиды, антитела, такие, как моноклоналоные антитела, полисахаридные цепи.

Хелатные комплексы по изобретению могут также быть включены в липосомы, используемые в форме моно-многослоевых носителей.

Хелатообразователи общей формулы I и их комплексные соли предпочтительно получают взаимодействием 1,4,7,10-тетраазациклододекана (II), синтезируемого согласно методу, предложенному Аткинсом и др. (JACS, 96, 2268 (1974)), с нужным -галоидпропиониловым производным

(II)

R-O-CH₂-H-CO-X (III) где Z является галогеном, а R и Х имеют значения, определенные выше, получая продукт присоединения IV

IV или соответствующие поли-замещенные, в зависимости от используемого избытка соединения III, по атомам азота соединения II продукты. Соединение IV также может быть получено, например, защитой диэтилентриамина V с помощью подходящей защитной группы Р, где Р может быть, например, фталоильной группой или другой подходящей защитной группой, известной из литературы (Т.У. Грин: "Защитные группы в органическом синтезе", 1980),

NH₂~ NH ~ NH₂ _ PN ~ NH ~ NP путем алкилирования получающегося в результате соединения VI подходящим галоидным производным III

VI + II _ PN-CH₂-CHN-CH VII и окончательным конденсированием по- лучающегося в результате продукта VII, после снятия защиты и последующего тозилирования, с тозилдиэтаноламином.

Соединение IV или его полизамещенные аналоги в свою очередь могут быть подвергнуты конденсации с подходящим -галоидацетатным производным VIII или с подходящим его предшественником (таким, как сложный эфир или нитрил),

R₄-H-CO-Y VIII где Z является галогеном, а R₄ и Y имеют значения определенные выше, получая искомые хелатообразователи общей формулы I.

И наконец, хелатообразование с искомым ионом металла проводят предпочтительно путем взаимодействия подходящего производного формулы I со стехиометрическим количеством металла в форме соли или оксида, возможно в присутствии кислоты или основания, необходимых для нейтрализации.

Конденсацию II с III можно проводить предпочтительно в воде или в диполярном апротонном органическом растворителе, таком, как диметилформамид (DM F) или диметилацетамид (DМAC), или в их смеси при температуре от 30 до 150^оС, предпочтительно от 40 до 100^оС. Последующая конденсация IV c VIII может быть выполнена в водной среде или в органическом растворителе в присутствии неорганического или органического основания, такого, как гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат калия или гидроксид тетрабутиламмония (ТВАОН), при рН, лежащем в интервале от 8 до 12, предпочтительно от 9 до 11. Температура может изменяться в диапазоне от 40 до 100^оС, предпочтительно от 50 до 70^оС.

И наконец, получение комплексной соли металла предпочтительно проводят в воде или в подходящей смеси спирт-вода, когда температура может лежать в диапазоне от 25 до 100^оС, предпочтительно от 40 до 80^оС.

Выбор иона металла и, если необходимо, нейтрализующего иона строго связан с использованием получающегося в результате комплекса.

П р и м е р 1. 2-(1,4,7,10-Тетраазациклододекан-1-ил)-3-бензилоксипропионовой кислоты гидрохлорид.

А) 2-хлоро-3-бензилоксипропионат натрия.

85 г 2-хлоро-3-бензилоксипропионовой кислоты (0,396 моль) суспендировали в 550 мл воды и нейтрализовали до рН 7 с помощью 10%-ного раствора гидроксида натрия. После перемешивания в течение 15 мин по- лучающийся в результате водный раствор промывали диэтиловым эфиром и упаривали досуха под вакуумом, получая искомое соединение. Было получено 90,6 г 2-хлоро-3-бензилоксипропионата натрия (0,383 моль). Выход: 96,7

Вычислено, С 50,75; Н 4,26; Cl 14,98.

Найдено, С 50,68; Н 4,33; Cl 14,98.

В) 2-(1,4,7,10-Тетраазациклододекан-1-ил)-3-бензилоксипропионовой кислоты тригидрохлорид.

Суспензию 17,2 г 1,4,7,10-тетраазациклододекана (0,1 моль) и 71 г 2-хлоро-3-бензилоксипропионата натрия (0,3 моль) в 70 мл воды нагревали в течение 24 ч при 50^оС. Полученный в результате раствор разбавляли водой до 400 мл, добавляли по каплям в 200 мл 2н. раствора HCl, экстрагировали несколько раз хлористым метиленом и затем упаривали досуха под вакуумом.

Неочищенный остаток совмещали с 400 мл воды и адсорбировали на амберлите 1R 120, с которого его элюировали с помощью раствора гидроксида натрия. Концентрированием основного элюата было получено 29 г остатка, который растворяли в 400 мл абсолютного этанола при 60^оС; раствор подкисляли с помощью 200 мл 6н. раствора HCl в этиловом спирте, и получающийся в результате осадок перемешивали при 60^оС в течение 1 ч. После охлаждения твердое вещество отфильтровывали и сушили, получая искомое соединение. Было по- лучено 33,5 г 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3- бензилоксипропионовой кислоты тригидрохлорида (0,0729 моль). Выход: 72,9% Температура плавления: 221-224^оС. Титры: (NaOH): 96,9% (AgNO₃): 99,0%

Вычислено, C 47,01; H 7,23; Cl 23,13; N 12,18.

Найдено, C 47,13; H 7,32; Cl 22,92; N 12,09.

Тонкослойная хроматография: носитель: пластинка из силикагеля (фирмы "Мерк" типа G60), элюент: CHCl₃ AcOH: H₂O 5:5:1; проявитель: Cl₂ + орто-толуидин; Rf 0,35.

¹Н-ЯМР-¹³С-ЯМР и ИК-спектры подтверждают указанную структуру.

П р и м е р 2. 2-[1,4,7,10-Тетрааза-7-(1-карбокси-2-бензилоксиэтил)-циклододекан- 1-ил]-3-бензилоксипропионовая кислота.

Раствор 12 г 1,4,7,10-тетраазациклододекана (0,069 моль) и 82,32 г натриевой соли 2-хлоро-3-бензилоксипропионовой кислоты (0,348 моль), полученной по методике, описанной в примере 1-А, в 120 мл диметилформамида помещали в герметически уплотненный сосуд и нагревали при 50^оС в течение 30 ч. Образовавшуюся соль отфильтровывали и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток совмещали с 300 мл воды, рН доводили до 2,5 с помощью 10% -ной хлористоводородной кислоты, затем смесь экстрагировали четырьмя 50 мл порциями хлористого метилена. Органическую фазу упаривали досуха, и остаток растворяли в 200 мл 0,01 н. HCl и промывали диэтиловым эфиром. рН доводили до 6 с помощью 10%-ного раствора гидроксида натрия и водный раствор упаривали досуха. Неочищенный остаток совмещали с 30 мл воды и адсорбировали на амберлите 1R 120, с которого его элюировали с помощью 5н. раствора гидроокиси аммония. Концентрированием основного элюанта было получено 7 г остатка, который перекристаллизовывали из воды. Было получено 5,85 г 2-[1,4,7,10-тетрааза-7-(1-карбокси-2-бензи- локсиэтил)-циклододекан-1-ил] -3-бензилок- сипропионовой кислоты (0,011 моль).

Выход 16% Температура плавления 170-175^оС.

Вычислено, C 63,61; H 7,63; N 10,60.

Найдено, C 63,48; H 7,82; N 10,51.

Аналогично были получены следующие соединения:

2-[1,4,7,10-тетрааза-4-(1-карбокси-2-бен- зилоксиэтил)-циклододекан-1-ил] -3-бензи- локсипропионовая кислота; 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7-ди(1-карбокси-2-бензилоксиэтил)- циклододекан-1-ил]-3-бензилоксипропи- оновая кислота.

П р и м е р 3. 2-[1,4,7,10-Тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан- 1-ил]-3-бензилоксипкислота (Метод А).

К суспензии 23 г тригидрохлорида 2-[1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил] -3-бензилоксипропионовой кислоты (0,05 моль), полученной по методике, описанной в примере 1, и 27,8 г бромуксусной кислоты (0,2 моль) в 100 мл воды при перемешивании добавляли приблизительно 60 мл 6н. раствора гидроксида натрия, достигая рН 10. Смесь нагревали при 50^оС в течение 17 ч и рН, равный 10, поддерживали дальнейшим добавлением 6 н. гидроксида натрия. Раствор охлаждали и обрабатывали амберлитом 1R 120, с которого продукт элюировали 5 н. раствором гидроокиси аммония. Основной элюат упаривали досуха, получающееся в результате неочищенное соединение растворяли в воде, и раствор подкисляли до рН 3 с помощью 5 н. HCl. Осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из воды, получая искомое соединение. Было получено 15,3 г 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)циклододкан-1 -ил] -3-бензилоксипрокислоты (0,029 моль).

Выход 58,4%

Температура плавления 173оС с разложением.

Титры: (NaOH), 99,6% (ZnSO4) 99,5% (высокоэффективная жидкостная хроматография): 09,0%

Вычислено, С 54,95; Н 6,92; N 10-68.

Найдено, С 54,77; Н 6,96; N 10,77.

ЯН-ЯМР 13С-ЯМР- и ИК-спкетры подтверждают указанную структуру.

П р и м е р 4. 2-[1,4,7,10-Тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан- 1-ил]-3-бензилоксипкислота (Метод В).

Смесь 10 г 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-бензилоксипропионовой кислоты (0,028 моль), полученной согласно методике, описанной в примере 1, но без образования гидрохлорида, и 15,57 г бромуксусной кислоты (0,112 моль) в 60 мл воды обрабатывали по методике, аналогичной, описанной в примере 3, получая искомое соединение. Было получено 7,93 г 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиме- тил)-циклододекан-1-ил]-3-бензилоксипропионовой кислоты (0,015 моль).

Выход 54% Температура плавления 169-172^оС с разложением.

Титры: (NaOH): 99,3% (ZnSO₄) 99,5%

Вычислено, C 54,95; H 6,92; N 10,68.

Найдено, С 54,71, Н 7,00; N 10,64.

Другие физико-химические свойства согласуются со свойствами соединения, полученного согласно методу А (пример 3).

Аналогично были получены следующие соединения: 2-1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(1-карбоксиэтил)-циклододекан -1-ил-3-бензилоксипркислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4-(1-карбокси-2-бензилоксиэтил)- 4,10-ди(карбоксиметил)-циккислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-7-(1-карбокси-2-бензилоксиэтил) -7,10-ди(карбоксиметил)-цик3-бензилоксипропионовая кислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7-ди(1-карбокси-2-бензилокси -этил)-10-карбоксиметилциклокислота.

П р и м е р 5. Соль D(-)-N-метилглюкамина и комплекса Gd³⁺-2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)- циклододекан-1-ил]-3-бензилоксикислота.

К суспензии 100 г 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1- ил] -3-бензилоксипропионовой кислоты (0,19 моль), полученной по методике, описанной в примере 3, в 150 мл воды добавляли 36,6 г D(-)-N-метилглюкамина (0,187 моль). К раствору были добавлены 19,47 г Gd₂O₃ (0,095 моль), и получившуюся в результате суспензию нагревали при 50^оС в течение 4 ч. Реакционную смесь фильтровали и рН доводили до 6,5 с помощью 10%-ного водного раствора D(-)-N-метилглюкамина. Полученный в результате раствор затем упаривали и сушили, получая искомое соединение. Было получено 159 г соли D(-)-N-метилглюкамина и комплекса Gd³⁺(2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил) -циклододекан-1-ил]-3-бензилоксикислота (0,182 моль).

Выход 95,8%

Температура плавления 137^оС. Титр: (высокоэффективная жидкостная хроматография): 99,3%

Вычислено, C 42,56; H 5,76; Gd 17,99; N 8,01.

Найдено, C 42,42; H 5,96; Gd 17,63; N 7,92.

[]₃₆₉²⁰ -15,36^o, []₄₃₆ ²⁰=-11,22^o,

[]₅₄₆²⁰ -6,7^o, []₂₈₀²⁰-5,7^о (С= 5% Н₂О).

П р и м е р 6. Соль D(-)-N-метилглюкамина с комплексом Gd³⁺2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил] -3-гидр оксипропкислота.

Раствор 92 г 0,105 моль соли D(-)-N-мтилглюкамина с комплексом Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиме- тил)-циклододекан-1-ил]-3-бензилоксипро- пионовая кислота, полученной по методике, описанной в примере 5, в 550 мл воды, к которому было добавлено 153 г 5% палладия на активированном угле, гидрогенизировали в течение 5 ч при комнатной температуре. Катализатор удаляли фильтрованием и водный раствор упаривали под вакуумом при 50^оС. Сушка остатка до постоянной массы привела к получению искомого дебензилированного соединения. Было получено 67 г соли D(-)-N-метиглюкамина с комплексом Gd³⁺ /2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1- ил] -3-гидроксипропионовая кислота (0,084 моль).

Выход 80%

Температура плавления 180^оС (разлагается).

Вычислено, С 36,77; Н 5,65; Gd 20,06; N 8,93.

Найдено, C 36,47; H 5,47; Gd 20,29; N 8,83.

[_]365²⁰-16,7^о, []₄₃₆²⁰-11,2^о []₅₄₆²⁰-6,7^о, []₅₈₉²⁰=-5,8^о (с 5% Н₂О).

Аналогично были получены следующие соединения: 2-[1,4,7,10-тетраазоциклододекан-1-ил] -3-гидроксипропионовая кислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4-(1-карбокси-2-гидро- ксиэтил)-циклододекан-1-ил]-3-гидрокси- пропионовая кислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-7-(1-карбокси-2-гидроксиэтил)-циклододекан- 1-ил] -3-гидроксипропионовая кислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7-ди(1-карбокси-2-гид- роксиэтил)циклододекан-1-ил] -3-гидрокси- пропионовая кислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4-(1-карбокси-2-гидроксиэтил)- 7,10-ди-(карбоксиметил)-циклододекан-1- ил]-3-гид- роксипропионовая кислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7-ди(1-карбокси-2-гид- роксиэтил)-10-карбоксиметил-циклододе- кан-1-ил]-3-гид- роксипропионовая кислота, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиме- тил)-циклодо- декан-1-ил]-3-гидроксипропионовая кислота.

П р и м е р 7. 2-[1,4,7,10-Тетраазациклододекан-1-ил]-3-бензилокси-N-(1,3,-дигид- роксиизопропил)пропионамид.

А) 3-Бензилокси-2-хлоропропионилхлорид.

119 г хлористого тионила (1 моль) добавляли по каплям к 107,3 г 3-бензилокси-2-хлоропропионовой кислоты (0,5 моль) при 30^оС. После кипячения реакционной смеси в колбе с обратным холодильником в течение 2 ч дополнительно добавляли 33 г хлористого тионила (0,277 моль) и смесь кипятили с обратным холодильником еще в течение 30 мин. Избыток хлористого тионила отгоняли при пониженном давлении и перегонкой в вакууме получали искомое соединение. Было получено 95,8 г (0,41 моль) 3-бензилокси-2-хлоропропионилхлорида. Выход 82% Температура кипения 125-131^оС /0,05 мбар. Титры: (восстановление с Zn): 99,9% ( аргентометрия): 96,0%

Вычислено, С 51,53; Н 4,32; Сl 30,42.

Найдено, С 51,30; H 4,46; Сl 29,48.

¹Н-ЯМР-, ¹³С-ЯМР- и ИК-спектры подтверждали указанную структуру.

В) 2-хлоро-3-бензилокси-N-(1,3-дигидроксиизопропил)-пропионамид.

Раствор 70 г (0,3 моль) 3-бензилокси-2-хлоропропионилхлорида в 150 мл тетрагидрофурана по каплям в течение приблизительно 2 ч добавляли к раствору 32,6 г (0,36 моль) 2-амино-1,3-дигидроксиизопропана в 150 мл воды и 250 мл тетрагидрофурана. В процессе добавления хлорангидрида рН раствора поддерживали постоянно при 10 добавлением 6 н. раствора гидроксида натрия. К реакционной смеси добавляли 250 мл воды. При концентрировании до 450 мл осаждался продукт белого цвета, который отфильтровывали и перекристаллизовывали из воды, получая после обработки карбопуроном 4 н. искомый продукт. Было получено 62,2 г (0,218 моль) 2-хлоро-3-бензилокси-N-(1,3-дигидроксии- зопропил)-пропионамида.

Выход 72,6%

Температура плавления 133-135^оС.

Титры (аргентометрия): 99,8%

Вычислено, С 54,27; H 6,30; Cl 12,32; N 4,87.

Найдено, С 54,19; Н 6,38; Сl 12,24; N 4,84; H₂O 0,22.

Высокоэффективная жидкостная хроматография:99%

¹Н-ЯМР-, ¹³С-ЯМР- и ИК-спектры подтверждали указанную структуру.

С) Тригидрохлорид 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-бензилокси-N-(1,3- дигидроксиизопропил)-пропионамида.

51,6 г (0,3 моль) 1,4,7,10-тетраазациклододекана и 258,75 г (0,9 моль) 2-хлоро-3-бензилокси-N-(1,3-дигидроксиизопропил)-про- пионамида, полученного по методике, описанной в примере 7-В, взаимодействовали в диметилформамиде при 70^оС в течение 24 ч. После упаривания растворителя под вакуумом к остатку добавляли воду и адсорбировали на ион-обменной смоле типа 1R 120, с которой его элюировали с помощью 5н. раствора гидроокиси аммония. Аммониевый раствор упаривали досуха и остаток переводили в соответствующий тригидрохлорид, как описано в примере 1. Было получено 63,84 г (0,120 моль) тригидрохлорида 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-бен- зилокси-N-(1,3-дигидроксиизопропил)-про- пионамида. Выход 40,0% Температура плавления 125^оС (разложение).

Вычислено, C 47,33; H 7,56; Cl 19,96; N 13,14.

Найдено, C 47,41; H 7,68; Cl 19,85; N 13,08.

Высокоэффективная жидкостная хроматография: 97,6%

Аналогично были получены следующие соединения: 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-бензилоксипропионамид, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-бен- зилокси-N-(2-гидроксиэтил)-пропионамид, 2-(1,4,7,10-тетразациклододекан-1-ил)-3- бензилокси-N-(2,3-дигидроксипропил)-про- пионамид, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-бензилокси-N, N-ди-(3-гидрокси- этил)-пропионамид.

П р и м е р 8. 2-[1,4,7,10-Тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил]-3-бензилок си-N

Смесь 16 г (0,038 моль) 2-[1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)]-бензилокси-N-(1,3- дигидроксиизопропиол)-пропионамида, по- лученного по методике, описанной в примере 7, и 21,13 г (0,152 моль) бромуксусной кислоты в 100 мл воды взаимодействовали таким же образом, как описано в примере 3, давая искомое соединение. Было получено 12,4 г 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил] -3-бензи- локси-N-(1,3-дигидроксиизопропил)-пропи- онамида.

Выход 54,4%

Температура плавления 137^оС (разложение).

Титры: (NaOH) 98,8%

Вычислено, C 53,98; H 7,72; N 11,66.

Найдено, С 53,91; H 7,85; N 11,59.

Аналогично были получены следующие соединения: 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил] -3-бензилок сипр2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододе- кан-1-ил] -3-бензилокси-N-(2-гидроксиэтил)пропионамид, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил] -3-бензилок си-Nпионамид, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1- ил] -3-бензилокси-N, N-ди(2-гидроксиэтил)-про- пионамид.

П р и м е р 9. Gd³⁺2-[1,4,7,10-Тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1- ил]-3-бензилокси-N-(1,3-дигидроксиизо- пропил)-пропионамид.

К суспензии 8 г (0,013 моль) 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-цикло- додекан-1-ил] -3-бензилокси-N-(1,3-дигид- роксиизопропил)-пропионамида, полученного по методике, описанной в примере 8, в 30 мл воды добавляли 1,33 г (0,0065 моль) Gd₂O₃ и смесь реагировали при 50^оС согласно методике, описанной в примере 5. По- лученный в результате раствор упаривали досуха, выделяя искомый продукт. Было получено 9 г (0,012 моль) Gd³⁺ 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклодо- декан-1-ил]-3-бензилокси-N-(1,3-дигидро- ксиизопропил)-пропионамида. Выход 92,3%

Вычислено, С 42,95; Н 5,74; N 9,28.

Найдено, C 42,87; H 5,80; N 9,23.

Высокоэффективная жидкостная хроматография: 97,5%

П р и м е р 10. Gd³⁺2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1- ил]-3-гидрокси-N-(1,3-дигидроксиизопро- пил)-пропионамид.

9 г (0,012 моль) Gd³⁺2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододе- кан-1-ил]-3-бензилокси-N-(1,3-дигидрокси- изопропил)-пропионамида, полученного по методике, описанной в примере 9, растворяли в 60 мл воды. После добавления 15 г палладия на активированном угле раствор гидрогенизировали согласно методике из примера 6, получая искомое соединение. Было получено 6,22 г (0,0096 моль) Gd³⁺2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиме- тил)-циклододекан-1-ил] -3-гидрокси-N -(1,3-дигидроксиизопропил)-пропионамида.

Выход 80%

Вычислено, С 36,13; Н 5,61; N 10,53.

Найдено, С 36,06; Н 5,64; N 10,48.

Аналогично были получены следующие соединения: 2-[1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил] -3-гидроксипропионамид, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-гидрокси-N-(2-гидроксиэтил)-пропион амид2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-гид- рокси-N-(2,3-дигидроксипропил)-пропиона- мид, 2-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1-ил)-3-гидрокси-N-N-ди-(2-гидроксиметил)- пропионамид, 2-[1,4,7,10- тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил]-3-гидроксипропионамид, 2-[1,4,7,10-тетра- аза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододе- кан-1-ил] -3-гидрокси-N-(2-гидроксиэтил)- пропионамид, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил]-3-гидрокси -N-(пионамид, 2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил] -3- гидрокси-N, N-ди-(2-гидроксиэтил)пропио- намид).

П р и м е р 11. Определение релаксации соединений по изобретению.

Рабочие условия

А) Оборудование "MINISPEС PC 120" (фирмы "Брукер")

В) Наблюдаемая частота 20 МГц (протон)

С) Температура: 39^оС, с предварительной термостабилиза-

цией ЯМР-ампулы в течение 10 мин при

рабочей температуре

D) Концентрации: в интервале от 0 до 5 ммоль со следующи-

ми конкретными точками измерения:

0/0,1/0,2/0,5/1,0/2,0/5,0 ммоль

Е) Растворитель: 0,154 М раствор NaOH (0,9%), вода

F) pH: 7,3, проверяют снова потенциометричес-

ки перед измерением релаксации.

Измерения продольной релаксации (R₁) обрабатывали, используя последовательность "обратного восстановления" c минимумом по 8 точкам и аппроксимацией по 3 параметрам в соответствии с программой, предусмотренной для прибора типа "MINISPEC 120 BRUKER", с помощью которого проводили измерения.

Измерения поперечной релаксации (R₂) обрабатывали, используя последовательность Карра, Перселла, Мейбума и Гилла, согласно программе, предусмотренной для прибора типа "MINISPEC 120 BRUKER", с помощью которого проводили измерения, настраивая прибор таким образом, чтобы наблюдать ослабление сигнала приблизительно на 1/3 от начальной величины, причем число точек было больше или равно 10 и аппроксимацию проводили по 2 параметрам.

В табл.1 в качестве неограничивающих примеров представлены величины R₁ и R₂, рассчитанные для соединений А и В в сравнении с комплексом Gd/DTPA, нейтрализованным N-метилглюкамином.

Физико-химические данные соединений приведены в табл.2.

П р и м е р 12. Получение липосом, содержащих комплекс: Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклодо- декан-1-ил]-3-бензилоксипропионовая кислота, нейтрализованный N-метилглюкамином.

Готовили безводную липидную смесь следующего состава: фосфатидилхолин яйца 75 мол. и холестерин 25 мол. используя PEV метод (Ф.Жока и др. (1978), Proc. Natl, Acad. Sci, USA, 75, 4194). 400 мг названной смеси растворяли в 35 мл хлороформа, куда по каплям при воздействии ультразвука добавляли 10 мл 0,05 М раствора соли N-метил-D-глюкамина с комплексом Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбоксиметил)-циклододекан-1-ил] -3-бен зи- локсипропионовая кислота.

После завершения добавления обработку ультразвуком продолжали в течение 5 мин. Затем неочищенное соединение нагревали до 50^оС, и растворитель отгоняли под вакуумом. Полученный в результате гелеобразный остаток суспендировали в 1%-ном растворе NaCl и освобождали от несвязанного хелата с помощью пяти последовательных операций центрифугирования и повторного суспендирования (26000 g) 10 мин.

П р и м е р 13. Определение LD₅₀ на мышах при внутривенном введении соединений по настоящему изобретению.

В табл.3 в качестве неограничивающих примеров представлены LD₅₀ величины для соединений А и В по настоящему изобретению в сравнении с GdCl₃ и c Gd/DTPA, нейтрализованного N-метилглюкамином.

Из табл.3 видно, что в данном фармакологическом тесте комплексы гадолиния с макроциклическими хелатообразователями по настоящему изобретению характеризуются существенно пониженной токсичностью по сравнению как с GdCl₃, так и с Gd/DТРА.

П р и м е р 14. Получение раствора соли D(-)-N-метилглюкамина с комплексом Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбо- ксиме- тил)-циклододекан-1-ил]-3-бензилоксипропионовая кислота.

436,8 г (0,500 моль) соединения, по- лученного по методике, описанной в примере 5, растворяли в 300 мл воды для инъекций.

Объем раствоpа доводили до 500 мл добавлением воды для инъекций, затем раствор фильтровали, наливали в пробирки и стерилизовали.

П р и м е р 15. Получение раствора соли D(-)-N-метилглюкамина с комплексом Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбо- ксиме- тил)-циклододекан-1-ил]-3-гидроксипропио- новая кислота.

398,8 г (0,500 моль) соединения, по- лученного по методике, описанной в примере 6, растворяли в 300 мл воды для инъекций. Объем раствора доводили до 500 мл добавлением воды для инъекций, затем раствор фильтровали, наливали в пробирки и стерилизовали.

П р и м е р 16. Получение раствора соли D(-)-N-метилглюкамина с комплексом Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбо- кси- метил)-циклододекан-1-ил]-3-бензилоксипропионовая кислота.

218,4 г (0,250 моль) соли, описанной в примере 14, растворяли в 260 мл воды для инъекций, добавляли 0,6 г аскорбиновой кислоты, и раствор разбавляли до 500 мл водой для инъекций. Раствор стерилизовали с помощью фильтрации и наливали в пробирки.

П р и м е р 17. Получение раствора соли D(-)-N-метилглюкамина с комплексом Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(карбо- ксиме- тил)-циклододекан-1-ил]-3-бензилоксипропионовая кислота.

218,4 г (0,250 моль) соли, описанной в примере 14, растворяли в 200 мл воды для инъекций, добавляли 0,45 г гидрохлорида трометамина, и раствор разбавляли водой для инъекций до 500 мл. Раствор фильтровали, наливали в пробирки и стерилизовали.

П р и м е р 18. Получение раствора соли D(-)-N-метилглюкамина с комплексом Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(кар- боксиметил)-циклододекан-1-ил]-3-гидро- ксипропионовая кислота.

199,4 г (0,250 моль) соли, описанной в примере 15, растворяли в 200 мл воды для инъекций, добавляли 0,6 г аскорбиновой кислоты, и раствор разбавляли водой для инъекций до 500 мл. Раствор стерилизовали путем фильтрации и наливали в пробирки.

П р и м е р 19. Получение раствора соли D(-)-N-метилглюкамина с комплексом Gd³⁺/2-[1,4,7,10-тетрааза-4,7,10-три(кар боксиметил)-циклододекан-1-ил] -3-гидро- ксипропионовая кислота.

199,4 г (0,250 моль) соли, описанной в примере 15, растворяли в 200 мл воды для инъекций, добавляли 0,45 г гидрохлорида трометамина, и раствор разбавляли до 500 мл водой для инъекций. Раствор фильтровали, наливали в пробирки и стерилизовали.