способ окрашивания мазков крови
Классы МПК: | G01N1/30 окрашивание; импрегнирование |
Автор(ы): | Роговин В.В., Цикалов С.И., Хан И.Г., Титова С.П. |
Патентообладатель(и): | Роговин Всеволод Викторович, Цикалов Сергей Иванович, Хан Ир Гвон, Титова Светлана Павловна |
Приоритеты: |
подача заявки:
1992-03-26 публикация патента:
20.09.1995 |
Использование: в медицине, в частности в лабораторной диагностике. Сущность изобретения: мазки крови термически фиксируют при 160-180°С, окрашивают 0,25-ным водным раствором эозина 110-130 с, споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2% -ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового 50-70 с. Способ позволяет сократить время анализа, получить объемную картину ядер лейкоцитов и исключить токсичность красителя.
Формула изобретения
СПОСОБ ОКРАШИВАНИЯ МАЗКОВ КРОВИ, включающий термическую фиксацию при 160 180oС и обработку красителями, отличающийся тем, что мазки окрашивают 0,2% -ным раствором эозина 110 130 с, споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2% -ным раствором диазагемицианинового бензтиазолового 50 70 с.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при анализе крови. Известен способ окрашивания мазков крови, в котором фиксированные метиловым спиртом мазки крови окрашивают по Романовскому смесью азура и эозина в течение 20 мин. Наиболее близким является способ окрашивания мазков крови, при котором высушенные на стенках мазки крови фиксируют термической обработкой при 160-180оС в течение 9-11 мин, а затем окрашивают по Романовскому азур-эозином в течение 20 мин. Однако производство азура токсично, сам он токсичен и экологически опасен. Окраска азур-эозином никогда не дает "объемную" картину ядра леток крови, а только плоскую, что считается единственно возможным. Готовый краситель: смесь азур-эозина по Романовскому, растворенная в смеси глицерина и метилового спирта, огнеопасна. Кроме того, окрашивание мазков крови по Романовскому требует довольно длительного времени (20 мин). Целью изобретения является создание технологии окраски мазков крови с использованием нетоксичных, экологически безопасных и пожаробезопасных смесей красителей, получение объемной картины ядер лейкоцитов и сокращение времени анализа. Это достигается предлагаемым способом окрашивания мазков крови, включающим термическую фиксацию при 160-180оС и обработку красителями, мазки окрашивают 0,2%-ным водным раствором эозина в течение110-130 с, споласкивают водой и затем окрашивают 0,2%-ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового в течение 50-70 с. Диазагемицианиновый бензтиазоловый является нетоксичным водорастворимым красителем, который применяют в текстильной промышленности для окрашивания тканей из полиакриловых волокон. П р и м е р 1. Мазок крови человека высушивают на воздухе, фиксируют высокой температурой при 169оС в течение 9 мин. Остывшие мазки окрашивают 0,2%-ным водным раствором эозина 110 с, споласкивают водой, а затем окрашивают 0,2%-ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового 50 с. Эритроциты окрашиваются в красный цвет, ядра нейтрофилов в фиолетовый, зернистость эозинофилов в оранжево-красный; ядра лимфоцитов и моноцитов окрашиваются в светло-фиолетовый цвет, видна объемность ядра, цитоплазма лимфоцитов и моноцитов светло-синяя. П р и м е р 2. Высушенные мазки крови выдерживают 11 мин при 171оС. Остывшие мазки окрашивают 70 с, 0,2%-ным водным раствором эозина, ополаскивают водой, затем окрашивают 130 с 0,2%-ным водным раствором диазагемицианинового бензтиазолового. Эритроциты розовые, ядра нейтрофилов фиолетовые, цитоплазма голубоватая, гранулы светло-вишневого цвета. Ядра моноцитов и лимфоцитов светло-фиолетовые, объемные, цитоплазма сиреневая. Тромбоциты светло-синие. Как видно из примеров, удается получить объемную картину ядер лейкоцитов, что может дать дополнительную диагностическую информацию. Сокращается время окраски мазков крови до 3 мин вместо 20 мин, что экономит время медперсонала. Удается отказаться от применения красителя азура, производство которого токсично, а применение экологически опасно. Удается избежать добавления в краситель токсичного метилового спирта.Класс G01N1/30 окрашивание; импрегнирование