способ определения повреждения почек при воздействии химических веществ

Формула изобретения

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЯ ПОЧЕК ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ, включающий введение лабораторным животным вещества с последующим сбором мочи и определением объема мочи, титруемой кислотности, содержания белка, мочевой кислоты и хлоридов, отличающийся тем, что , с целью повышения точности способа путем обеспечения возможности выявления локализации повреждения почки, указанные показатели определяют до и после введения стандартной дозы диуретика с известным механизмом действия и при изменении значения этих показателей относительно контроля определяют повреждение почек.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к экспериментальной медицине и в частности к экспериментальной фармакологии и токсикологии.

Цель изобретения - повышение точности локализации повреждения нефрона веществами нефрогенного действия.

Способ осуществляется следующим образом.

Для эксперимента подбираются четыре группы животных крыс-самцов весом по 200-220 г, по восемь особей в каждой. Первая группа - контрольные животные (К), вторая группа - контрольные животные, получающие перед сбором мочи диуретик (К+Д), третья группа - отравленные животные, перед сбором мочи получающие диуретик (О+Д), четвертая группа - отравленные животные (О).

Животным 3(О+Д) и 4(О) групп в течение 3-х дней вводится 1/3 ДЛ₅₀ исследуемого соединения. Через 24 ч после последнего отравления опытных групп животным 2-й контрольной (К+Д) и 3-й опытной (О+Д) групп вводится диуретик. Диуретик используется как дозированная фармакологическая нагрузка на определенный участок нефрона. После введения диуретика 2-й и 3-й группам животных у всех четырех групп в течение суток собирается моча. После сбора мочи проводится исследование по следующим показателям:

общее количество выделенной за сутки мочи;

содержание белка в моче;

содержание мочевой кислоты в моче;

содержание хлоридов в моче;

определение титруемой кислотности мочи.

Сопоставляются показатели исследования мочи всех экспериментальных групп животных и таким образом выявляется повреждаемый участок нефрона.

Способ подтверждается следующим примером. Животные были отравлены метиловым эфиром нитроуксусной кислоты (МЭНУК). через 24 ч после отравления опытных групп животных всех четырех групп высаживали для сбора мочи. В качестве диуретика был применен диакарб, действующий на проксимальный отдел почечного канальца. Диакарб вводили контрольной (К+Д) и одной подопытной группам животных (МЭНУК + Д).

Введение МЭНУК вызывает снижение диуреза на 48,88%, белка на 39,50%, мочевой кислоты на 28,87% и хлоридов на 68,90%, у гpуппы отравленных животных, получивших диакарб (О+Д), наблюдается повышение диуреза на 45,37%, белка на 62,30%, мочевой кислоты на 178,70%, хлоридов на 2,77%. Однонаправленность изменений показателей у животных группы (К+Д) и группы (МЭНУК+Д) свидетельствует о том, что фармакологический эффект диакарба реализуется у обеих групп одинаково, т.е. МЭНУК не вызывает повреждения клеток проксимального канальца, что послужило основанием для проведения эксперимента с другим диуретиком - фуросемидом.

Фуросемид - диуретик, действие которого в основном направлено на восходящий толстый отдел петли Генле. Результаты экспериментов показали, что изменения обратимы и не связаны с повреждением почечного канальца. Выявленные нарушения функционального состояния почек в виде резкого снижения диуреза (группа отравленные животные МЭНУК), обусловлены не повреждением почечных канальцев, а связаны с нарушениями функции клубочкового аппарата.

Таким образом, последовательное применение двух диуретиков диакарба и фуросемида, фармакологический эффект которых связан с функционированием различных участков нефрона, позволяет исключить повреждение проксимального отдела почечного канальца (установлено в опытах с диакарбом) и восходящего толстого отдела петли Генле (установлено в опытах с применением фуросемида), свидетельствует о поражении клубочков почек. Выявленные повреждения предложенным способом подтверждаются гистологическими исследованиями почек крыс отравленных МЭНУК, выявившими поражение стенок мелких сосудов клубочков почек в виде отека, периваскулита, атрофии клубочков.

Данные, полученные по прототипу, свидетельствуют о том, что функция почек нарушена, в частности наблюдается снижение диуреза на 48,9%, белка на 39,5%, мочевой кислоты на 28,9%= хлоридов на 68,9%.

Данные, полученные предложенным способом, т.е. с применением диуретиков, уточняют локализацию повреждения и указывают на повреждение именно клубочкового аппарата нефрона.