способ оценки иммунокоррекции у больных b-клеточным вариантом хронического лимфолейкоза
Классы МПК: | G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого |
Автор(ы): | Маркова Т.П., Чувиров Г.Н. |
Патентообладатель(и): | Маркова Татьяна Петровна, Чувиров Геннадий Николаевич |
Приоритеты: |
подача заявки:
1990-09-05 публикация патента:
15.06.1994 |
Способ относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использован при проведении иммунокоррекции у больных B-клеточным вариантом хронического лимфолейкоза. Целью изобретения является повышение точности оценки иммунокоррекции у больных B-клеточным вариантом ХЛЛ за счет определения индивидуальной чувствительности в процессе лечения. Способ заключается в том, что дополнительно у больного до и после введения иммунокорректора определяют относительное количество субпопуляций Т-лимфоцитов, "стабильных" Е-РОК и "активных" Е-РОК, B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами, далее рассчитывают индекс иммунокоррекции для Т-клеточного звена иммунитета по формуле ИИМ=А/Аисх+B/Bисх+C/Cисх , где A - относительное количество Е-РОК после иммунокоррекции; Aисх - относительное количество Е-РОК до иммунокоррекции; B - относительное количество "стабильных" Е-РОК после иммунокоррекции; Bисх - относительное количество "стабильных" Е-РОК до иммунокоррекции; C - относительное количество "активных" Е-РОК после иммунокоррекции; Cисх - относительное количество "активных" Е-РОК до иммунокоррекции, при этом при значении индекса иммунокоррекции от 10 и выше и снижении B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами от исходного уровня до нормы оценивают иммунокоррекцию как эффективную, а при индексе иммунокоррекции 1 - 9 и сохранении B-клеток выше нормы проводят повторный курс иммунокоррекции.
Формула изобретения
СПОСОБ ОЦЕНКИ ИММУНОКОРРЕКЦИИ У БОЛЬНЫХ B-КЛЕТОЧНЫМ ВАРИАНТОМ ХРОНИЧЕСКОГО ЛИМФОЛЕЙКОЗА, включающий введение иммунокорректора и определение Е-РОК в реакции спонтанного розеткообразования до и после иммунокоррекции с последующей оценкой эффекта лечения, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно до и после введения иммунокорректора определяют количество "стабильных" Е-РОК и "активных" Е-РОК, B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами, далее рассчитывают индекс иммунокоррекции для T-клеточного звена иммунитета по формулеИИМ =



где A - относительное количество Е-РОК после иммунокоррекции;
Aисх. - относительное количество Е-РОК до иммунокоррекции;
B - относительное количество "стабильных" Е-РОК после иммунокоррекции;
Bисх. - относительное количество "стабильных" Е-РОК до иммунокоррекции;
C - относительное количество "активных" Е-РОК после иммунокоррекции;
Cисх. - относительное количество "активных" Е-РОК до иммунокоррекции,
при этом при значении индекса иммунокоррекции от 10 и выше и снижении B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами от исходного уровня до нормы оценивают иммунокоррекцию, как эффективную, а при индексе иммунокоррекции 1 - 9 и сохранении B-клеток выше нормы недостаточно эффективную.
Описание изобретения к патенту
Известен способ оценки иммунокоррекции левамизолом, у больных хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ), включающий предварительное лабораторное определение чувствительности к препарату в тесте миграции лейкоцитов и спонтанного розеткообразования, введение препарата и определение Т-лимфоцитов у больного в тесте спонтанного розеткообразования. Однако известный способ не позволяет точно оценить результаты иммунокоррекции из-за индивидуальной вариабельности показателей клеточного иммунитета. Предварительное лабораторное определение чувствительности к препарату в тесте миграции лейкоцитов демонстрирует положительный эффект у 32% больных ХЛЛ, а в тесте спонтанного розеткообразования у 3,5%. Опыт показывает , что только в 20-28% случаев B-клеточного варианта ХЛЛ in vitro определяется чувствительность к иммуномодуляторам в тесте спонтанного розеткообразования. Известно, что тест миграции лейкоцитов не является основным для оценки иммунного статуса, поэтому чувствительность in vitro в данном тесте не определялась. Таким образом, прогнозирование эффекта левамизола известным способом и отбор больных по указанным показателям не позволяет с большой точностью оценить иммунокоррекцию у больных ХЛЛ, что объясняет несоответствие между количеством больных, лимфоциты которых чувствительны in vitro к препарату и количеством больным со снижением числа инфекционных осложнений, т.е. точность оценки иммунокоррекции невелика, что не позволяет значительно снизить число инфекционных осложнений и их тяжесть и повысить продолжительность жизни больных. Целью изобретения является повышение точности оценки иммунокоррекции у больных B-клеточным вариантом ХЛЛ за счет определения индивидуальной чувствительности в процессе лечения. Поставленная цель достигается тем, что в способе оценки иммунокоррекции у больных B-клеточным вариантом хронического лимфолейкоза, включающем введение иммунокорректора и определение Т-лимфоцитов в реакции спонтанного розеткообразования до и после иммунокоррекции с последующей оценкой эффекта лечения, отличием является то, что дополнительно у больного до и после введения иммунокорректора определяют относительное количество субпопуляций Т-лимфоцитов, "стабильных" Е-РОК и "активных" Е-РОК, B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами, далее рассчитывают индекс иммунокоррекции для Т-клеточного звена иммунитета по формулеИИМ =



Aисх. - относительное количество Е-РОК до иммунокоррекции;
B - относительное количество "стабильных" Е-РОК после иммунокоррекции;
Bисх. - относительное количество "стабильных" Е-РОК до иммунокоррекции;
С - относительное количество "активных" Е-РОК после иммунокоррекции;
Сисх. - относительное количество "активных" Е-РОК до иммунокоррекции. При значении индекса иммунокоррекции от 10 и выше и снижении B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами от исходного уровня до нормы оценивают иммунокоррекцию, как эффективную, а при индексе иммунокоррекции 1-9 и сохранении B-клеток выше нормы проводят повторный курс иммунокоррекции. Способ осуществляют следующим образом. У обследуемого осуществляют забор крови из локтевой вены в стерильную пробирку с гепарином. Известным способом в камере Горяева подсчитывают количество лейкоцитов в 1 мм3 крови, делают мазок и окрашивают его по Романовскому-Гимза для подсчета лейкоцитарной формулы. Исследуемую кровь инкубируют с карбонильным железом из расчета 1 мг/мл крови, периодически встряхивая, в течение 30 мин при температуре 37оС для устранения фагоцитирующих клеток. Выделяют лимфоидные клетки известным способом в градиенте верографин-фиколл, плотностью 1,077 г/мл. Примесь аутологичных эритроцитов удаляют инкубацией с 0,83%-ным забуференным хлористым аммонием, pH 7,2 в течение 20 мин при температуре -4оС. Затем лимфоидные клетки дважды осторожно отмывают 0,5%-ным гидролизатом лактальбумина в растворе Хенкса и определяют концентрацию. Известным способом в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана определяют количество Е-РОК, "стабильных" Е-РОК, "активных" Е-РОК. Известным способом в реакции прямой иммунофлюоресценции определяют количество B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами с помощью суммарной сыворотки против иммуноглобулинов человека, меченной флуоресцеинизотиоционатом (ФИТЦ). После исследования показателей иммунитета проводят предварительный отбор больных с B-клеточным вариантом ХЛЛ, т.е. с повышением выше нормы B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами, снижение ниже нормы Е-РОК, "стабильных" Е-РОК и "активных" Е-РОК. Отобранным больным ХЛЛ в системе комплексного лечения назначают иммунокорректоры: левамизол по известной схеме (декарис, ВНР) по 100 мг в день в течение 21 дня до 10 ч утра после завтрака или тактивин по известной схеме по 100 мкг подкожно в течение 5 дней, затем один раз в 10 дней. Курсовая доза левамизола 2100 мг, курсовая доза тактивина 800 мкг. Интервалы между курсами не менее 4-5 мес от начала предыдущего курса. Во время курсов иммунокоррекции больные не получают химиотерапии, в дальнейшем химиогормональное лечение назначают по мере необходимости. После проведения иммунокоррекции через 4-5 мес от начала предыдущего курса у больных вновь определяют количество Е-РОК, "стабильных" Е-РОК, "активных" Е-РОК, B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами и рассчитывают индекс иммунокоррекции по приведенной формуле. Снижение B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами от исходного уровня до нормы и значения индекса иммунокоррекции от 10 и выше определяют иммунокоррекцию, как эффективную. Сохранение B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами выше нормы и значения индекса иммунокоррекции 1-9 в комплексе являются показанием для назначения повторных курсов иммунокоррекции. Повторные курсы назначают с интервалом не менее 4-5 мес от начала предыдущего курса, поддерживая снижение B-клеток с поверхностными иммуноглобулинами до нормы и значения индекса иммунокоррекции от 10 и выше. П р и м е р 1. Больной Д., 70 лет, находится на диспансерном наблюдении. Диагноз: хронический лимфолейкоз, начальная стадия, иммунологически B-клеточный вариант с преобладанием клеток, несущих поверхностные иммуноглобулины. На начало наблюдения: лейкоциты 10




Класс G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого