ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила, обладающие антихолинэстеразной активностью

Классы МПК:C07D487/08 мостиковые системы
A61P21/04 для миастении гравис
A61P25/28 для лечения нейродегенеративных заболеваний центральной нервной системы, например ноотропные агенты, агенты для усиления умственных способностей, для лечения болезни Альцгеймера или других форм слабоумия
A61P27/06 средства против глаукомы или миотические средства
A61P1/14 способствующие пищеварению, например кислоты, энзимы, стимуляторы аппетита, средства против диспепсии, тонизирующие средства, ветрогонные средства
A61P25/32 алкогольного злоупотребления
Автор(ы):, , , , , , ,
Патентообладатель(и):Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт органической и физической химии им. А.Е. Арбузова Казанского научного центра Российской академии наук (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2013-07-15
публикация патента:

Изобретение относится к новым макроциклическим алкиламмониевым производных 6-метилурацила формулы (1). Соединения обладают антихолинэстеразной активностью и могут найти применение для фармакологической коррекции синаптических дефектов, лежащих в основе болезни Альцгеймера, миастении Гравис и других форм патологической мышечной слабости. Соединения также могут найти применение при лечении глаукомы, атонии кишечника, алкоголизма, шизофрении, маниакально-депрессивных психозов, травматических повреждений мозга, расстройств сна и др. В формуле (1)

макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 (1)

X=NO2,Y=(CH2 )4(1a);X=CN,Y=(CH2)4(1b);X=NO 2,Y=C6H4(1c);X=CN,Y=C6 H4(1d).

2 н.п. ф-лы, 2 табл., 9 пр.

Изобретение относится к органической химии гетероциклических соединений, в частности к макроциклическим алкиламмониевым производных 6-метилурацила формулы (1), которые обладают свойством ингибировать активность холинэстераз и могут найти применение в медицине и ветеринарии.

макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903

где X=NO2, Y=(CH2 )4 (1a);

X=CN, Y=(CH2) 4 (1b);

X=NO2, Y=C6 H4 (1c);

X=CN, Y=C6H 4 (1d).

Ингибиторы холинэстераз широко используются в медицинской практике для фармакологической коррекции синаптических дефектов, лежащих в основе болезни Альцгеймера, миастении Гравис и других форм патологической мышечной слабости. Показана их эффективность и при лечении глаукомы, атонии кишечника, травматических повреждений мозга, алкоголизма, маниакально-депрессивных психозов, шизофрении, старческого слабоумия, аутизма, расстройств сна и др. Фармацевтическая промышленность выпускает множество антихолинэстеразных препаратов: Аминостигмин, Дезоксипеганин, Стефаглабрин, Дистигмин, Хинолитин, Оксазил, Пиридостигминабромид, Прозерин, Галантамин, Физостигмин. В зависимости от химической структуры и физико-химических свойств антихолинэстеразные препараты различаются между собой, например третичные амины (физостигмин, галантомин и др.) проникают через биологические мембраны, в том числе через гематоэнцефалический барьер, и оказывают выраженное влияние на ЦНС. Начиная с середины 90-х годов прошлого века ингибиторы ацетилхолинэстеразы как вещества, улучшающие когнитивные функции, начали применяться при лечении больных с легкой или умеренной степенью выраженности болезни Альцгеймера. Четвертичные аммониевые производные (прозерин, пиридостигмина бромид, оксазил и др.) трудно проникают через гематоэнцефалический барьер и используются, таким образом, для коррекции дефектов синаптической передачи в периферических синапсах (преимущественно при терапии миастении Гравис и других форм патологической мышечной слабости).

Недостатком большинства известных антихолинэстеразных препаратов, применяемых при терапии мышечной слабости, является отсутствие избирательности в отношении ферментов ацетилхолинэстеразы и бутирилхолнинэстеразы. Бутирилхолинэстераза преимущественно присутствует в крови и ее ингибирование не оказывает положительного эффекта при терапии дефектов синаптической передачи возбуждения ингибиторами холинэстераз. Поскольку целевой эффект оказывает ингибирование ацетилхолинэстеразы, то подавлять функцию бутирилхолинэстеразы в этом случае нет никакой необходимости. Однако применяемые на сегодняшний день при терапии миастенических синдромов ингибитора холинэстеразы (калимин и неостигмин) не избирательны в отношении этих двух ферментов.

Исследования, проведенные авторами, выявили новый класс ингибиторов холинэстераз - тетраалкиламмониевые производные 6-метилурацила, обладающие способностью высокоизбирательно блокировать ацетилхолинэстеразу млекопитающих [Доклады РАН. - 1998. - Т.362, № 1. С.68-70: Доклады РАН. - 2001. - Т.376, № 6. - С.818-822; Совр. проблемы токсикол. - 2004. - № 3. - С.25-33; Доклады РАН. - 2005. - Т.401, № 1. - С.120-123; Хим. фарм. ж. - 2005. - Т.39, № 5. - С.15-19; Совр. вопросы токсикол. - 2006. - № 2. - С.13-22].

Известно, что 6-метилурацил и его производные являются физиологически активными веществами и широко применяются в лечебной практике. Например, препараты Метилурацил и Пентоксил обладают анаболической активностью. Эти препараты ускоряют процессы клеточной регенерации; способствуют заживлению ран, стимулируют клеточные и гуморальные факторы иммунитета. У лекарственных средств, созданных на основе метилурацил и пентоксила, помимо способности стимулировать лейкопоэз и эритропоэз были выявлены и другие свойства - повышать фагоцитоз, резистентность к инфекции, поствакцинальный иммунитет, стимулировать репаративные процессы, оказывать противовоспалительное действие, вызывать анаболический и антикатаболический эффект, иммуностимулирующий эффект и др. Обнаружены также антитоксические и антиоксидантные, мембраностабилизирующие свойства.

Наиболее структурно близкими к заявляемым соединениям формулы (1) являются пиримидинофаны (макроциклические производные пиримидина) формулы (4) и (5), содержащие в своем составе 6-метилурациловые фрагменты и алкиламмониевые группировки.

макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903

Эти соединения проявляют антимикробную активность и обладают холинолитическими свойствами, способность же к ингибированию ацетилхолинэстеразы у них отсутствует [Современные проблемы токсикологии. - 2006. - N 2. - С.13-22; Eur. J. Med. Chem. - 2006. - Vol.41. - N 9. - P.1093-1101]. Среди известных из уровня производных 6-метилурацила, содержащих алкиламмониевые группировки, антихолинэстеразными свойствами обладают только соединения ациклического строения [Chemico-biological interactions. - 2008. - Vol.175. - Nos 1-3. - P.286-292].

Расширение ассортимента антихолинэстеразных средств на основе тетраалкиламмониевых производных 6-метилурацила является задачей изобретения.

Техническим результатом, на решение которого направлено изобретение, являются новые ингибиторы холинэстераз - макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила формулы (1):

макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903

где X=NO2, Y=(CH2 )4 (1a);

X=CN, Y=(CH2) 4 (1b);

X=NO2, Y=C6 H4 (1c);

X=CN, Y=C6H 4 (ld).

Следует отметить, что три заявляемых соединения (пиримидинофана) являются новыми, а именно 1(a), 1(b) и 1(d). Соединение (1c), где Х=NO2, Y=C6 H4 описано, однако не как ингибитор холинэстераз [Николаев А.Е. Синтез и особенности структуры пиримидинофанов, содержащих атомы азота или серы в соединительных мостиках. / Дисс. на соискание ученой степени канд. хим. наук. - 2008].

Заявляемые соединения получены из пиримидинофанов формулы (3), которые синтезированы циклизацией 1,3-бис(5-аминоэтилпентил-1)-6-метилурацила (2) 1,6-дибромгексаном или пара-дибромксилиленом согласно приведенной схеме. Соединение (2) и способ его получения описаны [Р.Х. Гиниятуллин, А.С. Михайлов, В.Э. Семенов и др. / Изв. АН. Сер. хим. - 2003. - Т.52. - № 7. - С.1511-1515]. Целевые соединения (1) получены взаимодействием пиримидинофанов (3) с орто-нитробензилбромидом или орто-цианбензилбромидом в ацетонитриле.

Схема - Синтез соединений (пиримидинофанов) формулы (1)

макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903

Пример 1. Синтез 7,14-Диаза-7,14-диэтил-1 2,14-диоксо-16-метил-1(3,1)-пиримидинациклононадекафана (3) Y=(CH2)4

К перемешиваемой при 50-55°C суспензии 2.50 г (18.1 ммоль) K2CO 3 в 100 мл CH3CN в течение 1 ч по каплям одновременно добавляют растворы 2.30 г (6.5 ммоль) соединения (2) в 25 мл CH3CN и 1.78 г (7.2 ммоль) 1,6-дибромгексана в 25 мл CH3CN. По окончании прикапывания реакционную массу перемешивают при температуре 50-55°C в течение 8 ч, после чего упаривают в вакууме и к остатку добавляют 100 мл CHCl 3. Образовавшийся осадок отфильтровывают, фильтрат концентрируют и хроматографируют через колонку с SiO2. Колонку промывают последовательно петролейным эфиром, этилацетатом, смесью этилацетат-диэтиламин (10:1). После упаривания последнего элюата получают 0.27 г (10%) пиримидинофана (3), где Y=(CH2)4 в виде масла.

Спектр ЯМР 1H (600 МГц) в CDCl 3, макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , м.д.: 1.00-1.02 (м., 6Н), 1.32-1.38 (м., 8Н), 1.44-1.52 (м., 8Н), 1.64-1.66 (м., 4H), 2.22 (с., 3H), 2.39-2.41 (м, 8H), 2.48-2.50 (м, 4H), 3.83 (т., 2H, J=7.3 Гц), 3.94 (т., 2H, J=7.0 Гц), 5.55 (с., 1H).

Масс-спектр (ЭУ, 70 эВ), m/z (Iотн (%)): 435 (10), 434 [M]+ (31), 419 [M-15]+ (25), 405 [M-29]+ (100), 140 (21), 99 (30);

ИК-спектр (масло), макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , см-1: 2932 с., 2858 сл., 2798 сл., 1701 с., 1662 о.с., 1467 с., 1431 с., 1399 сл., 1365 сл., 1207 сл., 1156 с., 1071 сл., 1018 сл., 815 сл., 768 сл.

Брутто-формула C25H46N4O2. Вычислено, %: C 69.08, H 10.67, N 12.89.

Найдено, %: C 69.00, H 10.75, N 12.85.

Найдено: m/z 434.3621 [M] +. C25H46N4O2 . Вычислено: M=434.36209.

Пример 2. Синтез 7,14-Диазоний-7,14-диэтил-7,14-ди-орто-нитробензил-1 2,14-диоксо-16-метил-1(3,1)-пиримидинациклононадекафандибромида (1а)

К раствору 0.15 г (0.70 ммоль) орто-нитробензилбромида в 40 мл CH3CN добавляют 0.15 г (0.35 ммоль) пиримидинофана (3), где Y=(CH2)4 и перемешивают при температуре 50-60°C в течение 10 ч. Растворитель упаривают. Остаток тщательно растирают в безводном диэтиловом эфире, эфир декантируют. Процедуру повторяют несколько раз до получения кристаллического вещества, которое далее сушат в вакууме (0.1 мм рт.ст.).

Получено 0.27 г (90%) целевого соединения (1a), которое представляет собой желтоватое кристаллическое вещество, т.пл. 120°C.

Спектр ЯМР 1H (400 МГц) в CDCl3 , макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , м.д.: 1.18-1.22 (м., 6H), 1.36-1.85 (м., 20H), 2.25 (с., 3H), 3.27-3.50 (м., 12H), 3.78-3.80 (м., 2H), 3.95-3.97 (м., 2H), 4.84 (уш. с., 4H), 5.58 (с., 1H), 7.49-8.05 (м., 8H);

ИК-спектр (KBr), макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , см-1: 2945 с., 2864 сл., 1694 с., 1655 о.с., 1528 о.сл., 1470 с., 1432 с., 1350 с., 1204 сл., 1144 сл., 1078 сл., 1037 сл., 923 сл., 858 сл., 768 сл., 726 с.

Брутто-формула C39H58Br2N 6O6. Вычислено, %: C 54.04, H 6.75, N 9.70, Br 18.44. Найдено, %: C 54.10, H 6.82, N 9.81, Br 18.54.

Масс-спектр MALDI-TOF: вычислено для C39H58 Br2N6O6 [M-2Br]+, [M-2Br-C7H6NO2]+ 706.4, 570.4, соответственно. Найдено: 706.6, 570.4.

Пример 3. Синтез 7,14-Диазоний-7,14-диэтил-7,14-ди-орто-цианбензил-1 2,14-диоксо-16-метил-1(3,1)-пиримидинациклононадекафандибромида (1b) проводят аналогично примеру 2 из 1.12 г (0.28 ммоль) пиримидинофана (3), где Y=(CH2)4 и 0.14 г (0.71 ммоль) орто-цианбензилбромида. Получено 0.22 г (88%) целевого соединения (1b), которое представляет собой желтоватое кристаллическое вещество, т.пл. 110°C.

Спектр ЯМР 1H (400 МГц) в CDCl3, макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , м.д.: 1.17-1.20 (м., 6H), 1.44-1.90 (м., 20H), 2.26 (с., 3H), 3.38-3.68 (м, 12H), 3.78-3.80 (м., 2H), 3.95-3.97 (м., 2H), 4.64 (уш. с., 4H), 5.58 (с., 1H), 7.42-7.82 (м., 8H);

ИК-спектр (KBr), макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , см-1: 2946 с., 2862 сл., 2226 ср., 1694 с., 1655 о.с., 1467 с., 1432 с., 1401 сл., 1213 сл., 1161 сл., 1034 сл., 770 с.

Брутто-формула C41H 58Br2N6O2. Вычислено, %: C 59.56, H 7.07, N 10.17, Br 19.33. Найдено, %: C 59.70, H 7.12, N 10.08, Br 19.40.

Масс-спектр MALDI-TOF: вычислено для C41H58Br2N 6O2 [M-Br]+, [M-2Br-C8 H6N]+ 746.9, 550.4, соответственно. Найдено: 746.6, 550.3.

Пример 4. Синтез 7,11-Диаза-7,11-диэтил-1 2,14-диоксо-16-метил-1(3,1)-пиримидина-9(1,4)-бензинациклогексадекафана (3) Y=C6H4

К раствору 2.07 г (5.88 ммоль) соединения (2) в 100 мл CH3CN добавляют 1.62 г (11.76 ммоль) K2CO3 и 1.67 г (6.33 ммоль) пара-дибромксилилена. Реакционную массу перемешивают 10 ч при температуре 70°C. Реакционную смесь охлаждают, растворитель отгоняют и к остатку добавляют 100 мл CHCl3. Образовавшийся осадок отфильтровывают, фильтрат концентрируют и хроматографируют через колонку с Al2O3. Колонку промывают последовательно диэтиловым эфиром и смесью диэтиловый эфир-этилацетат-диэтиламин (10:10:1). После упаривания последнего элюата получают 0.60 г (22%) пиримидинофана (3), где Y=C6H4 в виде масла.

Спектр ЯМР 1H (600 МГц) в CDCl3, макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , м.д.: 1.06-1.10 (м., 6H), 1.22-1.27 (м., 4H), 1.38-1.41 (м., 4H), 1.48-1.55 (м., 4H), 2.20 (с., 3H), 2.25-2.28 (м, 4H), 2.56-2.59 (м, 4H), 3.52 (с., 2H), 3.54 (с., 2H), 3.75 (т., 2Н, J=7.3 Гц), 3.89 (т., 2Н, J=6.8 Гц), 5.53 (с., 1Н), 7.22-7.26 (м., 4Н);

Масс-спектр (ЭУ, 70эВ), m/z (Iотн (%)): 455 [M+1]+ (8), 454 [M]+ (36), 439 [M-15]+ (25), 426 (45), 425 [M-29]+ (100), 382 (13), 349 (27), 162 (16), 148 (18), 145 (40), 132 (14), 112 (14), 109 (20), 105 (34), 104 (87);

ИК-спектр (масло), макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , см-1: 2964 сл., 2932 с., 2859 сл., 2798 сл., 1702 с., 1662 о.с., 1467 с., 1431 с., 1399 сл., 1365 сл., 1207 сл., 1156 с., 1071 сл., 1019 сл., 849 сл., 815 сл., 765 сл. Найдено, %: C 71.47, H 9.22, N 12.21.

Брутто-формула C 27H42N4O2. Вычислено, %: C 71.33, H 9.31, N 12.32.

Найдено: m/z 454.3307 [M]+. C27H42N4O 2. Вычислено: M=454.33078.

Пример 5. Синтез 7,11-Диазоний-7,11-диэтил-7,11-ди-орто-нитро-бензил-12 ,14-диоксо-16-метил-1(3,1)-пиримидина-9(1,4)-бензинацикло-гексадекафандибромида (1c) проводят аналогично примеру 2 из 0.40 г (0.88 ммоль) пиримидинофана (3), где Y=C6H4 и 0.42 г (1.94 ммоль) орто-нитробензилбромида в 60 мл CH3CN.

Получено 0.57 г (74%) целевого соединения (1c), которое представляет собой желтоватое кристаллическое вещество, т.пл. 250-251°C.

Спектр ЯМР 1H (600 МГц) в CDCN3, макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , м.д.: 1.14-1.11 (м, 6H), 1.20-1.80 (м, 12H), 2.21 (с, 3H), 2.94-3.21 (м., 8H), 3.70-3.90 (м., 4H), 4.44-4.86 (м., 8H), 5.48 (с, 1H), 7.56-7.78 (м., 8H).

Брутто-формула C41H54Br2N6O 6. Вычислено, %: C 55.53, H 6.14, Br 18.02, N 9.48. Найдено, %: C 55.45, H 6.06, Br 18.11, N 9.46.

Масс-спектр MALDI-TOF: вычислено для C41H54Br2 N6O6 [M-Br]+, [M-2Br-C7 H6NO2]+ 805.3, 590.4, соответственно. Найдено: 805.2, 590.3.

Пример 6. Синтез 7,11-Диазоний-7,11-диэтил-7,11-ди-орто-циан-бензил-1 2,14-диоксо-16-метил-1(3,1)-пиримидина-9(1,4)-бензинацикло-гексадекафандибромида (1d) проводят аналогично примеру 2 из 0.28 г (0.62 ммоль) пиримидинофана (3), где Y=C6H4 и 0.25 г (1.28 ммоль) орто-цианбензилбромида. Получено 0.36 г (70%) целевого соединения (1d), которое представляет собой желтоватое кристаллическое вещество, т.пл. 143-145°C.

Спектр ЯМР 1H (600 МГц) в ДМСО-d6 , макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 , м.д.: 1.11-1.141 (м, 6Н), 1.24-1.75 (м, 12H), 2.28 (с, 3H), 3.00-3.30 (м., 8Н), 3.70-3.90 (м., 4H), 4.60-4.96 (м., 8H), 5.58 с (с., 1H), 7.65-8.05 (м., 8H).

Брутто-формула C43H54Br2N6O 2. Вычислено, %: C 60.99, H 6.43, Br 18.87, N 9.93. Найдено, %: C 60.90, H 6.46, Br 18.93, N 10.00.

Масс-спектр MALDI-TOF: вычислено для C43H54Br2 N6O2 [M-Br]+, [M-2Br-C8 H6N]+ 765.3, 570.4, соответственно. Найдено: 765.3, 570.2.

Заявляемые алкиламмониевые производные 6-метилурацила формулы (1) представляют собой желтоватые кристаллические вещества, растворимые в воде, диметилсульфоксиде, ацетонитриле, хлороформе.

Биологическая активность

Пример 7. Определение антихолинэстеразной активности пиримидинофанов формулы (1)

Регистрацию ферментативной реакции осуществляли согласно методу Элмана [Ellman G.L., Courtney K.D., Andres V. Jr., Feather-Stone R.M. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity. Biochem Pharmacol 1961, № 7, C.88-95]. Анализ зависимости активности холинэстеразы от концентрации ингибитора проводили уравнением Хилла (Hill) с вычислением среднеэффективной концентрации - IC50 . Ацетилхолинэстераза и бутирилхолинэстераза человека были куплены в Sigma-Aldrich. Результаты ингибиторной активности заявляемых соединений приведены в таблице 1, которые свидетельствуют о том, что все соединения проявляли высокую антихолинэстеразную активность, показывая большую эффективность в отношении ацетилхолинэстеразы (АХЭ) по сравнению с бутирилхолинэстеразой (БуХЭ). Соединение 1(c) является лидером в исследуемой группе алкиламмониевых производных 6-метилурацила формулы (1), т.к. его ингибирующая АХЭ концентрация (IC50) на порядок ниже, чем у соединений 1(a), 1(b) или 1(d).

Таблица 1
Антихолинэстеразная активность и токсичность соединений формулы (1)
Соединение (молекулярная масса)АХЭ эритроцитов человека IC 50, [M]БуХЭ сыворотки крови человека, IC50, [M]ЛД50 мг/кг (мыши, в/б)
1(a) (М.м. 866.0) 5.9×10-8 5.0×10-66.50 (4.87÷7.85)
1(b) (М.м. 826.0) 9.8×10-86.0×10 -67.00 (6.104÷8.69)
1(с) (М.м. 886,0) 7.0×10-91.2×10 -63.74 (2.924÷4.47)
1(d) (М.м. 846.7) 2.8×10-83.5×10 -72.81 (2.394÷3.30)

Пример 8. Изучение общетоксического действия заявляемых соединений проводили согласно «Методическим указаниям по изучению общетоксического действия фармакологических веществ» (М., Медицина. 2005. Под ред. Р.У. Хабриева) на беспородных белых мышах обоего пола массой 19,0±2,0 г, содержавшихся на стандартном рационе питания в условиях природного режима освещения помещения при комнатной температуре. Данные токсикологической оценки соединений приведены в таблице 1. Для сравнения, ЛД50 Пиридостигмина бромида (антихолинэстеразное средство) для мышей при пероральном применении составляет 12-15 мг/кг, а при внутрибрюшинном введении составляет 3 мг/кг массы тела. [http://www.mosmed.ru/medic/preparats/astamedica/kalimin/kaliminl1.htm]

Таким образом, заявляемые алкиламмониевые производные 6-метилурацила (1) обладает высокой антихолинэстеразной активностью при токсичности, соизмеримой с Пиридостигмином.

Пример 9. Терапия симптомов мышечной слабости в условиях экспериментальной аутоиммунной модели миастении Гравис

Соединение 1(с), проявляющее наибольшую антихолинэстеразную активность in vitro, было протестировано нами in vivo на способность купировать признаки мышечной слабости у животных с экспериментальной миастенией Гравис. Экспериментальную аутоиммунную модель миастении Гравис (ЭАМГ) создавали по методике, описанной в статье [Baggi F, Annoni A, Ubiali F, Milani M, Longhi R, Scaioli W, Cornelio F, Mantegazza R, Antozzi C. Breakdown of tolerance to a self-peptide of acetylcholine receptor alpha-subunit induces experimental myasthenia gravis in rats. J Immunol. 2004 Feb 15; 172(4):2697-703].

Развитие мышечной слабости диагностировалось по наличию выраженного декремента амплитуды интегрального потенциала действия (ПД) мышцы задних конечностей крысы при высокочастотной стимуляции седалищного нерва (40 Гц, 200 стимулов). Стимуляцию седалищного нерва проводили игольчатыми электродами. Интегральные ПД мышц регистрировали накожными электродами с поверхности задних конечностей крыс.

Таблица 2
Декремент амплитуды мышечного потенциала действия у здоровых животных и животных с ЭАМГ
макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903 Отношение амплитуд первого ПД к 200-му ПД (декремент), %
здоровые животныеживотные с миастенией Гравис
Вода 95,02±1,0967,31±2,72
Соединение 1(c) 0.1 мг/кг -75,05±1,83
Соединение 1(c) 0.3 мг/кг- 95,42±0,97
Пиридостигмин 0.1 мг/кг-91,27±1,90

После диагностики ЭАМГ трем группам крыс внутрибрюшинно вводился или водный раствор соединения 1(с) , или пиридостигмина бромид (Sigma-Aldrich) - действующее вещество препаратов «Калимин» и «Местинон», или эквивалентный объем только воды для инъекций (ОАО Мосхимфармпрепараты им. Семашко).

В опытах на животных с экспериментальной миастенией Гравис была подобрана доза соединения 1(c), восстанавливающая значение декремента амплитуды интегрального мышечного ПД до показателей здоровых животных. Эта доза составляла 0.3 мг/кг при внутрибрюшинном введении. Аналогичный эффект достигался инъекцией Пиридостигмина в дозе 0.1 мг/кг (таблица 2). Этот факт делает соединение 1(c) перспективным кандидатом в качестве средства лечения синдромов патологической мышечной слабости.

Предложены новые эффективные ингибиторы фермента ацетилхолинэстеразы, которые могут найти применение в ветеринарии и медицине, например для лечения миастении Гравис и других форм патологической мышечной слабости.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила общей формулы:

макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903

где X=NO2, Y=(CH2) 4;

X=CN, Y=(CH2)4;

X=CN, Y=C6H4.

2. Макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила общей формулы:

макроциклические алкиламмониевые производные 6-метилурацила,   обладающие антихолинэстеразной активностью, патент № 2534903

где Х=NO2, Y=(CH2) 4;

X=CN, Y=(CH2)4;

X=NO2, Y=C6H4;

X=CN, Y=C6H4,

обладающие антихолинэстеразной активностью.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2534903

patent-2534903.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс C07D487/08 мостиковые системы

Патенты РФ в классе C07D487/08:
поликатионное соединение "тривирон (triviron)" и способ его получения -  патент 2527256 (27.08.2014)
производное бензола или тиофена и его применение в качестве ингибитора vap-1 -  патент 2526256 (20.08.2014)
замещенные аминоинданы и их аналоги, и их применение в фармацевтике -  патент 2522586 (20.07.2014)
способ получения 5-метокси-4-азатрицикло[4.3.1.1 3,8]ундец-4-ена -  патент 2515500 (10.05.2014)
пролекарства нестероидных противовоспалительных средств (nsaia) c очень высокой скоростью проникновения через кожу и мембраны и новые медицинские применения указанных пролекарств -  патент 2509076 (10.03.2014)
макроциклические ингибиторы серинпротеазы -  патент 2490272 (20.08.2013)
алициклические производные n, n'-замещенных 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонанов, обладающие фармакологической активностью, и лекарственные средства на их основе -  патент 2489436 (10.08.2013)
средство, проявляющее противирусную активность в отношении днк-вирусов -  патент 2487876 (20.07.2013)
макроциклические индолы в качестве ингибиторов вируса гепатита с -  патент 2486190 (27.06.2013)
диметил 4-ацил-1-гидрокси-3-метил-7-оксо-6-фенил-2,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-5,8-дикарбоксилаты и способ их получения -  патент 2478638 (10.04.2013)

Класс A61P21/04 для миастении гравис

Класс A61P25/28 для лечения нейродегенеративных заболеваний центральной нервной системы, например ноотропные агенты, агенты для усиления умственных способностей, для лечения болезни Альцгеймера или других форм слабоумия

Патенты РФ в классе A61P25/28:
внутрижелудочковая доставка ферментов при лизосомных болезнях накопления -  патент 2529830 (27.09.2014)
улучшение памяти у пациентов с оценкой 24-26 баллов по краткой шкале оценки психического статуса -  патент 2529815 (27.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
6-замещенные изохинолины и изохинолиноны полезные в качестве ингибиторов rho-киназы -  патент 2528229 (10.09.2014)
применение программы противоположной дифференцировки клеток (ппдк) для лечения дегенерировавших органов в патологическом состоянии -  патент 2528084 (10.09.2014)
сублингвальная форма 6-метил-2-этил-3-гидроксипиридина и ее применение в качестве средства, обладающего стимулирующей, анорексигенной, антидепрессивной, анксиолитической, противогипоксической, антиамнестической (ноотропной) и антиалкогольной активностью -  патент 2527342 (27.08.2014)
четырехзамещенные бензолы -  патент 2527177 (27.08.2014)
способ лечения болезни альцгеймера -  патент 2526155 (20.08.2014)
способ повышения фармакологической активности действующего вещества лекарственного средства и фармацевтическая композиция -  патент 2526153 (20.08.2014)
терапевтические агенты 713 -  патент 2526055 (20.08.2014)

Класс A61P27/06 средства против глаукомы или миотические средства

Патенты РФ в классе A61P27/06:
6-замещенные изохинолины и изохинолиноны полезные в качестве ингибиторов rho-киназы -  патент 2528229 (10.09.2014)
офтальмологическое фармацевтические композиции для неоангиогенных патологий глаза -  патент 2519739 (20.06.2014)
композиция для комплексного лечения больных с первичной открытоугольной глаукомой и заболеваниями глазной поверхности -  патент 2517033 (27.05.2014)
способ лечения больных с первичной открытоугольной глаукомой -  патент 2506062 (10.02.2014)
фармацевтические композиции, обладающие желаемой биодоступностью -  патент 2503453 (10.01.2014)
терапевтические соединения -  патент 2500674 (10.12.2013)
способ лечения заболеваний зрительного нерва и сетчатки -  патент 2500370 (10.12.2013)
новое производное 1,2,3,4-тетрагидрохиноксалина, содержащее в качестве заместителя фенильную группу, имеющую структуру эфира сульфокислоты или амида сульфокислоты, и обладающее связывающей активностью в отношении рецептора глюкокортикоидов -  патент 2498980 (20.11.2013)
способ лечения открытоугольной глаукомы -  патент 2494707 (10.10.2013)
гетероциклические производные индана, используемые для снятия боли и лечения состояний, подобных глаукоме -  патент 2491278 (27.08.2013)

Класс A61P1/14 способствующие пищеварению, например кислоты, энзимы, стимуляторы аппетита, средства против диспепсии, тонизирующие средства, ветрогонные средства

Патенты РФ в классе A61P1/14:
способ лечения больных с синдромом диспепсии в сочетании с избыточной массой тела -  патент 2528641 (20.09.2014)
препарат для стимуляции обменных процессов, профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний телят в ранний постнатальный период -  патент 2521369 (27.06.2014)
способ лечения недоношенных новорожденных детей с низкой массой тела -  патент 2514346 (27.04.2014)
кристаллические формы соединения 3-карбоксипропил-аминотетралина -  патент 2512390 (10.04.2014)
препарат для профилактики диарей у новорожденных телят -  патент 2504386 (20.01.2014)
способ уменьшения урчания в животе путем введения бактерий рода bifidobacterium -  патент 2492869 (20.09.2013)
композиция на основе пробиотических бактерий совместно с пребиотиком и ее применение в предупреждении и/или лечении респираторных патологий и/или инфекций и для улучшения функций кишечника -  патент 2491081 (27.08.2013)
способ лечения вторичной лактазной недостаточности -  патент 2477633 (20.03.2013)
применение варианта сплайсинга грелина для лечения кахексии, и/или анорексии, и/или анорексии-кахексии, и/или нарушения питания, и/или липодистрофии, и/или мышечного истощения, и/или стимуляции аппетита -  патент 2470940 (27.12.2012)
пробиотики в пред- и/или послеоперационный период -  патент 2470652 (27.12.2012)

Класс A61P25/32 алкогольного злоупотребления

Патенты РФ в классе A61P25/32:
сублингвальная форма 6-метил-2-этил-3-гидроксипиридина и ее применение в качестве средства, обладающего стимулирующей, анорексигенной, антидепрессивной, анксиолитической, противогипоксической, антиамнестической (ноотропной) и антиалкогольной активностью -  патент 2527342 (27.08.2014)
средство для купирования алкогольного абстинентного синдрома -  патент 2521226 (27.06.2014)
фармацевтическая композиция, содержащая физиологически активные гептапептиды, обладающие противосудорожным, анксиолитическим, центральным противовоспалительным и анальгетическим, а также антиалкогольным действием -  патент 2506269 (10.02.2014)
гемигидрат основания налтрексона, способ его получения и способ изготовления микросфер -  патент 2505542 (27.01.2014)
имплант на основе дисульфирама для лечения пациентов, зависимых от алкоголя или опиатов -  патент 2495679 (20.10.2013)
пролекарства налмефена -  патент 2495042 (10.10.2013)
диэфирные пролекарства налмефена -  патент 2495041 (10.10.2013)
средство для лечения алкогольных токсикозов -  патент 2493867 (27.09.2013)
композиции и способы профилактики и лечения зависимостей -  патент 2492858 (20.09.2013)
имплантируемое лекарственное средство на основе налтрексона для лечения пациентов, зависимых от алкоголя или опиатов -  патент 2476209 (27.02.2013)


Наверх