6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие противоопухолевую активность

Классы МПК:C07D487/04 орто-конденсированные системы
A61K31/395  с атомами азота в качестве гетероатомов, например гуанетидин, рифамицины
A61P35/00 Противоопухолевые средства
Автор(ы):, , , , , , ,
Патентообладатель(и):Автономная Некоммерческая Организация "Научно-исследовательский центр биотехнологии антибиотиков и других биологически активных веществ "БИОАН" (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2013-02-19
публикация патента:

Описываются новые производные имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразинов общей формулы

6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258

где: Het=4-метилимидазол-1-ил, R=Н или Het=3,5-диметилпиразол-1-ил, R=пропилтио, и противоопухолевые агенты на их основе для лечения онкологических больных. 2 н.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.

Изобретение относится к фармацевтической химии и касается производных имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразинов, содержащих в тетразиновом цикле 4-метилимидазолильный или 3,5-диметилпиразолильный заместитель и водород и пропилтиогруппу в азольном фрагменте. Указанные соединения могут быть использованы в качестве противоопухолевых агентов в первую очередь для лечения онкологических больных.

Соединения, раскрываемые в настоящем изобретении, являются новыми, не описанными ранее, производными азоло[1,2,4,5]тетразинов. Способ получения представленных соединений описан [Изв. АН. Сер. хим., 2011. 961-967]. Противоопухолевая активность азоло[1,2,4,5]тетразинов неизвестна и неописана.

Аналогами вышеуказанных веществ по строению и действию являются темозоломид формулы А [Патент US 0286088 от 10.11.2010], 3,6-дизамещенный 1.2,4,5-тстразин формулы В [Патент CN 102267983А от 07.12.2011], использующиеся для лечения онкологических заболеваний, и 3-(имидазол-1-ил)имидазо[1,2-b][1.2,4.5]тетразин формулы С, ингибитор протеинкиназ Mycobacterium tuberculosis, который можно использовать для лечения больных туберкулезом [Патент РФ 2462466 С1 от 27.09.2012 J.

Заявлено новое соединение

1. Имидазо[1.2-6][1,2,4,5]тетразины общей формулы I:

6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258

где: Het=4-метилимидазол-1-ил, R=Н;

Het=3,5-диметилпиразол-1-ил. R=пропилтио

6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258

Новые соединения, раскрываемые в настоящем изобретении, отличаются от известного и близкого по структуре соединения C тем, что заместитель имидазол-1-ил в 3-м положении азолотетразина заменен на 4-метилимидазол-1-ил- или 3,5-диметилпиразол-1-ил, а в положении 6 заместителями являются атом водорода или пропилтио.

Вещества, представленные в настоящем изобретении, могут быть получены с использованием известных методов синтеза 3-азолил-6-(алкилтио)имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразинов [Изв. АН. Сер. хим., 2011, 5]. Структуры представленных в изобретении новых соединений подтверждаются данными спектроскопии ЯМР 1Н (спектрометр Avance DRX-400 (Bruker) с рабочей частотой 400 МГц) и элементного анализа (автоматический анализатор CHN РЕ 2400 сер. II (Perkin Elmer)).

Примеры конкретного выполнения

Пример 1

3-(4-Метилимидазол-1-ил)имидазо[1,2-А][1,2,4,5]тетразин

6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258

В колбу с 10 мл ледяной уксусной кислоты помещают 265 мг (1 ммоль) 3-(4-метилимидазол-1-ил)-6-(2,2-диметоксиэтиламино)-1,2,4,5-тетразина и реакционный раствор кипятят в течение 4 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток перекристаллизовывают из ацетонитрила. Выход 135 мг (66%). Т.пл. 211-212°C.

Найдено (%): C 47.81; H 3.39; N 48.77. C8H7N 7. Вычислено (%): C 47.76, Н 3.51, N 48.73. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6, 6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 , м.д.): 7.23 (с, 3H, CH3 в 4-метилимидазол-1-иле); 8.78, 7.74 (оба с, по 1 H, H(2) и H(5) в 4-метилимидазол-1-иле); 8.64 (м, 2 Н, в имидазолильном цикле).

Пример 2

3-(3,5-Диметилпиразол-1-ил)-6-(пропилтио)имидазо [1,2-b] [1,2,4,5] тетразин

6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258

К раствору 215 мг (1.0 ммоль) 3-(3,5-диметилпиразол-1-ил)имидазо[1,2-6][1,2,4,5]тетразина в 7 мл ацетонитрила добавляют 91.2 мг (1.2 ммоль) пропилмеркаптана и 101 мг (1 ммоль) триэтиламина. Перемешивают 4 ч при комнатной температуре. Растворитель упаривают, вещество экстрагируют бензолом, остаток после испарения бензола перекристаллизовывают из гексана. Выход 205 мг (71%). Т.пл. 95-97°C. Найдено (%): C 49.87; H 5.28; N 34.09. C12H15N7S. Вычислено (%): С 49.81; Н 5.23; N 33.88. Спектр ЯМР 1 Н (ДМСО-d6, 6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 , м.д.): 2.40, 2.71 (оба с, по 3 Н, 2 СН3 в 3,5-диметилпиразол-1-иле); 3.11 (т, 2 Н, -CH2 CH2CH3, J=7.3 Гц); 1.75-1.66 (м, 2 Н, -CH 2CH2CH3; 1.06 (т, 3 Н, -CH 2CH2CH3, J=7.3 Гц); 6.17 (с, 1 Н, Н(4) в 3,5-диметилпиразол-1-иле); 8.39 (с, 1 H, CH в имидазолильном цикле).

Пример 3. Противоопухолевая активность

В экспериментах использовали линии клеток НСТ116 (аденокарцинома толстой кишки человека) и лейкоза К562, полученные из международного банка American Туре Culture Collection, США. Реагенты приобретали в компании ПанЭко, кроме отдельно оговоренных случаев. Клетки культивировали в среде, модифицированной Дульбекко среде. Игла с добавлением 5% эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ L-глутамина, 100 ЕД/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37°C, 5% CO2 в увлажненной атмосфере. В экспериментах использовали культуру в логарифмической фазе роста.

Клетки рассевали на 96-луночные планшеты (Costar, США) в концентрации 5-10×103 клеток в 190 мкл культуральной среды. В лунки вносили исследуемые соединения до конечных концентраций от 100 нМ до 50 мкМ или соответствующие количества растворителя (вода+диметилсульфоксид; контроль). Объем вносимых веществ не превышал 5% объема среды в лунках. Каждую концентрацию препарата изучали в 3 повторностях. Культуры инкубировали при 37°C в атмосфере с 5% содержанием CO2 в течение 72 часов. По окончании инкубации в лунки вносили 20 мкл водного раствора МТТ (Sigma, США), и планшеты помещали в CO2-инкубатор на 2 часа. О жизнеспособности клеток судили по цветной реакции, развивающейся при восстановлении МТТ в формазан дегидрогеназами митохондрий (МТТ-тест). Окраску регистрировали на спектрофотометре при длине волны возбуждения 540 нм. Оптическую плотность в лунках, где клетки инкубировались только с растворителем (контроль), принимали за 100%. Показатели оптической плотности в лунках с каждой концентрацией испытуемых препаратов усредняли и вычисляли процент выживших клеток при той или иной концентрации исследуемого вещества.

Результаты измерений приведены в таблице 1.

Таблица 1
Цитотоксичность соединений для линий опухолевых клеток человека
6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 IC50, мкМ
Соединение НСТ116К562
16-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 2,2±0,12 1,2±0,2
2 6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 1,8±0,1 2,0±0,3
Аналог А 6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258 5,8±0,5 6,2±0,4

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины общей формулы I:

6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие   противоопухолевую активность, патент № 2527258

где: Het=4-метилимидазол-1-ил, R=Н или

Het=3,5-диметилпиразол-1-ил, R=пропилтио.

2. Противоопухолевые агенты, представляющие собой соединения формулы I, где Het=4-метилимидазол-1-ил, R=Н или Het=3,5-диметилпиразол-1-ил, R=пропилтио.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2527258

patent-2527258.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс C07D487/04 орто-конденсированные системы

Патенты РФ в классе C07D487/04:
5-метил-6-нитро-7-оксо-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-альфа]пиримидинид l-аргининия моногидрат -  патент 2529487 (27.09.2014)
хиназолиноны как ингибиторы пролилгидроксилазы -  патент 2528412 (20.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
гетероциклические соединения и способы применения -  патент 2525116 (10.08.2014)
соединения азаазулена -  патент 2524202 (27.07.2014)
замещенные пиразоло[1,5-a]пиримидиновые соединения как ингибиторы трк киназы -  патент 2523544 (20.07.2014)
соли производных тетерагидро-имидазо[1,5-a]пиразина, способы их получения и их медицинское применение -  патент 2523543 (20.07.2014)
замещенные аминоинданы и их аналоги, и их применение в фармацевтике -  патент 2522586 (20.07.2014)
способы и композиции для стимулирования нейрогенеза и ингибирования дегенерации нейронов с использованием изотиазолопиримидинонов -  патент 2521333 (27.06.2014)
кристаллические соли ситаглиптина -  патент 2519717 (20.06.2014)

Класс A61K31/395  с атомами азота в качестве гетероатомов, например гуанетидин, рифамицины

Патенты РФ в классе A61K31/395:
способ лечения инфекционных заболеваний, вызванных вирусом гриппа с типом поверхностого антигена н1n1 и лекарственное средство для лечения инфекционных заболеваний, вызванных вирусом гриппа с типом поверхностного антигена н1n1 -  патент 2527688 (10.09.2014)
способ послеоперационной профилактики несостоятельности толсто-толстокишечного анастомоза -  патент 2523822 (27.07.2014)
способ получения композиции рифабутина с повышенной биодоступностью, фармацевтическая композиция и способ лечения микобактериозов -  патент 2520603 (27.06.2014)
производные жирных кислот для перорального введения, обеспечивающие высокие вкусовые качества -  патент 2520070 (20.06.2014)
способы лечения заболеваний кишечника -  патент 2519649 (20.06.2014)
селективные противотуберкулезные агенты, представляющие собой 3-аминозамещенные 6-(3,5-диметилпиразол-1-ил)-1,2,4,5-тетразины -  патент 2519218 (10.06.2014)
противоопухолевый агент, набор и способ лечения рака -  патент 2519199 (10.06.2014)
наружное средство для лечения при ранах, загрязненных микрофлорой -  патент 2512824 (10.04.2014)
2,6-диметиланилид n-циклогексилпирролидин-2-карбоновой кислоты гидрохлорид, проявляющий активность при поверхностной, инфильтрационной и проводниковой анестезии -  патент 2504538 (20.01.2014)
алициклические производные n, n'-замещенных 3,7-диазабицикло[3.3.1]нонанов, обладающие фармакологической активностью, и лекарственные средства на их основе -  патент 2489436 (10.08.2013)

Класс A61P35/00 Противоопухолевые средства

Патенты РФ в классе A61P35/00:
способ лечения рака толстой кишки -  патент 2529831 (27.09.2014)
способ оценки эффекта электромагнитных волн миллиметрового диапазона (квч) в эксперименте -  патент 2529694 (27.09.2014)
новые (поли)аминоалкиламиноалкиламидные, алкил-мочевинные или алкил-сульфонамидные производные эпиподофиллотоксина, способ их получения и их применение в терапии в качестве противораковых средств -  патент 2529676 (27.09.2014)
производные 1, 2-дигидроциклобутендиона в качестве ингибиторов фосфорибозилтрансферазы никотинамида -  патент 2529468 (27.09.2014)
фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа -  патент 2529373 (27.09.2014)
модульный молекулярный конъюгат для направленной доставки генетических конструкций и способ его получения -  патент 2529034 (27.09.2014)
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
лечение опухолей с помощью антитела к vegf -  патент 2528884 (20.09.2014)
способ лечения местнораспространенного неоперабельного рака поджелудочной железы -  патент 2528881 (20.09.2014)
новые бензолсульфонамидные соединения, способ их получения и применение в терапии и косметике -  патент 2528826 (20.09.2014)


Наверх