комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка, ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса, ее применение и способ производства

Классы МПК:A61K39/05 Corynebacterium; Propionibacterium
A61K39/08 Clostridium, например Clostridium столбняка
A61K39/10 Brucella; Bordetella, например коклюша
A61K39/102 Pasteurella;Haemophilus
A61K39/13 поливирус
A61K39/29 вирус гепатита
Автор(ы):, ,
Патентообладатель(и):Панацеа Биотек Лтд. (IN)
Приоритеты:
подача заявки:
2009-10-23
публикация патента:

Представленная группа изобретений касается комбинированной вакцины, ее применения и способа получения. Охарактеризованная вакцина включает смесь антигенов для защиты от таких заболеваний, как дифтерия (D), столбняк (Т), ацеллюлярный коклюш (аР) и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae (Hib b) и полиовирусами (IPV). Ангитен Hib b в охарактеризованной вакцине конъюгирован с белком-носителем, выбранным из группы, включающей анатоксин столбняка, анатоксин дифтерии, CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides, или любым их эквивалентом, где IPV антигены представляют собой Salk штаммы, выбранные из группы, включающей Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3, или Sabin штаммы, выбранные из группы Sabin 1 или 2, и где аР включает, по меньшей мере, один или более антигенов из группы, включающей анатоксин коклюша (РТ), филаментный гемагглютинин (FHA), пертактин (Р69 или PRN) и фимбриальные белки (FIM 1, 2 и 3). Все компоненты вакцины находятся в жидком состоянии и являются стабильными, а Hib b присутствует в количестве 10 мкг на 0,5 мл вакцины. Представленные изобретения обеспечивают защиту от различных инфекций. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 3 табл., 3 пр.

Формула изобретения

1. Комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии (D), столбняка (Т), ацеллюлярного коклюша (аР), Haemophilus influenzae (Hib) и полиовируса (IPV), где каждый из антигенов присутствует в количестве в вакцине так, чтобы обеспечить защитный иммунный ответ против указанного антигена, где уровень адсорбции Hib на любом адъюванте является меньше чем 15% и Hib конъюгирован с белком-носителем, выбранным из группы, включающей анатоксин столбняка, анатоксин дифтерии, CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides или любые их эквиваленты, или любым другим известным носителем, и где дополнительно IPV антигены представляют собой Salk штаммы, выбранные из группы, включающей Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3, или Sabin штаммы, выбранные из группы Sabin 1 или 2, и где аР включает, по меньшей мере, один или более антигенов из группы, включающей анатоксин коклюша (РТ), филаментный гемагглютинин (FHA), пертактин (Р69 или PRN) и фимбриальные белки (FIM 1, 2 и 3), где все указанные компоненты находятся в жидком состоянии и являются стабильными, где Hib представляет собой Hib b, где Hib b присутствует в количестве 10 мкг на 0,5 мл вакцины.

2. Вакцина по п.1, где D, Т и аР антигены адсорбированы на фосфате алюминия.

3. Вакцина по п.1, включающая D, Т, аР (РТ, FHA, PRN), Hib b и IPV (Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3), где D присутствует в количестве от 1 до 40 Lf, Т присутствует в количестве от 1 до 25 Lf, РТ присутствует в количестве от 1 до 40 мкг, FHA присутствует в количестве от 1 до 40 мкг и PRN присутствует в количестве от 1 до 15 мкг на 0,5 мл и штаммы Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 присутствуют в количестве от 1 до 50 DU, 1-15 DU и 1-50 DU соответственно на 0,5 мл.

4. Вакцина по п.3, включающая D, Т, аР (РТ, FHA, PRN), Hib b и IPV, где D присутствует в количестве 25 Lf, Т присутствует в количестве 10 Lf, PT присутствует в количестве 25 мкг, FHA присутствует в количестве 25 мкг и PRN присутствует в количестве 8 мкг на 0,5 мл и штаммы Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 присутствуют в количестве 40 DU, 8 DU и 32 DU, соответственно на 0,5 мл.

5. Применение иммунологически активного количества комбинированной вакцины по п.1 для индукции иммунологического ответа на любой из антигенов, выбранных из группы D, Т, аР, Hib или IPV, у субъекта.

6. Способ производства полностью жидкой стабильной комбинированной вакцины по п.1, включающий этапы, на которых:

a) получают компонент I, включающий антигены i) дифтерии (D) ii) столбняка (Т) и iii) ацеллюлярного коклюша (аР),

b) добавляют компонент I к препарату антигена Haemophilus influenzae (Hib) для получения смеси,

c) добавляют вышеупомянутую смесь к препарату антигена полиовируса (IPV), где адсорбция Hib на любом адъюванте является меньше чем 15% и предпочтительно меньше чем 10%.

7. Способ по п.6, где D, Т и аР антигены адсорбируют на фосфате алюминия.

8. Способ по п.6, где способ дополнительно включает этап, на котором добавляют 2-феноксиэтанол (2-РОЕ) в качестве консерванта к составу.

9. Способ по п.6, где получение компонента I включает следующие этапы, на которых:

a) переносят препараты антигенов дифтерии и столбняка вместе с гелем фосфата алюминия, солевым раствором и 2-РОЕ в сосуд,

b) переносят препараты антигенов PT, FHA и PRN в вышеуказанный сосуд,

с) добавляют солевой раствор и 2-РОЕ в указанный сосуд для получения смеси, проверяют рН и регулируют его в диапазоне 6,0-7,0.

10. Способ по п.9, дополнительно включающий этапы, на которых:

a) переносят компонент I в препарат антигена Hib для получения смеси,

b) смешивают смесь, полученную на этапе а) с препаратом антигена IPV, проверяют рН и регулируют его в диапазоне 6,0-7,0.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к комбинированной вакцине, включающей смесь антигенов для защиты от заболеваний, таких как дифтерия, столбняк, коклюш, и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae и полиовирусами. Данное изобретение также относится к включению одного или более антигенов в указанную комбинированную вакцину для защиты от инфекций, вызываемых вирусом гепатита и другими патогенами, так что введение вакцины может одновременно иммунизировать субъект против более чем одного патогена. Данное изобретение, в частности, касается полностью жидкой стабильной комбинированной вакцины, включающей антигены, как указано выше, и способов ее производства.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Антигены вакцины

Антигены дифтерии и столбняка

Дифтерия и столбняк представляют собой острые инфекции, вызываемые Cornyebacterium diphtheriae и Clostridium tetani, соответственно. Токсины этих бактерий являются главной причиной соответствующих заболеваний. Вакцины, обеспечивающие защиту против этих бактерий, включают эти токсины, которые являются анатоксинами, теряя свою инфекционность. Токсины обрабатывают, используя химические реагенты, такие как формальдегид или глютаральдегид для создания анатоксинов [анатоксин дифтерии (DT) и анатоксин столбняка (ТТ)]. CRM 197, мутантный токсин дифтерии, также используется в определенных вакцинах.

Антигены коклюша

Болезнь судорожного кашля или коклюш вызывается Bordetella pertussis. Она представляет собой истощающую и серьезную болезнь, которая даже может привести к смерти. Начальные вакцины против болезни были на основе целых клеток, которые обрабатывали химическими реагентами, такими как формальдегид, чтобы убить клетки и инактивировать токсические материалы. Будучи высокоэффективными, такие вакцины, называемые «цельноклеточные (wP) вакцины», были связаны с побочными эффектами, включая повышение температуры тела и местные реакции. Была выявлена необходимость в более определенной вакцине, и исследователи затем сменили фокус внимания на разработку вакцины, включающей меньшее количество высокоочищенных антигенов, которая называется «составная вакцина». Многие факторы, связанные с вирулентностью, такие как коклюшный токсин (РТ), филаментный гемагглютинин (FHA), пертактин (PRN или Р69), фимбриальные белки (FIM 1, 2 и 3), аденилциклаза, липополисахарид и другие белки внешней мембраны были предложены для включения в «ацеллюлярную вакцину», которая является менее определенной по сравнению с составной вакциной. Многие работы были сконцентрированы на вакцине на основе РТ, которая была только частично защитной. Комбинация PT/FHA была более эффективной, но все еще имела меньшую иммуногенность, чем вакцина на основе wP (цельноклеточный коклюш). Другой потенциальный кандидат, PRN или Р69, как было обнаружено, делал коклюшную вакцину более эффективной в комбинации с РТ и FHA. Определенная коклюшная вакцина также имела FIM в качестве четвертого участника, обеспечивая иммуногенность против коклюша.

Антигены полиомиелита

Доступно два различных типа вакцины:

- Живую аттенуированную (ослабленная) пероральную полиомиелитную вакцину (OPV), разработанную Dr. Albert Sabin в 1961, OPV, включающую Sabin штаммы, дают перорально.

- Инактивированную (убитая) полиомиелитную вакцину (IPV), разработанную в 1955 Dr. Jonas Salk, IPV, включающую Salk штаммы, вводят как инъекцию.

Как живая аттенуированная (OPV), так и инактивированная (IPV) полиомиелитные вакцины являются эффективными в контроле заболевания полиомиелита во всем мире. Полиомиелитная вакцина может включать Salk или Sabin штаммы. Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 являются Salk штаммами, которые используются в вакцине против заболевания полиомиелита. Sabin штаммы включают Sabin 1 и Sabin 2 штаммы.

Антигены Haemophilus influenzae (Hib)

Haemophilus influenzae представляет собой грамотрицательную коккобактерию, которая представляет собой нормальную составляющую флоры верхнего дыхательного пути. Haemophilus influenzae тип b (Hib b) представляет собой главную причину менингитных инвазивных переносимых кровью инфекций у детей младшего возраста и главной причиной менингита на первых 2 годах жизни. Иммунизация против Haemophilus influenzae началась в Канаде в 1987 с полисахаридной вакцины [рибитолфосфат полирибозы (PRP)]. Полирибозилрибитолфосфатная (PRP) капсула Hib представляет собой главный вирулентный фактор для организма. Антитело к PRP является первичным фактором, влияющим на сывороточную бактерицидную активность, и повышение уровней антител связано с пониженным риском инвазивной болезни. PRP представляет собой Т-клеточно независимый антиген и, следовательно, характеризуется следующим: а) индукция слабого ответа антитела у менее чем 18-месячных младенцев и детей, b) изменчивый и количественно меньший ответ антитела, чем тот, который наблюдается с Т-клеточно зависимыми антигенами, с) продукция более высокого соотношения иммуноглобулина М (IgM) и d) неспособность индуцировать вторичный ответ.

Начальные вакцины на основе только PRP компонента доказали свою неэффективность для младенцев. Дополнительные попытки были направлены на PRP конъюгированную вакцину, где PRP конъюгирован с белками, которые называются белки-носители, такие как наружный белок мембраны Neisseria meningitides, анатоксин дифтерии, анатоксин столбняка и CRM 197.

Антигены гепатита (Нер)

Существуют различные штаммы вируса гепатита. Гепатит В представляет собой болезнь, вызываемую вирусом гепатита В (HBV), который инфицирует печень гоминид, включая людей, и вызывает воспаление, называемое гепатитом. Он варьирует по тяжести от легкого заболевания, которое продолжается несколько недель (острого), до серьезного длительно (хронического) заболевания, которое может привести к болезни печени или раку печени. Вакцина против болезни включает один из вирусных оболочечных белков, поверхностный антиген гепатита В (HBsAg). Одобренные FDA вакцины, включающие Нер В, представляют собой Recombivax НВ® и Comvax® от Merck, Engerix-B® и Pediarix® от GlaxoSmithKline Biologicals.

Другие антигены

Другие антигены, которые затрагивают человечество, включают Haemophilus influenzae (а, с, d, e, f серотипы и неинкапсулированные штаммы), гепатит (А, С, D, Е, F и G штаммы), менингит А, В или С, грипп, Pneumococci, Streptococci, сибирскую язву, денге, малярию, корь, свинку, краснуху, БЦЖ, японский энцефалит, ротавирус, натуральную оспу, желтую лихорадку, брюшной тиф, Singles, вирус ветряной оспы и другие.

Комбинированные вакцины

Несмотря на многие десятилетия исследования в области вакцин, инфекционные заболевания остаются угрозой для человечества. Комбинированные вакцины, которые защищают от различных заболеваний, являются очень необходимыми, так как они снижают количество введений вакцины, что снижает количество введений и стоимости продукции, а также улучшает степень согласия пациента с предписанным режимом. Такие комбинированные вакцины, в общем, лучше переносятся.

Однако документально доказанное явление антигенной конкуренции усложняло и тормозило развитие поливалентных вакцин. Это явление касается наблюдения, что введение множественных антигенов вместе часто приводит к ослабленному ответу на определенные антигены сравнительно с иммунным ответом на эти антигены, когда они вводятся отдельно.

Более раннее исследование было сфокусировано на разработке вакцин с множественными валентностями, направленных на различные заболевания и инфекции. Одна такая хорошо известная комбинация вакцины представляет собой ту, которая обеспечивает защиту от дифтерии, столбняка и ацеллюлярного коклюша. Ацеллюлярный коклюшный (аР) компонент в норме включает 2 или все 3 из следующего: детоксифицированный РТ (коклюшный токсин), FHA (филаментный гемагглютинин) и PRN или Р69 (пертактин). В некоторых случаях могут также присутствовать другие коклюшные антигены, такие как антигены фимбрий (Fim 1, 2 или 3). Infanrix® (GlaxoSmithKline Biologicals), Tripedia и Daptacel (Sanofi Pasteur) являются одобренными FDA DTaP комбинированными вакцинами.

Желательно добавить другие антигены к такой комбинированной вакцине, которые будут давать защиту от заболеваний, вызываемых вирусом гепатита (Нер), Haemophilus influenzae (Hib) и полиовирусами (IPV). Также желательно иметь антигены, обеспечивающие защиту от других заболеваний, которые будут добавлены к указанным выше комбинированным вакцинам.

Недавно одобренная FDA вакцина Kinrix® от GlaxoSmithKline Biologicals представляет собой комбинированную вакцину, которая имеет IPV вместе с DTaP (Infanrix®) антигенами. Infanrix-Hib® представляет собой другую комбинацию, которая предоставлена GlaxoSmithKline Biologicals, где DTaP антигены присутствуют в жидкой форме и Hib антиген лиофилизирован и предоставлен в отдельной ампуле. Pediarix® и Infanrix penta® от GlaxoSmithKline Biologicals включает комбинированную вакцину, дозированную в отдельной ампуле, которая включает DTaP вместе с Нер В и IPV компонентом. Pentacel® от Sanofi Pasteur представляет собой комбинацию пяти вакцинных компонентов, доставляемых в виде DTaP-IPV в жидкой форме и Hib компонента в высушенной форме. Infanrix hexa® представляет собой шестикомпонентную комбинированную вакцину от GlaxoSmithKline Biologicals, которая защищает от заболеваний, таких как дифтерия, столбняк, коклюш, полиомиелит и инфекций, вызываемых Нер В вирусом и Haemophilus influenzae типа b. Даже в этой комбинации все компоненты, за исключением Hib компонента, присутствуют в жидкой форме, а Hib компонент присутствует в лиофилизированной форме. Таким образом, ни одна из представленных комбинированных вакцин не продается в виде полностью жидких составов и не включает антигены, такие как Hib и Нер вместе с антигенами, обеспечивающими защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и полиомиелита, в одной ампуле.

Патент США № 6756040 утверждает, что простое смешивание компонентов вакцины приводит к снижению в титрах антител для полисахаридного компонента, вследствие антигенной интерференции. US'040 касается состава вакцины для профилактики инфекций Haemophilus influenzae (Hib) типа b, где существует необходимость того, чтобы Hib b конъюгат был адсорбирован на фосфате алюминия так, чтобы ингибировать снижение антиполисахаридных антител. Дополнительно, Hib b антиген является лиофилизиррванным и его смешивают с другими антигенами, присутствующими в жидкой форме, не более чем за один час до введения. Таким образом, в US'040 нет сообщения о комбинированной вакцине, которая присутствует в качестве полностью жидкого состава и включает антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусом гепатита и полиомиелита.

Патент США № 6013264 от SmithKline Beecham Biologicals касается поливалентной вакцины, включающей HbsAg (Hep В антиген), адсорбированный на фосфате алюминия. Он отстаивает точку зрения, что, когда адсорбированный на гидроксиде алюминия HBsAg используют в комбинированной вакцине, то наблюдается существенное снижение иммунного ответа на HBsAg компонент, приводя к незначительной сероконверсии после вакцинации. Он также утверждает, что существует необходимость избегать применения гидроксида алюминия в качестве адъюванта для адсорбции HBsAg в поливалентной вакцине. Описание утверждает, что Hib b компонент может быть добавлен непосредственно перед приемом к вакцине данного изобретения. Таким образом, в US'264 нет сообщения о комбинированной вакцине, которая присутствует как полностью жидкий состав и включает антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусами гепатита и полиомиелита. Также вакцина согласно US'264 имеет специфическое требование, чтобы Hep В антиген был адсорбирован на фосфате алюминия, а не на гидроксиде алюминия.

РСТ заявка WO 2007054820 от Novartis Vaccines and Diagnostics касается композиции вакцины, где D и Т антигены, в частности, адсорбированы на гидроксиде алюминия и Hib b и Hep В антигены адсорбированы на фосфате алюминия. Эта заявка, однако, не включает сообщения о получении полностью жидкой стабильной комбинированной вакцины, где D, Т и аР антигены адсорбированы на фосфате алюминия и Hep антиген адсорбирован на гидроксиде алюминия.

РСТ заявка WO 1998000167 А1 от Connaught Lab обеспечивает поливалентную иммуногенную композицию для обеспечения защиты у хозяина от болезни, вызываемой инфекцией Bordetella pertussis, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheriae, полиовируса и/или Haemophilus influenzae. Hib b компонент вакцины, согласно описанию, представляет собой лиофилизированный компонент, который необходимо растворить до смешивания с другими компонентами вакцины. Таким образом, в описании нет сообщения, касающегося полностью жидкой комбинированной вакцины, включающей все указанные антигены.

Лиофилизация, также имеющая название сублимационная сушка, представляет собой дорогостоящий способ, который также вызывает значительный стресс на белки. Когда любой компонент вакцины является лиофилизированным на момент введения вакцины, то необходимо смешать лиофилизат с другой жидкостью или жидким компонентом комбинированной вакцины. Это представляет собой дополнительное ограничение для практикующего клинициста и представляет риск того, что это будет проведено некачественно. Затем был предложен шприц с многочисленными отсеками, который будет включать лиофилизированный компонент в одном отсеке и жидкий компонент вакцины в другом. Однако такой шприц, чье содержимое могло быть смешанным на момент введения вакцины, не проявил себя удовлетворительно в отношении снижения стоимостей получения, а также в отношении операций, которые необходимо выполнить практикующему клиницисту.

Следовательно, желательно избегать этапа сублимационной сушки и обеспечить комбинированную вакцину, которая имеет все компоненты, присутствующие вместе и в полностью жидкой форме. Это облегчит введение вакцины, обеспечит соблюдение пациентом режима введения, а также снизит стоимости получения. Таким образом, желательно иметь Hib антиген, добавленный к жидкому компоненту вакцины и, таким образом, иметь полностью жидкую поливалентную вакцину.

РСТ заявка WO 2004110480 от Glaxo SmithKline Biologicals касается вакцины, включающей Hib b полисахарид. Заявка утверждает, что простое смешивание компонентов комбинированной вакцины затрудняется фактом того, что не все антигены могут быть эффективно смешаны друг с другом. Она утверждает, что существует интерференция между гидроксидом алюминия DTP вакцины и PRP. Данное изобретение в WO'480 направлено на минимизацию этой интерференции в такой приготовленной для немедленного приема комбинированной вакцине, где PRP предварительно адсорбируют на фосфате алюминия. Данное изобретение дополнительно обеспечивает иммуногенные композиции, вакцины и комбинированные вакцины, включающие PRP, который защищен в некоторой степени от иммунной интерференции. Изобретатели обнаружили, что описанное выше может быть достигнуто путем включения полианионного полимерного вспомогательного вещества в вакцину, включающую PRP.

Однако применение полианионного полимера в составе вакцины может быть нежелательным, поскольку это может увеличивать стоимость составления вакцины. Также, поскольку вакцина в итоге предназначена для применения у людей, она оптимально должна иметь наименьшее количество возможных компонентов. Применение дополнительных ингредиентов означает добавление к составу веществ, на которые организм может реагировать и производить антитела. Такой ответ организма, вступая в контакт с компонентами иммунологического препарата, может быть нежелательным.

Патент США № 6333036 от Pasteur Merieux Semms касается композиций вакцины, содержащих капсулярный полисахарид Haemophilus influenzae типа b или высокомолекулярный полирибозилрибитол фосфат (PRP), связанный с анатоксином столбняка, а также адъювант на основе алюминия. Адъюванты на основе алюминия, используемые в данном изобретении, имеют точку нулевого заряда при менее чем приблизительно 7,2. Патент, однако, конкретно не сообщает о получении комбинированной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae и полиовирусами, в полностью жидкой форме, где Hib антиген может не быть, по сути, адсорбированным на каком-либо адъюванте. Этот патент также не сообщает о получении полностью жидкой стабильной комбинированной вакцине, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусами гепатита и полиомиелита, где антигены дифтерии, столбняка и коклюша адсорбированы на фосфате алюминия, а антиген гепатита адсорбирован на гидроксиде алюминия.

Европейский патент № 1028750 от Sanofi Pasteur MSD, касается поливалентной вакцины, которая обеспечивает защиту от заболеваний, вызываемых Bordetella pertussis, Corynebacterium diphtheriae, Clostridium tetani, полиовирусами, вирусом гепатита В и Haemophilus influenzae. Патент, однако, в частности, не сообщает о получении комбинированной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусами гепатита и полиомиелита, в полностью жидкой форме, где D, Т и аР антигены адсорбированы на фосфате алюминия, а Нер антиген не адсорбирован на гидроксиде алюминия.

Hexavac® от Aventis Pasteur MSD представляет собой полностью жидкую вакцину, которая обеспечивается для защиты от заболеваний, вызываемых указанными организмами. Однако было временно остановлено применение этой вакцины во всем мире вследствие проблем после выхода на рынок в связи с вариабельностью способа получения компонента гепатита В вакцины, что могло привести к пониженной долговременной защите от гепатита В.

Несмотря на то, что продолжаются исследования по созданию поливалентной вакцины, включающей различные антигены, которая бы обеспечивала защиту от ряда заболеваний, они не направлены на необходимость обеспечения стабильной комбинированной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae и полиовирусами, в полностью жидкой форме, где Hib антиген может не быть, по сути, адсорбирован на каком-либо адъюванте. Также отсутствует раскрытие создания стабильной комбинированной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от дифтерии, столбняка, коклюша и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae, вирусами гепатита и полиомиелита, в полностью жидкой форме, где D, Т и аР антигены адсорбированы на фосфате алюминия, а Нер антиген адсорбирован на гидроксиде алюминия. Существуют противоречивые сообщения относительно ответов антител против конкретных антигенов у детей, иммунизированных отдельным и совместным введением комбинированных вакцин и PRP вакцины. Могут существовать различные причины для таких результатов, включая вакцины, которые не являются идентичными по их антигенному содержанию, способ создания анатоксина, использование адъюванта или используемый консервант.

Таким образом, коммерчески доступные в настоящее время комбинированные вакцины могут не включать подходящие составы подходящих антигенов в подходящих иммуногенных формах для достижения необходимых уровней эффективности и иммуногенности у чувствительной человеческой популяции, для нескольких заболеваний в одном введении. Существует необходимость в многокомпонентной вакцине, которая обеспечивает защиту от различных инфекций и находится в жидкой форме, так что обеспечивает простоту введения и комфорт стоимости-эффективности. Было бы желательным обеспечить стабильную и эффективную поливалентную вакцину против заболеваний, вызываемых инфекциями, вызываемыми Corynebacterium diphtheria, Clostridium tetani, Bordetella pertussis, полиовирусами, вирусом гепатита, Haemophilus influenzae и другими. Для такой вакцины, чтобы она была эффективной, необходимо, чтобы соблюдался критерий серопротекции для каждого из антигенов вакцины. Для этого существует необходимость в преодолении препятствий и трудностей, обусловленных антигенной конкуренцией и интерференцией. Данное изобретение преодолевает ограничения известного уровня техники и решает связанные проблемы путем обеспечения состава полностью жидкой комбинированной вакцины, защищающего от нескольких заболеваний.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ДАННОГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение относится к комбинированной вакцине, включающей смесь антигенов для защиты от заболеваний, таких как дифтерия, столбняк, коклюш и инфекций, вызываемых Haemophilus influenzae и полиовирусами. Данное изобретение также относится к включению антигенов для защиты от инфекций, вызываемых вирусом гепатита и другими патогенами, так что введение вакцины может одновременно иммунизировать субъект против более чем одного патогена. Данное изобретение, в частности, касается полностью жидкой стабильной комбинированной вакцины, включающей антигены, как указано выше, и способов ее производства.

Данное изобретение дополнительно касается пятивалентной вакцины, где Hib антиген, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте. Данное изобретение также касается полностью жидкой стабильной шестивалентной вакцины, включающей антигены, обеспечивающие защиту от нескольких заболеваний, где антигены дифтерии, столбняка и ацеллюлярного коклюша адсорбируют на фосфате алюминия и антиген гепатита адсорбируют на гидроксиде алюминия.

Данное изобретение дополнительно направлено на комбинированную вакцину, которая включает несколько компонентов вакцины, которые являются подходящими для профилактики, улучшения и лечения множества болезненных состояний, которые соответствуют критерию для серопротекции для каждого из указанных компонентов вакцины.

ДЕТАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Данное изобретение направлено на полностью жидкую стабильную комбинированную вакцину, которая включает несколько компонентов вакцины, которые являются подходящими для профилактики, улучшения и лечения множества болезненных состояний, которые соответствуют критерию для серопротекции для каждого из указанных компонентов вакцины.

Преимущества данного изобретения включают поливалентную вакцину, которая может обеспечить защиту от широкого спектра заболеваний и инфекций безопасным и эффективным способом. Вакцина данного изобретения обеспечивает иммуногенность к различным заболеваниям и инфекциям без какой-либо интерференции любого из антигенов, которые присутствуют в вакцине. Таким образом, однократное введение будет обеспечивать иммуногенность против различных заболеваний и инфекций, делая вакцину более удовлетворяющей пациентов. Поскольку однократное введение будет обеспечивать иммунитет против ряда инфекций и заболеваний, стоимость вакцинации будет снижена. Вакцина данного изобретения будет предпочтительной в том смысле, что она будет снижать число визитов в центр вакцинации, а также число введений, которые необходимо осуществить для ряда различных заболеваний и инфекций. Этот аспект данного изобретения будет делать ее более пригодной и предпочтительной особенно для более молодой группы населения, которая нуждается в вакцинации для обеспечения иммунитета к большому числу инфекций и заболеваний. Таким образом, данное изобретение обеспечивает вакцину, которая является более приемлемой.

Определения

Выражение «полностью жидкая», как используется в данном документе для описания вакцины данного изобретения, относится к состоянию вакцины, где все компоненты вакцины находятся в жидком состоянии, и нет такого компонента вакцины, который обеспечен в лиофилизированной или любой другой форме, так чтобы его необходимо было смешивать с другими компонентами вакцины до введения ее субъекту.

Выражение «белок-носитель», как используется в данном документе, описывает белковый компонент, с которым капсулярный полисахарид (Hib), используемый в вакцине, конъюгирован так, чтобы превращать Т-клеточно независимый полисахарид в Т-клеточно зависимый антиген.

Выражение «адъювант», как используется в данном документе, описывает неантигенный компонент вакцины, который усиливает иммунный ответ антигенов вакцины путем облегчения контакта между антигеном и иммунной системой путем влияния на тип и качество иммунного ответа, образованного против антигена. Адъювант вызывает пролонгированные иммунные ответы против антигенов, а также может служить для снижения токсичности определенных антигенов или обеспечения растворимости для определенных антигенов.

Выражение «стабильная», используемое здесь для описания вакцины данного изобретения, означает, что каждый из антигенов композиции вакцины имеет эффективность/иммуногенность большую, чем та, которая установлена в качестве нормального допустимого предела, после инкубации вакцины при 5±3°С в течение, по меньшей мере, 1, предпочтительно 12 и наиболее предпочтительно 24 месяцев.

Выражение «по сути», используемое здесь для описания количества адсорбции или соединения Hib на любой адъювант, в выражении «Hib, по сути, не адсорбированный на каком-либо адъюванте», означает, что адсорбция Hib на любом адъюванте является меньше чем 15%, и предпочтительно меньше чем 10%. Hib антиген не подвергается какому-либо из этапов, так чтобы целенаправленно адсорбироваться на любом адъюванте; некоторая адсорбция может иметь место, возможно, вследствие контакта между антигеном и адъювантом и не является целенаправленной.

Выражение «от приблизительно», используемое здесь для описания количества каждого из компонентов, присутствующих в вакцине данного изобретения, означает количество указанного компонента вакцины, который присутствует в количествах предпочтительно ±20%, более предпочтительно ±10% и наиболее предпочтительно ±5% установленного количества для этого конкретного компонента.

Выражение «приблизительно», как используется в данном документе для описания времени перемешивания компонентов смеси в ходе способа получения вакцины данного изобретения, составляет предпочтительно ±20%, более предпочтительно ±10% и наиболее предпочтительно ±5% установленного значения.

Выражение «иммунологически активный», используемое здесь в отношении комбинированной вакцины данного изобретения, означает, что вакцина при введении субъекту способна вызывать антитела против каждого антигена указанной комбинации так, чтобы защитить вакцинируемого пациента от соответствующих заболеваний или инфекций.

Выражение «соединение или адсорбирование», используемое здесь в отношении антигенов комбинированной вакцины данного изобретения, относится к любой форме физического связывания между антигеном и адъювантом.

Вакцина данного изобретения

Данное изобретение обеспечивает композицию стабильной комбинированной вакцины, в которой все компоненты вакцины присутствуют вместе в жидкой форме в одной ампуле.

Один аспект данного изобретения обеспечивает полностью жидкую стабильную пятивалентную вакцину, включающую антигены дифтерии (D), столбняка (Т), ацеллюлярного коклюша (аР), Haemophilus influenzae (Hib) и полиовируса (IPV), где Hib, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте.

Другой аспект данного изобретения относится к полностью жидкой стабильной шестивалентной вакцине, включающей антигены дифтерии (D), столбняка (Т), ацеллюлярного коклюша (аР), Haemophilus influenzae (Hib) и гепатита (Нер) и полиовируса (IPV), где D, Т и аР антигены адсорбируют на фосфате алюминия и Нер антиген адсорбируют на гидроксиде алюминия.

Данное изобретение дополнительно обеспечивает, что антигены дифтерии (D), столбняка (Т) и ацеллюлярного коклюша (аР) адсорбируют только на фосфате алюминия, а не на гидроксиде алюминия.

Согласно аспекту данного изобретения Hib антиген конъюгирован с белком-носителем, выбранным из группы, включающей анатоксин столбняка (ТТ), анатоксин дифтерии (DT), CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides или любые их эквиваленты, или любыми другими известными носителями.

Согласно другому аспекту данного изобретения Hib антиген, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте.

Согласно другому аспекту данного изобретения Hib антиген в вакцине данного изобретения получают из капсулярного полисахарида Hib b штамма.

Один аспект данного изобретения обеспечивает то, что Нер антиген адсорбируют на гидроксиде алюминия, а не на фосфате алюминия.

Один дополнительный аспект данного изобретения касается Нер антигена, полученного из поверхностного антигена гепатита В (HBsAg); т.е. поверхностного антигена Нер В штамма.

Согласно другому аспекту данного изобретения IPV штаммы представляют собой один или более Salk штаммов, которые могут быть выбраны из группы, включающей: Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3, или один или более Sabin штаммов, выбранных из группы, включающей Sabin типы 1 и 2.

Другой аспект данного изобретения обеспечивает то, что вакцина данного изобретения включает 2-феноксиэтанол в качестве консерванта в составе.

Дополнительно, другой аспект данного изобретения относится к способу производства комбинированных вакцин данного изобретения.

Другой аспект данного изобретения касается композиции комбинированных вакцин данного изобретения, так что каждый из антигенов присутствует в количестве в вакцине так, чтобы обеспечить защитный иммунный ответ против указанного антигена.

Антигены вакцины данного изобретения

Дифтерию вызывает Coryne bacterium diphtheriae, грамположительная неспорообразующая аэробная бактерия. Этот организм экспрессирует кодируемый профагом экзотоксин АДФ-рибозилирования («токсин дифтерии»), который может быть обработан (например, используя формальдегид) для получения анатоксина. Этот анатоксин уже не является токсичным, но все еще остается антигенным и способен стимулировать продукцию специфических антител против токсина после инъекции. Препарат антигена дифтерии, используемый в вакцине данного изобретения, предпочтительно включает анатоксин дифтерии.

Столбняк вызывает Clostridium tetani, грамположительная, спорообразующая бактерия. Этот организм экспрессирует эндопептидазу («токсин столбняка»), который может быть обработан для получения анатоксина, который уже не является токсичным. Однако он все еще остается антигенным и способен стимулировать продукцию специфических антител против токсина после инъекции. Препарат антигена столбняка, используемый в вакцине данного изобретения, предпочтительно включает анатоксин столбняка.

Коклюш или судорожный кашель вызывает Bordetella pertussis. Антигены ацеллюлярного коклюша (аР) могут быть получены из любого из известных штаммов Bordetella pertussis. Для цели данного изобретения аР антигены могут предпочтительно быть получены из штамма Tohama В. pertussis. Любые приемлемые среды могут быть использованы для выделения, культивирования, пролиферации и ферментации культуры. Для цели данного изобретения предпочтительно может быть использована модифицированная среда Stainer-Scholte. Антигены ацеллюлярного коклюша (аР), используемые в вакцине данного изобретения, включают, по меньшей мере, один или более антигенов, выбранных из группы, включающей коклюшный токсин (РТ), филаментный гемагглютинин (FHA), пертактин (PRN или Р69) и FIM (фимбриальные антигены - 1, 2 или 3). Однако согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения препарат аР антигена, используемый в вакцине данного изобретения, включает РТ, FHA и PRN (P69) антигены.

Haemophilus influenzae представляет собой грамотрицательную коккобактерию, которая вызывает инвазивные переносимые кровью инфекции и менингит. Согласно одному варианту осуществления данного изобретения Hib антиген, который получают из капсулярного полисахарида, может быть конъюгирован или связан с белками-носителями. Белки-носители, используемые для конъюгации Hib антигена, могут быть выбраны из группы, включающей анатоксин столбняка (ТТ), анатоксин дифтерии (DT), CRM 197 и наружный белок мембраны Neisseria meningitides или любые их эквиваленты. Другие подходящие белки-носители включают, но не ограничиваясь, синтетические пептиды, белки теплового шока, коклюшные белки, цитокины, лимфокины, гормоны, факторы роста, искусственные белки, включающие эпитопы многочисленных CD4+ Т клеток человека от различных полученных из патогенов антигенов, такие как N19, белок D из Н. influenzae, белок PspA поверхности пневмококка, пневмолизин, белки захвата железа, токсин А или В из С. difficile и S. agalactiae белков. Препарат антигена Hib, используемый в вакцине данного изобретения, включает Hib антиген, предпочтительно конъюгированный или связанный с анатоксином столбняка.

Полисахаридный конъюгат может быть получен любой известной методикой связывания. Например, полисахарид может быть связан посредством тиоэфирной связи. Этот способ конъюгации основан на активации полисахарида с помощью 1-циано-4-диметиламинопиридин тетрафторбората (CDAP) для образования сложного эфира цианата. Активированный полисахарид может, таким образом, быть соединен напрямую или посредством спейсерной группы с аминогруппой на белке-носителе. Конъюгаты могут также быть получены с помощью способов прямого восстановительного аминирования. Другой способ включает соединение полисахарида, активированного цианистым бромидом (CNBr), дериватизированного с гидразидом адипиновой кислоты (ADH) с белком-носителем с помощью карбодиимидной конденсации. Любой другой известный способ может быть использован для получения полисахаридного конъюгата, используемого в вакцине данного изобретения.

Согласно варианту осуществления данного изобретения Hib антиген, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте; предпочтительно степень адсорбции Hib антигена с адъювантом составляет не более чем 15%; более предпочтительно степень адсорбции Hib антигена с адъювантом составляет не более чем 10%.

Согласно другому варианту осуществления данное изобретение касается Hib антигена, который не подвергается целенаправленной или преднамеренной адсорбции на каком-либо адъюванте.

Согласно другому предпочтительному варианту осуществления данного изобретения Hib антиген получают из капсулярного полисахарида Hib b штамма.

Гепатит вызывают различные штаммы гепатита, такие как А, В, С, D, Е, F или G. Вирус гепатита В (HBV) является одним из главных агентов, которые вызывают вирусный гепатит. Вирион HBV состоит из внутреннего ядра, окруженного внешней белковой оболочкой или капсидом. Главный компонент капсида представляет собой белок, известный как HBV поверхностный антиген или, чаще, «HBsAg». Когда этот антиген вводят вакцинируемому пациенту, он стимулирует продукцию антиHBsAg антител, которые защищают от HBV инфекции. Согласно одному предпочтительному аспекту данного изобретения препарат антигена гепатита (Нер), используемый в вакцине данного изобретения, включает Нер антигены, полученные из поверхностного антигена штамма гепатита В (HBsAg).

Для производства вакцины HBsAg может быть получен либо очищением антигена в крупнодисперсной форме из плазмы носителей хронического гепатита В, так как большие количества HBsAg синтезируются в печени и высвобождаются в кровоток в ходе HBV инфекции, либо экспрессией белка рекомбинантными ДНК способами. HBsAg для применения в вакцине данного изобретения может быть получен любым способом.

Полиомиелит вызывают вирусы полиомиелита. Вакцина данного изобретения может включать Sabin (Sabin 1 и/или Sabin 2) или Salk штаммы полиовируса. Согласно одному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения вакцина данного изобретения включает Salk штаммы. Существует 3 типа Salk штаммов, которые могут вызывать полиомиелит. Три типа являются сходными и вызывают идентичные симптомы, но они антигенно очень отличаются, и инфицирование одним типом не защищает от инфицирования другими. Salk полиовирус включает 3 штамма - тип 1 (например, Mahoney штамм), тип 2 полиовируса (например, MEF-I штамм) и тип 3 полиовируса (например, Saukett штамм). Согласно предпочтительному варианту осуществления данного изобретения вакцина данного изобретения может включать один или более из указанных Salk штаммов.

Полиовирусы могут быть выращены в клеточной культуре. Клеточная линия Vero, которая представляет собой стабильную клеточную линию, полученную из почки обезьяны, может быть использована для выращивания полиовирусов. После выращивания вирионы могут быть очищены, используя уже известные методики. Может быть проведена инактивация вирусов. Количества полиовируса типично выражают в «DU» единице («D-антигенная единица»). Препарат антигена IPV, используемый в получении вакцины данного изобретения, предпочтительно получают так, чтобы он содержал один или более штаммов, которые используются в производстве вакцины. Этот нерасфасованный препарат затем используют для составления вакцины данного изобретения.

Неантигенные компоненты вакцины

Наряду с антигенными компонентами вакцина может включать ряд неантигенных компонентов, которые являются фармацевтически приемлемыми наполнителями. Они включают, но не ограничиваются следующим: рН модификаторы, буферы, адъюванты, консервант, носитель и средства, модифицирующие тоничность.

Адъюванты

Антигены окончательного состава могут быть или могут не быть адсорбированными на адъюванте. Адъювант функционирует для стимулирования продукции иммунитета против ингредиентов вакцины, делая вакцину более эффективной.

Адъюванты могут служить для:

- приведения антигена в контакт с иммунной системой и влияния на тип вызываемого иммунитета, а также качество иммунного ответа (величина или длительность);

- уменьшения токсичности определенных антигенов; и

- обеспечения растворимости некоторых компонентов вакцин.

Исследования показали, что многие включающие алюминий вакцины вызывают более сильные и более длительные ответы антител, чем сопоставимые вакцины без адъюванта. Преимущество адъювантов обычно наблюдалось во время серий первичной иммунизации, нежели с повторными иммунизациями.

Адъюванты на основе алюминия являются наиболее часто используемыми адъювантами. Эти адъюванты были также одобрены FDA (Управление США по надзору за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств) для применения в вакцинах. Существует три главных типа адъювантов, содержащих алюминий:

- Гидроксид алюминия

- Фосфат алюминия

- Калий-алюминий сульфат (часто называемый «квасцы»)

Один вариант осуществления данного изобретения касается определенных антигенов вакцины, подлежащих адсорбции на фосфате алюминия, и определенных антигенов вакцины, адсорбированных на гидроксиде алюминия. Некоторые антигены могут быть адсорбированы только на фосфате алюминия, а не на гидроксиде алюминия и наоборот. Определенные антигены данного изобретения могут не быть адсорбированы или, по сути, адсорбированы на каком-либо адъюванте. Преимущество адъюванта для адсорбции указанных антигенов сообщает вакцине данного изобретения свои характеристики. Преимущество адсорбции описано более детально в разделе «Способ производства вакцины данного изобретения» ниже.

Консерванты

Вакцины подвержены загрязнению бактериями. Таким образом, чтобы избежать потенциально угрожающему жизни загрязнению вредными микробами, которые могут быть введены в вакцину, введенную во время случайного заражения, консервант может быть включен в композицию вакцины при ее составлении. Консерванты, которые могут быть использованы, включают хлорид бензетония (Phemerol), тиомерсал, фенол и 2-феноксиэтанол (2-РОЕ).

Тимеросал представляет собой ртутьсодержащее органическое соединение (огранортутное), которое используется во многих вакцинах как консервант. Существуют сообщения, касающиеся определенных аллергических реакций на тиомерсал, главным образом, в форме местных реакций гиперчувствительности замедленного типа, включая покраснения и припухлость в месте инъекции. Также существуют противоречивые сообщения о связи аутизма с ртутью.

2-феноксиэтанол (2-РОЕ) также известен как «1-гидрокси-2-феноксиэтан», «2-гидроксиэтил-фениловый эфир», «фениловый эфир этиленгликоля» и т.д. Профиль безопасности 2-феноксиэтанола является лучшим, чем у ртутных консервантов (например, тиомерсала). Таким образом, имеется необходимость избегать тиомерсал и использовать 2-феноксиэтанол в вакцинах.

Таким образом, другой предпочтительный вариант осуществления данного изобретения касается применения 2-феноксиэтанола в качестве консерванта в композиции вакцины. Согласно другому предпочтительному варианту осуществления данного изобретения концентрация 2-феноксиэтанола составляет 5 мг/мл вакцины.

Средства, модифицирующие тоничность

Для контроля тоничности композиции вакцины предпочтительно включить в состав вакцины средство, модифицирующее тоничность. Эти средства включают, но не ограничиваясь, следующие: соли (примеры - NaCl, MgCl2, KCl, CaСl2), сахара (примеры - декстроза, маннитол, лактоза), аминокислоты (примеры - аргинин, глицин, гистидин) и полиолы (примеры - сахароза, глицерин, сорбит). В более предпочтительном варианте осуществления физиологическая соль, такая как соль натрия, используется в составе вакцины. Хлорид натрия (NaCl) наиболее предпочтительно включается в композицию вакцины данного изобретения.

рН модификаторы и/или буферы

Различные рН модификаторы, известные специалисту в данной области техники, могут быть использованы для регуляции рН композиции вакцины, как это необходимо, такие как гидроксид натрия или соляная кислота. Различные буферы, такие как фосфат натрия, фосфат калия и цитратные буферы, могут быть использованы в составе вакцины.

Композиция вакцины данного изобретения

Композиция вакцины данного изобретения является такой, чтобы вакцина данного изобретения оказывалась иммуногенной в силу количеств каждого из антигенов, содержащихся в вакцине. Каждый из антигенов в вакцине данного изобретения находится предпочтительно в таких количествах, что комбинированная вакцина при введении субъекту вызывает иммунный ответ у субъекта против указанного антигена композиции.

Согласно одному варианту осуществления данного изобретения полностью жидкая пятивалентная вакцина включает D, Т, аР (РТ5 FHA, PRN), Hib b и IPV (Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3), где D присутствует в количестве от приблизительно 1-40 Lf, Т присутствует в количестве от приблизительно 1-25 Lf, РТ присутствует в количестве от приблизительно 1-40 мкг, FHA присутствует в количестве от приблизительно 1-40 мкг и PRN присутствует в количестве от приблизительно 1-15 мкг на 0,5 мл, Hib b присутствует в количестве от приблизительно 1-20 мкг на 0,5 мл и штаммы Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 присутствуют в количестве от приблизительно 1-50 DU, 1-15 DU и 1-50 DU, соответственно на 0,5 мл, чтобы обеспечить стабильную и иммуногенную комбинированную вакцину.

Согласно одному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения полностью жидкая пятивалентная вакцина включает D, Т, аР (РТ, FHA, PRN), Hib b и IPV, где D присутствует в количестве от приблизительно 25 Lf, Т присутствует в количестве от приблизительно 10 Lf, РТ присутствует в количестве от приблизительно 25 мкг, FHA присутствует в количестве от приблизительно 25 мкг и PRN присутствует в количестве от приблизительно 8 мкг на 0,5 мл, Hib b присутствует в количестве от приблизительно 10 мкг на 0,5 мл и штаммы Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 присутствуют в количестве от приблизительно 40 DU, 8 DU и 32 DU, соответственно на 0,5 мл, так, чтобы указанная вакцина была стабильной композицией и была иммуногенной при введении субъекту.

Другой вариант осуществления данного изобретения обеспечивает полностью жидкую шестивалентную вакцину, включающую D, Т, аР (РТ, FHA, PRN), Hib b, Нер В и IPV (Mahoney тип 1, MEF Тип 2 и Saukett тип 3), где D присутствует в количестве от приблизительно 1-40 Lf, Т присутствует в количестве от приблизительно 1-25 Lf, РТ присутствует в количестве от приблизительно 1-40 мкг, FHA присутствует в количестве от приблизительно 1-40 мкг и PRN присутствует в количестве от приблизительно 1-15 мкг на 0,5 мл, Hib b присутствует в количестве от приблизительно 1-20 мкг и Нер В присутствует в количестве от приблизительно 1-25 мкг на 0,5 мл и штаммы Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 присутствуют в количестве от приблизительно 1-50 DU, 1-15 DU и 1-50 DU, соответственно на 0,5 мл, так, чтобы комбинированная вакцина была стабильной и иммуногенной при введении субъекту.

Согласно другому предпочтительному варианту осуществления данного изобретения обеспечивается полностью жидкая шестивалентная вакцина, включающая D, Т, аР (РТ, FHA, PRN), Hib b, Нер В и IPV, где D присутствует в количестве от приблизительно 25 Lf, Т присутствует в количестве от приблизительно 10 Lf, РТ присутствует в количестве от приблизительно 25 мкг, FHA присутствует в количестве от приблизительно 25 мкг и PRN присутствует в количестве от приблизительно 8 мкг на 0,5 мл, Hib b присутствует в количестве от приблизительно 10 мкг и Нер В присутствует в количестве от приблизительно 10 мкг на 0,5 мл и штаммы Mahoney тип 1, MEF тип 2 и Saukett тип 3 присутствуют в количестве от приблизительно 40 DU, 8 DU и 32 DU соответственно на 0,5 мл. Такая вакцина будет стабильной вакциной, способной вызывать иммунный ответ против всех антигенов композиции при введении субъекту.

Данное изобретение дополнительно касается способа, включающего иммунологический ответ на любой из антигенов, выбранных из группы D, Т, Р, Hib, Нер или IPV, включающий введение иммунологически активного количества вакцины данного изобретения.

Согласно другому аспекту данного изобретения содержание алюминия (Аl+3) в вакцине данного изобретения не может быть более чем предпочтительно 2 мг на 0,5 мл, более предпочтительно 1 мг на 0,5 мл и наиболее предпочтительно 0,8 мг на 0,5 мл.

Согласно другому аспекту данного изобретения предпочтительное количество 2-феноксиэтанола в комбинированной вакцине данного изобретения может быть 5 мг/мл.

Способ производства вакцины данного изобретения

Один из аспектов данного изобретения касается способа производства вакцины данного изобретения. Иммуногенность, стабильность и поддержание правильной формы антигенов в иммуногенной композиции может зависеть от способа составления композиции. Это может включать последовательность добавления антигенов, применение специфических адъювантов для определенных антигенов, применение различных параметров, включая помешивание, температуру и рН.

Один из вариантов осуществления данного изобретения касается способа производства полностью жидкой пятивалентной вакцины, включающей антигены дифтерии (D), столбняка (Т), ацеллюлярного коклюша (аР), Haemophilns influenzae (Hib) и IPV антигены, который включает этапы, на которых:

a) получают компонент I, включающий антигены i) дифтерии (D) ii) столбняка (Т) и iii) ацеллюлярного коклюша (аР),

b) добавляют компонент I к препарату антигена Haemophilus influenzae (Hib) для получения смеси,

c) добавляют вышеупомянутую смесь к антигенам полиовируса (IPV) с оговоркой, что Hib, по сути, не адсорбируют на каком-либо адъюванте.

Согласно одному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения D, Т и аР антигены адсорбируют на фосфате алюминия.

Один из вариантов осуществления данного изобретения касается получения компонента I, которое включает следующие этапы, на которых:

а) переносят препараты антигенов дифтерии и столбняка вместе с гелем фосфата алюминия, солевым раствором и 2-феноксиэтанолом (2-РОЕ) в сосуд,

b) переносят PT, FHA и PRN препараты антигенов при перемешивании в вышеупомянутый сосуд для получения смеси,

c) добавляют солевой раствор и 2-РОЕ в указанный сосуд, проверяя рН вышеупомянутой смеси и регулируя его в диапазоне 6,0-7,0.

Способ дополнительно касается смешивания Hib и IPV антигенов с компонентом I вакцины данного изобретения, который включает этап, на котором переносят вышеупомянутую смесь, включающую D, Т и аР антигены, в препарат Hib антигена для получения другой смеси и затем смешивают эту смесь с препаратом IPV антигена, проверяют рН и регулируют его в диапазоне 6,0-7,0.

Данное изобретение дополнительно касается другого предпочтительного варианта осуществления данного изобретения, который обеспечивает способ производства полностью жидкой стабильной шестивалентной вакцины, включающей антигены дифтерии (D), столбняка (Т), ацеллюлярного коклюша (аР), Haemophilus influenzae (Hib), гепатита и IPV, включающий этапы, на которых:

a) получают компонент I, включающий антигены i) дифтерии (D) И) столбняка (Т) и iii) ацеллюлярного коклюша (aР),

b) получают компонент II, включающий антиген гепатита (Нер),

c) комбинируют компоненты I и II для образования смеси,

d) добавляют вышеупомянутую смесь к Hib и IPV антигенам,

с оговоркой, что D, Т и aР антигены были адсорбированы на фосфате алюминия и Нер антиген адсорбирован на гидроксиде алюминия.

Согласно другому предпочтительному аспекту данного изобретения получение компонента I включает следующие этапы, на которых:

a) переносят препараты антигенов дифтерии и столбняка вместе с гелем фосфата алюминия, солевым раствором и 2-феноксиэтанолом (2-РОЕ) в сосуд,

b) переносят препараты антигенов РТ, FHA и PRN при перемешивании в вышеупомянутый сосуд,

c) добавляют солевой раствор и 2-РОЕ в указанный сосуд, проверяют рН и регулируют его в диапазоне 6,0-7,0.

Способ дополнительно включает получение компонента II вакцины данного изобретения, который включает следующие этапы, на которых:

a) переносят гель гидроксида алюминия в сосуд,

b) переносят препарат антигена Нер в сосуд,

c) добавляют солевой раствор и препарат 2-РОЕ при перемешивании, проверяют рН и регулируют его в диапазоне рН 6,0-7,0.

Дополнительно способ касается смешивания компонента I и II вакцины данного изобретения, включающий этап, на котором переносят содержимое компонента II в компонент I для получения смеси.

Способ дополнительно включает смешивание Hib и IPV антигенов со смесью, полученной выше, который включает этап, на котором смешивают указанную выше смесь с препаратом антигена Hib для получения другой смеси и дополнительно смешивают эту смесь с препаратом антигена IPV, проверяют рН и регулируют его в диапазоне 6,0-7,0.

Согласно одному предпочтительному варианту осуществления данного изобретения перемешивание, как упоминается в любом из вышеупомянутых этапов, проводят при 150 об/мин при 25±2°С в течение от приблизительно 30 минут до 2 часов.

Следующие примеры используются для дополнительной иллюстрации данного изобретения и его преимуществ. Следующие специфические примеры представлены с пониманием того, что они предназначены для иллюстрации, не выступая в роли ограничения объема данного изобретения.

ПРИМЕР I

Этот пример дает композицию и способ производства пятивалентной вакцины согласно одному аспекту данного изобретения

А] Композиция пятивалентной вакцины согласно данному изобретению является следующей.

Каждый 0,5 мл вакцины включает следующее:

Таблица 1
КОМПОНЕНТЫКОЛИЧЕСТВО
Анатоксин дифтерии1 (DT)25 Lf
Анатоксин столбняка1 (ТТ)10 Lf
Ацеллюлярный коклюш1 (аР)комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214
Анатоксин коклюша (РТ) 25 мкг
Филаментный гемагглютинин (FHA)25 мкг
Пертактин (PRN)8 мкг
Антиген Haemophilus influenzae (Hib) b (капсулярный полисахарид)10 мкг
Инактивированный вирус полиомиелита (IPV)комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214
Тип 1 40 D единиц
Тип 2 8 D единиц
Тип 3 32 D единиц
Другие ингредиенты: комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214
Содержание алюминия 0,60 мг Аl+3 (в виде фосфата алюминия)
2-феноксиэтанол 2,5 мг
Солевой раствор q.s.
1 на фосфат алюминия

q.s. - достаточное количество

В] Способ производства пятивалентной вакцины согласно данному изобретению является следующим.

1. Процедура составления для компонента I

Препараты антигенов дифтерии и столбняка вместе с гелем фосфата алюминия, солевым раствором и 2-РОЕ переносили в сосуд с последующим добавлением препаратов антигенов РТ, FHA и PRN. Дополнительно, солевой раствор и 2-феноксиэтанол (2-РОЕ) смешивали со смесью в указанном выше сосуде; рН проверяли и регулировали так, чтобы он попадал в диапазон рН 6,0-7,0.

2. Добавление Hib b и IPV нерасфасованного препарата

Содержимое компонентов I смешивали с препаратом антигена Hib b для получения другой смеси, которую затем смешивали с препаратом антигена IPV при перемешивании для получения пятивалентной вакцины. рН проверяли и регулировали так, чтобы он попадал в диапазон 6,0-7,0.

ПРИМЕР II

Этот пример дает композицию и способ производства шестивалентной вакцины согласно одному аспекту данного изобретения

А] Композиция шестивалентной вакцины согласно данному изобретению является следующей.

Каждый 0,5 мл вакцины включает следующее.

Таблица 2
КОМПОНЕНТЫКОЛИЧЕСТВО
Анатоксин дифтерии1 (DT)25 Lf
Анатоксин столбняка1 (ТТ)10 Lf
Ацеллюлярный коклюш1 (аР)комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214
Анатоксин коклюша (РТ) 25 мкг
Филаментный гемагглютинин (FHA)25 мкг
Пертактин (PRN)8 мкг
Антиген Haemophilus (Hib) b (капсулярный поли

influenzae сахарид)
10 мкг
Поверхностный антиген гепатита (Нер) В (HBsAg)2 10 мкг
Инактивированный полиомиелита вирус (IPV) комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214
Тип1 40 D единиц
Тип 2 8 D единиц
Тип 3 32 D единиц
Другие ингредиенты: комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214
Содержание алюминия 0,60 мг Аl+3 (в виде фосфата алюминия)
0,20 мг Аl+3 в виде гидроксида алюминия)
2-феноксиэтанол 2,5 мг
Солевой раствор q.s.
1 на фосфат алюминия;

2 на гидроксид алюминия;

q.s. - достаточное количество

В] Способ производства шестивалентной вакцины согласно данному изобретению является следующим.

1. Процедура составления для компонента I

Препараты антигенов дифтерии и столбняка вместе с гелем фосфата алюминия, солевым раствором и 2- феноксиэтанолом (2-РОЕ) переносили в сосуд с последующим добавлением препаратов антигенов РТ, FHA и PRN. Дополнительно солевой раствор и 2-РОЕ смешивали со смесью в указанном выше сосуде; рН проверяли и регулировали так, чтобы он попадал в диапазон рН 6,0-7,0.

2. Процедура составления для компонента II

Гель гидроксида алюминия помещали в сосуд. Смешивали препарат антигена Нер В для получения смеси. Дополнительно, солевой раствор и препарат 2-РОЕ смешивали с указанной смесью, включающей Нер В антиген, рН проверяли и регулировали так, чтобы он попадал в диапазон рН 6,0-7,0.

3. Смешивание компонента I и компонента II

Этот этап проводили путем переноса содержимого компонента II в компонент I для получения смеси.

4. Добавление Hib b и IPV нерасфасованного препарата

Вышеупомянутую смесь, включающую компоненты I и II, смешивали с препаратом антигена Hib b для получения другой смеси, которую затем смешивали с препаратом антигена IPV при перемешивании для получения шестивалентной вакцины. рН проверяли и регулировали так, чтобы он попадал в диапазон 6,0-7,0.

ПРИМЕР III

Этот пример дает краткий обзор испытания in vivo эффективности, проводимого для антигенов дифтерии, столбняка, цельноклеточного коклюша, Haemophilus influenzae типа (Hib) b, гепатита В и инактивированного полиомиелита и данные стабильности или эффективности для них.

А] In vivo испытание эффективности, проводимое для антигенов дифтерии, столбняка, цельноклеточного коклюша, Haemophilus influenzae типа (Hib) b, гепатита В и инактивированного полиомиелита

1. Анатоксин дифтерии

Необходимый вид животного: Морские свинки
Количество животных, необходимых для 1 партии:116 (48 для испытания, 48 для эталона и 20 для LD50)
Путь введения вакцины:Подкожный
Объем инъекции:1,0 мл
Количество дней, в течение которых животные находились в клетках:28

Эффективность анатоксина дифтерии определяли на морских свинках с помощью способа контрольного заражения смертельными дозами. В этом способе три разведения каждой из анализируемой и эталонной вакцины готовили так, что среднее разведение включает ED50 дозу, которая спасает, по меньшей мере, или более чем 50% анализируемых животных. Шестнадцать морских свинок для каждого разведения анализируемой вакцины и эталонной вакцины инокулировали и через 28 дней анализируемых животных подкожно заражали токсином дифтерии, содержащим 100 LD50. Группу из двадцати морских свинок оставляли неиммунизированной для титрования токсина дифтерии и эту группу морских свинок инокулировали различными разведениями токсина дифтерии, 5 морских свинок для каждого разведения. Испытание завершали через 33 дня. Дополнительные вычисления были проведены с использованием PROBIT. Образец проходит испытание на эффективность дифтерии, если он включает комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214 30 МЕ/отдельная доза для человека.

- Анализируемая вакцина должна соответствовать линейности и параллельности эталонной вакцины.

- Доверительный предел оцененной эффективности должен находиться между 50 и 200%.

- Оцененная эффективность должна быть не менее чем 30 ME на отдельную дозу для человека.

- Предел 95% доверительного интервала оценки эффективности должен быть в пределах 50-200%, кроме того, что нижний предел 95% доверительного интервала оцененной эффективности должен быть больше чем 30 ME на дозу.

2. Анатоксин столбняка

Необходимый вид животного: Домовые мыши-альбиносы
Количество животных, необходимых для 1 партии:116 (48 для испытания, 48 для эталона и 50 для LD50)
Путь введения вакцины: Подкожный
Объем инъекции: 0,5 мл
Количество дней, в течение которых животные находились в клетках: 28

Эффективность анатоксина столбняка определяли на домовых мышах способами контрольного заражения смертельными дозами. В испытании три разведения каждой из анализируемой и эталонной вакцины готовили так, что среднее разведение включает LD50 дозу, которая спасает, по меньшей мере, или более чем 50% анализируемых животных. Группу из шестнадцати домовых мышей для каждого разведения анализируемой вакцины, а также эталонной вакцины инокулировали и через 28 дней содержания в клетке анализируемых животных подкожно заражали токсином столбняка, содержащим 100 LD50. Группу из двадцати домовых мышей оставляли неиммунизированной для титрования токсина столбняка, и инокулировали 5 мышей для 4 разведений LD 50 титрования. Испытание завершали через 33 дня. Дополнительно вычисления проводили с использованием PROBIT. Образец на испытание эффективности проходит испытание эффективности столбняка, если он включает комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214 60 МЕ/отдельная доза для человека.

- Анализируемая вакцина должна соответствовать линейности и параллельности эталонной вакцины.

- Доверительный предел оцененной эффективности должен находиться между 50 и 200%.

- Оцененная эффективность должна быть не менее чем 60 ME на отдельную дозу для человека.

Предел 95% доверительного интервала оценки эффективности должен быть в пределах 50-200%, кроме того, что нижний предел 95% доверительного интервала оцененной эффективности должен быть больше чем 60 ME на дозу.

3. Антиген ацеллюлярного коклюша (аР)

Необходимый вид животного: Домовые мыши
Количество животных, необходимых для 1 партии:24
Путь введения вакцины: Подкожный
Объем инъекции: 0,5 мл
Количество дней, в течение которых животные находились в клетках: 35

Эффективность аР антигена определяли на морских свинках с помощью способа ELISA (ферментный иммуносорбентный анализ). Были приготовлены три разведения (неразведенная, 1:5, 1:25) анализируемой вакцины. Отбирали три группы 8 домовых мышей и каждую группу иммунизировали соответствующими для нее разведениями. Каждой мыши анализируемой группы вводили подкожно инъекцию 0,5 мл разведенных вакцин. Конечный забор крови проводили на 35ый день. Образцы сыворотки анализировали на антитело против Hib с помощью способа ELISA. Образец проходит испытание аР эффективности, если > 70% мышей в анализируемой группе являлись сероконвертированными.

4. Антиген Hemophilus influenza типа b

Необходимый вид животного: Домовые мыши
Количество животных, необходимых для 1 партии:16 (8 для иммунизации, 8 служили контролем)
Путь введения вакцины:Подкожный
Объем инъекции:0 5 мл
Количество дней, в течение которых животные находились в клетках: 35

Испытание эффективности Hib b антигена проводили на домовых мышах с помощью способа ELISA. В этом испытании отбирали две группы (анализируемая и контрольная группа), каждая по 8 домовых мышей. Каждой мыши анализируемой группы подкожно вводили инъекцию 0,5 мл 1:4 разведенных вакцин и контрольную группу оставляли неинокулированной. Ревакцинирующую дозу вводили на 10ый и 20ый день, и конечный забор крови проводили на 35ый день. Образцы сыворотки анализировали на антитело против Hib с помощью способа ELISA. Образец проходит испытание эффективности Hib, если комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214 50% мышей в анализируемой группе являлись сероконвертированными.

5. Поверхностный антиген гепатита В

Необходимый вид животного: В alb С мыши
Количество животных, необходимых для 1 партии:110 (50 для образца, 50 для эталона, 10 для плацебо)
Путь введения вакцины:Интраперитонеальный
Объем инъекции: 1,0 мл
Количество дней, в течение которых животные находились в клетках: 28

Испытание эффективности поверхностного антигена гепатита В проводили на Balb/C мышах. В этом испытании готовили пять двукратных разведений каждой из эталонной и анализируемой вакцины и десять мышей были интраперитонеально инокулированы на каждое разведение. Десять мышей инокулировали разбавителем и они служили в качестве плацебо. У инокулированных мышей проводили забор крови на 28ой день инокуляции и сыворотки отделяли, внимательно отслеживая, чтобы не было гемолиза. Образцы сывороток анализировали на титр антител против гепатита В с помощью ELISA. Образец проходит испытание эффективности гепатита В, если верхний предел его относительной эффективности комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214 1.

6. Вакцина инактивированного полиомиелита (IPV)

Необходимый вид животного: Крысы Вистар
Количество животных, необходимых для 1 партии:100 (50 для анализируемой вакцины, 50 для эталонной вакцины)
Путь введения вакцины:Внутримышечный
Объем инъекции: 0,5 мл
Количество дней, в течение которых животные находились в клетках: 21

Испытание эффективности IPV проводили на RIVM ТОХ крысах. Готовили пять трехкратных разведений каждой из эталонной и анализируемой вакцины и десятерым крысам внутримышечно вводили инъекцию 0,5 мл каждого разведения. У анализируемых животных проводили забор крови через 21 день после иммунизации, и образцы сыворотки собирали, аккуратно избегая лизиса красных кровяных телец. Каждый образец сыворотки анализировали на титр антител против серотипов вируса полиомиелита типа 1, типа 2 и типа 3 с помощью реакции сывороточной нейтрализации.

Испытание является недействительным за исключением тех случаев, когда:

- средняя эффективная доза (ED50) как для анализируемой, так и для эталонной вакцин находится между наименьшей и наибольшей дозами, которые вводят животным;

- статистический анализ не показывает существенного отклонения от линейности и параллельности;

- доверительные пределы оцененной относительной эффективности попадают в диапазон от 25% до 400% оцененной эффективности.

В] Данные стабильности или эффективность антигенов в вакцине данного изобретения

Анализы были проведены, как показано в Примере III А] для всех антигенов шестивалентной вакцины Примера II. Результаты представлены в таблице ниже.

Таблица 3
Номер п/пКомпоненты Допустимые пределы Длительное исследование (5°С±3°С)
6 месяцев
1 Ацеллюлярный коклюш (аР) (Эффективность) комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214 70100%
2Hib b (Антиген капсулярного полисахарида (Эффективность)комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214 50%100%
3Поверхностный антиген гепатита (Нер) В (HBsAg) (Эффективность)комбинированная вакцина, включающая антигены дифтерии, столбняка,   ацеллюлярного коклюша, haemophilus influenzae и полиовируса,   ее применение и способ производства, патент № 2526214 1,01,18
4Инактивированный вирус полиомиелита (IPV) (Эффективность)Тип 1 Эффективность анализируемой вакцины должна быть не менее чем эталонной вакциныСоответствует
Тип 2Соответствует
Тип 3Соответствует

Таким образом, можно увидеть, что даже после длительного хранения вакцины при 5±3°С, антигены вакцины все еще эффективны/имеют иммуногенность выше допустимых пределов.

Класс A61K39/05 Corynebacterium; Propionibacterium

комбинированная вакцина с цельноклеточным коклюшем -  патент 2504398 (20.01.2014)
симбионтный штамм corynebacteriae diphtheriae tox - 108, используемый для приготовления иммуномодулятора, создающего неспецифическую резистентность против инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной природы у сельскохозяйственных животных -  патент 2477751 (20.03.2013)
пробиотический бактериальный препарат корпускулярных антигенов коринебактерий липопептидополисахаридной природы для профилактики и лечения туберкулеза, способ его получения -  патент 2468816 (10.12.2012)
способ профилактической вакцинации спортсменов против дифтерии и столбняка -  патент 2432916 (10.11.2011)
комбинированные вакцины с антигеном коклюша цельных клеток -  патент 2420315 (10.06.2011)
ферментационный способ получения дифтерийного токсина -  патент 2394914 (20.07.2010)
вакцинация менингококковыми конъюгатами -  патент 2379052 (20.01.2010)
способ вакцинопрофилактики дифтерии у взрослого населения крайнего севера -  патент 2248575 (20.03.2005)
комбинированная вакцина для иммунопрофилактики коклюша, дифтерии, столбняка и вирусного гепатита в и д -  патент 2233673 (10.08.2004)
комбинированная вакцина для иммунопрофилактики вирусного гепатита в и д, столбняка и дифтерии -  патент 2233672 (10.08.2004)

Класс A61K39/08 Clostridium, например Clostridium столбняка

способ получения гипериммунной сыворотки против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиозной диареи телят -  патент 2523389 (20.07.2014)
клостридиальный токсин netb -  патент 2474587 (10.02.2013)
применение бактерии clostridium perfringens типа с для производства вакцины -  патент 2462263 (27.09.2012)
способ лечения косоглазия с атипичной иннервацией экстраокулярных мышц -  патент 2447867 (20.04.2012)
рекомбинантные аттенуированные микроорганизмы clostridium и вакцина -  патент 2445364 (20.03.2012)
жидкая фармацевтическая композиция ботулинического токсина -  патент 2440825 (27.01.2012)
вакцина альфа токсоида с.perfringens -  патент 2434638 (27.11.2011)
одновременное, раздельное или разнесенное во времени терапевтическое применение, по меньшей мере, одного ботулического нейротоксина и, по меньшей мере, одного опиатного производного -  патент 2434637 (27.11.2011)
способ профилактической вакцинации спортсменов против дифтерии и столбняка -  патент 2432916 (10.11.2011)
вакцина ассоциированная против анаэробной энтеротоксемии и эшерихиозной диареи телят -  патент 2428202 (10.09.2011)

Класс A61K39/10 Brucella; Bordetella, например коклюша

способ лечения радиационного, химического и/или биологического поражения организма и способ получения глобулинов для лечения радиационного, химического и/или биологического поражения организма -  патент 2524612 (27.07.2014)
способ экстренной профилактики и лечения бруцеллеза -  патент 2523392 (20.07.2014)
способ дифференциальной эпизоотической оценки на бруцеллез стад крупного рогатого скота, иммунизированного живыми вакцинами из диссоциированных штаммов бруцелл -  патент 2518308 (10.06.2014)
способ получения бесклеточной вакцины для иммунопрофилактики коклюша -  патент 2504399 (20.01.2014)
способ профилактики бруцеллеза животных -  патент 2501567 (20.12.2013)
полинуклеотидная последовательность, кодирующая сконструированный белок пертактин, вектор, включающий такую последовательность, и вакцинные композиции, содержащие белок пертактина или вектор -  патент 2499046 (20.11.2013)
способ получения эритроцитарного антительного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (рнга) с целью индикации бруцелл в патматериале -  патент 2493871 (27.09.2013)
способ профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота -  патент 2491091 (27.08.2013)
способ получения бруцеллезного антигена для роз-бенгал пробы (рбп) -  патент 2488119 (20.07.2013)
аттенуированные бактерии bordetella pertussis, вакцина против возбудителя коклюша -  патент 2455024 (10.07.2012)

Класс A61K39/102 Pasteurella;Haemophilus

вакцина для защиты от haemophilus parasuis серотипа 4 у поросят -  патент 2498816 (20.11.2013)
способ биологического контроля качества живой вакцины против пастереллеза птиц -  патент 2435608 (10.12.2011)
комбинированные вакцины с антигеном коклюша цельных клеток -  патент 2420315 (10.06.2011)
живая аттенуированная бактерия pasteurella multocida, вакцина на ее основе, способ получения вакцины и применения этой бактерии для получения вакцины для защиты животных или человека -  патент 2415926 (10.04.2011)
вакцина против пастереллеза животных -  патент 2414929 (27.03.2011)
способ получения вакцины против пастереллеза животных -  патент 2405567 (10.12.2010)
способ очистки бактериального капсулярного полисахарида neisseria meningitidis или haemophilus influenzae и способ получения вакцины -  патент 2381814 (20.02.2010)
комбинированные вакцины против бактериального менингита для введения через слизистую оболочку -  патент 2378008 (10.01.2010)
вакцинная композиция, содержащая трансферрин-связывающий белок и hsf из грамотрицательных бактерий -  патент 2359696 (27.06.2009)
способ получения иммуногенной негемолитической бактерии вида actinobacillus pleuropneumoniae, бактерия вида actinobacillus pleuropneumoniae, вакцина против свиной плевропневмонии (варианты), иммуногенный и негемолитический штамм actinobacillus pleuropneumoniae (варианты) -  патент 2351360 (10.04.2009)

Класс A61K39/13 поливирус

Класс A61K39/29 вирус гепатита

вакцина на основе вирусоподобных частиц, содержащих все структурные антигены вируса гепатита с, и способ ее получения в дрожжах hansenula polymorpha -  патент 2510998 (10.04.2014)
вакцинная композиция, пригодная при инфекциях hpv и вирусом гепатита в, и способ ее получения -  патент 2509570 (20.03.2014)
способ получения рекомбинантного капсидного белка вируса гепатита е и рекомбинантная вакцина для профилактики вирусного гепатита е -  патент 2501809 (20.12.2013)
рекомбинантная вакцина для профилактики вирусного гепатита е у животных -  патент 2501568 (20.12.2013)
гидрофобные, модифицированные, полученные из pres вируса гепатита в (hbv) пептиды и их использование в качестве ингибиторов проникновения hbv и hdv -  патент 2492182 (10.09.2013)
композиция для лечения гепатита с и способ лечения гепатита с -  патент 2447899 (20.04.2012)
получение вакцин, содержащих поверхностный антиген вируса гепатита в и поверхностно-активное вещество -  патент 2444374 (10.03.2012)
иммуногенные композиции, способы получения таких композиций и плазмида, включенная в такие композиции -  патент 2442825 (20.02.2012)
иммуностимулирующая комбинация для профилактики и лечения гепатита с -  патент 2431499 (20.10.2011)
комбинированные вакцины с антигеном коклюша цельных клеток -  патент 2420315 (10.06.2011)
Наверх