ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

лечебное средство профилактики и лечения хронических заболеваний печени

Классы МПК:A61K36/21 Amaranthaceae (семейство амарантовых), например марь (лебеда), подсвекольник, цыганка, краснуха, ширица или амарант
A61K31/355  токоферолы, например витамин E
A61K31/23  кислот, имеющих карбоксильную группу, связанную с углеродной цепью из семи или более атомов углерода
A61K31/20  имеющие карбоксильную группу, связанную с ациклической цепью из семи или более атомов углерода, например стеариновая, пальмитиновая или арахидоновая кислота
A61K31/035  с ненасыщенным алифатическим радикалом
A61P1/16 для лечения печени или расстройств желчного пузыря, например противогепатитные средства, желчегонные средства, средства, способствующие растворению конкрементов
Автор(ы):, , , ,
Патентообладатель(и):Общество с ограниченной ответственностью "Русская Олива" (ООО "Русская Олива") (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2012-02-10
публикация патента:

Изобретение относится к лечебному средству профилактики и лечения хронических заболеваний печени. Указанное средство представляет собой амарантовое масло, полученное холодным прессованием зародышей и оболочек семян амаранта, которое применяется в дозе 62,5 - 250 мг/кг массы тела. Заявленное изобретение обеспечивает повышение положительного эффекта на биохимические процессы в крови и ткани печени при лечении токсического гепатита. 2 табл.

Изобретение относится к области фармакологии, а именно к гепато-протекторным препаратам и может быть использовано при разработке новых лекарственных средств растительного происхождения для коррекции цитолитического синдрома при профилактике и лечении хронических заболеваний печени.

Известен гепатопротекторный препарат Эссенциале производства "Rhone-Poulenc Rorer", США/Франция; "Natterman", Германия, в состав которого входят эссенциальные фосфолипиды (EFL) высокой степени очистки - диглицериновые эфиры холинфосфорной кислоты и ненасыщенные жирные кислоты экстракта из бобов сои. Кроме того, эссенциале содержит рибофлавин, тиамин, пиридоксин, цианокобаламин, токоферол, никотинамид и пантотеновую кислоту (Sports Wiki.ru).

Известный препарат ингибирует процессы свободнорадикального окисления (СРО) липидов, оказывает влияние на физико-химические свойства мембраны, уменьшает вязкость липидного слоя, модулирует активность мембрано-связанных ферментов. Восстанавливает функции клеточных мембран. Способствует улучшению самочувствия пациентов.

Известно использование в качестве профилактического средства при токсическом гепатите масла семян амаранта, полученное экстракционным способом в дозе 0,5 мл на кг массы тела (Близнецова Г.Н., Рецкий М.И., Полякова-Семенова Н.Д. и др. Роль процессов свободнорадикального окисления в механизме гепатопротекторного действия масла из семян амаранта // Биомедицина. 2006. № 2. С.105-112). Установлено, что масло оказывает выраженное гепатопротекторное действие, однако дозы для лечения заболеваний печени не установлены.

Кроме того, экстракционный способ получения масла из семян амаранта не гарантирует химической чистоты, содержащихся в нем фосфолипидов, токоферола, ненасыщенных жирных кислот, сквалена, фитостеринов, эфиров стеринов, и снижает эффективность лечебного воздействия.

Задача изобретения - расширение ассортимента лекарственных средств растительного происхождения и создание отечественного препарата для профилактики и лечения хронических заболеваний печени.

Технический результат - повышение положительного эффекта на биохимические процессы в крови и ткани печени при лечении токсического гепатита.

Технический результат достигается тем, что в лечебном средстве профилактики и лечения хронических заболеваний печени, представляющее собой амарантовое масло, последнее получено холодным прессованием зародышей и оболочек семян амаранта, которое применяется в дозе 62,5-250 мг/кг массы тела.

Амарантовое масло, полученное холодным прессованием содержит фосфолипиды, токоферол, ненасыщенные жирные кислоты, сквален, фито-стерины и эфиры стеринов при следующем соотношении компонентов, мас.%: фосфолипиды 7-9, токоферол 0,3, ненасыщенные жирные кислоты 51,25, сквален 3-12, фитостерины 2, эфиры стеринов 1,7. Влияние последних в виде амарантового масла, которое содержится в лекарственном средстве в дозе 62,5-250 мг/кг массы тела изучено в динамике развития экспериментального токсического гепатита (ЭТГ).

Препаратом сравнения для лекарственного действия являлось средство растительного происхождения, а именно, эссенциале в дозе 80 мг/кг.

Эксперимент выполнен на 30 белых крысах-самцах массой 180-250 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария Воронежской государственной медицинской академии им. Н.Н. Бурденко.

Опыты проводились в весенний период. В каждой серии опытов использовали крыс одной возрастной группы, предварительно голодавших 18-20 ч. Затравку животных осуществляли введением CCl4 на протяжении 1 суток, что позволяло добиться поражения паренхимы печени. Однодневное токсическое поражение печени формировали путем подкожного ведения 50% раствора CCL4 на персиковом масле в дозе 0,4 мл на 100 г массы животного однократно. В процессе моделирования экспериментального гепатита смертность животных не наблюдалась.

Данная схема и доза CCl4 считаются достаточными для создания полноценной биохимической картины токсического поражения паренхимы печени, а также дают возможность проследить за направленностью индуцированного патологического процесса.

Перед проведением терапии оценивали биохимические индексы крови, а также гистологические и гистохимические срезы печени, почек и надпочечников, на предмет признаков гепатита, определяли биохимические показатели: концентрацию малонового диальдегида (МДА), АсАт, АлАт, гексозы, связанные с белком и тиоловые пробы.

У животных интактных и с ЭТГ применяли масло зародышей и оболочек семян амаранта (далее - Амарантовое масло), содержащее фосфолипиды, токоферол, ненасыщенные жирные кислоты, сквален, фитостерины и эфиры стеринов при следующем соотношении компонентов, мас.%: фосфолипиды 7-9, токоферол 0,3, ненасыщенные жирные кислоты 51,25, сквален 3-12, фитостерины 2, эфиры стеринов 1,7.

Контрольным животным масло вводили через рот при помощи металлического зонда в количестве 62,5, 125 и 250 мг/кг, а животным опытной группы - за 1 ч до введения CCl4. Забой животных контрольной и опытной групп осуществляли методом одномоментной декапитации под хлороформным наркозом через 1 сутки от начала затравки соответственно. Исследование проводили в сравнении с раствором Эссенциале, вводимым в желудок в дозе 80 мг/кг.

Развитие ЭТГ подтверждали биохимическим и морфологическим методами исследования. Биохимическому исследованию подвергалась сыворотка, полученная путем центрифугирования цельной крови в течение 15 мин при 3000 об/мин, спектрофотометрическим методом.

Для морфологического исследования образцы ткани доли печени размером 3×3×2 мм, а также почек, сердца, надпочечников и фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Парафиновые срезы толщиной 4-5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином и по Ван-Гизону.

После однократного введения CCl4 у экспериментальных животных развивалось токсическое поражение печени, что подтверждалось:

- повышением активности по отношению к исходному уровню ферментов-маркеров печеночного цитолиза АлАТ и АсАТ соответственно на 143,1% и 83,5% (р<0,05);

- увеличением в сыворотке крови общиего билирубина на 63,8%. Это говорит или о распаде эритроцитов и гемоглобин или о нарушение в системе переноса прямого билирубина из печеночной клетки в желчь;

- увеличением общих гексоз на 19,46%, что свидетельствует о воспалении;

- уменьшением свободныех SH-групп 9,4%, очевидно связанное со снижением активности пероксидаз;

- увеличение концентрации малоновыого дальдегида по сравнению с исходной веичиной на 25%, что свидетельствует о об активации ПОЛ и деградации полиненасыщенных жиров реактивными формами кислорода.

Однократное подкожное введение крысам Эссенциале в дозе 0,085 мг/кг вызывало по отношению к контролю:

- снижение активности АсАТ, АлАТ практически до исходного туровня, то есть соответственно на 64,5% и 52,2%;

- увеличение в сыворотке крови общего билирубина на 13% по отношению к контролю;

- уменьшение общих гексоз на 22,5%.

Морфологически сохранялось дольковое строение печени, преобладала жировая крупнокапельная центробулярная форма дистрофии, мелкокапельная наблюдалась при переходе к относительно сохраненной перипортальной зоне.

В таблице 1 представлены биохимические показатели при гепатите вызванном CCl4 на фоне применения в различных дозах масла, выделенного холодным прессованием зародышей и оболочек семян амаранта, при следующем соотношении компонентов, мас.%: фосфолипиды 7-9, токоферол 0,3, ненасыщенные жирные кислоты 51,25, сквален 3-12, фитостерины 2, эфиры стеринов 1,7.

лечебное средство профилактики и лечения хронических заболеваний   печени, патент № 2526172

В экспериментах использовали эритроциты крови белых беспородных крыс, которую забирали из хвостовых вен путем резекции кончика хвоста. Кровь самотеком собирали в пробирку, содержащую 0,1 мл гепарина (5000 ЕД в 1 мл) из расчета на 1-1,5 мл крови. Кровь центрифугировали 10 минут при 3000 об/мин. Затем убирали надосад очную жидкость и трижды промывали при тех же условиях. Суспензию чистых эритроцитов готовили с использованием прибора ПЭ5400 ВИ, концентрацию контролировали спектрофотометрически. Кислотную резистентность эритроцитов оценивали с использованием метода регистрации кислотных эритрограмм. Гемолиз индуцировали 0,1 М соляной кислотой. Эритрограммы регистрировали после предварительного перорального введения исследуемых веществ (за сутки однократно) с использованием металлического зонда, сконструированного д.м.н., проф. В.А. Никалаевским. За час до забора крови в/б вводили CCl 4 в дозе 0,4 мл/кг в виде 50% раствора на оливковом масле. Эритрограммы оценивали по показателям Kmax, t лат, Gсф, G50, данные которых представлены в таблице 2.

Таблица 2
ПоказателиKmax, отн.ед. Gсф, %tлат , СG50, %
контроль5.777±0.93 -2.6±1.3125±45.3 256,7±37,9
Амарантовое масло, 62,5 мг/кг4.455±0.23; t=2.4; Р=0.07 -1.25±0.95; t=-1.5; p=0.2 65±31.2 t=1,87; Р=0.13235±8,7; t=0.96; P=0.39
Амарантовое масло, 125 мг/кг5.26±0.97; t=0.65; P=0.55 -1.2±1.22; t=-1.4; Р=0.23 105±30; t=0.6; Р=0.56246.7±15.3: t=0.42; P=0.7
Амарантовое масло, 250 мг/кг4.4±0.71; t=2.04; P=0.111 -2.65±0.3; t=0.01; Р=0.99 105±21.2; t=0.55; Р=0.61230±40; t=0.8; Р=0.45
Эссенциале Н, 80 мг/кг5.89±0.37; t=-0.19; Р=0.86 -0.48±1.1 t=-2.2; Р=0.09 80±48.2; t=1.17; Р=0.31228.3±2.9; t=1.29; P=0.27
ССl4 8,114±0.0005; t=-4.4; Р=0.01 -0.45±0.096; t=-2.9; P=0.04 50±17.3; t=2.65; Р=0.05205±8.7; t=3.7; P=0.02

Анализ Kmax , который отражает долю эритроцитов, одновременно вступающих в стадию собственно гемолиза, показал, что скорость гемолиза эритроцитов основной среднестойкой популяции эритроцитов при введении Амарантового масла в дозах 62,5-125-250 мг/кг и эссенциале в дозе 80 мг/кг достоверно не отличается от контрольного опыта.

Однако предварительное введение Амарантового масла в дозах 62,5-600-1200 мг/кг в среднем способствует снижению K max относительно контрольного опыта на 22,9%, 8,8%, 23,8% соответственно, в случае применения эссенциале перед введением CCl4 доля эритроцитов, одновременно вступающих в стадию собственно гемолиза, была выше на 2% по сравнению с эритроцитами животных, не получавших исследуемых веществ. Однократное в/б введение CCl4 в дозе 0,4 мл/кг за 1 час до регистрации эритрограмм сопровождалось достоверным увеличением скорости гемолиза эритроцитов среднестойкой популяции на 40,6% относительно контрольного опыта.

Таким образом, на основании экспериментов in vivo установлено, что CCl4 при указанном способе и дозе введения вызывает повреждение цитоплазматической мембраны основной популяции эритроцитов, возможно за счет увеличения окислительных процессов в мембране клеток. Предварительное введение эссенциале и Амарантового масла способствует ослаблению повреждающего действия CCl4, возможно, за счет доказанных антиоксидантных свойств этих фармакологически активных веществ, которые реализуются увеличением порога проницаемости мембран для ионов водорода относительно применения CCl4 в отдельности.

При введении амарантового масла в дозах 62,5-125-250 мг/кг значение Gсф достоверно не отличалось от контроля. Однако в дозах 62,5-125 мг/кг доля сфероцитов по средним значениям была в два раза менее контроля, в дозах 250 мг/кг практически равна ему.

При введение Эссенциале в дозе 80 мг/кг тенденция к уменьшению Gсф более выражена (Р=0,09), о чем свидетельствует уменьшение доли эритроцитов, одновременно находящихся в стадии сфероцитоза на 84,6% относительно контроля. При введение CCl 4 Gсф достоверно (Р<0,05) менее контроля на 73%.

Таким образом, CCl4 снижает кислотную резистентность эритроцитов низкостойкой популяции на 73% по отношению к контролю, а предварительное применение амарантового масла значительно предотвращает непосредственное повреждающее действие CCl4 на мембраны «старых» эритроцитов.

tлат кислотного гемолиза, отражающая продолжительность во времени латентного периода гемолиза, при использовании Амарантового масла в дозах 62,5-125-250 мг/кг и Эссенциале в дозе 80 мг/кг достоверно не отличалось от контроля и находилось примерно на одном уровне с контролем. Однако в/б введение CCl4 в дозе 0,4 мл/кг, сопровождалось сокращением латентного времени гемолиза на 60% относительно контроля.

Таким образом, применение CCl4 в отдельности вызывает ускорение перехода эритроцитов их стадии сферуляции в стадию собственно гемолиза более чем в два раза, тогда как предварительное введение амарантового масла и эссенциале замедляют развитие стадии собственно гемолиза и приближают его к контрольному уровню.

Анализ время наступления 50% гемолиза (G50,%) показал, что амарантовое масло во всех дозах и Эссенциале вызывают замедление развития гемолиза эритроцитов основной среднестойкой популяции относительно применения CCl4 в отдельности. Это нашло свое отражение в том, что при предварительном внутрижелудочном введение Амарантового масла в дозах 62,5-125-250 мг/кг и Эссенциале в дозе 80 мг/кг перед применением CCl4, значение изучаемого показателя практически и достоверно не отличались от таковых у контрольной группы животных, которым внутрижелудочно вводился однократно физиологический раствор NaCl, а введение CCl4 вызывало уменьшение времени 50% гемолиза на 20,1% относительно контроля.

Исходя из всего вышеперечисленного установлено, что в условиях конкретного эксперимента in vivo профилактическое применение амарантового масла в дозах 62,5-125-250 мг/кг и эссенциале в дозе 80 мг/кг способствует увеличению кислотной резистентности эритроцитов на фоне введения CCl4, ослабляя непосредственное повреждающее действие последнего на эритроцитарные мембраны. Это связано с доказанными антиоксидантными свойствами указанных веществ. Кроме того, имеет место быть взаимодействие с белково-липидными комплексами мембран клеток, что приводит к изменению структурно-функциональных свойств эритроцитарных мембран и реализуется в снижение проницаемости мембран для ионов Н+ относительно применения CCl 4 в отдельности.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Лечебное средство профилактики и лечения хронических заболеваний печени, представляющее собой амарантовое масло, отличающееся тем, что последнее получено холодным прессованием зародышей и оболочек семян амаранта, которое применяется в дозе 62,5-250 мг/кг массы тела.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2526172

patent-2526172.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K36/21 Amaranthaceae (семейство амарантовых), например марь (лебеда), подсвекольник, цыганка, краснуха, ширица или амарант

Патенты РФ в классе A61K36/21:
способ приготовления полифенольных экстрактов из листьев шпината -  патент 2519640 (20.06.2014)
способ получения средства, обладающего нефропротекторной активностью -  патент 2505309 (27.01.2014)
мазь для лечения при обморожениях -  патент 2478368 (10.04.2013)
средство, нормализующее митохондрии печени -  патент 2470655 (27.12.2012)
способ прерывания беременности у реципиенток почечного аллотрансплантата -  патент 2438682 (10.01.2012)
способ профилактики и лечения угрозы прерывания беременности у женщин с миомой матки согласно новому взгляду на ее этиопатогенез -  патент 2424817 (27.07.2011)
противоопухолевое средство -  патент 2377008 (27.12.2009)
средство для повышения остроты зрения -  патент 2350345 (27.03.2009)
способ коррекции вегетативного дисбаланса у детей -  патент 2294754 (10.03.2007)
лечебно-профилактический комплекс "бальзам долголетие" общеукрепляющего и тонизирующего действия (варианты) -  патент 2277927 (20.06.2006)

Класс A61K31/355  токоферолы, например витамин E

Патенты РФ в классе A61K31/355:
улучшение памяти у пациентов с оценкой 24-26 баллов по краткой шкале оценки психического статуса -  патент 2529815 (27.09.2014)
способ персонифицированной профилактики эстрогензависимых заболеваний у здоровых женщин и женщин с факторами сердечно-сосудистого риска в возрасте 45-60 лет -  патент 2527357 (27.08.2014)
мазь с витамином а, восстанавливающая кожу и препятствующая ее избыточному ороговению -  патент 2527333 (27.08.2014)
способ лечения пациентов с заболеваниями пульпы зуба и периодонта -  патент 2526961 (27.08.2014)
способ коррекции нейротоксического действия дапсона, в эксперименте -  патент 2525180 (10.08.2014)
способ комплексного лечения хронического эндометрита у коров -  патент 2524623 (27.07.2014)
лекарственный препарат в суппозиториях для лечения инфекционно-воспалительных заболеваний, вызванных вирусом простого герпеса 1-го типа и цитомегаловирусом и способ лечения им детей -  патент 2521272 (27.06.2014)
комбинация ликопина, полифенола и витаминов для ухода за кератиновыми материалами -  патент 2517132 (27.05.2014)
способ лечения мужского бесплодия, обусловленного аутоиммунными реакциями против сперматозоидов -  патент 2517061 (27.05.2014)
способ повышения продуктивности цыплят-бройлеров -  патент 2514670 (27.04.2014)

Класс A61K31/23  кислот, имеющих карбоксильную группу, связанную с углеродной цепью из семи или более атомов углерода

Патенты РФ в классе A61K31/23:
жировая эмульсия для искусственного питания тяжелобольных, нуждающихся в интенсивной терапии -  патент 2528108 (10.09.2014)
жирные кислоты и глицериды со средней длиной цепи в качестве нефропротективных средств -  патент 2519215 (10.06.2014)
композиции и способы усиления когнитивной функции -  патент 2507742 (27.02.2014)
композиции производных стильбеновых полифенолов и их применение для борьбы с патологиями и со старением живых организмов -  патент 2491063 (27.08.2013)
лактилаты для предупреждения и лечения инфекций, вызванных грамположительными бактериями у животных -  патент 2484818 (20.06.2013)
способ коррекции дисбиоза влагалища при метаболическом синдроме -  патент 2484669 (20.06.2013)
липидная композиция для лечения желудочно-кишечных нарушений и активации развития и созревания кишечника -  патент 2469545 (20.12.2012)
композиция для получения косметических и лекарственных эмульсий и способ ее получения -  патент 2460511 (10.09.2012)
вязкий лекарственный препарат для инъекций, содержащий этанол и жирорастворимое, непроницаемое для рентгеновского излучения соединение -  патент 2442569 (20.02.2012)
мазь для лечения арахнозов животных -  патент 2368377 (27.09.2009)

Класс A61K31/20  имеющие карбоксильную группу, связанную с ациклической цепью из семи или более атомов углерода, например стеариновая, пальмитиновая или арахидоновая кислота

Патенты РФ в классе A61K31/20:
жирные кислоты и глицериды со средней длиной цепи в качестве нефропротективных средств -  патент 2519215 (10.06.2014)
ранозаживляющий препарат -  патент 2517065 (27.05.2014)
применение 2-гидроксипроизводных полиненасыщенных жирных кислот в качестве лекарственных препаратов -  патент 2513995 (27.04.2014)
питательная композиция для содействия здоровому развитию и росту -  патент 2508121 (27.02.2014)
композиции и способы усиления когнитивной функции -  патент 2507742 (27.02.2014)
питательная композиция, способствующая здоровому развитию и росту -  патент 2501553 (20.12.2013)
бронхолитическое средство на основе простагландина -  патент 2500397 (10.12.2013)
распадающаяся во рту композиция, содержащая полиненасыщенные жирные кислоты, не имеющая неприятного запаха или вкуса -  патент 2493842 (27.09.2013)
композиция для регулирования прохождения катализируемых липазой реакций -  патент 2491057 (27.08.2013)
способ лечения парвовирусной инфекции в19 у детей раннего возраста -  патент 2487708 (20.07.2013)

Класс A61K31/035  с ненасыщенным алифатическим радикалом

Класс A61P1/16 для лечения печени или расстройств желчного пузыря, например противогепатитные средства, желчегонные средства, средства, способствующие растворению конкрементов

Патенты РФ в классе A61P1/16:
гепатопротекторное средство из морских водорослей -  патент 2528898 (20.09.2014)
применение пептида актг (4-7)-пгп гепатопротекторного воздействия -  патент 2528741 (20.09.2014)
новый агонист бета рецептора тиреоидного гормона -  патент 2527948 (10.09.2014)
способ ведения беременности у женщин с избыточной массой тела -  патент 2527910 (10.09.2014)
способ лечения жирового гепатоза кошек -  патент 2527700 (10.09.2014)
способ гепатопротекции апи-фитокомпозицией -  патент 2524797 (10.08.2014)
растворимые во рту и/или шипучие композиции, содержащие по меньшей мере один s-аденозилметионин (sam) -  патент 2524645 (27.07.2014)
экстракт семян fraxinus excelsior и его терапевтическое применение -  патент 2523905 (27.07.2014)
способ экспериментальной терапии гепатита -  патент 2522942 (20.07.2014)
способ синтеза производного эфира и глицирретиновой кислоты и соединение сложного эфира дезоксиглицирретиновой кислоты -  патент 2522455 (10.07.2014)


Наверх