ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

соединения азаазулена

Классы МПК:C07D401/14 содержащие три или более гетероциклических кольца
C07D403/04 связанные непосредственно
C07D403/14 содержащие три или более гетероциклических кольца
C07D405/14 содержащие три или более гетероциклических кольца
C07D413/14 содержащие три или более гетероциклических кольца
C07D471/04 орто-конденсированные системы
C07D487/04 орто-конденсированные системы
A61K31/33  гетероциклические соединения
A61P35/00 Противоопухолевые средства
Автор(ы):, , , ,
Патентообладатель(и):ИНДАСТРИАЛ ТЕКНОЛОДЖИ РЕСЕРЧ ИНСТИТУТ (TW)
Приоритеты:
подача заявки:
2010-04-29
публикация патента:

Описывается конкретный перечень разнообразных новых азаазуленовых соединений, содержащих 6,5-конденсированный гетероцикл индольного типа, бензимидазольного типа, пуринового типа, 3Н-имидазо[4,5-b]пиридин, 3Н-имидазо[4,5-с] пиридин т.д., которые могут быть изображены общей формулой (I).

соединения азаазулена, патент № 2524202

где R1 - =О; R2- Н или диэтиламиноС2-4алкил; R3-R7 - Н; другие переменные в этой формуле (I) отражены в конкретных структурных формулах описываемых соединений. Также описывается фармацевтическая композиция, их содержащая. Соединения обладают противоопухолевой активностью и могут быть использованы для лечения рака, такого как рак груди, рак легких, рак поджелудочной железы, рак толстой кишки острая миелоидная лейкемия. 2 н.и 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 6 табл., 14 пр.

Рисунки к патенту РФ 2524202

соединения азаазулена, патент № 2524202

Перекрестные ссылки

Настоящая заявка заявляет приоритет на предварительную заявку США № 61/173,883, поданную 29 апреля 2009 и озаглавленную «Новые соединения азаазулена, обладающие множественными ингибиторными активностями в отношении киназы»; ее содержание включено здесь полностью в виде ссылки.

Предпосылки настоящего изобретения

Область применения настоящего изобретения

Настоящее изобретение касается медицины, в частности соединений азаазулена, которые модулируют активность протеинкиназы (PKs) и/или лечат рак.

Описание родственной технологии

Протеинкиназы (PKs) представляют собой ферменты, которые катализируют фосфорилирование специфических остатков тирозина, серина или треонина в клеточных протеинах. Указанные протеинкиназы (PKs) являются медиаторами трансдукции (преобразования) клеточных сигналов в такие регулирующие функции клеток, как пролиферация, дифференциация, рост, клеточный цикл, клеточный метаболизм, жизнеспособность клеток, апоптоз клеток, устранение повреждений ДНК, подвижность клеток и их ответ на микросреду. Дисрегулируемая активность PKs является частой причиной таких заболеваний, как ангиогенезис, рак, рост опухолей, метастазы опухолей, артериосклероз, возрастная дегенерация желтого пятна, диабетическая ретинопатия. воспалительные заболевания и/или заболевания, вызванные паразитами.

PKs можно разделить на 2 класса - протеинтирозинкиназы (PTKs) и серин/треонинкиназы (STKs). Протеинтирозинкиназы, которые катализируют передачу гамма-фосфата АТФ к остаткам тирозина в протеиновых субстратах, являются одним из ключевых ковалентных изменений, происходящих в микроклеточных организмах как результат внеклеточной связи в процессе эмбриогенеза и защиты зрелых тканей. Фосфорилирование тирозиновых остатков модулирует ферментную активность PTKs и восстановление нижележащей сигнальной системы протеинов. В клетках представлено 2 класса PTKs: трансмембранные рецепторы PTKs и нерецепторные PTKs. PTKs представляют собой главный компонент путей передачи сигналов клеток, каталитическая активность PTKs четко регулируется. Нерегулируемая активация этих ферментов через такие механизмы, как точечные мутации и избыточная экспрессия могут привести к различным формам рака, а также к состоянию злокачественной пролиферации. Важная роль PTKs для состояний здоровья или болезни также подчеркивается наличием аберраций в сигнальной системе PTK, имеющей место при воспалительных заболеваниях и диабете. Рецепторы фактора роста, обладающие РТК-активностью, известны как рецепторы тирозинкиназы (RTKs). Они включают большое семейство трансмембранных рецепторов с многообразной биологической активностью. Внутриклеточные домены RTKs можно разделить на 2 класса: на домены, содержащие растяжку аминокислот, отделяющих домен киназы, и на такие, в которых домены киназы непрерывны. Активация киназы достигается связыванием лиганда с внеклеточным доменом, который индуцирует димеризацию или олигомеризацию рецепторов. Активируемые таким образом рецепторы способны к автофосфорилированию остатков тирозина вне каталитического домена, которое происходит путем перекрестного фосфорилирования. Результатами такого автофосфорилирования являются стабилизация конформации активного рецептора и создание фосфотирозиновых стыковочных сайтов для протеинов, преобразующих сигналы внутри клетки. Сигнальная система протеинов, которые связаны с внутриклеточным доменом рецептора тирозинкиназы зависимым от фосфотирозина образом, включают: RasGAP, PI3-киназу, фосфолипазу C, фосфотирозинфосфатазу SHP и адаптор протеинов, такой как She, Grb2 и Crk.

ERFR - рецептор эпидермального фактора роста - принадлежит к семейству рецептора тирозинкиназы млекопитающих, он состоит из 4 членов ERFR (ErB1), ErB2, ErB3 и ErB4. ERFR представляет собой 1186 аминокислотный остаток трансмембранного гликопротеина. Он содержит внеклеточный лигандсвязывающий домен, внутриклеточный домен тирозинкиназы и СООН терминальную область, содержащую сайты автофосфорилирования. Связывание специфичных лигандов (таких как EGF, трансформирующий фактор роста, бета-целлулин, гепаринсвязывающий EGF, эпирегулин или амфирегулин) приводит к фосфорилированию большого количества тирозиновых остатков на COOH-терминальном хвосте. При этом запускаются в действие клеточные сигнальные пути, которые регулируют фундаментальные клеточные процессы типа пролиферации, миграции, дифференциации и продолжительность существования. ERFR обладает избыточной экспрессией во многих типах опухолевых клеток типа клеток мочевого пузыря, легких, желудка, молочной железы, мозга, головы и шеи, шейки матки, яичника, эндометрия и т.д. Аномально высокая активность EGFR может быть характеристикой немелкоклеточного рака легких, молочной железы, яичника, мочевого пузыря, простаты, слюнных желез, поджелудочной железы, эндометрия, немелкоклеточного колоректального рака, рака почки, рака шеи и головы, а также мультиформной глиобластомы. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к EGFR, может быть использован для лечения раковых заболеваний, имеющих аномально высокий уровень активности киназы EGFR, а также для лечения заболеваний с нарушениями киназы EFGR.

Одно из подсемейств рецепторов тирозинкиназы (RTK) называют группой производного рецептора фактора роста тромбоцитов (PDGFR), которая включает PDGFR-альфа, PDGFR-бета, CSFIR, c-KIT и c-fms. Эти рецепторы состоят из гликозилированных внеклеточных доменов, составленных из различного количества иммуноглобулиноподобных петель, а также из внутриклеточного домена, в котором домен тирозинкиназы прерывается последовательностями неродственных аминокислот. Сигналы PDGFR индуцируют экспрессию проангиогенных сигналов в клетки эндотелия, стимулируя в дальнейшем опухолевый ангиогенезис. Сигнальный путь PDGFR может играть важную роль в пролиферации клеток, миграции клеток и ангиогенезисе, а также может опосредовать высокое давление интерстициальной жидкости в опухолях.

Другой группой, которую из-за ее схожести с подсемейством PDGFR иногда относят к последней группе, является подсемейство рецептора киназы печени эмбриона (flk). Предполагают, что эта группа построена из вкладки домена киназы - рецептора киназы-1 печени эмбриона (KDR/FLK-1, VEGF-R2), flk-1R, flk-4 и семейства, подобного тирозинкиназе (flk-1). Аномально высокая активность PDGFR может быть характеристикой рака стромы желудка, мелкоклеточного рака легкого, мультиформной глиобластомы и рака простаты. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к PDGFR, может быть использован для лечения раковых заболеваний, имеющих аномально высокий уровень активности киназы PDGFR, а также для лечения заболеваний с нарушениями киназы PDFGR.

FLT-3 представляет собой класс III рецепторов тирозинкиназы (RTK), структурно относящийся к PDGFR и колониестимулирующему фактору 1 (CSF). Эти рецепторы тирозинкиназы содержат во внеклеточной области 5 иммуноглобулиноподобных доменов, а также внутриклеточный домен тирозинкиназы, расщепляемый надвое путем специфического гидрофильного внедрения. Экспрессия FLT-3 была описана на CD34-позитивных клетках спинного мозга, соответствующих мультипотенциальным, миелоидным и B-лимфоидным клеткам-предшественникам, и на клетках моноцитов. Экспрессия FLT-3 ограничена клетками печени эмбриона, обладающими высокими уровнями экспрессии CD34. Функция рецептора FLT-3 может быть определена по активности его лиганда FL. FL представляет собой рано действующий фактор, он поддерживает жизнеспособность, пролиферацию и дифференциацию примитивных кроветворных клеток-предшественников. Связывание лиганда с FLT-3 способствует димеризации рецептора и последующей передаче сигнала путем фосфорилирования многочисленных протеинов цитоплазмы, включая SHC, SHP-2, SHIP, Cb1, Cb1-b, Gab1 и Gab2, а также активации нескольких путей передачи сигналов типа Ras/Raf/MARK и каскадов PI3 киназы. Внутренняя дупликация тандема (ITD) и/или вставки и (редко) делеции в FLT-3 гене в 20-25% случаев вовлечены в острую миелоидную лейкому (AML). Такая дуплицированная последовательность принадлежит экзону 11, но иногда включает интрон 11 и экзон 12. Наиболее часто используемой номенклатурой является FLT3-ITD. Более адекватным, ввиду сильной степени гетерогенности молекулярной структуры, представляется термин FLT3-LM (длинные мутации). Описано также, что он вовлечен в 5-10% стойкую анемию с миелодиспластическим синдромом (MDS) при избытке бластов (RAEB 1 и RAEB 2), а в редких случаях - в острую лимфобластную анемию (ALL).

Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к FLT-3, может быть использован для лечения раковых заболеваний, имеющих аномально высокий уровень активности киназы FLT-3, а также для лечения заболеваний с нарушениями киназы FLT-3.

C-KIT, SCFR (рецептор фактора роста стволовых клеток, Stem Cell Factor Receptor) известен как рецептор III типа тирозинкиназы, структурно относящийся к CSF-1R, PDGFR и FLT-3, содержащим внеклеточный домен с 5 Ig-подобными петлями, трансмембранный домен с высокой степенью гидрофобности, а также внутриклеточный домен с активной тирозинкиназой, расщепленной вставкой киназы (KI) в АТФ-связывающую область и в домен фосфотрансферазы. C-KIT экспрессирован на мембране плазмы клетки в кроветворных стволовых клетках, тучных клетках, меланоцитах и на клеточных линиях зародышевых клеток. Рецептор SCF/MGF, обладающий активностью протеинтирозинкиназы (РТК), связывая лиганд SCF, индуцирует димеризацию рецептора, автофосфорилирование и преобразование сигнала посредством молекул, содержащих 8Н2-домен. При аномальной экспрессии у большинства пациентов выявляется гиперплазия тучных клеток в спинном мозге, печени, селезенке, лимфоузлах, желудочно-кишечном тракте и коже, и усиление функции мутации. Признается, что на клинические характеристики роста недоброкачественных кроветворных клеток оказывает влияние время, расположение эпизодов мутации, а также количество ассоциированных патологических изменений. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к c-KIT, может быть использован для лечения раковых заболеваний, имеющих аномально высокий уровень активности киназы c-KIT, а также для лечения заболеваний с нарушениями киназы c-KIT.

Другим членом семейства рецепторов фактора роста тирозинкиназы является подгруппа рецептора сосудисто-эндотелиального фактора роста (VEGRF). VEGRF представляет собой димерный гликопротеин, аналогичный PDGFR, но обладающий другими биологическими функциями и другой специфичностью к клеткам-мишеням in vivo. В частности, в настоящее время полагают, что VEGRF играет существенную роль в васкулогенезе и ангиогенезе. Ангиогенез существенен для роста и жизнеспособности опухолей. Различаются 3 рецептора VEGRF - VEGRF-1, -2 и -3. Каждый из них по отдельности вносит свой вклад в процесс ангиогенеза. Полагают, что VEGRF-1 играет роль в связывании VEGF с VEGRF-2 в процессе ангиогенеза. VEGRF-2 (KDR) стимулирует пролиферацию, миграцию и жизнеспособность клеток эндотелия в процессе ангиогенеза, и его считают рецептором, важным для ангиогенеза. VEGRF-3 стимулирует пролиферацию, миграцию и жизнеспособность клеток эндотелия в процессе лимфагиогенеза, который в свою очередь ускоряет метастазирование. Несмотря на эти кажущиеся различимыми роли, все VEGRF до некоторой степени обладают перекрывающимися функциями, приводя к существенной избыточности. Поэтому более полное подавление ангиогенеза может гарантировать ингибирование всех идентифицированных рецепторов VEGF. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный по отношению к VEGRF, может быть использован для лечения солидных опухолей и заболеваний, связанных с сосудистыми нарушениями.

c-Met (рецептор фактора роста гепатоцитов) представляет собой обладающий высоким сродством рецептор HGF/SF, мультифункционального цитокина. При связывании с лигандом MET димеризует и трансфосфорилирует остатки тирозина в C-терминальном домене, который затем взаимодействует с элементами различных путей передачи сигнала. Они включают ассоциированное с Grb-2 связующее 1, фосфоиноситид 3' киназу и c-Src. Было показано, что в физиологичных условиях в зависимости от клетки-мишени передача сигнала MET-HGF/SF оказывает воздействие на большое количество веществ с биологической активностью. Эта активность меняется от пролиферации клеток до формирования клеток (морфогенез) и их подвижности. Координация этих разнообразных активностей составляет генетическую программу инвазивного роста, делающую возможным разветвленный морфогенез (образование эпителиальных тубулярных структур), миграцию миобластов и разветвление аксонов. MET/HGF клетки-мишени включают клетки эпителия и мезенхимальные клетки, кроветворные клетки, миобласты, спинальные двигательные нейроны. Передача сигнала MET-HGF/SF также важна для нормального развития: эмбрионы мыши, обладающие нулевой мутацией в обоих HGF аллелях, погибают в середине срока беременности и демонстрируют дефектное формирование печени. MET и его лиганд - фактор роста гепатоцитов/фактор рассеяния (HGF/SF) - экспрессированы в многочисленные ткани, хотя преимущественно - в клетки эпителия и мезенхимальные клетки соответственно. MET амплифицирован и обладает избыточной экспрессией в многие типы опухолей, включая опухоли почек, щитовидной железы, поджелудочной железы и остеосаркому. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к с-МЕТ, может быть использован для лечения раковых заболеваний, имеющих аномально высокий уровень активности киназы с-МЕТ, а также для лечения заболеваний с нарушениями киназы с-МЕТ.

RET представляет собой рецептор тирозинкиназы, лигандами которого являются нейротропные факторы глиальной клеточной линии, производными семейства нейротропных факторов (GDNF). Активация RET опосредована различными рецепторами гликозилфосфатидил-инозитола. У человека выявлены 3 изоформы RET - длинная изоформа (RET 51):1114 аминокислот, средняя изоформа (RET 43): 1106 аминокислот и короткая изоформа (RET 9): 1072 аминокислоты. В основном RET экспрессирована в опухоли с исходным нервным валиком - медуллярную тироидную карциному, феохромоцитому и нейробластому. У эмбриона человека RET экспрессирована в популяцию клеток мозга с нервным валиком, а также в развиваемые нервную и урогенитальную системы. Экспрессия RET обнаруживается в некоторых клеточных линиях с нервным валиком, селезенке, тимусе, лимфоузлах, слюнных железах, а в последнее время - в здоровой тироидной ткани, аденоме щитовидной железы, а также как в папиллярных, так и в фоликуллярных неопластах щитовидной железы. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к RET, может быть использован для лечения раковых заболеваний, имеющих аномально высокий уровень активности киназы RET, а также для лечения заболеваний с нарушениями киназы RET.

c-ABL (изменяемый гомолог вирального онкогена лейкемии мышей Абельсона, v-abi Abelson murine leukemia viral oncogene homolog) демонстрирует постоянную активность ядер и цитоплазмы, которой управляют 3 сигнала с ядерной локализацией (NLS) и 1 сигнал ядерного экспорта (NES) в непосредственной близости от C-терминальной области. BCR/ABL имеет цитоплазменную локализацию, а все слитые белки BCL-ABL, как было показано, обладают онкогенным потенциалом. Все 3 гибридных белка имеют повышенную активность протеинкиназы по сравнению с ABL:3BPI (связывающий белок), который связывает нормальный ABL на домене SH3, что предотвращает активацию SHL. Ядерный и цитоплазматический ABL может иметь различные функции. 1-Ядерный c-ABL играет важную роль в регуляции клеток после повреждения ДНК. Все агенты, индуцирующие повреждение ДНК, активируют ядерную c-ABL киназу, причем эта активация происходит в режиме, зависимом от ATM, и в присутствии р53-гомолога белка р73. Последний, после повреждения ДНК, физически ассоциирован с c-ABL посредством SH3 домена из c-ABL. Повреждение ДНК одновременно активирует также путь р53, приводя к активации Робертсоновской транслокации (Rb), которая индуцирует прекращение роста и защищает клетки от апоптоза. Точный механизм апоптоза, индуцируемого c-ABL, неизвестен. Было показано, что ядерный захват BCR-ABL также индуцирует апоптоз в лейкозных клетках. 2-Цитоплазменная c-ABL: возможная функция подачи сигнала адгезии в фибробластах как отток с-ABL из ядер в цитоплазму после адгезии. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к c-ABL, может быть использован для лечения раковых заболеваний, имеющих аномально высокий уровень активности киназы с-ABL, а также для лечения заболеваний с нарушениями киназы c-ABL.

TIE (тирозинкиназа с иммуноглобулиноподобным и EGF-подобным доменом) можно разделить на 2 подгруппы. TIE-1 (тирозинкиназа с Ig и EGF гомологичным доменом 1) и подсемейство TIE-2/Tek содержат рецептор тирозинкиназы с уникальными структурными характеристиками:

2 иммуноглобулиноподобных домена, фланкирующих три EGF-подобные домена эпидермального фактора роста, за ними во внеклеточной области следуют 3 повтора фибронектинового типа, а в цитоплазмической области - расщепленный домен тирозинкиназы. Эти рецепторы экспрессированы прежде всего на эндотелиальных и кроветворных клетках-предшественниках и играют существенную роль в ангиогенезе, васкулогенезе и гемопоэзе. TIE-1 кДНК человека кодирует 1124 аминокислотный остаток - предшественник белка с 18 остатками мнимых сигнальных пептидов, домен 727 внеклеточных остатков и домен 354 цитоплазмических остатков. Были идентифицированы 2 лиганда, ангиопоэтин-1 (Angi) и ангиопоэтин-2 (Ang2), которые связывают TIE-1 с высокой степенью сродства. Сообщалось, что Ang2 действует как антагонист Angi. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к TIE, может быть использован для лечения солидных опухолей и заболеваний, связанных с сосудистыми нарушениями.

FGFR (рецепторы фактора роста фибробластов) состоит из домена внеклеточного лиганда, содержащего 3 иммуноподобных домена, 1 трансмембранный спиральный домен, а также внутриклеточный домен, обладающий тирозинкиназной активностью. Указанные факторы роста фибробластов представляют собой самое большое семейство лигандов факторов роста, содержащее 23 члена. FGFR принимают участие в аналогичной последовательности, характеризующейся 3 внеклеточными иммуноглобулиноподобными доменами (IgI, IgII и IgIII), трансмембранным сегментом однократного прохождения сигнала, а также расщепленным доменом (TK1/TK2). Важную роль в патогенных мутациях FGFR играют бессмысленный кодон и все неудачные передачи функций мутированному белку. Некоторые мутации являются в высокой степени возвратными. Механизмом приобретения функций, выявленных для мутаций FGFR2, являются: (а) селективное усиление сродства к FGF-связыванию, (б) запрещенная специфичность FGF-связывания, (в) независимая ковалентная димеризация FGF, а также (г) эктопическая экспрессия сплайсиформ. Эти механизмы объясняют доминантную наследственность всех ассоциированных фенотипов. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к FGFR, может быть использован для лечения раковых заболеваний, имеющих аномально высокий уровень активности киназы FGFR, а также для лечения заболеваний с нарушениями киназы FGFR.

Инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF1) рассматривался потенциальным кандидатом для лечения сердечной недостаточности. Однако некоторые испытания на животных и клинические опыты поставили под вопрос, действительно ли полезно хроническое повышение инсулиноподобного фактора роста. Этот нежелательный результат могут объяснить вторичные эффекты повышенного уровня сывороточного IGF1 в других тканях. Целью настоящего исследование являлось изучение роли IGF1 в миоцитах сердца при отсутствии вторичных эффектов, а также объяснение путей передачи сигналов и регулирующих транскрипционных воздействий рецептора IGFI(IGFIR). Активацией рецептора IGF1 является жизнеспособность и пролиферации в мито-компетентных клетках, а также рост (гипертрофию) в тканях, таких как мышцы скелета и сердечная мышца. Путь передачи сигнала особенно важен в период нормального развития ткани молочных желез при беременности и лактации. В этот общий процесс вовлечены несколько факторов роста и гормоны, и полагают, что IGF1R играет роль в дифференциации клеток и ключевую роль в подавлении апоптоза вплоть до того момента, пока не будет завершено отнятие ребенка от груди. IGF1 вовлечен в некоторые формы рака, наиболее заметно - в рак молочной железы. Он вовлечен также в рак молочной железы за счет увеличения потенциала метастазов исходной опухоли, препятствуя ее способности поддерживать васкулизацию. Ингибитор тирозинкиназы, специфичный к IGFR, может быть использован для лечения рака с аномально высоким уровнем активности киназы IGFR и заболеваний, связанных с повреждениями киназы IGFR.

Киназы типа c-Src, с-Abl, киназы митогенактивированного белка (MAP), фосфотидилинозитол-3 -киназы (PI3K) АКТ и рецептора эпидермального фактора роста (EGF) обычно активируются в раковых клетках, и известно, что они вносят вклад в онкогенез. Многие из них находятся на одном и том же пути передачи сигналов, например, члены семейства киназы HER1, HER3 и HER4 для того, чтобы поддерживать пролиферацию клеток, передают сигналы через киназу митогенактивированного белка и фосфотидилинозитол-3-киназу.

TrkA (тропомиозинсвязанная киназа А) является каталитическим рецептором нейротрофина, фактора роста нервов (Nerve Growth Factor, NGF), и таким образом она опосредует многочисленные действия указанного фактора, включая нейронную дифференциацию и жизнеспособность. Рецептор TrkA является частью большого семейства рецепторов тирозинкиназы.

Нарушение работы протеинтирозинкиназы (РТК) включает такие расстройства, как рак, артрит, диабетическая ретинопатия, рестеноз, цирроз печени, артериосклероз, разрастание кровеносных сосудов, гломеронефрит, диабетическая невропатия, синдромы тромбозной микроангиопатии, отторжение трансплантата, аутоиммунные заболевания и гипериммунные расстройства.

Виды рака включают, без ограничения, карциномы желчного пузыря, молочной железы, толстой кишки, почки, печени, головы и шеи, яичника, поджелудочной железы, желудка, шейки матки, щитовидной железы, простаты, кожи, гемопоэтический рак лимфоидного происхождения (например, лейкемия, острая лимфоцитная лейкемия, острая лимфобластная лейкемия, лимфома В-клеток, лимфома Т-клеток, лимфома Ходкинса, лимфома волосковых клеток и лимфома Буркетта), гемопоэтический рак миелоидного происхождения (например, миелогенная лейкемия, хроническая миелогенная лейкемия, множественная миелогенная лейкемия, миелодиспластический синдром и промиелоцитная лейкемия), рак мезенхимального происхождения (например, фибросаркома и рабдомиосаркома), рак центральной или периферической нервной системы (например, астроцитома, нейробластома, глиома и невриома), меланома, семинома, тератосаркома, остеосаркома, фолликулярный рак щитовидной железы и саркома Капоши.

Краткое содержание настоящего изобретения

Один вариант настоящего изобретения характеризует азаазуленовые соединения формулы (I):

соединения азаазулена, патент № 2524202

в которой

один соединения азаазулена, патент № 2524202 представляет простую связь, а другой соединения азаазулена, патент № 2524202 двойную связь;

каждый из A1, А2, А3, А4, А5, А6, А7, и A8 независимо представляет собой углерод или азот;

A1, A2 , А3, А4, А5, А6, A7, и A8 вместе с азотом связаны с A 1 и A8, образуя 6,5-слитый гетероцикл, имеющий соединения азаазулена, патент № 2524202 -электронов;

R1 представляет собой О, OR, S, SR, NH2, NHR, NRR', NH, or NR; каждый из R2, R3, R4, R5, R 6, R7, R8, R9, R10 , R11, R12, и R13, независимо представляет собой O, Н, галоид, C110 алкил, C210алкенил, C2 10алкинил, C320циклоалкил, C 320циклоалкенил, C1-C20 гетероциклоалкил, C1-C20гетероциклоалкенил, C3-C20арил, C1-C20 гетероарил, NO2, NO, N3, SCN, CN, OCN, OR, OC(O)R, OC(S)R, OC(S)OR, ОС(O)SR, OC(S)SR, OC(O)NRR', OC(S)NRRсоединения азаазулена, патент № 2524202 , ONRR', OS(O)R, OS(O)2R, SR, SC (O)R, SC(S)R, SC(S)OR, SC(O)SR, SC(S)SR, SC(O)NRR', SC(S)NRR', S(O)R, S(O)2R, S(O)NRR', S(O)2NRR', S(O)OR, S(O)2OR, NCO, NCS, NRR', N(R)-C(O)Rсоединения азаазулена, патент № 2524202 , N(R)-C(O)OR', N(R)-C(S)R', N(R)-C(S)OR', N(C(O)R)-C(O)R', N(R)-S(O)R', N(R)-S(O)OR', N(R)-S(O) 2R', N(R)-S(O)2OR', N(R)-OR, N(OR)-C(O)R', N(OR)-C(O)OR', N(OR)-C(S)R', N(OR)-C(S)OR', N(OR)-C(S)SR', N(OR)-S(O)R', N(OR)-S(O)OR', N(OR)-S(O)2R', N(OR)-S(O)2OR', C(O)R, C(O)OR, C(O)NRR', C(O)SR, C(S)R, C(S)OR, C(S)NRR', C(S)SR, C(NR)-R', C(NR)-OR', C(NR)-NRRсоединения азаазулена, патент № 2524202 , C(NR)-SR, C(NOR)-R', C(NOR)-OR', C(NOR)-NR'Rсоединения азаазулена, патент № 2524202 , или C(NOR)-SR; или R2 и R3, R 3 и R4, R4 и R5, R 5 и R6, R6 и R7, R 8 и R9, R9 и R10, R 10 и R11, R11 и R12, или R12 и R13 вместе с атомами, к которым они присоединены, представляют собой C3-C20 циклоалкил, C3-C20циклоалкенил, C1 -C20гетероциклоалкил, C1-C20 гетероциклоалкенил, C3-C20арил, или C 1-C20гетероарил; в которой каждый из R, R', и Rсоединения азаазулена, патент № 2524202 независимо представляет собой Н, галоид, C1 -C10алкил, C2-C10алкенил, C 2-C10алкинил, C3-C20циклоалкил, C3-C20циклоалкенил, C1-C 20гетероциклоалкил, C1-C20гетероциклоалкенил, C3-C20арил, или C1-C20 гетероарил, или R и R', R и Rсоединения азаазулена, патент № 2524202 или R' и Rсоединения азаазулена, патент № 2524202 вместе с атомами, к которым они присоединены, представляют собой C1-C20гетероциклоалкил или C 1-C20гетероциклоалкенил, где каждый из A 1, А3, А4, A5, А6 , А7, и A8 представляет собой углерод, А2 представляет собой азот, соединения азаазулена, патент № 2524202 представляет собой соединения азаазулена, патент № 2524202 , а соединения азаазулена, патент № 2524202 представляет собой C=O, соединения азаазулена, патент № 2524202 или С-NH2, по меньшей мере один R2 , R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11 и R12 не является Н.

Если соединения азаазулена, патент № 2524202 представляет собой С=N, то соединения азаазулена, патент № 2524202 представляет собой соединения азаазулена, патент № 2524202 , а если соединения азаазулена, патент № 2524202 представляет собой C=R1, то соединения азаазулена, патент № 2524202 представляет собой соединения азаазулена, патент № 2524202 .

Термин «арил» касается неразветвленной или разветвленной углеводородной цепи, радикальной группы, содержащей от 1 до 12 атомов углерода и присоединенной к остальной молекуле простой связью, например, метил, этил, н-пропил, 1-метилэтил (изопропил), н-бутил, н-пентил, 1,1-диметилэтил (трет-бутил) и им подобные.

Термин «алкенил» касается линейного или разветвленного углеводородного фрагмента, который содержит по меньшей мере одну двойную связь, включает от 2 до 20 атомов углерода и присоединен к остальной молекуле простой или двойной связью, например, этенил, проп-1-енил, бут-1-енил, пент-1-енил, пента-1,4-диенил и им подобные.

Термин «алкинил» касается линейного или разветвленного углеводородного фрагмента, который содержит по меньшей мере одну тройную связь, включает от 2 до 10 атомов углерода и присоединен к остальной молекуле простой или тройной связью, например, этинил, проп-1-инил, бут-1-инил, пент-1-инил, пент-3-инил и им подобные.

Термин «циклоалкил» касается насыщенного, моно-, би- или трициклического углеводородного фрагмента, который содержит от 3 до 20 атомов углерода, насыщен и присоединен к остальной молекуле простой связью, например, циклопропил, циклобутил, циклогексил, декалинил, норборнан, норборнен, адамантил, бицикло[2.2.2]октан и им подобные.

Термин «циклоалкенил» касается неароматического, моно-, би- или трициклического углеводородного фрагмента, который содержит от 3 до 20 атомов углерода и имеет по меньшей мере одну двойную связь, например циклогексенил.

Термин «гетероциклоалкил» касается насыщенного, моно-, би- или трициклического фрагмента, который содержит от 1 до 20 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом (например, N, О, или S), типа 4-тетрагидропиранила.

Термин «гетероциклоалкенил» касается неароматического, моно-, би- или трициклического фрагмента, который содержит от 1 до 20 атомов углерода, по меньшей мере один гетероатом (например, N, О, или S), а также по меньшей мере одну двойную связь, типа пиранила.

Термин «арил» касается углеводородного фрагмента, имеющего от 6 до 30 атомов углерода, а также содержит один и более ароматических циклов. Примеры арильных фрагментов включают фенил (Ph), фенилен, бифенил, нафталин, пиренил, антрил, азуленил и фенантрил.

Термин «гетероарил» касается фрагмента, который включает от 1 до 30 атомов углерода, а также по меньшей мере один или более ароматических циклов, содержащих по меньшей мере один гетероатом (например N, О, или S). Примеры гетероарильных фрагментов включают (но ими не ограничены): акридинил, азаазуленил, бензимидазолил, бензиндолил, бензозоксазинил, бенз[4,6]имидазо[1,2-а]пиридинил, бензофуранил, бензотиадиазолил, бензотиазолил, бензотиофенил, бензотриазолил, бензотиопиранил, бензоксазинил, бензоксазолил, бензотиазолил, бета-карбонил, карбазолил, циннолинил, дибензофуранил, фуранил, имидазолил, имидазопиридинил, имидазотиазолил, индазолил, индолизинил, индолил, изобензотиенил, изоиндолинил, изохинолинил, изотиазолидинил, изатиазолил, нафтиридинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, оксазолидинонил, оксазолил, оксиранил, перимидинил, фенантридинил, фенантролинил, фенарсазинил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, фтализинил, птеридинил, пуринил, пиразинил, пиразолил, пиридазинил, пиридинил, пиридопиридинил, пиримидинил, пирролил, хиназолинил, хинолинил, хиноксалинил, тетразолил, тиадиазолил, тиазолил, тиофенил, триазинил и триазолил.

Если иного не оговорено, то упоминаемые здесь алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил и гетероарил включают как замещенные, так и незамещенные фрагменты. Возможные заместители циклоалкила, циклоалкенила, гетероциклоалкенила, арила и гетероарила включают (но ими не ограничены): C1-C20алкил, C 2-C20алкенил, C2-C20алкинил, C3-C20циклоалкил, C3-C20 циклоалкенил, C1-C20гетероциклоалкил, C 1-C20гетероциклоалкенил, C1-C 10алкокси, C3-C30арил, C3 -C30арилокси, C1-C30гетероарил, C1-C30гетероарилокси, амино, C1 -C20алкиламино, C1-C20диалкиламино, C3-C20ариламино, C6-C40 диариламино, C1-C10алкилсульфониламино, C3-C20арилсульфониламино, C1 -C10алкилимино, C3-C20арилимино, C1-C20алкилсульфонилимино, C3 -C20арил-сулофонилимино, гидроксид, галоген, тио, C1-C10алкилтио, C3-C20 арилтио, C1-C10алкилсульфонил, C3 -C20арилсульфонил, ациламино, аминоацил, аминотиоацил, амидино, гуанидин, уреидо, циано, нитро, нитрозо, азидо, ацил, тиоацил, ацилокси, карбоксил, и эфиры карбоновых кислот. С другой стороны, возможные заместители алкила, алкенила или алкинила включают все цитируемые выше заместители. Циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил и гетероарил также могут быть слиты друг с другом.

Другой вариант настоящего изобретения характеризует способ лечения рака. Указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества одного или более азаазуленовых соединений с приведенной выше формулой (1). Примеры раковых заболеваний включают лейкемию (например, острая миелогенная лейкемия), рак желудочно-кишечного тракта (например, стромальная опухоль желудочно-кишечного тракта), рак почки (например, метастазирующая карцинома клеток почки), или рак легких (например, мелкоклеточный рак легких).

Термин «лечение» касается введения одного или более азаазуленовых соединений субъекту, у которого имеется описанное выше заболевание, симптомы такого заболевания или предрасположенность к нему, для того, чтобы обеспечить некоторый терапевтический эффект, например, лечение, ослабление, прекращение или предотвращение описанного выше заболевания, его симптомов или предрасположенности.

Другой вариант настоящего изобретения охватывает фармацевтический состав, который содержит эффективное количество по меньшей мере одного из упомянутых выше азаазуленовых соединений, а также фармацевтически приемлемый носитель.

Упомянутые выше азаазуленовые соединения включают как сами соединения, так и их соли, пролекарства, сольваты, комплексы или производные с радиоизотопными метками. Такая соль может быть образована, например, анионом и положительно заряженной группой (например, аминогруппой) азаазуленового соединения. Подходящие анионы включают хлорид, бромид, иодид, сульфат, нитрат, фосфат, цитрат, метансульфонат, трифторацетат, ацетат, малеат, тозилат, тартрат, фумарат, глюконат, лактат, глютарат и малеат.

Аналогично соль может быть образована также катионом и отрицательно заряженной группой (например, карбоксилат) азаазуленового соединения. Подходящие катионы включают ион натрия, ион калия, ион магния, ион кальция, а также катион аммония, типа иона тетраметиламмония. Указанные азаазуленовые соединения включают также соли, содержащие четвертичный атом азота. Примеры пролекарств включают сложные эфиры и другие фармацевтически доступные производные, которые при введении их субъекту способны обеспечить активные азаазуленовые соединения. Сольватами называют молекулы, образованные активным азаазуленовым соединением и фармацевтически приемлемым растворителем. Примеры фармацевтически приемлемых растворителей включают воду, этанол, изопропанол, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин. Комплекс может быть образован активным азаазуленовым соединением и комплексообразующим агентом (например, циклодекстрины или циклофаны) или активным азаазуленовым соединением и неорганическим катионом (например, катионы цинка, магния, кальция, серебра или меди).

В границы настоящего изобретения входит также состав, содержащий одно или более описанных выше азаазуленовых соединений, для их применения при лечении рака, а также использование такого состава для изготовления лекарственного средства, предназначенного для указанного выше лечения. Упоминаемые выше раковые заболевания могут включать острую миелоидную лейкемию (AML).

Настоящее изобретение обеспечивает также способ ингибирования активности протеинкиназы у субъекта. Этот способ включает введение в клетку эффективного количества одного или более азаазуленовых соединений, описанных выше формулой (I). Примеры протеинкиназы включают АМРК, BLK, CSF1R, FGFR, FGR, FLT3, KDR, KIT, LCK, LYN, МАР4К5, NTRK, PHKG1, RET, SRC, STK и YES1. Помимо этого, при способе ингибирования активности протеинкиназы у субъекта по настоящему изобретению таким субъектом может быть раковая клетка, и указанная раковая клетка может включать клетку острой миелоидной лейкемии.

В приведенных далее вариантах дано подробное описание настоящего изобретения со ссылкой на прилагаемые фигуры.

Краткое описание фигур

Настоящее изобретение может быть более полно понято при чтении изложенного ниже подробного описания и примеров со ссылкой на прилагаемые фигуры. На этих фигурах показано: фиг.1 демонстрирует средний объем опухолей MV4-11 подкожного рака, модель для мышей BALB/c после введения В26 или носителя.

Подробное описание изобретения

Приведенное описание представляет собой наилучший из предполагаемых способов реализации настоящего изобретения. Это описание сделано для иллюстрации основных принципов изобретения и его не следует использовать в предельном смысле. Границы настоящего изобретения наилучшим образом определены в прилагаемой формуле изобретения.

Азаазуленовые соединения по настоящему изобретению можно получить хорошо известными способами. Например, приведенная далее схема иллюстрирует типичный путь синтеза азаазуленовых соединений по настоящему изобретению.

Промежуточные соединения для конструирования азаазуленовых ядер по настоящему изобретению можно синтезировать по следующей схеме:

соединения азаазулена, патент № 2524202

По этому изобретению азаазуленовые соединения, которые содержат 6,5-конденсированный гетероцикл индольного типа можно синтезировать по следующей схеме:

соединения азаазулена, патент № 2524202

По этому изобретению азаазуленовые соединения, которые содержат 6,5-конденсированный гетероцикл бензимидазольного типа можно синтезировать по следующей схеме:

соединения азаазулена, патент № 2524202

соединения азаазулена, патент № 2524202

По этому изобретению азаазуленовые соединения, которые содержат 3H-имидазо[4,5-6]пиридин, 3H-имидазоо[4,5-с]пиридин, а также 6,5-конденсированный гетероцикл пуринового типа, можно синтезировать по следующей схеме:

соединения азаазулена, патент № 2524202

По этому изобретению азаазуленовые соединения, которые содержат 2Н-имидазол, а также 6,5-конденсированный гетероцикл 2Н-бензо[d][1,2,3]триазольного типа, можно синтезировать по следующей схеме:

соединения азаазулена, патент № 2524202

По этому изобретению азаазуленовые соединения, которые содержат имидазо[1,2-а]пиридин, имидазо[1,2-а]пиримидин, имидазо[1,2-с]пиримидин, имидазо[1,2-а]пиразин, а также 6,5-конденсированный гетероцикл имидазо[1,2-а][1,3,5]триазинового типа, можно синтезировать по следующей схеме:

соединения азаазулена, патент № 2524202

Как показано на приведенных выше схемах, в целях ускорения синтеза азаазуленовых соединений по настоящему изобретению можно использовать основание. Предпочтительно, чтобы указанное основание представляло собой соединение, содержащее атом азота (типа аммиака, метиламина, триметиламина, триэтиламина, анилина, диметиламино-пиридина, пролина, N-метиланилина, 1,8-диазобицикло[5.4.0]ундец-7-ена, диизопропилэтиламина, пирролидина, пиперидина, амида натрия, диизопропиламида лития и гексаметилдисилазанида натрия. Также можно использовать другие органические или неорганические основания, не содержащие атом азота. Они включают карбонаты, бикарбонаты, ацетаты, формиаты, алкиллитиевые соединения, ариллитиевые соединения, оксиды металла, реактивы Гриньяра, гидроксиды, фосфаты, бисульфаты, гидросульфиды и гидриды.

Как показано на приведенных выше схемах, для ускорения синтеза азаазуленовых соединений по настоящему изобретению можно использовать кислоту. Примеры органических или неорганических кислот включают уксусную, бензолсульфоновую, бензойную, камфоросульфоновую, лимонную, этенсульфоновую, дихлоруксусную, муравьиную, фумаровую, глюконовую, хлористоводородную, бромистоводородную, фтористоводородную, молочную, малеиновую, метансульфоновую, азотную, щавелевую, пантотеновую, фосфорную, янтарную, серную, винную, п-толуолсульфоновую, трифторуксусную кислоту и им подобные.

Как показано на приведенных выше схемах, для ускорения синтеза азаазуленовых соединений по настоящему изобретению можно использовать связующий реагент. Примеры связующего реагента включают ВОР, CDI, DCC, DEPBT, DIC, EDC HCl, HATU, HBTU, HCTU, PyBOP, PyBrOP, TATU, TBTU, TDBTU, TSTU и им подобные.

Как показано на приведенных выше схемах, для ускорения синтеза азаазуленовых соединений по настоящему изобретению можно использовать металлсодержащий катализатор. Примеры таких металлов включают Fe, Ni, Co, Cu, Au, Pd, Pt, Rh и Ru. Для повышения каталитической способности металла возможно присутствие лиганда.

Реакция, приведенная выше на схеме, может происходить в присутствии растворителя, который может быть или протонным, или апротонным. Примеры протонных растворителей включают гексан, толуол, бензол, метиленхлорид, хлороформ, диметилформамид, диметилсульфоксид и тетрагидрофуран. Приведенная выше на схеме реакция также может происходить и в отсутствие растворителя.

Синтезированное таким способом азаазуленовое соединение можно очистить подходящим для этого способом, таким как колоночная хроматография, высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), дистилляция, сублимация и перекристаллизация.

Другие азаазуленовые соединения можно получить, используя пригодное сырье, и действуя согласно приведенной выше схеме, а также другим известным схемам. Описанные выше способы могут дополнительно включать стадии (или до, или после описанных здесь), предназначенные для присоединения или удаления защитных групп в целях оптимального проведения синтеза указанных азаазуленовых соединений. Помимо этого, возможно проведение различных стадий синтеза в меняющейся последовательности. Методики использования групп перегруппировки и защитных групп известны в химическом синтезе, для синтеза азаазуленовых соединений применимы методики, которые включают схемы, описанные, например в работах R.Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W.Greene and P.G.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2 sup.nd Ed., John Wiley and Sons (19991); L.Fieser and M.Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995).

Упоминаемые здесь азаазуленовые соединения могут содержать неароматическую двойную связь, а также один или более асимметричных центра. Поэтому они могут существовать в виде рацематов, рацемических смесей, единичных энантиомеров, отдельных диастереомеров, смесей диастереомеров, а также в виде цис- или трансизомерных форм.

В границы настоящего изобретения входит также фармацевтический состав, содержащий эффективное количество по меньшей мере одного описанного азаазуленового соединения, а также фармацевтически приемлемый носитель или соль. Помимо этого, настоящее изобретение охватывает также способ введения раковому больному эффективного количества одного или более азаазуленового соединения. Термин «эффективное количество» означает такое количество активного азаазуленового соединения, которое необходимо для оказания данному субъекту требуемого терапевтического эффекта. Эффективная доза будет варьироваться в зависимости от вида заболевания, способа введения, использования наполнителей, а также возможности совместного применения вместе с другим терапевтическим лечением. Фармацевтически приемлемый носитель может включать растворитель, дисперсионную среду, покровные, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические средства и средства задержки действия, а также им подобные.

Азаазуленовые соединения по настоящему изобретению пригодны для выявления сайтов рестрикции азаазулена или 6,5-слитого гетероцикла. Сайтом рестрикции азаазулена или 6,5-слитого гетероцикла может быть любой энзим, рецептор, канал, переносчик, функциональный белок, РНК или ДНК сайт, который связан с азаазуленом или с 6,5-слитым гетероциклическим фрагментом азаазуленового соединения по настоящему изобретению. Поэтому соединения по настоящему изобретению могут быть использованы как диагностические средства, прогностические средства, молекулярные датчики, средства разделения и терапевтические средства, относящиеся к заболеваниям или нарушениям, или к энзимам, рецепторам, каналам, переносчикам, функциональным белкам, РНК или ДНК, связанным с этими заболеваниями или нарушениями.

Солями, пригодными для используемых компонентов согласно настоящему предмету изобретения, являются также соли с неорганическими катионами, такие как соли щелочных металлов (в частности, соли натрия, калия или аммония), соли щелочноземельных металлов (в частности, соли магния или кальция), а также соли с би- или тетравалентными катионами, например соли цинка, алюминия или циркония. Рассматриваются также соли органических оснований (такие как дициклогексиламиновые соли, метил-D-глюкамин); и соли аминокислот (таких как аргинин, лизин, гистидин, глютамин и т.д.). Основные азотсодержащие группы можно также кватернизировать с помощью таких агентов, как галогениды низших алкилов (типа метила, этила, пропила) и бутилхлоридов, бромидов и иодидов; диалкилсульфаты (такие как диметил, диэтил, дибутил и диамил сульфаты); галогениды с длинной цепью (типа децила, лаурила, миристила и стеарилхлоридов). Возможно также применение солеобразующих агентов, например низкомолекулярных алкиламинов (типа метиламина, этиламина или триэтиламина). Таким образом получают водо-, или жирорастворимые, или диспергируемые продукты.

В целях применения способа лечения по настоящему изобретению состав, содержащий одно или более азаазуленовых соединений, можно вводить субъекту (например, млекопитающему) парентерально, орально, назально, ректально, местно или буккально. Используемый здесь термин «парентеральный» касается подкожной, интрадермальной, внутривенной, внутримышечной, интраартериальной, интрасиновиальной или интра-краниальной инъекциии, а также любого пригодного инфузионного способа введения.

Стерильный инъекционный состав может представлять собой раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, типа раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых разбавителей и растворителей, которые можно использовать, находятся: маннит, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Помимо этого, в качестве растворителя или суспендирующей среды удобно использовать нелетучее масло (например, синтетические моно- или диглицериды). Для изготовления инъекционных форм пригодны жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, поскольку (особенно в своей полиоксиэтилированной форме) они являются натуральными фармацевтически приемлемыми маслами, типа оливкового или касторового масла. Такие масляные растворы или суспензии могут также содержать спиртовой растворитель или дисперсант с длинной цепью, карбоксиметилцеллюлозу или аналогичные диспергирующие средства. Для составления рецептуры можно использовать также другие стандартно применяемые поверхностно-активные вещества, такие как Твин или Спан, или другие эмульгаторы, или биологически доступные интенсификаторы, обычно применяемые при производстве фармацевтически приемлемых твердых, жидких или иных дозировочных форм.

Составом для орального введения может быть любая орально приемлемая дозировочная форма, включая капсулы, таблетки, эмульсии и водные суспензии, дисперсии и растворы. В случае таблеток стандартно используемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал. Также обычно вводят скользящие средства, типа стеарата магния. Пригодные для орального введения в капсульной форме разбавители включают лактозу и кукурузный крахмал. Если суспензию или эмульсию вводят орально, то активный ингредиент может быть суспендирован или растворен в масляной фазе, объединенной с эмульгатором или с суспендирующим средством. Если это требуется, то возможно дополнительное введение определенных подсластителей, ароматизаторов или красителей.

Назальный аэрозоль или ингаляционный состав можно приготовить по методике, хорошо известной в области получения фармацевтических рецептур. Например, такой состав можно получить в виде физиологического раствора, используя бензиловый спирт или другие подходящие консерваторы, промоторы абсорбции, фтороуглероды и/или другие известные способствующие солюбилизации или дисперсии агенты.

Возможно также использование состава, содержащего одно или более азаазуленовых соединений, в виде суппозитория, предназначенного для ректального введения.

Носитель в таком фармацевтическом составе может быть приемлем, если он совместим с активным ингредиентом указанного состава (и, предпочтительно, способен стабилизировать активный ингредиент), а также не вреден для проходящего лечение субъекта. В целях доставки активного азаазуленового соединения в качестве фармацевтических наполнителей возможно применение одного или более способствующего солюбилизации средства. Примеры других носителей включают коллоидный оксид кремния, стеарат магния, целлюлозу, лаурилсульфат натрия, а также D&C Yellow #10.

Описанные выше азаазуленовые соединения могут быть предварительно отобраны по их эффективности при лечении приведенных выше заболеваний, этот отбор производится путем in vitro анализа с последующим подтверждением опытами на животных и клиническими испытаниями. Квалифицированным в данной области людям очевидны также другие методы.

Приводимые далее примеры сделаны только в иллюстративных целях, они никоим образом не ограничивают остальное раскрытие. Без дальнейшего уточнения предполагается, что на основании приведенного здесь описания квалифицированный в данной области человек способен использовать настоящее изобретение в наиболее полной степени. Все цитируемые публикации включены здесь полностью в виде ссылок.

Настоящее изобретение обеспечивает также способ ингибирования активности протеинкиназы или протеинфосфатазы в клетке, используя для этого одно из описанных азаазуленовых соединений. Этот способ включает контакт клетки, экспрессирующей протеинкиназу или протеинфосфатазу, с такого рода азазуленовым соединением. Протеинкиназа и протеинфосфатаза регулируют каскады передачи сигналов. Эти каскады в свою очередь регулируют рост клеток, их миграцию, дифференциацию, экспрессию гена, сжатие мышц, метаболизм глюкозы, синтез клеточных белков, а также регулируют клеточный цикл.

Термин «Протеинкиназа» касается фермента киназы, который изменяет другие белки путем химического присоединения к ним фосфатных групп (фосфорилирования). Примеры протеинкиназы включают AMPK, BLK, CSFIR, FGFR, FOR, FLT3, KDR, KIT, LCK, LYN, MAP4K5, NTRK, PHKG1, RET, SRC, STK и YES1.

В настоящем изобретении клетки могут быть получены от раковых больных. Их здесь называют «раковыми клетками». Эти клетки выделяют из разных источников и тканей. Например, указанные клетки можно выделить из образца крови или биопсии. Такие клетки могут быть стволовыми клетками, клетками фибробласта или лимфоидными клетками. Согласно типу клеток и источнику их получения клетки можно размножить в некоторой культуре. Размножение клеток возможно без их иммортализации. Или же клетки могут быть иммортализированы, используя вирус или плазмиду, несущую антиген, или путем трансформации вирусного белка, например белка папилломы Е6 или Е7.

Таблица 1
Примеры некоторых соединений
Номер соединенияСтруктура
А1соединения азаазулена, патент № 2524202
В1 соединения азаазулена, патент № 2524202
В2 соединения азаазулена, патент № 2524202
В3 соединения азаазулена, патент № 2524202
В4 соединения азаазулена, патент № 2524202
В5 соединения азаазулена, патент № 2524202
В6 соединения азаазулена, патент № 2524202
В7 соединения азаазулена, патент № 2524202
В8 соединения азаазулена, патент № 2524202

В9соединения азаазулена, патент № 2524202
В10 соединения азаазулена, патент № 2524202
B11 соединения азаазулена, патент № 2524202
В12 соединения азаазулена, патент № 2524202
В13 соединения азаазулена, патент № 2524202
В14 соединения азаазулена, патент № 2524202
В15 соединения азаазулена, патент № 2524202
В16 соединения азаазулена, патент № 2524202
В17 соединения азаазулена, патент № 2524202

В18соединения азаазулена, патент № 2524202
В19 соединения азаазулена, патент № 2524202
В20 соединения азаазулена, патент № 2524202
B21 соединения азаазулена, патент № 2524202
В22 соединения азаазулена, патент № 2524202
В23 соединения азаазулена, патент № 2524202
В24 соединения азаазулена, патент № 2524202
В25 соединения азаазулена, патент № 2524202
В26 соединения азаазулена, патент № 2524202

В27соединения азаазулена, патент № 2524202
В28 соединения азаазулена, патент № 2524202
В29 соединения азаазулена, патент № 2524202
В30 соединения азаазулена, патент № 2524202
В31 соединения азаазулена, патент № 2524202
В32 соединения азаазулена, патент № 2524202
В33 соединения азаазулена, патент № 2524202
В34 соединения азаазулена, патент № 2524202

В35 соединения азаазулена, патент № 2524202
В36 соединения азаазулена, патент № 2524202
В37 соединения азаазулена, патент № 2524202
В38 соединения азаазулена, патент № 2524202
В39 соединения азаазулена, патент № 2524202
В40 соединения азаазулена, патент № 2524202
В41 соединения азаазулена, патент № 2524202
В42 соединения азаазулена, патент № 2524202
В43 соединения азаазулена, патент № 2524202

В44 соединения азаазулена, патент № 2524202
В45 соединения азаазулена, патент № 2524202
В46 соединения азаазулена, патент № 2524202
В47 соединения азаазулена, патент № 2524202
В48 соединения азаазулена, патент № 2524202
В49 соединения азаазулена, патент № 2524202
В50 соединения азаазулена, патент № 2524202
В51 соединения азаазулена, патент № 2524202
В52 соединения азаазулена, патент № 2524202

В53соединения азаазулена, патент № 2524202
В54 соединения азаазулена, патент № 2524202
В55 соединения азаазулена, патент № 2524202
В56 соединения азаазулена, патент № 2524202
В57 соединения азаазулена, патент № 2524202
В58 соединения азаазулена, патент № 2524202
В59 соединения азаазулена, патент № 2524202
В60 соединения азаазулена, патент № 2524202

В61 соединения азаазулена, патент № 2524202
В62 соединения азаазулена, патент № 2524202
В63 соединения азаазулена, патент № 2524202
В64 соединения азаазулена, патент № 2524202
В65 соединения азаазулена, патент № 2524202
В66 соединения азаазулена, патент № 2524202
В67 соединения азаазулена, патент № 2524202

В68 соединения азаазулена, патент № 2524202
В69 соединения азаазулена, патент № 2524202
В70 соединения азаазулена, патент № 2524202
В71 соединения азаазулена, патент № 2524202
В72 соединения азаазулена, патент № 2524202
В73 соединения азаазулена, патент № 2524202
В74 соединения азаазулена, патент № 2524202
В75 соединения азаазулена, патент № 2524202

В76соединения азаазулена, патент № 2524202
В77 соединения азаазулена, патент № 2524202
В78 соединения азаазулена, патент № 2524202
В79 соединения азаазулена, патент № 2524202
В80 соединения азаазулена, патент № 2524202
В81 соединения азаазулена, патент № 2524202
В82 соединения азаазулена, патент № 2524202

В83 соединения азаазулена, патент № 2524202
В84 соединения азаазулена, патент № 2524202
В85 соединения азаазулена, патент № 2524202
В86 соединения азаазулена, патент № 2524202
В87 соединения азаазулена, патент № 2524202
В88 соединения азаазулена, патент № 2524202
В89 соединения азаазулена, патент № 2524202
В90 соединения азаазулена, патент № 2524202

В91 соединения азаазулена, патент № 2524202
В92 соединения азаазулена, патент № 2524202
В93 соединения азаазулена, патент № 2524202
В94 соединения азаазулена, патент № 2524202
В95 соединения азаазулена, патент № 2524202
В96 соединения азаазулена, патент № 2524202
В97 соединения азаазулена, патент № 2524202
В98 соединения азаазулена, патент № 2524202
В99 соединения азаазулена, патент № 2524202

В100 соединения азаазулена, патент № 2524202
В101 соединения азаазулена, патент № 2524202
В102 соединения азаазулена, патент № 2524202
B103 соединения азаазулена, патент № 2524202
В104 соединения азаазулена, патент № 2524202
В105 соединения азаазулена, патент № 2524202
В106 соединения азаазулена, патент № 2524202
В107 соединения азаазулена, патент № 2524202

B108 соединения азаазулена, патент № 2524202
B109 соединения азаазулена, патент № 2524202
В110 соединения азаазулена, патент № 2524202
B111 соединения азаазулена, патент № 2524202
В112 соединения азаазулена, патент № 2524202
В113 соединения азаазулена, патент № 2524202
B114 соединения азаазулена, патент № 2524202
В115 соединения азаазулена, патент № 2524202
В116 соединения азаазулена, патент № 2524202

В117соединения азаазулена, патент № 2524202
B118 соединения азаазулена, патент № 2524202
B119 соединения азаазулена, патент № 2524202
В120 соединения азаазулена, патент № 2524202
В121 соединения азаазулена, патент № 2524202
В122 соединения азаазулена, патент № 2524202
В123 соединения азаазулена, патент № 2524202
В124 соединения азаазулена, патент № 2524202
В125 соединения азаазулена, патент № 2524202

В126 соединения азаазулена, патент № 2524202
В127 соединения азаазулена, патент № 2524202
В128 соединения азаазулена, патент № 2524202
В129 соединения азаазулена, патент № 2524202
В130 соединения азаазулена, патент № 2524202
В131 соединения азаазулена, патент № 2524202
В132 соединения азаазулена, патент № 2524202
В133 соединения азаазулена, патент № 2524202
В134 соединения азаазулена, патент № 2524202

В135 соединения азаазулена, патент № 2524202
В136 соединения азаазулена, патент № 2524202
В137 соединения азаазулена, патент № 2524202
В138 соединения азаазулена, патент № 2524202
B139 соединения азаазулена, патент № 2524202
В140 соединения азаазулена, патент № 2524202
В141 соединения азаазулена, патент № 2524202
В142 соединения азаазулена, патент № 2524202
В143 соединения азаазулена, патент № 2524202

ПРИМЕРЫ

Сравнительный пример (Соединение A1)

Получение 3-(бензимидазол-2-ил)-1-азаазулен-2-он (A1): 3-формил-1-азаазулен-2-он (1 ммол, согласно методике, описанной в Chem. Pharm. Bull., 1994, vol.42, #12, pp.2491-2499 с небольшими изменениями) был растворен в насыщенном растворе гидросульфита натрия (3 мл) и перемешан в течение 3 часов. После этого добавили о-фенилендиамин (1.2 ммол) и этанол (10 мл) и нагревали вплоть до дефлегмации в течение 3 часов. Этанол выпарили и далее в остаток добавили воду (50 мл). Осадок отфильтровали, промыв водой (50 мл, 3 раза), и извлекли для сушки. Масса продукта составила 197.3 мг, выход 75%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.28 (s, 1H), 9.41 (d, 1H), 7.70-7.68 (m, 2H), 7.63 (t, 1H), 7.55 (t, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.20-7.18 (m, 2H). LC-MS (m/z) 262 [M+1].

Пример 1

Получение B1: 3-Формил-1-азаазулен-2-онs (1 ммол) и калий т-бутоксид (2 ммол) были растворены в DMF (10 мл) и перемешаны до образования прозарачного раствора. Далее, в раствор добавили диэтиламиноэтил хлорид гидрохлорид (1 ммол) и перемешивали в течение ночи, при комнатной температуре. С утра остаток был очищен колоночной хроматографией, используя дихлорметан/этилацетат/триэтиламин (9:1:0.1 to 5:5:0.1) как элюент, до получения 76% 1-диэтиламинэтил-3-формил-1-азаазулен-2-он. 1-диэтиламинэтил-3-формил-1-азаазулен-2-он (0.1 ммол) растворили в смеси этанола (10 мл) и воды (5 мл). Далее добавили о-финилинидиамин (0.15 ммол) и бисульфат натрия (0.2 ммол) и нагревали вплоть до дефлегмации в течение 1 дня. С утра остаток очистили колоночной хроматографией используя дихлорметан/этилацетат/триэтиламина (9:1:0.1 to 3:7:0.1) в качестве элюента, до получения 54% целевого соединения B1. 1H-ЯМР (500 МГц, CDCl3) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.53 (s, 1H), 9.56 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.53-7.149 (m, 7H), 4.26 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.62 (q, 4H), 1.02 (t, 6H). LC-MS (m/z) 361 [M+1].

Получение B2: 3-формил-1-азаазулен-2-он (1 ммол) растворили в насыщенном растворе бисульфита натрия (3 мл) и перемешали в течение 3 часов. Далее добавили 4-фтор-1,2-фенилендиамин (1.2 ммол) и этанол (10 мл), нагрели смесь вплоть до дефлегмации в течение 3 часов. Этанол выпарили и далее в остаток добавили воду (50 мл). Осадок отфильтровали, промыв водой (50 мл, 3 раза), и извлекли для сушки. Масса целевого продукта составила 210.5 мг, выход 75%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.31 (s, 1H), 9.36 (d, 1H), 7.68 (t, 1H), 7.65 (t, 1H), 7.57 (t, 1H), 7.48-7.45 (m, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.04 (dt, 1H). LC-MS (m/z) 280 [M+1].

Получение B4: 3-Формил-1-азаазулен-2-он (1 ммол) растворили в насыщенном растворе бисульфита натрия (3 мл), перемешали в течение 3 часов. Далее добавили 3,4-диаминобензотрифторид (1.2 ммол) и этанол (10 мл), нагрели смесь вплоть до дефлегмации в течение 3 часов. Этанол выпарили и далее добавили воду (50 мл). Осадок отфильтровали, промыв водой (50 мл, 3 раза), и извлекли для сушки. Масса целевого продукта составила 245.5 мг, выход 74%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.58 (s, 1H), 12.39 & 12.37 (s, 1H), 9.44 & 9.42 (d, 1H), 8.07 & 8.01 (s, 1H), 7.87 & 7.86 (t, 1H), 7.73 & 7.14 (t, 1H), 7.63 & 7.62 (t, 1H), 7.54-7.49 (m, 2H), 7.41 & 7.39 (t, 1H). LC-MS (m/z) 330 [M+1].

Получение B5: 3-Формил-1-азаазулен-2-он (5 ммол) растворили в насыщенном растворе бисульфита натрия (10 мл) и перемешали в течение 30 минут. Далее добавили 4-нитро-1,2-фенилендиамин (6 ммол) и этанол (150 мл) и нагревали смесь вплоть до дефлегмации в течение 3 часов. Этанол выпарили и далее в остаток добавили воду (50 мл). Осадок отфильтровали, промыв водой (50 мл, 3 раза) и 1N HCl в этаноле (50 мл, 3 раза), и в конце извлекли для сушки. Масса целевого продукта составила 1.06 г, выход 69%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.55 (s, 1H), 9.38 (d, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.80 (t, 1H), 7.71 (t, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.48 (t, 1H).

Получение В6: Соединение B5 (2.8 ммол) растворили в метаноле (350 мл) и далее добавили 10% Pd/C (100 мг). Смесь гидрировали, используя водород при давлении 1 атм при комнатной температуре. Смесь для удаления катализатора отфильтровали и далее выпарили. Остаток очистили колоночной хроматографией с помощью метанола в качестве элюента. После выпаривания смеси масса целевого продукта составила 230 мг, выход 26%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 (ppm) 12.74 (s, 1H), 9.11 (d, 1H), 7.73-7.81 (m, 5H), 7.56 (t, 3H), 7.27 (s, 2H).

Получение B7: 3-Формил-1-азаазулен-2-онs (4 ммол) добавили в насыщенный раствор бисульфита натрия (10 мл) и этанола (40 мл). Смесь перемешали в течение 30 минут при комнатной температуре и далее добавили 3,4-диаминобензойную кислоту (4.5 ммол) и в течение ночи нагревали вплоть до дефлегмации. Этанол выпарили. В остаток добавили воду (100 мл) и затем окислили с 6 N хлористоводородой кислотой (3 мл). Продукт отфильтровали с водой (2 мл, 4 раза) и высушили при 80°C. Масса целевого продукта составила 981.7 мг, выход 80%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.39 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.84 (d, 1H), 7.63 (t, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.36 (t, 2H), 3.97 (d, 1H), 3.40(s, 1H).

Получение B8: 4-амино-3-нитрофенол (3 ммол) растворили в метаноле (100 мл), добавили 5% Pd/C (100 мг) и смесь гидрировали. Катализатор отфильтровали и затем в фильтрат добавили 3-формил-1-азаазулен-2-онs (3 ммол) и насыщенный раствор бисульфита натрия (3 мл) и нагрели вплоть до дефлегмации. Осадок отфильтровали, промыли метанолом (20 мл, 5 раз) и водой (20 мл, 5 раз). Продукт высушили вакуумом до получения 411.2 мг целевого продукта, выход 49%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.18 (s, 1H), 11.90,11.95 (s, 1H), 9.30, 9.35 (d, 1H), 8.95, 9.12 (s, 1H), 7.44-7.60 (m, 3H), 7.36, 7.39 (d, 1H), 7.22-7.29 (m, 1H), 7.00, 7.07 (d, 1H), 6.69 (dt, 1H).

Получение B15: 3-Формил-1-азаазулен-2-он (0.5 ммол) и насыщенный раствор гидросульфита натрия (0.5 мл) добавили в этанол (20 мл) и перемешали в течение 30 минут. Добавили 2,3-диаминпиридин (0.5 ммол) и нагрели вплоть до дефлегмации в течение 8 часов. Этанол выпарили вакуумом. Остаток распределили на этилацетат и воду.

Органический слой отделили, высушили с ангидридмагнийсульфатом, отфильтровали и затем концентрировали до 20 мл. Раствор подвергли колоночной хроматографии с силикагелем и элютированию, сначала с этилацетатом и затем с ацетоном до получения 58.6 мг целевого продукта, выход 45%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.37 (s, 1H), 9.44 (broad, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.02 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.73 (t, J=10 Hz, 1H), 7.63 (t, J=10.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.41 (t, J=9.5 Hz, 1H), 7.22 (broad, 1H). LC-MS (m/z) 263 [M+1].

Получение B18: 2,3-диамононафталин (1 ммол), 3-формил-1-азаазулен-2-онs (1 ммол) и аммоний метавандат (0.05 ммол) добавили в метанол (50 мл) и перемешали при температуре 50°C в течение 24 часов. Этилацетат (200 мл) добавили в реакционную смесь и затем пропустили через планшет силикагеля. Собранный фильтрат выпарили под вакуумом. Твердый осадок обработали с помощью EtOAc/MeOH (10/1, 40 мл), отфильтровали и повторно промыли смесью растворителей (10 мл). Масса целевого продукта составила 65.4 мг, выход 20.9%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.38 (s, 1H), 12.19 (s, 2H), 9.30 (d, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.73 (t, 1H), 7.61 (t, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.32-7.40 (m, 3H).

Получение B19: 3-Формил-1-азаазулен-2-онs (4 ммол) добавили в насыщенный раствор бисульфита натрия (10 мл) и этанола (40 мл). Смесь перемешали в течение 30 минут при комнатной температуре и далее добавили 3,4-диаминобензойная кислоту (4.5 ммол) и в течение ночи нагревали вплоть до дефлегмации. Этанол выпарили. В остаток добавили воду (100 мл). Продукт отфильтровали с водой (5 мл, 4 раза) и высушили при температуре 80°C. Масса целевого продукта составила 761.6 мг, выход 80%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.59 (d, 1H), 12.36 (d, 1H), 9.35-9.40 (m, 1H), 8.07, 8.13 (s, 1H), 7.38-7.83 (m, 6H).

Получение B20: дикарбонат ди-трет-бутила (38.41 г, 0.176 ммол) добавили в раствор 2-нитро-п-фенилендиамин (24.50 г, 0.16 ммол) безводный дихлорметан (1.6 Л) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 2 дней реакционную смесь пропустили через короткий планшет активной глины и концентрировали под вакуумом. Высушили под вакуумом при температуре 50°C до получения твердого продукта ярко-оранжевого цвета. Масса целевого продукта составила 40.52 г, выход 100%. Нитрофенилендиамин (15.20 г, 60 ммол) растворили в метаноле (500 мл) и затем добавили никель Ренея (5.0 г). Смесь гидрировали, используя водород при давлении 1 атм в течение 48 часов.

Смесь для удаления катализатора отфильтровали и далее промыли с 200 мл метанола два раза. Далее, 3-формил-1-азаазулен-2-он (10.39 г, 60 ммол) аммоний метавандат (0.35 г, 3 ммол) добавили в фильтрат и перемешали при температуре 50°C в течение 18 часов. Метанол выпарили и остаток растворили в смеси EtOAc/MeOH (10/1, 500 мл). Смесь отфильтровали через короткую колонку силикагеля и выпарили под вакуумом. Твердый остаток обработали с EtOAc/DCM (1/5, 10 мл) и отфильтровали до получения 2.42 г целевого продукта, выход 10.7%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.16, 12.19 (s, 1H), 12.02 (s, 1H), 9.30, 9.35 (d, 1H), 9.16, 9.24 (s, 1H), 7.75, 7.89 (s, 1H), 7.45-7.60 (m, 3H), 7.37 (t, 1H), 7.16-7.29 (m, 2H), 1.50 (s, 9H).

Получение B22: 2-нитро-5-пиперазин-1-ил-анилин (6.12 ммол, согласно методике описанной в Pharmazie, 1984, vol. 39, #11 p.747-749) растворили в метаноле (100 мл). Добавили никель Ренея (1.0 г) и гидрировали, используя водород при давлении 1 атм в течение 1 дня. Смесь отфильтровали, затем фильтрат добавили в колбу, содержащую 3-формил-1-азаазулен-2-он (1.01 г, 5.8 ммол) и насыщеную смесь гидросульфата натрия (7 мл). Смесь дефлегмировали в течение 1 дня. Сырой продукт очистили колоночной хроматографией с помощью дихлорметанметанола в качестве элюента (20:1 to 2.5:1). Масса продукта 1.46 g, выход 72%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.28 (s, 1H), 12.00, 12.05 (s, 1H), 9.32, 9.37 (d, 1H), 7.41-7.60 (m, 4H), 7.27 (m, 2H), 6.99 (d, 1H), 3.28-3.35 (m, 8H).

Получение B24: 2,6-диметилпиперазин (12.56 г, 0.11 ммол), 5-фтор-2-нитроанилин (15.61 г, 0.1 ммол) и триэтиламин (11.13 г, 0.11 ммол) добавили в ацетонитрил (200 мл) и нагревали до дефлегмации в течение 12 часов. Растворитель выпарили, добавили воду (100 мл) в остаток и перемешали в течение 30 минут. Отфильтровали твердый продукт желтого цвета, промыли с водой (50 мл, 2 раза) и в конце высушили под вакуумом до получения 23.15 г продукта, выход 92%. Используя такой же способ как при получении B22, соединение 24 было получено с выходом 78%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.10 (d, 1H), 9.40 (m, 1H), 7.73 (d, 1H), 7.44 (m, 3H), 7.16 (m, 1H), 7.04 (m 3H), 3.60 (d, 2H), 3.20 (b, 1H), 2.41 (q, 2H), 1.24 (d, 6H).

Получение B26: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(4-метилпепиразин-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 90%. Далее были проведены реакции восстановления и конденсации аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B26 было получено с выходом 72%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.20 (s, 1H), 11.97 & 11.91 (s, 1H), 9.38 & 9.31 (d, 1H), 7.58-6.94 (m, 7H), 3.34 (s, 4H), 3.14 (s, 4H), 2.24 (s, 3H). LC-MS (m/z) 360 [M+1].

Получение B33: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(4-(3-(диметиламино)пропил)пиперазин-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 81%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B33 было получено с выходом 65%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.82 (s, 1H), 11.47 (s, 1H), 10.80 (s, 1H), 8.94 (d, 1H), 7.74-7.84 (m, 3H), 7.58 (t, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.28 (d, 1H), 3.85 (d, 2H), 3.67 (d, 2H), 2.80 (s, 6H), 2.27 (dd, 2H), 2.11 (s, 2H).

Получение B34: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(4-(3-(дипропиламино)пропил)пиперазин-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 91%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B34 было получено с выходом 75%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 8.85 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.21 (t, 1H), 7.08 (m, 1H), 7.04 (m, 4H), 6.94 (m, 1H), 6.75 (d, 1H), 3.50 (t, 4H), 2.97 (d, 4H), 2.46 (s, 2H), 2.34 (m, 2H), 2.27 (m, 4H), 1.41 (m, 4H), 0.76 (m, 6H).

Получение B35: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(4-(1-метилпиперидин-4-ил)пиперазин-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 93%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения В22, целевое соединение B35 было получено с выходом 77%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.19 (d, 1H), 9.93 (m, 1H), 7.56 (m, 3H), 7.36 (t, 1H), 7.24 (q, 1H), 7.15 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 3.25 (m, 2H), 3.17 (s, 4H), 2.80 (d, 2H), 2.65 (s, 4H), 2.14 (s, 3H), 1.98 (m, 1H), 1.77 (d, 2H), 1.47 (q, 2H).

Получение B36: Используя такой же способ, как при получении B24, 3-(4-(3-амино-4-нитрофенил)пиперазин-1-ил)пропан-1-ол был получен с выходом 85%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения В22, целевое соединение B36 было получено с выходом 67%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 9.20 (d, 1H), 7.62 (m, 2H), 7.56 (m, 1H), 7.38 (m, 4H), 7.17 (m, 1H), 7.10 (d, 1H), 3.80 (m, 2H), 3.69 (m, 4H), 2.83 (m, 4H), 2.68 (m, 2H), 2.07 (s, 1H).

Получение B50: Используя такой же способ, как при получении B24, 4-фтор-5-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 95%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B50 было получено с выходом 87%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.23 (s, 1H), 12.10, 12.12 (s, 1H), 9.31, 9.34 (d, 1H), 7.59 (t, 1H), 7.51 (t, 1H), 7.38-7.44 (m, 2H), 7.27-7.33 (m, 1H), 3.03 (s, 4H), 2.53 (s, 4H), 2.27 (s, 3H).

Получение B51: Используя такой же способ, как при получении B24, 2-фтор-3-(4-метилпиперазин-1-ил)-6-нитроанилин был получен с выходом 94%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B51 было получено с выходом 89%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.26 (s, 1H), 12.19 (s, 1H), 9.35 (d, 1H), 7.64 (t, 1H), 7.53 (t, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.31 (t, 1H), 6.96 (t, 1H), 3.03 (s, 4H), 2.53 (s, 4H), 2.26 (s, 3H).

Получение B52: Используя такой же способ, как при получении B24, 2,4-дифтор-3-(4-метилпиперазин-1-ил)-6-нитроанилин было получено с выходом 91%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B52 было получено с выходом 85%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.38 (s, 1H), 9.30 (d, 1H), 7.67 (t, 1H), 7.57 (t, 1H), 7.48 (d, 1H), 7.29-7.36 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.16 (s, 2H), 2.48 (s, 2H), 2.27 (s, 2H), 1.26 (s, 2H).

Получение B60: Используя такой же способ, как при получении B24, 2-нитро-5-(4-(пиредин-4-ил)пиперазин-1-ил)анилин был получен с выходом 81%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B60 было получено с выходом 82%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6+TFA-d) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 13.50 (s, 1H), 12.81 (s, 1H), 8.57 (d, 1H), 8.32 (d, 2H), 7.88 (m, 1H), 7.77 & 7.73 (d, 1H), 7.63 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.30 (d, 2H), 3.96 (s, 4H), 3.46 (s, 4H). LC-MS (m/z) 422 [M+1].

Получение B76: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(1,4-диазепан-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 80%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B76 было получено с выходом 80%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.67, 11.79 (s, 1H), 9.24, 9.34 (d, 1H), 7.39-7.50 (m, 3H), 7.31 (t, 1H), 7.19 (t, 1H), 6.89, 6.95 (s, 1H), 6.70 (d, 1H), 3.50-3.57 (m, 5H), 2.91 (s, 2H), 2.65 (s, 2H), 1.84 (s, 2H).

Получение B77: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(4-метил-1,4-диазепан-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 85%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения В22, целевое соединение B77 было получено с выходом 89%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.13 (s, 1H), 11.69, 11.81 (s, 1H), 9.25, 9.35 (d, 1H), 7.17-7.53 (m, 5H), 6.89, 6.94 (s, 1H), 6.69 (d, 1H), 3.47-4.07 (m, 6H), 3.17 (s, 2H), 2.27 (s, 3H), 1.93 (d, 2H).

Получение B85: Используя такой же способ, как при получении B24, 4-фтор-5-(4-метил-1,4-диазепан-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 89%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B85 было получено с выходом 88%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.18 (s, 1H), 11.96, 12.02 (s, 1H), 9.26, 9.30 (d, 1H), 7.51-7.57 (m, 2H), 7.44-7.49 (m, 2H), 7.33-7.38 (m, 2H), 7.21-7.30 (m, 2H), 2.72 (s, 2H), 2.63 (s, 2H), 2.32 (s, 2H), 1.94 (s, 2H), 1.25 (s, 2H).

Получение B86: Используя такой же способ, как при получении B24, 2,4-дифтор-3-(4-метил-1,4-диазепан-1-ил)-6-нитроанилин был получен с выходом 96%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B86 было получено с выходом 88%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.32 (s, 1H), 9.29 (d, 1H), 7.64 (t, 1H), 7.54 (t, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.32 (t, 1H), 7.27 (d, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.68 (t, 2H), 2.64 (t, 2H), 2.33(s, 4H), 1.87-1.91 (m, 2H).

Получение B101: Используя такой же способ, как при получении B24, 1-(3-амино-4-нитрофенил)-N,N-диметилпиперадин-4-амин был получен с выходом 86%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения В22, целевое соединение B101 было получено с выходом 78%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.90 (d, 1H), 9.30 (m, 1H), 7.55 (m, 3H), 7.46 (t, 1H), 7.25 (m, 3H), 6.93 (m 1H), 3.67 (d, 2H), 2.68 (m, 2H), 2.29 (s, 6H), 1.90 (d, 2H), 1.58 (m, 2H).

Получение B102: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-([1,4соединения азаазулена, патент № 2524202 -бипиперадин]-1соединения азаазулена, патент № 2524202 -ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 76%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, соединение B102 было получено с выходом 79%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.20 (b, 1H), 11.90 (d, 1H), 8.30 (s, 1H), 9.30 (m, 1H), 7.54 (m, 3H), 7.40 (s 1H), 7.38 (m, 2H), 7.20 (m, 1H), 3.73 (d, 2H), 2.82 (m, 2H), 2.03 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.21 (m, 2H).

Получение B103: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(4-морфолинпиперадин-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 76%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения В22, целевое соединение В 103 было получено с выходом 81%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.90 (d, 1H), 9.28 (m, 1H), 7.50 (m, 3H), 7.35 (t, 1H), 7.19 (m, 3H), 6.91 (t 1H), 3.63 (d, 2H), 3.58 (s, 1H), 2.66 (m, 2H), 2.26 (s, 6H), 1.88 (d, 2H), 1.55 (b, 2H).

Получение B104: Используя такой же способ, как при получении B24, 2-нитро-5-(4-(пирролидин-1-ил)пиперидин-1-ил) анилин был получен с выходом 77%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B104 было получено с выходом 78%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.0 (d, 1H), 9.46 (m, 1H), 7.6 (d, 1H), 7.49 (m, 2H), 7.2-7.51 (m, 3H), 7.01 (b, 2H), 3.69 (m, 4H), 2.79 (q, 1H), 2.71 (b, 4H), 2.05 (b, 2H), 1.84 (b, 4H), 1.25 (s, 2H).

Получение B105: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиперидин-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 79%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B105 было получено с выходом 72%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.96 (d, 1H), 9.37 (m, 1H), 7.56 (m, 3H), 7.40 (t, 1H), 7.29 (m, 3H), 6.92 (m, 1H), 3.67 (m, 1H), 3.3 (s, 4H), 3.12 (m, 2H), 2.69 (m, 2H), 2.53 (s, 4H), 2.17 (s, 3H), 1.92 (m, 2H), 1.62 (m, 2H). B106, 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 9.16 (d, 1H), 7.59 (t, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.35 (m, 5H), 7.251 (1H, s), 7.08 (d, 1H), 3.37 (s, 2H), 3.29 (t, 1H), 2.75 (d, 4H), 2.58 (m, 4H), 1.22 (t, 3H).

Получение B107: Используя такой же способ, как при получении B24, 1-(3-амино-4-нитрофенил)пиперидин-4-ол был получен с выходом 79%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B107 было получено с выходом 72%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.19 (b, 1H), 11.88 (d, 1H), 9.28 (m, 1H), 9.31 (m, 1H), 7.55 (m, 3H), 7.41 (t, 1H), 7.21 (m, 3H), 6.85 (t, 1H), 3.66 (m, 1H), 3.53 (b, 2H), 2.85 (q, 2H), 1.89 (b, 2H), 1.58 (m, 2H).

Получение B108: Используя такой же способ, как при получении B24, 1-(3-амино-4-нитрофенил)пиперидин-4-карбоксамид был получен с выходом 85%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, соединение B108 было получено с выходом 67%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 9.18 (d, 1H), 7.60 (m, 2H), 7.52 (t, 1H), 7.37 (m, 4H), 7.27 (t, 1H), 7.10 (d, 1H), 3.74 (d, 2H), 2.41 (t,1H), 2.30 (m, 4H), 1.94 (m, 4H).

Получение B109: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-(4-(этоксиметил)пиперидин-1-ил)-2-нитроанилин был получен с выходом 82%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B109 было получено с выходом 72%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 9.05 (d, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.37 (m, 1H), 7.24 (m, 4H), 7.07 (m, 1H), 6.98 (t, 1H), 3.61 (d, 2H), 3.5 (m, 2H), 2.70 (t, 4H), 1.87 (d, 4H), 1.46 (m, 1H), 1.23 (m, 3H).

Получение B110: Используя такой же способ, как при получении B24, (R)-1-(3-амино-4-нитрофенил)-N,N-диметилпиролидин-3-амин был получен с выходом 68%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B110 было получено с выходом 67%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.1 (b, 1H), 11.77 (m, 1H), 9.32 (m, 1H), 7.42-7.50 (m, 3Н), 7.34 (t, 1H), 7.22 (t, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.59 (m, 1H), 3.48 (m, 2H), 3.20 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.25 (s, 6H), 2.21 (m, 1H), 1.87(m, 1H).

Получение B111: Используя такой же способ, как при получении B24, 5-морфолино-2-нитроанилин был получен с выходом 77%. Далее реакции восстановления и конденсации были проведены аналогично, как при получении соединения B22, целевое соединение B111 было получено с выходом 79%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 9.30 (d, 1H), 7.56 (m, 2H), 7.38 (d, 1H), 7.26 (m, 4H), 7.17 (s, 1H), 6.95 (d, 1H), 3.04 (s, 4H), 1.98 (s, 4H).

Получение B112: К раствору этилацетата (10 мл) 1-метилпиперазине (400.6 мг, 4 ммол) и триэтиламине (404.8 мг, 4 ммол) добавили в раствор этилацетата (40 мл) 4-хлор-3-нитробензинсульфонил хлорид (1.02 г, 4 ммол). После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 минут раствор промыли водой (50 мл), 1 М раствором бикарбоната натрия (20 мл) и насыщенным солевым раствором. Органический слой отделили, высушили с ангидридмагнийсульфатом, отфильтровали и затем концентрировали под вакуумом до получения качественного продукта. Вышеупомянутый сульфамид (639.5 мг, 2 ммол) растворили в растворе метанольного амония (7М, 20 мл) размещенного в герметичном стальном баллоне, и затем раствор нагрели до температуры 100°C в течение 18 часов. Реакционную смесь концентрировали. Остаток обработали раствором 1М карбоната натрия (50 мл), этилацетат (100 мл) и изопропанола (15 мл) и перемешали в течение 30 минут. Раствор этилацетата разделили, высушили с ангидридмагнийсульфатом, отфильтровали и затем концентрировали под пониженным давлением до получения 422.3 мг продукта, выход 70.3%. Нитроанилин (157.2 мг, 0.52 ммол) растворили в метаноле (30 мл) и затем добавили никель Ренея (0.5 г). Смесь гидрировали при давлении 1 атм в течение 1 дня. Никель Ренея отфильтровали и промыли с метанолом (30 мл, 2 раза). Далее, 3-формил-1-азаазулен-2-он (86.6 мг, 0.5 ммол) и аммонийметавандат (2.9 мг, 0.025 ммол) добавили в фильтрат и перемешали при температуре 50°C в течение 48 часов. Метанол выпарили, и далее остаток пропустили через колонну с силикагелем и элютировали с DCM/MeOH (10/1) до получения 100 мг продукта, выход 47.2%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.58, 12.62 (s, 1H), 12.34 (s, 1H), 9.39, 9.41 (d, 1H), 7.97, 8.11 (s, 1H), 7.83, 7.87 (d, 1H), 7.70 (dd, 1H), 7.58-7.63 (dt, 1H), 7.49-7.53 (m, 2H), 7.36-7.40 (dt, 1H), 2.90 (s, 4H), 2.36 (d, 4H), 2.12 (d, 3H).

Получение B113: Используя такой же способ, как при получении B112, как сульфамид 1-((4-хлор-3-нитрофенил)сульфонил)-4-метил-1,4-диазепан, так и нитроанилин 4-((4-метил-1,4-диазепан-1-ил)сульфонил)-2-нитроанлин были получены с качественным выходом. Целевое соединение В113 было получено с выходом 21%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.54, 12.58 (s, 1H), 12.33 (s, 1H), 9.38, 9.40 (d, 1H), 8.00, 8.14 (s, 1H), 7.80, 7.84 (d, 1H), 7.69 (dd, 2H), 7.56-7.62 (m, 2H), 7.49-7.54 (m, 1H), 7.35-7.39 (m, 1H), 3.32 (s, 3H), 2.55 (s, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.72 (d, 2H).

Получение B114: Используя такой же способ, как при получении B18, целевое соединение B114 было получено с выходом 40%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.49, 12.53 (s, 1H), 12.31 (s, 1H), 9.38, 9.43 (d, 1H), 7.98, 8.17 (s, 1H), 7.75-7.82 (m, 3H), 7.63-7.72 (m, 3H), 7.55-7.61 (m, 3H), 7.49 (t, 1H), 7.35 (dd, 1H).

Получение B115: Имидазол (7.49 г, 0.11 ммол), 5-фтор-2-нитроанилин (15.61 г, 0.1 ммол) и триэтиламин (11.13 г, 0.11 мл) были добавлены в ацетонитрил (200 мл) и нагреты вплоть до дефлегмации в течение 12 часов. Растворитель выпарили, добавили воду (50 мл) к остатку и перемешали в течение 30 минут. Твердый продукт желтого цвета отфильтровали, промыли с водой (25 мл, 2 раза) и в конце высушили в вакууме до получения 18.71 г 5-(1H-имидазод-1-ил)-2-нитроанилина, выход 92%. Используя такой же способ, как при получении B22, целевое соединение B115 было получено с выходом 88%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.30 (b, 1H), 9.38 (d, 1H), 8.6 (b, 1H), 7.90-7.88 (m, 2H), 7.79 (d, 1H), 7.66 (t 1H), 7.56 (t, 1H), 7.47 (m, 2H), 7.36 (m, 2H).

Получение B116: Используя такой же способ, как при получении B115, 2-нитро-5-(2H-1,2,3-триазол-2-ил)анилин был получен с выходом 68%. Используя такой же способ, как при получении B22, целевое соединение B116 было получено с выходом 75%. 1H-ЯМР (DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.00 (s, 1Н), 9.18 (d, 1Н), 8.69 (s, 1H), 8.05 (s, 2H), 7.56-7.66 (m, 2H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.25 (d, 1H), 7.16 (d, 1H).

Пример 2

Получение B23: К раствору B22 (345.4 мг, 1 ммол) с ацетонитрилом (10 мл) добавили диизопропилэтиламин (142.2 мг, 1.1 ммол) и затем трифторэтилйодид (314.9 мг, 1.5 ммол), реакционную смесь перемешали до дефлегмации в течение 16 часов. Полученной смеси дали охладится при комнатной температуре, концентрировали под вакуумом и далее очистили хроматографией на силикагеле с помощью этилацетатметанола (10:1-2:1), в качестве элюента, до получения 210.4 мг целевого соединения B23, выход 49.2%. 1Н NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.9 (b, 1H), 9.27 (d, 1H), 7.56-7.50 (m, 2H), 7.46 (t, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.17, (s, 1H), 6.93 (d, 1H), 3.16 (s, 2H), 3.13 (t, 4H), 3.00 (t, 4H).

Получение B28: Используя такой же способ, как при получении B23 и этилйодид, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B28 было получено с выходом 75%. 1Н NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.18 (s, 1H), 11.87, 11.93 (2s, 1H), 9.28, 9.34 (2d, 1H), 7.49-7.55 (m, 2H), 7.45 (t, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.24 (t, 1H), 7.13, 7.18 (2s, 1H), 6.92 (t, 1H), 3.11 (s, 4H), 2.54 (s, 4H), 2.39 (q, 2H), 1.04 (t, 3H).

Получение B38: Используя такой же способ, как при получении B23, и фторэтилтозилат, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B38 было получено с выходом 70%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.88, 11.94 (2s, 1H), 9.28, 9.34 (2d, 1H), 7.43-7.56 (m, 3H), 7.37 (t, 1H), 7.18-7.26 (m, 2H), 6.93 (t, 1H), 4.63 (t, 1H), 4.54 (t, 1H), 3.12 (s, 4H), 2.72 (t, 1H), 2.64 (s, 4H).

Получение B39: Используя такой же способ, как при получении B38, и фторпропилтозилат, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B38 было получено с выходом 65%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.88, 11.94 (2s, 1H), 9.29, 9.35 (d, 1H), 7.43-7.55 (m, 3H), 7.37 (t, 1H), 7.23 (q, 1H), 7.15 (d, 1H), 6.92 (t, 1H), 4.55 (t, 1H), 4.45 (t, 1H), 3.11 (s, 4H), 2.55 (t, 4H), 2.43 (t, 2H),1.88 (t, 1H), 1.82 (t, 1H).

Получение B78, B79 и B80: К раствору B76 (359.4 мг, 1 ммол) в ацетонитриле (10 мл) добавили диизопропилэтиламин (142.2 мг, 1.1 ммол) затем фторэтилтозилат (327.4 мг, 1.5 ммол), реакционную смесь перемешали до дефлегмации в течение 16 часов. Полученной смеси дали охладится при комнатной температуре, концентрировали под вакуумом и далее очистили хроматографией на силикагеле с помощью этилацетатметанола (10:1-2:1), в качестве элюента, до получения 94.8 мг целевого соединения B78, выход 21%; 141.9 мг целевого соединения B79, выход 35%; и 89.2 мг целевого соединения B80, выход 22%.

B78, 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.74, 11.88 (d, 1H), 9.40, 9.50 (d, 1H), 7.49-7.67 (m, 4H), 7.25-7.33 (m, 1H), 6.87-7.00 (m, 1H), 6.70-6.76 (m, 1H), 1.87-4.81 (m, 18H).

B79, 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.72, 11.85 (s, 1H), 9.39, 9.49 (d, 1H), 7.44-7.67 (m, 4H), 7.25-7.33 (m, 1H), 6.90, 6.94 (s, 1H), 6.72 (t, 1H), 4.76 (d, 2H), 4.55 (d, 2H), 3.50-3.58 (m, 4H), 2.92 (d, 2H), 2.67 (d, 2H), 1.84-1.86 (m, 2H).

B80, 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.13 (s, 1H), 11.68, 11.71, 11.28 (s, 1H), 9.24, 9.34 (d, 1H), 7.40-7.53 (m, 3H), 7.31-7.35 (m, 1H), 7.18-7.25 (m, 1H), 6.95-7.00 (m, 1H), 6.73-6.75 (m, 1H), 1.86-3.93 (m, 14H).

Получение B81, B82 и B83: Используя такой же способ, как при получении B78, и фторпропилтозилат, в качестве алкилирующего агента, целевые соединения B81, B82 и B83 были получены с выходом 19%, 31% и 21%.

B81, 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.31, 11.73, 11.87 (s, 1H), 9.38, 9.48, 9.75, 9.82 (d, 1H), 8.33-8.34, 7.81-7.84, 7.40-7.61 (m, 4H), 7.24-7.32 (m, 1H), 6.84-6.99 (m, 1H), 6.72 (t, 1H), 1.75-4.92 (m, 17H), В83, 1H-ЯМР (CDCl3, 500 МГц) соединения азаазулена, патент № 2524202 1.81-4.55 (m, 22H), 11.19, 11.27 (s, 1H), 9.44, 9.50 (d, 1H), 6.68-7.62 (m, 6H).

В82, 1Н-ЯМР (CDCl3, 500 МГц) соединения азаазулена, патент № 2524202 1.17-4.54 (m, 16H), 10.85, 11.11 (s, 2H), 9.37-9.40 (m, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.11-7.43 (m, 5H), 6.71-6.76 (m, 1H).

Пример 3

Получение B43: К раствору соединения B22 (345.4 мг, 1 ммол) в этаноле (10 мл) добавили триэтиламин (253.0 мг, 2.5 ммол) и 2-нафталингид (553.6 мг, 3.5 ммол). После одного часа в смесь добавили цианоборгидрид натрия (351.9 мг, 5.6 ммол), которую перемешали при комнатной температуре в течение 1 дня. Смесь концентрировали под пониженным давлением. Сырой продукт очистили хроматографией на силикагеле с помощью этилацетатметанола (10:1-2:1), в качестве элюента, до получения 317.4 мг B43, выход 65%. 1Н NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.18 (s, 1H), 11.87, 11.93 (2s, 1H), 9.27, 9.33 (2d, 1H), 7.84-7.90 (m, 4H), 7.45-7.60 (m, 6H), 7.38 (t, 1H), 7.18-7.26 (m, 2H), 6.93 (t, 1H), 3.71 (s, 2H), 3.14 (s, 4H), 2.62 (s, 4H).

Получение B44: Используя такой же способ, как при получении B43, и бензальдегид, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B44 было получено с выходом 79%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.14 (s, 1H), 11.85, 11.91 (2s, 1H), 9.31, 9.36 (2d, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.50-7.55 (m, 2H), 7.44 (t, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.24 (q, 1H), 7.17 (d, 1H), 6.93 (t, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.20 (s, 4H), 2.57 (s, 4H).

Получение B45: Используя такой же способ, как при получении B43, и п-диметиламинобензальдегид, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B45 было получено с выходом 77%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.20 (s, 1H), 11.85, 11.91 (2s, 1H), 9.25, 9.31 (2d, 1H), 7.40-7.52 (m, 3H), 7.33 (t, 1H), 7.21 (q, 1H), 7.13 (t, 1H), 7.10 (d, 2H), 6.89 (t, 1H), 6.66 (d, 1H), 3.39 (s, 2H), 3.08 (s, 4H), 2.83 (s, 6H), 2.50 (s, 4H).

Получение B46: Используя такой же способ, как при получении B43, и 5-бромфуран-2-карбальдегид, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B46 было получено с выходом 87%. 1Н NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.18 (s, 1H), 11.87, 11.93 (2s, 1H), 9.28, 9.35 (2d, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.43-7.57 (m, 3H), 7.38 (t, 1H), 7.13-7.27 (m, 2H), 6.92 (t, 1H), 6.51 (d, 1H), 6.41 (d, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.27 (s, 4H), 2.75 (s, 4H).5.

Получение B47: Используя такой же способ, как при получении B43 и пиридин-4-карбальдегид, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B47 было получено с выходом 82%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.88, 11.94 (2s, 1H), 9.27, 9.30 (2d, 1H), 8.53 (d, 2H), 7.43-7.55 (m, 3H), 7.37 (d, 2H), 7.34 (t, 1H), 7.14-7.25 (m, 3H), 6.92 (t, 1H), 3.59 (s, 2H), 3.15 (s, 4H), 2.58 (s, 4H).

Получение B48: Используя такой же способ, как при получении B43 и пиридин-3-карбальдегид, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B48 было получено с выходом 91%. 1Н NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.87, 11.94 (2s, 1H), 9.27, 9.33 (2d, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.42 (d, 2H), 7.75 (d, 1H), 7.43-7.56 (m, 3H), 7.36-7.39 (m, 2H), 7.23 (q, 1H), 7.15 (d, 2H), 6.92 (t, 1H), 3.58 (s, 2H), 3.12 (s, 4H), 2.57 (s, 4H).

Получение B49: Используя такой же способ, как при получении B43, пиридин-2-карбальдегид, в качестве алкилирующего агента, целевое соединение B49 было получено с выходом 81%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.88, 11.94 (2s, 1H), 9.28, 9.34 (2d, 1H), 8.42, 8.52 (2d, 1H), 7.78 (t, 1H), 7.43-7.57 (m, 3H), 7.38 (t, 1H), 7.18-7.35 (m, 3Н), 6.93 (t, 1H), 6.50 (s, 1H), 3.67 (s, 2H), 3.14 (s, 4H), 2.62 (s, 4H).

Получение B87: Используя такой же способ, как при получении B48, и соединения B76 в качестве исходного сырья, целевое соединение B87 было получено с выходом 90%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.11, 12.16 (s, 1H), 11.68, 11.80 (s, 1H), 9.25, 9.34 (d, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.17-7.51 (m, 5H), 6.89, 6.95 (s, 1H), 6.70 (d, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.56 (s, 2H), 3.52 (s, 2H), 2.75 (s, 2H), 2.56 (s, 2H), 1.98 (s, 2H).

Пример 4

Получение B59: 5-бомофуран -2-карбальдегид (262.5 мг, 1.5 ммол), соединение BN22 (345.4 мг, 1 ммол) и диизопропилэтиламин (258.5, 2 ммол) в н-бутаноле (10 мл) перемешали при температуре 140°C в течение 1 дня. Смесь охладили при комнатной температуре, разбавили водой (50 мл), и выделили с этилацетатом (20 мл, 2 раза). Растворы этилацетатата объединили, высушили с ангидридмагнийсульфатом и далее выпарили под пониженным давлением. Остаток очистили хроматографией на силикагеле с помощью этилацетатметанола (10:1-2:1), в качестве элюента, до получения 258.6 мг целевого соединения B59, выход 59%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.94, 11.99 (2s, 1H), 9.28, 9.34 (2d, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.51-7.59 (m, 3H), 7.46 (t, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.24-7.27 (m, 2H), 6.99 (t, 1H), 5.71 (d, 1H), 3.57 (t, 4H), 3.23 (t, 4H).

Получение B61: Используя такой же способ, как при получении B59, и 3,4,5-трифторпиридин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B61 было получено с выходом 80%. 1 H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.30, 11.33 (2s, 1H), 10.44, 10.53 (2s, 1H), 9.46, 9.49 (2d, 1H), 8.15 (s, 2H), 7.50 (q, 1H), 7.30-7.47 (m, 3H), 7.21 (t, 1H), 7.01-7.05 (m, 2H), 3.73 (s, 4H), 3.31 (s, 4H).

Получение B63: Используя такой же способ, как при получении B59 и 3-фторпиридин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B63 было получено с выходом 65%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.00, 12.06 (2s, 1H), 9.42, 9.48 (2d, 1H), 7.51-7.70 (m, 6H), 7.33 (q, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.97 (t, 1H), 3.57 (t, 4H), 3.13 (t, 2H), 3.07 (t, 2H).

Получение B64: Используя такой же способ, как при получении B59, и 2-хлорпиридин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B64 было получено с выходом 85%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.97, 12.02 (2s, 1H), 9.30, 9.36 (2d, 1H), 8.18 (d, 1H), 7.57-7.61 (m, 3H), 7.48 (t, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.24-7.28 (m, 2H), 7.03 (t, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.70 (t, 1H), 3.68 (t, 4H), 3.22 (t, 4H).

Получение B65: Используя такой же способ, как при получении B59, и 2-хлор-3-нитропиридин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B65 было получено с выходом 81%. 1Н NMR (500 МГц, CDCl3) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm), 11.20, 11.26 (2s, 1H), 9.45 (d, 1H), 8.35 (t, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.17-7.50 (m, 7H), 7.01 (d, 1H), 6.67 (m, 1H), 3.67 (s, 4H), 3.32 (s, 4H).

Получение B67: Используя такой же способ, как при получении B59, и 4-хлор-N,N,6-триметилпиримидин-2-амин, в качестве исходного сырья, целевое соединение В67 было получено с выходом 81%. 1H NMR (500 МГц, CDCl3) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.30, 11.36 (2s, 1H), 9.45 (m, 1H), 7.69-7.71 (m, 1H), 7.29-7.51 (m, 6H), 7.04 (m, 2H), 3.78 (t, 4H), 3.20 (t, 4H), 3.15 (s, 6H), 2.33 (s, 3Н).

Получение B68: Используя такой же способ, как при получении B59, и 2-хлорпиримидин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B68 было получено с выходом 80%. 1H NMR (500МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.93, 11.98 (2s, 1H), 9.29, 9.30 (2d, 1H), 8.39, 8.40 (d, 2H), 7.53-7.58 (m, 2H), 7.42-7.48 (m, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.21-7.28 (m, 2H), 7.00 (t, 1H), 6.65 (t, 1H), 3.93 (t, 4H), 3.18 (t, 4H).

Получение B69: Используя такой же способ, как при получении B59, и 2-хлорпиразин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B69 было получено с выходом 75%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.94, 12.00 (2s, 1H), 9.29, 9.35 (2d, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.12 (t, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.52-7.56 (m, 2H), 7.46 (t, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.22-7.27 (m, 2H), 6.71-7.00 (m, 1H),3.76(t, 4H), 3.17 (t, 4H).

Получение B93: 4-хлорпиридигидрохлорид (205.5 мг, 1.5 ммол), соединение B76 (359.4 мг, 1 ммол) и диизопропилэтиламин (258.5, 2 ммол) в н-бутаноле (10 мл) перемешали при температуре 140°C в течение 1 дня. Смесь охладили при комнатной температуре, разбавили водой (50 мл), и разделили с этилацетатом (20 мл, 2 раза). Растворы этилацетатата объединили, высушили с ангидридмагнийсульфатом и далее выпарили под пониженным давлением. Остаток очистили хроматографией на силикагеле с помощью этилацетатметанола (10:1-2:1), в качестве элюента, до получения 315.6 мг целевого соединения B93, выход 72%. 1H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.17 (s, 1H), 11.74 (s, 1H), 8.11 (m, 2H), 7.49-7.53 (m, 1H), 7.46 (d, 2H), 7.35 (m, 1H), 7.23 (m, 1Н), 7.03 (m, 1H), 6.93 (d, 2H), 6.77 (d, 1H), 3.82 (s, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.51 (s, 1H), 3.17 (s, 1H), 2.09 (s, 2H), 1.76 (s, 1H), 1.24 (m, 2H).

Получение B94: Используя такой же способ, как при получении B93, и 2-хлорпиридин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B94 было получено с выходом 75%. 1Н-ЯМР (DMSO-d6, 500 МГц) соединения азаазулена, патент № 2524202 2.04-4.04 (m, 10Н), 12.12, 12.16 (s, 1H), 11.69, 11.81 (s, 1H), 9.24, 9.35 (d, 1H), 7.40-8.05 (m, 4H), 7.30-7.35 (m, 1H), 7.18-7.25 (m, 1H), 6.97, 7.03 (s, 1H), 6.75-6.85 (m, 1H), 6.67 (t, 1H), 6.50 (t, 1H).

Получение B95: Используя такой же способ, как при получении B93, и 2-хлор-3-нитропиридин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B95 было получено с выходом 85%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.12, 12.15 (s, 1H), 11.66, 11.79 (s, 1H), 9.22, 9.32 (d, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.18-7.54 (т, 5Н), 6.92, 6.96 (s, 1H), 6.68-6.72 (т, 2Н), 2.03-3.82 (d, 10H).

Получение B96: Используя такой же способ, как при получении B93, и 2,6-дихлорпиридин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B96 было получено с выходом 85%. 1 H-ЯМР (DMSO-d6, 500 МГц) соединения азаазулена, патент № 2524202 .1.93-3.65 (m, 10Н), 12.14 (s, 1H), 11.71, 11.83 (s, 1H), 9.26 (d, 1H), 7.42-7.95 (m, 5Н), 7.33 (d, 1H), 7.22 (t, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.75 (d, 1H).

Получение B97: Используя такой же способ, как при получении B93, и 4-хлор-N,N,6-триметилпиримидин-2-амин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B97 было получено с выходом 81%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.13 (s, 1H), 11.69, 11.81 (s, 1H), 9.26 (s, 1H), 7.41-7.52 (m, 3H), 7.32 (d, 1H), 7.23 (t, 1H), 7.01 (s, 1H), 6.76 (d, 1H), 5.89 (s, 1H), 3.68 (s, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.31 (s, 4H), 3.04 (s, 6H), 2.11 (s, 3H), 2.01 (t, 2H).

Получение B98: Используя такой же способ, как при получении B93, и 2-хлопиримидин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B97 было получено с выходом 87%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.13 (s, 1H), 11.69, 11.80 (s, 1H), 9.23, 9.33 (d, 1H), 7.32-7.55 (m, 4H), 7.19-7.26 (m, 1H), 6.96, 7.01 (s, 1H), 6.77 (t, 1H), 6.55 (t, 1H), 3.98 (s, 2H), 3.66 (s, 2H), 3.62 (d, 2H), 2.55 (s, 2H), 2.00 (d, 2H).

Получение B99: Используя такой же способ, как при получении B93, и 2-хлопиразин, в качестве исходного сырья, целевое соединение B99 было получено с выходом 80%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.12 (s, 1H), 11.69, 11.81 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.41-7.52 (m, 3H), 7.33 (d, 1H), 7.21 (t, 1H), 7.02 (s, 1H), 6.77 (d, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.57 (s, 2H), 3.50 (s, 2H), 2.04 (t, 2H).

Получение B100: Используя такой же способ, как при получении B93, и 2-хлор-6-метилпиразин, в качестве исходного сырья, целевое соединение В 100 было получено с выходом 78%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.11 (s, 1H), 11.70, 11.82 (s, 1H), 9.23, 9.34 (d, 1H), 7.30-7.53 (m, 4H), 7.16 7.24 (m, 2H), 6.97-7.07 (m, 2H), 6.75(d, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.46 (s, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.03 (t, 2H).

Пример 5

Получение B57: К смеси соединения B22 (345.4 мг, 1 ммол) и диизопропилэтиламин (193.8 мг, 1.5 ммол) в дихлорметане (10 мл) добавили метансульфонил хлорид (137.5 мг, 1.2 ммол) и перемешали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия (10 мл). Раствор дихлорметана разделили, высушили с ангидридмагнийсульфатом и далее выпарили под пониженным давлением. Остаток очистили хроматографией на силикагеле с помощью этилацетатметанола (10:1-10:3), в качестве элюента, до получения 385.4 мг целевого соединения B57, выход 91%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.20 (s, 1H), 11.97, 12.02 (s, 1H), 9.32, 9.38 (d, 1H), 7.47-7.61 (m, 3H), 7.40 (t, 1H), 7.23-7.31 (m, 2H), 6.97-7.00 (m, 1H), 3.19-3.25 (m, 8H), 2.97 (s, 3H).

Получение B58: Используя такой же способ, как при получении B57, и 2-хлорэтанолсульфонил хлорид, в качестве сульфирующего агента, целевое соединение B58 было получено с выходом 78%. 1 H NMR (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.7 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.92 (d, 1H), 7.68-7.78 (m, 3H), 7.52 (t, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.20 (t, 1H), 3.29-3.41 (m, 12H).

Получение B89: К смеси соединения B79 (359.4 мг, 1 ммол) и диизопропилэтиламин (193.8 мг, 1.5 ммол) в дихлорметане (10 мл) добавили янтарный ангидрид (120.1 мг, 1.2 ммол) и перемешали при комнатной температуре в течение ночи. Затем смесь промыли 0.1 М раствором лимонной кислоты (10 мл). Раствор дихлорметана разделили, высушили с ангидридмагнийсульфатом, отфильтровали и далее выпарили под пониженным давлением. Полученный остаток очистили хроматографией на силикагеле с помощью этилацетатметанола (10:1-2:1), в качестве элюента, до получения 425.1 мг целевого соединения B57, выход 92%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.71, 11.83 (s, 1H), 9.24, 9.34 (d, 1H), 7.33-8.09 (m, 5H), 7.18-7.22 (m, 1H), 6.96, 7.01 (s, 1H), 6.58, 6.75 (d, 1H), 3.66 (m, 4H), 2.42 (t, 2H), 2.34 (t, 2H), 2.25 (t, 2H), 1.98 (t, 2H), 1.88 (t, 2H).

Получение B90: Используя такой же способ, как при получении B57, и B75, в качестве исходного сырья, целевое соединение B90 было получено с выходом 88%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.13, 12.17 (s, 1H), 11.71, 11.84 (s, 1H), 9.25, 9.35 (d, 1H), 7.41-7.54 (m, 3H), 7.33 (t, 1H), 7.19-7.26 (m, 1H), 6.97, 7.02 (s, 1H), 6.76 (t, 1H), 1.95-3.67 (m, 13H).

Получение B91: Используя такой же способ, как при получении B57, и диметилсульфомоил хлорид, в качестве сульфирующего агента, целевое соединение B91 было получено с выходом 87%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.13, 12.17 (s, 1H), 11.71, 11.83 (s, 1H), 9.25, 9.34 (d, 1H), 7.39-7.52 (m, 3H), 7.33 (t, 1H), 7.22 (dd, 1H), 6.75 (d, 1H), 6.67, 7.01 (s, 1H), 1.39-3.65 (m, 16H).

Пример 6

Получение B55: Соединение B22 (345.4 мг, 1 ммол) и фенилизоцинат (178.7 мг, 1.5 ммол) были добавлены в дихлорметан (10 мл) и вступили реакцию при комнатной температуре в течение 1 дня. Смесь добавили в колонку силикагеля и далее вымыли смесью этилацетатметанола (10:1-2:1). После выпаривания 401.2 мг целевого соединения В55 было получено с выходом 86%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.21 (s, 1H), 11.92, 11.98 (2s, 1H), 9.28, 9.35 (2d, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.46-7.58 (m, 5H), 7.39 (t, 1H), 7.23-7.28 (m, 4H), 6.99 (t, 1H), 6.94 (t, 1H), 3.65 (s, 4H), 3.15 (s, 4H).

Получение B118: Соединение B6 (276.3 мг, 1 ммол) и 4-хлор-3-(трифторметил)фенилизоцинат (265.9 мг, 1.2 ммол) были смешаны с N-метилпрролидином (10 мл) и вступили в реакцию при комнатной температуре в течение 1 дня. Смесь выпарили в вакууме для удаления большинства NMP. Остаток обработали дихлорметаном (5 мл), наполнили им колонку силикагеля и далее вымыли смесью этилацетатметанола (10:1-2:1). После выпаривания, 412.5 мг целевое соединение B118, было получено с выходом выходом 83%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.25 (s, 1H), 12.13 & 12.11 (s, 1H), 9.41 & 9.36 (d, 1H), 9.15 & 9.11 (s, 1H), 8.87 & 8.76 (s, 1H) 8.18-8.17 (m, 1H), 7.92 & 7.86 (s, 1H), 7.70-7.23 (m, 8H). LC-MS (m/z) 498 [M+1].

Получение B119: Используя такой же способ, как при получении В 118, и 2-фтор-5-(трифторметил)фенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B119 было получено с выходом 81%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.21 (s, 1H), 12.09 (s, 1H), 9.35 (s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.68 (d, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.58 (dd, 2H), 7.49 (t, 2H), 7.40 (d, 2H), 7.28 (t, 1H), 7.20 (d, 1H).

Получение B120: Используя такой же способ, как при получении B118,, и 2,5-дифторфенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B120 было получено с выходом 89%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.09, 12.20 (s, 1H), 12.05, 12.08 (s, 1H), 9.32, 9.37 (d, 1H), 8.09-9.16 (m, 2H), 7.87 (t, 1H), 7.55-7.62 (m, 2H), 7.46-7.52 (m, 1H), 7.36-7.41 (m, 1H), 6.80-7.30 (m, 3Н).

Получение B121: Используя такой же способ, как при получении B118,, и фенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B121 было получено с выходом 83%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.04, 12.06 (s, 1H), 9.31, 9.36 (d, 1H), 8.66, 8.70 (s, 1H), 8.60, 8.63 (s, 1H), 7.84, 7.87 (s, 1H), 7.54-7.61 (m, 2H), 7.44-7.51 (m, 3Н), 7.38 (t, 1H), 7.16-7.30 (m, 4H), 6.96 (t, 1H).

Получение B123: Используя такой же способ, как при получении B118,, и 2-этил-6-метилфенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B123 было получено с выходом 78%. 1Н-ЯМР (DMSO-d6, 500 МГц) соединения азаазулена, патент № 2524202 12.02 (s, 1H), 9.30, 9.34 (d, 1H), 8.62, 8.74 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.50-7.59 (m, 2H), 7.46 (t, 1H), 7.35-7.40 (m, 1H), 7.20-7.28 (m, 2H), 7.10-7.15 (m, 3Н), 2.62 (dd, 2H), 2.24 (s, 3H),1.15 (t, 3H).

Получение B124: Используя такой же способ, как при получении B118,, и циклогексил изоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B124 было получено с выходом 71%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.17 (s, 1H), 11.96, 11.99 (s, 1H), 9.29, 9.34 (d, 1H), 8.16, 8.27 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.34-7.59 (m, 3Н), 7.24 (dd, 1H), 7.06, 7.12 (d, 1H).

Получение B125: Используя такой же способ, как при получении B118,, и 2-фторфенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B125 было получено с выходом 85%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.20 (s, 1H), 12.06, 12.08 (s, 1H), 9.32, 9.37 (d, 1H), 8.99, 9.08 (s, 1H), 8.49 (d, 1H), 8.21 (t, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.48 (t, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.13-7.30 (m, 4H), 6.99 (dd, 1H).

Получение B126: Используя такой же способ, как при получении B118, и 3-фторфенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B126 было получено с выходом 88%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.05 (s, 1H), 9.31, 9.36 (d, 1H), 9.30, 9.32 (s, 1H), 9.07, 9.16 (s, 1H), 7.84, 7.89 (s, 1H), 7.52-7.60 (m, 3Н), 7.47 (t, 1H), 7.38 (t, 1H), 7.15-7.31 (m, 4H), 6.74 (t, 1H).

Получение B127: Используя такой же способ, как при получении B118, и 4-фторфенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B127 было получено с выходом 80%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.04, 12.06 (s, 1H), 9.30, 9.35 (d, 1H), 8.91, 8.93 (s, 1H), 8.82, 8.91 (s, 1H), 7.83, 7.87 (s, 1H), 7.45-7.60 (m, 5H), 7.38 (t, 1H), 7.17-7.28 (m, 2H), 7.11 (t, 2H).

Получение B128: Используя такой же способ, как при получении B118,, и 2,4-дифторфенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B128 было получено с выходом 77%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.20 (s, 1H), 12.07, 12.08 (s, 1H), 9.32, 9.36 (d, 1H), 8.94, 9.04 (s, 1H), 8.46, 8.47 (s, 1H), 8.15 (dd, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.51-7.61 (m, 2H), 7.48 (t, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.13-7.32 (m, 3H), 7.05 (t, 1H).

Получение В 129: Используя такой же способ, как при получении B118, и 2,6-дифторфенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B129 было получено с выходом 75%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.19 (s, 1H), 12.06 (s, 1H), 9.32 (d, 1H), 8.79, 8.88 (s, 1H), 8.00 (1H, s), 7.84 (1H, s), 7.56 (t, 2H), 7.48 (t, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.24-7.33 (m, 2H), 7.13-7.20 (m, 3H).

Получение B130: Используя такой же способ, как при получении B118,, и 3-хлор-4-фторфенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B130 было получено с выходом 82%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.19 (s, 1H), 12.06 (s, 1H), 9.32, 9.37 (d, 1H), 8.87 (d, 1H), 8.69, 8.79 (s, 1H), 7.78-7.85 (m, 2H), 7.46-7.60 (m, 3H), 7.39 (t, 1H), 7.17-7.33 (m, 4H).

Получение B131: Используя такой же способ, как при получении B118, и 2-(трифторметил)фенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение В 131 было получено с выходом 82%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.19 (s, 1H), 12.08 (s, 1H), 9.32, 9.36 (d, 1H), 9.31, 9.40 (s, 1H), 8.01, 8.03 (s, 2H), 7.85, 7.88 (s, 1H), 7.56-7.68 (m, 4H), 7.48 (t, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.13-7.30 (m, 3Н).

Получение B132: Используя такой же способ, как при получении B118, и 3-(трифторметил)фенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение В 13 2 было получено с выходом 82%. 1 Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.20 (s, 1H), 12.06, 12.08 (s, 1H), 9.32, 9.37 (d, 1H), 8.98, 9.01 (s, 1H), 8.69, 8.79 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.83, 7.89 (s, 1H), 7.46-7.61 (m, 5H), 7.39 (t, 1H), 7.20-7.30 (m, 3H).

Получение В133: Используя такой же способ, как при получении B118, и 4-(трифторметил)фенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение В 133 было получено с выходом 83%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.20 (s, 1H), 12.08 (s, 1H), 9.32, 9.37 (d, 1H), 9.02, 9.05 (s, 1H), 8.69, 8.79 (s, 1H), 7.84, 7.88 (s, 1H), 7.58-7.69 (m, 6H), 7.48 (t, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.18-7.28 (m, 2H).

Получение B134: Используя такой же способ, как при получении B118, и 2,5-бис(трифторметил)фенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B134 было получено с выходом 88%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 10.02-12.20 (m, 1H), 8.90-9.39 (m, 2H), 6.52-8.18 (m, 12H).

Получение B135: Используя такой же способ, как при получении B118, и 2-хлор-5-(трифторметил)фенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B135 было получено с выходом 80%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.08, 12.10 (s, 1H), 9.49, 9.58 (s, 1H), 9.32, 9.38 (d, 1H), 7.88, 7.91 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.52-7.61 (m, 2H), 7.49 (t, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.35 (dd, 1H), 7.16-7.31 (m, 2H).

Получение B136: Используя такой же способ, как при получении B118, и 4-хлор-2-(трифторметил)фенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B136 было получено с выходом 82%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.09 (s, 1H), 9.39, 9.47 (s, 1H), 9.32, 9.35 (d, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.08 (dd, 1H), 7.85-7.88 (m, 1H), 7.71-7.75 (m, 3H), 7.52-7.61 (m, 2H), 7.48 (t, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.13-7.30 (m, 2H).

Получение B137: Используя такой же способ, как при получении B118, и 2-метоксифенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B137 было получено с выходом 89%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.04, 12.06 (s, 1H), 9.31, 9.36 (d, 1H), 9.26 (d, 1H), 8.18 (t, 2H), 7.88 (d, 1H), 7.51-7.61 (m, 2H), 7.47 (t, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.13-7.30 (m, 2H,), 7.02 (d, 1H), 6.891-6.954 (m, 2H), 3.894 (s, 3H).

Получение B138: Используя такой же способ, как при получении B118, и 3-метоксифенилизоцинат, в качестве уреидного агента, целевое соединение B138 было получено с выходом 80%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.04, 12.06 (s, 1H), 9.31, 9.35 (d, 1H), 8.62, 8.65 (d, 2H), 7.83, 7.87 (s, 1H), 7.54-7.61 (m, 2H), 7.48 (t, 1H), 7.39 (t, 1H), 7.15-7.30 (m, 4H), 6.95 (t, 1H), 6.54 (d, 1H), 3.74 (s, 3H).

Пример 7

Получение B71: Соединение B7 (305.3 мг, 1 ммол) и HBTU (568.9 мг, 1.5 ммол) были растворены дихлорметане (10 мл) при комнатной температуре. После 10 минут добавили 1-метилпиперазин (300.5 мг, 3 ммол). Реакционную смесь перемешивали всю ночь при комнатной температуре с азотом. Смесь разбавили этилацетатом (50 мл) и промыли раствором карбоната натрия (1 M, 20 мл, 2 раза). Органический слой отделили, высушили с ангидридмагнийсульфатом, отфильтровали и затем выпаривали под вакуумом. Сырой продукт очистили испарительной колонной с помощью дихлорметанэтилацетата (5:1), в качестве элюента, до получения 325 мг целевого продукта, выход 84%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.42 (d, 1H), 10.10 (s, 1H), 9.42 (d, 1H), 7.73-7.82 (m, 3H), 7.63 (t, 1H), 7.52 (d, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.30 (d, 1H), 3.55 (t, 4H), 2.94 (t, 4H), 2.66 (s, 3H).

B72, 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 9.39 (d, 2H), 8.51 (s, 2H), 8.24 (s, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.59-7.67 (m, 3H), 7.55 (d, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.32 (t, 2H), 6.69 (s, 1H), 3.50 (t, 4H), 3.29 (t, 4H).

Получение B73: Это соединение было получено с использованием сходной методики при получении целевого соединения B71 с выходом 78%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.42 (s, 1H), 12.28 (br, 1H), 10.25 (d, 1H), 9.43 (dd, 1H), 8.02 (dd, 1H), 7.90 (t, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.72 (m, 2H), 7.62 (m, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.05 (d, 1H), 3.30 (t, 4H), 2.01 (t, 4H).

Получение B74: Это соединение было получено с использованием сходной методики при получении целевого соединения B71 с выходом 88%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.36 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.67-7.69 (m, 2H), 7.56 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.67 (d, 1H), 3.51 (s, 1H), 3.20 (s, 1H), 2.64 (m, 1H), 2.53 (s, 3Н), 2.32 (d, 2H), 1.83 (d, 2H), 1.79 (s, 1H), 1.26 (s, 1H).

Получение B92: Это соединение было получено с использованием сходной методики при получении целевого соединения B71 с выходом 75%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 12.35 (s, 1H), 9.40 (t, 1H), 8.03 (m, 2H), 7.66 (m, 2H), 7.60 (m, 2H), 7.47 (d, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.09 (m, 1H), 6.86 (m, 1H), 6.65 (m, 1H), 3.59-3.84 (m, 5H), 3.20 (s, 1H), 1.99 (s, 2H), 1.83 (d, 2H), 1.61-1.82 (m, 2H), 1.26 (s, 1H).

Пример 8

Получение B9: 1-Азаазулен-2-он (8.71 г, 60 ммол) был растворен в дихлорметане (250 мл), далее хлорид алюминия (120 ммол) и бромацетилхлорид (10 мл, 90 ммол, 1.5 экв) были добавлены и перемешаны при комнатной температуре в течение ночи. В смесь был добавлен лед (100 г), и далее соляная кислота (6N, 20 мл) и вода (150 мл), все перемешали в течение 30 минут. Твердый продукт отфильтровали и промыли водой (100 мл, 4 раза). Продукт 3-(бромацетил)-1-азаазулен-2-он массой 6.36 г, выход 40%. 3-(бромацетил)-1-азаазулен-2-он (1 ммол) и 2-аминопиридин (1 ммол) были добавлены в этанол (5 мл) и нагреты вплоть до дефлегмации в течение 1 дня. Растворитель выпарили в вакууме, остаток разделили на этилацетат и раствор карбоната натрия.

Слой этилацетата был отделен и выпарен. Остаток очистили колоночной хроматографией с помощью этилацетатметанола (10:1-3:1), в качестве элюента, до получения 175 мг целевых соединений, выход 67%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.84 (s, 1H), 9.33 (d, 1H), 8.67 (d, 1H), 8.66 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.29 (t, 1H), 7.27 (t, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.13 (d, 1H), 7.04 (t, 1H), 6.92 (t, 1H). LC-MS (m/z) 262 [M+1].

Получение B13: 3-(бромацетил)-1-азаазулен-2-он (1 ммол) и 2-амино-5-цианопиридин (1 ммол) были добавлены в этанол (5 мл) и нагреты вплоть до дефлегмации в течение 1 дня. Слой этилацетата был отделен и выпарен. Остаток очистили колоночной хроматографией с помощью этилацетатметанола (10:1-2:1), в качестве элюента, до получения 115 мг целевых соединений, выход 40%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.95 (s, 1H), 9.44 (s, 1H), 9.30 (d, 1H), 8.76 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.31-7.40 (m, 2H), 7.22 (d, 1H), 7.11 (t, 1H).

Получение B14: 3-(бромацетил)-1-азаазулен-2-он (1 ммол) и 2-амино-5-метоксипиридин (1 ммол) были добавлены в этанол(5 мл) и нагреты вплоть до дефлегмации в течение 1 дня. Слой этилацетата был отделен и выпарен. Остаток очистили колоночной хроматографией с помощью этилацетатметанола (10:1-3:1), в качестве элюента, до получения 254 мг целевых соединений, выход 87%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 9.03 (d, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.30-7.7.36 (m, 2H), 7.13(t, 1H), 3.90 (s, 3H).

Получение B16: 3-(бромацетил)-1-азаазулен-2-он (1 ммол) и 2-амино-4-хлорпиридин (1 ммол) были добавлены в этанол (5 мл) и нагреты вплоть до дефлегмации в течение 1 дня. Слой этилацетата был отделен и выпарен. Остаток очистили колоночной хроматографией с помощью этилацетатметанола (10:1-4:1), в качестве элюента, до получения 213 мг целевых соединений, выход 72%. 1H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.84 (s, 1H), 9.25 (d, 1H), 8.68 (d, 1H), 8.67 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.22-7.30 (m, 2H), 7.13 (d, 1H), 6.68-7.04 (m, 2H).

B17, 1H-ЯМР (DMSO-d6, 500 МГц) соединения азаазулена, патент № 2524202 11.85 (s, 1H), 9.26 (d, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.23-7.37 (m, 3H), 7.14 (d, 1H), 7.04 (t, 1H).

Пример 9

Получение B12: 3-(бромацетил)-1-азаазулен-2-он (1 ммол) и 2-аминопирмидин (1 ммол) были добавлены в этанол (5 мл) и нагреты вплоть до дефлегмации в течение 1 дня. Слой этилацетата был отделен и выпарен. Остаток очистили колоночной хроматографией с помощью этилацетатметанола (10:1-1:1), в качестве элюента, до получения 198 мг целевых соединений, выход 76%. 1 H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 11.91 (broad, 1H), 9.36 (d, 1H), 9.07 (d, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.37 (t, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.12-7.08 (m, 2H). LC-MS (m/z) 263 [M+1].

Пример 10

Получение B143: 2-(3-фторфенил) уксусная кислота (1 ммол) и 1-азаазулен-2-он (1 ммол) были добавлены в реактив Итона (2 мл) и нагреты при температуре 80 градусов в течение 1 дня. Смесь пересыпали в воду (50 мл) и перемешали в течение 30 минут. Продукт отфильтровали, промыли с водой и высушили до получения 201 мг целевого продукта, выход 72%. 3-(2-(3-фторфенилацетил)-1-азаазул -2-он (201 мг, 0.72 ммол) был растворен в концентрированной серной кислоте (2 мл), охлажденной в ледяной ванне и далее добавили концентрированную азотную кислоту (65 мг) и перемешали в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавили водой (5 мл). Твердый продукт отфильтровали, промыли с водой (5 мл) и метанолом (5 мл) и далее высушили до получения 57 мг нитрированного продукта, выход 24%. 3-(2-(5-фтор-2-нитрофенил)ацетил)-1-азаазул-2-он (57 мг, 0.17 ммол), KF (41 мг) and N-метилпиперазине (109 мг) были растворены в DMSO (3 мл) и нагреты при температуре 120 градусов в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавили водой (10 мл). Твердый продукт отфильтровали, промыли с водой (5 мл) и метанолом (5 мл), и далее высушили до получения 58 мг целевого продукта, выход 84%. 3-(2-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-нитрофенил)ацетил)-1-азаазул-2-он (10 мг, 0.025 ммол) растворили в метаноле (5 мл), гидрировали при давлении 1 атм водорода при наличии никеля Ренея в течение 14 часов. Смесь отфильтровали, и фильтрат концентрировали в вакууме до получения 5.2 мг целевого соединения 3-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)-1H-индол -2-ил)-1-азаазул-2-он, выход 58%. 1Н-ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) соединения азаазулена, патент № 2524202 (ppm) 10.04 (s, 1H), 11.01 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.29(t, 2H), 7.16 (d, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.06 (t, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.90 (s, 1H), 3.49 (b, 4H), 2.82 (b, 4H), 2.53 (s, 3H).

Ингибирующая активность соединений по настоящей заявке.

Пример 11: Образцы для анализа киназы

Азаазуленовые соединения по настоящему изобретению исследовались на их эффективность по ингибированию активностей FLT-3, C-KIT и KDR-киназ, исследования проводили биохимическими анализам DELFIA по описанной ниже методике. Анализы осуществлялись в Division of Cell Engineering, Biomedical Engineering Research Laboratories, Industrial Technology Research Institute, Bidg. 53, 195, sec.4, Chung Hsing Rd. Chutung, Hsinchu, Taiwan 310, R.O.C.

Анализ FLT-3 проводился по протоколу, описанному в руководстве «Protocol for HTScang FLT-3 Kinase Assay Kit (Cell Signaling TechnologyRTM)». Условия анализа были следующими: источник FLT-3: слитый белок GST-киназы получали при использовании системы экспрессии бакуловируса с элементом конструкции, экспрессирующей FLT-3 человека (Arg571-Ser993) (GenBank серийный № NM.sub.-004119) с аминотерминальным хвостом GST, субстрат: 1,5 мкМ биотинированный пептидный предшественник гастрина (с Tyr87 в качестве сайта фосфорилирования), носитель: 1% диметилсульфоксид (ДМСО), время до инкубирования/температура: 5 мин при комнатной температуре, время инкубирования/температура: 30 мин при комнатной температуре, буфер для инкубирования: 60 мМ HEPES pH 7.5, 5 мМ MgCl2, 5 мМ MnCl2, 3 мкМ Na3 VO4, 1,25 мМ DTT, 20 мкМ АТР. Использовался также и количественный анализ: DELFLRTM Assay.

В приведенной далее таблице 2 сведены ингибирующие действия азаазуленовых соединений по настоящему изобретению в отношении FLT-3 киназы.

Таблица 2
Ингибирующие активности азаазуленовых соединений в отношении FLT-3 киназы
Номер соединенияИнгибирование FLT-3 при 1 мкМ (%)Ингибирование FLT-3 при 0,1 мкМ (%)
A1 (предыдущая технология) 59,411,5
B1 10,48,4
B259,918,9
B4 37,113,7
B527,112,8
B6 45,112,8
B78,7-
B8 68,59,8
B919,15,8
B10 20,38,9
B1127,3 12,5
B12 1,64,5
B149,6 -
B15 18,18,6
B1616,5 4,8
B17 23,44,9
B1840,2 16,4
B19 28,614,7
B2033,3 16,7
B21 63,020,1
B2283,9 29,1
B23 91,541,2
B2471,5 19,1
B26 91,245,6
B328,1 8
B33 96,658,7
B3485,4 40,2
B35 86,742
B3664 24,8
B38 69,221,8
B3978,6 24,3
B40 88,138,2
B4367,2 33,5
B44 79,129
B4577 27,3
B46 79,227,4
B4972,2 21,9
B50 79,625,1
B5166,6 20,6
B52 42,520,3
B5491,6 46,0
B55 93,245,2
B5781,5 29,5
B58 83,835,7
B5996,1 55,6
B60 99,171,7
B6174,3 17,7
B62 13,79,5
B6333,4 18,9
B64 79,229,5
B6560,5 16,3
B66 55,520,3
B6795,3 43,3
B68 80,739,1
B6977,3 29,3
B70 27,511,1
B7139,3 6,8
B72 85,536,8
B7322,3 23,7
B74 64,027,1
B7537,1 13,4
B76 92,950,0
B7794,3 47,1
B78 39,420,3
B7936,6 22,3
B80 71,423,1
B8121 9,9
B82 81,630,3
B8321,2 11
B85 89,844,4
B8791,6 39,8
B88 62,420,6
B8956,7 20
B90 59,223,0
B9142,5 14,3
B92 51,417,9
B9389,4 44,2
B94 52,317
B9537,7 14,4
B96 35,710,9
B9744,6 8,8
B98 69,517,8
B9951,8 17
B100 20,29,1
B10190,7 46,8
B102 67,822,8
B10387,4 36,5
B104 84,128,3
B10586 38,7
B106 76,224,2
B10792,9 42,5
B108 86,516
B10935,2 17,3
B110 84,936,5
B11175,0 24,5
B112 21,39,5
B11342 14,8
B114 16,310
B11572,7 25,4
B116 62,736,3
B11876,3 57,9
B119 44,632
B12010,1 10,2
B130 248,6
B1317,3 7,9
B132 72,447,5
B13353,3 30,5
B134 57,336,8
B13562 41,4
B136 70,821
B13719 14,3
B138 58,135,6

Анализ c-KIT проводился по протоколу, описанному в руководстве «Protocol for HTScarRTM c-KIT Kinase Assay Kit (Cell Signaling TechnologyRTM)». Условия анализа были следующими: источник C-KIT: слитый белок GST-c-KIT получали при использовании системы экспрессии бакуловируса с элементом конструкции, экспрессирующей c-KIT человека (Thr544-Val976) с аминотерминальным хвостом GST, субстрат: 1,5 мкМ биотинированного пептида, содержащего остатки, окружающие Tyr-996 из KDR, носитель: 1% диметилсульфоксид (ДМСО), время до инкубирования/температура: 5 мин при комнатной температуре, время инкубирования/температура: 30 мин при комнатной температуре, буфер для инкубирования: 60 мМ HEPES рН 7.5, 5 мМ MgCl2, 5 мМ MnCl2 , 3 мкМ Na3VO4, 1,25 мМ DTT, 20 мкМ АТР. Использовался также и количественный анализ: DELFIARTM Assay.

[00232] В приведенной далее таблице 3 сведены ингибирующие действия азаазуленовых соединений по настоящему изобретению в отношении c-KIT киназы.

Таблица 3
Ингибирующие активности азаазуленовых соединений в отношении c-KIT киназы
Номер соединения Ингибирование c-Kit при 1 мкМ (%) Ингибирование c-Kit при 0,1 мкМ (%)
A1 (прежняя технология)64,5 34,1
B1 41,131,2
B257,96,4
B437,6 5
B5 56,815,2
B662,632,6
B757,3 34,8
B8 75,542,2
B924,4 16
B11 43,715,1
B1325,632,2
B1439,4 20,1
B15 43,18,5
B2155,4 10,8
B70 86,640,5
B8082,956,7
B8117,2 28,9
B82 91,131
B8319,7 -
B87 96,249,6
B8889,247,2
B9479,1 12,3
B95 82,648,3
B9787,2 40,1
B118 36,866,6

Анализ KDR проводился по протоколу, описанному в руководстве «Protocol for HTScanRсоединения азаазулена, патент № 2524202 VEGFR-2 Kinase Assay Kit (Cell Signaling Technology. RTM)». Условия анализа были следующими: источник KDR: слитый белок GST-киназы получали при использовании системы экспрессии бакуловируса с элементом конструкции, экспрессирующей VEGFR-2 человека (Val789-Vall356) (GenBank Accession No. NM.sub.-002253) с аминотерминальным хвостом GST, субстрат: 1,5 мкМ биотинированный пептидный предшественник гастрина (с Tyr87 в качестве сайта фосфорилирования), носитель: 1% диметилсульфоксид (ДМСО), время до инкубирования/температура: 5 мин при комнатной температуре, время инкубирования/температура: 30 мин при комнатной температуре, буфер для инкубирования: 60 мМ HEPES Ph 7.5, 5 мМ MgCl2, 5 мМ MnCl2 , 3 мкМ Na3VO4, 1,25 мМ DTT, 20 мкМ АТР. Использовался также и количественный анализ: DELFIARTM Assay.

В приведенной далее таблице 4 сведены ингибирующие действия азаазуленовых соединений по настоящему изобретению в отношении KDR киназы.

Таблица 4
Ингибирующие активности азаазуленовых соединений в отношении KDR киназы
Номер соединения 1 мкМ0,1 мкМ
B13,7 -
B294,5 78,3
B4 17,814,4
B545,3 31,7
B6 63,329,7
B746,120,2
B863,8 15,9
B9 13,20,5
B2696,9 71,3

Пример 12: Анализы активности киназы

Анализ активности киназы в соединении B26 по настоящему изобретению осуществлялся с помощью SelectScreen ® Kinase Profiling Services of Invitrogen. Ингибирующее действие 1000 нМ соединения B26 в отношении различных киназ, у которых ингибирующее действие было >50%, приведены далее в таблице 5.

Таблица 5.

Ингибирующая активность киназ из B26 в отношении различных киназ

Исследуемые киназы % ингибирования
AMPKA1/B1/G1 88
AMPKA2/B1/G1 70
BLK 52
CSFIR (FMS) 60
FGFR1 54
FGFR2 48
FGFR3 62
FGFR3 K650E 47
FGR 69
FLT3 95
FLT3 D835Y 98
FLT4 (VEGFR3) 50
KDR (VEGFR2) 64
KIT 61
LCK 63
LYNA 57
LYNB 51
MAP4K5 (KHS1) 60
NTRK1 (TRKA) 89
NTRX2 (TRKB) 84
NTRK3 (TRKC) 76
PHKG1 53
RET 81
RET V804L 79
RETY791F 79
SRC 50
SRCN1 52
STK4 (MST1) 59
YES1 73

Пример 13: Анализ клеточной активности in vitro Клеточная линия человека MV4-11 (FLT3-ITD) была получена из Американской Коллекции клеточных культур (American Tissue Culture Collection, ATCC номер CRL-9591). Эту клеточную линию культивировали с RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 1 ммол/л пирувата натрия и 10 ммол/л HEPES (рН 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку MV4-11 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (72 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Promega, Madison, WI) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 600 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Ингибирующее действие азаазуленовых соединений по настоящему изобретению в отношении клеток MV4-11 сведено в приведенной ниже таблице 6.

Таблица 6
Клеточная ингибирующая активность азаазуленовых соединений в отношении клетки MV4-11
Соединение IC50 в отношении MV4-11 (мкМ)
A1=1
B11-5
B21-5
B31-5
B41-5
B51,3003
B60,9162
B7>5
B8=0,5
B91-5
B101-5
B111-5
B12>5
B13>5
B141-5
B151-5
B16>5
B171-5
B191-5
B201-5
B210,4275
B220,0429
B230,0344
B240,075
B260,0211
B270,375
B280,0963
B321-5
B330,0542
B340,1513
B350,1591
B360,1507
B380,1185
B390,0622
B400,0723
B431-5
B440,1901
B450,318
B460,3142
B470,3002
B480,1485
B490,2486
B500,0507
B510,0991
B520,6351
B540,0740
B550,0938
B570,1045
B580,0672
B590,1465
B600,0059
B610,2696
B62>5
B630,4732
B640,2504
B650,2784
B660,4656
B670,0778
B680,2345
B690,1-0,5
B70=1
B710,9567
B720,05-0,1
B73=1
B740,1629
B75=1
B760,0256
B770,0392
B780,1-0,5
B790,3458
B800,7957
B810,2082
B820,0186
B830,2274
B850,1306
B860,2527
B870,0886
B880,1444
B89>5
B900,5037
B910,8759
B920,9099
B930,1293
B940,8524
B950,7706
B961-5
B970,1-0,5
B980,4183
B990,5996
B1001-5
B1010,0397
B1020,1154
B1030,042
B1040,0691
B1050,1769
B1060,3153
B1080,0891
B109=1
B1110,1687
B1121-5
B1130,1-0,5
B1141-5
B1150,3063
B1180,0641
B1190,1-0,5
B1200,6757
B1210,1-0,5
B122>5
B1231-5
B124=5
B1250,6796
B126>5
B127=1
B1281-5
B129>5
B1301-5
B1311-5
B1320,5802
B1330,1-0,5
B1340,6705
B1350,6261
B1361-5
B1370,05-0,1
B1380,718

Пример 14: Анализ клеточной активности in vitro

Методика разработки ксенотрансплантата опухоли, а также дозировка B26 осуществлялись в соответствии с правилами ухода и использования животных ITRI, IACUC. Женские особи мышей BALB/c, лишенные шерстного покрова, в возрасте 6-8 недель получены от BioLASCO Co., Ltd, (Taipei, Taiwan). Этим мышам подкожно в правый бок вводили клетки MV4-11 (FLT3-ITD) в количестве 1×107 клеток на каждую особь. Обработка началась, когда размер опухоли достиг 150-200 мм3. Мыши были случайным образом распределены на когорты (обычно по 4 мыши в каждой группе, из соображений эффективности исследования). Начиная с 16 дня после инокуляции мышам орально давали B26 (50 и 150 мг/кг) и носитель, процедуру проводили в течение 14 дней. Размеры опухолей оценивали ежедневно, а массы тел - два раза в неделю. Сделанные кронциркулем измерения были преобразованы в формулу, позволяющую узнать средний объем опухоли: 0,5 × [длина × (ширина)2].

В модели подкожного введения опухолевых клеток MV4-11 (FLT3-ITD) в виде ксенотрансплантата BALB/c мышам при оральном применении B26 в дозе 50 или 150 мг/кг в течение 14 дней был показано сильное и значительное противопухолевое действие, зависящее от дозы препарата. Доза B26, составляющая 50 и 150 мг/кг, продемонстрировала полную регрессию опухоли у всех мышей на 9 и 7 день соответственно. Обратимся к фиг.1, на ней показано, что в процессе эксперимента у группы, обрабатываемой B26, не было никакой существенной потери веса и не наблюдалось смертности. По настоящему изобретению соединение B26 представляет собой новый и потенциальный ингибитор FLT3, обещающий противораковУЮ активность и активность против лейкемии.

Пример A: Анализ клеточной активности In vitro для соединения В39 в отношении различных клеточных линий AML

Клеточная линия человека MV4-11 (FLT3-ITD) была получена из Американской Коллекции клеточных культур (American Tissue Culture Collection, ATCC номер CRL-9591). Эту клеточную линию культивировали с RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 1 ммол/л пирувата натрия и 10 ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку MV4-11 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (72 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 600 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека MOLM13 (FLT3-ITD) была получена из Американской Коллекции клеточных культур. Эту клеточную линию культивировали с RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 1 ммол/л пирувата натрия и 10 ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку MOLM13 (FLT3-ITD) поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (72 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 600 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека RS4;11 (FLT3wt) была получена из Американской Коллекции клеточных культур (American Tissue Culture Collection, ATCC номер CRL-1873). Эту клеточную линию культивировали с RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 1 ммол/л пирувата натрия и 10 ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку RS4; 11 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (72 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 600 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека ТНР-1 (FLT3wt) была получена из Американской Коллекции клеточных культур. Эту клеточную линию культивировали с RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 1 ммол/л пирувата натрия и 10 ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку ТНР-1 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (72 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 600 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека Kasumi-1 была получена из Американской Коллекции клеточных культур (American Tissue Culture Collection, ATCC номер CRL-2724). Эту клеточную линию культивировали с RPMI 1640, содержащей 20% бычьей сыворотки, 1 ммол/л пирувата натрия и 10 ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку Kasumi-1 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (72 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Таблица A
Клеточная ингибирующая активность азаазуленового соединения B39 в отношении различных AML клеточных линий
AML клеточная линия, испытываемая в отношении соединения В39 IC50 (мкМ)
MV4-110.0622
MOLM130.0587
RS4; 111-5
ТНР-11-5
Kasumi-11-5

Пример В: Анализ клеточной активности in vitro для соединения B26 в отношении различных твердоопухолевых клеточных линий.

Клеточная линия рака прямой кишки.

Клеточная линия человека НСТ-15 была получена из Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (BCRC номер: 60539). Эту клеточную линию культивировали в среде RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 2 ммол/л L-глутамина и 10 ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку НСТ-15 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека НТ-29 была получена из Американской Коллекции клеточных культур (American Tissue Culture Collection, ATCC номер НТВ-39). Эту клеточную линию культивировали в среде RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 1 ммол/л пирувата натрия и 10 ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку НТ-29 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия рака груди

Клеточная линия человека MCF-7 была получена из Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (BCRC номер: 60539). Эту клеточную линию культивировали в среде RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 2 ммол/л L-глутамина и 10 ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку MCF-7 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека MDA-MB-231 была получена из Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (BCRC номер: 60539). Эту клеточную линию культивировали в среде Лейбовица (Leibovitz's) содержащей 10% бычьей сыворотки (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку MDA-MB-231 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия гепатоаденомы.

Клеточная линия человека Huh7 была получена из Японского Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (JCRB номер: CRB0403). Эту клеточную линию культивировали в среде DMEM содержащей 10% бычьей сыворотки, 0.1 ммол/л второстепенных аминокислот (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку Huh7 231 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека HepG2 была получена из Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (BCRC номер: 60539). Эту клеточную линию культивировали в среде DMEM содержащей 10% бычьей сыворотки, 0.1 ммол/л второстепенных аминокислот (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку HepG2 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека Hep3B из Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (BCRC номер: 60434). Эту клеточную линию культивировали в среде альфа MEM содержащей 10% бычьей сыворотки (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку Hep3B поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека SK-Hep1 была получена из Американской Коллекции клеточных культур (American Tissue Culture Collection) (ATCC номер: НТВ-52). Эту клеточную линию культивировали в среде DMEM, содержащей 10% бычьей сыворотки, 0.1 ммол/л второстепенных аминокислот (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку SK-Hep1 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия рака поджелудочной железы

Клеточная линия человека MIA-PaCa-2 была получена из Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (BCRC номер: 60139). Эту клеточную линию культивировали в среде DMEM, содержащей 10% бычьей сыворотки, 4 ммол/л L-глутамина. Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку MIA-PaCa-2 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия человека ВхРС-3 была получена из Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (BCRC номер: 60283). Эту клеточную линию культивировали в среде RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 1 ммол/л HERPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку ВхРС-3 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Клеточная линия рака легких

Клеточная линия человека NCI-H460 была получена из Центра Сбора и Исследования Биологических источников (Bioresource Collection & Research Center) (BCRC номер: 60373). Эту клеточную линию культивировали в среде RPMI 1640, содержащей 10% бычьей сыворотки, 1 ммол/л пирувата натрия 10 и ммол/л HEPES (pH 7.4). Клетки росли и выдерживались во влажной атмосфере при 37°C и 5% содержании диоксида углерода.

Клетку NCI-H460 поместили на микротитровальные пластины с 96 ячейками (10,000 клеток на каждую ячейку) и добавили последовательные разведения исследуемых соединений. В конце инкубационного периода (48 ч при 37°C) с помощью красящего тетразолия, МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий-бромид) (Sigma) определили жизнеспособность клетки. Кристаллы формазана растворили в диметилсульфоксиде (ДМСО) и с помощью считывающего устройства ELISA зарегистрировали абсорбцию при длине волны, составляющей 570 нм. Величины IC50 вычисляли, используя нелинейную регрессию, и определили их как такую концентрацию, которая необходима для 50% снижения абсорбции обработанных клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Таблица B
Клеточная ингибирующая активность азаазуленового соединения B26 в отношении различных твердо опухолевых клеточных линий
Орган связанный с клеточной линией Клеточные линии обработанные соединением B26 Рост ингибирования (%)
Толстая кишкаНСТ-15 40
Толстая кишка НТ2944
ГрудьMCF-759
ГрудьMDA-MB-231 31
Печень Huh-724
ПеченьHepG2 34
Печень Hep3B35
ПеченьSK-Hep1 60
Печень MIA-PaCa-258.1
Поджелудочная железаBxPC-3 67.5
Легкое NCI-H46043.46

Пример C: Анализ активности ксенотрансплантата опухоли при раке поджелудочной железы in vivo

Клеточная линия человека для рака поджелудочной железы MIA РаСа-2 была получена из Американской Коллекции клеточных культур (American Tissue Culture Collection, ATCC номер CRL-1420соединения азаазулена, патент № 2524202 ).

Методика разработки ксенотрансплантата опухоли, а также дозировка азаазуленового соединения В26, осуществлялись в соответствии с правилами ухода и использования животных ITRI, IACUC.

Женские особи мышей BALB/c, лишенные шерстного покрова, в возрасте 6-8 недель получены от BioLASCO Co., Ltd, (Taipei, Taiwan). Этим мышам подкожно в правый бок вводили клетки 5×106 MIA РаСа-2 в количестве 5×106 клеток на каждую особь.

Обработка началась, когда размер опухоли достиг 200 мм3. Мыши были случайным образом распределены на когорты (обычно по 4 мыши в каждой группе, из соображений эффективности исследования).

Начиная с 9 дня после инокуляции мышам путем интраперитонеальной инъекции давали азаазуленовые соединения B26 (25 мг/кг/день) и носитель, процедуру проводили в течение 14 дней и увеличили дозу до 100 мг/кг/день в течение 7 дней. Размеры опухолей и массы тела оценивали три раза в неделю. Сделанные кронциркулем измерения были преобразованы в формулу, позволяющую узнать средний объем опухоли: 0,5 × [длина × (ширина)2].

Коэффициент (TGI; %) роста опухоли вычислили как [1-(конечный размер опухоли - первоначальный размер опухоли для леченной группы) / (конечный размер опухоли - первоначальный размер опухоли для группы с носителем)] × 100.

В модели подкожного введения опухолевых клеток MIA РаСа-2 в виде ксенотрансплантата BALB/c мышам размер опухоли достиг 1437±117 мм3 на 20 день после лечения. Интраперитонеальное введение азаазуленовых соединения B26 проявило противоопухолевую активность; средний размер опухоли составил 1177±123 мм3; и коэффициент ингибирования роста опухоли на 20 день лечения составил 22±9% (p=0.1616).

Ниже приведен результат исследований азаазуленового соединения B26 как отдельного средства, проявляющего активность в отношении клеток MIA РаСа-2 ксенотрансплантата опухоли при раке поджелудочной железы.

соединения азаазулена, патент № 2524202

Пример D: Анализ активности ксенотрансплантата опухоли при печеночно-клеточном раке in vivo

Клеточная линия человека для печеночно-клеточного рака PLC/PRF/5 была получена из Американской Коллекции клеточных культур (American Tissue Culture Collection, ATCC номер CRL-8024соединения азаазулена, патент № 2524202 ). Методика разработки ксенотрансплантата опухоли, а также дозировка ITRI-260 осуществлялись в соответствии с правилами ухода и использования животных ITRI, IACUC. Женские особи мышей BALB/c, лишенные шерстного покрова, в возрасте 6-8 недель получены от BioLASCO Co., Ltd, (Taipei, Taiwan). Этим мышам подкожно в правый бок вводили клетки 5×106 PLC/PRF/5 в количестве 5×106 клеток на каждую особь. Обработка началась, когда размер опухоли достиг 200 мм3. Мыши были случайным образом распределены на когорты (обычно по 4 мыши в каждой группе, из соображений эффективности исследования). Начиная с 9 дня после инокуляции мышам орально давали азаазуленовые соединения B26 (300 мг/кг/день), B39 (150 мг/кг/день) и носитель, процедуру проводили в течение 14 дней.

Размеры опухолей оценивали ежедневно, а массы тел - два раза в неделю. Сделанные кронциркулем измерения были преобразованы в формулу, позволяющую узнать средний объем опухоли: 0,5 × [длина × (ширина) 2].

Коэффициент (TGI; %) роста опухоли вычислили как [1-(конечный размер опухоли - первоначальный размер опухоли для леченной группы) / (конечный размер опухоли - первоначальный размер опухоли для группы с носителем)] × 100.

В модели подкожного введения опухолевых клеток PLC/PRF/5 в виде ксенотрансплантата SCID мышам с носителем размер опухоли достиг 1070±345 мм3 на 23 день после инакуляции клеток. Введение азаазуленовых соединений B26 (300 мг/кг/день) и B39 (150 мг/кг/день) проявило противоопухолевую активность; средние размеры опухоли составили 972±96 мм3 и 873±167 мм3; и коэффициенты ингибирования роста опухоли на 23 день составили 35±8% (p=0.3622) и 45±13% (P=0.3622). Ниже приведен результат исследований азаазуленовых соединений B26 и B39 как отдельного средства, проявляющего активность в отношении клеток PLC/PRF/5 ксенотрансплантата опухоли при печеночно-клеточном раке.

соединения азаазулена, патент № 2524202

Несмотря на то что настоящее изобретение было описано с помощью примеров и в терминах предпочтительных вариантов, необходимо понимать, что раскрытыми вариантами оно не ограничивается. Напротив, оно предназначено для охвата различных модификаций и сходных процессов. Следовательно, прилагаемая формула изобретений должна соответствовать самым широким интерпретациям всех таких модификаций и сходных процессов.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Азаазуленовое соединение, отличающееся тем, что указанное азаазуленовое соединение представляет собой соединение, выбранное из соединений, приведенных в Таблице А, или его энантиомеров, диастереомеров, рацематов и их фармацевтически приемлемых солей:

Таблица А

Номер соединения Структура
B1 соединения азаазулена, патент № 2524202
B2 соединения азаазулена, патент № 2524202
B3 соединения азаазулена, патент № 2524202
B4 соединения азаазулена, патент № 2524202
B5 соединения азаазулена, патент № 2524202
B6 соединения азаазулена, патент № 2524202
B7 соединения азаазулена, патент № 2524202
B8 соединения азаазулена, патент № 2524202
B9 соединения азаазулена, патент № 2524202


B10 соединения азаазулена, патент № 2524202
B11 соединения азаазулена, патент № 2524202
B12 соединения азаазулена, патент № 2524202
B13 соединения азаазулена, патент № 2524202
B14 соединения азаазулена, патент № 2524202
B15 соединения азаазулена, патент № 2524202
B16 соединения азаазулена, патент № 2524202
B17 соединения азаазулена, патент № 2524202
B18 соединения азаазулена, патент № 2524202


B19 соединения азаазулена, патент № 2524202
B20 соединения азаазулена, патент № 2524202
B21 соединения азаазулена, патент № 2524202
B22 соединения азаазулена, патент № 2524202
B23 соединения азаазулена, патент № 2524202
B24 соединения азаазулена, патент № 2524202
B25 соединения азаазулена, патент № 2524202
B26 соединения азаазулена, патент № 2524202
B27 соединения азаазулена, патент № 2524202


B28 соединения азаазулена, патент № 2524202
B29 соединения азаазулена, патент № 2524202
B30 соединения азаазулена, патент № 2524202
B31 соединения азаазулена, патент № 2524202
B32 соединения азаазулена, патент № 2524202
B33 соединения азаазулена, патент № 2524202
B34 соединения азаазулена, патент № 2524202
B35 соединения азаазулена, патент № 2524202


B36 соединения азаазулена, патент № 2524202
B37 соединения азаазулена, патент № 2524202
B38 соединения азаазулена, патент № 2524202
B39 соединения азаазулена, патент № 2524202
B40 соединения азаазулена, патент № 2524202
B41 соединения азаазулена, патент № 2524202
B42 соединения азаазулена, патент № 2524202
B43 соединения азаазулена, патент № 2524202
B44 соединения азаазулена, патент № 2524202


B45 соединения азаазулена, патент № 2524202
B46 соединения азаазулена, патент № 2524202
B47 соединения азаазулена, патент № 2524202
B48 соединения азаазулена, патент № 2524202
B49 соединения азаазулена, патент № 2524202
B50 соединения азаазулена, патент № 2524202
B51 соединения азаазулена, патент № 2524202
B52 соединения азаазулена, патент № 2524202
B53 соединения азаазулена, патент № 2524202


B54 соединения азаазулена, патент № 2524202
B55 соединения азаазулена, патент № 2524202
B56 соединения азаазулена, патент № 2524202
B57 соединения азаазулена, патент № 2524202
B58 соединения азаазулена, патент № 2524202
B59 соединения азаазулена, патент № 2524202
B60 соединения азаазулена, патент № 2524202


B61 соединения азаазулена, патент № 2524202
B62 соединения азаазулена, патент № 2524202
B63 соединения азаазулена, патент № 2524202
B64 соединения азаазулена, патент № 2524202
B65 соединения азаазулена, патент № 2524202
B66 соединения азаазулена, патент № 2524202
B67 соединения азаазулена, патент № 2524202


B68 соединения азаазулена, патент № 2524202
B69 соединения азаазулена, патент № 2524202
B70 соединения азаазулена, патент № 2524202
B71 соединения азаазулена, патент № 2524202
B72 соединения азаазулена, патент № 2524202
B73 соединения азаазулена, патент № 2524202
B74 соединения азаазулена, патент № 2524202
B75 соединения азаазулена, патент № 2524202


B76 соединения азаазулена, патент № 2524202
B77 соединения азаазулена, патент № 2524202
B78 соединения азаазулена, патент № 2524202
B79 соединения азаазулена, патент № 2524202
B80 соединения азаазулена, патент № 2524202
B81 соединения азаазулена, патент № 2524202
B82 соединения азаазулена, патент № 2524202


B83 соединения азаазулена, патент № 2524202
B84 соединения азаазулена, патент № 2524202
B85 соединения азаазулена, патент № 2524202
B86 соединения азаазулена, патент № 2524202
B87 соединения азаазулена, патент № 2524202
B88 соединения азаазулена, патент № 2524202
B89 соединения азаазулена, патент № 2524202
B90 соединения азаазулена, патент № 2524202


B91 соединения азаазулена, патент № 2524202
B92 соединения азаазулена, патент № 2524202
B93 соединения азаазулена, патент № 2524202
B94 соединения азаазулена, патент № 2524202
B95 соединения азаазулена, патент № 2524202
B96 соединения азаазулена, патент № 2524202
B97 соединения азаазулена, патент № 2524202
B98 соединения азаазулена, патент № 2524202
B99 соединения азаазулена, патент № 2524202


B100 соединения азаазулена, патент № 2524202
B101 соединения азаазулена, патент № 2524202
B102 соединения азаазулена, патент № 2524202
B103 соединения азаазулена, патент № 2524202
B104 соединения азаазулена, патент № 2524202
B105 соединения азаазулена, патент № 2524202
B106 соединения азаазулена, патент № 2524202
B107 соединения азаазулена, патент № 2524202


B108 соединения азаазулена, патент № 2524202
B109 соединения азаазулена, патент № 2524202
B110 соединения азаазулена, патент № 2524202
B111 соединения азаазулена, патент № 2524202
B112 соединения азаазулена, патент № 2524202
B113 соединения азаазулена, патент № 2524202
B114 соединения азаазулена, патент № 2524202
B115 соединения азаазулена, патент № 2524202
B116 соединения азаазулена, патент № 2524202


B117 соединения азаазулена, патент № 2524202
B118 соединения азаазулена, патент № 2524202
B119 соединения азаазулена, патент № 2524202
B120 соединения азаазулена, патент № 2524202
B121 соединения азаазулена, патент № 2524202
B122 соединения азаазулена, патент № 2524202
B123 соединения азаазулена, патент № 2524202
B124 соединения азаазулена, патент № 2524202
B125 соединения азаазулена, патент № 2524202


B126 соединения азаазулена, патент № 2524202
B127 соединения азаазулена, патент № 2524202
B128 соединения азаазулена, патент № 2524202
B129 соединения азаазулена, патент № 2524202
B130 соединения азаазулена, патент № 2524202
B131 соединения азаазулена, патент № 2524202
B132 соединения азаазулена, патент № 2524202
B133 соединения азаазулена, патент № 2524202
B134 соединения азаазулена, патент № 2524202


B135 соединения азаазулена, патент № 2524202
B136 соединения азаазулена, патент № 2524202
B137 соединения азаазулена, патент № 2524202
B138 соединения азаазулена, патент № 2524202
B139 соединения азаазулена, патент № 2524202
B140 соединения азаазулена, патент № 2524202
B141 соединения азаазулена, патент № 2524202
B142 соединения азаазулена, патент № 2524202
B143 соединения азаазулена, патент № 2524202

2. Фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, содержащая терапевтически эффективное количество азаазуленового соединения по п.1, а также фармацевтически приемлемый носитель.

3. Фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что указанную фармацевтическую композицию используют для лечения рака, выбранного из группы: острая миелоидная лейкемия (AML), рак толстой кишки, рак груди, рак поджелудочной железы и рак легких субъекта, путем введения указанному субъекту терапевтически эффективного количества указанной фармацевтической композиции.

4. Фармацевтическая композиция по п.3, отличающаяся тем, что указанным субъектом является млекопитающее.

5. Фармацевтическая композиция по п.3, отличающаяся тем, что указанным субъектом является человек.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2524202

patent-2524202.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс C07D401/14 содержащие три или более гетероциклических кольца

Патенты РФ в классе C07D401/14:
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
хиназолиноны как ингибиторы пролилгидроксилазы -  патент 2528412 (20.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
изоиндолиновые соединения для применения при лечении рака -  патент 2527952 (10.09.2014)
производные имидазола в качестве антагонистов mglur5 -  патент 2527106 (27.08.2014)
диаминогетероциклическое карбоксамидное соединение -  патент 2526253 (20.08.2014)
тозилатная соль производного 5-пиразолил-2-пиридона, полезная в лечении copd -  патент 2526038 (20.08.2014)
антибактериальные соединения -  патент 2525915 (20.08.2014)
соединения, которые являются ингибиторами erk -  патент 2525389 (10.08.2014)
хиназолинон, хинолон и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина -  патент 2519779 (20.06.2014)

Класс C07D403/04 связанные непосредственно

Патенты РФ в классе C07D403/04:
хиназолиноны как ингибиторы пролилгидроксилазы -  патент 2528412 (20.09.2014)
сп0соб получения соединений дигидроинденамида, фармацевтические композии, содержащие данные соединение и их применение в качестве ингибитора протеинкиназы -  патент 2528408 (20.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
производные имидазола в качестве антагонистов mglur5 -  патент 2527106 (27.08.2014)
замещенные аминоинданы и их аналоги, и их применение в фармацевтике -  патент 2522586 (20.07.2014)
алкил [2-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-метоксикарбониламино-ацетил)-пирролидин-2-ил]-3н-имидазол-4-ил}-фенил)-бута-1,3-диинил]-1н-имидазол-2-ил}-пирролидин-1-ил)-2-оксо-этил]-карбамат, фармацевтическая композиция, лекарственное средство, способ лечения вирусных заболеваний -  патент 2518369 (10.06.2014)
производные индола и бензоморфолина в качестве модулятора метаботропных глутаматных рецепторов -  патент 2517181 (27.05.2014)
5-членное гетероциклическое соединение и его применение для лекарственных целей -  патент 2515968 (20.05.2014)
1н-хиназолин-2,4-дионы -  патент 2509764 (20.03.2014)
низкомолекулярные модуляторы активности trp-p8 -  патент 2509079 (10.03.2014)

Класс C07D403/14 содержащие три или более гетероциклических кольца

Патенты РФ в классе C07D403/14:
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
новые производные пиримидина -  патент 2528386 (20.09.2014)
диариловые эфиры -  патент 2528231 (10.09.2014)
применение бис(2,4,7,8,9-пентаметилдипирролилметен-3-ил)метана дигидробромида в качестве флуоресцентного сенсора на катион цинка(ii) -  патент 2527461 (27.08.2014)
соединения, которые являются ингибиторами erk -  патент 2525389 (10.08.2014)
хиназолинон, хинолон и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина -  патент 2519779 (20.06.2014)
алкил [2-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-метоксикарбониламино-ацетил)-пирролидин-2-ил]-3н-имидазол-4-ил}-фенил)-бута-1,3-диинил]-1н-имидазол-2-ил}-пирролидин-1-ил)-2-оксо-этил]-карбамат, фармацевтическая композиция, лекарственное средство, способ лечения вирусных заболеваний -  патент 2518369 (10.06.2014)
новые фенилпиразиноны в качестве ингибиторов киназы -  патент 2507202 (20.02.2014)
новые замещенные пиридин-2-оны и пиридазин-3-оны -  патент 2500680 (10.12.2013)
соединения 2,4-пиримидиндиаминов и их применение -  патент 2493150 (20.09.2013)

Класс C07D405/14 содержащие три или более гетероциклических кольца

Патенты РФ в классе C07D405/14:
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
хиназолиноны как ингибиторы пролилгидроксилазы -  патент 2528412 (20.09.2014)
изоиндолиновые соединения для применения при лечении рака -  патент 2527952 (10.09.2014)
аналоги хроменона в качестве модуляторов сиртуина -  патент 2527269 (27.08.2014)
замещенные пиридазин-карбоксамидные соединения в качестве соединений, ингибирующих киназы -  патент 2526618 (27.08.2014)
диаминогетероциклическое карбоксамидное соединение -  патент 2526253 (20.08.2014)
алкил [2-(2-{5-[4-(4-{2-[1-(2-метоксикарбониламино-ацетил)-пирролидин-2-ил]-3н-имидазол-4-ил}-фенил)-бута-1,3-диинил]-1н-имидазол-2-ил}-пирролидин-1-ил)-2-оксо-этил]-карбамат, фармацевтическая композиция, лекарственное средство, способ лечения вирусных заболеваний -  патент 2518369 (10.06.2014)
новое бициклическое гетероциклическое соединение -  патент 2518073 (10.06.2014)
5-членное гетероциклическое соединение и его применение для лекарственных целей -  патент 2515968 (20.05.2014)
производные 8-оксихинолина в качестве модуляторов рецептора в2 брадикинина -  патент 2512541 (10.04.2014)

Класс C07D413/14 содержащие три или более гетероциклических кольца

Патенты РФ в классе C07D413/14:
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
изоиндолиновые соединения для применения при лечении рака -  патент 2527952 (10.09.2014)
новый агонист бета рецептора тиреоидного гормона -  патент 2527948 (10.09.2014)
замещенные пиразоло[1,5-a]пиримидиновые соединения как ингибиторы трк киназы -  патент 2523544 (20.07.2014)
новые противомикробные средства -  патент 2522582 (20.07.2014)
соединения, ингибирующие (блокирующие) горький вкус, способы их применения и получения -  патент 2522456 (10.07.2014)
органические соединения -  патент 2518462 (10.06.2014)
производные индола и бензоморфолина в качестве модулятора метаботропных глутаматных рецепторов -  патент 2517181 (27.05.2014)
оксазолидиниловые антибиотики -  патент 2516701 (20.05.2014)

Класс C07D471/04 орто-конденсированные системы

Патенты РФ в классе C07D471/04:
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
соли метил(r)-7-[3-амино-4-(2,4,5-трифторфенил)-бутирил]-3-трифторметил-5,6,7,8-тетрагидро-имидазо[1,5-a]пиразин-1-карбоксилата -  патент 2528233 (10.09.2014)
индолил-замещенные пиразино-хинолины и их применение для лечения рака -  патент 2527526 (10.09.2014)
гетероциклические соединения и способы применения -  патент 2525116 (10.08.2014)
замещенные пиразоло[1,5-a]пиримидиновые соединения как ингибиторы трк киназы -  патент 2523544 (20.07.2014)
способ получения 7-r-пиридо[1,2-а]бензимидазолов -  патент 2522549 (20.07.2014)
способы получения производных хиназолинона -  патент 2520098 (20.06.2014)
лиганды для агрегированных молекул тау-белка -  патент 2518892 (10.06.2014)
производные имидазопиридина в качестве ингибиторов рецепторных тирозинкиназ -  патент 2518089 (10.06.2014)
новое бициклическое гетероциклическое соединение -  патент 2518073 (10.06.2014)

Класс C07D487/04 орто-конденсированные системы

Патенты РФ в классе C07D487/04:
5-метил-6-нитро-7-оксо-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-альфа]пиримидинид l-аргининия моногидрат -  патент 2529487 (27.09.2014)
хиназолиноны как ингибиторы пролилгидроксилазы -  патент 2528412 (20.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
6-замещенные 3-азолилимидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразины, проявляющие противоопухолевую активность -  патент 2527258 (27.08.2014)
гетероциклические соединения и способы применения -  патент 2525116 (10.08.2014)
замещенные пиразоло[1,5-a]пиримидиновые соединения как ингибиторы трк киназы -  патент 2523544 (20.07.2014)
соли производных тетерагидро-имидазо[1,5-a]пиразина, способы их получения и их медицинское применение -  патент 2523543 (20.07.2014)
замещенные аминоинданы и их аналоги, и их применение в фармацевтике -  патент 2522586 (20.07.2014)
способы и композиции для стимулирования нейрогенеза и ингибирования дегенерации нейронов с использованием изотиазолопиримидинонов -  патент 2521333 (27.06.2014)
кристаллические соли ситаглиптина -  патент 2519717 (20.06.2014)

Класс A61K31/33  гетероциклические соединения

Патенты РФ в классе A61K31/33:
имплантируемые продукты, содержащие наночастицы -  патент 2524644 (27.07.2014)
фармацевтическая композиция для лечения вич-инфекции, способ ее получения и способ лечения -  патент 2505286 (27.01.2014)
агенты, связывающиеся с psma, и их применение -  патент 2494096 (27.09.2013)
замещенные никотинамидные соединения и их применение в лекарственных средствах -  патент 2489425 (10.08.2013)
замещенные бензоиламиноиндан-2-карбоновые кислоты и родственные соединения -  патент 2477279 (10.03.2013)
соединения для лечения пролиферативных расстройств -  патент 2475478 (20.02.2013)
соединения имидазо[1,2-a]пиридина в качестве ингибиторов рецепторных тирозинкиназ -  патент 2467008 (20.11.2012)
2,6-дифенил-4-(п-метоксифенил)-4h-селенопиран - средство для лечения и профилактики отравлений соединениями ртути -  патент 2455987 (20.07.2012)
ингибиторы сфингозинкиназы -  патент 2447060 (10.04.2012)
макроциклические ингибиторы вируса гепатита с -  патент 2441870 (10.02.2012)

Класс A61P35/00 Противоопухолевые средства

Патенты РФ в классе A61P35/00:
способ лечения рака толстой кишки -  патент 2529831 (27.09.2014)
способ оценки эффекта электромагнитных волн миллиметрового диапазона (квч) в эксперименте -  патент 2529694 (27.09.2014)
новые (поли)аминоалкиламиноалкиламидные, алкил-мочевинные или алкил-сульфонамидные производные эпиподофиллотоксина, способ их получения и их применение в терапии в качестве противораковых средств -  патент 2529676 (27.09.2014)
производные 1, 2-дигидроциклобутендиона в качестве ингибиторов фосфорибозилтрансферазы никотинамида -  патент 2529468 (27.09.2014)
фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа -  патент 2529373 (27.09.2014)
модульный молекулярный конъюгат для направленной доставки генетических конструкций и способ его получения -  патент 2529034 (27.09.2014)
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
лечение опухолей с помощью антитела к vegf -  патент 2528884 (20.09.2014)
способ лечения местнораспространенного неоперабельного рака поджелудочной железы -  патент 2528881 (20.09.2014)
новые бензолсульфонамидные соединения, способ их получения и применение в терапии и косметике -  патент 2528826 (20.09.2014)


Наверх