ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации у реаниматологических больных

Классы МПК:G01N33/50 химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания
Автор(ы):, , , , ,
Патентообладатель(и):Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт общей реаниматологии имени В.А. Неговского" Российской академии медицинских наук (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2012-03-20
публикация патента:

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу лабораторной оценки эффективности лечения эндогенной интоксикации у реаниматологических больных, заключающийся в том, что в венозной крови или сыворотке венозной крови пациентов одновременно определяют концентрации фенилуксусной, парагидроксифенилуксусной, фенилмолочной и парагидроксифенилмолочной кислот и при увеличении или сохранении исходно повышенного уровня любой из определяемых кислот по сравнению с их уровнем до проведенного лечения делают вывод о неэффективности лечения. Использование заявленного способа позволяет своевременно и объективно оценить эффективность лечения эндогенной интоксикации у различных групп реаниматологических больных. 4 ил., 9 табл., 5 пр.

Рисунки к патенту РФ 2522877

способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877

Изобретение относится к области медицины, а именно к реаниматологии и лабораторной диагностике. Способ может быть использован в медицинской практике для оценки эффективности лечения синдрома интоксикации у реаниматологических больных. Способ также может быть полезен в детской реаниматологии, включая период новорожденности, для оценки эффективности лечения синдрома интоксикации у детей. Также способ может быть полезен для оценки эффективности проведения экстракорпоральных методов очистки крови у детей и взрослых, находящихся в критическом состоянии.

Синдром эндогенной интоксикации - это совокупность симптомов, характеризующихся повреждением клеток и клеточных структур организма, вызванных избыточным содержанием в крови токсических продуктов и биологически активных веществ [Афанасьев А.Н., Одинцова И.Н., Удут В.В. Синдром эндогенной интоксикации и системного воспалительного ответа: общность и различия. Анестезиология и реаниматология. 2007; 4:67-71]. Синдром эндогенной интоксикации - это полиэтиологический и полипатогенетический синдром. В развитии эндотоксикоза одновременно или последовательно могут участвовать несколько механизмов образования эндогенных токсических субстанций. Наиболее тяжелые формы синдром эндогенной интоксикации приобретает у реаниматологических больных, особенно при таких критических состояниях как сепсис, деструктивный панкреатит, политравма, постреанимационная болезнь, ожоговая болезнь, тяжелая кровопотеря и др.

Полиэтиологичность и сложный механизм развития эндогенной интоксикации затрудняют разработку универсальных критериев, позволяющих оценить эффективность проводимого лечения. В целом маркерами эндогенной интоксикации считаются множество показателей и интегральных показателей гомеостаза: билирубин, трансаминазы, протеазы и их ингибиторы, фибриноген, гаптоглобин, церулоплазмин, С-реактивный белок, прокальцитонин, креатинин, мочевина, уровень общего белка и показатели протеинограммы, скорость оседания эритроцитов, характеристики клеточного, гуморального и неспецифического иммунитета. Каждый из этих показателей изменяется в зависимости от причины интоксикации, а изменение некоторых из них, может не быть связано с интоксикацией.

В результате перекисного окисления липидов в эритроцитах формируется малоновый диальдегид. Повышение концентрации малонового отмечено при различных заболеваниях, в том числе и при заболеваниях, сопровождающихся тяжелой эндогенной интоксикацией (Иванова 3.О. Изменение показателей малонового диальдегида при пневмонии бактериальной этиологии. Успехи современного естествознания. 2008; 1:105-105). Однако данный маркер не является специфичным маркером интоксикации и в большей степени характеризует общую тяжесть состояния, а не тяжесть интоксикации в данный момент времени, о чем свидетельствует медленная динамика его концентрации. Поэтому для быстрой оценки эффективности проводимого лечения у реаниматологических больных этот маркер не пригоден.

Одним из способов оценки эффективности лечения эндогенной интоксикации возможно использование расчетных индексов интоксикации, вычисляемых по формулам (лейкоцитарный индекс интоксикации по формуле Кальф-Калифа и его аналоги, ядерный индекс Г.Д.Даштаянца). Однако использование подобных индексов не дает полной оценки степени эндогенной интоксикации, а отражает, в основном, степень воспалительного ответа организма, что затрудняет их использование именно для оценки эффективности лечения при интоксикации. Существенными недостатками способов, основанных на оценке клеточного состава крови, является их непригодность при заболеваниях крови и кроветворных органов, в период новорожденности, у больных с нарушенной реактивностью иммунной системы, а также трудоемкость и субъективность результатов, так как предварительно требуется провести визуальный подсчет и анализ клеток в образце крови.

В качестве прототипа изобретения может выступать способ, предлагающий в качестве универсального биохимического маркера эндогенной интоксикации, на основе которого возможно и оценивать эффективность лечения интоксикации, использовать такой показатель, как содержание в крови и других биологических жидкостях молекул средней и низкой молекулярной массы [RU 2324943 С2; Карякина Е.В., Белова С.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2004; 3:3-8]. Вещества низкой и средней молекулярной массы состоят из олигопептидов с молекулярной массой 500-6000 дальтон и малых молекул с массой 150-300 дальтон. Существенным недостатком прототипа и его аналогов является то, что в качестве оценочного показателя содержания веществ низкой и средней молекулярной массы используют величину оптической плотности. Величина оптической плотности зависит не только от концентрации веществ низкой и средней молекулярной массы, но и условий проведения измерений (толщина и качество применяемых кювет, спектральное разрешение, погрешность и динамический диапазон используемого спектрофотометра, способ пробоподготовки), что сказывается на результатах определения эндогенной интоксикации. Существуют другие методики определения веществ низкой и средней молекулярной массы (методы ультрафильтрации, методы гельфильтрации на различных носителях, метод жидкостной хроматографии под высоким давлением), но все они являются более сложными и менее изученными. Недостатком прототипа является то, что в состав молекул средней и низкой молекулярной массы входит неопределенно большое количество химических веществ, обладающих разной специфичностью для оценки интоксикации, что затрудняет оценку эффективности лечения интоксикационного синдрома.

В целом в литературе нет рекомендаций, позволяющих оценить эффективность лечения интоксикации в диагностическом временном интервале, удовлетворяющем для принятия решения о правильности проводимого лечения у реаниматологических (тяжелых и крайне тяжелых) больных различных групп. Таким образом, перед исследователями стоит задача по разработке универсального способа, позволяющего своевременно и объективно оценить эффективность лечения интоксикации у реаниматологических больных различных групп. Поставленная задача решается способом лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации у реаниматологических больных, заключающийся в том, что в крови пациентов определяют концентрации парагидроксифенилмолочной кислоты (п-ГФМК), фенилмолочной кислоты (ФМК), парагидроксифенилуксусной кислоты (п-ГФУК), фенилуксусной кислоты (ФУК) и при увеличении или сохранении исходно повышенного уровня любой из определяемых кислот делают вывод о неэффективности лечения.

Отбор выбранных маркеров производился на основе результатов многолетнего анализа содержания различных веществ в крови у реаниматологических больных в динамике с помощью газовой хромато-масс-спектрометрии. Выявленная динамика концентраций определяемых химических веществ удовлетворяет потребности врача-реаниматолога для быстрой, динамичной оценки эффективности лечения интоксикационного синдрома у тяжелых и крайне тяжелых пациентов.

Способ может быть реализован с использованием стандартного лабораторного оборудования с привлечением персонала, квалификация которого не превосходит уровень специалиста в области химического, биохимического, иммуноферментного анализа. Хотя в исследовании выполнялось хромато-масс-спектральное определение указанных кислот, способ по изобретению в принципе заключает в себя также определение указанных кислот любым другим методом.

Сущность изобретения

Для лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации производится одновременное количественное определение концентрации пара-гидроксифенилмолочной кислоты (п-ГФМК), фенилмолочной кислоты (ФМК), парагидроксифенилуксусной кислоты (п-ГФУК), фенилуксусной кислоты (ФУК) в образце сыворотки крови до и после назначенного лечения. При интоксикационном синдроме уровни концентраций указанных соединений существенно превышают фоновые концентрации (у здоровых людей). При неэффективном лечении в динамике происходит увеличение или сохранение исходно повышенного уровня любой из определяемых кислот.

Исходным материалом анализа является сыворотка венозной крови, которая подвергается процессу пробоподготовки (разбавлению, подкислению, введению внутреннего стандарта, экстракции в диэтиловый эфир, упариванию, силилированию) с последующим хромато-масс-спектральным анализом триметилсилильных производных определяемых кислот.

Методика количественного определения содержания определяемых кислот в сыворотке крови:

а) приготовление раствора внутреннего стандарта - 16 мг безводной D5-бензойной кислоты растворяют в 1 мл 96% этилового спирта. 10 мкл полученного раствора разбавляют 96% этиловым спиртом до объема 4 мл. Содержание D5-бензойной кислоты в конечном растворе составляет 40 нг/мкл или 40 мкг/мл. В процессе пробоподготовки в образец вводят 10 мкл конечного раствора (абсолютное содержание стандарта 400 нг);

б) пробоподготовка - 2 мл цельной венозной крови центрифугируют в течение 15 мин при скорости вращения ротора центрифуги 3000 об/мин.

Отбирают два параллельных образца по 0,2 мл полученной таким образом сыворотки, которые затем обрабатывают одновременно и независимо. Сыворотку помещают в пробирку вместимостью 10 мл, разбавляют 0,8 мл воды для инъекций, добавляют 20 мкл 50% серной кислоты (до рН=2,0) и 10 мкл спиртового раствора, содержащего 400 нг D5-бензойной кислоты (внутреннего стандарта). Затем полученную смесь дважды экстрагируют порциями по 1 мл диэтилового эфира. Полученные эфирные вытяжки объединяют и упаривают при температуре 40°С досуха. Сухой остаток обрабатывают 20 мкл N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида (BSTFA) в течение 15 минут при 80°С в замкнутом объеме (в герметично закрытом сосуде). Полученный силилированный продукт (ТМС-производное) разбавляют 80 мкл н-гексана (квалификации «о.с.ч.»), переносят во вставку виал для проведения хромато-масс-спектральномого анализа (ГХ-МС);

в) ГХ-МС анализ - хромато-масс-спектральное определение фенилсодержащих кислот проводят с использованием газового хроматографа Agilent Technologies 6890, оснащенного масс-спектральным детектором Agilent Technologies 5973. Хроматорафическое разделение компонентов прводят на кварцевой капиллярной колонке HP5MS диаметром 0,2 мм, длиной 25 м, с толщиной слоя 0,33 мкмоль/л.

Условия хроматографирования: газ-носитель - гелий, скорость потока - 24 мл/мин, скорость потока через колонку - 1,2 мл/мин; температура испарителя 280°С; режим работы термостата - программируемый: начальная температура термостата колонки 80°С, время выдержки 4 мин, далее нагрев до 240°С со скоростью 7°С/мин, до 320°С со скоростью 15°С /мин, затем термостатирование при 320°С до конца анализа; объем анализируемой пробы - 2 мкл, время анализа - 35 мин, время задержки работы детектора - 4 мин, режим работы детектора - режим полного сканирования.

Идентификация определяемых кислот производится в соответствии с временами удерживания основного и подтверждающего ионов (m/z), приведенных в табл.1;

Таблица 1. Времена удерживания, интенсивности основного и подтверждающего ионов (m/z) в хроматограммах и масс-спектрах определяемых карбоновых кислот.

Таблица 1

Вещество Время удерживания ТМС-производного, мин Основной ион, m/zПодтв. ион, m/z
1D5 -Бензойная кислота (стандарт)10,45 184110
2n-Гидроксифенилмолочная кислота22,02179 147
3 Фенилмолочная кислота 17,12193147
4n-Гидроксифенилуксусная кислота18,04179 296
5 Фенилуксусная кислота 11,7116491

г) обработка результатов - для расчетов используют хроматограммы, полученные в режиме тока селективных ионов (SIM). Проводят идентификацию пиков, соответствующих определяемым веществам по временам удерживания (табл.1).

Наличие вещества считается доказанным в случае присутствия в хроматограмме пиков для основного и подтверждающего ионов (m/z) с относительными интенсивностями, близкими к ним в масс-спектре из базы данных NIST-02.

Интегрирование (определение площади) пиков проводят по сигналу основного иона (m/z).

Массовую концентрацию (в нг/мл) определяемых кислот вычисляют методом внутреннего стандарта по формуле

способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877

где сi - концентрация i-го компонента (нг/мл), Si - площадь пика i-го компонента, определенная по основному иону (m/z), Мri - молекулярная масса i-го компонента, mst - масса вводимого стандарта (400 нг), Imax - высота пика самого интенсивного иона (m/z) в масс-спектре ТМС-производного i-го компонента (999), S st - площадь пика стандарта, Mrst - молекулярная масса стандарта (127), Vs - объем образца (0,2 мл), Ii - относительная интенсивность (высота) пика основного иона (m/z) в масс-спектре ТМС-производного i-го компонента. Масс-спектральные данные (m/z и относительные интенсивности пиков) взяты из международной базы данных масс спектров NIST-02.

На первом этапе исследования было установлено, что выбранные маркеры объективно отражают тяжесть интоксикационного синдрома (Табл. 2, 3, 4). На втором этапе проведено изучение содержания в сыворотке крови п-ГМФК, ФМК, п-ГФУК, ГФУ у реаниматологических больных разных групп с целью динамической оценки эффективности лечения интоксикационного синдрома до и после назначенного лечения. Было установлено, что уровень определяемых кислот в крови у больных при неэффективном лечении эндогенной интоксикации не снижался или возрастал.

Пример 1. Исследовано содержание определяемых кислот в сыворотке крови 52 пациентов, принадлежащих к 6 клиническим группам: № 1 - здоровые добровольцы (16 человек), № 2 - кардиохирургические больные с сердечно-сосудистыми заболеваниями до операции (36 человек), № 3 - больные с неосложненным течением послеоперационного периода (11 человек), № 4 - больные с неэффективным лечением интоксикационного синдрома на фоне неинфекционных осложнений (8 человек), № 5 - пациенты с неэффективным лечением интоксикационным синдрома на фоне пневмонии (20 человек) и № 6 - больные с неэффективным лечением интоксикационного синдрома на фоне генерализованного инфекционного процесса (22 человека). Проведен полный цикл пробоподготовки и количественного определения определяемых кислот. Полученные данные статистически обработаны и приведены в табл.2, 3, 4.

Таблица 2. Содержание определяемых кислот в сыворотке крови у кардиохирургических больных, разделенных на группы, оперированных в плановом порядке с применением искусственного кровообращения (медиана, М и интерквартильные размахи 25% и 75%), мкмоль/л.
ГРУППЫ № 2 Исходные данные (до операции) (n=36) № 3 Неосложненное течение послеоперационного периода/есть признаки эндогенной интоксика-ции как результат перенесенного искусственного кровообращения (на 3 сутки) (n=11) № 4

Неэффективное лечение/прогрессирует эндогенная интоксика-ция на фоне неинфекционных

Осложнений (n=8)
№ 5

Неэффективное лечение/прогрессирует эндогенная интоксика-ция на фоне пневмонии (n=20)
№ 6

Неэффектиное лечение/прогрессирует эндогенная интоксикация на фоне генерализованного инфекционного процесса (n=22)
Концентрация ФМ, мкмоль/л М25% 75%М25% 75%М25% 75%М25% 75%М25% 75%
Фенилуксус-ная кислота 0,40,2 0,70,30,1 0,40,0 0,00,30,1 0,00,3 0,40,10,7
п-Гидроксифенил-уксусная кислота 0,70,3 1,41,00,6 1,81,8 0,92,62,8 1,86,5 14,17,835,9
Фенилмолоч-ная кислота 0,40,20,6 0,30,2 0,51,00,6 1,20,7 0,61,32,7 1,45,1
п-Гидроксифе-нил-молочная кислота 1,40,72,1 1,41,1 1,62,91,3 41.9 1,33,47,6 2,915,5

Таблица 3. Содержание определяемых кислот в сыворотке крови у здоровых добровольцев и у кардиохирургических больных до операции (медиана, М и интерквартильные размахи 25% и 75%), мкмоль/л.
ГРУППЫ № 1

Здоровые добровольцы

(п=16)
№ 2

Больные - исходные данные

(до операции)

(п=36)
Концентрация ФМ, мкмоль/лМ25% 75%М 25%75%
Фенилуксусная кислота0,4 0,30,60,4 0,20,7
п-Гидроксифенилуксусная кислота 0,50,40,6 0,70,3 1,4
Фенилмолочная кислота 0,30,2 0,40,40,2 0,6
п-Гидроксифенилмолочная кислота1,10,9 2,01,4 0,72,1

Таблица 4. Достоверность различий по Mann-Whitney U Test (Spreadsheet2) при сравнении групп
Группы № 1 vs № 2 № 2 vs № 3 № 2 vs № 5 № 2 vs № 4 № 2 vs № 6 № 4 vs № 5 № 4 vs № 6 № 5 vs № 6
Фенил-уксусная кислота 0,870,01 0,0027680,006 0,9234010,575888 0,024380,017317
п-Гидрокс ифенил-уксусная кислота0,04 0,0020,000253 0,170 0,1777720,000869 0,000077
Фенил-молочная кислота 0,370,008 0,0003520,019 00,9189870,007514 0,000261
п-Гидрокс ифенил-молочная кислота0,66 0,0220,020975 0,05600,647173 0,0129340,00056

Пример 2. Больная К-н, 52 лет ( № и/б 64730) поступила в стационар 22 ноября 2011 г.

Основной диагноз: Обширная флегмона левой нижней конечности. Целлюлит, некротический фасциит. На момент поступления у больной был тяжелый интоксикационный синдром с признаками органных нарушений на фоне генерализованной инфекции (гипертермия 38.5°С, лейкоцитов в крови 12,2*109 кл/л, в лейкоцитарной формуле - палочкоядерных нейтрофилов 28%, СОЭ 44 мм/ч, сывороточный креатинин 149.9 мкмоль/л, общий билирубин 39.4 ммоль/л, гипотензия 96/64 мм рт.ст, тахикардия 104 в мин).

Выполненное лечение: 22 ноября 2011 г. - вскрытие флегмоны мягких тканей левой голени + назначение антибиотикотерапии; 30 ноября 2011 г. - расширенная хирургическая санация гнойного очага.

На фоне проведенного комплексного лечения у больной положительная динамика в виде регрессии признаков органной недостаточности, снижение температуры до субфебрильных значений, снижение количества лейкоцитов в крови до нормальных значений. По данным ГХ-МС анализа в период благополучия после первой операции - отмечается прогрессивное снижение концентрации п-ГФМК, п-ГФУК практически до нормальных значений, а ФМК - до нормальных. Замедленное снижение концентрации ФУК между первой и третьей пробой говорит о нестойкости полученного положительного эффекта от лечения. Однако в целом оценка эффективности лечения интоксикационного синдрома за временной промежуток до 2 декабря 2011 г. - положительная (Таблица 5, Фиг.1).

Таблица 5. Динамика определяемых кислот в крови больной К-н, 52 лет ( № и/б 64730) по данным ГХ-МС, мкмоль/л
способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 ФУКп-ГФУК ФМКп-ГФМК
23.ноя1,067 3,6551,1732,781
29.ноя0,934 1,6470,2 0,541
02.дек 0,8350,7090,223 0,493
06.дек 0,9460,755 0,2730,604

Итог лечения: больная выписана из стационара.

Пример 3.

Больная К-ва, 70 лет ( № и/б 66300) поступила в стационар 28 ноября 2011 г.

Основной диагноз: Обширная межмышечная флегмона правой голени с переходом на нижнюю треть бедра. Давность заболевания 7 суток. На момент поступления у больной был тяжелый интоксикационный синдром (гипертермия 38.2°С, тахикардия 95 в мин, лейкоцитов в крови 18.2*109 кл/л, прокальцитонин 2,95 нг/мл).

Выполненное лечение: 28 ноября 2011 г. - вскрытие флегмоны мягких тканей правой ноги + назначение антибиотикотерапии.

На следующие сутки после операции клинически и по рутинным лабораторным данным отмечалась положительная динамика: температура тела не повышалась выше 37°С, лейкоцитов в крови определялось 12,0*109 кл/л, исчезла тахикардия. Однако на следующие сутки, 30 ноября 2011 отмечен рост содержания лейкоцитов в крови до 20,0*109 кл/л, рост температуры с повышением до 37,6°С, нарастание дыхательной недостаточности со снижением индекса оксигенации ниже 300 мм рт.ст. на фоне учащения дыхания до 23 в мин (Таблица 6, Фиг.2).

Таблица 6. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больной К-ва, 70 лет ( № и/б 66300) по данным ГХ-МС, мкмоль/л.
способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 ФУКп-ГФУК ФМКп-ГФМК
29.ноя0 2,1032,6595,243
30.ноя0 2,7093,715 0,496
02.дек 0,1524,2591,087 0,947
06.дек 0,0492,387 0,4010,701
08.дек00,608 0,210,572
09.дек0,042 1,7360,2710,753
12.дек0,057 1,0860,251 0,146

На основе табличных данных видно, что определяемые кислоты, кроме ФУК, после первичной хирургической санации очага инфекции остались на высоком уровне и на момент развития ухудшения 30 ноября 2011 г. концентрации ФУК, п-ГФУК, п-ГФМК начали резко возрастать, что свидетельствует о неэффективности проводимого лечения и прогрессировании синдрома эндогенной интоксикации. Была проведена смена антибиотикотерапии, что сопровождалось снижением всех определяемых кислот. 6 декабря 2011 г. выполнена повторная операция с иссечением некротизированных тканей. На фоне проведенного лечения отмечалась положительная динамика в общем состоянии больной, по данным ГХ-МС продолжалось снижение концентрации всех определяемых кислот. Клинически в этот период также определялось улучшение состояния больной, по данным рутинных лабораторных показателей к 8 декабря 2011 г. отмечено снижение лейкоцитов до 6,8*10 9 кл/л, температура тела не повышалась выше 37°С, прокальцитонин 0,092 нг/мл. Однако достигнутый эффект от проведенного лечения оказался нестойким, у больной вновь стал прогрессировать синдром эндогенной интоксикации (временной отрезок от 8 декабря 2011 г. до 9 декабря 2011 г.), что потребовало срочного проведения расширенной хирургической обработки гнойного очага 9 декабря 2011 г. и пересмотра антибиотикотерапии. В результате был достигнут положительный эффект в лечении эндогенной интоксикации и основного заболевания, что отражается в динамике определяемых кислот на временном отрезке от 9 декабря до 12 декабря. Клинически, 12 декабря 2011 г. больная стала более активной, у нее появился хороший аппетит, температура не поднималась выше 37.0°С. Больная была переведена из отделения реаниматологии в профильное хирургическое отделение. С этого момента был достигнут стойкий положительный результат лечения эндогенной интоксикации до момента выписки больной из стационара.

Пример 4.

Больная С-ва, 54 лет ( № 67585) поступила в стационар с диагнозом: флегмона большого пальца левой стопы с переходом на свод стопы; сахарный диабет 2-го типа, ср. степени тяжести; метаболический синдром. На момент поступления лейкоцитов в крови 16,6*109 кл./л, температура тела 36,8°С, гликемия 20,1 ммоль/л, прокальцитонин 0,211 нг/мл. Больная в первый день отказалась от предложенного оперативного вмешательства, было назначено консервативное лечение. 7 декабря на фоне нарастающей интоксикации больная была прооперирована (лейкоцитов в крови 18,8*109 кл./л, температура тела 38,8°С, гликемия 21,2 ммоль/л, прокальцитонин 0,213 нг/мл).

Выполненное лечение: 07.12.2011 г. - ампутация нижней левой конечности на уровне нижней трети бедра. Вскрытие флегмоны мягких тканей левого бедра + назначение антибиотикотерапии + лечение сахарного диабета (Таблица 7, Фиг.3).

Таблица 7. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больной С-ва, 54 лет ( № 67585) по данным ГХ-МС, мкмоль/л.
способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 ФУКп-ГФУК ФМКп-ГФМК
05.12.20110,741 0,4580,699 1,57
7.12.2011(1) 0,3470,4130,603 1,598
7.12.2011(2) 0,3150,446 0,5351,407
08.12.201100,623 0,2291,048
12.12.20110,223 0,7570,256 0,812

По данным ГХ-МС эффективность лечения интоксикационного синдрома можно оценить как неудовлетворительную, т.к. ни на одном временном промежутке не было достигнуто снижения концентрации всех определяемых кислот, что отразилось на длительности пребывания больной в стационаре. Например, на временном отрезке с 7 декабря 2011 г. по 8 декабря 2011 г. после выполненной операции происходило снижение всех определяемых кислот, кроме п-ГФУК.

Обращает на себя внимание проба 7.12.2011(1), взятая в день операции до начала оперативного вмешательства, и проба 7.12.2012 (2), взятая в операционной сразу после выполненной ампутации. Интервал между забором проб составил 40 минут. Но даже за этот небольшой промежуток времени заметна тенденция динамики определяемых веществ, что подтверждает приемлемость предлагаемого способа для быстрой оценки эффективности лечения интоксикационного синдрома у реаниматологических больных. Итог лечения: больная выписана.

Пример 5. Больной Д-в, 67 лет поступил в стационар с диагнозом: Мочекаменная болезнь. Коралловидный камень левой почки. Пионефроз слева. Осложнения: Гнойный паранефрит слева. Абсцесс забрюшинной клетчатки слева в области удаленной почки с прорывом в свободную брюшную полость, распространенный перитонит (Таблица 8, таблица 9, Фиг.4).

Таблица 8. Клинические и лабораторные данные больного Д-в, 67 за время наблюдения.
способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 11.0812.08 13.0814.08 15.0816.0817.08 19.08
APACHE II13способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 16способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 16способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 18способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877
SOFA 2способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 4способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 4способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 8способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877
температура тела,°С 3738 3838,238,3 3939,5 39,7
Лейкоцитоз, *109 кл/л14,712,8 12,314,5 14,513,312,9 27,8
Палочкоядерные нейтрофилы, %10 402823 302819 48
ЧСС, уд./мин 9810095 969597 110125

Таблица 9. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больного Д-в, 67 лет, мкмоль/л.
способ лабораторной оценки эффективности лечения интоксикации   у реаниматологических больных, патент № 2522877 ФУКп-ГФУК ФМКп-ГФМК
13.08.20113 11.0063,828
15.08.20111,968 10,3382,254 8,882
17.08.2011 3,61330,8374,399 24,811

За все время лечения у больного клинически и по данным ГХ-МС в соответствии с предложенным способом нарастал синдром интоксикации. Лечение интоксикационного синдрома было крайне неэффективным.

Исход заболевания: смерть больного.

Таким образом, способ по изобретению позволяет своевременно и объективно оценить эффективность лечения интоксикации у различных групп реаниматологических больных.

Краткое описание чертежей

Фиг.1. Динамика определяемых кислот в крови больной К-н, 52 лет (пример 2) по данным ГХ-МС, мкмоль/л. Точные численные значения концентраций ФКК приведены в таблице 5.

Фиг.2. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больной К-ва, 70 лет (пример 3) по данным ГХ-МС, мкмоль/л. Точные численные значения концентраций ФКК приведены в таблице 6.

Фиг.3. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больной С-ва, 54 лет (пример 4) по данным ГХ-МС, мкмоль/л. Точные численные значения концентраций ФКК приведены в таблице 7.

Фиг.4. Динамика концентраций определяемых кислот в крови больного Д-в, 67 лет (пример 5), мкмоль/л. Точные численные значения концентраций ФКК приведены в таблице 9.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ лабораторной оценки эффективности лечения эндогенной интоксикации у реаниматологических больных, заключающийся в том, что в венозной крови или сыворотке венозной крови определяют концентрации фенилуксусной, парагидроксифенилуксусной, фенилмолочной и парагидроксифенилмолочной кислот и при увеличении или сохранении исходно повышенного уровня любой из определяемых кислот по сравнению с их уровнем до проведенного лечения делают вывод о неэффективности лечения.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2522877

patent-2522877.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс G01N33/50 химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания

Патенты РФ в классе G01N33/50:
способ выбора лечения акне у женщин -  патент 2529789 (27.09.2014)
способ определения структурного состояния мембраны эритроцитов -  патент 2528909 (20.09.2014)
способ определения показаний к операции программированной санационной релапаротомии при перитоните -  патент 2528880 (20.09.2014)
способ лечения больных с синдромом диспепсии в сочетании с избыточной массой тела -  патент 2528641 (20.09.2014)
способ диагностики острого токсического повреждения печени -  патент 2527770 (10.09.2014)
способ исследования скорости всасывания аминокислот в пищеварительном тракте -  патент 2527349 (27.08.2014)
способ комплексного лечения некротического энтероколита у новорожденных и детей младшего грудного возраста -  патент 2527348 (27.08.2014)
способ оценки эффективности тромболитической терапии у больных острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента st -  патент 2526831 (27.08.2014)
способ прогнозирования развития пороговой стадии ретинопатии недоношенных у детей без офтальмологических признаков заболевания -  патент 2526827 (27.08.2014)
способ диагностики наружного генитального эндометриоза -  патент 2526823 (27.08.2014)


Наверх