способ покрытия предметных стекол для микроскопии
| Классы МПК: | G01N33/49 крови |
| Автор(ы): | Фефелов Владимир Александрович (RU), Шереметьев Юрий Александрович (RU) |
| Патентообладатель(и): | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия" (RU) |
| Приоритеты: |
подача заявки:
2012-05-03 публикация патента:
20.06.2014 |
Изобретение относится к области биологии и медицины, а именно к лабораторным методам исследования эритроцитов. Сущность способа: предметное стекло покрывают адгезивным веществом, в качестве которого используют хлористый лантан, при этом стекла помещают в сосуд с 0.03% раствором хлористого лантана на 60 мин и высушивают при комнатной температуре в течение 60 минут. Затем изучают эритроциты с помощью атомно-силовой или сканирующей электронной микроскопии. Способ обеспечивает стойкое прилипание эритроцитов и способствует сохранению их на предметном стекле в течение длительного времени.
Формула изобретения
Способ исследования эритроцитов, включающий забор крови, фиксацию эритроцитов глутаровым альдегидом, отличающийся тем, что предметное стекло покрывают адгезивным веществом, в качестве которого используют хлористый лантан, при этом стекла помещают в сосуд с 0.03% раствором хлористого лантана на 60 мин и высушивают при комнатной температуре в течение 60 минут, затем изучают эритроциты с помощью атомно-силовой или сканирующей электронной микроскопии.
Описание изобретения к патенту
Предлагаемое изобретение относится к биологии и медицине, в частности к лабораторным методам исследования эритроцитов с помощью атомно-силовой или сканирующей электронной микроскопии.
Известно, что для изучения эритроцитов с помощью атомно-силовой или сканирующей электронной микроскопии с целью создания монослоя и стойкого прикрепления их помещают на предметные стекла, покрытые адгезивным веществом (Nowakowski R., Luckham P. Surface Interface Analysis. 2002.33.118-121).
В качестве прототипа выбран способ исследования эритроцитов, включающий забор крови, фиксацию эритроцитов глутаровым альдегидом, помещение их на предметное стекло, покрытое полилизином, и изучение с помощью атомно-силовой микроскопии (Liu F., Burgess J., Mizukami H., Ostafin A. Cell Biochem. Biophys. 2003.38.251-269).
Однако полилизин является дорогим и дефицитным препаратом.
Задача предлагаемого изобретения - использование нового, недорогого адгезивного вещества, обеспечивающего стойкое прилипание эритроцитов к предметным стеклам.
Технический результат - исследование эритроцитов на стеклах, покрытых новым адгезивным веществом.
Технический результат достигается за счет того, что в способе, включающем забор крови, фиксацию эритроцитов глутаровым альдегидом, клетки помещают на предметное стекло, покрытое хлористым лантаном, и изучают с помощью атомно-силового или сканирующего электронного микроскопа.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.
Предметные стекла помещают в сосуд с 0.03% раствором хлористого лантана на 60 мин и высушивают при комнатной температуре в течение 60 минут.
Эритроциты трижды отмывают от плазмы и белых клеток центрифугированием в 10-кратном объеме физиологического раствора. Отмытые эритроциты фиксируют в 1% растворе глутарового альдегида в течение 60 минут при комнатной температуре. После этого эритроциты трижды отмывают дистиллированной водой, помещают на предметное стекло, покрытое 0.03% раствором хлористого лантана, и изучают с помощью атомно-силовой или сканирующей электронной микроскопии.
