способ диагностики давности наступления смерти по морфологическим изменениям гнилостно измененных спаек

Формула изобретения

Способ диагностики давности наступления смерти по морфологическим изменениям гнилостно измененных спаек, взятых вместе с участком мышечной ткани брюшной стенки в месте прикрепления спайки к брюшной стенке, отличающийся тем, что с целью диагностики давности смерти проводится микроскопическое исследование спаек и участка мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки в окрасках гематоксилином и эозином, трихром по Массону, по Зербино и в случае потери клеточного состава в окраске гематоксилином и эозином при сохранении окраски мышечных клеток мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки по Зербино, а также коллагеновых и ретикулярных волокон в окраске по Массону давность составляет от 7 до 10 суток, в случае потери клеточного состава и отсутствия окраски мышечных клеток по Зербино давность устанавливается в пределах от 10 до 14 суток, в случае, если в ткани спаек не окрашиваются клетки, миоциты по Зербино и ретикулярные волокна по Массону, а только коллагеновые волокна по Массону, давность наступления смерти устанавливается свыше 14 суток.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины.

Изобретение относится к способу для определения давности смерти по результатам морфологического исследования спаек.

Известны способы диагностики давности наступления смерти при судебно-медицинском исследовании трупа, которые заключаются в исследовании ректальной температуры, изучении характеристик трупных пятен, окоченения и т.д. [«Об утверждении Порядка организации и производства судебно-медицинских экспертиз в государственных судебно-экспертных учреждениях Российской Федерации». Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 12 мая 2010 г. № 346н. Зарегистрирован в Минюсте РФ 10 августа 2010 г. Регистрационный № 18111; Ботезату Г.А. Судебно-медицинская диагностика давности наступления смерти. - Кишинев, 1975. - 131 с.].

Недостатком этих методов является их применимость лишь на ранних сроках смерти. По мере увеличения давности смерти их информативность уменьшается, а для некоторых из них - исчезает ввиду наступления гнилостных изменений. Приблизительный рубеж для оценки давности смерти такими методами составляет около 2-3 суток. Вместе с тем существует актуальная необходимость в диагностике давности смерти на более протяженном периоде.

Задачей изобретения является разработка способа морфологической диагностики давности наступления смерти, основанного на морфологическом изучении обнаруженных при судебно-медицинском вскрытии спаек. Решение задачи лежит в плоскости исследования различных структурных элементов спаечного процесса, таких как клеточные элементы, ретикулярные и коллагеновые волокна, степень окрашивания которых различными красителями на разных сроках давности смерти различна.

Сущностью изобретения является использование дифференцировочного окрашивания красителями ткани спаек, взятых вместе с участком мышечной ткани брюшной стенки в месте прикрепления спайки к брюшной стенке. Эмпирически при судебно-медицинском и судебно-гистологическом исследовании на большом объеме выборки было определено, что при давности смерти в интервале от 7 до 10 суток в спайках при окраске гематоксилином и эозином была обнаружена потеря клеточного состава - клетки становились неразличимыми, ядра теряли свою структуру. При окраске трихром по Массону (Р. Лилли, 1968) в строме спаек обнаруживались коллагеновые и ретикулярные волокна. При окраске по Зербино в мышечных клетках в мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки обнаруживалось накопление красителя кислотного красного 2С, что служило доказательством гибернации миоцитов и сохраняющихся контрактур [Захарова В.П., Руденко К.В., Руденко Е.В., Левчишина Е.В., Третьяк А.А. Использование метода MSB в модификации Зербино-Лукасевич для диагностики морфофункционального состояния миокарда. // Патологiя. - № 2. - Т.7. - 2010. С.105-106].

На 10-14 сутки в окраске гематоксилином и эозином клеточный состав также был неразличим, в окраске трихром по Массону также обнаруживались коллагеновые и ретикулярные волокна, а при окраске по Зербино наблюдалась потеря окрашивания кислотным красным 2С, что свидетельствовало об аутолизе внутримышечных белков мышечных клеток мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки актино-миозинового комплекса и отсутствии гибернации тканей.

При давности смерти свыше 14 суток к уже указанным изменениям была обнаружена потеря способности к окрашиванию ретикулярных волокон в окраске трихром по Массону.

Таким образом, отличительным признаком давности смерти на 7-10 сутки является потеря спайками различимого клеточного состава, на 10-14 сутки - потеря способности мышечных клеток мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки с окрашиванию кислотным красным 2С в окраске по Зербино, свыше 14 суток - отсутствие окрашивания ретикулярных волокон в красный цвет красителями трихром по Масону.

Для проверки существующей гипотезы нами было проведено экспериментальное исследование, целью которого было установление зависимости между давностью смерти и степенью окрашивания спаек.

Работа была выполнена на 36 нелинейных белых крысах обоего пола массой 180-210 г. Выбор, содержание животных, моделирование патологических процессов и выведение крыс из опыта осуществляли на основе базисных нормативных документов МЗ РФ и рекомендаций ВОЗ [Zutphen L.F., Baumans V., Beynen А.С. Principles of laboratory animal science. Amsterdam: Elsevier, 1993. 389 p.].

При воспроизведении спаечного процесса была использована классическая модель (Воробьев А.А., Бебуришвили А.Г., 2001) с десерозированием участка париетальной и висцеральной брюшины. Через 15 суток после формирования спаечного процесса животных выводили из эксперимента передозировкой нембутала. Трупы животных помещались в темное сухое проветриваемое помещение при температуре 20°C для воспроизводства процессов гниения.

Аутопсия и забор трупного материала спаек, взятых вместе с участком мышечной ткани брюшной стенки в месте прикрепления спайки к брюшной стенке, проводился на 7-е, 10-е, 14-е сутки после наступления смерти.

С образцов тканей спаек были получены гистологические срезы, которые окрашивали по общепринятой методике: гематоксилином и эозином, трихром по Масону, по Зербино.

На 7 сутки смерти в спайках обнаруживалась потеря клеточного состава, целостность коллагеновых и ретикулярных волокон, окрашивание мышечных клеток мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки кислотным красным 2С по Зербино. На 10 сутки клеточный состав был неразличим, коллагеновые и ретикулярные волокна сохраняли способность к окрашиванию, миоциты теряли способность к окрашиванию по Зербино.

К 14 суткам давности наступления смерти клеточный состав был неразличим, мышечные клетки мышечной ткани брюшной стенки из места прикрепления спайки не окрашивались по Зербино, ретикулярные волокна теряли способность к окрашиванию. Способность воспринимать красители сохранялась только у коллагеновых волокон.

Таким образом, предложенный способ определения давности наступления смерти по морфологическим изменениям спаек в различных окрасках является достоверным, воспроизводимым и позволяет существенно уточнить интервалы наступления смерти, что имеет важное значение для судебно-медицинской деятельности.