штамм бактерий bacillus vallismortis - деструктор нефти и нефтепродуктов

Классы МПК:C12N1/26 способы, использующие, или питательные среды, содержащие углеводороды
C02F3/34 отличающаяся используемыми микроорганизмами
B09C1/10 микробиологическими способами или с использованием ферментов
Автор(ы):
Патентообладатель(и):Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2013-03-27
публикация патента:

Изобретение относится к области микробиологии. Предложен штамм бактерий Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 - деструктор нефти и нефтепродуктов. Штамм обладает способностью в короткие сроки в широком диапазоне температур от +8 до +37°C осуществлять деградацию нефти на 78,3%. Штамм может быть использован для очистки почв и для очистки воды, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, такими как дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат. 3 табл., 5 пр.

Формула изобретения

Штамм бактерий Bacillus vallismortis ВКПМ B-11017 - деструктор нефти и нефтепродуктов.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области микробиологии и представляет собой новый бактериальный штамм бактерий Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017, обладающий способностью быстро утилизировать нефть и нефтепродукты (дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат). Штамм может быть использован для очистки почв и водоемов, загрязненных нефтью и нефтепродуктами, в широком диапазоне температур от +8 до +37°C.

Уровень техники

Известны штаммы: Rhodococcus erythropolis, Rhodococcus luteus, Micrococcus flavus (1. Клюшникова T.M., Смирнова Г.Ф., Куберская С.Л., Слабоспицкая А.Т., Залевский B.C., Касаткина Т.П., Елисеева Г.С. А.с. SU 1493666-А1. Способ очистки подсланцевых сточных вод от нефтепродуктов. Заявка 4280617, 09.07.1987. Опубл. 15.07.1989); Flavobacterium tirrennicum (2. Новожилова М.И., Попова Л.Е., Недоводиева Т.П., Каламкарова Л.И. А.с. SU 1409594. Штамм бактерий Flavobacterium tirrennicum, используемый для очистки подсланевых и промышленных сточных вод от нефти и нефтепродуктов. Заявка 4066152, 24.03.1986. Опубл. 15.07.1988), которые могут разлагать углеводороды нефти.

Недостатком вышеперечисленных штаммов является то, что они осуществляют деструкцию нефтепродуктов только в воде и не способны осуществлять очистку почвы от нефти.

Известны штаммы: Pseudomonas putida 36 (3. Дядечко В.Н., Толстокорова Л.Е., Морозова Т.Н. Штамм @ @ 36, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов. А.с. СССР 1076446. Заявка 3474745, 22.07.1982. Опубл. 28.02.1984); Acinetronacter sp.НВ-1 (4. Жиркова Н.А., Холоденко В.П. Штамм бактерий ACINETOBACTER SPECIES, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов. Патент РФ 2077579. Заявка 9404331, 06.12.1994. Опубл. 20.04.1997); Acinetronacter sp.JN-2 (5. Ушков С.Б., Ильинская Н.В. Штамм ACINETOBACTER SPECIES, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов. Патент РФ 2064017. Заявка 93009595, 23.02.1993. Опубл. 20.07.1996); Pseudomonas alcaligenes Е7 (6. Ермоленко З.М., Холоденко В.П., Чугунов В.А. Штамм бактерий PSEUDOMONAS ALCALIGENES Е7, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов. Патент РФ 2134723. Заявка 98105707, 25.03.1998. Опубл. 20.08.1999) и Pseudomonas alcaligenes B-1 (7. Ермоленко З.М., Холоденко В.П., Чугунов В.А., Кобелев B.C., Акимова Н.А. Штамм бактерий PSEUDOMONAS ALCALIGENES В-1, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов. Патент РФ 2133770. Заявка 98105709, 25.03.1998. Опубл. 27.07.1999).

Недостатком штаммов является то, что они утилизируют нефть при сравнительно высоких температурах.

Большую эффективность в условиях низких положительных температур показал штамм Rhodococcus erythroplis Е-15 (8. Коронелли Т.В., Аракелян Э.И., Комарова Т.Н., Ильинский В.В. Способ очистки почв от нефтяных загрязнений. Патент РФ 2019527. Заявка 93017464, 3.04.1993. Опубл. 15.09.1994), но процесс биодеградация нефти протекает медленно и только при добавлении нитроаммофоски или нитроаммофоски и натриевой селитры.

В качестве прототипа служит штамм бактерий «Bacillus subtilis Колыма 7/2» (9. Неустроев М.П., Тарабукина Н.П., Неустроев М.М., Сазонов Н.Н., Парникова С.И., Степанова A.M. Способ очистки мерзлотных почв от нефти спорообразующими бактериями BACILLUS SUBTILIS. Патент РФ 2446900. Заявка 2010129158, 13.07.1010. Опубл. 13.07.2010), обладающий способностью снижать концентрацию нефти до 0,48%, то есть уровень нефти от 135143 мг/кг снижается до 645 мг/кг в течение 3 месяцев летнего периода. Однако штамм осуществляет деградацию только нефти и только в почве в условиях модельного эксперимента и не способен осуществлять очистку воды от нефти и утилизировать нефтепродукты (дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат), в том числе в условиях широкого диапазона температур от +4 до +37°C.

Задачей изобретения является получение штамма бактерий, обладающего высокой утилизирующей способностью по отношению как к нефти, так и к нефтепродуктам в относительно короткие сроки, в широком диапазоне температур от +8 до +37°C, который может быть использован для очистки почв и воды, загрязненных нефтью и нефтепродуктами (дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат).

Осуществление изобретения

Предлагаемый штамм бактерий Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 выделен из нефтезагрязненной почвы трассы магистрального нефтепровода «Восточная Сибирь - Тихий Океан», 1338,5 км, Ленский район, Республика Саха (Якутия), 19 мая 2010 года. Штамм депонирован Всероссийской коллекцией промышленных микроорганизмов в ФГУП ГосНИИГенетика - ВКПМ, 117545, г.Москва, 1-й Дорожный проезд, 1. Коллекционный номер ВКПМ В-11017.

Штамм Bacillus vallismortis ВКПМ B-11017 утилизирует нефть и нефтепродукты (дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат) в качестве единственного источника углерода. Процесс идет в широком диапазоне температур (от +8 до +37°C).

Использование штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 в естественных условиях, для очистки мерзлотной почвы от нефти, при средней температуре почвы от +8 до +14°C, позволяет достичь 78,3% деструкции нефти за 60 суток.

Деструкция нефти и нефтепродуктов в воде при температуре воды +20°C составляет 50,8%, за 2 месяца.

Деструкция нефти и нефтепродуктов в водной среде с добавлением минеральных компонентов через 7 суток при температуре +8°C составляет 18,5 - 56,4%, при температуре +20°C - 31,7 - 67,8%, при температуре +30°C - 44,7 - 74,0%, при температуре +37°C - 50,0 - 84,7% в зависимости от типа загрязнителя.

Полученный штамм характеризуется следующими признаками.

Морфологокультуральные признаки.

Грамположительные споровые палочки в мазках расположены одиночно и короткими цепочками.

На мясопептонном агаре (масс.%: ферментативный пептон - 1,0; натрий хлористый - 0,5; агар - 1,0; вода мясная - остальное, pH 7,0-7,2) с добавлением 1% глюкозы растет в виде сморщенных суховатых бежевых колоний, через 1-3 суток колонии окрашиваются в коричневый цвет, субстрат не пигментирует.

На поверхности скошенного мясопептонного агара без добавления 1% глюкозы растет в виде сухой морщинистой пленки бежевого цвета.

На среде Сабуро (масс.%: гидролизат рыбной муки - 1,0; панкреатический гидролизат казеина - 1,0; дрожжевой экстракт - 0,2; натрия фосфат однозамещенный - 0,2; D-глюкоза - 4,0; агар - 1,0; вода дистиллированная - остальное; pH 6,0±3) образует крупные колонии от грязно-коричневого до болотно-коричневого оттенка диаметром до 1 см и более.

В мясопептонном бульоне (масс.%: ферментативный пептон - 1,0, натрий хлористый - 0,5, вода мясная - остальное; pH 7,0-7,2) растет в виде морщинистой пленки бежевого цвета поверх бульона.

На минеральной среде Мюнца (10. Керстен Д.К. Морфологические и культуральные свойства индикаторных микроорганизмов нефтегазовой съемки - Микробиология, 1963, № 5 - С.1024-1030) с нефтью и нефтепродуктами (дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат) следующего состава, масс.%: KNO3 - 0,4; MgSO4·7H2 O - 0,08; NaCl - 0,1; K2HPO4 - 0,14; KH 2PO4 - 0,06; агар - 2,0; нефть или нефтепродукты - 1,0; вода дистиллированная - остальное, pH - 7,2, в виде непрозрачных матовых серо-бежевых колоний диаметром 0,1-0,2 см.

Физиолого-биохимические признаки.

Штамм хорошо растет при температуре от +8 до +37°C, в аэробных условиях. При температуре ниже +8°C и в анаэробных условиях штамм сразу не погибает, но развивается медленнее. Оптимум роста +30°C. Растет при pH 6,0 - 8,0. Растет в солевом бульоне с добавлением 0,1-2,0% NaCl.

Штамм каталазоположителен, оксидазоотрицателен. Метаболизм окислительного типа. Биохимическая активность выражена слабо. Не усваивает лизин и орнитин. Не потребляет цитрат и малонат натрия. Желатин не гидролизует. Крахмал не разлагает. Индолоотрицателен. Не образует сероводород. Реакция Фогес-Проскауэра отрицательная. Фенилаланиндезоксаминаза отрицательная. Ферментирует бета-галактозидазу.

Штамм не вирулентный, не токсичный, не токсигенный, не фитотоксичен (проверка проведена на белых мышах и семенах высших растений (овес сорт «Скакун» и пшеница сорт «Приленская-19»).

Условия хранения:

1. В лиофилизированном виде в ампулах при +4°C.

2. Штамм может поддерживаться регулярными пересевами (1 раз в 2 недели) на скошенном МПА.

Изобретение поясняется следующими примерами.

Пример 1. Культивирование штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017

Предлагаемый штамм Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 был выделен из нефтезагрязненной почвы трассы магистрального нефтепровода «Восточная Сибирь - Тихий Океан», 1338,5 км, Ленский район, Республика Саха (Якутия), 19 мая 2010 года.

Культивирование штамма проводили в минеральной среде Мюнца следующего состава (г/дм 3): KNO3 - 4,0; MgSO4·7Н 2O - 0,8; NaCl - 1,0; K2HPO4 - 1,4; KH2PO4 - 0,6; агар - 20,0; вода дистиллированная 1,0 дм3; pH среды - 7,2. Для чего 1,0 г нефтезагрязненной почвы с вышеуказанного объекта вносили в 250 мл минеральной среды Мюнца. В качестве единственного источника углерода и энергии использовали нефть, которую вносили в среду Мюнца в количестве 1000 мг на 1,0 дм3 среды. Инкубация проводилась в термостатируемых качалочных условиях на установке «УВМТ-12-250» при 200 об/мин и температуре +29±1°C. Рост бактерий наблюдали уже через 7-10 дней инкубации по образованию мутной беловатой эмульсии и исчезновению маслянистых пятен нефти. Чистая культура бактерий была получена путем культивирования при вышеперечисленных условиях и многократных пересевов (более 10) накопительной культуры на чашки Петри с агаром из гидролизата рыбной муки (ГРМ-агар) с добавлением 1% глюкозы. Далее посевы инкубировали в стационарных условиях в термостате при +30°C. Через 48 часов на поверхности ГРМ-агара появились суховатые бежевого оттенка колонии, которые по культурально-морфологическим и биохимическим признакам, а также по результатам проведенного анализа нуклеотидных последовательностей гена 16S рРНК и ключевых фенотипических признаков согласно таксономическим описаниям, приведенным в Определителе Берги (11. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology Book Review Int. J. of Syst. Bact.; July 1985, p.408), идентифицированы как штамм Bacillus vallismortis.

Изолированные колонии пересевали на скошенный мясопептонный агар. Через 48 часов инкубации при температуре +30°C клетки штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 со скошенного агара использовали для определения активности в процессе деструкции нефти и нефтепродуктов.

Пример 2. Исследование нефтеокисляюшей активности штамма бактерий Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017

Клетки штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 со скошенного мясопептонного агара смывают 0,9% раствором NaCl, готовят исходную микробную суспензию бактериального изолята, объемом 25 см3, с концентрацией 1×109 микробных клеток/см3 по оптическому стандарту ГИСК им. A.M. Тарасевича.

Полученный бактериальный изолят штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 культивируют в водной среде с минеральным составом, близким по составу к среде Мюнца, состав которой описан в примере 1.

В колбочки объемом 200,0 см3 вносят по 100,0 см3 готовой минеральной среды и 1000 мг нефти. Колбы засевают клетками штамма до концентрации 1·10 9 клеток/ см3. В качестве контроля ставят такую же колбу со средой, нефтью и без бактерий для определения общих (естественных) потерь. Опыт проводят в трех повторностях. Колбы культивируют в качалочных условиях на установке «УВМТ-12-250» при 200 об/мин, при температурах +8°C; +20°C; +30°C и +37°C в течение 7 суток.

Биодеградацию нефти и нефтепродуктов определяют спектрометрическим методом, с использованием концентратомера «ИКН-025» (12. ФР. 1.31.2007.03234 МВИ 01.02.117 Методика выполнения измерений массовой концентрации нефтепродуктов в питьевых, природных и сточных водах ИК-спектрометрическим методом с использованием концентратомера «ИКН-025»).

Данные эксперимента показывают, что в водной среде с минеральными компонентами предлагаемый штамм уже на 7-е сутки при температуре +8+37°C утилизирует 18,59-52,82% - нефти; 25,46-82,26% - дизельного топлива; 28,19-50,04% - масла моторного; 56,40-84,73% - газового конденсата (таблица 1).

Таблица 1
Степень утилизации нефти и нефтепродуктов штаммом Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 через 7 суток культивирования
Вариант опытаt°C
Ксенобиотик, мг/дм3 Срок+8 +20+30+37
Нефть до опыта1000,01000,0 1000,01000,0
после опыта814,1 425,0393,0 471,8
% деструкции 18,5957,560,7 52,82
Дизельное топливодо опыта 1000,01000,01000,0 1000,0
после опыта 745,4393,7 171,0177,4
% деструкции25,46 60,6382,982,26
Масло моторное до опыта1000,01000,0 1000,01000,0
после опыта718,1 682,8553,0 499,6
%28,19 31,7244,7 50,04
штамм бактерий bacillus vallismortis - деструктор нефти и нефтепродуктов, патент № 2513702 деструкцииштамм бактерий bacillus vallismortis - деструктор нефти и нефтепродуктов, патент № 2513702 штамм бактерий bacillus vallismortis - деструктор нефти и нефтепродуктов, патент № 2513702 штамм бактерий bacillus vallismortis - деструктор нефти и нефтепродуктов, патент № 2513702 штамм бактерий bacillus vallismortis - деструктор нефти и нефтепродуктов, патент № 2513702
Газовый конденсат до опыта1000,0 1000,01000,01000,0
после опыта436,0 321,2259,4 152,7
% деструкции 56,467,8874,06 84,73

Пример 3. Приготовление препарата на основе клеток штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017

Бактериальный изолят, полученный способом, описанным в примере 2, переносят в колбы с жидкой стерильной средой, по составу близкой к среде Степина и др. (13. Степин А.А., Самыгин В.М., Кухтин В.П., Владимцева И.В., Жога Л.К., Каплиев В.И. Способ получения биомассы бацилл. Патент РФ 2053293. Заявка 5036470, 09.01.1992. опубл. 27.01.1996), г/дм3 : солянокислый гидролизат казеина - 14,0; экстракт кормовых дрожжей 3,0; MgSO4·7H2O - 0,2; NaCl - 4,0; (NH4)6Mo7O24·4H 2O - 0,5; дистиллированная вода до 1,0 дм3; pH 7,3-7,4. Среду стерилизуют при 0,5 атм в течение 20 мин.

В стерильных условиях, в 100,0 см3 готовой среды вносят 2,0 см3 эмульсии «Перфторана» (ОАО НПФ «Перфторан», Россия) и 10,0 см3 суспензии бактериального изолята. Культивируют в колбах на качалке в течение 48 часов, при температуре 29±1°C. Получают жидкую мутноватую культуру, с титром не менее 1 млрд клеток/см 3, которую используют как препарат для обработки почвы или воды от загрязнений нефтью.

Пример 4. Очистка воды от нефти с помощью препарата на основе клеток штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017

В эксикатор объемом 5,0 дм3 вносили 3,0 дм3 воды и 30,0 см 3 препарата на основе штамма бактерий Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017, полученной вышеописанным способом (пример 3). Для создания нефтяной пленки в емкости добавляли 30000 мг сырой неочищенной нефти. В качестве контроля использовали воду в количестве 3,0 дм3 с добавлением 30 000 мг нефти и без внесения микроорганизмов.

Эксперименты проводились в течение 2-х месяцев при температуре воды +20±1°C.

Биодеградацию нефти определяют спектрометрическим методом, с использованием концентратомера «ИКН-025» (12. ФР. 1.31.2007.03234 МВИ 01.02.117. Методика выполнения измерений массовой концентрации нефтепродуктов в питьевых, природных и сточных водах ИК-спектрометрическим методом с использованием концентратомера «ИКН-025»).

Установлено, что деструкция нефти в воде за 2 месяца составила 50,8%. Деструкция в контрольной емкости за 2 месяца существенно не изменилась (таблица 2).

Таблица 2
Динамика деструкции нефти в воде после внесения препарата на основе штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017
Вариант опытаКоличество нефти до внесения клеток штамма, мгКоличество нефти через 2 месяца после внесения клеток штамма, мг Степень утилизации нефти, %
Вода+нефть+клетки штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 30 00014 736,250,80
Контроль30 000 29 334,62,21

Пример 5. Очистка почвы от нефти с помощью клеток штамма бактерий Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017

Проведен эксперимент по очищению мерзлотной почвы, загрязненной нефтью, с помощью клеток штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017. Опыт выполнен в естественных условиях. Средняя температура почвы, в течение всего периода постановки эксперимента, на горизонте 20 см составляла +8°C; на горизонте 10 см - +14°C.

Для опыта клетки штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 со скошенного мясопептонного агара, полученные способом, описанным в примере 1, смывают 0,9% раствором NaCl, готовят микробную суспензию бактериального изолята, с концентрацией 1×10 9 микробных клеток/см3 по оптическому стандарту ГИСК им. A.M. Тарасевича.

Полученную суспензию клеток штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017 вносят в почву, загрязненную нефтью в количестве 1 литр суспензии на 1 куб. м нефтезагрязненной почвы. Почву тщательно перемешивают и экспонируют в течение 60 суток.

Для анализа образцы почвы отбирают до начала эксперимента и через 60 суток после его окончания. Эффективность биодеградации нефти предлагаемым штаммом оценивают гравиметрическим методом (14. РД 39-0147098-90. Инструкция по контролю за состоянием почв на объектах предприятий Миннефтегазпрома. - 1990). Результаты исследований показывают, что предлагаемый штамм в течение 60-ти суток, при средней температуре почвы +8+14°C, осуществляет деградацию нефти на 78,3%, в то время как естественные потери нефти при тех же условиях окружающей среды в почве, не обработанной препаратом, составила 7,32% (таблица 3).

Таблица 3
Динамика деструкции нефти в мерзлотных почвах, обработанных суспензией на основе клеток штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-11017
Вариант опыта Содержание нефти до внесения штамма, мг/кг Содержание нефти через 60 суток после внесения штамма, мг/кг Деструкция нефти за 60 суток, %
Почва+нефть+препарат на основе штамма Bacillus vallismortis ВКПМ В-110173886 84378,3
Контроль 1377112762 7,32

Технико-экономическая эффективность

Таким образом, преимуществом предлагаемого штамма бактерий BACILLUS VALLISMORTIS ВКПМ В-11017 является то, что он обладает высокой утилизирующей способностью по отношению как к нефти, так и к нефтепродуктам и в относительно короткие сроки (от 7 до 60 суток), в широком диапазоне температур от +8 до +37°C осуществляет деградацию нефти на 78,3%, в то время как естественные потери нефти при тех же условиях окружающей среды в почве, не обработанной препаратом, составляют 7,32%. Штамм может быть использован, как для очистки почв, так и для очистки воды, загрязненных нефтью и нефтепродуктами (дизельное топливо, масло моторное, газовый конденсат).

Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2513702

patent-2513702.pdf

Класс C12N1/26 способы, использующие, или питательные среды, содержащие углеводороды

штамм rhodotorula sp. для очистки почв, вод, сточных вод, шламов от нефти и нефтепродуктов -  патент 2526496 (20.08.2014)
штамм бактерий exiguobacterium mexicanum - деструктор нефти и нефтепродуктов -  патент 2523584 (20.07.2014)
препарат для очистки почвы от нефти и нефтепродуктов -  патент 2501852 (20.12.2013)
штамм rhodococcus erythropolis, используемый для разложения нефти -  патент 2489485 (10.08.2013)
штамм pseudomonas citronellolis, используемый для разложения нефти и дизельного топлива -  патент 2489484 (10.08.2013)
штамм rhodococcus fascians, используемый для разложения нефти -  патент 2489483 (10.08.2013)
штамм pseudomonas aeruginosa rcam01139 для разложения нефти и дизельного топлива -  патент 2489482 (10.08.2013)
штамм micrococcus luteus, обладающий каталазной активностью и осуществляющий трансформации органических остатков природного происхождения -  патент 2488630 (27.07.2013)
штамм penicillium sp., обладающий полифункциональными свойствами и осуществляющий трансформации органических остатков природного происхождения -  патент 2487933 (20.07.2013)
биосорбент для очистки воды от углеводородных загрязнений и способ его получения -  патент 2487752 (20.07.2013)

Класс C02F3/34 отличающаяся используемыми микроорганизмами

биосорбент для ликвидации нефти с поверхности водоемов -  патент 2529771 (27.09.2014)
штамм rhodotorula sp. для очистки почв, вод, сточных вод, шламов от нефти и нефтепродуктов -  патент 2526496 (20.08.2014)
способ очистки воды и мерзлотных почв от нефти и нефтепродуктов штаммом бактерий pseudomonas panipatensis вкпм в-10593 -  патент 2525932 (20.08.2014)
способ очистки мерзлотных почв и водной среды от нефти и нефтепродуктов спорообразующими бактериями bacillus vallismortis -  патент 2525930 (20.08.2014)
штамм бактерий exiguobacterium mexicanum - деструктор нефти и нефтепродуктов -  патент 2523584 (20.07.2014)
способ очистки мерзлотной почвы и водной среды от нефти и нефтепродуктов штаммом бактерий exguobacterium mexicanum -  патент 2521654 (10.07.2014)
способ очистки водного раствора, содержащего соль никеля, от ионов никеля. -  патент 2521653 (10.07.2014)
способ биологической очистки -  патент 2520561 (27.06.2014)
способ учета нефтеокисляющих бактерий в морской воде -  патент 2520084 (20.06.2014)
штамм rhodococcus sp.-деструктор нефтяных углеводородов -  патент 2518349 (10.06.2014)

Класс B09C1/10 микробиологическими способами или с использованием ферментов

способ получения биопрепарата для очистки и восстановления плодородия почвогрунтов, загрязненных нефтепродуктами -  патент 2529735 (27.09.2014)
способ детоксикации грунта, загрязненного нефтью и нефтепродуктами -  патент 2528198 (10.09.2014)
выделение белка, ответственного за восстановление урана (vi) -  патент 2527892 (10.09.2014)
способ очистки воды и мерзлотных почв от нефти и нефтепродуктов штаммом бактерий pseudomonas panipatensis вкпм в-10593 -  патент 2525932 (20.08.2014)
способ очистки мерзлотных почв и водной среды от нефти и нефтепродуктов спорообразующими бактериями bacillus vallismortis -  патент 2525930 (20.08.2014)
штамм бактерий exiguobacterium mexicanum - деструктор нефти и нефтепродуктов -  патент 2523584 (20.07.2014)
грунтошламовая смесь -  патент 2522317 (10.07.2014)
способ очистки мерзлотной почвы и водной среды от нефти и нефтепродуктов штаммом бактерий exguobacterium mexicanum -  патент 2521654 (10.07.2014)
способ учета нефтеокисляющих бактерий в морской воде -  патент 2520084 (20.06.2014)
штамм rhodococcus sp.-деструктор нефтяных углеводородов -  патент 2518349 (10.06.2014)
Наверх