ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу и лизоцим и/или сангвиритрин

Классы МПК:A61K38/43 энзимы; проэнзимы; их производные
A61K38/44 оксидоредуктазы (1)
A61K31/155  амидины , например гуанидин (H2N-C(=NH)-NH2), изомочевина (HN=C(OH)-NH2), изотиомочевина (HN=С(SH)-NH2)
A61K31/7012  соединения, содержащие свободную или этерифицированную карбоксильную группу, присоединенную непосредственно или через углеродную цепь к атому углерода сахаридного радикала, например глюкуроновая кислота, нейраминовая кислота
A61P17/02 для обработки ран, язв, ожогов, шрамов, келоидов или подобных заболеваний
A61P31/00 Противоинфекционные средства, те антибиотики, антисептики, химиотерапевтические средства
Патентообладатель(и):Клопотенко Леонид Леонидович (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2012-09-10
публикация патента:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой композицию для лечения ран, язв, эрозий, ожогов, обморожений, рубцов, а также инфекций, вызываемых грамположительными и грамотрицательными бактериями Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp., патогенными грибами рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобными грибами рода Candida (в т.ч. полирезистентные штаммы), а также Actinomycetes и некоторыми патогенными простейшими (Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis), содержащую в качестве активного ингредиента 0,001-5,0 мас.% коллагеназы, 0,001-5,0 мас.% лизоцима и/или 0,001-5,0 мас.% сангвиритрина, в качестве носителя 0,05-1,0 мас.% фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрина или липосом и приемлемые эксципиенты. Изобретение обеспечивает стабильность с сохранением активности фермента в течение длительного времени, глубокое проникновение в область пораженного участка кожи, потенцированное комплексное противомикробное и противорубцовое действие, 1 з.п. ф-лы, 10 пр., 4 табл.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической композиции, содержащей ферменты: коллагеназу и лизоцим и/или сангвиритрин, которая может быть использована в медицине для лечения ран, язв, эрозий, ожогов, обморожений, рубцов, а также инфекций, вызываемых грамположительными и грамотрицательными бактериями (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp.), патогенными грибами рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобными грибами рода Candida (в т.ч. полирезистентные штаммы), а также Actinomycetes и некоторыми патогенными простейшими (Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis).

Известны лекарственные и косметические средства для местного применения, используемые для лечения и профилактики рубцов, язв и ран, содержащие ферменты, например мазь Ируксолфармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 , содержащий фермент: клостридиопептидазу А и антибиотик: хлорамфеникол, (http://www.rlsnet.ru/tn_index_id_1605.htm); порошок Карипазимфармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 , содержащий ферменты: папаин и лизоцим, для профилактики рубцов, (http://www.caripazymum.ru/instruction.html); гель Ферменкол, содержащий комплекс коллагенолитических протеаз (http://fermencol.ru/); бальзам Морикрол, содержащий фермент: морикразу (http://ekogoods.ru/catalog/11-balzam_%ABmorikroI%BB), крем Содермикс, содержащий фермент: суперроксиддисмутазу (http://sodermix.ru/).

Известны препараты, не содержащие ферментов, но используемые для лечения и профилактики язв и ран, например гель Контратубекс, включающий гепарин, экстракт репчатого лука и аллантоин (http://contractubex.ru/about/activejngredients/), крем Келофибраза, содержащий комбинацию гепарина, камфоры и мочевины (http://apteka-evrofarm.com/kelofibraze_kelofibrase_krem_50_g_review_6/), силиконовое покрытие Zeraderm, состоящее из полисилоксана, оксида цинка, витаминов Е и К, коэнзима Q (http://zeraderm.su/), силиконовые гели Scan-fade, Kelo-Cote, Dermatix (http://www.dermatix-gel.ru/pages/informaciya_dlya_specialistov.html; http://www.kelo-cote.ru/kelo/harakteristiki_kelo-cote.php; http://www.scarfade.com/), масло Камелокс с витамином Е, маслом зародышей пшеницы и эфирным маслом розмарина (http://vertex.spb.ru/catalog/37/19/kameloks_maslo_s_witaminom_ej_rozmarinom.html).

Известен комбинированный препарат Гексализ, содержащий в качестве противомикробных компонентов - биклотимол и лизоцим, эноксолон, выделенный из глицирризиновой кислоты в качестве противовоспалительного компонента. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/hexalyse~22640.htm)

Известна зубная паста «ОРВИ-про», содержащая экстракты цетрариии и маклеи и обладающая противомикробным действием. (http://audrie.ru/audrie/audrie_catalog/audrie_dentifrice/35-zubnaya-pasta-orvi-pro.html)

Известен препарат «Сангвиритрин», выпускаемый в виде таблеток, раствора и линимента, используемый при гнойно-воспалительных заболеваниях. (http://medi.ru/doc/g3418.htm)

Известны препараты «Коллагеназа КК» и «Коллализин», для ферментного очищения ран различной этиологии, трофических язв, ускоренного отторжения некротизированных тканей и струпа после ожогов и отморожений, при Рубцовых изменениях кожи век и конъюнктивы, симблефароне. (http://www.rlsnet.ru/tn_index_id_5958.htm; www.rlsnet.ru/tn_index_id_5958.htm)

Известен фармацевтический препарат «Рибонуклеаза», выпускаемый в виде лиофилизированного порошка в герметично укупоренных флаконах по 0,01 г. Этот препарат назначают при заболеваниях дыхательных путей с трудно отделяемой мокротой, пародонтозе, гингивите, гнойных ранах, трофических язвах, клещевом энцефалите, тромбофлебите, при местном применении присыпают раневую поверхность в количестве 0,025-0,05 г. (Справочник "Лекарственные средства" под редакцией М.А. Клюева, 2001 г.).

Фармацевтические композиции, содержащие ферменты: коллагеназу и лизоцим и/или сангвиритрин, используемые для лечения ран, язв, эрозий, ожогов, обморожений, рубцов, а также инфекций, вызываемых грамположительными и грамотрицательными бактериями (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp.), патогенными грибами рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобными грибами рода Candida (в т.ч. полирезистентные штаммы), а также Actinomycetes и некоторыми патогенными простейшими (Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis) не описаны.

Таким образом, задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить фармацевтическую композицию, содержащую ферменты: коллагеназу и лизоцим и/или сангвиритрин, которая может быть использована в медицине для лечения ран, язв, эрозий, ожогов, обморожений, рубцов, а также инфекций, вызываемых грамположительными и грамотрицательными бактериями (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp.), патогенными грибами рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобными грибами рода Candida (в т.ч. полирезистентные штаммы), а также Actinomycetes и некоторыми патогенными простейшими (Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis).

Согласно настоящему изобретению предложена композиция, содержащая в качестве активного ингредиента 0,001-5,0 мас.% коллагеназы, 0,001-5,0 мас.% лизоцима и/или 0,001-5,0 мас.% сангвиритрина и приемлемые носители и эксципиенты.

В качестве предпочтительного воплощения заявленного изобретения предложена композиция, указанная выше, дополнительно содержащая противомикробный и противовоспалительный ингредиент.

Наиболее предпочтительной является композиция, содержащая ферменты: коллагеназу и лизоцим и сангвиритрин в качестве активного ингредиента и приемлемые носители и эксципиенты, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Коллагеназа0,001-5,0
Лизоцим0,001-5,0
Сангвиритрин 0,001-5,0
Пероксидаза или хлоргексидин 0,001-5,0
Глицирризинат аммония0,001-5,0
носитель0,05-1,0
регулятор pH0,05-1,0
вода деминерализованная1,00-5,00
гидрофильной основы 73,00-98,085

Активными ингредиентами заявленной фармацевтической композиции являются ферменты: коллагеназа, лизоцим, пероксидаза, сангвиритрин, хлоргексидин, глицирризинат аммония. Коллагеназа - ферментный препарат, получаемый из поджелудочной железы убойного скота, представляющий собой, белую или белую с желтоватым оттенком пористую массу, легко растворимую в воде и изотоническом растворе натрия хлорида. Растворы хранят при температуре от О до +8'C не более суток; при нагревании инактивируется. Активность препарата выражается в единицах действия (ЕД). В 1 г препарата должно содержаться не менее 500 ЕД. Коллагеназа обладает протеолитической активностью; влияя преимущественно на коллагеновые волокна, способствует расплавлению струпов и некротических тканей. Применяют для ускорения отторжения струпов и некротизированных тканей после ожогов и отморожений; при трофических язвах для очищения от гнойно-некротических налетов. Назначают местно. Раствор готовят непосредственно перед применением, добавляя во флакон с препаратом стерильный изотонический раствор натрия хлорида или раствор новокаина. Раствором смачивают марлевые салфетки. На пораженную поверхность поверх салфетки, смоченной раствором, накладывают клеенку или вощаную бумагу и повязку. Перевязки делают через 1-2 дня. При наличии больших плотных струпов на них, перед наложением препарата, производят насечки. Форма выпуска: в герметически укупоренных флаконах по 65 или 1625 ЕД препарата, (http://dic.academic.ru/dic.nsf/meditem/912). Глицирризинат аммония (соль глицирризиновой кислоты) используется как противовирусное средство для наружного и местного применения. Глицирризиновая кислота активна в отношении ДНК- и РНК-содержащих вирусов, включая различные штаммы вирусов Herpes simplex, Varicella zoster, вирусов папилломы человека, цитомегаловирусов. Противовирусное действие связано, по-видимому, с индукцией образования интерферона. Прерывает репликацию вирусов на ранних стадиях, вызывает выход вириона из капсида, тем самым не допуская его проникновение в клетки. Это обусловлено селективным дозозависимым ингибированием фосфорилирующей киназы Р. Взаимодействует со структурами вируса, изменяя различные фазы вирусного цикла, что сопровождается необратимой инактивацией вирусных частиц (находящихся в свободном состоянии вне клеток), блокированием внедрения активных вирусных частиц через клеточную мембрану внутрь клетки, а также нарушением способности вирусов к синтезу новых структурных компонентов. Ингибирует вирусы в концентрациях, нетоксичных для нормально функционирующих клеток. Штаммы вирусов, резистентные к ацикловиру и йодоуридину, высокочувствительны к глицирризиновой кислоте. Оказывает также противовоспалительное, анальгезирующее и улучшающее регенерацию тканей действие, как при ранних проявлениях вирусной инфекции, так и при язвенных формах. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/act_1347.htm).

Сангвиритрин® обладает широким спектром противомикробной активности, действуя на грамположительные и грамотрицательные бактерии (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp.), патогенные грибы рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобные грибы рода Candida (в т.ч. полирезистентные штаммы), а также Actinomycetes и некоторые патогенные простейшие (Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis). В основе механизма противомикробного действия сангвиритрина лежит подавление бактериальной нуклеазы, нарушение процессов проницаемости клеточных стенок, перегородок деления, строения нуклеоида. http://www.vidal.ru/poisk preparatov/sanguiritrin~21839.htm)

Лизоцим (от греч. lysis - растворение, распад и zyme - закваска), мурамидаза, фермент класса гидролаз; разрушает стенку бактериальной клетки, в результате чего происходит ее растворение (лизис). В организме играет роль неспецифического антибактериального барьера, особенно в местах контакта с внешней средой (слезы, слюна, слизистая оболочка носа). Лизоцим открыт в 1922 А. Флемингом в слизи из полости носа и затем обнаружен во многих тканях и жидкостях человеческого организма (хрящи, селезенка, лейкоциты, слезы), в растениях (капуста, репа, редька, хрен), в некоторых бактериях и фагах и, в наибольшем количестве, в яичном белке. Лизоцимы из разных источников различаются по строению, но близки по действию. Лизоцим яичного белка - первый фермент, для которого методом рентгеноструктурного анализа установлена трехмерная структура и выявлена связь между строением и механизмом действия (1965); эти исследования - существенный вклад в представления о механизмах ферментативного катализа в целом.

Лизоцим - белок с молекулярной массой около 14000; единственная полипептидная цепь состоит из 129 аминокислотных остатков и свернута в компактную глобулу (30'30'45Å). Трехмерная конформация полипептидной цепи поддерживается 4 дисульфидными (-S-S-) связями. (В лизоциме молока человека их 3, яичного белка гуся - 2, в лизоциме фага Т4 их нет; чем больше дисульфидных групп, тем лизоцим более устойчив, но менее активен.) Глобула лизоцима состоит из двух частей, разделенных щелью; в одной части большинство аминокислот (лейцин, изолейцин, триптофан и др.) содержит гидрофобные группы, в др. преобладают аминокислоты (лизин, аргинин, аспарагиновая к-та и др.) с полярными группами. Полярность окружения влияет на ионизацию двух карбоксильных групп (-COOH), расположенных на поверхности щели молекулы с разных ее сторон. Лизоцим действует на один из основных компонентов бактериальной стенки - сложный полисахарид, состоящий из двух типов аминосахаров. Полисахарид сорбируется на молекуле лизоцима в щели на границе гидрофобной и гидрофильной ее частей таким образом, что с ферментом связывается 6 колец аминосахаров, а одна из соединяющих их гликозидных связей (между 4 и 5 кольцами) оказывается между карбоксилами. Благодаря взаимодействиям между карбоксилами лизоцима и атомами, образующими гликозидную связь, а также искажению валентных углов субстрата, происходит активация и разрыв связи. Это ведет к разрушению оболочки бактериальной клетки. (Филлипс Д., Трехмерная структура молекулы фермента, в сборнике: Молекулы и клетки, пер. с англ., в. 3, М., 1968; Химия белка, М., 1969; Бернхард С., Структура и функция ферментов, пер. с англ., М., 1971)

Хлоргексидин - антисептическое и дезинфицирующее средство. В зависимости от используемой концентрации проявляет как бактериостатическое, так и бактерицидное действие. Бактериологическое действие как водных, так и спиртовых рабочих растворов) проявляется в концентрации 0,01% и менее; бактерицидное - в концентрации более 0,01% при температуре 22°C и воздействии в течение 1 мин. Фунгицидное действие - и при концентрации 0,05%, при температуре 22°C и воздействии 10 мин. Вирулицидное действие - проявляется при концентрации 0,01-1%. Эффективен в отношении возбудителей инфекций, передаваемых половым путем - гарднерелез, генитальный герпес; грамположительных и грамотрицательных бактерий-Treponema spp., Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas spp., Chlamidia spp., Ureaplasma spp. He действует на кислотоустойчивые формы бактерий, микробные споры, грибы. Стабилен, после обработки кожи (рук, операционного поля) сохраняется на ней в некотором количестве, достаточном для проявления бактерицидного эффекта. Сохраняет активность (хотя несколько сниженную) в присутствии крови, гноя, различных секретов и органических веществ.

Пероксидаза - фермент, присутствующий в растениях, в лейкоцитах крови и в молоке и катализирующий дегидрогенизацию (окисление) различных веществ в присутствии перекиси водорода, которая действует как акцептор водорода и превращается в воду в ходе данной химической реакции. Является важным компонентом антиоксидантной защиты клеток, способствуя утилизации перекисных соединений и оказывая противовоспалительное действие.

Таким образом, осуществляется комплексная некротомия и противорубцовое действие: гидролиз дефектного коллагена, подавление патогенной микрофлоры и воспаления в области поражения и ускорение эпителизации.

Для приготовления композиции используют: лекарственный ферментные субстанции: «Коллагеназа», «Лизоцим», «Пероксидаза», а также «Сангвиритрин». Колагеназа получена из поджелудочной железы крупного рогатого скота либо из гепатопанкреаса камчатского краба путем экстракции из измельченного сырья с последующей очисткой и лиофильной сушкой. Лиофильно высушенный порошок «Коллагеназа» используется для ускорения отторжения струпов и некротизированных тканей после ожогов и отморожений; притрофических язвах для очищения от гнойно-некротических налетов. Субстанция «Лизоцим» получена экстракцией из корневищ хрена или яичного белка, с последующей лиофильной сушкой. Субстанция «Пероксидаза» получена экстракцией из корневищ хрена, редьки с последующей лиофильной сушкой. Субстанция «Сангвиритрин» получена экстракцией из растения рода Маклея со стандартизованным содержанием алкалоидов: сангвинарина и хелеритрина.

Коллагеназа в форме указанного препарата оказывает только поверхностное действие вследствие его затрудненного всасывания через неповрежденную кожу и низкого уровня потребительских свойств, а также отсутствия стабильности при содержании влаги свыше 3% и в растворе, с потерей активности фермента в течение суток.

Неожиданно обнаружено, коллагеназа, пероксидаза, лизоцим и липосомы или бета-циклодекстрин могут быть включены в состав стабильной композиции с сохранением активности указанного фермента в течение длительного времени, несмотря на то, что такая композиция содержит значительное количество воды (до 5%).

В качестве носителей биологически активных веществ через кожу в медицине используются липосомы. Липосомы (греч. lipos жир+soma тело) искусственно создаваемые замкнутые везикулы, состоящие из одной (моноламеллярные) или многих (мультиламеллярные) липидных бимолекулярных мембран. Липосомы обычно получают из фосфолипидов, молекулы которых в водной среде самопроизвольно образуют замкнутые структуры. Лецитины (синоним: фосфатидилхолины, холин-фосфатиды) сложные эфиры аминоспирта холина и диглицеридфосфорных (фосфатидных) кислот, являются важнейшими представителями фосфолипидов. (см. Интернет www.dic.academic.ru).

Липосомы представляют собой наночастицы шаровидной формы, ограниченные билипидной мембраной, в полости которой находится водная среда. Активное вещество может располагаться в ядре липосомы (водорастворимые вещества) либо в ее липидной оболочке (жирорастворимые вещества). Обычно липосомы классифицируют на три группы: однослойные малые, однослойные большие и многослойные. Кроме того, в зависимости от состава и пути попадания в клетку липосомы могут быть разделены на пять классов: 1) стандартные липосомы, 2) липосомы, чувствительные к pH, 3) катионные липосомы, 4) липосомы с иммунными свойствами, 5) длительно циркулирующие липосомы. (http://prostonauka.com/nano/nanotehnologii-v-bioloaii-i-medicine/nanomaterialv/nanochasticv/liposomy)

Композицию по настоящему изобретению обычно изготавливают общепринятыми способами, используя твердые или жидкие приемлемые носители или эксципиенты, выбранные из эмульгаторов, диспергирующих агентов, консервантов, ароматизаторов, регуляторов pH, полимерных носителей и других эксципиентов, которые целесообразны для приготовления композиций для местного применения. Композиция по настоящему изобретению может быть приготовлена в форме глазных капель, суппозиториев, геля, крема, пасты, мази и тому подобного.

Дополнительными преимуществами указанной композиции являются повышенная стабильность, глубокое проникновение в область пораженного участка кожи, потенцированное комплексное противомикробное и противорубцовое действие, удобство применения, а также легкость дозирования.

Заявленная композиция обладает стабильностью в отношении активности ферментов, входящих в ее состав, при длительном хранении, которая достигается путем иммобилизации ферментов на носителях, содержащихся в указанной композиции. В качестве указанных носителей могут быть использованы любые лецитины, циклодекстрины и полимеры, способные связываться с ферментами с образованием комплексов фермент-носитель. Примерами таких полимерных носителей являются камеди, поливинилпирролидон, каррагинаны, натрия альгинат, полиэтиленгликолевый эфир хитозана, натрий карбоксиметилцеллюлоза, полиакрилат, циклодекстрины, лецитины.

Активность заявленной композиции обусловлена активностью входящего в ее состав коллагеназы и лизоцима и/или сангвиритрина, а также дополнительным противомикробным компонентом: пероксидазой или хлоргексидином и противовоспалительным компонентом: глицирризинатом аммония. Обнаружено, что композиция, содержащая в качестве активного ингредиента 0,001-5,0 мас.% коллагеназы, 0,001-5,0 мас.% лизоцима и 0,001-5,0 мас.% сангвиритрина и приемлемые носители и эксципиенты, обладает стабильностью в отношении активности фермента при ее длительном хранении, в то время как активность этого фермента, приготовленных в виде раствора, быстро падает. Сангвиритрин, хлоргексидин и глицирризинат аммония является устойчивыми соединениями и стабилизации не требуют. Следовательно, заявленная композиция может быть использована для эффективной профилактики рубцов, осложненных вторичной инфекцией.

Настоящее изобретение иллюстрируется следующими примерами.

ПРИМЕР 1

Композиция в виде геля на основе коллагеназы, лизоцима, сангвиритрина и глицирризината аммония имеет следующий состав:

Коллагеназа0,001
Лизоцим0,001
Сангвиритрин 0,001
Пероксидаза 0,001
Глицирризинат аммония 0,001
фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрин0,05
регулятор pH0,05
вода деминерализованная 1,00
гидрофильная основа 98,085

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют коллагеназу, лизоцим, пероксидазу, фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрин, глицирризинат аммония, добавляют регулятор pH, сангвиритрин и гидрофильную основу. Полученный гель перемешивают, вакуумируют и гомогенизируют.

ПРИМЕР 2

Композиция в виде геля на основе коллагеназы, лизоцима, сангвиритрина и глицирризината аммония имеет следующий состав:

Коллагеназа5,0
Лизоцим5,0
Сангвиритрин5,0
Хлоргексидин 5,0
Глицирризинат аммония 5,0
Липосомы 0,05
регулятор pH 0,05
вода деминерализованная 5,00
гидрофильная основа73,00

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют коллагеназу, лизоцим, липосомы, хлоргексидин, глицирризинат аммония, добавляют регулятор pH, сангвиритрин и гидрофильную основу. Полученный гель перемешивают, вакуумируют и гомогенизируют.

ПРИМЕР 3

Композиция в виде крема на основе коллагеназы и лизоцима имеет следующий состав:

Коллагеназа5,0
Сангвиритрин 5,0
Пероксидаза 5,0
Глицирризинат аммония 5,0
Липосомы 1,0
регулятор pH 0,05
вода деминерализованная 5,00
гидрофильная основа77,05

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют коллагеназу, сангвиритрин, пероксидазу, липосомы, глицирризинат аммония, добавляют регулятор pH и гидрофильную основу. Полученный крем перемешивают, вакуумируют и гомогенизируют.

ПРИМЕР 4

Композиция в виде крема на основе коллагеназы и лизоцима имеет следующий состав:

Коллагеназа5,0
Лизоцим5,0
Пероксидаза5,0
Глицирризинат аммония 5,0
фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрин1,0
регулятор pH0,05
вода деминерализованная5,00
гидрофильная основа77,05

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют коллагеназу, лизоцим, пероксидазу, фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрин, глицирризинат аммония, добавляют регулятор pH и гидрофильную основу. Полученный крем перемешивают, вакуумируют и гомогенизируют.

ПРИМЕР 5

Композиция в виде геля на основе коллагеназы, лизоцима, сангвиритрина и глицирризината аммония имеет следующий состав:

Коллагеназа0,002
Лизоцим0,001
Сангвиритрин 0,001
Глицирризинат аммония 0,001
фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрин0,05
регулятор pH0,05
вода деминерализованная 1,00
гидрофильная основа 98,085

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют коллагеназу, лизоцим, фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрин, глицирризинат аммония, добавляют регулятор pH, сангвиритрин и гидрофильную основу. Полученный гель перемешивают, вакуумируют и гомогенизируют.

ПРИМЕР 6

Композиция в виде геля на основе коллагеназы, лизоцима, сангвиритрина и глицирризината аммония имеет следующий состав:

Коллагеназа5,0
Лизоцим5,0
Сангвиритрин5,0
Глицирризинат аммония 5,0
Липосомы 0,05
регулятор pH 0,05
вода деминерализованная 5,00
гидрофильная основа78,00

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют коллагеназу, лизоцим, липосомы, глицирризинат аммония, добавляют регулятор pH, сангвиритрин и гидрофильную основу. Полученный гель перемешивают, вакуумируют и гомогенизируют.

ПРИМЕР 7

Оценка стабильности фермента.

Поскольку главными недостатками ферментов является их нестабильность в присутствии воды от 3%, была проведена сравнительная оценка сохранения активности ферментов при хранении в виде раствора и в виде композиции для местного применения (на примере геля).

Активность коллагеназы определяли по следующей методике. Для определения протеолитической активности коллагеназы использовали модифицированный метод Кунитца. За одну коллагенолитическую единицу принимают такое количество фермента, при воздействии которого на субстрат коллаген в течение 10 минут в стандартных условиях освобождается такое количество продуктов гидролиза, которое приводит к возрастанию оптической плотности при длине волны 280 нм на одну единицу.

Для количественного определения коллагеназы использовали метод Лоури. Метод определения основан на том, что белки с солями меди в щелочной среде восстанавливают реактив Фоллина. Готовили раствор красителя Кумасси G-250 следующим образом: 100 мг красителя растворяли в 100 мл ортофосфорной кислоты, разводили водой в 5 раз, затем фильтровали через плотный бумажный фильтр. Для определения концентрации в пробе добавляли равный объем красителя, перемешивали и измеряли оптическую плотность раствора при длине волны 595 нм.

Активность пероксидазы определяли при 220С по начальной скорости окисления о-дианизидина или аскорбиновой кислоты перекисью водорода. К 2.0 мл 0.1 М натрий-фосфатного буфера (pH 7.0), добавляли 0.2 мл раствора супернатанта и 0.1 мл 0.43 мМ раствора о-дианизидина в 96%-ном этаноле или 0.1 мл 5.5 мМ раствора аскорбиновой кислоты. Реакцию инициировали введением 0.1 мл 16 мМ перекиси водорода. Окисление о-дианизидина регистировали по увеличению поглощения при 460 нм, фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 =30 мМ-1 см-1, а аскорбиновой кислоты по уменьшению поглощения при 265 нм, фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 =7000 М-1 см-1 (Досон и др., 1991). За единицу активности фермента принимали количество о-дианизидина или аскорбиновой кислоты (мкмоль), окисленных за 1 мин 1 г сухой массы.

Определение активности лизоцима проводили по методу Бухарина О.В., основанного основанной на измерении величины оптической плотности при добавлении фермента к бактериальной суспензии. В опытную пробирку наливают 0,4 мл фосфатного буфера (pH 6,2) и 0,1 мл исследуемого раствора и 2 мл стандартизированной взвеси микрококка. Смесь инкубируют 30 минут при 37°, после чего измеряют ее оптическую плотность на ФЭК-М при А=540 нм.

За единицу активности лизоцима принимают наименьшее количество фермента, которое при воздействии его на субстрат в условиях опыта лизирует такое количество культуры суспензии Mycrococcus lysodeikticus, которое приводит к возрастанию оптической плотности при длине волны 540 нм на одну единицу.

Результаты приведены в следующей таблице.

Таблица 1
Исследуемые образцыОсновные ингредиенты Стабильность при хранении
123
Гель № 1Согласно Примеру 1 Активность коллагеназы 90%; лизоцима - 85%, пероксидазы - 85% в течение 5 лет наблюдения
Гель № 5Согласно Примеру 5 Активность коллагеназы 90%; лизоцима-85% в течение 5 лет наблюдения
Раствор нативного фермента фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 Активность 5% для коллагеназы, лизоцима и пероксидазы в течение 1 суток

Как видно из представленной таблицы, использование полимерных носителей и стабилизаторов в композиции позволяет получить стабильные композиции с сохранением активности фермента, в течение 5-х лет наблюдения, благодаря созданию устойчивой конформации фермента фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрином, лецитином и полимером-носителем. Аналогичные данные получены при использовании композиций из ПРИМЕРОВ 2, 3, 4, 6.

ПРИМЕР 8

Оценка антимикробной активности композиции

Антимикробную активность композиции из ПРИМЕРА 1 определяли методом серийных разведении. В качестве тест-микроорганизмов - культуры: Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp., грибы рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes, простейшие: Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis. В каждую пробирку вносили односуточную культуру в количестве 1000 клеток/мл. Все культуры микроорганизмов, кроме Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes выращивали в пробирках на среде с мясопептонным бульоном при 37°C в течение суток, а культуры Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes на агаризированной среле Сабуро при 24°C двое суток. Титрование начинали с концентрации 10 мг/мл (с разведения 1/10). В качестве контроля использовали пробирку, в которую вносилась только питательная среда и микроорганизм. Концентрацию в последней пробирке с отсутствием роста принимали за минимальную ингибирующую концентрацию. Для оценки бактерицидного действия (минимальная подавляющая концентрация) из пробирок с отсутствием роста сделали пересев на чашки с мясопептонным бульоном. Чашки термостатировали при 37°C в течение суток. Бактерицидное действие отмечали в случае отсутствия роста на плотной питательной среде.

Таблица 2
Наименование культурыМИК (минимальная ингибируюшая концентрация) мг/млМПК (минимальная подавляющая концентрация) мг/мл
Staphylococcus spp.12,5 25
Streptococcus spp. 12,525
Enterococcus spp.12,5 25
Shigella spp. 12,525
Escherichia spp.12,5 25
Salmonella spp. 12,525
Proteus spp.12,5 25
Acinetobacter spp. 12,525
Citrobacter spp.12,5 25
Pseudomonas spp. 12,525
Serratia spp.12,5 25
Klebsiella spp. 12,525
Antracoides spp.12,5 25
Cryptococcus spp. 12,525
Microsporum25 50
Trichophyton 2550
Nocardia2550
Aspergillus 2550
Candida2550
Actinomycetes 2550
Entamoeba histolytica25 50
Trichomonas vaginalis 2550

Как видно из таблицы 2, минимальная ингибирующая концентрация составляет: для Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp.-12,5 мг/мл; для Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes, Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis - 25 мг/мл; минимальная подавляющая концентрация составляет: для Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp. - 25 мг/мл; для Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes, Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis - 50 мг/мл. Аналогичные результаты получены при определении антимикробной активности композиций из ПРИМЕРОВ 2-6.

ПРИМЕР 9

Оценка эффективности композиций при лечении ран. ожогов, обморожений

Больная С., 55 лет, обратилась по поводу ожогов кистей рук III степени. Из анамнеза известно, что 14 дней тому получила производственную травму. Пациентку беспокоят: боль, жжение в области поражения, обезображивание. Выполнено 15 сеансов аппликаций с композицией из ПРИМЕРА 1. В результате проведенного лечения наступило заживление пораженной области без образования рубцов, а также восстановление эстетичного вида рук пациентки.

Больная П., 21 год. Обратилась по поводу обморожения пальцев ног. Из жалоб отмечает снижение чувствительности и изменения цвета кожи ног. Выполнено 15 аппликаций с композицией из ПРИМЕРА 6. В результате проведенного в течение 2-х недель лечения, кожа на пальцах ног полностью восстановилась.

Пациетка М., 43 года, обратилась по поводу длительно незаживающей раны на передней поверхности грудной клетки слева. 2 месяца тому назад была выполнена операция - удаление молочной железы по Холстеду. Впоследствии произошел краевой некроз кожного лоскута. При местном лечении использовали мази «Левомеколь» и препарат «Актовегин». При осмотре: гранулирующая рана продолговатой формы размером 5,5х8 см. Дно раны выполнено бледно-розовыми грануляциями, покрытиями налетом фибрина. Краевая эпителизация вялая. На раневые поверхности в течение недели накладывали повязки с композицией из ПРИМЕРА 3. Заживление раны завершилось к исходу 10-х суток.

ПРИМЕР 10

Оценка эффективности композиций при лечении язв. эрозий и рубцов

Клинические испытания предлагаемой композиции из ПРИМЕРА 6 проводили в течение одного месяца на 30 добровольцах в возрасте 25-50 лет, имеющих в анамнезе такие заболевания как язвенный гингивита, эрозия слизистой полости рта, рубцы, возникшие после флегмоны челюстно-лицевой области.

Для определения противовоспалительных свойств предлагаемой композиции всем пробантам дважды в день в течение одного месяца проводили аппликации композиции из ПРИМЕРА 6 в области поражения.

Противовоспалительное действие пасты оценивалось по изменению состояния прикрепленной к зубам десны с помощью индекса РМА по формуле:

Индекс РМА=[Сумма показателей/(3×число зубов)]×100, где

P - воспаление десневого сосочка, которое оценивается в 1 балл;

M - воспаление десневого края, которое оценивается в 2 балла;

A - воспаление прикрепленной десны альвеолярного отростка, которое оценивается в 3 балла.

Оценка противовоспалительного действия композиции из ПРИМЕРА 6 проводилась на основании анализа динамики индекса РМА, который определяли при повторных осмотрах на 1-й, 7-й, 14-й, 21-й и 28-й дни. Противовоспалительная эффективность рассчитывалась по формуле:

Противовоспалительная эффективность=[(PMA1-РМАх)/PMA1 ]×100, где

PMA1 - показатель индекса РМА полученный при первичном осмотре в 1-й день исследования;

PMAx - показатель индекса РМА полученный при последующем осмотре (7, 14, 21 и 28 дни).

Данные приведены в табл.3 и 4. Из них наглядно видно, что после использования композиции из ПРИМЕРА 6 состояние тканей пародонта значительно улучшалось: у 100% пробантов исчезали явления гингивита, эрозии. Также у лиц, имеющих рубцы, изменялась их плотность и снижалась интенсивность окраски, а индекс РМА снижался с 49,3 до 6,1, что соответствовало 87,62% противовоспалительной эффективности композиции из ПРИМЕРА 6.

Табл.3
Индекс РМА1-й день 7-й день14-й день 21-й день28-й день
49,3%27,5%15,3% 10,05%6,1%

Табл.4
Противовоспалительная эффективность7-й день14-й день 21-й день28-й день
44,21%68,96%79,61% 87,62%

Аналогичные данные получены при исследовании композиций из ПРИМЕРОВ 1-5.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Композиция для лечения ран, язв, эрозий, ожогов, обморожений, рубцов,

а также инфекций, вызываемых грамположительными и грамотрицательными бактериями (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp.), патогенными грибами рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобными грибами рода Candida (в т.ч. полирезистентные штаммы), а также Actinomycetes и некоторыми патогенными простейшими (Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis), содержащая в качестве активного ингредиента 0,001-5,0 мас.% коллагеназы, 0,001-5,0 мас.% лизоцима и/или 0,001-5,0 мас.% сангвиритрина, в качестве носителя 0,05-1,0 мас.% фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрина или липосом и приемлемые эксципиенты.

2. Композиция по п.1, содержащая дополнительно в качестве активного ингредиента 0,001-5,0 мас.% пероксидазы или хлоргексидина, 0,001-5,0 мас.% глицирризината аммония при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Коллагеназа0,001-5,0
Лизоцим0,001-5,0
Сангвиритрин 0,001-5,0
Пероксидаза или хлоргексидин 0,001-5,0
Глицирризинат аммония0,001-5,0
фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу   и лизоцим и/или сангвиритрин, патент № 2504396 -циклодекстрина или липосомы0,05-1,0
Регулятор pH 0,05-1,0
Вода деминерализованная 1,00-5,00
Гидрофильная основа73,00-98,085


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2504396

patent-2504396.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K38/43 энзимы; проэнзимы; их производные

Патенты РФ в классе A61K38/43:
терапевтическое средство для лечения заболевания нижних мочевых путей и средство для улучшения симптома нижних мочевых путей -  патент 2527679 (10.09.2014)
способ лечения больных туберкулезом легких с сопутствующими неспецифическими бронхитами -  патент 2526121 (20.08.2014)
способ консервации трутневого гомогената медоносных пчел -  патент 2523885 (27.07.2014)
биодеградируемое гемостатическое лекарственное средство для остановки капиллярных и паренхиматозных кровотечений -  патент 2522879 (20.07.2014)
способ лечения больных деструктивными формами туберкулеза легких -  патент 2521197 (27.06.2014)
водорастворимый молекулярный комплекс включения восстановленной формы коэнзима q10 в -циклодекстрине и способ его препаративного получения -  патент 2509760 (20.03.2014)
фармацевтическая композиция для местного применения при лечении воспалительных заболеваний глаз и способ ее использования -  патент 2508123 (27.02.2014)
фармацевтическая композиция, содержащая фермент дезоксирибонуклеазу и/или рибонуклеазу и липосомы, для местного применения -  патент 2504361 (20.01.2014)
способ определения прогрессии рака органов брюшной полости -  патент 2503409 (10.01.2014)
композиция, содержащая фермент рибонуклеазу и/или стеарилглицирретинат или глицирризиновую кислоту или ее соли - глицирризинат аммония, или дикалия, или тринатрия -  патент 2501560 (20.12.2013)

Класс A61K38/44 оксидоредуктазы (1)

Патенты РФ в классе A61K38/44:
способ лечения рака толстой кишки -  патент 2529831 (27.09.2014)
композиции для усиления антибактериальной активности миелопероксидазы и способы их применения -  патент 2529799 (27.09.2014)
лечение инфекции поверхности тела человека или животного -  патент 2527341 (27.08.2014)
фармацевтическая композиция для местного применения при лечении воспалительных заболеваний глаз и способ ее использования -  патент 2508123 (27.02.2014)
антибактериальный вспомогательный агент, содержащий экстракт комбу в качестве активного ингредиента, антибактериальная композиция и пищевой продукт или напиток -  патент 2500414 (10.12.2013)
фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: лизоцим, пероксидазу, повиаргол и липосомы, для местного применения -  патент 2481101 (10.05.2013)
применение s-аденозилметионина (sam) и супероксиддисмутазы (sod) для изготовления лекарственных средств для лечения болезни альцгеймера -  патент 2472513 (20.01.2013)
способ получения препарата, усиливающего метаболизм алкоголя и продуктов его окисления -  патент 2456017 (20.07.2012)
конъюгаты уратоксидазы, фармацевтическая композиция для снижения уровней мочевой кислоты и способ получения вышеупомянутых конъюгатов -  патент 2443426 (27.02.2012)
способ местного лечения отморожений в дореактивном и раннем реактивном периодах травмы -  патент 2397779 (27.08.2010)

Класс A61K31/155  амидины , например гуанидин (H2N-C(=NH)-NH2), изомочевина (HN=C(OH)-NH2), изотиомочевина (HN=С(SH)-NH2)

Патенты РФ в классе A61K31/155:
способ выбора лечения акне у женщин -  патент 2529789 (27.09.2014)
способ комплексного лечения артериальной гипертонии при метаболических нарушениях -  патент 2525593 (20.08.2014)
желчные кислоты и бигуаниды как ингибиторы протеаз для сохранения целостности пептидов в пищеварительном канале -  патент 2525290 (10.08.2014)
средство для профилактики мастита -  патент 2524622 (27.07.2014)
лекарственное средство, включающее совместное применение или комбинацию ингибитора dpp-iv и другого лекарственного средства для лечения диабета -  патент 2523552 (20.07.2014)
средство для профилактики мастита у дойных коров в сухостойный период -  патент 2521401 (27.06.2014)
кристаллические соли ситаглиптина -  патент 2519717 (20.06.2014)
местное гемостатическое средство -  патент 2519220 (10.06.2014)
способ лечения поверхностных термических ожогов -  патент 2519102 (10.06.2014)
антисептическое средство с гемостатическим действием и способ его получения -  патент 2508104 (27.02.2014)

Класс A61K31/7012  соединения, содержащие свободную или этерифицированную карбоксильную группу, присоединенную непосредственно или через углеродную цепь к атому углерода сахаридного радикала, например глюкуроновая кислота, нейраминовая кислота

Патенты РФ в классе A61K31/7012:
офтальмологический ирригационный раствор -  патент 2529787 (27.09.2014)
сиаловая кислота для поддержки иммунной системы в пожилом возрасте -  патент 2506087 (10.02.2014)
профилактика и лечение вторичных инфекций после вирусной инфекции -  патент 2481844 (20.05.2013)
композиция для лечения хронических дегенеративных воспалительных заболеваний -  патент 2445114 (20.03.2012)
набор поливитаминов для женщин -  патент 2443422 (27.02.2012)
способ лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний опорно-двигательного аппарата и посттравматических болевых синдромов -  патент 2433844 (20.11.2011)
способ профилактики спаечного процесса в полости брюшины при акушерско-гинекологических операциях -  патент 2386441 (20.04.2010)
способ лечения глубокого ожога кожи -  патент 2372922 (20.11.2009)
способ лечения возрастных и косметических дефектов кожи лица -  патент 2352329 (20.04.2009)
лекарственное средство с гиполипидемическим эффектом "симваглизин" -  патент 2308947 (27.10.2007)

Класс A61P17/02 для обработки ран, язв, ожогов, шрамов, келоидов или подобных заболеваний

Патенты РФ в классе A61P17/02:
способ лечения трофических язв -  патент 2528973 (20.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
ранозаживляющее средство на основе штамма trichoderma harzianum rifai -  патент 2528065 (10.09.2014)
лечение инфекции поверхности тела человека или животного -  патент 2527341 (27.08.2014)
мазь доктора рустамова -  патент 2527335 (27.08.2014)
концентрированная гидрогелевая микрокапсульная композиция и перевязочное средство из нее -  патент 2527331 (27.08.2014)
композиция для парентерального введения, способ получения и применение композиции -  патент 2526826 (27.08.2014)
способ восстановления кожного покрова у пациентов с обширными ранами с дефектом мягких тканей (варианты) -  патент 2526814 (27.08.2014)
комбинированный трансплантат дермального матрикса с мезенхимальными мультипотентными стромальными клетками, способ его получения и способ лечения ран с его использованием -  патент 2526813 (27.08.2014)
способ местного лечения ран с помощью биологической повязки, содержащей живые клетки линии диплоидных фибробластов человека -  патент 2526811 (27.08.2014)

Класс A61P31/00 Противоинфекционные средства, те антибиотики, антисептики, химиотерапевтические средства

Патенты РФ в классе A61P31/00:
способ получения алкилбензилдиметиламмонийфторидов, обладающих противовирусным и антибактериальным действием -  патент 2529790 (27.09.2014)
5-метил-6-нитро-7-оксо-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-альфа]пиримидинид l-аргининия моногидрат -  патент 2529487 (27.09.2014)
способ комплексного лечения коров при послеродовом эндометрите -  патент 2528916 (20.09.2014)
способ лечения ран мягких тканей различной этиологии -  патент 2528905 (20.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
диариловые эфиры -  патент 2528231 (10.09.2014)
вакцины на основе солюбилизированных и комбинированных капсулярных полисахаридов -  патент 2528066 (10.09.2014)
штамм бактерий serratia species, являющийся продуцентом внеклеточной рибонуклеазы и дезоксирибонуклеазы, обладающих противовирусной активностью -  патент 2528064 (10.09.2014)
модуляторы транспортеров атф-связывающей кассеты -  патент 2528046 (10.09.2014)
использование альгинатных олигомеров в борьбе с биопленками -  патент 2527894 (10.09.2014)


Наверх