ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения

Классы МПК:A61K39/385 гаптены или антигены, связанные с носителями
A61K9/42 содержащие воск, высшие жирные кислоты, высшие жирные спирты или их производные, например шоколад
A61K38/31 соматостатины
A61P15/08 для лечения расстройств половых желез или увеличения фертильности, например стимуляторы овуляции или сперматогенеза
Автор(ы):, , , ,
Патентообладатель(и):Юдин Сергей Михайлович (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2012-06-07
публикация патента:

Изобретение относится к биотехнологии, конкретно к использованию химерного соматостатинсодержащего белка для повышения воспроизводительных качеств самцов сельскохозяйственных животных и петухов, и может быть использовано в ветеринарии. Инъекционный препарат используют в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска, из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска. Инъекционный препарат применяют петухам или сельскохозяйственным животным по достижении физиологической зрелости из расчета 50-200 мкг белка на 1 кг живой массы тела. Изобретение позволяет повысить спермопродукцию: увеличить объем эякулята и снизить брак спермы по биологическим показателям у производителей сельскохозяйственных животных и петухов путем использования препарата для инъекций с низкой реактогенностью адъюванта. 2 н.п. ф-лы, 13 табл.

Область применения

Изобретение относится к ветеринарии, а конкретно к инъекционному препарату для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов и способу его применения. Изобретение предназначено для повышения репродуктивной способности производителей сельскохозяйственных животных и петухов с целью их более эффективного использования за счет повышения объема эякулята при значительном снижении брака спермы по биологическим показателям (подвижность сперматозоидов, количество живых сперматозоидов и их морфологическая полноценность), что в итоге повышает рентабельность искусственного осеменения животных.

Известный уровень

Современная ветеринарная наука решает проблему повышения репродуктивных способностей производителей сельскохозяйственных животных и птицы, применяя биологически активные препараты - витамины, макро-, микроэлементы, растительные препараты, а также используя физиологические методы - дозированный прямой контакт самцов-производителей с половозрелыми самками животных в состоянии охоты.

Химические препараты дорогостоящие и не всегда гарантируют положительный эффект. Из данных литературы известен стимулирующий и адаптогенный эффект экстрактов родиолы розовой. При скармливании хрякам-производителям в течение 60 дней препарата из высушенных корней родиолы розовой авторы (А.Г.Нарижный, А.Ч.Джамалдинов. Ветеринария, № 10, 2003) обнаружили повышение объема эякулята на 7,9-13,8% с сохранением на контрольном уровне концентрации сперматозоидов. По окончании подкормки биологические показатели спермы возвращались к первоначальному уровню.

Стимулирующим эффектом на спермопродукцию быков-производителей оказывает препарат на основе инактивированной биомассы галобактерий Halobacterium halobium, содержащий аминокислоты, липиды, водо- и жирорастворимые витамины (Г.В.Ескин, Н.А.Комбарова, Р.А.Корнилин. Проблемы биологии продуктивных животных № 4, 2011). При скармливании быкам-производителям препарата на основе галобактерий («Баксин-вет») авторы отмечали сокращение количества выбракованных эякулятов, улучшение качества нативного семени, повышение выживаемости криоконсервированной спермы после оттаивания в течение 5 часов вне организма при температуре 37°С. Эффект сохранялся в течение 30 суток после окончания скармливания препарата в последующем показатели спермопродукции возвращались на уровень предварительного периода.

В исследованиях С.Околышева, Н.Карпова, Р.Корнилина показано стимулирующее влияние препарата «Баксин-вет» на продуктивные характеристики хряков-производителей. Ежедневное применение хрякам-производителям препарата «Баксин-вет» в течение трех недель в дозе 5 и 10 мг на 1 кг живой массы при содержании хряков даже на хозяйственном рационе приводило к увеличению объема эякулята и количества сперматозоидов в сперме. (С.Околышев, Н.Карпова, Р.Корнилин. «Влияние препарата «Баксин-вет» на спермопродукцию хряков и многоплодие свиноматок в условиях интенсивного производства свинины». «Свиноводство» № 2, 2009).

В работе З.П.Комовой «Повышение воспроизводительной функции хряков с использованием биологически активных веществ» (диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук, ВНИИЖ, Дубровицы, 2001 г.) показано, что подкормка хряков-производителей биологически активными препаратами «СГОЛ» и «Стимульгин» оказывает положительное влияние на проявление рефлексов совокупления и эрекции у производителей, повышает объем эякулята и содержание спермиев в эякуляте.

В исследованиях С.А.Холева установлено положительное влияние селеносодержащего препарата «Деполен» для коррекции воспроизводительной функции быков-производителей («Применение селеносодержащего препарата «Деполен» для коррекции воспроизводительной функции быков-производителей», Воронеж, 2000).

В исследованиях, представленных в международной заявке WO 03/064619 (WO 03/064619 А2, МПК А61К 38/00, 20036), повышение сперматогенеза обеспечивается за счет активации фактора VEGF, индуцирующего увеличение васкуляризации ткани половых желез.

Иной метод увеличение спермопродукции производителей сельскохозяйственных животных и птицы основан на повышении концентрации в организме эндогенного соматотропина за счет индукции синтеза аутосоматостатиновых антител. Это приводит к снижению концентрации эндогенного соматостатина и повышению содержания соматотропина, что, в свою очередь, оказывает стимулирующее влияние на рост и пролиферацию клеток половых желез животных.

Соматостатин - биологически активный тетрадекапептид, вырабатывающийся в гипоталамусе и желудочно-кишечном тракте животных. Впервые биологическая активность вещества, впоследствии определенная как соматостатиновая, была обнаружена в 1968 году Крюликом. В последующем, из гипоталамуса животных было выделено вещество, представляющее собой низкомолекулярный пептид, обладающий способностью регулировать концентрацию гормона роста в организме животных.

Соматостатин-14 оказывает сильное ингибирующее действие на ряд гормонов (соматотропин, тиреотропный гормон (ТТГ), инсулин, глюкагон, гастрин, пепсин), инициирует угнетение секреции желудочных ферментов, поджелудочной железы, тонкого отдела кишечника, замедление моторики желудочно-кишечного тракта и эвакуации его содержимого.

Изучение аминокислотного состава соматостатина у различных представителей животного царства показало достаточную степень гомологии пептидов, синтезируемых живыми организмами, находящимися на различных ступенях эволюционного развития. Аминокислотная последовательность соматостатина-14 идентична у живых организмов - от рыб до млекопитающих.

Широкий спектр физиологического действия соматостатина-14 и отсутствие, в отличие от гормона роста, видовой специфичности для млекопитающих явились основанием для изучения возможности его использования с целью оптимизации выращивания и откорма, повышения молочной продуктивности животных.

В США, Канаде, Великобритании более тридцати лет назад были выполнены отдельные работы по активной иммунизации животных (крупный рогатый скот, овцы, свиньи) против соматостатина-14 (Spenser et al.). Авторы исследований отмечают, что по динамике увеличения массы тела в одинаковых условиях содержания иммунизированные животные превосходили контрольных особей на 20-30%, при этом в крови обнаруживалось повышенное содержание эндогенного соматотропного гормона. В процессе исследований было обнаружено сокращение сроков откорма, повышение надоев молока и, как следствие этого, снижение непроизводительных расходов на единицу получаемой животноводческой продукции. В дальнейшем были проведены эксперименты с разными видами животных. Изучали влияние пассивной и активной иммунизации на уровень гормонов, динамику увеличения массы тела животных и другие параметры. Введение антисоматостатиновой сыворотки крысам приводило к повышению концентрации эндогенного гормона роста, пассивная антисоматостатиновая иммунизация овец обусловливала увеличение времени нахождения пищи в желудочно-кишечном тракте, повышение активности желудочных ферментов. Активная иммунизация животных белками, полученными в результате химического связывания синтетического соматостатина с белками-носителями, приводила к повышению уровней концентрации гормона роста, инсулинового ростового фактора, гастрина и других функционально связанных с соматостатином биологически активных соединений. Результатом активной антисоматостатиновой иммунизации являлось увеличение массы тела животных на 8-17%.

Метод соматостатиновой иммунокоррекции лишен многих недостатков, возникающих при использовании анаболических гормонов или рекомбинантного соматотропина. Механизм действия основан на временном связывании эндогенного соматостатина-14 специфическими антителами и возрастании концентрации эндогенного соматотропного гормона в физиологических пределах. Однако широкое применение метода активной иммунизации животных против эндогенного соматостатина-14 длительное время было невозможно вследствие его высокой стоимости, поскольку основным путем получения пептида являлся химический синтез, что экономически не позволяло реализовать данный подход на практике. Поскольку небольшие размеры соматостатина-14 не позволяют его прямой микробный синтез с помощью технологии рекомбинантной ДНК, описано несколько способов его синтеза в форме химерных белков с последующим выделением целевого продукта, не давших удовлетворительных результатов. Основным недостатком упомянутых методов является крайне низкая иммуногенность полученных препаратов в отношении соматостатина, обусловленная его маскированием в молекуле химерного белка, вследствие чего данные методы получения химерных белков не нашли широкого практического использования (Itakura R. et al., 1977 Expression in E. Coli of a chemically synthesized gene of hormone somatostatin, Science, 1986, 1056-1063; Шишкина А.А. и др. Синтез фрагмента генов соматостатина. Химия природных соединений, 1988, № 6, с.614-615).

Известен способ конструирования химерных соматостатинсодержащих белков с применением аминокислотного спейсера, содержащего аргинин и пролин, обусловливающего локализацию соматостатина на поверхности белка-носителя и, тем самым, высокую иммуногенность препарата (RU 2031121 С1, МПК C12N 15/12, 1995). Конструкция состоит из водонерастворимого белка-носителя (фрагмента бактериальной хлорамфениколацетилтрансферазы без 10 С-концевых аминокислот), тетрамерного спейсера и С-концевого соматостатина-14. Молекулярный вес химерного белка составляет 28 кДа. Данный химерный белок экспрессируется штаммом кишечной палочки В-6519, трансформированным плазмидой pC(Sp)4 S. Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под номером В-6519. Химерный белок с экспонированным соматостатином представляет собой водонерастворимую ферментативно неактивную хлорамфениколацетилтрансферазу без 10 С-концевых аминокислотных остатков, к которой через спейсерную последовательность присоединена аминокислотная последовательность соматостатина-14. Метод антисоматостатиновой иммунизации животных с использованием указанного химерного соматостатинсодержащего белка предлагается для использования в промышленном животноводстве для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных (RU 2034457 С1, МПК А01К 67/02, 1995). К продуктивности сельскохозяйственных животных относятся: молочность, мясная продуктивность, настриг шерсти (Большая советская энциклопедия, главный редактор А.М.Прохоров. М.: Издательство «Советская энциклопедия», 1975, том 21, стр.36, рубрика «Продуктивность сельскохозяйственных животных»).

Известно, когда для приготовления готовой лекарственной формы препарата для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, содержащего эффективное количество химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и последовательностью соматостатина-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC использовали в качестве адъюванта неполный адьювант Фрейнда (RU 2034457 С1, МПК А01К 67/02, 1995). Однако высокая реактогенность адъюванта, наличие болезненных ощущений у животных при его введении привели к необходимости поиска других адъювантных систем.

Известно, что использование препарата для повышения мясной продуктивности бройлеров, содержащего эффективное количество химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и последовательностью соматостатина-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в липосомальной форме (RU 2337708 С1, МПК А61К 39/385, 2006), в данном случае неприемлемо вследствие незначительной концентрации действующего вещества в удельном объеме (<1·10-3 г/мл). Для животного массой тела более 500 кг потребовалось бы введение около двадцати миллилитров препарата, что является на практике весьма проблематичным обстоятельством.

Сущность изобретения

Задача изобретения заключается в использовании химерного соматостатинсодержащего белка для повышения воспроизводительных качеств самцов сельскохозяйственных животных и петухов, а именно повышения спермопродукции (увеличения объема эякулята, снижения брака спермы по биологическим показателям) у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде препарата для инъекций с низкой реактогенностью адъюванта, позволяющего осуществлять инъекции без болезненных ощущений производителям сельскохозяйственных животных и петухам.

Решение этой задачи обеспечивает препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска.

Препарат содержит химерный белок с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.

Использование в качестве адъюванта для такого рода препарата растительного масла, полностью метаболизирующегося в организме животного, позволяет в значительной степени снизить уровень реактогенности адъюванта и создает необходимые условия для постепенного поступления действующего вещества в организм животного («депо» препарата). Могут использоваться подсолнечное, хлопковое и арахисовое масла. Механизм действия препарата основан на временном блокировании активности эндогенного соматостатина сельскохозяйственных животных и петухов, повышении концентрации соматотропного гормона, и усилении активности сперматогенеза. Наличие пчелиного воска в конечной прописи препарата обосновано необходимостью достижения равномерности распределения химерного белка в объеме растительного масла, снижения скорости седиментации химерного белка, сохранении стерильных свойств лекарственной формы препарата, что особенно важно при проведении инъекций животным с помощью шприцев-автоматов.

Способ повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов предусматривает двукратную подкожную инъекцию с интервалом в 14 суток препарата в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска петухам или сельскохозяйственным животным по достижении физиологической зрелости из расчета 50-200 мкг белка на 1 кг живой массы тела. Используют препарат в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в количестве из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.

Осуществление изобретения и эффективность препарата

Возможность осуществления изобретения поясняется примером получения препарата для повышения сперматогенеза у производителей сельскохозяйственных животных и петухов.

Полученный и очищенный от примесей препарат белка растворяют в буфере 0,2 М трис-HCL рН 8,0, содержащем 6М гуанидинхлорид и 2М МЭДТА. Добавляют 50-кратный молярный избыток инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873 -меркаптоэтанола в расчете на количество S-S групп химерного белка и раствор быстро разбавляют 10-кратным объемом буфера без гуанидинхлорида. Образовавшийся преципитат гибридного белка отделяют центрифугированием в течение 15 минут при 12000g и температуре 4°С и лиофильно высушивают для последующего хранения или приготовления масляной суспензии.

Для приготовления готовой формы препарата используют рафинированное растительное масло и пчелиный воск. В растительное масло добавляют пчелиный воск из расчета 0,9%. Масло нагревают до температуры 45-50°С, перемешивая, достигают полного растворения воска. Затем масло с воском охлаждают до температуры 35-37°С и добавляют навеску сухого белка из расчета 250 мг на 100 мл адъюванта. Суспензию гомогенизируют в течение 1-2 минут и передают на разливочное оборудование. Готовую эмульсию препарата расфасовывают в тару (флаконы стеклянные и шприцы одноразовые). При иной концентрации компонентов препарат приготавливается аналогично. Предпочтительными являются следующие содержания компонентов на 100 мл рафинированного растительного масла: 250 мг химерного белка - 0,9 мас.% пчелиного воска; 500 мг химерного белка - 1,0 мас.% пчелиного воска; 1000 мг химерного белка - 1,1 мас.% пчелиного воска.

Эффективность применения препарата для повышения сперматогенеза у производителей сельскохозяйственных животных и петухов, находящихся в стадии физиологической зрелости, иллюстрируется следующими примерами.

инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873

В условиях промышленного свиноводческого комплекса хрякам-производителям крупной белой породы и породы дюрок был введен препарата двукратно с интервалом 14 суток из расчета 50-200 мкг рекомбинантного белка на 1 кг живой массы тела.

У хряков-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объем эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество спермодоз. Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 1.

Препарат оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков.

инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873

После первой инъекции препарата животным крупной белой породы объем эякулята хряков увеличился на 5,8-13,8%, через 30-60 дней после второй инъекции объем эякулята вырос на 23,6-25,4%, также повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 12,1-14,1%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз на 38,3-42,6%. Близкие показатели спермопродукции были обнаружены при применении препарата и у хряков породы дюрок.

Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 2.

инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873

Препарат в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела также оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков. Через 30-60 дней после второй инъекции препарата объем эякулята хряков увеличился на 18,9-16,6%, также повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 12,2-13,8%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз на 34,8-38,6%. Близкие показатели спермопродукции при применении препарата были обнаружены и у хряков породы дюрок.

Показатели спермопродукции хряков при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 3.

Препарат в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела также оказал положительное влияние на спермопродукцию хряков. Через 30-60 дней после второй инъекции препарата объем эякулята хряков увеличился на 16,5-15,9%, также повысилась концентрация сперматозоидов в эякуляте на 11,1-12,9%, что повлияло на увеличение количества полученных спермодоз на 29,1-37,1%. Близкие показатели спермопродукции при применении препарата были обнаружены и у хряков породы дюрок.

Изучение влияния препарата на спермопродукцию быков-производителей проводили в организациях по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных.

Масляную суспензию препарата животным вводили подкожно в дозе 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями.

У быков-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объем эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте, количество полученных спермодоз и процент брака спермы по биологическим показателям качества спермы (количество сперматозоидов с прямолинейно-поступательным движением, выживаемость).

Показатели спермопродукции быков-производителей при применении препарата в дозах 50, 100 и 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблицах 4-6.

Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у быков-производителей в результате применения препарата.

Так объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела (таблица 4), увеличился на 28,7%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 22,2%.

В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 часов). Итогом применения препарата на быках-производителях в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз - на 23,4-34,7% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Таблица 4
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Голштинская порода
Средний объем эякуляции, мл3,90±0,15 4,23±0,104,37±0,12 5,02±0,11
Подвижность сперматозоидов с примолинейно-поступательным движением, баллы 7,02±0,027,0±0,02 7,0±0,027,0±0,02
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 1,23±0.091,20±0.06 1,18±0.051,18±0.05
Активность сперматозоидов, баллы 3,31±0,253,82±0,18 3,90±0,163,95±0,16
Подвижность сперматозоидов, через 5 часов после инкубации при 37°С, баллы 1,46±0,231,52±0,22 1,59±0,201,59±0,20
Брак спермы по биологическим показателям, %51,2±5,6 39,7±4,935,7±2,2 35,8±2,1
Кол-во полученных спермодоз от одного животного726±35 959±26978±15 978±15
Айрширская порода
Средний объем эякулята, мл4,19±0,17 4,61±0,144,88±0,12 5,12±0,13
Подвижность сперматозоидов с прямолинейно-поступательным движением, баллы 7,01±0.037,0±0,02 7.0±0,027.05±0,04
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 1,40±0,101,36±0,07 1,32±0,091,29±0,06
Активность сперматозоидов, баллы 3,77±0,323,47±0,28 3,89±0,214,19±0,23
Подвижность сперматозоидов через 5 часов после инкубации при 37°С, баллы 0,80±0,181,12±0,19 1,12±0,221,11±0,17
Брак спермы по биологическим показателям, %28,6±8,5 31,0±6,226,5±5,3 24,5±5,0
Кол-во полученных спермодоз от одного животного1416±42 1520±371675±28 1747±28

Таблица 5
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Голштинская порода
Средний объем эякуляции, мл3,85±0,12 4,18±0,134,22±0,15 4,92±0,10
Подвижность сперматозоидов с примолинейно-поступательным движением, баллы 7,02±0,027,0±0,02 7,0±0,027,0±0,02
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 1,22±0,081,18±0,04 1,16±0.051,17±0,03
Активность сперматозоидов, баллы 3,36±0,253,82±0,18 3,88±0,143,93±0,18
Подвижность сперматозоидов, через 5 часов после инкубации при 37°С, баллы 1,42±0,231,48±0,24 1,54±0,211,56±0,18
Брак спермы по биологическим показателям, %49,3±4,9 38,7±4,634,7±2,1 34,8±2,5
Кол-во полученных спермодоз от одного животного722±32 941±28968±15 971±15
Айрширская порода
Средний объем эякулята, мл4,16±0,15 4,55±0,144,78±0,11 5,02±0,15
Подвижность сперматозоидов с прямолинейно-поступательным движением, баллы 7,02±0,027,0±0,02 7,0±0,027,06±0,05
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 1,38±0,111,33±0,08 1,30±0,101,30±0,07
Активность сперматозоидов, баллы 3,76±0,313,44±0,25 3,82±0,204,11±0,25
Подвижность сперматозоидов через 5 часов после инкубации при 37°С, баллы 0,81±0,171,10±0,15 1,11±0,231,10±0,15
Брак спермы по биологическим показателям, %29,8±6,5 31,5±5,227,5±4,2 25,5±5,2
Кол-во полученных спермодоз от одного животного1408±38 1505±321637±24 1719±21

Таблица 6
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Голштинская порода
Средний объем эякуляции, мл3,92±0,11 4,19±0,124,20±0,15 4,88±0,11
Подвижность сперматозоидов с примолинейно-поступательным движением, баллы 7,02±0,027,0±0,02 7,0±0,027,0±0,02
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 1,21±0,071,16±0,03 1,14±0,041,16±0,03
Активность сперматозоидов, баллы 3,34±0,233,81±0,19 3,885±0,143,90±0,18
Подвижность сперматозоидов, через 5 часов после инкубации при 37°С, баллы 1,43±0,221,49±0,22 1,53±0,201,52±0,16
Брак спермы по биологическим показателям, %45,3±4,2 36,7±4,433,7±2,1 35,8±2,5
Кол-во полученных спермодоз от одного животного719±31 938±26962±14 968±15
Айрширская порода
Средний объем эякулята, мл4,17±0,15 4,58±0,124,77±0,11 4,99±0,14
Подвижность сперматозоидов с прямолинейно-поступательным движением, баллы 7,01±0,027,0±0,02 7,0±0,027,04±0,03
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 1,34±0,101,31±0,07 1,30±0,121,32±0,06
Активность сперматозоидов, баллы 3,66±0,283,54±0,23 3,80±0,174,08±0,22
Подвижность сперматозоидов через 5 часов после инкубации при 37°С, баллы 0,84±0,161,09±0,13 1,12±0,191,12±0,15
Брак спермы по биологическим показателям, %28,7±6,5 30,5±4,626,9±4,3 25,8±4,2
Кол-во полученных спермодоз от одного животного1395±33 1487±281617±18 1682±20

Анализ показателей спермопродукции быков-производителей после применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела (таблица 5) свидетельствует о положительном влиянии препарата на контролируемые показатели. Так объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела, увеличился на 27,8%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 20,7%.

В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 часов).

Итогом применения на быках-производителях препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз - на 22,1-34,5% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Анализ показателей спермопродукции быков-производителей после применения препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела (таблица 6) свидетельствует о положительном влиянии препарата на контролируемые показатели. Так объем эякулята, взятый у быков голштинской породы через 90 суток после первой инъекции препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела, увеличился на 24,5%, у производителей айрширской породы этот показатель возрос на 19,6%.

В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (активность сперматозоидов, их выживаемость через 5 часов).

Итогом применения на быках-производителях препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела является увеличение количества полученных спермодоз - на 20,5-34,6% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Аналогичные эксперименты были проведены на баранах вятской (нолинской) породы.

Масляную суспензию препарата животным вводили подкожно в дозе 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями (таблицы 7, 8, 9).

У баранов-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие спермы и определяли объем эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество полученных спермодоз.

Показатели спермопродукции баранов-производителей при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы показаны в таблице 7.

Результаты представленных в таблице 7 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата. Так объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 18,0%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз от одного животного на 28,1% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Таблица 7
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Средний объем эякуляции, мл2,05±0,03 2,22±0,022,31±0,03 2,42±0,04
Средняя подвижность сперматозоидов, баллы 8,0±0,018,0±0,01 8,0±0,018,0±0,01
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 2,2±0,052,17±0,04 2,15±0,022,16±0,06
Выживаемость сперматозоидов, часы 259±6,0282±10,0 293±8,0305±6,0
Брак спермы по биологическим показателям, %28,6±8,5 24,5±6,822,6±5,5 20,9±5,2
Кол-во полученных спермодоз от одного животного32±3,0 36±2,838±3,2 41±2,1

В Таблице 8 приведены показатели спермопрдукции баранов-производителей при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела.

Таблица 8
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Средний объем эякуляции, мл2,10±0,04 2,24±0,052,29±0,02 2,38±0,04
Средняя подвижность сперматозоидов, баллы 8,0±0,018,0±0,01 8,0±0,018,0±0,01
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 2,2±0,062,15±0,05 2,13±0,062,15±0,04
Выживаемость сперматозоидов, часы 256±5,0278±10,0 289±6,0292±4,0
Брак спермы по биологическим показателям, %27,7±6,5 27,8±5,222,4±4,8 20,4±6,2
Кол-во полученных спермодоз от одного животного30±2,0 34±2,236±2,8 38±3,1

Результаты представленных в таблице 8 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела. Так объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 13,3%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение через 90 дней после первой инъекции препарата количества полученных спермодоз от одного животного на 26,6% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

В таблице 9 приведены показатели спермопродукции баранов-производителей при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела.

Таблица 9
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Средний объем эякуляции, мл2,07±0,02 2,18±0,062,23±0,04 2,32±0,03
Средняя подвижность сперматозоидов, баллы 8,0±0,018,0±0,01 8,0±0,018,0±0,01
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 2,20±0,042,12±0,03 2,17±0,052,17±0,03
Выживаемость сперматозоидов, часы 260±5,0274±9,0 285±8,0289±7,0
Брак спермы по биологическим показателям, %28,8±6,5 25,1±5,223,2±4,8 22,4±3,2
Кол-во полученных спермодоз от одного животного31±2,0 34±2,237±3,2 39±4,1

Результаты представленных в таблице 9 экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у баранов-производителей в результате применения препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела. Так объем эякулята, взятый у баранов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 12,1%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (подвижность, выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на баранах-производителях является увеличение через 90 дней после первой инъекции препарата количества полученных спермодоз от одного животного на 25,8% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Изучение влияния препарата на продуктивные качества петухов производителей (двухлинейный гибрид плимутрок и корниш) проводили на птицеводческих предприятиях.

Суспензию препарата птице вводили подкожно в дозе 50-200 мкг белка на 1 кг массы тела двукратно с интервалом 14 суток между инъекциями.

У петухов-производителей до и после применения препарата установленным порядком осуществляли взятие образцов спермы и определяли объем эякулята, концентрацию сперматозоидов в эякуляте и количество полученных спермодоз.

Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 50 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 10.

Таблица 10
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Средний объем эякуляции, мл0,52±0,02 0,57±0,030,68±0,05 0,74±0,02
Средняя подвижность, баллы7,03±0,02 7,02±0,027,03±0,03 7,02±0,04
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл2,1±0,05 1,98±0,032,01±0,03 1,99±0,04
Выживаемость сперматозоидов, часы132±8,5 142±6,3148±3,2 144±3,2
Брак спермы по биологическим показателям, % 15,6±3,513,4±2,7 12,5±2.311,7±3,2
Кол-во полученных спермодоз 12,0±2,313,0±2,7 15,0±2,517,0±2,8
Оплодотворяющая способность спермы, % 9292 9392

Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петухов-производителей в результате применения препарата. Так объем эякулята, взятый у петухов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 42,3%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз на 41,6% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 100 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 11.

Таблица 11
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Средний объем эякуляции, мл0,49±0,03 0,54±0,020,65±0,06 0,71±0,03
Средняя подвижность, баллы7,03±0,02 7,01±0,017,02±0,04 7,02±0,06
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 2,11±0,041,95±0,04 2,01±0,061,98±0,03
Выживаемость сперматозоидов, часы 135±6,5140±7,3 144±2,2143±4,2
Брак спермы по биологическим показателям, %16,7±3,0 14,2±1,713,5±1,9 12,2±3,3
Кол-во полученных спермодоз12,0±3,2 12,0±2,714,0±3,2 16,0±2,9
Оплодотворяющая способность спермы, %92 939293

Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петухов-производителей в результате применения препарата. Так объем эякулята, взятый у петухов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 44,9%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз на 33,3% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Показатели спермопродукции у петухов при применении препарата в дозе 200 мкг на 1 кг живой массы тела приведены в таблице 12.

Результаты экспериментов свидетельствуют о стимуляции спермопродукции у петухов-производителей в результате применения препарата. Так объем эякулята, взятый у петухов через 90 суток после первой инъекции, увеличился на 35,3%. В течение контролируемого периода улучшились качественные показатели взятой спермы (выживаемость сперматозоидов). Итогом применения препарата на петухах-производителях является увеличение количества полученных спермодоз на 25,0% и снижение процента брака спермы по биологическим показателям.

Таблица 12
Показатель качества спермы До введения препарата (исходные) После введения препарата черезинъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей   сельскохозяйственных животных и петухов и способ его применения, патент № 2493873
30 суток 60 суток90 суток
Средний объем эякуляции, мл0,52±0,02 0,55±0,030,64±0,05 0,69±0,04
Средняя подвижность, баллы7,03±0,02 7,01±0,017,01±0,03 7,01±0,05
Концентрация сперматозоидов, млрд/мл 2,12±0,031,96±0,05 2,02±0,032,01±0,04
Выживаемость сперматозоидов, часы 137±5,5141±7,1 145±3,2144±5,2
Брак спермы по биологическим показателям, %18,3±4,2 15,7±2,914,1±2,7 13,9±4,2
Кол-во полученных спермодоз12,0±3,2 11,0±2,713,0±3,2 15,0±2,7
Оплодотворяющая способность спермы, %92 939293

Ввиду того что в соответствии с известным препаратом для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных (RU 2034457 С1, МПК А01К 67/02, 1995) действующее вещество (рекомбинантный белок) суспендировано в неполном адъюванте Фрейнда, представляется необходимым показать низкую реактогенность и отсутствие болезненных ощущений животных при введении соматостатинсодержащего белка, суспендированного в растительном масле с добавлением пчелиного воска.

С этой целью были сформированы три группы поросят (подсвинки пород канадской селекции (Йоркшир, Ландрас) по 10 голов в каждой, находящихся на доращивании с массой тела 20 кг. Животным одной группы был введен подкожно рекомбинантный белок, суспендированный в неполном адъюванте Фрейнда в объеме 2 мл на голову (концентрация действующего вещества составляла 0,5 мг/мл), животным другой группы был подкожно введен рекомбинантный белок, суспендированный в растительном масле с добавлением пчелиного воска в объеме 2 мл на голову (концентрация действующего вещества составила 0,5 мг/мл).

Животные контрольной группы были интактны - препараты им не вводили.

В результате анализа результатов применения рекомбинантного белка, суспендированного в неполном адъюванте Фрейнда, у 7 животных было отмечено появление в месте введения препарата инфильтрата, вызывающего болезненные ощущения у животных (поросята были агрессивны, место инъекции препарата пропальпировать было невозможно из-за болезненных ощущений). Из 7 животных, реакция организма которых на введение препарата выразилась в образовании инфильтрата, у 4 животных на 6-8 сутки после введения препарата появились признаки абсцесса. Данные осложнения вызвали изменения в физиологических показателях животных и послужили причиной вскрытия абсцессов с назначением животным курса антибиотикотерапии.

В таблице 13 приведены клинико-физиологические показатели подопытных животных.

Таблица 13
Показатель (в среднем за опыт) Группы
контрольная 1 опытная (неполный адъювант Фрейнда) 2 опытная (растительное масло с добавлением пчелиного воска
До введения препаратов
Температура тела,°С 38,8±0,1338,7±0,15 38,8±0,15
Частота дыхания в мин, раз12,7±0,19 10,2±0,2212,0±0,33
Частота пульса в мин, раз 73,2±4,2666,9±4,89 68,2±5,57
После введения препаратов на 6-8 сутки
Температура тела, °С39,0±0,19 40,1±0,1639,1±0,17
Частота дыхания в мин, раз 13,2±0,2923,4±0,19 13,8±0,45
Частота пульса в мин, раз77,9±4,26 92,6±4,9071,7±5,72

Анализ данных, приведенных в таблице 13, позволяет сделать выводы, что введение рекомбинатного белка, суспендированного в неполном адъюванте Фрейнда, вызывает у значительного числа животных побочные реакции в виде образования инфильтратов с последующим абсцедированием. Этот факт является существенным препятствием для широкого применения рекомбинантного белка на указанном адъюванте.

Соответствующая изобретению лекарственная форма препарата на основе рекомбинантного белка и рафинированного растительного масла с добавлением пчелиного воска представляет собой суспензию, в которой рекомбинантный белок является дисперсионной фазой, а рафинированное растительное масло - дисперсионной средой.

В соответствии с законом Стокса скорость оседания дисперсионной фазы находится в обратно пропорциональной зависимости от вязкости дисперсионной среды. Для повышения показателей седиментационной устойчивости масляной суспензии (а конкретно - для повышения вязкости дисперсионной среды) введены в состав препарата 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска (в этом случае пчелиный воск не может обладать свойствами эмульгатора). Кроме того, пчелиный воск обладает бактерицидными свойствами и его наличие в составе лекарственной формы повышает микробиологическую чистоту препарата, что является важным фактором при проведении подкожных инъекций животным.

Введение препарата на основе рекомбинантного белка, суспендированного в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска, в организм млекопитающих инициирует формирование нескольких отличных друг от друга физиологических процессов. Образующиеся антисоматостатиновые антитела снижают концентрацию соматостатина и повышают содержание в организме соматотропного гормона. Это, с одной стороны, приводит к активации ферментов желудочно-кишечного тракта животных, замедлению эвакуации химуса из просвета кишечника, повышению усвоения питательных веществ и, как следствие, - увеличению молочной и мясной продуктивности животных (RU 2034457 С1, МПК А01К 67/02,1995).

В то же время повышение концентрации соматотропного гормона приводит к активации фолликулостимулирующего гормона животных, ответственного за функциональное состояние интерстициальных клеток (клеток Лейдига), продуцирующих тестостерон, гормон, регулирующий уровень сперматогенеза и качество получаемой спермы от животных-производителей.

В проведенных исследованиях впервые обнаружено повышение концентрации тестостерона у животных, получивших инъекции соответствующего изобретению препарата на основе рекомбинантного белка на 25-27% (13,2 нг/мл и 16,5 нг/мл соответственно). Этот механизм действия препарата на основе рекомбинантного белка является новым и ранее не был описан.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Инъекционный препарат для повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска,

причем инъекционный препарат содержит химерный белок с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.

2. Способ повышения спермопродукции у производителей сельскохозяйственных животных и петухов, включающий двукратную подкожную инъекцию с интервалом в 14 суток инъекционного препарата в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в рафинированном растительном масле с добавлением пчелиного воска петухам или сельскохозяйственным животным по достижении физиологической зрелости из расчета 50-200 мкг белка на 1 кг живой массы тела,

причем используют инъекционный препарат в виде суспензии химерного белка с водонерастворимой ферментативно неактивной хлорамфениколацетилтрансферазой без 10 С-терминальных аминокислот, аминокислотным спейсером (Sp)n, где n=1, 2, 4, 8, и соматостатином-14 с последовательностью аминокислот AGCFWKTFTSC в количестве из расчета 250-1000 мг указанного химерного белка на 100 мл рафинированного растительного масла, включающего 0,9-1,1 мас.% пчелиного воска.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2493873

patent-2493873.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K39/385 гаптены или антигены, связанные с носителями

Патенты РФ в классе A61K39/385:
синтетический иммуноген для защиты от токсического действия наркотических и психоактивных веществ -  патент 2526807 (27.08.2014)
инъекционный препарат для повышения спермопродукции человека и способ его применения -  патент 2526571 (27.08.2014)
антигенные tau-пептиды и их применения -  патент 2518291 (10.06.2014)
композиции, включающие антигены neisseria meningitidis из серогрупп в и с, и дополнительный антиген -  патент 2508122 (27.02.2014)
никотиновые иммунонанотерапевтические лекарственные средства -  патент 2487712 (20.07.2013)
мультивалентная композиция на основе конъюгата пневмокковый полисахарид-белок -  патент 2484846 (20.06.2013)
препарат вакцины на основе конъюгата никотин-носитель -  патент 2465007 (27.10.2012)
сахарид-конъюгатные вакцины -  патент 2454244 (27.06.2012)
композиции вакцин, содержащие наборы антигенов в виде амилоида бета 1-6 -  патент 2450827 (20.05.2012)
вакцина против гриппа и способ ее получения -  патент 2446824 (10.04.2012)

Класс A61K9/42 содержащие воск, высшие жирные кислоты, высшие жирные спирты или их производные, например шоколад

Класс A61K38/31 соматостатины

Патенты РФ в классе A61K38/31:
циклический октапептид, радиофармацевтическое средство на его основе и способ применения радиофармацевтического средства для получения лекарственных (фармацевтических) средств для лечения новообразований, экспрессирующих соматостатиновые рецепторы -  патент 2528414 (20.09.2014)
пептидные лиганды соматостатиновых рецепторов -  патент 2525468 (20.08.2014)
имплантат октреотида, содержащий высвобождающее вещество -  патент 2521291 (27.06.2014)
доставка октреотида из сухих лекарственных форм -  патент 2518745 (10.06.2014)
фармацевтические композиции -  патент 2504360 (20.01.2014)
слитый белок дефектная хлорамфеникол ацетилтрансфераза (сат)-соматостатин и его применения -  патент 2501565 (20.12.2013)
лечение нейроэндокринных опухолей -  патент 2487711 (20.07.2013)
конъюгаты дисоразолов, фармацевтическая композиция на их основе, названные конъюгаты для изготовления лекарственного средства, набор и способ их получения -  патент 2473562 (27.01.2013)
композиции с замедленным высвобождением, включающие октреотид и два или более сополимера полилактида и гликолида -  патент 2464972 (27.10.2012)
фармацевтические композиции конъюгатов соматостатин-дофамин -  патент 2464039 (20.10.2012)

Класс A61P15/08 для лечения расстройств половых желез или увеличения фертильности, например стимуляторы овуляции или сперматогенеза

Патенты РФ в классе A61P15/08:
способ лечения и профилактики рецидивов внутриматочных синехий -  патент 2525533 (20.08.2014)
способ исследования транспортной функции маточных труб -  патент 2524306 (27.07.2014)
способ лечения мужского бесплодия, обусловленного аутоиммунными реакциями против сперматозоидов -  патент 2517061 (27.05.2014)
способ комплексного лечения патозооспермии у мужчин с надпочечниковой гиперандрогенией -  патент 2510284 (27.03.2014)
способ витальной иммобилизации сперматозоидов человека и животных -  патент 2504581 (20.01.2014)
(дигидро)пирроло[2,1-а]изохинолины -  патент 2495037 (10.10.2013)
способы созревания фолликулов яичника in vitro -  патент 2492866 (20.09.2013)
средство для улучшения репродуктивной функции -  патент 2489142 (10.08.2013)
средство для улучшения репродуктивной функции -  патент 2487705 (20.07.2013)
способ немедикаментозной коррекции идиопатической астенозооспермии -  патент 2482858 (27.05.2013)


Наверх