бензимидазольные антигельминтные композиции

Классы МПК:A61K9/08 растворы
A61K31/4184  конденсированные с карбоциклическими кольцами, например бензимидазолы
A61K33/10 карбонаты; бикарбонаты
Автор(ы):, , ,
Патентообладатель(и):Вайет ЭлЭлСи (US)
Приоритеты:
подача заявки:
2009-10-02
публикация патента:

Группа изобретений относится к ветеринарии. Самоэмульгирующаяся ветеринарная антигельминтная композиция содержит: а) от примерно 15% до примерно 25% масс./об. бензимидазольного антигельминтного средства; и (б) несмешиваемую с водой систему растворителей, которая содержит лактонный растворитель в количестве от примерно 10% до примерно 40% масс./об., эфирное масло в количестве от примерно 10% до примерно 35% масс./об. и поверхностно-активное вещество в количестве от примерно 30% до примерно 60% масс./об. Самоэмульгирующаяся ветеринарная антигельминтная композиция содержит: а) от примерно 15% до примерно 25% масс./об. триклабендазола; и б) несмешиваемую с водой систему растворителей, которая содержит бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, 1,8-цинеол и глицериды полиэтиленгликоля каприловой/каприновой кислоты. Способы лечения теплокровного животного от паразитов, представляющих собой гельминтов, включают введение указанному животному одной из указанных самоэмульгирующихся ветеринарных антигельминтных композиций. Способ изготовления самоэмульгирующейся ветеринарной антигельминтной композиции включает смешивание (1) бензимидазольного антигельминтного средства с (2) несмешиваемой с водой системой растворителей, содержащей лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество. Группа изобретений обеспечивает повышение эффективности лечения животных. 5 н. и 28 з.п. ф-лы, 8 табл., 4 ил., 8 пр.

Рисунки к патенту РФ 2493825

бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825

Предшествующий уровень техники

Гельминтоз представляет собой широко распространенное заболевание, поражающее животных, особенно теплокровных животных, и вызывающее значительные экономические потери. Особенно подвержены этим инфекциям овцы, крупный рогатый скот, козы, лошади и другие домашние травоядные. Обнаружено много известных антигельминтных агентов, обладающих разной степенью эффективности по отношению к конкретным гельминтам, вызывающим инфекции. Определенные классы антигельминтных средств имеют более широкий или менее широкий спектр активности, то есть, они способны лечить инфекции, включающие более широкий или более узкий диапазоны паразитов.

Особенно полезные классы антигельминтных средств представляют собой классы авермектина и милбемицина, примерами которых являются абамектин, ивермектин, дорамектин, милбемицин D и моксидектин. Они обладают активностью против паразитических круглых червей, а также против некоторых эктопаразитов, но лишены активности против цестод и трематод (двуусток).

Печеночная двуустка вызывает глобальное заболевание, которое в основном поражает крупный рогатый скот и овец, но может также развиваться у многих других животных, в том числе лошадей, свиней, коз, кроликов и, по меньшей мере в Австралии, у местных животных, такие как кенгуру и вомбаты. Люди также могут быть инфицированы печеночной двуусткой. Печеночная двуустка может вызывать серьезные экономические потери. Глобальные потери из-за заболевания, вызываемого печеночной двуусткой, оценены более чем в три миллиарда долларов США в год. У овец инфекция печеночной двуусткой снижает продуктивность, включая рост и качество шерсти, процент ягнения и скорость роста ягнят. Овцы могут также погибать в результате инфекции печеночной двуусткой.

Бензимидазолы, в том числе триклабендазол, хорошо известны своей антигельминтной активностью. Триклабендазол является особенно полезным антигельминтным средством, обладающим активностью, главным образом, против трематод и, конкретно, против печеночных двуусток. Триклабендазол описан в Патенте США 4197307 и известен также как 5-хлор-6(2,3-дихлорфенокси)-2-метилтио-1Н-бензимидазол. Триклабендазол является весьма эффективным против печеночных двуусток на всех стадиях их жизненного цикла, в том числе ранней незрелой, незрелой и взрослой.

Желательной является комбинация антигельминтных активностей, которая имеет спектр активности авермектин/милбемицинов и триклабендазола. Однако успешные комбинированные препараты должны обеспечивать физическую стабильность препарата в течение коммерчески достаточного периода времени; химическую стабильность активных компонентов, содержащихся в них; поддерживать или превышать уровень фармакологической активности индивидуальных активных компонентов и быть пригодными для введения животным в подходящей лекарственной форме.

Предпочтительным является наличие жидких препаратов, которые содержат антигельминтный(е) активный(е) компонент(ы) и которые легко вводить животным путем обливания спины животного. Жидкие препараты терапевтических агентов могут быть в форме раствора или суспензии. По причине весьма низкой растворимости триклабендазола, было трудно обеспечить жидкие препараты, содержащие триклабендазол. Как результат, антигельминтные препараты, содержащий триклабендазол, обычно получали в виде суспензий. Однако препараты суспензий имеют несколько недостатков. По самой его природе, диспергированное вещество в суспензии может осаждаться или оседать на дно контейнера при стоянии. Такое осаждение может также приводить к образованию осадка и отвердению осадка, что приводит к трудностям при повторном диспергировании суспензии при перемешивании. Осаждение вызывает дополнительные проблемы, поскольку приводит к различиям в концентрации активного агента в препарате. Это в свою очередь приводит к трудностям в определении и получении эффективной и безопасной дозы для лечения животных. Суспензии также хуже абсорбируются при нанесении путем обливания.

По этим причинам было бы желательным предоставление жидких препаратов для обливания, которые содержат триклабендазол в форме раствора, а не в форме суспензии. Растворы иногда требуются для достижения достаточной биологической доступности. Растворы представляют собой жидкие препараты, которые содержат одну или более чем одну химическую субстанцию, растворенную в подходящем растворителе или смеси взаимно смешиваемых растворителей. Однако субстанции в растворах часто подвержены химической нестабильности больше, чем в твердом состоянии.

При составлении антигельминтных композиций необходимым является то, что эти композиции поддерживают как химическую активность активных соединений, так и физическую стабильность препарата. Это позволяет готовить композиции задолго до их намеченного применения и достигать полезного срока хранения в качестве коммерческого продукта.

Более того, подходящий жидкий препарат для обливания должен предпочтительно включать растворители, имеющие способность эффективно проникать через кожу, что делает более вероятной системную абсорбцию антигельминтного(ых) активного(ых) агента(ов) животным. Предпочтительно, подходящий препарат для обливания должен иметь низкую точку замерзания и низкое поверхностное натяжение, что помогает нанесению путем обливания, и должен обладать высокими водоотталкивающими свойствами для уменьшения смывания с животного во время дождя или другого воздействия водой.

Краткое описание сущности изобретения

В настоящем изобретении предложена ветеринарная антигельминтная композиция, включающая по меньшей мере 10% масс./об. (предпочтительно 10-40% масс./об., например, 15-25% масс./об.) бензимидазольного антигельминтного средства в несмешиваемой с водой системе растворителей, содержащей лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество.

Более того, в этом изобретении предложена ветеринарная антигельминтная композиция, включающая 10-40% масс./об. и, предпочтительно, от примерно 15% до примерно 25% масс./об. триклабендазола в несмешиваемой с водой системе растворителей, содержащей бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, 1,8-цинеол и глицериды полиэтиленгликоля и каприловой/каприновой кислоты.

Также предложен способ лечения теплокровного животного от паразитов. Этот способ включает введение теплокровному животному ветеринарной антигельминтной композиции, включающей по меньшей мере 10% масс./об. (предпочтительно 10-40% масс./об., например, 15-25% масс./об.) бензимидазольного антигельминтного средства в несмешиваемой с водой системе растворителей, содержащей лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество.

В этом изобретении дополнительно предложен способ лечения теплокровного животного от паразитов. Этот способ включает введение животному ветеринарной антигельминтной композиции, содержащей по меньшей мере 10% масс./об. (предпочтительно 10-40% масс./об., например, 15-25% масс./об.) триклабендазола в несмешиваемой с водой системе растворителей, которая содержит бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, 1,8-цинеол и глицериды полиэтиленгликоля и каприловой/каприновой кислоты.

Далее, в этом изобретении предложен способ изготовления ветеринарной композиции. Этот способ включает смешивание бензимидазольного антигельминтного средства с несмешиваемой с водой системой растворителей, содержащей лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество.

Краткое описание графических материалов

На Фиг.1-4 представлены графики количества сульфоксида триклабендазола (фармакологически активного метаболита триклабендазола) в плазме крупного рогатого скота, обработанного композициями по Примерам 3 и 4 через, 14 суток после обработки.

Подробное описание изобретения

Это изобретение относится к ветеринарным композициям, включающим бензимидазольное антигельминтное средство. Бензимидазолы используют для лечения эндопаразитарных заболеваний у домашних животных, и они характеризуются широким спектром активности и низкой токсичностью. В одном из воплощений композиция включает бензимидазол в комбинации с другим антигельминтным соединением, таким как макроциклический лактон.

Ветеринарная антигельминтная композиция содержит по меньшей мере 10% масс./об. бензимидазольного антигельминтного средства в несмешиваемой с водой системе растворителей, содержащей лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество. В одном из воплощений композиция представляет собой композицию для обливания.

В одном из воплощений ветеринарная антигельминтная композиция включает от примерно 15% до примерно 25% масс./об. триклабендазола в несмешиваемой с водой системе растворителей, содержащей бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, 1,8-цинеол и глицериды полиэтиленгликоля и каприловой/каприновой кислоты.

При использовании здесь термин "несмешиваемая с водой система растворителей" предназначен обозначать неводную систему трех или более чем трех растворителей, которые при смешивании по существу неспособны к перемешиванию или достижению гомогенности с водой. В общем, несмешиваемая с водой система растворителей имеет низкий уровень растворимости в воде, например, растворимость смеси растворителей в воде составляет менее чем 10% масс., особенно менее чем 5% масс.

Термин "композиция для обливания" и тому подобные при использовании здесь предназначен обозначать композицию, для которой особенно предпочтительным путем нанесения является обливание. В типичных случаях препараты для обливания называют так потому, что ими обливают спину животного, обычно от холки к корню хвоста животных, таких как крупный рогатый скот, овцы или лошади.

При использовании здесь "бензимидазол" обозначает ветеринарное соединение бензимидазольного химического семейства, такое как тиабендазол, камбендазол, парбендазол, мебендазол, фенбендазол, оксфендазол, оксибендазол, албендазол, албендазола сульфоксид, тиофанат, фебантел, нетобимин, триклабендазол, их соли или их комбинации.

Термин "макроциклический лактон" при использовании здесь обозначает фармацевтическое соединение в авермектиновом или милбемициновом семействе соединений, включающем авермектины, такие как ивермектин, абамектин или дорамектин, и милбемицины, такие как милбемицин D или моксидектин, или их комбинации.

При использовании здесь термин "масс./масс." обозначает масса/масса, термин "масс./об." обозначает масса/объем, и термин "мг/кг" обозначает миллиграммы на килограмм массы тела.

Как описано выше, композиции могут включать бензимидазольное соединение в комбинации с другим антигельминтным соединением, таким как макроциклический лактон. Желательно вводить бензимидазольное соединение в комбинации с макроциклическим лактоном для расширения спектра действия против паразитов, подлежащих контролю. В идеале, ветеринарные композиции; содержащие как бензимидазол, так и макроциклический лактон, должны быть стабильными, биологически доступными и простыми в нанесении обливанием.

Бензимидазолы при использовании в комбинации, по меньшей мере, с одним дополнительным антигельминтным средством, таким как макроциклические лактоны или аминоацетонитрилы, обеспечивают комплиментарный контроль паразитов у теплокровных животных. Например, триклабендазол является активным против печеночных двуусток, но только умеренно активным против круглых червей или эктопаразитов, а моксидектин (макроциклический лактон) является весьма активным против круглых червей и эктопаразитов, но минимально активным против двуусток. Более того, активными против круглых червей являются депсипептиды, такие как эмодепсид, и аминоацетонитрилы, такие как монепантел.

Теперь неожиданно обнаружено, что бензимидазольное соединение и макроциклический лактон можно приготавливать в виде прозрачного, гомогенного, несмешиваемого с водой раствора, подходящего для нанесения путем обливания на теплокровное животное. Преимуществом является то, что эта композиция является самоэмульгирующейся, так что бензимидазольный активный ингредиент остается в растворе и является биодоступным. Эта антигельминтная композиция является эффективной против всех стадий двуусток и имеет великолепную способность проникать через кожу. Более того, эта композиция имеет низкое поверхностное натяжение, хорошие водоотталкивающие свойства и низкую точку замерзания, все из которых представляют собой желательные характеристики препарата для обливания.

Бензимидазолы, подходящие для применения в композиции, включают тиабендазол, камбендазол, парбендазол, мебендазол, фенбендазол, оксфендазол, оксибендазол, албендазол, албендазол сульфоксид, тиофанат, фебантел, нетобимин, триклабендазол и их комбинации. В одном из предпочтительных воплощений бензимидазольное антигельминтное средство представляет собой триклабендазол. Триклабендазол является весьма эффективным против печеночной двуустки на всех стадиях их жизненного цикла.

Лактонные растворители, подходящие для применения в антигельминтной композиции, включают, без ограничения, следующие: бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, бутиролактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -додекалактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -ноналактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -декалактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -декалактон и бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -додекалактон и другие алкильные лактоны и их комбинации.

Триклабендазол имеет удивительно хорошую растворимость в этих лактонах и схожих лактонах и комбинациях. В предпочтительном воплощении лактонным растворителем является собой у-гексалактон.

Масляный компонент этой композиции предпочтительно представляет собой эфирное масло, выбранное из следующих, без ограничения: 1,8-цинеол (также известный как эвкалиптол), 1,4-цинеол, эвганол, лимоненовое масло, масло чайного дерева, цитронеллол и их комбинации. В одном из воплощений компонентом, представляющим собой эфирное масло, является 1,8-цинеол.

Поверхностно-активные вещества, подходящие для применения в этой композиции, включают, без ограничения, следующие классы эмульгаторов или поверхностно-активных веществ: сложные эфиры полиэтиленгликоля с жирной кислотой, сложные эфиры полиэтиленгликоля и глицерина с жирной кислотой, продукты трансэстерификации спирта и масла, полиглицерированные жирные кислоты, сложные эфиры пропиленгликоля с жирной кислотой, моно-, ди- и триглицериды и их комбинации. Неионные поверхностно-активные вещества могут быть предпочтительными.

В одном из предпочтительных воплощений поверхностно-активное вещество представляет собой смесь моно-, ди- и триглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля с жирными кислотами. Например, подходящими поверхностно-активными веществами являются Лабрасол® (Gattefosse, Saint-Priest, France), который состоит в основном из сложных эфиров ПЭГ и глицеридов с ацильными цепями средней длины. Лабрасол® также известен как глицериды каприловой/каприновой кислоты с ПЭГ-8. Другим подходящим поверхностно-активным веществом являются глицериды и эфиры каприловой/каприновой кислоты с ПЭГ-6. Другими поверхностно-активными веществами, подходящими для применения в этой композиции, являются такие, как полиэтиленгликоля монолаурат, полиэтиленгликоля дилаурат, полиэтиленгликоля моноолеат, полиэтиленгликоля диолеат или эфиры кокосового масла с глицерином и полиэтиленгликолем.

Как описано выше, эта композиция возможно может включать по меньшей мере одно антигельминтное средство вдобавок к бензимидазольному соединению. В одном из воплощений по меньшей мере одно дополнительное антигельминтное средство выбрано из следующих: макроциклические лактоны, тетрамизол, левамизол, депсипептиды (например, эмодепсид), аминоацетонитрилы (например, монепантел) и их комбинации.

В одном из воплощений эта композиция может включать макроциклический лактон или аминоацетонитрил. Макроциклические лактоны, подходящие для применения в композиции по этому изобретению, включают милбемицин D, авермектин, ивермектин, абамектин, дорамектин, моксидектин и их комбинации. Аминоацетонитрилы включают монепантел. В одном из предпочтительных воплощений композиция включает моксидектин.

Эффективные количества антигельминтных соединений, таких как бензимидазол, макроциклический лактон и/или аминоацетонитрил, могут варьировать в соответствии с эффективностью соединений, способа нанесения, животного-хозяина, целевого паразита, степени зараженности или тому подобного. В одном из воплощений бензимидазол присутствует в количестве от примерно 10% до примерно 40% масс./об. В общем, предпочтительными являются количества примерно 15-25% масс./об. бензимидазола, такого как триклабендазол, и подходящими являются количества примерно 0,01-2,0% масс./об., предпочтительно 0,5% масс./об. макроциклического лактона, такого как моксидектин.

Эта композиция включает несмешиваемую с водой систему растворителей, содержащую лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество. Лактонный растворитель может присутствовать в композиции в количестве от примерно 10% до примерно 40% масс./об. Эфирное масло может присутствовать в количестве от примерно 5% до примерно 50% масс./об. В предпочтительном воплощении эфирное масло присутствует в количестве от примерно 10% до примерно 35% масс./об. Поверхностно-активное вещество присутствует в количестве от примерно 30% до примерно 60% масс./об. В предпочтительном воплощении поверхностно-активное вещество присутствует в количестве от примерно 40% до примерно 50% масс./об.

Преимуществом является то, что эта ветеринарная композиция обеспечивает простое введение и эффективную биологическую доступность антигельминтных ингредиентов. Соответственно, в настоящем изобретении предложен способ лечения теплокровного животного от паразитов, включающий введение указанному животному композиции, содержащей по меньшей мере 10% масс./об. бензимидазольного антигельминтного средства в несмешиваемой с водой системе растворителей, содержащей лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество.

В одном из воплощений способ лечения включает введение животному ветеринарной антигельминтной композиции, содержащий от примерно 15% до примерно 25% масс./об. триклабендазола в несмешиваемой с водой системе растворителей, содержащей бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, 1,8-цинеол и глицериды каприловой/каприновой кислоты и полиэтиленгликоля.

В одном из воплощений этих способов бензимидазольное антигельминтное средство представляет собой триклабендазол. Триклабендазол может присутствовать во вводимой композиции в количестве от примерно 10% до примерно 40% масс./об.

В еще одном воплощении этих способов, вводимая композиция дополнительно включает по меньшей мере одно дополнительное антигельминтное средство, выбранное из следующих, без ограничения: макроциклические лактоны, тетрамизол, левамизол, депсипептиды, аминоацетонитрилы и их комбинации. В одном из предпочтительных воплощений дополнительный антигельминтный представляет собой моксидектин. Моксидектин предпочтительно присутствует в количестве от примерно 0,01 до примерно 2% масс./об.

В одном из воплощений этих способов композиция включает бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон в качестве лактонного растворителя. Лактонный растворитель может присутствовать в количестве от примерно 10% до примерно 40% масс./об.

В дополнительном воплощении этих способов компонентом, представляющим собой эфирное масло, является 1,8-цинеол. Эфирное масло может присутствовать в количестве от примерно 5% до примерно 50% масс./об.

В еще одном воплощении этих способов поверхностно-активное вещество представляет собой смесь моно-, ди- и триглицеридов и моно- и диэфиров полиэтиленгликоля с жирными кислотами. Поверхностно-активное вещество может присутствовать в количестве от примерно 30% до примерно 60% масс./об.

В одном из воплощений композиции можно вводить животному в виде композиций для обливания. В типичных случаях композицию для обливания наносят на кожу животного от холки до корня хвоста.

Теплокровные животные, которых можно лечить этим способом, включают: свиней, крупный рогатый скот, овец, лошадей, коз, верблюдов, буйволов, ослов, ланей, северных оленей или тому подобных, предпочтительно свиней, крупный рогатый скот, лошадей или овец.

В реальной практике композицию по этому изобретению можно наносить в дозе порядка миллиграмм активного антигельминтного ингредиента на килограмм массы тела животного-хозяина. Уровни доз, подходящие для применения в способе по этому изобретению, должны варьировать в зависимости от способа введения, вида и здоровья животного-хозяина, целевого паразита, степени инфицирования или зараженности, условий содержания, эффективности дополнительного противопаразитарного соединения и тому подобного.

В настоящем изобретении также предложен способ изготовления ветеринарной композиции. Этот способ включает комбинирование (1) бензимидазольного антигельминтного средства с (2) несмешиваемой с водой системой растворителей, содержащей лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество. В одном из воплощений указанное комбинирование включает растворение бензимидазольного антигельминтного средства в растворе поверхностно-активного вещества с образованием раствора бензимидазола в поверхностно-активном веществе; и перемешивание раствора бензимидазола в поверхностно-активном веществе с эфирным маслом и лактонным растворителем с образованием композиции.

В одном из воплощений этот способ дополнительно включает добавление по меньшей мере одного дополнительного антигельминтного средства к композиции. В одном из воплощений по меньшей мере одно дополнительное антигельминтное средство представляет собой макроциклический лактон, аминоацетонитрил или их комбинацию. В еще одном воплощении этого способа к композиции можно добавлять стабилизатор. В одном из воплощений стабилизатором является бутилированный гидрокситолуол (ВНТ).

Макроциклические лактоны, подходящие для применения в этом способе изготовления, включают милбемицин D, авермектин, ивермектин, абамектин, дорамектин, моксидектин или их комбинации, предпочтительно моксидектин.

Аминоацетонитрилы, подходящие для применения в этом способе изготовления, включают монепантел.

Бензимидазолы, подходящие для применения в этом способе изготовления, включают тиабендазол, камбендазол, парбендазол, мебендазол, фенбендазол, оксфендазол, оксибендазол, албендазол, албендазола сульфоксид, тиофанат, фебантел, нетобимин, триклабендазол, или их комбинации, предпочтительно триклабендазол.

Специалисту в данной области будет понятно, что если композиции в соответствии с настоящим изобретением предназначены для использования или предназначены для изготовления с целью применения в ветеринарной медицине, они могут также содержать дополнительные носители, стабилизаторы, буферные агенты, консерванты или другие эксципиенты, хорошо известные в данной области.

Для более ясного понимания этого изобретения здесь ниже приведены следующие примеры. Эти примеры являются всего лишь иллюстративными, и их не надо понимать как ограничивающие объем или основополагающие принципы этого изобретения каким-либо образом. На самом деле, различные модификации этого изобретения, вдобавок к тем, что показаны и описаны здесь, должны стать очевидными специалистам из примеров, приведенных здесь ниже, и описания, приведенного здесь выше. Такие модификации также предназначены быть в пределах объема прилагаемой формулы изобретения.

Примеры

Пример 1. Способ изготовления антигельминтных композиций

Ветеринарную антигельминтную композицию для обливания можно изготавливать в соответствии со следующим способом. Лабрасол (поверхностно-активное вещество) добавляли в бак для перемешивания, и это поверхностно-активное вещество нагревали до примерно 60°C. После этого к нагреваемому поверхностно-активному веществу добавляли триклабендазол. Нагревание прекращали, как только получали раствор. Этому раствору затем давали охладиться до примерно 40°C, после чего добавляли в бак для перемешивания 1,8-цинеол (эфирное масло), продолжая перемешивание. Когда раствор охлаждался до примерно 30°C, добавляли бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, продолжая перемешивание. Затем добавляли к сосуду для перемешивания стабилизатор, такой как бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), и перемешивали до растворения. После этого добавляли моксидектин и перемешивали до растворения. Получившийся раствор фильтровали через 2-мкм фильтровальный картридж (Pall Corporation, East Hills, NY) и упаковывали в бутыли, подходящие для использования путем обливания в ветеринарии.

При том что вышеизложенное описывает одно предпочтительное воплощение этого способа, настоящим изобретением предусмотрено, что эти компоненты можно добавлять в разном порядке. Например, в еще одном воплощении лактонный растворитель добавляют в бак для перемешивания первым с последующем добавлением эфирного масла при продолжении перемешивания. После этого добавляют бензимидазольное антигельминтное средство и затем поверхностно-активное вещество. Нагревание можно использовать для облегчения образования раствора на одной или более чем одной стадии этого способа. Затем раствору дают охладиться до примерно 25-30°C, и затем добавляют стабилизатор и перемешивают до растворения. Затем добавляют моксидектин или другой подходящий антигельминтный агент и перемешивают до растворения. Получившуюся композицию фильтруют и упаковывают так же, как описано выше.

Пример 2. Ветеринарные композиции для обливания

Таблица I ниже иллюстрирует различные воплощения репрезентативных антигельминтных композиций по настоящему изобретению. Эти композиции являются подходящими для нанесения путем обливания на теплокровных животных, таких как крупный рогатый скот, олени и/или овцы.

Таблица I
Примеры антигельминтных композиций
КомпонентКомпозиция А

% масс./объем
Композиция Б

% масс./объем
Композиция В

% масс./объем
Композиция Г

% масс./объем
Триклабендазол 25,025,0 20,020,0
Моксидектин0,42 0,420,50,5
ВНТ0,5 0,50,5 0,5
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -Гексалактонсколько требуется 34,0сколько требуется 34,0
1,8-Цинеол 7,0сколько требуется 7,0сколько требуется
PEG400-лаурат 45,0-45,0 -
Лабрасол -45,0 -45,0

Пример 3. Испытание на двуустках

Испытание на крупном рогатом скоте, инфицированном печеночными двуустками, осуществляли для того, чтобы сравнить эффективность дополнительных воплощений настоящего изобретения, содержащих: (1) моксидектин в количестве 0,42% масс./об. или 0,5% масс./об. и (2) 15, 20 или 25% триклабендазола, с двумя другими средствами лечения и контроля. Таблица II ниже представляет примеры композиций, использованных для настоящего испытания на двуустках.

Таблица II
Композиции для испытания на двуустках по примеру 3
КомпонентКомпозиция Д

% масс./об.
Композиция Е

% масс./об.
Композиция Ж

% масс./об.
Триклабендазол 1520 25
Моксидектин 0,50,50,42
ВНТ0,5 0,50,5
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -Гексалактон14,0 14,034,0
1,8-Цинеол29,0 29,0сколько требуется
Лабрасолсколько требуется сколько требуется45,0

Животных разделяли в двенадцать групп для обработки по восемь животных. Животные в Группах 1-3 получали Композицию Д. Животные в Группах 4-6 получали Композицию Е. Животные в Группах 7-8 получали Композицию Ж. Животные в Группах 9 и 10 получали коммерческое средство против двуусток, содержащее 0,5% масс./об. абамектина и 30% масс./об. триклабендазола. Животные в Группе 11 получали коммерческую композицию, содержащую 0,5% масс./об. моксидектина, для оценки эффективности только против нематод. Животные в Группе 12 не получали обработки. Всех животных экспериментально инфицировали двуусткой Fasciola hepatica в День 0. Обработку осуществляли в День 28 (ранняя незрелая стадия), День 42 (незрелая стадия) и День 84 (взрослая стадия). Крупный рогатый скот забивали между Днями 96 и 100 исследование, когда осуществляли подсчет двуусток. Композиции для обработки наносили путем обливания спины животного от холки к корню хвоста.

Во время испытания на двуустках количество сульфоксида триклабендазола (активного метаболита триклабендазола) в плазме измеряли в течение 14 суток после обработки анализом с использованием обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии в соответствии с известными способами. Присутствие сульфоксида триклабендазола в плазме животного свидетельствовало том, что исходное лекарственное средство абсорбировалось через кожу животного и метаболизировалось печенью. Для того чтобы эффективно лечить инфекцию печеночной двуусткой, триклабендазольные антигельминтные средства должны достигать специфичных рецепторов внутри клеток паразита для оказания своего действия. Суммарный подсчет червей осуществляли при использовании способов, хорошо известных в данной области.

Указания, использованные для оценки эффективности антигельминтных композиций, раскрыты в следующих ссылках: World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology (WAAVP) 2nd Edition of guidelines for evaluating the efficacy of anthelmintics in ruminants (bovine, ovine, caprine). 1. В Wood et al., Veterinary Parasitology, 58 181-213 (1995); и Good Clinical Practices. VICH GL9. International Cooperation on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Veterinary Medical Products.

Сульфоксид триклабендазола определяли в плазме обработанных групп, которые получали Композиции Д, Е или Ж, а также тех обработанных групп, которые получали коммерческие средства против двуусток. Неожиданно, более высокие уровни сульфоксидного метаболита были найдены в плазме животных, обработанных Композицией Е в дозе 20 мг/кг триклабендазола, при сравнении с коммерческим средством против двуусток в дозе 30 мг/кг триклабендазола. См. Фиг.1 и 2, где показаны фармакокинетические профили сульфоксида триклабендазола, когда обработку делали в день 28 против ранней стадии двуусток (Фиг.1) или в день 42 против незрелых двуусток (Фиг.2). Вне связи с какой-либо теорией, весьма вероятно, что система растворителей, использованная в настоящей композиции, увеличивает проникновение в кожу животных, что повышает вероятность абсорбции и метаболизма активного компонента печенью.

Результаты испытания на эффективность против двуусток показаны в Таблице III, где эффективность по группе вычислена относительно группы животных, которая не получала обработки. В Таблице III "мокси", "трикла" и "обр" представляют собой сокращения для "моксидектин", "триклабендазол" и "обработка" соответственно. День обработки 28 соответствует обработке против 4-недельных ранних незрелых двуусток. День обработки 42 соответствует обработке против 6-недельных незрелых двуусток. Более того, день обработки 84 соответствует обработке против 12-недельных взрослых двуусток.

бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825

Результаты, представленные в Таблице III, показывают, что Композиции Д, Е и Ж были эффективными против ранней незрелой, незрелой и взрослой стадий двуустки, причем Композиции Е и Ж показали наибольшую эффективность.

Более того, эти результаты дополнительно показывают, что Композиция Е, наносимая в дозе 20 мг/кг триклабендазола (Группы 4-6), была столь же эффективной против ранних незрелых и незрелых двуусток, как и коммерческое средство против двуусток, наносимое в дозе 30 мг/кг триклабендазола (Группы 9-10).

Пример 4. Краткое изложение результатов, полученных в других испытаниях на крупном рогатом скоте

Таблица IV ниже показывает композиции, использованные в сравнительном исследовании уровней в плазме крупного рогатого скота.

Таблица IVa
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 % МАСС./ОБ. бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825
Компонент ААВВСС Коммерческий продукт для сравнения
Триклабендазол20 2020Триклабендазол 30% масс./об.
Моксидектин 0,50,5 0,5Содержит 0,5% масс./об. Абамектина
ВНТ 0,50,50,5
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -Гексалактон34 1414
ЦинеолСколько требуется 2945
Лабрасол45Сколько требуетсяСколько требуется

Фиг.3 представляет собой график количества сульфоксида триклабендазола в плазма животных из испытания на протяжении 14 дней после обработки. Как описано выше, присутствие сульфоксида триклабендазола в плазме животных показывает, что триклабендазол абсорбируется через кожу животных и метаболизируется печенью. На Фиг.3 суммированы различия, наблюдаемые среди разных препаратов, указанных в Таблице IVa. Примечательны эквивалентные или более высокие уровни в плазме с препаратами АА, ББ и ВВ, все в дозах 20 мг/кг триклабендазола (TBZ), при сравнении с коммерческим продуктом в дозе 30 мг/кг триклабендазола. Это показывает, что композиции по настоящему изобретению были способны лучше проникать в кожу.

Другой пример лучшей чрескожной абсорбции по этому изобретению приведен в Таблице IVb ниже, где показаны композиции, использованные в другом сравнительном исследовании на двуустках.

Таблица IVb
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 % масс./об.
КомпонентDD ЕЕFF GG
Триклабендазол 252520 20
Моксидектин 0,420,420,5 0,5
ВНТ 0,50,5 0,50,5
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -Гексалактонсколько требуется 34сколько требуется 34
Цинеол 7Сколько требуется 7сколько требуется
Лаурат ПЭГ400 45-45 -
Лабрасол -45- 45

Фиг.4 представляет собой график количества сульфоксида триклабендазола в плазме крупного рогатого скота в испытании на двуустках на протяжении 14 дней после обработки. Как описано выше, присутствие сульфоксида триклабендазола в плазме животных показывает, что триклабендазол абсорбируется через кожу животных и метаболизируется печенью. На Фиг.4 суммированы различия, наблюдаемые среди разных препаратов, указанных в Таблице IVb. Препараты ГГ и ДД были в дозах 30 мг/кг, рекомендованной дозе для коммерческого продукта, тогда как Препараты ЖЖ и ЕЕ были в дозах 20 мг/кг. Препараты ЕЕ и ЖЖ при всего лишь двух третях дозы превосходят коммерческий продукт по фармакокинетическому профилю в плазме. Это показывает, что композиции по настоящему изобретению были способны лучше проникать через кожу.

Пример 5. Исследования стабильности

Исследования стабильности осуществляли с целью убедиться в том, что композиция в соответствии с настоящим изобретением была стабильной. Композицию Е по Примеру 3 приготавливали в соответствии со способом, описанным в Примере 1, и хранили при температуре либо окружающей среды (25°C), либо 40°C в сумме в течение 6 месяцев. По завершении каждого периода хранения, показанного в Таблице V ниже, пробы тестировали на суммарные уровни моксидектина и триклабендазола.

Таблица V
Результаты исследований стабильности
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 % масс./об.

Моксидектин
% масс./об.

Триклабендазол
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 25°C 40°C25°C 40°C
Исходно 0,504-20,01 -
1 месяц 0,4980,498 19,8619,97
3 месяца0,508 0,51120,3020,88
6 месяцев 0,4940,48619,92 19,89

Результаты, представленные в Таблице V, ясно демонстрируют, что триклабендазол во время хранения оставался в растворе. Более того, оба, триклабендазол и моксидектин, оставались стабильными и активными в течение всех 6 месяцев периода хранения.

Пример 6. Физические характеристики

Определяли физические характеристики Композиции Е, и результаты показаны в Таблице VI ниже.

Таблица VI
Физические характеристики
Физическая характеристикаКомпозиция Е
Точка замерзания, °C -20
Вязкость, сантипуаз 39,2
Поверхностное натяжение, дин/см36,3
Точка вспышки, °F>150
Водоотталкивающая способность, % отмывки 1
Угол контакта

Результаты в Таблице VI показывают, что физические характеристики композиции в соответствии с настоящим изобретением являются идеальными для применения в качестве композиции для обливания. В частности, Композиция Е имеет низкую точку замерзания (-20°C), что помогает нанесению путем обливания. Более того, низкое поверхностное натяжение Композиции Е позволяет этой композиции легко растекаться по телу животного. Кроме того, Композиция Е обладает высокой водоотталкивающей способностью, что снижает количество, которое может быть смыто дождем или другим воздействием воды, что также является желательной характеристикой композиции для обливания.

Пример 7. Дополнительные примеры антигельминтных композиций

Таблица VII ниже иллюстрирует дополнительные воплощения репрезентативных антигельминтных композиций по настоящему изобретению. Эти примеры изготавливают в соответствии со способом, описанным в Примере 1, за исключением того, что композицию изготавливают без моксидектина (Композиция И), или добавляют отличный от моксидектина антигельминтный агент, например абамектин (Композиция К).

Таблица VII
Дополнительные воплощения антигельминтных композиций
КомпонентКомпозиция И (% масс./об.)Композиция К (% масс./об.)
Триклабендазол 2020
Абамектин00,5
ВНТ0,5 0,5
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -Гексалактон14,0 14,0
1,8-Цинеол 29,029,0
Лабрасолсколько требуется сколько требуется

Пример 8. Дополнительные воплощения антигельминтных композиций

Еще дополнительные воплощения репрезентативных антигельминтных композиций по настоящему изобретению изготавливают в соответствии со способом, описанным в Примере 1 выше, за исключением того, что используют иные лактонные растворители, чем бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон. В частности, эти композиции приготавливают с одним из нижеследующих лактонных растворителей: бутиролактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -додекалактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -ноналактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -декалактон, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -декалактон и бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -додекалактон. Подходящие количества триклабендазола, моксидектина, стабилизатора (например, ВНТ), эфирного масла (например 1,8-цинеола), поверхностно-активного вещества (например, Лабрасола) и лактонного растворителя являются теми же, какие описаны выше. Обнаружено, что триклабендазол имеет удивительно хорошую растворимость в этих лактонных растворителях (см. Таблицу VIII ниже) и в аналогичных лактонах и их комбинациях.

Таблица VIII
Растворимость триклабендазола в различных лактонных растворителях:
Растворитель Растворимость триклабендазола (% масс.)
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон16,8
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -бутиролактон>18,0
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -додекалактон11,8
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -ноналактон16,7
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -декалактон28,1
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -декалактон15,2
бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -додекалактон21,5

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Самоэмульгирующаяся ветеринарная антигельминтная композиция, содержащая:

а) от примерно 15 до примерно 25% мас./об. бензимидазольного антигельминтного средства; и (б) несмешиваемую с водой систему растворителей, которая содержит лактонный растворитель в количестве от примерно 10% до примерно 40% мас./об., эфирное масло в количестве от примерно 10 до примерно 35% мас./об. и поверхностно-активное вещество в количестве от примерно 30% до примерно 60% мас./об.

2. Композиция по п.1, где бензимидазольное антигельминтное средство представляет собой триклабендазол.

3. Композиция по п.1 или 2, где триклабендазол присутствует в количестве примерно 20% мас./об.

4. Композиция по п.1, где лактонный растворитель выбран из группы, состоящей из бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактона, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -бутиролактона, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактона, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -додекалактона, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -ноналактона, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -декалактона, бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -декалактона и бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -додекалактона и их комбинаций.

5. Композиция по п.4, где лактонный растворитель представляет собой бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон.

6. Композиция по п.1, где эфирное масло выбрано из группы, состоящей из 1,8-цинеола, 1,4-цинеола, эвганола, лимоненового масла, масла чайного дерева, цитронеллола и их комбинаций.

7. Композиция по п.6, где эфирное масло представляет собой 1,8-цинеол.

8. Композиция по п.1, где эфирное масло присутствует в количестве примерно 29% мас./об.

9. Композиция по п.1, где поверхностно-активное вещество выбрано из группы, состоящей из сложных эфиров полиэтиленгликоля с жирной кислотой, сложных эфиров полиэтиленгликоля и глицерина с жирной кислотой, продуктов трансэстерификации спирта и масла, полиглицерированных жирных кислот, сложных эфиров пропиленгликоля с жирной кислотой, моно-, ди- и триглицеридов и их комбинаций.

10. Композиция по п.9, где поверхностно-активное вещество представляет собой смесь моно-, ди- и триглицеридов и моно- и диэфиров жирных кислот с полиэтиленгликолем.

11. Композиция по п.10, где поверхностно-активное вещество представляет собой глицериды каприловой/каприновой кислоты с ПЭГ-8 (полиэтиленгликоль) или глицериды каприловой/каприновой кислоты с ПЭГ-6.

12. Композиция по п.9, где поверхностно-активное вещество представляет собой монолаурат полиэтиленгликоля, дилаурат полиэтиленгликоля, моноолеат полиэтиленгликоля, диолеат полиэтиленгликоля или эфир глицерина и полиэтиленгликоля с кокосовым маслом.

13. Композиция по п.9, где поверхностно-активное вещество присутствует в количестве от 40% до 50% мас./об.

14. Композиция по п.1, включающая по меньшей мере одно дополнительное антигельминтное средство, выбранное из группы, состоящей из макроциклических лактонов, тетрамизола, левамизола, депсипептидов, аминоацетонитрилов и их комбинаций.

15. Композиция по п.14, где макроциклический лактон представляет собой моксидектин.

16. Самоэмульгирующаяся ветеринарная антигельминтная композиция, содержащая:

а) от примерно 15% до примерно 25% мас./об. триклабендазола; и

б) несмешиваемую с водой систему растворителей, которая содержит бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон, 1,8-цинеол и глицериды полиэтиленгликоля каприловой/каприновой кислоты.

17. Композиция по п.16, дополнительно содержащая моксидектин.

18. Композиция по п.17, где моксидектин присутствует в количестве от примерно 0,01 до примерно 2% мас./об.

19. Способ лечения теплокровного животного от паразитов, представляющих собой гельминтов, включающий введение указанному животному самоэмульгирующейся ветеринарной антигельминтной композиции, содержащей:

(а) от примерно 15% до примерно 25% мас./об. бензимидазольного антигельминтного средства; и (б) несмешиваемую с водой систему растворителей, которая содержит лактонный растворитель в количестве от примерно 10% до примерно 40% мас./об., эфирное масло в количестве от примерно 10% до примерно 35% мас./об. и поверхностно-активное вещество в количестве от примерно 30% до примерно 60% мас./об.

20. Способ по п.19, где бензимидазольное антигельминтное средство представляет собой триклабендазол.

21. Способ по п.19, где лактонный растворитель представляет собой бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон.

22. Способ по п.19, где эфирное масло представляет собой 1,8-цинеол.

23. Способ по п.19, где поверхностно-активное вещество представляет собой смесь моно-, ди- и триглицеридов и моно- и диэфиров жирной кислоты с полиэтиленгликолем.

24. Способ по п.19, где вводимая композиция дополнительно включает по меньшей мере одно дополнительное антигельминтное средство, выбранное из группы, состоящей из макроциклических лактонов, тетрамизола, левамизола, депсипептидов, аминоацетонитрилов, таких как монепантел, и их комбинаций.

25. Способ по п.24, при котором композицию наносят путем обливания, и указанное одно дополнительное антигельминтное средство представляет собой макроциклический лактон, который является моксидектином.

26. Способ лечения теплокровного животного от паразитов, представляющих собой гельминтов, включающий введение указанному животному самоэмульгирующейся ветеринарной антигельминтной композиции, содержащей:

а) от примерно 15% до примерно 25% мас./об. триклабендазола; и

б) несмешиваемую с водой систему растворителей, которая содержит бензимидазольные антигельминтные композиции, патент № 2493825 -гексалактон в количестве от примерно 10% до примерно 40% мас./об., 1,8-цинеол в количестве от примерно 10% до примерно 35% мас./об. и глицериды полиэтиленгликоля и каприловой/каприновой кислоты в количестве от примерно 40% до примерно 50% мас./об.

27. Способ по п.26, где вводимая композиция дополнительно содержит моксидектин.

28. Способ по п.27, где моксидектин присутствует в количестве примерно 0,5% мас./об.

29. Способ изготовления самоэмульгирующейся ветеринарной антигельминтной композиции, включающий: смешивание (1) бензимидазольного антигельминтного средства с (2) несмешиваемой с водой системой растворителей, содержащей лактонный растворитель, эфирное масло и поверхностно-активное вещество.

30. Способ по п.29, при котором указанное смешивание включает растворение бензимидазольного антигельминтного средства в растворе поверхностно-активного вещества с образованием раствора бензимидазола в поверхностно-активном веществе; и перемешивание раствора бензимидазола в поверхностно-активном веществе с эфирным маслом и лактонным растворителем с образованием композиции.

31. Способ по п.29, дополнительно включающий добавление моксидектина к композиции.

32. Способ по любому из пп.29-31, дополнительно включающий добавление стабилизирующего агента к композиции.

33. Способ по п.32, где стабилизирующий агент представляет собой бутилированный гидрокситолуол (ВНТ).


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2493825

patent-2493825.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K9/08 растворы

Патенты РФ в классе A61K9/08:
стабильные составы бортезомиба -  патент 2529800 (27.09.2014)
офтальмологический ирригационный раствор -  патент 2529787 (27.09.2014)
вискоэластичный раствор для контрастирования задней гиалоидной мембраны -  патент 2527767 (10.09.2014)
способ получения комплексного иммунометаболического препарата с антиинфекционной активностью -  патент 2527329 (27.08.2014)
лекарственные средства, содержащие фторхинолоны -  патент 2527327 (27.08.2014)
способ получения комплексного антибактериального иммуномодулирующего препарата -  патент 2526184 (20.08.2014)
биоматериал и средство с биоматериалом, стимулирующие противоопухолевую активность -  патент 2526160 (20.08.2014)
оздоровительная композиция для введения в форме капель и способ ее получения -  патент 2524656 (27.07.2014)
фармацевтическая композиция в форме раствора для инъекций и способ ее получения -  патент 2524651 (27.07.2014)
фармацевтическая композиция лигандов рецепторов секретагогов гормона роста -  патент 2523566 (20.07.2014)

Класс A61K31/4184  конденсированные с карбоциклическими кольцами, например бензимидазолы

Класс A61K33/10 карбонаты; бикарбонаты

Патенты РФ в классе A61K33/10:
фосфатный адсорбент -  патент 2527682 (10.09.2014)
раствор для бикарбонатного гемодиализа -  патент 2521361 (27.06.2014)
фармацевтическая композиция -  патент 2519099 (10.06.2014)
смешанные соединения металлов для применения в качестве антацидов -  патент 2510265 (27.03.2014)
акарицидная фармацевтическая композиция на основе соли четвертичного фосфония, замещенного динитробензофураксана и ксимедонгидрохлорида -  патент 2497508 (10.11.2013)
способ консервативного лечения эпикондилита плеча -  патент 2491964 (10.09.2013)
способ консервативного лечения предкаменной стадии желчнокаменной болезни -  патент 2490017 (20.08.2013)
способ лечения кашля при бронхиальной астме у детей -  патент 2487718 (20.07.2013)
средство для спринцевания влагалища в первую фазу лечения кандидозного кольпита (молочницы) -  патент 2486912 (10.07.2013)
способ коррекции липидного обмена у лиц с риском развития атеросклероза с применением кумыса, фитокомплекса и минеральной воды -  патент 2483738 (10.06.2013)


Наверх