Поиск патентов
ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ

способ получения иммунотропного средства как основы для препарата "иммунофлан"

Классы МПК:A61K36/35 Caprifoliaceae (семейство жимолостных)
B01D11/02 твердых веществ 
A61P37/02 иммуномодуляторы
Автор(ы):, , , ,
Патентообладатель(и):Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханский государственный университет" (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2011-11-02
публикация патента:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к способу получения иммунотропного средства. Способ получения иммунотропного средства путем экстракции воздушно-сухих листьев Lophanthus anisatus Benth водным этиловым спиртом, нагревания, охлаждения, отфильтровывания, выпаривания растворителя, растворения остатка и экстрагирования хлороформом, отфильтровывания и высушивания осадка, при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет получить эффективное иммунотропное средство. 3 табл., 5 пр.

Изобретение относится к относится к области медицины, конкретно к фармакологии и касается разработки средств, улучшающих, а в ряде случаев полностью нормализующих, иммунный статус организма.

В настоящее время известны иммунотропные средства синтетического, растительного и животного происхождения: тиролон, арбидол, кагоцел, циклоферон, эхинацея пурпурная и ряд адаптогенов с выраженным иммунотропным действием (родиола розовая, женьшень, цветки липы, пантокрин и др.). Известно использование Лофанта анисового как гепато-, кардиопротективного, дерматологического, урологического средства в народной медицине.

Известен фармакопейный метод получения флавоноидов [1], в котором измельченное сырье травы зверобоя заливают очищенной водой комнатной температуры в соотношении 1:10, взятом с учетом коэффициента водопоглощения настаивают на кипящей водяной бане в течение 15 мин, охлаждают 45 мин, процеживают, отжимая сырье, и прибавляют воду до требуемого объема извлечения. В настое, получаемом фармакопейным методом, содержание флавоноидов составляет 0,2%. [2].

Известен способ (патент № 2158740 RU), при котором воздушно-сухое сырье травы зверобоя, измельченное до размеров частиц 2-3 мм, заливают очищенной водой комнатной температуры, взятой с учетом коэффициента водопоглощения в соотношении 1:6,6 и настаивают на кипящей водяной бане. Полученное извлечение отфильтровывают через ватный фильтр, затем в целях максимальной очистки от сопутствующих веществ извлечение помещают на колонку диаметром 5 см с 6 г полиамидного сорбента (ТУ 6-09-10-822-73) с размером частиц 0,1-0,25 мм. После прохождения через колонку всей жидкости сорбент обрабатывают 150 мл очищенной воды в три приема. Полноту очистки извлечения контролируют визуально в видимом и УФ-свете, а также качественной реакцией с 5%-ным спиртовым раствором алюминия хлорида (III). Для элюирования полифенолов используют 70%-ный этанол в количестве 50 мл, время прохождения через колонку 7-8 мин, скорость прохождения 70-80 капель в 1 мин. Количество элюирующей смеси, необходимой для полной десорбции флавоноидов, устанавливают экспериментально. Этанол из собранного элюата отгоняют при температуре выше 70°C, экстракт высушивают до постоянной массы. Выход флавоноидов в данном способе составляет 0,4-0,9%.

Задачей, решаемой данным изобретением, является расширение арсенала средств, обладающих иммунотропной активностью, т.к. вопрос расширения группы иммунотропных средств является чрезвычайно актуальным, формируя социальный заказ на разработку и воспроизводство лекарственных средств, применяемых в различных сферах практической медицины, а также более эффективного способа получения средства с высоким выходом продукта (смеси флавоноидов).

Данная задача достигается за счет того, что в предлагаемом изобретении в качестве иммунотропного средства предлагается использовать смесь флавоноидов, полученных путем извлечения их из водно-спиртовой вытяжки листьев Лофанта анисового Lophanthus anisatus Benth (сортов «Астраханский 100» и «Астраханский 101») с размером частиц 1-3 мм, собранных в период цветения. Предлагаемый способ позволяет получить выход продукта (смеси флавоноидов) при экстракции в размере 3%.

Свойства полученной смеси флавоноидов Лофанта анисового как иммунотропного средства изучены в эксперименте на организме лабораторных животных в фоновых условиях, а также при циклофосфамидной иммунодепрессии. О наличии иммунотропной активности судили по следующим показателям: общее число лейкоцитов, популяционный состав лейкоцитарной формулы, клеточное (реакция гиперчувствительности замедленного типа (РГЗТ) с определением индекса реакции), гуморальное (реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) с определением титра антител) и фагоцитарное (латексный тест по изучению фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови с определением фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа) звенья иммуногенеза. При постановке РГЗТ и РПГА в качестве антигенного стимула использовали эритроциты барана.

Осуществление заявляемого способа получения смеси флавоноидов их применение в качестве иммунотропного средства проиллюстрировано на нижеследующих примерах.

Пример 1. Способ получения иммунотропного средства заключается в следующем: 50 г воздушно-сухого сырья листьев Лофанта анисового с размером частиц 1-3 мм, собранных в период цветения, заливают 500 мл 60% водного раствора этанола и нагревают на водяной бане в течение 2.5 ч. Раствор охлаждают до 50°C и отфильтровывают, а растворитель выпаривают на роторном испарителе (остаточное давление 1-2 мм). Остаток растворяют в 200 мл воды, нагретой до температуры 50°C и экстрагируют 50 мл хлороформа. Водный слой отстаивают 24 ч при температуре 5°C. Осадок отфильтровывают и высушивают на воздухе. Получают 1,2 г смеси флавоноидов Лофанта анисового: выход составил 3% от массы воздушно-сухового сырья.

Пример 2. Исследовалось влияние смеси флавоноидов Лофанта анисового при курсовом пероральном введении в дозе 75 мг/кг на общее количество лейкоцитов и лейкоцитарную формулу.

Эксперимент проводился на половозрелых крысах линии Wistar. Животные были разделены на следующие группы: контрольная - особи, которые получали дистиллированную воду в эквивалентном объеме и опытная - особи получали смесь флавоноидов лофанта анисового при 10-ти дневном введении per os, в дозе 75 мг/кг. Результаты отражены в таб. № 1.

способ получения иммунотропного средства как основы для препарата   "иммунофлан", патент № 2491949

Как видно из представленной таблицы, курсовое введение смеси флавоноидов Лофанта анисового в дозе 75 мг/кг сопровождается увеличением общего количества лейкоцитов более чем на 20%, изменениями лейкоцитарной формулы в сторону преобладания сегментоядерной фракции нейтрофилов, что указывает на усиление неспецифической иммунореактивности. Отсутствие увеличения числа эозинофилов позволяет говорить о том, что смесь флавоноидов лофанта анисового не проявляет сенсибилизирующего воздействия на организм лабораторных животных.

Пример 3. Исследовалось влияние смеси флавоноидов Лофанта анисового при курсовом пероральном введении в дозе 75 мг/кг на клеточное, гуморальное и фагоцитарное звенья иммуногенеза.

Эксперимент проводился на половозрелых крысах линии Wistar. Животные были разделены на следующие группы: контрольная - особи, которые получали дистиллированную воду в эквивалентном объеме и опытная - особи получали смесь флавоноидов Лофанта анисового при 10-ти дневном введении per os, в дозе 75 мг/кг. При постановке РГЗТ и РПГА в качестве антигенного стимула использовали эритроциты барана. Результаты отражены в таб. № 2.

способ получения иммунотропного средства как основы для препарата   "иммунофлан", патент № 2491949

Представленные данные демонстрируют, что под влиянием флавоноидов Лофанта анисового происходит усиление клеточного ответа - показатель местной реакции ГЗТ увеличивался более чем на 35%. Кроме того, отмечена активация процессов фагоцитоза: фагоцитарный индекс и фагоцитарное число достоверно превышают показатели интактных животных, что так же, как и в примере 1, подтверждает, усиление неспецифической резистентности. Введение смеси флавоноидов лофанта анисового лабораторным животным не способствует изменению процессов антителообразования (таб. № 2).

Пример 4. Исследовалась способность смеси флавоноидов Лофанта анисового при курсовом пероральном введении в дозе 75 мг/кг устранять нарушения в процессах лейкопоэза, развивающиеся при циклофосфамидной иммунодепрессии.

Эксперимент проводился на половозрелых крысах линии Wistar. Животные были разделены на следующие группы: контроль № 1 (особи, которые получали дистиллированную воду в эквивалентном объеме), контроль № 2 (животные с иммунодепрессией, вызванной однократным внутрибрюшинным введением циклофосфамида в дозе 150 мг/кг) и опытная (особи с иммунодепрессией, получавшие per os смесь флавоноидов Лофанта анисового в дозе 75 мг/кг курсом 10 дней). Полученные результаты отражены в таблице № 3.

способ получения иммунотропного средства как основы для препарата   "иммунофлан", патент № 2491949

Как видно из представленной таблицы, однократное введение циклофосфамида в дозе 150 мг/кг сопровождается развитием выраженной цитопении (общее количество лейкоцитов уменьшается на 90%), происходит также резкое смещение лейкоцитарной формулы влево в связи с увеличение процентного содержания палочкоядерных нейтрофилов. Введение смеси флавоноидов животным с экспериментальной иммунодепрессией сопровождается восстановлением общего числа лейкоцитов до 36% от исходного уровня и тенденцией к нормализации лейкоцитарной формулы (таб. № 3).

Пример 5. Исследовалась способность смеси флавоноидов Лофанта анисового при курсовом пероральном введении в дозе 75 мг/кг устранять иммунные нарушения, развивающиеся при циклофосфамидной иммунодепрессии.

Эксперимент проводился на половозрелых крысах линии Wistar. Животные были разделены на следующие группы: контроль № 1 (особи, которые получали дистиллированную воду в эквивалентном объеме), контроль № 2 (животные с иммунодепрессией, вызванной однократным внутрибрюшинным введением циклофосфамида в дозе 150 мг/кг) и опытная (особи с иммунодепрессией, получавшие per os смесь флавоноидов Лофанта анисового в дозе 75 мг/кг курсом 10 дней). Полученные результаты отражены в таблице № 4.

способ получения иммунотропного средства как основы для препарата   "иммунофлан", патент № 2491949

Представленные в таблице № 4 данные демонстрируют, что индукция иммунодепрессии однократным введением циклофосфамида в дозе 150 мг/кг сопровождается усилением реакции на корпускулярный антиген (показатель реакции ГЗТ увеличился более чем в 5 раз) с одновременным снижением титра антиэритроцитарных антител (показатель РПГА уменьшился более чем в 2 раза). Активация в данном случае индекса РГЗТ при одновременном подавлении антителообразования обусловлена усилением активности Т-супрессорного звена иммунитета, что в итоге привело к угнетению антиэритроцитарного иммунного ответа. При введении смеси флавоноидов Лофанта анисового на фоне индуцированной патологии отмечалось практически восстановление местной реакции (более чем в 3 раза) и усиление процесса образования антиэритроцитарных антител (более чем в 1,5 раза) по сравнению с группой животных с иммунодепрессией (таб. № 4).

Таким образом, полученные в ходе доклинических испытаний, данные об иммунотропных и иммунотерапевтических свойствах смеси флавоноидов Лофанта анисового дают основания для использования данного средства как основы для разработки нового препарата «Иммунофлан», который может выпускаться в виде высушенного сырья, настоек и таблеток.

Литература.

1. Государственная фармакопея СССР XI, вып.2, с.147.

2. Фармация, 1994., N1, с.30-34.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ получения иммунотропного средства путем экстракции растительного сырья водным этиловым спиртом, отличающийся тем, что воздушно-сухие листья Lophanthus anisatus Benth (сорта «Астраханский 100» или «Астраханский 101») с размером частиц 1-3 мм, собранные в период цветения, заливают 60% водным раствором этанола из расчета 500 мл 60% этанола на 50 г воздушно-сухих листьев Lophanthus anisatus Benth, нагревают на водяной бане в течение 2,5 ч, затем раствор охлаждают до 50°C и отфильтровывают, а растворитель выпаривают на роторном испарителе до остаточного давления 1-2 мм рт.ст., остаток растворяют в 200 мл воды, нагретой до температуры 50°C, и экстрагируют хлороформом в количестве 50 мл, водный слой отстаивают 24 ч при температуре 5°C, осадок отфильтровывают и высушивают на воздухе.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2491949

patent-2491949.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K36/35 Caprifoliaceae (семейство жимолостных)

Патенты РФ в классе A61K36/35:
вагинальные суппозитории (варианты) -  патент 2514630 (27.04.2014)
антидиабетический сбор лекарственных растений -  патент 2480231 (27.04.2013)
суппозитории для лечения женской половой сферы, обладающие антимикробным, противовоспалительным и ранозаживляющим действием -  патент 2463069 (10.10.2012)
средство для лечения дисбиоза кишечника у больных с хроническим криптогенным гепатитом -  патент 2411955 (20.02.2011)
способ достижения ремиссии в отношении оппортунистических инфекций у больных вич -  патент 2367452 (20.09.2009)
способ получения иридоидов из коры калины обыкновенной -  патент 2362576 (27.07.2009)
применение композиции ингредиентов в качестве стресс-протективного средства -  патент 2339394 (27.11.2008)
гомеопатическое средство "анавиарин-гомеоантигриппин", обладающее противовирусным действием (варианты) -  патент 2311194 (27.11.2007)
вагинальные гомеопатические суппозитории в антикан (варианты) -  патент 2308963 (27.10.2007)
средство эндоэкологической коррекции и способ эндоэкологической коррекции, основанный на его применении -  патент 2297843 (27.04.2007)

Класс B01D11/02 твердых веществ 

Патенты РФ в классе B01D11/02:
способ получения спиртованных морсов для напитков -  патент 2529710 (27.09.2014)
применение ланохолестероловой фракции из шерстного жира в качестве биоэмульгатора для косметических антивозрастных средств -  патент 2526158 (20.08.2014)
способ экстракции цинка из донных осадков ионной жидкостью -  патент 2523469 (20.07.2014)
способ получения меланина из чаги -  патент 2523414 (20.07.2014)
способ выделения билогически активных компонентов из растительного сырья и средство на его основе -  патент 2523038 (20.07.2014)
способ получения фракции липофильных веществ из чаги -  патент 2522952 (20.07.2014)
способ получения средства, обладающего гепатопротекторным действием -  патент 2522281 (10.07.2014)
способ раздельного выделения дубильных веществ и флавоноидов из лекарственного растительного сырья -  патент 2522227 (10.07.2014)
комплекс биологически активных веществ для лечения и профилактики заболеваний сердечно-сосудистой системы -  патент 2520695 (27.06.2014)
средство, обладающее противоопухолевым и иммуномодулирующим действием -  патент 2519769 (20.06.2014)

Класс A61P37/02 иммуномодуляторы

Патенты РФ в классе A61P37/02:
способ лечения больных с онкологическими заболеваниями и/или иммунодепрессиями -  патент 2528877 (20.09.2014)
средство для лечения аутоиммунных заболеваний -  патент 2528337 (10.09.2014)
способ получения комплексного иммунометаболического препарата с антиинфекционной активностью -  патент 2527329 (27.08.2014)
способ получения комплексного антибактериального иммуномодулирующего препарата -  патент 2526184 (20.08.2014)
применение бензофенонового производного или его соли и ингибитора tnf- в комбинации, и фармацевтическая композиция, содержащая данное производное или его соль и ингибитор -  патент 2522272 (10.07.2014)
способ получения персонального препарата для лечения диабета, персональный препарат, полученный этим способом, способ лечения диабета этим препаратом -  патент 2522250 (10.07.2014)
фармацевтическая композиция, обладающая противотромботическим, тромболитическим, иммуномодулирующим, противовоспалительным действиями, нормализующая липидный и углеводный обмен -  патент 2519741 (20.06.2014)
производное 5-оксипиримидина, обладающее противоопухолевой активностью -  патент 2518889 (10.06.2014)
способ моделирования гиперчувствительности замедленного типа у морских свинок на микобактерии m.bovis -  патент 2517218 (27.05.2014)
средство, обладающее адаптогенной и иммуномодулирующей активностью -  патент 2516886 (20.05.2014)


Наверх