Поиск патентов
ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ

способ получения биологически активного препарата из скелетных мышц

Классы МПК:A61K38/00 Лекарственные препараты, содержащие пептиды
A61K35/34 мышцы; сердце
A61P19/00 Лекарственные средства для лечения заболеваний опорно-двигательного аппарата, костных тканей
Автор(ы):,
Патентообладатель(и):Федеральное государственное бюджетное учреждение "Российский научный центр "Восстановительная травматология и ортопедия" имени академика Г.А. Илизарова" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2011-10-11
публикация патента:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения биологически активного препарата. Способ получения биологически активного препарата из скелетных мышц животных, включающий забор материала животного с удлиняемой конечности по методу Илизарова, очистку материала, растирание его с кварцевым песком в растворе КС1 до получения однородного гомогената, затем гомогенат центрифугируют, полученный надосадок фильтруют, замораживают, лиофильно высушивают, стерилизуют при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет получить препарат, который способен стимулировать ростовые и регенеративные процессы в тканях опорно-двигательного аппарата. 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к биотехнологии в сфере получения биологически активных средств, и может быть использовано в целях активации репаративных процессов при нарушении трофики и повреждений тканей опорно-двигательного аппарата.

Известны способы получения комплексов биологически активных веществ из различных тканей животных, когда с целью повышения выхода биологически активных продуктов используют органы и ткани животных, находящихся либо в стадии регенерации (Патент РФ № 2041715), либо после физических воздействий (Патент РФ № 2071335).

Однако в данных способах в качестве сырья не используются скелетные мышцы, хотя они более доступны в качестве объекта для выделения биологически активных веществ, а их масса по отношению к другим органам существенно больше.

В способе получения биологически активного карнозин-анзеринсодержащего комплекса, выделяемого из скелетных мышц (Патент РФ № 2255758), обладающего антиоксидантной и иммуномодулирующей активностью, так же как и в двух выше указанных способах ничего не указано о биологически активных характеристиках препаратов по отношению к тканям опорно-двигательного аппарата (кость, мышца, нервы, сухожилия, сосуды).

Самым близким аналогом является способ получения супернатанта из скелетных мышц животных (Ерофеев С.А. и др. Биохимические исследования сыворотки крови и скелетных мышц при удлинении голени аппаратом Илизарова с темпом дистракции 3 мм в сутки в автоматическом режиме // Вестник новых медицинских технологий. 2005. Т.XII, № 3-4. С.89-91). В данном способе в качестве сырья используют переднюю большеберцовую мышцу, взятую у собаки с удлиняемой конечности по методу Илизарова с режимом удлинения 1 мм в сутки за 4 приема, полученный материал растирают с кварцевым песком в 0,03М растворе KCl при 5-8°С до получения однородного гомогената, затем гомогенат центрифугируют в течение 10 минут при 14000g, полученный надосадок исследуют.

Задачей настоящего изобретения является разработка относительно простого способа получения из скелетных мышц композиции биологически активных веществ, обладающих биоактивными свойствами по отношению к тканям опорно-двигательного аппарата.

Указанная задача достигается тем, что делают забор материала животного с удлиняемой конечности по методу Илизарова, очищают, растирают его с кварцевым песком в 0,03 М растворе KCl - 1:9 соответственно в течение 5 минут, гомогенат центрифугируют в течение 11 минут, полученный надосадок фильтруют, замораживают при -70°С, лиофильно высушивают, стерилизуют.

Способ поясняют подробным описанием изготовления препарата и клиническими примерами его использования

Способ осуществляется следующим образом.

Переднюю большеберцовую мышцу (и/или длинный разгибатель пальцев), взятую у собаки с удлиняемой конечности на 14-е сутки удлинения по методу Илизарова с режимом удлинения 1 мм в сутки за 4 приема, сразу после забора очищают от остатков жировой и соединительной ткани. Далее материал отмывают от эритроцитов в 0,03М растворе KCl при 5-8°С, измельчают. Измельченную массу на холоду растирают с кварцевым песком в 0,03М растворе KCl при 5-8°С до получения однородного гомогената. Соотношение объемов ткань : экстрагирующий раствор (0,03М KCl) - 1:9. После 5 минут экстрагирования при 5-8°С гомогенат центрифугируют в течение 11 минут при 14000g. Полученный надосадок фильтруют через четыре слоя марли, замораживают при -70°С, лиофильно высушивают, стерилизуют.

Пример выполнения способа.

У экспериментального животного (собака № 4590) проводили удлинение костей правой голени по методу Илизарова с режимом удлинения 1 мм в сутки за 4 приема. На 14-е сутки дистракции, после эвтаназии, у этого животного, с удлиняемой конечности была взята передняя большеберцовая мышца. Затем мышцу очистили от остатков жировой и соединительной ткани, отмыли от эритроцитов в 0,03М растворе KCl при 5-8°С, измельчили. Измельченную массу на холоду растерли с кварцевым песком в 0,03М растворе KCl (соотношение объемов ткань : экстрагирующий раствор - 1:9) до получения однородного гомогената. После 5 минут экстрагирования при 5-8°С гомогенат центрифугировали в течение 11 минут при 14000g. Полученный надосадок отфильтровали в пенициллиновые флаконы через четыре слоя марли. После замораживания при -70°С препарат лиофильно высушили, простерилизовали.

Оценка биологической активности препарата.

Пример 1. Полученный от животного № 4590 препарат использовали для стимуляции репаративных процессов в тканях опорно-двигательного аппарата на модели удлинения костей голени с режимом удлинения 1,5 мм в сутки за 6 приемов. Препарат, из расчета 1 мг/кг массы тела, растворили в 5 мл физиологического раствора и вводили собаке № способ получения биологически активного препарата из скелетных   мышц, патент № 2476234 5035 на 10-е сутки удлинения внутримышечно по 1 мл в проксимальный и дистальный участок передней большеберцовой мышцы удлиняемого сегмента конечности и 1 мл в медиальную головку икроножной мышцы удлиняемого сегмента конечности. Для контроля, собаке № способ получения биологически активного препарата из скелетных   мышц, патент № 2476234 5069 на аналогичной модели, в аналогичные сроки, по той же схеме внутримышечно вводили аналогичный объем физиологического раствора.

Комплекс рентгенологических, физиологических, гистоморфологических и биохимических исследований обнаружил значительную активацию у животного № 5035, относительно животного № 5069, репаративных механизмов в тканях удлиняемого сегмента конечности. В частности, формирование полноценного костного регенерата у животного № 5035 отмечалось на 19-е сутки фиксации, у № 5069 - на 30-е. Кроме того, у собаки № 5035 после введения препарата отмечалась заметная активация мио-, хондро-, остео- и ангиогенеза, уровень белка в скелетных мышцах удлиняемого сегмента был выше относительно животного № 5069.

Пример 2. Полученный от животного № 4590 препарат использовали для стимуляции процессов роста у крысят-отъемышей. Использовали 6 животных (самцы) из одного помета, из которых трем крысятам на 2-й, 4-й, 6-й неделе онтогенеза внутримышечно вводили 0,1 мл тестируемой композиции, приготовленной на физиологическом растворе из расчета 1 мг/кг массы тела. Трем другим крысятам в эти же сроки внутримышечно вводили 0,1 мл физиологического раствора. Средние значения прироста массы животных, которым вводили тестируемую композицию, были на 27,7% выше прироста массы тела животных, которым вводили физиологический раствор.

Предложенный способ прост в использовании и позволяет получать из доступного материала значительные количества биологический активных веществ, способных стимулировать ростковые и регенеративные процессы в тканях опорно-двигательного аппарата.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ получения биологически активного препарата из скелетных мышц животных, включающий забор материала животного с удлиняемой конечности по методу Илизарова, очистку материала, растирание его с кварцевым песком в 0,03М растворе КСl при 5-8°С до получения однородного гомогената, затем гомогенат центрифугируют при 14000g, отличающийся тем, что материал растирают с кварцевым песком при соотношении его в 0,03М растворе КСl - 1:9 соответственно в течение 5 мин, гомогенат центрифугируют в течение 11 мин, полученный надосадок фильтруют, замораживают при -70°С, лиофильно высушивают, стерилизуют.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2476234

patent-2476234.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K38/00 Лекарственные препараты, содержащие пептиды

Патенты РФ в классе A61K38/00:
способ лечения рака толстой кишки -  патент 2529831 (27.09.2014)
внутрижелудочковая доставка ферментов при лизосомных болезнях накопления -  патент 2529830 (27.09.2014)
стабильные составы бортезомиба -  патент 2529800 (27.09.2014)
композиции для усиления антибактериальной активности миелопероксидазы и способы их применения -  патент 2529799 (27.09.2014)
способ лечения больных с синдромом внутрипеченочной портальной гипертензии -  патент 2529414 (27.09.2014)
фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа -  патент 2529373 (27.09.2014)
модульный молекулярный конъюгат для направленной доставки генетических конструкций и способ его получения -  патент 2529034 (27.09.2014)
лейколектины и их применение -  патент 2528860 (20.09.2014)
модифицированный фактор виллебранда с удлиненным полупериодом существования in vivo, его применения и способы получения -  патент 2528855 (20.09.2014)
применение пептида актг (4-7)-пгп гепатопротекторного воздействия -  патент 2528741 (20.09.2014)

Класс A61K35/34 мышцы; сердце

Патенты РФ в классе A61K35/34:
способ создания продукта спортивного питания -  патент 2524550 (27.07.2014)
композиции фрагментов ткани для лечения недержания -  патент 2459627 (27.08.2012)
способ получения цитохрома с -  патент 2435597 (10.12.2011)
способ получения средства, обладающего тканеспецифической активностью, и средство, полученное данным способом (варианты) -  патент 2415676 (10.04.2011)
способ лечения нарушений липидного обмена и снижения массы тела у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями -  патент 2384340 (20.03.2010)
внутриматочное средство для лечения и профилактики вульвовагинитов у коров и способ его применения -  патент 2375067 (10.12.2009)
способ получения биологически активного продукта из хвостов пантовых оленей -  патент 2327476 (27.06.2008)
способ профилактики осложнений химиотерапии при лечении онкологического заболевания -  патент 2308956 (27.10.2007)
способ клонирования in vitro регионарных клеток-предшественников сердца -  патент 2308280 (20.10.2007)
способ получения модифицированного биоматериала для использования в офтальмологии "склероплант м" -  патент 2290900 (10.01.2007)

Класс A61P19/00 Лекарственные средства для лечения заболеваний опорно-двигательного аппарата, костных тканей

Патенты РФ в классе A61P19/00:
биологический материал, подходящий для терапии остеоартроза, повреждения связок и для лечения патологических состояний суставов -  патент 2529803 (27.09.2014)
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
способ восстановительного лечения нервно-мышечного аппарата у больных с ложным суставом шейки бедренной кости после эндопротезирования тазобедренного сустава -  патент 2528637 (20.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
способ приготовления средства, обладающего свойством стимуляции регенерации хрящевой, костной, мышечной тканей и способ стимуляции регенерации хрящевой, костной, мышечной тканей с использованием приготовленного средства -  патент 2527701 (10.09.2014)
ингибиторы поли(адф-рибозо)полимеразы-1 человека на основе производных урацила -  патент 2527457 (27.08.2014)
способ сопроводительного лечения при эндопротезировании крупных суставов -  патент 2527159 (27.08.2014)
способ лечения артрита -  патент 2526201 (20.08.2014)
комбинированные препараты с антагонистом цитокина и кортикостероидом -  патент 2526161 (20.08.2014)
новый пептид и его применение -  патент 2525913 (20.08.2014)

Наверх