способы и композиции, повышающие переносимость пациентом методов визуализации миокарда

Формула изобретения

1. Фармацевтическая композиция для повышения переносимости пациентом визуализации миокарда, содержащая, от приблизительно 50 мг до приблизительно 1000 мг кофеина, по меньшей мере, 10 мкг регаденозона, и, по меньшей мере, один фармацевтический наполнитель.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой количество регаденозона составляет от приблизительно 10 мкг до приблизительно 600 мкг.

3. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой количество кофеина составляет от, приблизительно, 100 мг до, приблизительно, 500 мг.

4. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой количество кофеина составляет от, приблизительно, 200 мг до, приблизительно, 400 мг.

5. Применение от приблизительно 50 мг до приблизительно 1000 мг кофеина и, по меньшей мере, 10 мкг регаденозона для повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего.

6. Применение по п.5, где кофеина вводят до введения регаденозона.

7. Применение по п.5, где кофеин вводят одновременно с введением регаденозона.

8. Применение по п.6, где кофеин вводят не более чем за 120 мин до введения регаденозона.

9. Применение по п.6, где кофеин вводят не более чем за 30 мин до введения регаденозона.

10. Применение по п.5, где кофеин и регаденозон вводят в виде одной фармацевтической композиции.

11. Применение по п.5, где регаденозон вводят в количестве, составляющем от приблизительно 10 мкг до приблизительно 600 мкг.

12. Применение по п.5, где регаденозон вводят в количестве, составляющем от приблизительно 100 мкг до приблизительно 500 мкг.

13. Применение по п.11 или 12, где регаденозон вводят в однократной дозе.

14. Применение по п.11 или 12, где регаденозон вводят путем в/в болюсного вливания.

15. Применение по п.5, где млекопитающим является человек.

16. Применение от приблизительно 50 мг до приблизительно 1000 мг кофеина, радионуклида и регаденозона в количестве, составляющем от приблизительно 10 мкг до приблизительно 600 мкг для повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у человека, где исследование миокарда проводят путем определения площадей недостаточного кровотока после введения радионуклида и регаденозона.

17. Применение по п.16, где радионуклид и регаденозон вводят раздельно.

18. Применение по п.16, где радионуклид и регаденозона вводят одновременно.

19. Применение по п.16, где кофеин и регаденозон вводят раздельно и кофеин вводят не более, чем за 120 мин до введения регаденозона.

20. Применение однократного в/в болюсного вливания от приблизительно 50 мг до приблизительно 1000 мг кофеина и от приблизительно 10 мкг до приблизительно 600 мкг регаденозона для повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у человека.

21. Применение по п.20, где регаденозон вводят в количестве, составляющем от приблизительно 100 мкг до приблизительно 500 мкг.

22. Применение по п.20, где кофеин вводят в количестве, составляющем от приблизительно 100 мг до приблизительно 500 мг.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Данное изобретение касается способов и композиций, повышающих переносимость пациентом визуализации миокарда, включающей введение доз кофеина и одного или более агонистов A2A-аденозинового рецептора млекопитающему, подвергаемому визуализации миокарда.

Описание уровня техники

Визуализация миокардиальной перфузии (MPI) является диагностическим методом, полезным для выявления и характеризации заболевания коронарной артерии. Визуализация перфузии основана на применении таких материалов, как радионуклиды, для идентификации площадей недостаточного кровотока. При MPI кровоток оценивают в состоянии покоя и результат сравнивают с кровотоком, измеренным при физической нагрузке на бегущей дорожке (кардиальная нагрузочная проба), такое напряжение необходимо для стимуляции кровотока. К сожалению, многие пациенты не способны создать физическое напряжение на уровнях, необходимых для создания достаточного кровотока, вследствие заболеваний, таких как болезнь периферических сосудов, артрит и тому подобное.

Поэтому большую помощь могут оказать фармакологические средства, повышающие CBF на короткий период времени, в особенности, указанные средства, не вызывающие периферическую вазодилатацию. В настоящее время известно несколько разнотипных вазодилататоров, применяемых при визуализации перфузии. Дипиридамол является одним из таких эффективных вазодилататоров, но побочные эффекты, такие как боль и тошнота, ограничивают полезность обработки таким соединением.

Другим продаваемым вазодилататором является AdenoScan® (Astellas Pharma US, Inc.), который представляет собой состав на основе природного аденозина. Аденозин, природный нуклеозид, оказывает биологическое действие, взаимодействуя с семейством аденозиновых рецепторов, описываемых субтипами A₁, A_2A, A_2B и A₃. К сожалению, применение аденозина ограничивается побочными действиями, такими как гиперемия, дискомфорт в области груди, стремление глубоко дышать, головная боль, боль в горле, шее и челюсти. Такие нежелательные действия аденозина обусловлены активацией других субтипов аденозинового рецептора, помимо A_2A, опосредующего сосудорасширяющие действия аденозина. Кроме того, короткое время полужизни аденозина неизбежно влечет за собой многократную обработку во время процедуры, дополнительно ограничивая применение указанного препарата.

Известны другие эффективные и избирательные агонисты A_2A-аденозинового рецептора. Например, MRE-0470 (Medco) является агонистом A_2A-аденозинового рецептора, а именно эффективным и избирательным производным аденозина. WRC-0470 (Medco) является агонистом A_2A-аденозинового рецептора, используемым в качестве адъюванта при визуализации. Эти соединения обладают высоким сродством к рецептору A_2A и, следовательно, продолжительным действием, что нежелательно при визуализации.

Таким образом, все еще существует потребность в способе создания быстрой и максимальной коронарной вазодилатации у млекопитающих, не вызывая при этом соответствующей периферической вазодилатации, что было бы полезно при визуализации миокарда с помощью радионуклидных агентов. Предпочтительные соединения должны быть избирательными в отношении A_2A-аденозинового рецептора и должны обладать кратковременным действием (хотя более длительным действием, чем такие соединения, как аденозин), что позволит таким образом избежать многократного дозирования.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ниже перечислены аспекты данного изобретения.

Фармацевтическая композиция, содержащая от 50 мг до 1000 мг кофеина, по меньшей мере, 10 мкг, по меньшей мере, одного частичного агониста рецептора A_2A и, по меньшей мере, один фармацевтический наполнитель.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества кофеина и, по меньшей мере, 10 мкг, по меньшей мере, одного частичного агониста рецептора A_2A, в котором кофеин вводят млекопитающему одновременно, по меньшей мере, с одним частичным агонистом рецептора A_2A или раньше.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение млекопитающему кофеина и не более чем около 1000 мкг частичного агониста рецептора A _2A.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение млекопитающему кофеина и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 мкг до 600 мкг.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором частичный агонист рецептора A_2A вводят в однократной дозе.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором частичный агонист рецептора A_2A вводят путем в/в болюсного вливания.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором частичный агонист рецептора A_2A вводят приблизительно менее чем за 10 секунд.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A _2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором частичный агонист рецептора A _2A вводят в количестве, большем, чем около 10 мкг.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, а котором частичный агонист рецептора A_2A вводят в количестве, большем, чем около 100 мкг.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором частичный агонист рецептора A_2A вводят в количестве, не превышающем 600 мкг.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A _2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором частичный агонист рецептора A _2A вводят в количестве, не превышающем 500 мкг.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором частичный агонист рецептора A_2A вводят в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 100 до 500 мкг.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором частичный агонист рецептора A_2A выбирают из группы, включающей CVT-3033, регаденозон и комбинации указанных соединений.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором проводят исследование миокарда путем определения площадей недостаточного кровотока после введения радионуклида и частичного агониста рецептора A _2A.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором проводят исследование миокарда путем определения площадей недостаточного кровотока после введения радионуклида и частичного агониста рецептора A_2A, где изучение миокарда начинают не позднее примерно 1 минуты с момента введения частичного агониста рецептора A _2A.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором введение частичного агониста рецептора A_2A вызывает, по меньшей мере, 2,5-кратное увеличение коронарного кровотока.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором введение частичного агониста рецептора A_2A вызывает, по меньшей мере, 2,5-кратное увеличение коронарного кровотока, которое достигается приблизительно за 1 минуту с момента введения частичного агониста рецептора A_2A.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором радионуклид и частичный агонист рецептора A_2A вводят раздельно.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором радионуклид и частичный агонист рецептора A_2A вводят одновременно.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A_2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором введение частичного агониста рецептора A_2A вызывает, по меньшей мере, 2,5-кратное увеличение коронарного кровотока приблизительно менее чем за 5 минут.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и радионуклида, и частичного агониста рецептора A _2A в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, в котором введение частичного агониста рецептора A_2A вызывает, по меньшей мере, 2,5-кратное увеличение коронарного кровотока приблизительно менее чем за 3 минуты.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и регаденозона в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 600 мкг, путем однократного в/в болюсного вливания.

Способ повышения переносимости пациентом индуцируемой вазодилататором стрессовой визуализации миокардиальной перфузии у млекопитающего, включающий введение кофеина и регаденозона в количестве, изменяющемся в диапазоне приблизительно от 10 до 500 мкг, путем однократного в/в болюсного вливания.

Во всех вышеперечисленных способах млекопитающим является, как правило, человек.

Во всех вышеперечисленных способах дозу вводят, как правило, путем однократного в/в болюсного вливания.

Во всех вышеперечисленных способах, по меньшей мере, один радионуклид вводят до, во время или после введения агониста рецептора A _2A для обеспечения визуализации миокарда.

ОПИСАНИЕ ФИГУР

Фиг.1 представляет линейные графики, отражающие изменение коронарного кровотока (CBF) с течением времени после введения (двукратного) регаденозона (5 мкг/кг, в/в) (штрихпунктирная линия показывает 2-кратное увеличение CBF). Величины приведены как среднее значение ± SEM.

Фиг.2 представляет изменение коронарного кровотока (CBF) с течением времени в отсутствие и присутствии кофеина после введения регаденозона (5 мкг/кг, в/в). Панели A, B, C и D представляют CBF в отсутствии или присутствии кофеина при 1, 2, 4 и 10 мг/кг. Величины приведены как среднее значение ± SEM, #P<0,05, в сравнении с контролем.

Фиг.3 представляет концентрации регаденозона (верхняя панель) и кофеина (нижняя панель) после в/в введения. Величины приведены как среднее значение ± SEM.

Фиг.4 представляет линейные графики, отражающие процентные изменения в максимальном увеличении CBF и длительности 2-кратного увеличения CBF, вызванных регаденозоном (5 мкг/кг, в/в). В присутствии кофеина максимальное увеличение CBF, вызванное регаденозоном, существенно не изменяется, однако длительности 2-кратного увеличения CBF, вызванного регаденозоном, снижаются дозозависимым способом. Величины приведены как среднее значение ± SEM, #P<0,05, в сравнении с контролем.

Фиг.5 приводит результаты анкетирования на переносимость, описанные в примере 2.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Эффективные частичные агонисты A_2A полезны в качестве вспомогательных веществ при визуализации сердца, добавляемых либо перед дозированным введением радиофармацевтического средства, либо одновременно с радиофармацевтическим средством. Подходящими радиофармацевтическими средствами являются ²⁰¹таллий или ^99mтехнеций-сестамиби, ^99mTcтебороксим и ^99mtc(III).

Композиции могут быть введены перорально, внутривенно, через слой эпидермиса или любыми другими известными из уровня техники способами введения терапевтических средств, при этом предпочтительно введение путем в/в болюсного вливания.

Идентифицированы новые и эффективные частичные агонисты A_2A, которые увеличивают CBF, но несущественно увеличивают периферийный кровоток. Частичные агонисты A_2A и, в особенности, регаденозон и CVT-3033 характеризуются быстрым и кратковременным действием при введении. Неожиданное и недавно установленное преимущество таких новых соединений состоит в том, что указанные соединения очень полезны при введении в очень небольшом количестве в виде одной болюсной внутривенной инъекции. Частичные агонисты рецептора A_2A могут быть введены в столь малых количествах, как 10 мкг и до 600 мкг или более, и все же быть эффективными при незначительных побочных эффектах. Оптимальная внутривенная доза включает приблизительно от 100 до 500 мкг, по меньшей мере, одного частичного агониста рецептора A_2A. Такое количество неожиданно мало по сравнению с аденозином, который обычно вводят непрерывно путем однократного в/в вливания при скорости около 140 мкг/кг/мин. В отличие от аденозина та же самая доза частичного агониста рецептора A_2A, в частности регаденозона и CVT-3033, может быть введена больному человеку независимо от массы пациента. Таким образом, введение стандартной дозы частичного агониста рецептора A_2A путем в/в болюсного вливания для визуализации миокарда значительно проще и менее подвержено ошибкам, чем зависящее от времени и массы введение аденозина.

Неожиданно было обнаружено, что кофеин улучшает переносимость пациентом частичного агониста рецептора A_2A, вводимого при визуализации миокарда. В частности, переносимость пациентом улучшается, когда кофеин вводят пациенту либо перед введением, либо одновременно с введением частичного агониста рецептора A _2A. Улучшение переносимости пациентом демонстрируется, например, снижением CBF и/или сообщениями больных, подтверждающих, что введение кофеина улучшает переносимость частичного агониста рецептора A_2A, регаденозона.

Кофеин может быть введен больному млекопитающему, предпочтительно человеку, перед введением частичного агониста рецептора A_2A. Предварительное введение означает введение на момент, предшествующий введению частичного агониста рецептора A_2A, что позволяет поддерживать терапевтически эффективное количество кофеина в крови млекопитающего на момент введения частичного агониста рецептора A_2A. Более предпочтительно, предварительное введение означает введение кофеина не более чем, приблизительно, за 120 минут до введения и еще предпочтительнее не более чем за 30 минут до введения частичного агониста рецептора A_2A.

Альтернативно, кофеин может быть введен в то же самое время, что и частичный агонист рецептора A_2A. С этой целью кофеин может быть включен в фармацевтическую композицию, содержащую частичный агонист рецептора A_2A, или может быть введен в виде отдельной фармацевтической композиции.

Кофеин вводят млекопитающим согласно способам и композициям данного изобретения в терапевтически эффективном количестве. Терапевтически эффективным количеством является количество кофеина, достаточное для получения улучшения переносимости млекопитающим введения частичного агониста рецептора A_2A. Обычно терапевтически эффективное количество соответствует дозе кофеина, изменяющейся в диапазоне от приблизительно 50 мг до приблизительно 1000 мг. Более предпочтительно, доза кофеина составляет от приблизительно 100 мг до приблизительно 500 мг. Наиболее предпочтительно, доза кофеина составляет от приблизительно 200 мг до приблизительно 400 мг.

Кофеин может быть введен млекопитающему в жидком или твердом фармацевтическом препарате. Как указано выше, кофеин может быть введен вместе с частичным агонистом рецептора A_2A или независимо. Если кофеин вводят вместе с частичным агонистом рецептора A_2A, то предпочтительно вводить комбинированный препарат путем однократного в/в болюсного вливания. Если кофеин вводят независимо, т.е. отдельно от частичного агониста рецептора A_2A, то кофеин может быть введен любым известным способом, включая способ твердой пероральной лекарственной формы - таблетки, способ в/в инфузии, или в/в болюсного вливания, или в виде жидкости, такой как жидкость с добавкой кофеина, или в виде жидкости, содержащей природный кофеин, такой как кофе или чай.

Фармацевтические композиции, включающие соединения по данному изобретению, и/или соответствующие производные могут быть изготовлены в виде растворов или лиофилизованных порошков для парентерального введения. Порошки могут быть перерастворены путем добавления подходящего разбавителя или другого фармацевтически приемлемого носителя перед применением. При использовании в жидкой форме композиции по настоящему изобретению предпочтительно включены в буферный, изотонический, водный раствор. Примерами подходящих водных разбавителей являются нормальный изотонический солевой раствор, стандартный 5% раствор декстрозы в воде и буферный раствор ацетата натрия или аммония. Такие жидкие составы удобны для парентерального введения, но могут также быть использованы для перорального введения. В фармацевтические композиции, включающие соединения по данному изобретению, может быть желательно ввести наполнители, такие как поливинилпирролидинон, желатин, гидроксицеллюлоза, аравийская камедь, полиэтиленгликоль, маннит, хлорид натрия, цитрат натрия или любой другой наполнитель, известный специалисту в данной области.

Первым классом соединений, эффективных и избирательных агонистов A_2A-аденозинового рецептора, полезных в способах по данному изобретению, являются соединения 2-аденозин-N-пиразола, имеющие формулу:

где

R¹ = CH₂OH, -CONR⁵R⁶;

R² и R⁴ выбирают из группы, состоящей из H, C_1-6-алкила и арила, где алкильные и арильные заместители, необязательно, замещены галогеном, CN, CF₃, OR ²⁰ и N(R²⁰)₂ при условии, что когда R² не является водородом, то R⁴ означает водород, и когда R⁴ не является водородом, то R ² означает водород;

R³ независимо выбирают из группы, включающей C_1-15-алкил, галоген, NO₂, CF₃, CN, OR²⁰, SR²⁰ , N(R²⁰)₂, S(O)R²², SO₂ R²², SO₂N(R²⁰)₂, SO₂NR²⁰COR²², SO₂ NR²⁰CO₂R²², SO₂NR ²⁰CON(R²⁰)₂, N(R²⁰) ₂NR²⁰COR²², NR²⁰CO ₂R²², NR²⁰CON(R²⁰) ₂, NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³, COR ²⁰, CO₂R²⁰, CON(R²⁰) ₂, CONR²⁰SO₂R²², NR ²⁰SO₂R²², SO₂NR²⁰ CO₂R²², OCONR²⁰SO₂ R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH₂OC(O)R ²⁰ и OCON(R²⁰)₂, -CONR⁷ R⁸, C_2-15-алкенил, C_2-15-алкинил, гетероциклил, арил и гетероарил, где алкильный, алкенильный, алкинильный, арильный, гетероциклильный и гетероарильный заместители, необязательно, замещены 1-3 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, алкил, NO₂, гетероциклил, арил, гетероарил, CF₃, CN, OR²⁰, SR ²⁰, N(R²⁰)₂, S(O)R²², SO₂R²², SO₂N(R²⁰) ₂, SO₂NR²⁰COR²², SO ₂NR²⁰CO₂R²², SO₂ NR²⁰CON(R²⁰)₂, N(R²⁰ )₂NR²⁰COR²², NR²⁰ CO₂R²², NR²⁰CON(R²⁰ )₂, NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³ , COR²⁰, CO₂R²⁰, CON(R²⁰ )₂, CONR²⁰SO₂R²², NR²⁰SO₂R²², SO₂NR ²⁰CO₂R²², OCONR²⁰SO ₂R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH₂ OC(O)R²⁰ и OCON(R²⁰)₂, и где необязательные замещенные гетероарильный, арильный и гетероциклильный заместители, необязательно, замещены галогеном, NO₂ , алкилом, CF₃, амино, моно- или диалкиламино, алкил- или арил-, или гетероариламидом, NCOR²², NR²⁰ SO₂R²², COR²⁰, CO₂ R²⁰, CON(R²⁰)₂, NR²⁰ CON(R²⁰)₂, OC(O)R²⁰, OC(O)N(R ²⁰)₂, SR²⁰, S(O)R²², SO ₂R²², SO₂N(R²⁰)₂ , CN или OR²⁰;

каждый из R⁵ и R⁶ индивидуально выбирают из группы, включающей H и C₁-C₁₅-алкил, который, необязательно, замещен 1-2 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, NO₂, гетероциклил, арил, гетероарил, CF₃, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R ²⁰)₂, S(O)R²², SO₂R ²², SO₂N(R²⁰)₂, SO ₂NR²⁰COR²², SO₂NR ²⁰CO₂R²², SO₂NR²⁰ CON(R²⁰)₂, N(R²⁰)₂ NR²⁰COR²², NR²⁰CO₂ R²², NR²⁰CON(R²⁰)₂ , NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³, COR ²⁰, CO₂R²⁰, CON(R²⁰) ₂, CONR²⁰SO₂R²², NR ²⁰SO₂R²², SO₂NR²⁰ CO₂R²², OCONR²⁰SO₂ R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH₂OC(O)R ²⁰ и OCON(R²⁰)₂, где каждый необязательный замещенный гетероарильный, арильный и гетероциклильный заместитель, необязательно, замещен галогеном, NO₂, алкилом, CF ₃, амино, моноалкиламино, диалкиламино, алкиламидом, ариламидом, гетероариламидом, NCOR²², NR²⁰SO₂ R²², COR²⁰, CO₂R²⁰ , CON(R²⁰)₂, NR²⁰CON(R²⁰ )₂, OC(O)R²⁰, OC(O)N(R²⁰) ₂, SR²⁰, S(O)R²², SO₂R ²², SO₂N(R²⁰)₂, CN и OR ²⁰;

каждый из R⁷ и R⁸ независимо выбирают из группы, включающей водород, C_1-15 -алкил, C_2-15-алкенил, C_2-15-алкинил, гетероциклил, арил и гетероарил, где алкильный, алкенильный, алкинильный, арильный, гетероциклильный и гетероарильный заместители, необязательно, замещены 1-3 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, NO₂, гетероциклил, арил, гетероарил, CF₃, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R ²⁰)₂, S(O)R²², SO₂R ²², SO₂N(R²⁰)₂, SO ₂NR²⁰COR²², SO₂NR ²⁰CO₂R²², SO₂NR²⁰ CON(R²⁰)₂, N(R²⁰)₂ NR²⁰COR²², NR²⁰CO₂ R²², NR²⁰CON(R²⁰)₂ , NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³, COR ²⁰, CO₂R²⁰, CON(R²⁰) ₂, CONR²⁰SO₂R²², NR ²⁰SO₂R²², SO₂NR²⁰ CO₂R²², OCONR²⁰SO₂ R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH₂OC(O)R ²⁰ и OCON(R²⁰)₂, и где каждый необязательный замещенный гетероарильный, арильный и гетероциклильный заместитель, необязательно, замещен галогеном, NO₂, алкилом, CF ₃, амино, моно- или диалкиламино, алкил- или арил-, или гетероариламидом, NCOR²², NR²⁰SO₂ R²², COR²⁰, CO₂R²⁰ , CON(R²⁰)₂, NR²⁰CON(R²⁰ )₂, OC(O)R²⁰, OC(O)N(R²⁰) ₂, SR²⁰, S(O)R²², SO₂R ²², SO₂N(R²⁰)₂, CN и OR ²⁰;

R²⁰ выбирают из группы, включающей H, C_1-15-алкил, C_2-15-алкенил, C_2-15 -алкинил, гетероциклил, арил и гетероарил, где алкильный, алкенильный, алкинильный, гетероциклильный, арильный и гетероарильный заместители, необязательно, замещены 1-3 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, алкил, моно- или диалкиламино, алкил- или арил-, или гетероариламид, CN, O-C_1-6-алкил, CF₃, арил и гетероарил; и

R²² выбирают из группы, включающей C_1-15-алкил, C _2-15-алкенил, C_2-15-алкинил, гетероциклил, арил и гетероарил, где алкильный, алкенильный, алкинильный, гетероциклильный, арильный и гетероарильный заместители, необязательно, замещены 1-3 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, алкил, моно- или диалкиламино, алкил- или арил-, или гетероариламид, CN, O-C_1-6-алкил, CF₃, арил и гетероарил.

В родственной группе соединений по данному изобретению

R³ выбирают из группы, включающей C_1-15-алкил, галоген, CF ₃, CN, OR²⁰, SR²⁰, S(O)R²² , SO₂R²², SO₂N(R²⁰ )₂, COR²⁰, CO₂R²⁰ , -CONR⁷R⁸, арил и гетероарил, где алкильный, арильный и гетероарильный заместители, необязательно, замещены 1-3 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, арил, гетероарил, CF₃, CN, OR²⁰ , SR²⁰, S(O)R²², SO₂R²² , SO₂N(R²⁰)₂, COR²⁰ , CO₂R²⁰, CON(R²⁰)₂ или OCON(R²⁰)₂, и каждый необязательный замещенный гетероарильный, арильный и гетероциклильный заместитель, необязательно, замещен галогеном, алкилом, CF₃, CN и OR²⁰;

R⁵ и R⁶ независимо выбирают из группы, включающей H и C₁-C ₁₅-алкил, содержащий один необязательный арильный заместитель, который необязательно замещен галогеном или CF₃;

R⁷ выбирают из группы, включающей C _1-15-алкил, C_2-15-алкинил, арил и гетероарил, где алкильный, алкинильный, арильный и гетероарильный заместители, необязательно, замещены 1-3 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, арил, гетероарил, CF₃ , CN, OR²⁰, и каждый необязательный гетероарильный и арильный заместитель необязательно замещен галогеном, алкилом, CF₃, CN и OR²⁰;

R⁸ выбирают из группы, включающей галоген и C_1-15-алкил;

R²⁰ выбирают из группы, включающей H, C_1-4-алкил и арил, где алкильный и арильный заместители, необязательно, замещены одним алкильным заместителем; и

R²² выбирают из группы, включающей C_1-4 -алкил и арил, каждый из которых, необязательно, замещен 1-3 алкильными группами.

В еще одном родственном классе соединений,

R¹ означает CH₂ OH;

R³ выбирают из группы, включающей CO₂R²⁰, -CONR⁷R⁸ и арил, где арильный заместитель, необязательно, замещен 1-2 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, C_1-6-алкил, CF₃ и OR²⁰;

R⁷ выбирают из группы, включающей водород, C_1-8 -алкил и арил, где алкильный и арильный заместители, необязательно, замещены одним заместителем, выбираемым из группы, включающей галоген, арил, CF₃, CN, OR²⁰, и где каждый необязательный арильный заместитель необязательно замещен галогеном, алкилом, CF₃, CN и OR²⁰;

R⁸ выбирают из группы, включающей водород и C _1-8-алкил; и

R²⁰ выбирают из группы, включающей водород и C_1-4-алкил.

В еще одном родственном классе соединений по данному изобретению

R¹ = CH₂OH;

R³ выбирают из группы, включающей CO₂R ²⁰, -CONR⁷R⁸ и арил, который необязательно замещен одним заместителем, выбираемым из группы, включающей галоген, C_1-3-алкил и OR²⁰;

R⁷ выбирают из группы, включающей водород и C _1-3-алкил;

R⁸ означает водород и

R²⁰ выбирают из группы, включающей водород и C_1-4-алкил.

В данном предпочтительном варианте осуществления R³, наиболее предпочтительно, выбирают из CO₂Et и -CONHEt.

В еще одном родственном классе соединений

R¹ = -CONHEt;

R³ выбирают из группы, включающей CO₂R²⁰, -CONR⁷R ⁸ и арил, где арил необязательно замещен 1-2 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, C_1-3 -алкил, CF₃ или OR²⁰;

R ⁷ выбирают из группы, включающей водород и C_1-8 -алкил, который, необязательно, замещен одним заместителем, выбираемым из группы, включающей галоген, CF₃, CN или OR ²⁰;

R⁸ выбирают из группы, включающей водород и C_1-3-алкил; и R²⁰ выбирают из группы, включающей водород и C_1-4-алкил.

В данном предпочтительном варианте осуществления R⁸ предпочтительно означает водород, R⁷ предпочтительно выбирают из группы, включающей водород и C_1-3-алкил, и R²⁰ предпочтительно выбирают из группы, включающей водород и C_1-4-алкил.

Конкретные полезные соединения выбирают из группы, включающей

этил-1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-карбоксилат,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[4-(4-хлорфенил)пиразолил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[4-(4-метоксифенил)пиразолил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[4-(4-метилфенил)пиразолил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамид,

1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-карбоновая кислота,

(1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N,N-диметилкарбоксамид,

(1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-этилкарбоксамид,

1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-карбоксамид,

1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-(циклопентилметил)карбоксамид,

(1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-[(4-хлорфенил)метил]карбоксамид,

этил-2-[(1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)карбониламино]ацетат и смеси указанных соединений.

Вторым классом соединений, эффективных и избирательных агонистов A_2A -аденозинового рецептора, полезных в способах по данному изобретению, являются соединения 2-аденозин-С-пиразола, имеющие формулу:

где

R¹ является таким, как указано выше;

R^2' выбирают из группы, включающей водород, C_1-15-алкил, C_2-15-алкенил, C_2-15-алкинил, гетероциклил, арил и гетероарил, где алкильный, алкенильный, алкинильный, арильный, гетероциклильный и гетероарильный заместители, необязательно, замещены 1-3 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, NO₂, гетероциклил, арил, гетероарил, CF₃, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R ²⁰)₂, S(O)R²², SO₂R ²², SO₂N(R²⁰)₂, SO ₂NR²⁰COR²², SO₂NR ²⁰CO₂R²², SO₂NR²⁰ CON(R²⁰)₂, N(R²⁰)₂ NR²⁰COR²², NR²⁰CO₂ R²², NR²⁰CON(R²⁰)₂ , NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³, COR ²⁰, CO₂R²⁰, CON(R²⁰) ₂, CONR²⁰SO₂R²², NR ²⁰SO₂R²², SO₂NR²⁰ CO₂R²², OCONR²⁰SO₂ R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH₂OC(O)R ²⁰ и OCON(R²⁰)₂, и где каждый необязательный гетероарильный, арильный и гетероциклильный заместитель, необязательно, замещен галогеном, NO₂, алкилом, CF₃, амино, моно- или диалкиламино, алкил- или арил-, или гетероариламидом, NCOR²², NR²⁰SO₂R²² , COR²⁰, CO₂R²⁰, CON(R²⁰ )₂, NR²⁰CON(R²⁰)₂ , OC(O)R²⁰, OC(O)N(R²⁰)₂, SR ²⁰, S(O)R²², SO₂R²², SO ₂N(R²⁰)₂, CN или OR²⁰;

R^3', R^4' индивидуально выбирают из группы, включающей водород, C_1-15-алкил, C_2-15-алкенил, C_2-15-алкинил, гетероциклил, арил и гетероарил, галоген, NO₂, CF₃, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)₂ , S(O)R²², SO₂R²², SO₂ N(R²⁰)₂, SO₂NR²⁰COR ²², SO₂NR²⁰CO₂R²² , SO₂NR²⁰CON(R²⁰)₂ , N(R²⁰)₂NR²⁰COR²² , NR²⁰CO₂R²², NR²⁰ CON(R²⁰)₂, NR²⁰C(NR²⁰ )NHR²³, COR²⁰, CO₂R²⁰ , CON(R²⁰)₂, CONR²⁰SO₂ R²², NR²⁰SO₂R²², SO₂NR²⁰CO₂R²², OCONR ²⁰SO₂R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH ₂OC(O)R²⁰ и OCON(R²⁰)₂ , где алкильный, алкенильный, алкинильный, арильный, гетероциклильный и гетероарильный заместители, необязательно, замещены 1-3 заместителями, индивидуально выбираемыми из группы, включающей галоген, NO ₂, гетероциклил, арил, гетероарил, CF₃, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)₂ , S(O)R²², SO₂R²², SO₂ N(R²⁰)₂, SO₂NR²⁰COR ²², SO₂NR²⁰CO₂R²² , SO₂NR²⁰CON(R²⁰)₂ , N(R²⁰)₂NR²⁰COR²² , NR²⁰CO₂R²², NR²⁰ CON(R²⁰)₂, NR²⁰C(NR²⁰ )NHR²³, COR²⁰, CO₂R²⁰ , CON(R²⁰)₂, CONR²⁰SO₂ R²², NR²⁰SO₂R²², SO₂NR²⁰CO₂R²², OCONR ²⁰SO₂R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH ₂OC(O)R²⁰ и OCON(R²⁰)₂ , и где каждый необязательный замещенный гетероарильный, арильный и гетероциклильный заместители, необязательно, замещены галогеном, NO₂, алкилом, CF₃, амино, моно- или ди-алкиламино, алкил- или арил-, или гетероарил- амидом, NCOR²², NR²⁰SO₂R²², COR²⁰ , CO₂R²⁰, CON(R²⁰)₂ , NR²⁰CON(R²⁰)₂, OC(O)R ²⁰, OC(O)N(R²⁰)₂, SR²⁰ , S(O)R²², SO₂R²², SO₂ N(R²⁰)₂, CN или OR²⁰; и

R⁵, R⁶, R²⁰ и R²² является таким, как указано выше,

при условии, что, когда R¹ = CH₂OH, R^3' означает H, R^4' означает H, пиразольный цикл присоединен через C^4' и R^2' не является H.

Когда выбрано соединение, имеющее одну из следующих формул:

то предпочтительно, R¹ означает -CH₂OH; R^2' выбирают из группы, включающей водород, C_1-8-алкил, где алкил необязательно замещен одним заместителем, независимо выбираемым из группы, включающей арил, CF₃, CN, и где каждый необязательный арильный заместитель необязательно замещен галогеном, алкилом, CF₃ или CN; и каждый из R^3' и R ^4' независимо выбирают из группы, включающей водород, метил, и, более предпочтительно, каждый из R^3' и R^4' означает водород.

Когда соединение по данному изобретению имеет следующую формулу:

то предпочтительно, R¹ означает -CH₂OH; R^2' выбирают из группы, включающей водород и C_1-6-алкил, необязательно замещенный фенилом. Более предпочтительно, R^2' выбирают из бензила и пентила; R^3' выбирают из группы, включающей водород, C_1-6-алкил, арил, где алкильный и арильный заместители, необязательно, замещены 1-2 заместителями, независимо выбираемыми из группы, включающей галоген, арил, CF₃ , CN, и где каждый необязательный арильный заместитель необязательно замещен галогеном, алкилом, CF₃ или CN; и R^4' выбирают из группы, включающей водород и C_1-6-алкил, и, более предпочтительно, R^4' выбирают из водорода и метила.

Более конкретный класс соединений выбирают из группы, включающей

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-бензилпиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-амино-2-(1-пентилпиразол-4-ил)пурин-9-ил]-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-амино-2-(1-метилпиразол-4-ил)пурин-9-ил]-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-(метилэтил)пиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-(3-фенилпропил)пиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-(4-третбутилбензил)пиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-(6-амино-2-пиразол-4-илпурин-9-ил)-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-пент-4-енилпиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-децилпиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-(циклогексилметил)пиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-(2-фенилэтил)пиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-(3-циклогексилпропил)пиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-2-{6-амино-2-[1-(2-циклогексилэтил)пиразол-4-ил]пурин-9-ил}-5-(гидроксиметил)оксолан-3,4-диол и комбинации указанных соединений.

Очень полезным, эффективным и избирательным агонистом A_2A-аденозинового рецептора является регаденозон или (1-{9-[(4S,2R,3R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]-6-аминопурин-2-ил}пиразол-4-ил)-N-метилкарбоксамид, имеющий формулу:

Другим предпочтительным соединением, полезным в качестве избирательного частичного агониста A _2A-аденозинового рецептора, кратковременного действия является соединение формулы:

CVT-3033 в особенности полезно в качестве адъюванта при кардиологической визуализации.

Первый и второй классы соединений, указанные выше, описаны более подробно в патентах США № 6403567 и 6214807, описание каждого из которых включено здесь в качестве ссылки.

Как использовано здесь, к терминам применимы следующие определения.

"Галоид" или "галоген" - в отдельности или в комбинации означает все галогены, то есть хлор (Cl), фтор (F), бром (Br), иод (I).

"Гидроксил" означает группу -OH.

"Тиол" или "меркапто" означает группу -SH.

"Алкил" - в отдельности или в комбинации означает радикал алканового ряда, содержащий от 1 до 20, предпочтительно от 1 до 15, атомов углерода (если не оговорено иное). Понятие включает линейный алкил, разветвленный алкил или циклоалкил. Предпочтительно, линейные или разветвленные алкильные группы содержат 1-15, более желательно 1-8, предпочтительней 1-6, еще более предпочтительно 1-4 и наиболее предпочтительно 1-2, атома углерода, как, например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, третбутил и тому подобное. Термин "низший алкил" использован здесь для определения линейных алкильных групп, указанных непосредственно выше. Предпочтительно, циклоалкильные группы представляют собой системы моноциклических, бициклических или трициклических колец с 3-8, более желательно 3-6, циклическими членами в кольце, такие как циклопропил, циклопентил, циклогексил, адамантил и тому подобное. Алкил также включает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую циклическую часть или прерываемую циклической частью. Линейная или разветвленная алкильная группа присоединяется по любой приемлемой для образования устойчивого соединения точке. Примерами указанных групп являются, но не в порядке ограничения, 4-(изопропил)циклогексилэтил или 2-метилциклопропилпентил. Замещенный алкил представляет собой вышеуказанную линейную алкильную, разветвленную алкильную или циклоалкильную группу, независимо замещенную 1-3 группами или заместителями, выбираемыми из группы, включающей галоген, гидрокси, алкокси, алкилтио, алкилсульфинил, алкилсульфонил, ацилокси, арилокси, гетероарилокси, необязательно моно- или дизамещенную алкильными, арильными или гетероарильными группами амино, амидино, необязательно замещенную алкильными, арильными, гетероарильными или гетероциклильными группами мочевину, необязательно N-моно- или N,N-дизамещенный алкильными, арильными или гетероарильными группами аминосульфонил, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, гетероарилсульфониламино, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, гетероарилкарбониламино или тому подобное.

"Алкенил" - в отдельности или в комбинации означает линейный, разветвленный или циклический углеводород, содержащий 2-20, предпочтительно 2-17, более предпочтительно 2-10, еще предпочтительней 2-8, наиболее предпочтительно 2-4, атома углерода и, по меньшей мере, одну, предпочтительно 1-3, более предпочтительно 1-2, наиболее предпочтительно одну, двойную углерод-углеродную связь. В случае циклоалкильной группы сопряжение более чем одной двойной углерод-углеродной связи, не такое, чтобы придавать ароматичность циклу. Двойная углерод-углеродная связь может быть либо включена в циклоалкильный участок, за исключением циклопропила, либо в линейный или разветвленный участок. Примеры алкенильных групп включают этенил, пропенил, изопропенил, бутенил, циклогексенил, циклогексенилалкил и тому подобное. Замещенный алкенил представляет собой линейную алкенильную, разветвленную алкенильную или циклоалкенильную группу, определенную ранее, независимо замещенную 1-3 группами или заместителями, выбираемыми из группы, включающей галоген, гидрокси, алкокси, алкилтио, алкилсульфинил, алкилсульфонил, ацилокси, арилокси, гетероарилокси, необязательно моно- или дизамещенную алкильными, арильными или гетероарильными группами амино, амидино, необязательно замещенную алкильными, арильными, гетероарильными или гетероциклильными группами мочевину, необязательно N-моно- или N,N-дизамещенный алкильными, арильными или гетероарильными группами аминосульфонил, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, гетероарилсульфониламино, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, гетероарилкарбониламино, карбокси, алкоксикарбонил, арилоксикарбонил, гетероарилоксикарбонил или тому подобное, в любом приемлемом положении с образованием устойчивого соединения.

"Алкинил" - в отдельности или в комбинации означает линейный или разветвленный углеводород, содержащий 2-20, предпочтительно 2-17, более предпочтительно 2-10, еще предпочтительней 2-8, наиболее предпочтительно 2-4, атома углерода и, по меньшей мере, одну, предпочтительно одну, тройную углерод-углеродную связь. Примеры алкинильных групп включают этинил, пропинил, бутинил и тому подобное. Замещенный алкинил означает линейную алкинильную или разветвленную алкинильную группу, определенную ранее, независимо замещенную 1-3 группами или заместителями, выбираемыми из группы, включающей галоген, гидрокси, алкокси, алкилтио, алкилсульфинил, алкилсульфонил, ацилокси, арилокси, гетероарилокси, необязательно моно- или дизамещенную алкильными, арильными или гетероарильными группами амино, амидино, необязательно замещенную алкильными, арильными, гетероарильными или гетероциклильными группами мочевину, необязательно N-моно- или N,N-дизамещенный алкильными, арильными или гетероарильными группами аминосульфонил, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, гетероарилсульфониламино, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, гетероарилкарбониламино или тому подобное, в любом приемлемом положении с образованием устойчивого соединения.

"Алкилалкенил" означает группу -R-CR'=CR'"R"", где R является низшим алкилом или замещенным низшим алкилом, R', R'", R"" независимо могут означать водород, галоген, низший алкил, замещенный низший алкил, ацил, арил, замещенный арил, гетарил или замещенный гетарил, как определено ниже.

"Алкилалкинил" означает группы -RC CR', где R является низшим алкилом или замещенным низшим алкилом, R' означает водород, низший алкил, замещенный низший алкил, ацил, арил, замещенный арил, гетарил или замещенный гетарил, как определено ниже.

"Алкокси" означает группу -OR, где R представляет собой низший алкил, замещенный низший алкил, ацил, арил, замещенный арил, аралкил, замещенный аралкил, гетероалкил, гетероарилалкил, циклоалкил, замещенный циклоалкил, циклогетероалкил или замещенный циклогетероалкил, согласно определению.

"Алкилтио" означает группу -SR, где R представляет собой низший алкил, замещенный низший алкил, арил, замещенный арил, аралкил или замещенный аралкил, согласно данному здесь определению.

"Ацил" означает группы -C(O)R, -S(O)_n=1-2-R, где R представляет собой водород, низший алкил, замещенный низший алкил, арил, замещенный арил и тому подобное, согласно данному здесь определению.

"Арилокси" означает группы -OAr, где Ar представляет собой арильную, замещенную арильную, гетероарильную или замещенную гетероарильную группу, согласно данному здесь определению.

"Амино" означает группу NRR', где R и R' могут независимо означать водород, низший алкил, замещенный низший алкил, арил, замещенный арил, гетарил или замещенный гетарил, согласно данному здесь определению, или ацил.

"Амидо" означает группу -C(O)NRR', где R и R' могут независимо означать водород, низший алкил, замещенный низший алкил, арил, замещенный арил, гетарил, замещенный гетарил, согласно данному здесь определению.

"Карбоксил" означает группу -C(O)OR, где R представляет собой водород, низший алкил, замещенный низший алкил, арил, замещенный арил, гетарил и замещенный гетарил, согласно данному здесь определению.

"Арил" в отдельности или в комбинации означает фенил или нафтил, необязательно карбоциклически конденсированный с циклоалкилом, имеющим, предпочтительно, 5-7, более предпочтительно 5-6, членов в цикле и/или необязательно замещенным 1-3 группами или заместителями, выбираемыми из группы, включающей галоген, гидрокси, алкокси, алкилтио, алкилсульфинил, алкилсульфонил, ацилокси, арилокси, гетероарилокси, необязательно моно- или дизамещенную алкильными, арильными или гетероарильными группами амино, амидино, необязательно замещенную алкильными, арильными, гетероарильными или гетероциклильными группами мочевину, необязательно N-моно- или N,N-дизамещенный алкильными, арильными или гетероарильными группами аминосульфонил, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, гетероарилсульфониламино, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, гетероарилкарбониламино или тому подобное.

"Замещенный арил" означает арил, необязательно замещенный одной или более функциональными группами, например такими, как галоген, низший алкил, низший алкокси, алкилтио, ацетилен, амино, амидо, карбоксил, гидроксил, арил, арилокси, гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Гетероцикл" означает насыщенную, ненасыщенную или ароматическую карбоциклическую группу с одинарным циклом (например, морфолино, пиридил или фурил) или многократно конденсированными циклами (например, нафтпиридил, хиноксалил, хинолинил, индолизинил или бензо[b]тиенил) и, по меньшей мере, одним гетероатомом, таким как N, O или S, в цикле, который может, необязательно, быть незамещенным или замещенным таким заместителем, как, например, галоген, низший алкил, низший алкокси, алкилтио, ацетилен, амино, амидо, карбоксил, гидроксил, арил, арилокси, гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Гетероарил" в отдельности или в комбинации означает структуру моноциклического ароматического кольца, содержащую 5 или 6 атомов в цикле, или бициклическую ароматическую группу с 8-10 атомами, содержащую один или более, предпочтительно 1-4, более предпочтительно 1-3, еще предпочтительней 1-2, гетероатома, независимо выбираемых из группы, включающей O, S и N, и необязательно замещенную 1-3 группами или заместителями, выбираемыми из группы, включающей галоген, гидрокси, алкокси, алкилтио, алкилсульфинил, алкилсульфонил, ацилокси, арилокси, гетероарилокси, необязательно моно- или дизамещенную алкильными, арильными или гетероарильными группами амино, амидино, необязательно замещенную алкильными, арильными, гетероарильными или гетероциклильными группами мочевину, необязательно N-моно- или N,N-дизамещенный алкильными, арильными или гетероарильными группами аминосульфонил, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, гетероарилсульфониламино, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, гетероарилкарбониламино или тому подобное. Подразумевается также, что гетероарил включает окисленные S или N, как, например, сульфинил, сульфонил и N-оксид третичного циклического азота. Атом углерода или азота является местом присоединения гетероарильной циклической структуры, так что сохраняется устойчивый ароматический цикл. Примерами гетероарильных групп являются пиридинил, пиридазинил, пиразинил, хиназолинил, пуринил, индолил, хинолинил, пиримидинил, пирролил, оксазолил, тиазолил, тиенил, изоксазолил, оксатиадиазолил, изотиазолил, тетразолил, имидазолил, триазинил, фуранил, бензофурил, индолил и тому подобное. Замещенный гетероарил содержит заместитель, присоединенный по доступному углероду или азоту с образованием устойчивого соединения.

"Гетероциклил" в отдельности или в комбинации означает неароматическую циклоалкильную группу с 5-10 атомами, из которых от 1 до 3 атомов углерода в цикле заменены гетероатомами, выбираемыми из O, S или N, и представляет собой, необязательно, бензоконденсированный или конденсированный гетероарил с 5-6 членами в цикле и/или необязательно замещенный, как в случае циклоалкила. Подразумевается также, что гетероциклил включает окисленные S или N, как, например, сульфинил, сульфонил и N-оксид третичного циклического азота. Местом присоединения является атом углерода или азота. Примерами гетероциклильных групп являются тетрагидрофуранил, дигидропиридинил, пиперидинил, пирролидинил, пиперазинил, дигидробензофурил, дигидроиндолил и тому подобное. Замещенный гетероциклил содержит замещающий азот, присоединенный по доступному углероду или азоту с образованием устойчивого соединения.

"Замещенный гетероарил" означает гетероцикл, необязательно моно- или полизамещенный одной или более функциональными группами, например такими, как галоген, низший алкил, низший алкокси, алкилтио, ацетилен, амино, амидо, карбоксил, гидроксил, арил, арилокси, гетероцикл, замещенный гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Аралкил" означает группу -R-Ar, где Ar означает арильную группу и R представляет собой низшую алкильную или замещенную низшую алкильную группу. Арильные группы, необязательно, могут быть незамещенными или замещенными такими заместителями, как, например, галоген, низший алкил, алкокси, алкилтио, ацетилен, амино, амидо, карбоксил, гидроксил, арил, арилокси, гетероцикл, замещенный гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Гетероалкил" означает группу -R-Het, где Het означает гетероциклическую группу и R представляет собой низшую алкильную группу. Гетероалкильные группы, необязательно, могут быть незамещенными или замещенными такими заместителями, как, например, галоген, низший алкил, низший алкокси, алкилтио, ацетилен, амино, амидо, карбоксил, арил, арилокси, гетероцикл, замещенный гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Гетероарилалкил" означает группу -R-HetAr, где HetAr означает гетероарильную группу и R представляет собой низший алкил или замещенный низший алкил. Гетероарилалкильные группы, необязательно, могут быть незамещенными или замещенными такими заместителями, как, например, галоген, низший алкил, замещенный низший алкил, алкокси, алкилтио, ацетилен, арил, арилокси, гетероцикл, замещенный гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Циклоалкил" означает двухвалентную циклическую или полициклическую алкильную группу с 3-15 атомами углерода.

"Замещенный циклоалкил" означает циклоалкильную группу, содержащую один или более заместителей, включающих, например, галоген, низший алкил, замещенный низший алкил, алкокси, алкилтио, ацетилен, арил, арилокси, гетероцикл, замещенный гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Циклогетероалкил" означает циклоалкильную группу, где один или более атомов углерода в цикле заменены на гетероатом (например, N, O, S или P).

"Замещенный циклогетероалкил" означает циклогетероалкильную группу, как определено здесь, которая содержит один или более заместителей, таких как галоген, низший алкил, низший алкокси, алкилтио, ацетилен, амино, амидо, карбоксил, гидроксил, арил, арилокси, гетероцикл, замещенный гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Алкилциклоалкил" означает группу -R-циклоалкил, где циклоалкил означает циклоалкильную группу и R представляет собой низший алкил или замещенный низший алкил. Циклоалкильные группы, необязательно, могут быть незамещенными или замещенными такими заместителями, как, например, галоген, низший алкил, низший алкокси, алкилтио, ацетилен, амино, амидо, карбоксил, гидроксил, арил, арилокси, гетероцикл, замещенный гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

"Алкилциклогетероалкил" означает группу -R-циклогетероалкил, где R представляет собой низший алкил или замещенный низший алкил. Циклогетероалкильные группы, необязательно, могут быть незамещенными или замещенными такими заместителями, как, например, галоген, низший алкил, низший алкокси, алкилтио, амино, амидо, карбоксил, ацетилен, гидроксил, арил, арилокси, гетероцикл, замещенный гетероцикл, гетарил, замещенный гетарил, нитро, циано, тиол, сульфамидо и тому подобное.

Первый класс вышеуказанных соединений может быть получен, как представлено на схемах 1-4.

Соединения общей формулы IV могут быть получены, как показано на схеме 1.

Схема 1

Соединение I может быть получено при взаимодействии соединения 1 с соответственно замещенным 1,3-дикарбонилом в смеси AcOH и MeOH при 80°C (Holzer et al., J. Heterocycl. Chem. (1993) 30, 865). Соединение II, которое может быть получено взаимодействием соединения I с 2,2-диметоксипропаном в присутствии кислоты, может быть окислено до карбоновой кислоты III исходя из структурно подобных соединений с применением перманганата калия или хлорхромата пиридиния (M. Hudlicky, (1990) Oxidations in Organic Chemistry, ACS Monographs, American Chemical Society, Washington D.C). Взаимодействие первичного или вторичного амина, имеющего формулу HNR⁶R⁷, и соединения III с применением DCC (M. Fujino et al., Chem. Pharm. Bull. (1974), 22, 1857), PyBOP (J. Martinez et al., J. Med. Chem. (1988) 28, 1874) или PyBrop (J. Caste et al. Tetrahedron (1991), 32, 1967) в условиях сочетания может приводить к соединению IV.

Схема 2

Соединение V может быть получено, как показано на схеме 2. Три-TBDMS- производное 4 может быть получено обработкой соединения 2 с помощью TBDMSCl и имидазола в ДМФА с последующим гидролизом сложного этилового эфира с применением NaOH. Взаимодействие первичного или вторичного амина формулы HNR⁶R⁷ и соединения 4 с применением DCC (M. Fujino et al., Chem. Pharm. Bull. (1974), 22, 1857), PyBOP (J. Martinez et al., J. Med. Chem. (1988) 28, 1874) или PyBrop (J. Caste et al. Tetrahedron, (1991), 32, 1967) в условиях сочетания может приводить к соединению V.

Схема 3

Специфический синтез соединения 11 иллюстрируется схемой 3. Коммерчески доступный гуанозин 5 превращают в триацетат 6, как описано ранее (M.J. Robins and B. Uznanski, Can. J, Chem. (1981), 59, 2601-2607). Соединение 7, полученное по опубликованной в литературе методике Cerster'a et al. (J.F. Cerster, A.F. Lewis and R.K. Robins, Org. Synthesis, 242-243), превращают в соединение 9 в две стадии, как описано ранее (V. Nair et al., J. Org. Chem. (1988), 53, 3051-3057). Соединение 1 получают взаимодействием гидразингидрата с соединением 9 в этаноле при 80°C. Конденсация соединения 1 с этоксикарбонилмалондиальдегидом в смеси AcOH и MeOH при 80°C дает соединение 10. Нагревание соединения 10 в избытке метиламина дает соединение 11.

Синтез 1,3-диальдегида VII описан схемой 4.

Схема 4

Взаимодействие 3,3-диэтоксипропионата или 3,3-диэтоксипропионитрила, или 1,1-диэтокси-2-нитроэтана VI (R₃ = CO₂R, CN или NO₂) с этил- или метилформиатом в присутствии NaH может давать диальдегид VII (Y. Yamamoto et al., J. Org. Chem. (1989) 54, 4734).

Второй класс вышеуказанных соединений может быть получен, как представлено на схемах 5-9. Как показано на схеме 5, соединения, имеющие общую формулу VIII:

Схема 5

получают опосредованным палладием связыванием соединения 12 с галогенпиразолами, представленными формулой IX (синтез показан на схеме 8), в присутствии или отсутствие солей меди (K. Kato et. al. J. Org, Chem. 1997, 62, 6833-6841; Palladium Reagents and Catalysts-Innovations in Organic Synthesis, Tsuji, John Wiley and Sons, 1995) с последующим снятием защиты с помощью либо TBAF, либо NH₄F (Markiewicz et al. Tetrahedron Lerr.(1988), 29, 1561). Получение соединения 12 ранее описано (K. Kato et. al. J. Org. Chem. 1997, 62, 6833-6841) и представлено схемой 11.

Соединения общей формулы XIV могут быть получены, как показано на схеме 6.

Схема 6

Соединение XI, которое может быть получено взаимодействием VII с 2,2-диметоксипропаном в присутствии кислоты, может быть окислено до карбоновой кислоты XII исходя из структурно подобных соединений с применением перманганата калия или хлорхромата пиридиния и проч. (Jones et. al., J. Am. Chem. Soc. (1949), 71, 3994.; Hudlicky, Oxidations in organic chemistry, American Chemical Society, Washington D.C. 1990).

Взаимодействие первичного или вторичного амина формулы NHR⁵R⁶ и соединения XII с применением DCC (Fujino et al., Chem. Pharm. Bull. (1974), 22, 1857), PyBOP (J. Martinez et al., J. Med. Chem. (1988) 28, 1967) или PyBrop (J. Caste et al. Tetrahedron (1991), 32, 1967) в условиях сочетания может приводить к соединению XIII.

Снятие защиты соединения XIII может быть выполнено нагреванием с 80% водной уксусной кислотой (T.W. Green and P.G.M. Wuts (1991), Protective Groups in Organic Synthesis, A, Wiley-Interscience publication) или с безводным HCl (4н.) с образованием соединения общей формулы XIII.

Альтернативно, соединения общей формулы VIII могут также быть получены сочетанием по типу реакции Сузуки, как показано на схеме 7.

Схема 7

2-Иодаденозин 16 может быть получен в четыре стадии из гуанозина 25 по описанным в литературе методикам (M.J. Robins et.al. Can. J. Chem. (1981), 59, 2601-2607; J.F. Cerster et al. Org. Synthesis, ---242-243; V. Nair et al., J. Org. Chem., (1988), 53, 3051-3057). Опосредованное палладием сочетание по Сузуки 16 с соответственно замещенными пиразолбороновыми кислотами в присутствии основания может давать конечные соединения общей формулы VIII (A. Suzuki, Acc. Chem. Res) (1982), 15, 178). При необходимости 2'-, 3'-, 5'- гидроксилы на 6 могут быть защищены через простые эфиры TBDMS перед сочетанием по Сузуки.

Соединения общей формулы IX могут быть либо коммерчески доступными, либо полученными согласно стадиям, приведенным на схеме 8.

Схема 8

Конденсация 1,3-дикето-соединений формулы XV с гидразином в соответствующем растворителе может давать пиразолы общей формулы XVI (R.H. Wiley et. al., Org. Synthsis, Coll. Vol IV (1963), 351. Указанные пиразолы могут быть N-алкилированы различными алкилгалогенидами с образованием соединений формулы XVII, которые при иодировании дают 4-иод-производные общей формулы IX (R. Huttel et.al. Justus Liebigs Ann. Chem. (1955), 593, 200).

5-Иодпиразолы общей формулы XXI могут быть получены согласно стадиям, приведенным на схеме 9.

Схема 9

Конденсация 1,3-дикето-соединений формулы XVIII с гидразином в соответствующем растворителе может давать пиразолы общей формулы XIX. Указанные пиразолы могут быть N-алкилированы различными алкилгалогенидами с образованием соединений формулы XX. Отщепление 5-H с помощью сильного основания и последующее гашение иодом может давать 5-иод производные общей формулы XXI (F. Effenberger et. al. J. Org. Chem. (1984), 49, 4687).

4- или 5-Иодпиразолы могут быть превращены в соответствующие бороновые кислоты, как показано на схеме 10.

Схема 10

Переметаллирование с помощью н-buLi с последующей обработкой триметилборатом может давать соединения общей формулы XXII, которые при гидролизе могут давать бороновые кислоты общей формулы XXIII (F.C. Fischer et.al. RECUEIL (1965), 84, 439).

Как показано ниже на схеме 11, 2-станниладенозин 12 получают в три стадии из коммерчески доступного 6-хлорпуринрибозида по описанной в литературе методике (K. Kato et.al., J. Org. Chem. (1997), 62, 6833-6841).

Схема 11

Три-TBDMS-производное получают обработкой 18 с помощью TBDMSCl и имидазола в ДМФА. Литирование с помощью LTMP с последующим гашением три-н-бутилоловохлоридом дает исключительно 2-станнил-производное 20. Аммонолиз в 2-пропаноле дает 2-станниладенозин 12. Сочетание по Стиллу 12 с 1-бензил-4-иодпиразолом в присутствии Pd(PPh₃)₄ и CuI приводит к 21 (K. Kato et.al., J. Org. Chem. (1997), 62, 6833-6841). Снятие защитных силильных групп на 2'-, 3'- и 5'-гидроксилах с помощью 0,5 М фторида аммония в метаноле дает 22 с хорошим выходом.

Способы, используемые для получения соединений по данному изобретению, не ограничиваются описанными выше. Дополнительные способы могут быть найдены в следующих источниках и включены здесь в качестве ссылки (J. March, Advanced Organic Chemistry; Reaction Mechanisms and Studies (1992), A Wiley Interscience Publications; and J. Tsuji, Palladium reagents and catalysts-Innovations in organic synthesis, John Wiley and Sons, 1995).

Если конечное соединение по данному изобретению содержит основную группу, может быть получена кислотно-аддитивная соль. Кислотно-аддитивные соли соединений получают стандартным способом в подходящем растворителе из исходного соединения и взятой в избытке кислоты, такой как хлористоводородная, бромистоводородная, серная, фосфорная, уксусная, малеиновая, янтарная или метансульфоновая. В особенности полезна форма хлористоводородной соли. Если конечное соединение содержит кислотную группу, могут быть получены катионные соли. Как правило, исходное соединение обрабатывают избытком щелочного реагента, такого как гидроксид, карбонат или алкоксид, содержащего соответствующий катион. Катионы, такие как Na⁺, K⁺, Ca ⁺ и NH₄ ⁺, служат примерами катионов, присутствующих в фармацевтически приемлемых солях. Некоторые соединения образуют внутренние соли или цвиттерионы, которые также могут быть приемлемыми.

Теперь настоящее изобретение полностью раскрыто, для специалиста в данной области очевидно, что могут быть осуществлены многие изменения и модификации, не выходящие за рамки объема и сущности изобретения.

ПРИМЕР 1

Влияния кофеина (1-10 мг/кг) на коронарную вазодилатацию и изменения в гемодинамике под действием регаденозона (5 мкг/кг, в/в) оценивают на бодрствующих собаках. Кофеин дозозависимо снижает длительность коронарной вазодилатации, но не максимальное увеличение коронарной гиперемии, вызываемой регаденозоном. Кофеин (4 и 10 мг/кг) значительно снижает влияния регаденозона на среднее артериальное давление и частоту сердечных сокращений. Результаты позволяют предположить, что употребление кофеина непосредственно перед фармакологическим стресс-тестированием с помощью агониста A_2A-аденозинового рецептора может сокращать длительность коронарной вазодилатации, вызванной лекарственным средством.

Перечень сокращений:

CBF: коронарный кровоток

MAP: среднее артериальное давление

HR: частота сердечных сокращений

LVSP: систолическое давление левого желудочка

МЕТОДИКИ

Для исследования используют шестнадцать самцов дворняжек с вживленной измерительной аппаратурой массой 22-30 кг. Протокол исследования на животных утверждается Комитетом по биоэтике Медицинского колледжа Нью-Йорка и соответствует руководству по содержанию и использованию лабораторных животных Национального института здравоохранения Соединенных Штатов.

Оперативные вмешательства

Собакам дают успокоительное ацепромазин (0,3 мг/кг, в/м) и анестезируют пентобарбиталом натрия (25 мг/кг, в/в). После интубации собак искусственно вентилируют комнатным воздухом. Производят торакотомию в пятом межреберье, используя стерильное техническое оборудование. Катетер Tygon'a (Cardiovascular Instruments, Wakefield, MA) вставляют в нисходящую грудную аорту, а другой катетер вставляют в левое предсердие. У 9 собак ультразвуковой датчик кровотока (Transonic Systems, Ithaca, NY) размещают вблизи левой огибающей коронарной артерии. Твердый датчик давления (P6.5, Konisberg Instruments, Pasadena, CA) помещают в левый желудочек через верхушку. Послойно закрывают грудную клетку. Катетеры и проволоку пронизывают подкожно и выводят наружу через кожу с обратной стороны шеи собаки. Собакам дают восстановиться после операции перед осуществлением экспериментов и приучают лежать на столе.

Оценка коронарного кровотока и гемодинамические измерения

Фазное артериальное давление измеряют, подсоединяя аортальный катетер к тензометрическому датчику (P23 ID, LDS Test and Measurement, Valley View, OH). Давления левого желудочка измеряют с помощью твердого датчика давления. CBF (мл/мин) оценивают с помощью ультразвукового датчика кровотока, используя расходомер Transonic (T206, Transonic Systems, Ithaca, NY). Два показателя используют для индуцируемой регаденозоном коронарной вазодилатации: 1) максимальное увеличение CBF и 2) длительность 2-кратного увеличения CBF (период времени, на который CBF повышается до уровня 2-кратному относительно исходного уровня CBF). Все данные по давлению и кровотоку получают и анализируют, используя систему Ponemah System (Version 3.30 или 4.20, LDS Test and Measurement, Valley View, OH). MAP и HR рассчитывают из фазного кровяного давления и LV dP/dt_Max рассчитывают из систолического давления левого желудочка.

Экспериментальные протоколы

На день эксперимента собаку помещают на стол, где собака спокойно лежит во время эксперимента. Катетер вводят в периферийную вену левой ноги и подсоединяют к инфузионной линии для введения лекарственных средств не беспокоящим собаку способом. Эксперимент начинают после того, как MAP, HR и CBF станут устойчивыми.

Влияния кофеина, самого по себе, на MAP и HR и определение концентраций кофеина в плазме (часть I):

Выполняют по три эксперимента на каждой из собак в группе. В каждом эксперименте собаке делают в/в инъекцию (в течение 1-3 мин) кофеина при дозе 2, 4 или 10 мг/кг. Каждая собака получает до 3 доз кофеина (на различные дни) в произвольной последовательности. MAP и HR регистрируют непрерывно в течение 120 мин и производят забор 3 мл крови из аортального катетера на 2,5, 5, 15, 30, 60, 90 и 120 мин после введения доз кофеина для измерения концентраций кофеина в плазме.

Влияния кофеина на индуцируемую регаденозоном коронарную вазодилатацию и изменения в гемодинамике (часть II):

Каждой из собак делают в/в инъекцию 5 мкг/кг регаденозона. Спустя сорок пять минут вводят 1 мг/кг кофеина (в/в). Приблизительно через 45 мин после инъекции кофеина делают повторную инъекцию регаденозона. LVSP, LV dP/dt_Max , MAP, HR и CBF регистрируют непрерывно. Производят забор проб крови из катетера левого предсердия на 1, 3, 5, 15, 30, 45 и 60 мин после инъекций регаденозона.

В последующие дни протокол и забор крови повторяют на тех же самых собаках с различными дозами кофеина (2, 4 или 10 мг/кг).

4 собакам две дозы регаденозона (5 мкг/кг, в/в) вводят с интервалом 90 мин (без забора крови) для установления, существует ли тахифилаксия для индуцируемой регаденозоном коронарной вазодилатации.

Лекарственные средства

Регаденозон поставляется CV Therapeutics, Inc. в виде стерильного исходного раствора (Lot#: 803604, 0,08 мг/мл), который получают, используя 15% пропиленгликоль (pH 7), и разводят физиологическим раствором перед инъекцией. Кофеин приобретают в Sigma-Aldrich (St. Louis, MO) и растворяют в физиологическом растворе (10 мг/мл).

Статистический анализ

Статистическую значимость различия между величиной параметра на исходном уровне и в указанный момент времени после введения лекарственного средства определяют, используя однофакторный ANOVA с повторными измерениями, согласно тесту Тьюки. Статистическую значимость различия между реакциями на регаденозон в отсутствии и в присутствии кофеина определяют, используя двухфакторный ANOVA с повторными измерениями, согласно тесту Тьюки. Результаты с p<0,05 считаются значимыми. Для статистического анализа используют основанный на применении компьютера пакет программного обеспечения (SigmaStat 2.03). Все данные приведены как Среднее значение ± SEM.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Влияния кофеина, самого по себе, на MAP и HR и определение концентраций кофеина в плазме

В/в инъекция кофеина при 2 мг/кг не вызывает значимых изменений в MAP и HR. Кофеин при 4 мг/кг вызывает значимое повышение MAP, около ~12 мм Hg, как на 2,5, так и на 5 мин после инъекции без значимого изменения в HR. Кофеин при 10 мг/кг вызывает незначительное повышение MAP (5-9 мм Hg на 2,5, 5 и 15 мин, p>0,05), но снижает HR приблизительно до 16-24 ударов/мин на период времени от 30 до 120 мин после инъекции. Концентрации кофеина в плазме остаются в сравнительно узком интервале на период времени от 30 до 120 мин после инъекции кофеина (таблица 1). На основании приведенных результатов был сделан вывод, что момент времени 45 мин после введения кофеина является оптимальным для определения влияний кофеина на вызванные регаденозоном изменения в CBF и гемодинамике.

Таблица 1
Влияния кофеина (в/в) на MAP и HR и концентрации кофеина в плазме бодрствующих собак
	Исходный уровень	2,5 мин	5 мин	15 мин	30 мин	60 мин	90 мин	120 мин
MAP, мм Hg
2 мг/кг	107±4	110±5	108±3	106±4	104±4	112±5	111±7	109±6
4 мг/кг	97±3	109±6*	108±6*	99±4	103±4	104±2	108±4*	104±4
10 мг/кг	99±4	109±5	107±3	105±4	101±3	107±4	104±6	102±2
HR (удары/ мин)
2 мг/кг	95±6	95±5	91±5	85±6	81±7	90±9	87±5	88±6
4 мг/кг	100±8	104±5	102±4	88±6	90±7	85±7*	90±7	86±5
10 мг/кг	103±5	100±4	101±4	93±5	87±5*	83±2*	80±5*	80±4*
Уровни кофеина (мкМ)
2 мг/кг	-	19±0,98	15±0,29	12±0,19	11±0,10	9,9±0,11	9,1±0,11	8,7±0,18
4 мг/кг	-	35±0,93	28±1,28	22±0,89	20±0,74	17±1,07	17±0,64	16±0,98
10 мг/кг	-	76±3,00	67±2,19	52±1,37	47±2,14	45±1,22	41±1,78	37±1,78
MAP: Среднее артериальное давление. HR: Частота сердечных сокращений. Среднее значение ± SEM, n=5 (n=6 для уровней кофеина). Исходными уровнями являются величины до инъекции кофеина. *p<0,05, по сравнению с исходным уровнем.

Влияния кофеина на индуцируемую регаденозоном коронарную вазодилатацию

Группа временного контроля

У 4 собак в/в инъекция регаденозона (5 мкг/кг) вызывает значимое увеличение CBF. Максимальный CBF повышается от исходной величины 37±1 до 178±17 мл/мин, и длительность 2-кратного увеличения CBF составляет 401±45 сек. Повторная инъекция регаденозона приводит к идентичной коронарной вазодилатации спустя 90 мин (фиг.1). Максимальный CBF повышается от исходной величины 35±1 до 176±6 мл/мин, и длительность 2-кратного увеличения CBF составляет 395±43 сек. Не существует статистически значимых различий в исходных уровнях CBF, максимальных величинах CBF или длительности 2-кратного увеличения CBF, вызываемого двумя инъекциями регаденозона (фиг.1).

Влияния кофеина на индуцируемую регаденозоном коронарную вазодилатацию

В отсутствие кофеина в/в инъекция регаденозона (5 мкг/кг) повышает CBF от исходной величины 34±2 до пика 191±7 мл/мин, и длительность 2-кратного увеличения CBF, вызываемого регаденозоном, составляет 515±71 сек (n=8).

Исходные величины CBF незначительно различаются до и после обработки кофеином (спустя 45 мин после введения 1, 2, 4 и 10 мг/кг) (фиг.2, время 0). В присутствии кофеина при 1, 2, 4 и 10 мг/кг максимальные увеличения CBF, вызываемые регаденозоном, незначительно снижены по сравнению с контролем (в отсутствие кофеина). Максимальное увеличение CBF, вызываемое регаденозоном, изменяется лишь на 2±3, -0,7±3, -16±5 и -13±8% соответственно в присутствии кофеина при 1, 2, 4 и 10 мг/кг (все p>0,05, фиг.2). Напротив, длительности 2-кратного увеличения CBF, вызываемого регаденозоном, значительно снижаются при всех исследованных дозировках кофеина. Снижения длительности 2-кратного увеличения составляют 17±4, 48±8, 62±5 и 82±5% от контроля соответственно в присутствии кофеина при 1, 2, 4 и 10 мг/кг (все p<0,05) (фиг.4). Однако увеличенный под действием регаденозона CBF все же остается на уровнях 2-кратным исходным в течение 3 мин в присутствии 1, 2 и 4 мг/кг кофеина (фиг.2).

Концентрации регаденозона и кофеина в плазме

В отсутствие кофеина в/в инъекция регаденозона (5 мкг/кг) вызывает кратковременное увеличение концентрации регаденозона в плазме, достигаемое при пике на ~1 мин и быстро снижающееся. Фармакокинетические профили регаденозона не изменяются под действием кофеина при 1, 2, 4 или 10 мг/кг (фиг.3).

Концентрации кофеина в плазме составляют 5±0,2, 10±0,6, 18±0,8 и 52±1,8 мкМ соответственно на 45 мин после введения кофеина при 1, 2, 4 и 10 мг/кг и непосредственно перед вторичной инъекцией регаденозона (время 0 на нижней панели фиг.21). Концентрации кофеина в плазме остаются на сравнительно устойчивых уровнях с момента, предшествующего инъекции (время 0), до 30 мин после вторичной инъекции регаденозона (фиг.3, нижняя панель).

Влияния кофеина на вызванные регаденозоном изменения гемодинамики

В таблице 2 приведены величины MAP и HR в различные моменты времени после введения регаденозона как в отсутствие, так и в присутствии кофеина при 1, 2, 4 и 10 мг/кг (максимальные чувствительности не включены). Кофеин при 1, 2, 4 или 10 мг/кг не изменяет существенно гемодинамику на 45 мин после введения кофеина, как показано в таблице 2 (исходные величины для контроля и кофеина при 1, 2, 4 и 10 мг/кг).

В/в инъекция регаденозона (5 мкг/кг) вызывает умеренное снижение MAP. Регаденозон снижает MAP (пиковое) на 15±2% от исходной величины 102±2 мм Hg в отсутствие кофеина (n=9). В присутствии кофеина при 1 и 2 мг/кг пиковое снижение MAP, вызываемое регаденозоном, остается неизменным (13±2% против 13±1% от исходного уровня соответственно). Однако в присутствии 4 мг/кг кофеина регаденозон снижает пиковое MAP только на 2±5% от исходного уровня. В присутствии 10 мг/кг кофеина регаденозон увеличивает MAP, но незначительно, на 9±6% от исходного уровня.

В/в инъекция регаденозона (5 мкг/кг) вызывает увеличение HR, длящееся 8-9 мин. Регаденозон увеличивает HR (пиковую) до 114±14% от исходной величины в 80±4 удары/мин (n=9). Кофеин при 1 мг/кг не может заметно изменять вызванную регаденозоном тахикардию. Пиковая HR возрастает до 124±12% от исходного уровня. Кофеин при 2, 4 или 10 мг/кг значительно ослабляет вызванную регаденозоном тахикардию дозозависимым способом. Пиковые HR повышаются до 109±21%, 79±20% и 74±16% от исходного уровня соответственно (все p<0,05 по сравнению с контролем).

Регаденозон снижает LVSP (пиковое) на 9±1% от исходной величины в 139±5 мм Hg (n=8). В присутствии кофеина при 1 и 2 мг/кг регаденозон еще значительней снижает LVSP на 9±3% и 6±2% от исходного уровня соответственно. В присутствии 4 мг/кг кофеина регаденозон не вызывает значимого снижения в LVSP (1±5% снижение от контроля, p>0,05), тогда как в присутствии 10 мг/кг кофеина регаденозон увеличивает LVSP (11±7% прирост от контроля).

В/в инъекция 5 мкг/кг регаденозона вызывает увеличение в LV dP/dt_Max. Регаденозон увеличивает LV dP/dt _Max (пиковое) на 65±7% от исходной величины в 3240±196 мм Hg/с. Влияния кофеина на вызываемое регаденозоном увеличение в LV dP/dt_Max противоречивое. Увеличение в LV dP/dt _Max, вызываемое регаденозоном, несколько больше в присутствии кофеина при 1 мг/кг. В присутствии кофеина при 2 и 4 мг/кг, вызываемое регаденозоном увеличение в LV dP/dt_Max несколько меньше. Вызываемое регаденозоном увеличение в LV dP/dt_Max не изменяется в присутствии 10 мг/кг кофеина.

Как величина увеличения CBF, так и длительность коронарной вазодилатации важны для точного диагноза при визуализации миокардиальной перфузии. Наиболее важным результатом исследования является то, что кофеин снижает длительность коронарной вазодилатации, но не максимальное увеличение CBF под действием регаденозона. Таким образом, длительность коронарной вазодилатации, опосредованной рецептором A_2A , более чувствительна, чем максимальный CBF, к антагонизму под действием кофеина.

Кофеин является неспецифическим и неизбирательным антагонистом всех субтипов аденозинового рецептора. Сродство (Ki) кофеина к аденозиновым A₁, A_2A , A_2B и A₃ рецепторам человека составляет 12, 2,4, 13 и 80 мкМ соответственно (Fredholm et al. (1999). Pharmacol Rev, 51:83-133). Ряд исследований показывает, что кофеин может ослаблять коронарную вазодилатацию, вызываемую аденозином (Smits et al. (1990) Clin Pharmacol Ther, 48:410-8; Kubo et al. (2004) J Nucl Med, 45:730-8; Lapeyre et al. (2004) J Nucl Cardiol, 11:506-11), дипиридамолом (Smits et al. (1991) J Nucl Med, 32:1538-41; Kubo et al. (2004) J Nucl Med, 45:730-8; Lapeyre et al. (2004) J Nucl Cardiol, 1:506-11) и агонистом рецептора A_2A , ATL-146e (Riou et al. (2002) J Am Coll Cardiol, 40:1687-94), у людей и собак. Таким образом, действие кофеина может приводить к ложноотрицательной визуализации миокардиальной перфузии в исследованиях с применением таких стресс-агентов (Smits et al. (1991) J Nucl Med, 32:1538-41). Однако одно сообщение указывает на то, что кофеин не изменяет вызываемой коронарной гиперемии, оцениваемой по фракционному резерву кровотока у пациентов с заболеванием коронарной артерии (Aqel et al. (2004) Am J Cardiol, 93:343-6).

Представленные результаты впервые показывают, что кофеин ослабляет вызванную регаденозоном коронарную гиперемию уникальным образом: кофеин избирательно снижает длительность вызванной регаденозоном коронарной вазодилатации дозозависимым способом, но незначительно изменяет максимальное увеличение в CBF. Кофеин при дозах от 1 до 10 мг/кг не снижает пиковые концентрации регаденозона в плазме или не изменяет фармакокинетический профиль регаденозона. Различающиеся сродства к рецептору A_2A и фармакокинетические профили регаденозона и кофеина могут объяснить уникальную картину ослабления коронарной гиперемии, вызываемой регаденозоном в присутствии кофеина. Сразу же после инъекции молекулы регаденозона могут связывать большую часть рецепторов A_2A в коронарном кровообращении, тем самым вызывая сходное максимальное увеличение в CBF в присутствии всех доз кофеина. Вскоре после инъекции концентрации регаденозона в плазме быстро снижаются, но концентрации кофеина в плазме остаются относительно постоянными. Вследствие этого, поскольку молекулы кофеина захватывают большее количество рецепторов A_2A, увеличение в CBF после максимальной чувствительности к регаденозону должно снижаться быстрее в присутствии кофеина, тем самым сокращается длительность коронарной вазодилатации, вызванной регаденозоном. Хотя приведенные результаты указывают на то, что кофеин вызывает дозозависимое уменьшение длительности вызванной регаденозоном коронарной вазодилатации у бодрствующих собак, увеличенный регаденозоном CBF остается на 2-кратных исходных уровнях в течение >3 мин в присутствии кофеина при 1, 2 и 4 мг/кг (эквивалентных употреблению 1-2 чашек кофе). Совсем недавно сообщалось, что одна 8-унцивая чашка кофе, принятая за 1 ч до введения аденозина, не маскирует наличие или тяжесть обратимого дефекта, изучаемого методом однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (Zoghbi et al. (2006) J Am Coll Cordiol, 47:2296-302).

Сообщается о десенсибилизации рецептора A_2A на клеточных экспериментальных моделях (Anand-Srivastava et al. (1989) Mol Cell Endocrinol, 62:273-9, Ramkumar et al. (1991) Mol Pharmacol, 40:639-47). Однако родственные исследования демонстрируют, что три последовательные дозы в 1,0 мкг/кг регаденозона (с интервалом 5-10 мин) вызывают подобное максимальное увеличение в CBF у бодрствующих собак (Trochu et al. (2003) J Cardiovasc Pharmacol, 41: 132-9). Кроме того, в данном исследовании эксперименты по временному контролю выполнены на четырех бодрствующих собаках с целью установления, существует ли тахифилаксия при вызванной регаденозоном коронарной вазодилатации. Результаты показывают, что отсутствуют значимые различия как в максимальном увеличении в CBF, так и в длительности 2-кратного увеличения в CBF, вызванного двумя инъекциями регаденозона (фиг.1). Таким образом, сниженная коронарная гиперемия, вызванная регаденозоном в присутствии кофеина, скорее всего связана с конкурентным антагонизмом рецепторов A _2A благодаря наличию кофеина.

Данное исследование также показывает, что в/в инъекция регаденозона вызывает умеренное снижение в MAP (таблица 2) и LVSP и незначительные увеличения в HR (таблица 2) и LV dP/dt_Max у бодрствующих собак. Вызванные регаденозоном изменения в MAP и HR в данном исследовании согласуются с родственными исследованиями (Trochu et al. (2003) J Cardiovasc Pharmacol, 41: 132-9, Zhao et al. (2003) J Pharmacol Exp Ther, 307:182-9), указывающими на то, что умеренное снижение в MAP, вызванное регаденозоном, связано с дилатацией периферических сосудов. Сказанное подтверждается снижением общего периферического сопротивления (TPR) и дилатацией сосудов в нижней части тела под действием регаденозона (Zhao et al. (2003) J Pharmacol Exp Ther, 307:182-9).

Показано, что кофеин дозозависимым образом ослабляет вызванное дипиридамолом увеличение кровяного давления у людей (Smits et al. (1991) Clin Pharmacol Ther, 50:529-37). Данное исследование также подтверждает, что кофеин вызывает дозозависимое ослабление гипотензии, вызванной регаденозоном, новым агонистом A_2A-аденозинового рецептора, у бодрствующих собак. Сообщается, что аденозин может повышать активность симпатического нерва у людей, тем самым вызывая тахикардию (Biaggioni et al. (1991) Circulation, 83:1668-75). Данные результаты показывают, что в/в инъекция регаденозона вызывает существенную тахикардию у бодрствующих собак, и согласуются с родственными исследованиями (Trochu et al. (2003) J Cardiovasc Pharmacol, 4l:132-9, Zhao et al. (2003) J Pharmacol Exp Ther, 307:182-9). Что еще более важно, одно недавнее исследование показывает, что вызванная регаденозоном тахикардия у бодрствующих крыс полностью опосредована симпатоэксцитацией (Dhalla et al. (2006) J Pharmacol Exp Ther, 316:695-702), где вызванную регаденозоном тахикардию устраняют с помощью гексония (ганглиевого блокатора). Настоящее исследование демонстрирует, что кофеин снижает вызванную регаденозоном тахикардию у бодрствующих крыс дозозависимым способом. Однако механизм(ы) подавления кофеином вызванной регаденозоном тахикардии подлежит уточнению.

Таким образом, результат приведенного выше примера указывает, что в/в дозы кофеина от 1 до 10 мг/кг

(1) не изменяют исходного уровня CBF и гемодинамики на 45 мин, когда концентрации кофеина в плазме достигают 52±2 мкМ;

(2) несущественно снижают вызванные регаденозоном максимальные увеличения CBF;

(3) вызывают дозозависимое снижение длительности вызванной регаденозоном коронарной вазодилатации и

(4) ослабляют вызванную регаденозоном синусовую тахикардию и гипотензию.

ПРИМЕР 2

Цели:

Главная цель состоит в оценке влияния 200 мг-пероральной дозы кофеина на вызванное регаденозоном увеличение миокардиального кровотока (MBF), измеряемое приблизительно через 2 часа после приема кофеина. Дополнительные цели включают следующее:

- оценить реакцию вызванной регаденозоном частоты сердечных сокращений (HR) для случая предварительного приема кофеина и без кофеина

- оценить взаимосвязь между вызванным регаденозоном увеличением в MBF и изменениями HR и будет ли указанная взаимосвязь изменяться при пероральном приеме кофеина

- оценить реакцию вызванного регаденозоном кровяного давления (BP) для случая предварительного приема кофеина и без кофеина

- оценить безопасность и переносимость регаденозона для случая предварительного приема кофеина и без кофеина

- оценить, будет ли влияние предварительного приема кофеина на реакцию MBF по отношению к регаденозону различаться в случае волонтеров мужского и женского пола.

Методология

Проведено рандомизированное двойное слепое перекрестное исследование регаденозона на нормальных субъектах в присутствии или отсутствии кофеина. Сканирования методом позитронно-эмиссионной томографии (PET) в условиях покоя и стресса выполняют после введения регаденозона (однократная внутривенная (в/в) доза 400 мкг, вводимая за 10 секунд, с последующей промывкой 5 мл физиологического раствора) и последующего дозированного введения 200 мг кофеина или плацебо на каждый 2 день исследования. В качестве радионуклида в PET сканировании используют ¹⁵ O-воду. Между днями дозирования существует 1-14-дневный период вымывания. Забор проб крови и оценку безопасность производят в течение 120 минут после введения исследуемого лекарственного препарата.

Число субъектов (планируемое и анализируемое)

Для исследования планировалось завербовать 52 субъекта (26 в каждой перекрестной последовательности) с тем, чтобы 40 субъектов завершили исследование с поддающимися оценке данными. 45 субъектов было занесено в список и рандомизировано и 43 субъектам дозированно вводился регаденозон, из которых 41 субъект завершил исследование, 40 субъектов было с поддающимися оценке данными на эффективность и 2 субъекта закончили преждевременно.

Диагнозы и основные критерии включения

Для включения в исследования рассматривались здоровые взрослые мужчины и женщины (в возрасте 18 лет), которым было предложено подписать письменное информированное согласие и которые должны быть некурящими и регулярно употреблять кофе (по меньшей мере, одну чашку в день). Занесенные в список субъекты не имели исходных клинически значимых физических признаков или электрокардиографических (ЭКГ) данных. От указанных субъектов также требовалось воздерживаться от потребления кофеина или других метилксантинов за 24 часа до каждого дня исследования и воздерживаться от всех видов продовольствия и напитков за исключением воды за 4 часа до оценки исходного уровня, пока не будет произведен заключительный забор пробы крови (спустя 5 минут после PET сканирования при нагрузке). Субъекты женского пола, потенциально способные к беременности, должны были иметь отрицательный исходный тест на беременность и использовать приемлемый способ предупреждения беременности в течение 3 месяцев до госпитализации и 1 недели после исследования.

Субъекты не включались в списки на исследование, если имели какие-либо заболевания, требующие постоянного лечения. Субъекты с историей алкоголизма или наркомании, или историей установленного или подозреваемого бронхоконстриктивного или бронхоспастического заболевания легких, или установленной аллергией на теофиллин или аминофиллин не допускались к внесению в список.

Испытуемый продукт, доза и способ введения, номер партии

Лекарственное средство для открытого исследования поставляется в виде стерильного исходного раствора в ампулах для одноразового употребления, каждая из которых содержит 5 мл регаденозона (0,08 мг/мл). Регаденозон, 400 мкг, вводят путем быстрого болюсного вливания через в/в катетер приблизительно за 10 секунд с последующей немедленной промывкой 5 мл физиологического раствора. Регаденозон (исследуемый лекарственный препарат) имеет следующий CVT номер партии: 803604.

Длительность обработки

На каждый 2 день исследования субъекты получают в однократной дозе регаденозон, введенный внутривенно путем быстрого (10-секундного) болюсного вливания 5 мл с последующей промывкой 5 мл физиологического раствора. Между введением доз существует 1-14-дневный период вымывания.

Терапия сравнения, доза и способ введения, номер партии

Капсулу кофеина, 200 мг п/о, или плацебо вводят приблизительно за 105 минут до регаденозона. CVT номер отслеживания капсул кофеина 1341 (Leg 3). Указанные капсулы содержат таблетки кофеина от Bristol-Myers Squibb (NoDoz®) с номером партии 405542. CVT номер отслеживания для капсул с плацебо 1341 (Leg 2).

Критерии оценки

Эффективность

Главной мерой эффективности является log резерва коронарного кровотока (CFR), представляющего собой соотношение стресс-MBF после дозированного введения регаденозона и MBF покоя. Измеряют концентрации кофеина, теофеллина и регаденозона в плазме и используют в диагностическом анализе.

Безопасность

Оценки безопасности включают нежелательные явления (AE), серьезные нежелательные явления, основные показатели состояния организма (HR и BP), ЭКГ, сопутствующие медикаментозные лечения и анкетирование по вопросу переносимости. Все полученные данные от субъектов, принимающих в однократной дозе регаденозон, включены в статистические выводы.

Основным анализом на эффективность является проверка, может ли кофеин снижать CFR после введения регаденозона, по меньшей мере, на 10%, с использованием дисперсионного анализа (ANOVA) с терминами последовательность, субъект внутри последовательности, период и терапия. Пределы 95% и 90% доверительных интервалов (CI) для различия средних по условиям испытания величин (кофеин-плацебо; log-шкала) были потенцированы с целью получения CI для соотношений rawscale медиантов. Если нижний предел последних 90% CI превышал 0,9, можно было утверждать с 95% достоверностью, что предварительное введение кофеина снижает CFR менее чем на 10%. Данные также анализируют с использованием критерия суммы рангов Уилкоксона.

Влияния кофеина сопоставлялись на субъектах мужского и женского пола. Диагностический фармакодинамический анализ включает влияние кофеина на HR и BP и на взаимосвязь между MBF и HR/BP, а также корреляцию между CFR и концентрациями кофеина в плазме. AE, существующие или ухудшающиеся после введения регаденозона, суммируются по тяжести, взаимосвязи с исследуемым препаратом и предшествующему введению кофеина состоянию. Основные показатели состояния организма (HR, систолическое и диастолическое BP и расчетное среднее артериальное давление) суммированы по индивидуальным временным моментам и рассчитаны величины с изменением от исходного уровня; определены CI для разности в средних значениях (кофеин-плацебо).

Изучены взаимосвязи между концентрациями кофеина и теофиллина в плазме и HR и BP. ЭКГ-интервалы и изменения от исходных величин в ЭКГ-интервалах представлены как события аномалий ритмичности или проводимости. Одномоментные медикаментозные употребления суммированы.

Ответы на анкетирование по вопросу переносимости анализируют, используя критерий суммы рангов Уилкоксона (вопрос "Как вы себя чувствуете?") и точный критерий Cochran-Mantel-Haenszel'a (день 2-единственный вопрос "Как данное испытание сопоставимо с первоначальным испытанием?").

Результаты эффективности

Log CFR±SE для группы с плацебо (n=40) равен 1,03±0,06 и log CFR для группы с кофеином (n=40) равен 0,95±0,06. CFR (стресс/покой) для группы с плацебо равен 2,97±0,16 и для группы с кофеином равен 2,75±0,16.

Хотя по данному исследованию отсутствуют изменения в установленных CFR, исследование не исключает и не устанавливает значимого влияния регаденозона и кофеина на log CFR. Потенцированные верхний и нижний пределы 95 и 90% доверительных интервалов для log CFR (отличие кофеина от плацебо) равны 1,08 и 0,78 и 1,06 и 0,80 соответственно.

Поскольку указанный низший предел ниже 0,9, а верхний предел >1, данное исследование не может установить или исключить взаимодействие. Однако существует 95% достоверность того, что изменение в CFR не составляет 20%.

Не установлено значимое влияние кофеина с регаденозоном на CFR в зависимости от пола.

Результаты оценки безопасности

AE, проявляющиеся в любой момент времени, далее перечислены в процентах от субъектов: расстройства сердечной деятельности 25/43 (58%), респираторные, торакальные и медиастинальные расстройства 25/43 (58%), расстройства нервной системы 18/43 (42%), сосудистые нарушения 13/43 (30%), нарушения скелетно-мышечные и соединительной ткани 12/43 (28%), общие нарушения и состояние места ввода препарата 11/43 (26%), желудочно-кишечные расстройства 2/43 (5%) и нарушения уха и лабиринта 1/43 (2%).

Наиболее часто встречающимися AE являются диспноэ 24/43 (56%), учащенное сердцебиение 21/43 (49%), гиперемия 13/43 (30%), головная боль 12/43 (28%), чувство тяжести 12/27 (28%) и парестезия 8/43 (19%).

Сорок процентов (17/43) субъектов имеет, по меньшей мере, одно AE с максимальной тяжестью умеренной, 49% (21/43) средней и 9% (4/43) тяжелой. Девяносто пять процентов субъектов (41/43) имеет, по меньшей мере, одно AE, которое считается наверняка связанным, и 2% (1/43) пациентов имеют AE, которое считается возможно связанным с обработкой регаденозоном.

Тяжесть вызванной регаденозоном головной боли снижается кофеином (p=0,012). Сообщения о случаях со смертельным исходом или SAE не поступали.

Кофеин снижает прирост HR, вызванный регаденозоном (p<0,001). Отсутствует влияние кофеина на систолическое или диастолическое кровяные давления в присутствии регаденозона.

После дозированного введения регаденозона у одного субъекта, по-видимому, развивается AV-блокада первой степени и у одного субъекта, по-видимому, возникает удлинение комплекса QTc (>500 мсек и изменение на >60 мсек), как установлено анализом ЭКГ, что не указывается как AE.

Согласно анкетированию на переносимость субъекты чувствуют себя более комфортно во время испытания с кофеином (p<0,001) и чувствуют себя лучше после испытания с кофеином, чем после испытания с плацебо (p<0,001) (Фиг.5).

Хотя по данному исследованию отсутствуют изменения в установленных CFR, исследование не исключает и не устанавливает значимого влияния регаденозона и кофеина на log CFR. Потенцированные верхний и нижний пределы 95 и 90% доверительных интервалов для log CFR (отличие кофеина от плацебо) равны 1,08 и 0,78, 1,06 и 0,80 соответственно.

Поскольку указанный низший предел ниже 0,9, а верхний предел >1, данное исследование не может установить или исключить взаимодействие. Однако существует 95% достоверность того, что изменение в CFR не составляет 20%.

Не установлено значимое влияние кофеина с регаденозоном на CFR в зависимости от пола.

Не существует различий в общем числе случаев AE между группами с плацебо и кофеином; однако кофеин снижает тяжесть AE. Сила головной боли, вызванной регаденозоном, снижается кофеином.