способ прогноза количества обострений у больных бронхиальной астмой

Формула изобретения

Способ прогноза количества обострений у больных бронхиальной астмой, заключающийся в том, что на градиенте плотности фиколл-верографин путем центрифугирования выделяют лимфоциты из цельной крови пациента, взятой из кубитальной вены в утренние часы натощак, в моменты обострения бронхиальной астмы и после его купирования взвесь лимфоцитов наносят на предметное стекло по типу «толстой капли», высушивают при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FITC-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитывают на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты, при снижении их количества во втором образце относительно первого на 4 и более клеток прогнозируют отсутствие обострений бронхиальной астмы в течение года, при повышении на 4 и более клеток - как минимум 2 обострения, отсутствие динамики изменения количества CD38+ лимфоцитов либо колебания в пределах 3 клеток предусматривает 1 обострение.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано для заблаговременной адекватной коррекции терапии больным бронхиальной астмой.

Известны способы прогнозирования развития обострений, их степени тяжести и дальнейшего течения бронхиальной астмы:

1) способ прогнозирования нестабильного течения бронхиальной астмы, включающий определение радиоаэрозольным методом показателя скорости бронхиального мукоцилиарного клиренса радиофармпрепарата в % за 1 час, что позволяет определить риск нестабильного течения заболевания в 89,5% случаев [1];

2) способ прогноза тяжести обострения при атопической бронхиальной астме, включающий определение в лимфоцитах больного показателей активности ферментов глицерол-3-фосфатдегидрогеназы и НАД-зависимой малатдегидрогеназы, снижение активности которых прогнозирует тяжелую степень обострения бронхиальной астмы [2];

3) способ прогнозирования течения инфекционно-аллергической бронхиальной астмы, включающий определение в эритроцитах крови эффекта регуляции ЦАМФ глутатионтрансферазы, при отсутствии которого у больного наблюдается фаза обострения заболевания с ожидаемыми частыми приступами удушья и необходимостью более интенсивной бронхолитической терапии [3];

4) способ прогнозирования обострения бронхиальной астмы у детей острой респираторной инфекции путем определения уровня оксида азота в выдыхаемом воздухе, при повышении концентрации которого на 50% и более от исходного определяют необходимость предотвращения данного обострения и профилактическом увеличении объема базисной терапии [4].

Однако недостатком данных способов является невозможность определения количества обострений у больных бронхиальной астмой в течение года.

Задачей предлагаемого способа является прогнозирование количества обострений у больных бронхиальной астмой для заблаговременной адекватной коррекции терапии заболевания.

Поставленную задачу решают за счет того, что на градиенте плотности фиколл-верографин путем центрифугирования выделяют лимфоциты из цельной крови пациента, взятой из кубитальной вены в утренние часы натощак, в моменты обострения бронхиальной астмы и после его купирования, взвесь лимфоцитов наносят на предметное стекло по типу «толстой капли», высушивают при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FITC-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитывают на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты, при снижении их количества во втором образце относительно первого на 4 и более клеток прогнозируют отсутствие обострений бронхиальной астмы в течение года, при повышении на 4 и более клеток - как минимум 2 обострения, отсутствие динамики изменения количества CD38+ лимфоцитов либо колебания в пределах 3 клеток предусматривает 1 обострение.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом: на градиенте плотности фиколл-верографин путем центрифугирования выделяют лимфоциты из цельной крови пациента, взятой из кубитальной вены в утренние часы натощак, в моменты обострения бронхиальной астмы и после его купирования, взвесь лимфоцитов наносят на предметное стекло по типу «толстой капли», высушивают при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FIТС-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитывают на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты, при снижении их количества во втором образце относительно первого на 4 и более клеток прогнозируют отсутствие обострений бронхиальной астмы в течение года, при повышении на 4 и более клеток - как минимум 2 обострения, отсутствие динамики изменения количества CD38+ лимфоцитов либо колебания в пределах 3 клеток предусматривает 1 обострение (табл.1).

Предлагаемый способ позволяет прогнозировать количество обострений бронхиальной астмы в течение года после госпитализации с точностью до 92,86%.

Пример 1. Больная К., 23 года (в таблице данные № 2), поступила в стационар с диагнозом: бронхиальная астма экзогенного генеза, обострение, аллергический ринит, сенсибилизация к эпидермалъным аллергенам. У данной пациентки из кубитальной вены в утренние часы натощак была взята кровь при поступлении (в момент обострения) и выписке (после купирования симптомов заболевания). Лимфоциты были выделены из цельной крови путем центрифугирования на градиенте плотности фиколл-верографин. Взвесь лимфоцитов нанесли на предметное стекло по типу «толстой капли», высушили при комнатной температуре, в полученных образцах иммуноцитохимическим методом с использованием мышиных античеловеческих антител CD38, антимышиных FITC-меченных антител и люминесцентной микроскопии подсчитали на 300 клеток в поле зрения CD38+ лимфоциты и выявили снижение количества CD38+ лимфоцитов на 16 клеток, что свидетельствует о купировании воспалительного процесса и определяет прогноз отсутствия обострений в течение года после госпитализации. При обследовании через год прогноз у больной К. подтвердился: обострений заболевания не было.

Пример 2. Больной В., 52 года (в таблице данные № 14), поступил в стационар с диагнозом: бронхиальная астма смешанного генеза, тяжелое течение, обострение средней степени тяжести. Иммуноцитохимическое исследования крови при поступлении и выписке выявили повышение количества CD38+лимфоцитов на 12 клеток, что свидетельствует о продолжающемся воспалительном процессе, в связи с чем можно прогнозировать 2 и более обострений в течение года после госпитализации, что и подтвердилось у больного В.

Пример 3. Больная А., 48 лет (в таблице данные № 11), поступила в стационар с диагнозом: бронхиальная астма аллергического генеза, среднетяжелое течение, обострение средней степени тяжести. Иммуноцитохимическое исследования крови при поступлении и выписке выявили изменение количества CD38+ лимфоцитов в пределах 3 клеток, что свидетельствует о недостаточном купировании воспалительного процесса, в связи с чем можно прогнозировать 1 обострение в течение года после госпитализации, что и подтвердилось у больной А.

Таблица 1
Совпадение прогноза количества обострений по предлагаемому способу
№ п/п	Количество CD38+ лимфоцитов на 300 клеток при поступлении	Количество CD38+ лимфоцитов на 300 клеток при выписке	Прогноз количества обострений по предлагаемому способу	Количество обострений в течение 12 месяцев после госпитализации	Совпадение прогноза
1	2	3	4	5	6
1	12	18	2 и более	2	+
2	16	0	0	0	+
3	20	25	2 и более	3	+
4	21	19	1	1	+
5	14	16	1	2	-
6	14	9	0	0	+
7	22	5	0	0	+
8	10	3	0	0	+
9	21	7	0	0	+
10	12	1	0	0	+
11	9	8	1	1	+
12	10	3	0	0	+
13	3	5	1	3	-
14	2	14	2 и более	3	+
15	11	0	0	0	+
16	8	5	1	1	+
17	1	6	2 и более	4	+
18	3	2	1	1	+
19	29	7	0	0	+
20	2	8	2 и более	2	+
21	11	2	0	0	+
22	7	3	0	0	+
23	9	2	0	0	+
24	9	6	1	1	+
25	3	11	2 и более	2	+
26	1	8	2 и более	0	-
27	5	1	0	0	+
28	2	1	1	1	+
29	1	1	1	1	+
30	6	7	1	1	+
1	2	3	4	5	6
31	10	11	1	1	+
32	4	3	1	0	-

33	1	40	2 и более	5	+
34	1	2	1	1	+
35	2	8	2 и более	1	-
36	2	16	2 и более	3	+
37	0	10	2 и более	3	+
38	0	4	2 и более	2	+
39	5	6	1	1	+
40	24	22	1	1	+
41	1	2	1	1	+
42	0	15	2 и более	2	+
43	1	7	2 и более	2	+
44	5	1	0	0	+
45	0	2	1	1	+
46	4	1	1	1	+
47	0	2	1	1	+
48	5	3	1	1	+
49	12	5	0	0	+
50	10	8	1	1	+
51	5	9	2 и более	2	+
52	20	1	0	0	+
53	12	15	1	1	+
54	15	17	1	1	+
55	1	8	2 и более	2	+
56	4	10	2 и более	2	+
57	6	15	2 и более	3	+
58	13	0	0	0	+
59	16	2	0	0	+
60	8	21	2 и более	3	+
61	26	6	0	0	+
62	14	20	2 и более	3	+
63	4	1	1	1	+
64	12	0	0	0	+
65	8	4	0	0	+
66	1	11	2 и более	2	+
67	4	12	2 и более	3	+
68	5	2	1	1	+
69	3	0	1	1	+
70	2	13	2 и более	2	+

Список литературы

1. Патент РФ № 2262891, А61В 6/02, A61K 51/12, А61Р 43/00, БИПМ № 30, 27.10.2005 г.

2. Патент РФ № 2190217, G01N 33/50, БИПМ № 27, 27.09.2002 г.

3. Патент РФ № 2063044, G01N 33/68, БИПМ № 18, 27.06.1996 г.

4. Заявка на изобретение РФ № 2007130783, А61В 5/093, БИПМ № 5, 20.02.2009 г.