ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола, обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью

Классы МПК:C07J1/00 Нормальные стероиды, содержащие атомы углерода, водорода, галогена или кислорода, не замещенные в положении 17 бета атомом углерода, например эстран, андростан
A61P15/18 женские контрацептивы
A61P35/00 Противоопухолевые средства
Автор(ы):, , , , ,
Патентообладатель(и):Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Санкт-Петербургский государственный университет (RU),
НИИ Акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта СЗО РАМН (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2010-11-18
публикация патента:

Изобретение относится к диацетату рацемического 18-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраен-3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -диола, обладающему антиимплантационной и антиоксидантной активностью при пониженном утеротропном действии. Соединение, как показывают результаты проведенных исследований, проявляет антиимплантационную и антиоксидантную активность при пониженной утеротропной активности, что является преимуществом по сравнению с используемыми на практике препаратами. Наличие антиоксидантной активности у указанного стероида весьма важно, поскольку соединения с таким действием могут быть средствами профилактики эстрогенозависимого рака молочной железы. 1 н.п.ф-лы, 1 пр., 4 табл.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при синтезе биологически активных аналогов стероидных эстрогенов, в частности, при получении диацетата рацемического 18-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраен-3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -диола, обладающего антиимплантационной и антиоксидантной активностью при пониженном утеротропном действии, что предполагает его применение в качестве контрацептивного препарата.

Известен патент, в котором предложен способ синтез 13-Alkylgona-1,3,5(10),9(11)-tetraenes [1], а также сообщается о наличии у него эстрогенной и гиполипидемической активности, который является наиболее близким к заявленному изобретению и выбран в качестве прототипа. Позднее этот стероид в оптически активной форме использовали в качестве промежуточного вещества для получения других соединений, однако его биологические свойства не изучали [2].

Техническим результатом заявленного изобретения является получение вещества, обладающего антиимплантационным и антиоксидантным действием при пониженной утеротропной активности.

Указанный технический результат достигается синтезом диацетата 13-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраен-3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -диола.

Схема синтеза стероида приведена в примере 1.

Пример 1. К раствору 1 г известного соединения (3-гидрокси-13-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраен-17-он) [3] в 40 мл ТГФ добавляют при перемешивании 10 мл 1М раствора алюмогидрида лития в ТГФ, смесь кипятят 2 ч. Затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, избыток растворителя разлагают этилацетатом и выливают в 1 л 3%-ного раствора соляной кислоты. Продукты восстановления экстрагируют тремя порциями этилацетата по 100 мл, объединенные экстракты промывают водой до нейтральной реакции, сушат безводным сульфатом натрия. Осушитель отфильтровывают, остаток растворяют в 40 мл пиридина, добавляют 25 мл уксусного ангидрида, реакционную смесь оставляют на сутки при комнатной температуре. После обычной обработки [1] целевое соединение выделяют кристаллизацией из метанола. Получают 1.03 г (78%) стероида, т.пл. 145-146.5°C (по лит. данным, т.пл. 141-143°C [1]).

Масс-спектр, m/z (Iотн , %): 368 (35, М+), 326 (51), 266 (19), 237 (100), 209 (27), 181 (14), 160 (37), 133 (12), 107 (16).

Спектр 13C ЯМР, диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 , м.д.: 9.81; 18.41; 21.00; 21.15; 21.91; 23.66; 24.44; 27.95; 28.16; 29.92; 43.88; 48.28; 82.56; 118.77; 120.21; 122.55; 125.97; 133.53; 133.76; 136.62; 148.39; 169.67; 171.10.

Найдено, %: C 74.99; H 7.70. C23H28O 4. Вычислено, %: C 74.97; H 7.66.

Масс-спектры получены в режиме хромато-масс-спектрометрии на приборе Aligent 6850 с масс-селективным детектором Aligent 5973. Хроматографический анализ проводили на капиллярной колонке HP-5MS длиной 30 м, внутренним диаметром 0.25 мм и толщиной пленки неподвижной фазы 0.25. Скорость газа-носителя (гелия) через колонку 1.3 мл/мин. Использовали линейное программирование температуры термостата колонки от 220 до 230°С со скоростью 5 С/мин. Температура испарителя 330°С, деление потока 20:1. Масс-селективный детектор обеспечивал сканирование масс-спектров, полученных с помощью ионизации электронным ударом (70 eV) в диапазоне от 50 до 800 m/z со скоростью 2 скана в секунду. Полученную информацию обрабатывали с помощью программы ADMIS.

Спектры получали при 295 °K на спектрометре DPX-300 фирмы Bruker с рабочей частотой 75.468 МГц. Для регистрации использовали раствор 50 мг вещества в 0.6 мл CDCl3 . Химические сдвиги измерены по отношению к TMS путем присвоения сигналу растворителя (CDCl3/CHCl3=99.9/0.1) стандартного значения 76.90 м. д.

Антиимплантационную активность рацемического диацетата 3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -дигидрокси-18-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраена исследовали следующим образом. К крысам-самкам массой 160-180 г с установившимся эстральным циклом подсаживали самцов, ежедневно в течение 3 суток, со дня обнаружения спермы во влагалищных мазках (первый день беременности) вводили подкожно препарат в масляном растворе. Через 20 дней регистрировали число плодов. Результаты экспериментальных исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1
Антиимплантационное действие диацетата 3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -дигидрокси-13-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраена (1)
Введенный препарат Доза, мг/кг массы тела в деньЧисло животных в опытеКонтрацептивный эффект, %
Контроль- 100
1 0.115 87
1 0.5 15100

Кроме того, в ходе исследований не выявлено патологии в развитии плодов и уродств у плодов под действием препарата у животных, сохранивших беременность. Размеры и масса плодов и плацент в этом случае не отличались от таковых у животных контрольной группы.

Утеротропное действие препарата в эффективных дозах заметно меньше, чем у применяемого в медицинской практике 17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -этинилэстрадиола (таблица 2).

Таблица 2
Утеротропное действие рацемического диацетата 3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -дигидрокси-13-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраена (1)
Введенный препарат Доза, мг/кг массы тела в деньЧисло животных в опытеВес матки, мг
Контроль - 613.4±0.8
Этинилэстрадиол 0.05 698.5±11.5
1 0.15 16.6±1.4
10.5 634.6±2.8
1 1.56 71.0±8.4
15.0 588.5±10.5

Антиоксидантные свойства диацетата 3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -дигидрокси-18-метил-эстра-1,3,5(10),8(9)-тетраена исследовали в соответствии с работами [5-9]. Результаты исследований, представленные в таблицах 3 и 4, обработаны по Стьюденту - указаны достоверно значимые различия по сравнению с контрольными опытами.

Таблица 3
Антиоксидантные свойства диацетата 3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -дигидрокси-13-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраена в мозге крыс (доза - 1.5 мг/кг веса тела в сутки)
Группа животных Основания Шиффа, у.е./мг липидов Диеновые конъюгаты, нмоль/мг липидов Триеновые конъюгаты у.е./мг липидов Коэффициент Клейна Малоновый диальдегид, нмоль/мг, белка
Интактныедиацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424
крысы133±9 3.7±0.4 0.067±0.005 0.186±0.017 1.35±0.08
Интактныедиацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424
крысы,91±5 2.6±0.1 0.050±0.005 0.148±0,10 1.14±0,06
получавшиеР<0,01 Р<0,01 Р<0,05Р<0,05 Р<0,05
стероид 1 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424

Таблица 4
Антиоксидантные свойства диацетата 3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -дигидрокси-13-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраена (1) в печени крыс (доза - 1.5 мг/кг веса тела в сутки)
Группа животных Основания Шиффа, у.е./мг липидов Диеновые конъюгаты, нмоль/мг липидов Триеновые конъюгаты, у.е./мг липидов Коэффициент Клейна Малоновый диальдегид, нмоль/мг белка
Интактные крысы 173±115.8±0.4 0.123±0.008 0.248±0.010 1.43±0.10
Интактные 134±6 4.6±0.3 0.163±0.009 0.214±0,14 0.98±0,03
крысы, получавшие стероид 1 Р<0,01Р<0,05 Р<0,05 Р<0,05Р<0,01

Таким образом, как показали многочисленные экспериментальные исследования, проведенные на лабораторной базе Санкт-Петербургского государственного университета и НИИ акушерства и гинекологии, стероид [1] в используемых дозах проявляет антиимплантационную и антиоксидантную активность при пониженной утеротропной активности, что является преимуществом по сравнению с используемыми на практике препаратами. Наличие антиоксидантной активности у заявленного стероида очень важно, поскольку соединения с таким действием могут быть использованы как средства профилактики эстрогенозависимого рака молочной железы [4], что является особенно актуальным сегодня для сохранения здоровья, учитывая наблюдающуюся в последние годы тенденцию этого заболевания к существенному росту.

Литература

1. 13-Alkylgona-1,3,5(10),9(11)-tetraenes // U.S. Pat. 3391170 (1968) - прототип

2. 8(9)-Dehydroestradiol derivatives // PCT Int. Appl. WO 98/16544.

3. Сорокина И.Б., Баркова Т.И., Захарычев А.В., Чигирь Р.Н., Ананченко С.Н., Торгов И.В. // Эстрогенная и противоопухолевая активность в ряду трансформированных аналогов эстрона и эстрадиола. Изв. АН СССР, сер. хим. 1973, № 5. С.664-670.

4. Felty Q., Singh K., Roy D. Estrogen-induced G1/S transition to go-arrested estrogen-dependent breast cancer cells is regulated by mitochondrial oxidant signaling // Oncogene. 2005. V.24. N 31. P.4883-4893.

5. Folch J., Less M., Sloane-Stanly G.M. A simple method for the isolation and purification total lipids from animal tissues // J. Biol. Chem. 1957. V.226. P.497-509.

6. Bartlet G. Phosphorus assay in colomn chromathography // J. Biol. Chem. 1959, V.23. P.466-473.

7. Шведова А.А., Поленский Н.Б. // Метод определения конъюгатов гидроперекисей липидов в экстрактах тканей. Исследование синтетических и природных антиоксидатов (под редакцией Е.Б.Бурлаковой): M. - 1992. С.74-75.

8. Bidlack W.R., Tappel A.L. Fluorescent products of phospholipids during lipid peroxidation // Lipids. 1973. P.8.

9. Андреева Л.И., Кожемякин Л.А., Кашкун А.А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с ТБК // Лабор. дело. 1988. № 11. С.41-43.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Антиимплантационное и антиоксидантное средство, представляющее собой

диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424

диацетат13-этилгона-1,3,5(10),8(9)-тетраен-3,17диацетат 13-этилгона-1,3,5( 10), 8( 9)-тетраен-3,17бета-диола,   обладающий антиимплантационной и антиоксидантной активностью, патент № 2454424 -диола.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2454424

patent-2454424.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс C07J1/00 Нормальные стероиды, содержащие атомы углерода, водорода, галогена или кислорода, не замещенные в положении 17 бета атомом углерода, например эстран, андростан

Патенты РФ в классе C07J1/00:
способ получения андроста-4,9(11)-диен-3,17-диона из фитостерина -  патент 2512076 (10.04.2014)
стероидные лиганды и их применение для модуляции переключения генов -  патент 2487134 (10.07.2013)
способ получения 17-(3-гидроксипропил)-17-гидроксистероидов -  патент 2466137 (10.11.2012)
новые стероидные соединения, обладающие повышенной растворимостью в воде и устойчивостью к метаболизму, и способы их приготовления -  патент 2458065 (10.08.2012)
микробиологический способ получения 1,2-дегидрированных производных 4-3-кетостероидов ряда андростана в водно-органических средах -  патент 2447154 (10.04.2012)
способ получения 6-метиленандрост-4-ен-3,17-диона из андрост-4-ен-3,17-диона, способ получения 6-метиленандроста-1,4-диен-3,17-диона (эксеместана) с использованием полученного 6-метиленандрост-4-ен-3,17-диона -  патент 2425052 (27.07.2011)
3-метокси-2-фтор-18-этил-8 -гона-1,3,5( 10 )-триены, обладающие остеопротекторной и гипохолестеринемической активностью -  патент 2418000 (10.05.2011)
иммуномодуляторные стероиды -  патент 2417792 (10.05.2011)
средство, стимулирующее клеточный иммунитет млекопитающих -  патент 2415863 (10.04.2011)
способ 11 бета-гидроксилирования дельта4-3-кетостероидов -  патент 2399674 (20.09.2010)

Класс A61P15/18 женские контрацептивы

Патенты РФ в классе A61P15/18:
способ выбора лечения акне у женщин -  патент 2529789 (27.09.2014)
система доставки лекарственных веществ -  патент 2488369 (27.07.2013)
фармацевтическая композиция, способ ее получения и многофазный фармацевтический препарат для ингибирования овуляции у млекопитающего -  патент 2482853 (27.05.2013)
фармацевтическая композиция, содержащая тетрагидрофолиевую кислоту -  патент 2479306 (20.04.2013)
фармацевтическая комбинация этинилэстрадиола и дроспиренона для использования в качестве контрацептива -  патент 2449796 (10.05.2012)
лекарственное средство для вагинального применения, обладающее противозачаточным и защитным от инфекционных заболеваний действием -  патент 2432961 (10.11.2011)
новые режимы применения устройств контролируемой доставки лекарств для контрацепции -  патент 2408332 (10.01.2011)
многофазный фармацевтический препарат для ингибирования овуляции у млекопитающего -  патент 2396082 (10.08.2010)
применение комбинации из этинилэстрадиола и ацетата хлормадинона для приготовления лекарственного средства -  патент 2394579 (20.07.2010)
модуляторы рецепторов прогестерона -  патент 2381232 (10.02.2010)

Класс A61P35/00 Противоопухолевые средства

Патенты РФ в классе A61P35/00:
способ лечения рака толстой кишки -  патент 2529831 (27.09.2014)
способ оценки эффекта электромагнитных волн миллиметрового диапазона (квч) в эксперименте -  патент 2529694 (27.09.2014)
новые (поли)аминоалкиламиноалкиламидные, алкил-мочевинные или алкил-сульфонамидные производные эпиподофиллотоксина, способ их получения и их применение в терапии в качестве противораковых средств -  патент 2529676 (27.09.2014)
производные 1, 2-дигидроциклобутендиона в качестве ингибиторов фосфорибозилтрансферазы никотинамида -  патент 2529468 (27.09.2014)
фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа -  патент 2529373 (27.09.2014)
модульный молекулярный конъюгат для направленной доставки генетических конструкций и способ его получения -  патент 2529034 (27.09.2014)
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
лечение опухолей с помощью антитела к vegf -  патент 2528884 (20.09.2014)
способ лечения местнораспространенного неоперабельного рака поджелудочной железы -  патент 2528881 (20.09.2014)
новые бензолсульфонамидные соединения, способ их получения и применение в терапии и косметике -  патент 2528826 (20.09.2014)


Наверх