равномерно меченный дейтерием или тритием 4-(2-аминоэтил)пирокатехол с использованием наноалмазного порошка

Формула изобретения

Равномерно меченный дейтерием или тритием 4-(2-аминоэтил)пирокатехол формулы I:

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в аналитической химии и биологических исследованиях.

При изучении физиологически активных соединений необходимы их меченые аналоги.

Известно, что замена атомов соединений на их меченые аналоги не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения (Evans Е.А. - Tritium and its compounds London Butterworths, 1974, p.48) [I].

Известен 4-(2-аминоэтил)пирокатехол формулы I:

Данное соединение является эндогенным катехоламином с - и -адренергической активностью (Мерк 3479) (J. F. Dasta, M. G. Kirby // Pharmacotherapy 6, 304 (1986) [2]).

Известен способ получения его меченного тритием аналога (C.N.Filer, D.Orphanos, R.J.Seguin "Synthesis of [Ring-3H]dopamine and fluoro analogues at high specific activity" // Synthetic Communications. 2006. Vol. 36. P.975-978 [3]). Полученный препарат содержал метку только в ароматическом кольце (44 Ки/ммоль), при этом содержание изотопа водорода в среднем равнялось около 1.5 атомов на молекулу 4-(2-аминоэтил)пирокатехола.

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является получение равномерномеченного дейтерием и тритием 4-(2-аминоэтил)пирокатехола с использованием наноалмазного порошка (НАП), что расширит ассортимент меченых аналогов физиологически активных соединений.

Достигается указанный технический результат получением меченного изотопами водорода 4-(2-аминоэтил)пирокатехола формулы I:

Ниже приведен пример реализации изобретения.

Пример I.

20 мг НАП смешивали с раствором 2 мг солянокислого 4-(2-аминоэтил)пирокатехола в 30 мкл метанола, растворитель упарили, а остаток лиофилизировали. Остаток смешали с 60 мг катализатора Линдлара, механически растерли и снова лиофилизировали.

Высушенный остаток помещали в ампулу. Ампулу вакуумировали и заполняли дейтерием или тритием. Реакцию вели при 180°С в течение 15 мин. Ампулу снова вакуумировали, катализатор наносили на фильтр, вещество экстрагировали смесью метанола с уксусной кислотой (5×0.5 мл метанола с 1% уксусной кислотой). Экстракты упаривали, остаток растворяли в метаноле (3×1 мл) и вновь упаривали для удаления лабильного дейтерия или трития.

Анализ проводили на Милихроме А-02, колонка ProntoSIL-120-5-C ₁₈ AQ DB-2003, 2.0×75 мм, 5 мкм, 0.2 мл/мин, 35°С, детекция - 210 нм, А - 0.2 М LiClO₄+0.005М НСlO ₄ буфер, Б - метанол, градиент Б (0-100) за 12.5 мин, время удерживания 4-(2-аминоэтил)пирокатехола - 4.27 мин. Время удерживания 4-(2-аминоэтил)пирокатехола при анализе в тех же условиях, но при использовании воды, содержащей 0.1% трифторуксусной кислоты, в качестве системы А равнялось 3.83 мин.

Меченый 4-(2-аминоэтил)пирокатехол очищали также методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Хроматографию проводили на колонке Kromasil 100C₁₈, 8×150 мм, 7 мкм, система: метанол-вода-уксусная кислота-трифторуксусная кислота (20:80:0.1:0.01), скорость потока - 2 мл/мин, время удерживания - 11 мин, содержание меченого препарата не менее - 98%, выход - 7-10%.

а) В случае использования дейтерия в молекулу 4-(2-аминоэтил)пирокатехола включалось в среднем 4.8 атома детерия. Причем распределение дейтерия доходило до семи атомов в молекулу допамина (14%), а изотопомер, содержащий 5 атомов дейтерия, образовывался с наибольшим выходом (31%). Таким образом, при использовании наноматериалов распределение метки в полученном соединении и прототипе существенно отличалось, т.е. получено новое меченое соединение с другими характеристиками.

б) В случае использования трития получен меченый 4-(2-аминоэтил)пирокатехол с молярной радиоактивностью до 130-135 Ки/ммоль, что в три раза выше, чем в прототипе.

Таким образом получено равномерномеченное изотопами водорода соединение.