средство, обладающее гипохолестеринимическим, гиполипидемическим и желчегонным действием

Формула изобретения

Средство, обладающее гипохолестеринимической, гиполипидемической и желчегонной активностью, содержащее концентрат тритерпеновых кислот не менее 75 вес.%, полученный из шрота ягод облепихи путем трехкратной экстракции метил-третбутиловым эфиром в общей сложности в течение 15 ч, последующей очистки от неполярных примесей промывкой петролейным эфиром, удаления остаточных количеств полярных соединений экстракцией горячей водой 80-90°С с одновременной отгонкой с водяным паром петролейного эфира.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к получению лечебно-профилактических средств из растительного сырья облепихи.

Известны [Пат. РФ 2125459] биологически активные вещества (БАВ), полученные из облепихового сырья путем его экстракции органическим растворителем и последующим разбавлением полученного экстракта водой. В качестве исходного сырья используют жом плодов облепихи, или лист облепихи, или их смесь, а в качестве органического растворителя 90-96%-ный этиловый спирт. Экстракцию проводят при температуре кипения растворителя. Данный способ обеспечивает высокую степень извлечения как липофильной фракции (жиров, каротиноидов и хлорофиллов), так и водорастворимых БАВ. Тритерпеновые кислоты, обладающие биологической активностью, по данному способу не получают.

Наиболее близким аналогом (прототипом) к заявляемому изобретению является средство, обладающее гиполипидемическим и противоатеросклеротическим действием, гепатозащитной, желчегонной и антилитогенной активностью [Пат. РФ 2011383]. Для получения средства в качестве сырья используют шрот ягод облепихи, остающийся после получения облепихового масла. Экстракцию сырья проводят изопропиловым спиртом, а выделение суммы тритерпеновых кислот из упаренного концентрата осуществляют осаждением петролейным эфиром и последующей фильтрацией целевого продукта.

Экстракция нативного сырья с целью получения облепихового масла в прототипе проводится последовательно растительным маслом и фреоном, при этом извлекается преимущественно липофильная фракция, в то время как полярные соединения, в том числе алифатические и тритерпеновые кислоты, остаются в шроте.

При использовании в качестве экстрагента изопропилового спирта (полярного растворителя) наряду с тритерпеновыми кислотами экстрагируется значительное количество органических кислот, обладающих раздражающим действием, что является недостатком известного средства.

К тому же, получение средства-прототипа сопровождается высоким расходом экстрагентов (изопропилового спирта, петролейного эфира), часть которых поглощается экстрагируемым шротом и экстрактом на соответствующих стадиях (экстракция и промывка экстракта) и теряется при сушке; пары растворителей загрязняют атмосферу.

Задачей настоящего изобретения является создание нового средства, обладающего гипохолестеринемической, гиполипидемической и желчегонной активностью, на основе концентрата тритерпеновых кислот, полученного из шрота ягод облепихи, с пониженным содержанием сильных кислот (яблочной, щавелевой, винной, лимонной), обладающих нежелательным раздражающим действием.

Поставленная задача решается средством, содержащим концентрат тритерпеновых кислот, полученный из шрота ягод облепихи путем трехкратной экстракции

метилтретбутиловым эфиром в общей сложности в течение 15 час, последующей очистки от неполярных примесей промывкой петролейным эфиром, удаления остаточных количеств полярных соединений экстракцией горячей водой 80-90°С с одновременной отгонкой с водяным паром петролейного эфира.

Получение предлагаемого средства заключается в следующем.

Шрот облепихи экстрагируют трехкратно метилтретбутиловым эфиром, объединенный экстракт упаривают до получения сухого остатка, который далее заливают петролейным эфиром, и выдерживают.Надосадочный петролейный эфир отделяют декантацией, к остатку добавляют воду, полученную смесь при перемешивании нагревают и остаточный петролейный эфир отгоняют с водяным паром. Водную суспензию фильтруют, осадок промывают водой, сушат и получают целевой продукт.

Использование для получения заявляемого средства в качестве экстрагента

метилтретбутилового эфира, менее полярного растворителя по сравнению с изопропанолом, позволяет эффективно извлекать тритерпеновые кислоты. При этом метилтретбутиловый эфир плохо растворяет полярные компоненты, содержащиеся в шроте облепихи, в том числе сильные органические кислоты (яблочную, щавелевую, винную, лимонную).

Удаление из экстракта липофильных соединений с последующей очисткой от водорастворимых примесей включает последовательную обработку экстракта горячим петролейным эфиром и водой.

Получают целевой продукт с высоким содержанием тритерпеновых кислот (не менее 75 вес.%) и не содержащим сильных органических кислот.

Не менее важно то, что заявляемое средство является более дешевым ввиду снижения расходов органических экстрагентов при его получении и уменьшения рисков, связанных с выбросом паров в окружающую среду.

Предлагаемое новое средство, полученное из шрота облепихи, не обладает раздражающим действием, имеет более высокую биологическую активность и потому может применяться в меньшей дозировке.

Предлагаемое изобретение иллюстрируется следующим примером.

Пример. 17 кг шрота облепихи заливают 51 л метилтретбутилового эфира, настаивают в течение 5 ч. Экстракт сливают, экстракцию повторяют 2 раза. Объединенные экстракты упаривают, полученный остаток (670 г) промывают петролейным эфиром (1,7 л), раствор примесей в петролейном эфире отделяют, к осадку после промывки петролейным эфиром прибавляют воду (3 л), отгоняют с водяным паром остатки петролейного эфира (510 мл) для повторного использования, водную суспензию фильтруют, сушат, получают 273 г (1,6%) осадка с содержанием тритерпеновых кислот не менее 75 вес.% (титриметрически), кислотное число 1,4 мг КОН/г. К шроту добавляют воду (20 л), нагревают и отгоняют с водяным паром

метилтретбутиловый эфир (15 л) для повторного использования.

Проведением экстракции в условиях прототипа получен продукт с содержанием тритерпеновых кислот 62% (титриметрически), кислотное число 151 мг КОН/г.

Использование метилтретбутилового эфира в качестве экстрагента приводит к увеличению содержания тритерпеновых кислот и кардинальному снижению содержания сильных кислот в экстракте по сравнению с прототипом.

Определение биологической активности заявляемого средства проводилось следующим образом.

Экспериментальная гиперхолестеринемия у белых крыс вызывалась внутрибрюшинным введением твина-80 из расчета 200 мг/100 г массы тела. В течение 10 дней до введения твина-80 перорально вводился исследуемый препарат в дозах 10, 50, 100, 200 и 500 мг/кг. Через 12 ч после внутрибрюшинной инъекции твина-80 крыс забивали декапитацией и в сыворотке крови определяли содержание холестерина. В качестве вещества сравнения использовался экстракт облепихи, полученный по способу, описанному в прототипе.

Как показали опыты (таблица 1), в результате введения твина-80 у крыс контрольной группы уровень холестерина в крови по сравнению с интактными животными существенно повысился (на 52%). Введение заявляемого средства задерживало повышение холестерина в крови у животных под влиянием твина-80, причем отчетливый гипохолестеринемический эффект проявлялся при применении средства уже в дозе 10 мг/кг (снижение концентрации холестерина в крови на 46% по отношению к контролю). Дальнейшее увеличение дозы сопровождалось незначительными изменениями концентрации холестерина в крови, и его уровень оставался вблизи значений группы животных, получавших препарат в дозе 10 мг/кг. То есть дальнейшее увеличение дозы средства в условиях экспериментальной гиперлипидемии не сопровождалось значительным ростом эффективности в отношении данного показателя, за исключением дозы 200 мг/кг, при использовании которой уровень холестерина понизился на 60% по сравнению с контролем.

Как видно из данных таблицы 1, гипохолестеринемическое влияние заявляемого средства превышало действие экстракта, получаемого по способу, описанному в прототипе.

Для оценки гиполипидимического действия препарата определяли следующие биохимические показатели: в крови - содержание общих липидов, -липопротеидов и пре- -липопротеидов.

Из данных, представленных в таблице 2, видно, что в результате использования заявляемого средства отмечается улучшение показателей крови (общих липидов; липопротеидов и пре- -липопротеидов) по сравнению с контролем при дозировке от 10 до 200 мг/кг. Дальнейшее увеличение дозировки препарата до 500 мг/кг не приводит к улучшению показателей.

Желчегонная активность исследуемого продукта изучалась в опытах на здоровых белых крысах по методике Н.Д.Новосилец путем регистрации степени заполнения желчи трубки капилляра, вставленного в изолированную часть двенадцатиперстной кишки с впадаемым в нее желчным протоком. Заявляемое средство в дозе 10 мг/кг в 2 мл подсолнечного масла вводилось зондом в желудок крыс ежедневно в течение 10 дней. Контрольными служили опыты с введением подсолнечного масла в том же количестве.

Для сравнения эффективности желчегонного действия заявляемого средства ставились дополнительные опыты по той же методике с препаратом, получаемым из облепихи по способу, описанному в прототипе.

Под влиянием заявляемого средства у животных увеличилось выделение желчи по сравнению с контрольными опытами на 70,1% (Р<0,001) (таблица 2).

Таблица 3
Влияние заявляемого средства и продукта экстракции облепихи по способу, описанному в прототипе, на желчеотделение подопытных животных
Группы животных	Выделение желчи, в мм заполнения трубки капилляра	% изменений по отношению к контрольным значениям
Интактные животные	175,8±5,1
10-дневное введение подсолнечного масла (контроль)	457,0±50,4
10-дневное введение экстаракта, получаемого по способу, описанному в прототипе, в подсолнечном масле	768,7±53,5	+68,2
10-дневное введение заявляемого средства в подсолнечном масле	780,3±55,2	+70,1

Из представленных в таблице 3 данных видно, что желчегонная активность заявляемого средства не уступает таковой для средства, полученного по способу, описанному в прототипе.