способ размножения лилий in vitro

Классы МПК:A01H4/00 Разведение растений из тканевых культур
A01G7/00 Ботаника, общие вопросы
Автор(ы):,
Патентообладатель(и):Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева" (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2008-12-08
публикация патента:

Изобретение относится к области садоводства. В способе отделяют экспланты, обрабатывают их раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, подвергают их стерилизации. Затем высаживают экспланты на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты. Затем отделяют микролуковицы от эксплантов и укореняют на питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050 -нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С. Изобретение позволяет повысить выход размножаемого материала за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии оптимальных концентраций регуляторов роста. 5 табл.

Изобретение относится к области садоводства и может быть использовано для микроразмножения растений лилий in vitro.

Известен способ размножения лилий in vitro (Мазур A.M., Калашникова Е.А. Клональное микроразмножение ценных гибридов лилий // Сельскохозяйственная биотехнология. Избранные работы / Под ред. В. С.Шевелухи. - М.: Евразия, 2000. - 264 с.). В качестве первичного экспланта использовали чешуйки луковиц, которые стерилизовали 0,1%-ным раствором сулемы (HgCl2) в течение 10 минут, высаживали на среду Мурасиге и Скуга, дополненную сахарозой 20-60 г/л и регуляторами роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 1,5 мг/л способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050 -нафтилуксусной кислоты, и культивировали в световой комнате при температуре 25±1°С, 24-часовом освещении белыми люминесцентными лампами с интенсивностью света 3000 лк. Процесс ризогенеза индуцировали добавлением в питательную среду способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050 -нафтилуксусной кислоты в концентрации от 0,2 мг/л до 0,5 мг/л.

Недостатком данного способа является невысокий коэффициент размножения.

Технический результат заключается в повышении выхода размножаемого материала за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии оптимальных концентраций регуляторов роста.

Технический результат достигается тем, что в способе размножения лилий in vitro, включающем отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга, перед стерилизацией экспланты обрабатывают раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, затем микролуковицы отделяют от эксплантов и укореняют на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050 -нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С.

Способ осуществляют следующим образом.

Из луковицы лилии отделяют внутренние (сочные) чешуи, которые используют в качестве эксплантов, замачивают их в растворе препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч. Длительность обработки и концентрация препарата эпибрассинолид подобраны на основании предварительных экспериментов (табл.1).

способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050

После этого чешуи стерилизуют и в стерильных условиях высаживают в пробирки на питательную среду Мурасиге-Скуга, содержащую 7,0 г/л агара, 60 г/л сахарозы и регуляторы роста - 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты. Состав среды, использованный при культивировании чешуи луковиц, является стандартным для микроразмножения растений в культуре in vitro, за исключением подобранных в предварительных опытах концентраций сахарозы (табл.2) и регуляторов роста (табл.3). Культивирование осуществляют при постоянном освещении люминесцентными лампами с интенсивностью около 3000 лк и при температуре 25°С (физические условия выращивания близки к оптимальным для культивировании эксплантов растений).

Таблица 2
Концентрация сахарозы, г/л Микролуковицы, штук/эксплант
101,6
20 1,8
30 2,4
402,5
50 2,6
60 2,9
702,7

При выращивании эксплантов на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением сочетания 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты в течение 4 недель культивирования образуется максимальное число микролуковиц - 8 штук/эксплант (табл.3).

способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050

В последующем микролуковицы отделяют от чешуй и пересаживают на питательную среду для укоренения. Укоренение проводят на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050 -нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С. Эти условия были выбраны как наиболее способствующие укоренению пробирочных растений лилий (табл.4, 5). После укоренения размноженные растения переносят в почву и выращивают обычным способом.

способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050

Таблица 5
Длина светового дня, ч Процент укоренения
2453,1±2,8
16 84,4±3,1
0100±0,0
способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050
Температура, °С Процент укоренения
14100±0,0
23 65,1±1,6

В результате использования предложенного способа повышается выход размножаемого материала (8 штук/эксплант) за счет увеличения количества образующихся микролуковиц при положительном влиянии предобработки чешуй лилий препаратом эпибрассинолид с последующим их культивированием на питательной среде в присутствии сочетания регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индоуксусной кислоты. Культивирование микролуковиц на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга, дополненной 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050 -нафтилуксусной кислоты, в темноте при температуре 14°С приводит к 100% укоренению и высокой жизнеспособности растений - регенерантов при последующей высадке в почву.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ размножения лилий in vitro, включающий отделение эксплантов, стерилизацию, посадку на питательную среду Мурасиге-Скуга, отделение микролуковиц от эксплантов, их укоренение на питательной среде Мурасиге-Скуга, отличающийся тем, что перед стерилизацией экспланты обрабатывают раствором препарата эпибрассинолид в концентрации 0,1 мг/л и времени экспозиции 1 ч, экспланты высаживают на агаризованную питательную среду Мурасиге-Скуга с содержанием регуляторов роста 1,5 мг/л 6-бензиламинопурина и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты, затем микролуковицы отделяют от эксплантов и укореняют на агаризованной питательной среде Мурасиге-Скуга с добавлением 10-11 моль/л тидиазурона и 0,5 мг/л способ размножения лилий in vitro, патент № 2384050 -нафтилуксусной кислоты в темноте при температуре 14°С.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2384050

patent-2384050.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A01H4/00 Разведение растений из тканевых культур

Класс A01G7/00 Ботаника, общие вопросы

Патенты РФ в классе A01G7/00:
способ подкормки растений, выращиваемых в защищенном грунте -  патент 2527065 (27.08.2014)
способ выращивания эхинацеи пурпурной в защищенном грунте -  патент 2524085 (27.07.2014)
устройство для магнитно-импульсной обработки растений -  патент 2523162 (20.07.2014)
способ обработки садовых деревьев и винограда для защиты от низких температур и весенних заморозков -  патент 2522522 (20.07.2014)
способ повышения продуктивности яровых одно- и многокомпонентных фитоценозов -  патент 2520683 (27.06.2014)
способ определения потерь массы корнеплодов от механических повреждений -  патент 2520129 (20.06.2014)
способ определения поражения селями горной долины -  патент 2519807 (20.06.2014)
способ фитоиндикации с обеспечением благоприятной обстановки на склоновых землях -  патент 2519716 (20.06.2014)
способ обогащения йодом плодов и ягод -  патент 2519231 (10.06.2014)
способ определения поражения горной долины лавинообразным потоком -  патент 2518447 (10.06.2014)


Наверх