способ лечения глубокого ожога кожи

Классы МПК:A61K31/722 хитин; хитозан
A61K31/375  аскорбиновая кислота, те витамин C; ее соли
A61K31/726 глюкозаминоглюканы, те мукополисахариды
A61K31/7012  соединения, содержащие свободную или этерифицированную карбоксильную группу, присоединенную непосредственно или через углеродную цепь к атому углерода сахаридного радикала, например глюкуроновая кислота, нейраминовая кислота
A61K31/727 гепарин; гепаран
A61K31/715  полисахариды, те имеющие больше, чем пять сахаридных радикалов, соединенных друг с другом гликозидными связями; их производные, например простые эфиры, сложные эфиры
A61K38/39 пептиды соединительной ткани, например коллаген, эластин, ламинин, фибронектин, витронектин, холодный нерастворимый глобулин (CIG)
A61P41/00 Лекарственные средства, используемые в хирургии, например хирургические адъюванты для предотвращения спаек или для замещения стекловидного тела
A61B17/00 Хирургические инструменты, устройства или способы, например турникеты
Автор(ы):, , ,
Патентообладатель(и):ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "КРАСНОЯРСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ ПРОФЕССОРА В.Ф. ВОЙНО-ЯСЕНЕЦКОГО ФЕДЕРАЛЬНОГО АГЕНТСТВА ПО ЗДРАВООХРАНЕНИЮ И СОЦИАЛЬНОМУ РАЗВИТИЮ" (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2008-06-18
публикация патента:

Изобретение относится к медицине, а именно к комбустиологии, и может быть использовано для лечения глубокого ожога кожи, в том числе и III-Б степени. Для этого на раневую поверхность наносят биодеградируемый материал, который содержит аллогенные культивированные фибробласты фетусов животного и губчатую композицию, приготовленную из 2% раствора ацетата коллагена и 2% раствора ацетата хитозана молекулярной массы 100-700 кДа и степенью дезацетилирования свыше 95%. При этом в 2% раствор ацетата хитозана добавлены: аскорбиновая кислота - 1,8 г, хондроитинсерная кислота - 5-100 мг, D-глюкуроновая кислота - 10-100 мг, гепарин - 2,5-5 мг и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон» - 11-220 мкг. Способ позволяет обеспечить ускоренное заживления ожоговой раны с полноценным восстановлением дермального слоя кожи за счет использования материала с высокой биосовместимостью, содержащего компоненты, создающие оптимальную микросреду для регенерации раны. 6 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к комбустиологии, и может быть использовано для местного полноценного восстановления дермального слоя при глубоком ожоге кожи III-Б степени.

Известны способы местного лечения ожогов с использованием раневых покрытий на основе биодеградируемых биополимеров, таких как покрытие для ран, в состав которого входит коллаген, хитозан, полисахарид растительного происхождения, латекс, каучук [1]. Известна повязка для лечения ран [2], представляющая собой перфорированную пленку и содержащая хитозан из панцырей краба в виде соли органической кислоты (уксусной, янтарной или гликолевой), глутаровый альдегид, поливиниловый спирт и биологически активную добавку. Известно биополимерное покрытие для лечения ран «Коллахит», содержащее хитозан, бычий коллаген, сшитый с помощью 0,1-10% глутарового альдегида или глиоксаля. Покрытие дополнительно может содержать антисептические препараты, например, фурагин в количестве от 0,5 до 5% к массе композиции, анестетики, например, анилокаин в количестве от 3 до 5% к массе композиции [3].

Однако указанные способы лечения глубоких ожогов нецелесообразны. Так, при степени ожога кожи IIIБ утрачиваются все слои кожного покрова, восстановление которых из клеточных и неклеточных структур из одной соединительной ткани невозможно. Поэтому применение указанных раневых покрытий при местном лечении глубоких ожогов для полноценного восстановления кожного дефекта неэффективно.

Известен способ лечения глубоких ожоговых ран [4] с помощью перфорированного пленочного перевязочного материала, содержащего смесь антибиотиков. В качестве пленочного перевязочного материала используют перевязочный материал, содержащий ряды отверстий, образующих прямоугольники сплошной поверхности с размерами сторон 100 и 200 мм, при этом отверстия выполнены прямоугольными формами с размерами сторон 1 и 3-5 мм на расстоянии 1 мм, лечение ожоговых ран проводят сначала до полного удаления некротических масс и образования грануляций, а затем щадящее дерматомное удаление грануляций и аутодермопластику. После аутодермопластики кожными трансплантатами и закрытия донорских ран дальнейшее лечение проводят с помощью перфорированного пленочного перевязочного материала.

Однако использование данного способа ограничивается площадью ожоговых ран, при которых есть необходимость в потребности донорских ресурсов кожи, кроме того, включение антибактериальных средств в раневое покрытие не исключает развитие антибиотикорезистентности госпитальной микробной флоры и формирование местных и общих аллергических реакций. Отсутствие в раневых покрытиях клеточного микроокружения для восстановления утраченных элементов дермы при ожоге IIIБ степени не может по своей сути сформировать дермальный слой кожи и полноценно восстановить кожный дефект. В состав пленочного не биодеградируемого перевязочного материала не входят строительные элементы, участвующие в восстановлении дермального слоя кожи.

Наиболее близким к заявляемому способу лечения глубоких ожогов являются способы с использованием культивированных фибробластов [5], эмбриональных фибробластов и фибробластоподобных мезенхимальных стволовых клеток (ФМСК) [6], аллогенных фибробластоподобных мезенхимальных стволовых клеток костного мозга человека, иммобилизируемых на биодеградируемых мембранах [7], с выделением популяции базальных кератиноцитов человека для использования их в аллогенных трансплантатах [8].

Однако указанные способы не имеют универсального носителя клеточных структур, который бы обладал высокой биосовместимостью, создавал оптимальную микросреду для регенерации раны, обладал абсорбционной способностью в отношении раневого экссудата, предотвращал проникновение и развитие микроорганизмов, был проницаемым для паров воды и воздуха, но не высушивал дна раны, был эластичным, моделировал поверхность со сложным рельефом, создавал комфортные условия для жизнеобеспечения и пролиферации биомассы фибробластов.

Задача изобретения - повысить ранозаживляющие свойства раневого покрытия, полноценно восстановить дермальный слой при глубоком ожоге.

Задача достигается тем, что в качестве биодеградируемого материала на ожоговую поверхность кожи глубиной III-Б степени наносят губчатую композицию, приготовленную из 2% раствора ацетата коллагена, 2% раствора ацетата хитозана молекулярной массы 100-700 кДа и степенью дезацетилирования свыше 95%, в который на один грамм сухого хитозана добавлены: аскорбиновая кислота - 1,8 г, хондроитинсерная кислота - 5-100 мг, D-глюкуроновая кислота - 10-100 мг, гепарин - 2,5-5 мг и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон» - 11-220 мкг, включающую аллогенные культивированные фибробласты, полученные из фетусов животного.

Способ осуществляют следующим образом. Термический ожог кожи моделируют на крысах самцах популяции Wistar массой 180-220 г. В основу положена экспериментальная модель [11] для изучения влияния препарата на процесс заживления глубокого ожога кожи крыс. Животным после удаления волосяного покрова в паравертебральной области спины на уровне ее середины под эфирным наркозом создают контактный термический ожог медной пластинкой с силой в 1,255 Н, нагретой до 220°С. Время экспозиции пластины составляет 14 с с глубиной ожога IIIБ степени (определяют на гистологическом срезе ткани кожи). Для вычисления процентного соотношения ожоговой поверхности к общей площади тела у крыс используют формулу, предложенную Lee (1929), в модификации формулы Мее - Рубнера: S=К×W0,60, где S - поверхность тела в квадратных сантиметрах, К - коэффициент, равный 12,54, W - вес животного в граммах. Площадь ожоговой раны в эксперименте составляла 12 см2 (4-5% от общей поверхности кожи крысы). День нанесения ран животным считают нулевым. Животным на 2-й день после снятия ожогового струпа на ожоговую поверхность IIIБ степени проводят аппликацию раневого покрытия, приготовленного из 2% раствора ацетата коллагена, 2% раствора ацетата хитозана молекулярной массы 100-700 кДа и степени дезацетилирования свыше 95%, полученного из клешней камчатского краба), содержащего в своем составе на один грамм сухого хитозана аскорбиновую кислоту - 1,8 г, хондроитинсерную кислоту - 5-100 мг, D-глюкуроновую кислоту - 10-100 мг, гепарин - 2,5-5 мг и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон» - 11-220 мкг, включающего имплантированные и культивированные аллогенные фибробласты в кондиционированной среде, полученные из фетусов животного.

Животным контрольной группы на ожоговую поверхность наносили губчатое раневое покрытие с кондиционированной средой, не содержащее аллогенные фибробласты. Раневое покрытие не удаляют до полного заживления раневой поверхности. Сроки анализа репарации ожоговой поверхности составляют 3, 7, 13, 16 и 30 суток с момента травмы после забора тканей ожоговой раны.

Анализ раневой ожоговой поверхности проводили с помощью иммуногистохимических реакций по стандартному стрептавидин-биотин-пероксидазному методу с моноклональными и поликлональными антителами ("Novocastra", Великобритания). Использовали следующие моноклональные и поликлональные антитела: Ki-67 (оценка воспаления и процессов репарации, маркер пролиферативной активности клеток), металлопротеиназа-9 (ММР-9) и металлопротеиназа-2 (ММР-2) (оценка ремоделирования внеклеточного соединительнотканного матрикса, деструкция его компонентов), CD68 (экспрессия в цитоплазме моноцитов, макрофагов, маркер активации), TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 1 (трансформирующий фактор роста способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 1, оценка процессов репарации, фиброгенный фактор), коллагены IV и VII типов (оценка ремоделирования внеклеточного матрикса, составные компоненты базальных мембран),

Срезы, наклеенные на поли-L-лизиновые стекла, после депарафинирования подвергали микроволновой обработке в 0,01 М цитратном буфере (рН 6,0) в течение 15 минут для демаскировки антигенов. Блокирование эндогенной пероксидазной активности осуществляли 3% водным раствором перекиси водорода. Для избежания неспецифической адсорбции первичных антител проводили инкубацию с нормальной неиммунной сывороткой в течение 15 минут. Инкубацию проводили при температуре 25°С в течение 30 минут. После каждой процедуры обработки срезы промывали в трис HCL буфере - 0,05М, рН 7,6. Хромогеном служил диаминобензидин (ДАБ), гистологические срезы для обзорного анализа докрашивали гематоксилином и эозином, для выявления коллагеновых волокон по Ван-Гизону, для изучения аргирофильных структур использовали импрегнацию солями азотнокислого серебра.

При исследовании микропрепаратов анализ результатов иммуногистохимических реакций проводили отдельно в краях ожоговой раны и в зоне повреждения. При локализации продуктов реакций в клетках количественная оценка результатов реакций включала определение доли (%) окрашенных клеток и интенсивности их окрашивания по трехбалльной шкале. Интенсивность окраски: 0 - нет окрашивания, 1 балл - слабое окрашивание (+ слабая реакция), 2 балла - умеренное окрашивание (++ умеренная реакция), 3 балла - интенсивное окрашивание (+++ выраженная реакция). Неокрашенные, слабо окрашенные, умеренно окрашенные и сильно окрашенные структуры в каждом случае подсчитывали в ядрах 100 стромальных или эпителиальных клеток в трех различных полях зрения при увеличении ×400. Интенсивность реакции определяли по формуле

ИГХ реакция = способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 P(i)·i,

где i - интенсивность окрашивания в баллах от 1 до 3; P(i) - процент клеток, окрашенных с разной интенсивностью. Полученные цифровые данные трактовали следующим образом: от 1 до 100 - слабая реакция; от 101 до 200 - умеренная; от 201 до 300 - выраженная. Результаты иммуноморфологического исследования на ММР-9, MMP-2, TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 1, коллаген IV типа оценивали по степени выраженности окраски клеток и экстрацеллюлярного матрикса по трехбалльной системе (0 - нет окрашивания, 1 балл - слабое окрашивание (+ слабая реакция), 2 балла - умеренное окрашивание (++ умеренная реакция), 3 балла - интенсивное окрашивание (+++ выраженная реакция). В каждом гистологическом срезе исследовали не менее 25 полей зрения при увеличении микроскопа ×400.

Морфометрию со статистической обработкой полученных результатов производили при помощи светового микроскопа "Leica DMLB" и анализатора изображения "Q550IW", снабженного программой "Leica Qwin" для статистической обработки.

Для получения аллогенных фибробластов использовали фетусы крыс (7-10-й день беременности).

Результаты исследования. Опытная группа животных показала существенное ускорение репаративных процессов в ожоговой ране. При гистологическом анализе выявляются изменения, манифестирующие выраженную биологическую активность раневого покрытия в отношении эпителиального и стромально-сосудистого компонента кожи. Это подтверждалось стимуляцией пролиферации и кератинизации эпидермоцитов, активацией ангиогенеза в центральных и периферических зонах ожога, ранней активацией моноцитарно-макрофагальных CD68 маркеров в течение первого этапа заживления. При этом регистрировалась интенсивная по сравнению с контролем экспрессия трансформирующего фактора роста бета-1 (TGF-способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 1) и Ki67 маркера пролиферативной активности фибробластов. В область термического повреждения более активно мигрировали фибробласты. Их пролиферация сопровождалась выработкой компонентов внеклеточного матрикса и деградацией некротизированных тканей. Снижение экспрессии матриксных металлопротеаз в присутствии опытного раневого покрытия указывает на супрессию деструктивных процессов внеклеточного матрикса. При этом отмечается усиленный синтез компонентов внеклеточного матрикса с образованием неостромы, служащей адгезивной матрицей для вновь образующегося эпителия. Выявленные особенности сочетались с более активной продукцией волокнистых структур (коллагенов IV и VII типов), что указывало на полноценное и быстрое формирование базальных мембран сосудов сосочкового слоя и эпидермиса кожи.

Проведенные исследования указывают на то, что раневое покрытие создает благоприятные условия для пролиферации, дифференцировки эмбриональных аллогенных фибробластов. Раневое покрытие на основе коллаген-хитозанового комплекса, содержащее фибробласты, выделенные из десятидневного эмбриона крысы, показали высокую эффективность при реконструкции утраченной кожи в эксперименте.

Пример эксперимента.

Термический ожог кожи моделировали на 30 крысах-самцах популяции Wistar, массой 180-220 г. Площадь ожоговой раны составляла 12 см2.

При проведении эксперимента животные были разделены на 3 группы по 10 животных: 1) крысы с глубоким термическим ожогом IIIБ степени и применением раневого покрытия на основе коллаген-хитозанового комплекса, содержащего имплантированные аллогенные эмбриональные фибробласты (опыт); 2) крысы с глубоким термическим ожогом IIIБ и применением раневого покрытия на основе коллаген-хитозанового комплекса, не содержащего аллогенные эмбриональные фибробласты, но содержащие кондиционированную среду, в которой культивировались аллогенные эмбриональные фибробласты (контроль 1); 3) крысы с глубоким термическим ожогом IIIБ без применения раневого покрытия с использованием только сухой асептической повязки (контроль 2).

На 2-й день под эфирным масочным наркозом после механического удаления струпа и стандартного туалета ожоговых ран с использованием растворов антисептиков в условиях асептики для животных опытной группы из контейнера с питательной средой извлекали раневое покрытие с эмбриональными фибробластами и моделировали его по контуру, соответствующему размеру и форме раны. Покрытие наносили на рану, прижимали ее ко дну и фиксировали с помощью стерильного марлевого бинта и пластыря. При наложении на рану покрытие выступало за края раны на 0,5-1 см. Для животных группы контроля 1 из контейнера с питательной средой, не содержащей фибробластов, извлекали раневое покрытие и моделировали его по контуру, соответствующему размеру и форме раны идентично опытной группе. Для животных группы контроля 2 использовали асептическую марлевую повязку, смачивали ее в стерильном физиологическом растворе и наносили на ожоговую поверхность. Клиническую оценку результатов производили на основе динамического визуального, планиметрического, иммуногистохимического контроля состояния ожоговой поверхности.

Сроки анализа репарации ожоговой поверхности составляли 3, 7, 13, 16 и 30 суток с момента травмы. Животных, согласно сроку, выводили из опыта, для гистологического анализа забирали сектор ожоговой раны (с захватом центрального и периферического отделов), материал помещали в контейнер с забуференным нейтральным 10% раствором формалина и в течение 24 часов подвергали автоматизированной гистологической проводке на системе Leica (Германия) с заливкой в парафин. Секцию тканей в парафиновых блоках и их окраску осуществляли в стандартных автоматизированных условиях.

Для иммуногистохимического анализа ожоговой поверхности использовали моноклональные антитела к: TGF-способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 -1, CD68+, Ki-67, MMP-2, ММР-9 и коллагену IV, VII типов. После проведения иммуногистохимических реакций гистологические срезы для обзорного анализа докрашивали гематоксилином и эозином, для выявления коллагеновых волокон - по методике Ван-Гизона, для изучения аргирофильных структур - по методике импрегнации солями азотнокислого серебра.

Результаты анализа планиметрического исследования показали, что при использовании опытных раневых покрытий с имплантированными аллогенными эмбриональными фибробластами при лечении ожоговой поверхности происходит существенное ускорение процессов заживления, что отражается в сроках полного восстановления кожи (таблица 1).

Таблица 1
Динамика заживления ожоговых ран крыс
способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 Площадь ран после ожога IIIБ степени (см2)
Сутки наблюдения Опыт. Раневое покрытие + кондиционированная среда + эмбриональные фибробласты Контроль 1. Раневое покрытие + кондиционированная среда Контроль 2. Асептическая повязка + физраствор
316,2±1,7 1,323,45±0,9* 25,3±0,14
7 11,15±2,121,3 14,75±0,5* 23,15±0,35
139,45±0,21 2,413,1±0,42** 21,65±0,78
30 3,5±0,51,3 5,25±0,35* 16,7±1,8
Примечания:
1 - достоверность различий при сравнении площадей ожоговых ран после местного лечения коллаген-хитозановыми покрытием с имплантированными эмбриональными фибробластами (опыт) и без применения местного лечения (контроль 2) (Р<0,05);
2 - достоверность различий при сравнении площадей ожоговых ран после местного лечения коллаген-хитозановым покрытием с имплантированными эмбриональными фибробластами (опыт) и без применения местного лечения (контроль 2) (Р<0,01);
* - достоверность различий при сравнении площадей ожоговых ран после местного лечения коллаген-хитозановыми покрытиями в кондиционированной эмбриональными фибробластами в течение 5 дней среде ДМЕМ (контроль 1) и без применения местного лечения (контроль 2) (Р<0,05);
** - достоверность различий при сравнении площадей ожоговых ран после местного лечения коллаген-хитозановым покрытием в кондиционированной эмбриональными фибробластами в течение 5 дней среде ДМЕМ (контроль 1) и без применения местного лечения (контроль 2) (Р<0,01);
3 - достоверность различий при сравнении площадей ожоговых ран после местного лечения коллаген-хитозановым покрытием с имплантированными эмбриональными фибробластами (опыт) и коллаген-хитозановым покрытием в кондиционированной эмбриональными фибробластами в течение 5 дней среде ДМЕМ (контроль 1) (Р<0,05);
4 - достоверность различий при сравнении площадей ожоговых ран после местного лечения коллаген-хитозановым покрытием с имплантированными эмбриональными фибробластами (опыт) и в кондиционированной эмбриональными фибробластами в течение 5 дней среде ДМЕМ (контроль 1) (Р<0.01);

Применение коллаген-хитозановых раневых покрытий с имплантированными аллогенными фибробластами при обширной глубокой ожоговой ране III-Б приводит к формированию прочного раневого струпа, играющего роль наружного барьера, препятствующего суперинфицированию дефектной поверхности. Имеющая место микробная флора мало активизирована, блокирована в коллаген-хитозановой конструкции. Собственно раневая ожоговая поверхность уже в ранние сроки не содержит микробной флоры. Имеет место в сроки 15-20 дней после аппликации раневого покрытия на раны активное формирование краевой пролиферативной реакции эпидермиса, на дне раны формируется слой зрелой и незрелой соединительной ткани, образуется морфологический субстрат будущей тканевой подложки для появления элементов дермы. Активное формирование элементов дермы начинается после 20 суток лечения, имеет место хорошая фибробластная реакция, способная формировать и закрывать дно раны слоем молодой соединительной ткани. В поздние сроки лечения появляется морфологическая волокнисто-клеточная структура, способная сформировать дермальный слой кожи. При использовании для закрытия ожоговой поверхности раневых покрытий очевидна более ранняя реакция продуктивного воспаления как по краям ожогового дефекта кожи, так и в центре обширного ожога, вся поверхность ожогового дефекта выстлана послойно молодой и зрелой грануляционной тканью, содержащей множество вновь образованных микрососудов. Деградация раневого покрытия начинается с 20-х суток. Характерной особенностью является быстрое формирование дермального слоя кожи, содержащего необходимое клеточное микроокружение.

Известно, что TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 стимулирует синтез клетками составных элементов экстрацеллюлярного матрикса, сдерживает его деградацию, известен как мощный фактор, активирующий коллагеносинтетическую функцию фибробластов, ингибирующий пролиферацию большинства эпителиальных клеток.

Достоверное увеличение интенсивности иммунопероксидазной реакции на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 регистрируется в опыте уже на 7 сутки после ожога в моноцитах и макрофагах дна раны. В этих клетках экспрессия данного фактора роста продолжает опережающе нарастать до 13, а затем до 16 дней, дополняясь в опыте достоверно более высокой ИГХ-реакцией в глубоком слое лейкоцитарного вала, фибробластах, фиброцитах и эндотелии капилляров дна раны. Эти изменения свидетельствуют об активации основных этапов репарации - ограничения пораженного участка, фиброза, активации фагоцитоза и васкулогенеза.

При анализе результатов иммуногистохимических реакций определяется в краях раны положительная реакция на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 , имеет место окрашивание сайтов связывания антител с фактором в цитоплазме стромальных клеток дермы - фибробластах, фиброцитах. Степень ее выраженности варьирует от слабой до умеренной. Различий между распределением продуктов иммуногистохимической реакции (ИГХР) в сетчатом или в сосочковом слоях нет. В эпидермисе и придатках кожи реакция отрицательная.

Результат ИГХР в струпе отрицательный. В большинстве участков поверхностный и глубокий слои лейкоцитарного вала также не окрашены. Исключение составляют небольшие по протяженности места глубокого слоя полиморфноядерных лейкоцитов (ПЯЛ), в которых наблюдается положительная реакция на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 . В подлежащей грануляционной ткани положительная иммунопероксидазная реакция отмечается в цитоплазме фибробластов, фиброцитов, моноцитах/макрофагах и погибших мышечных волокнах. Слабая экспрессия TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 регистрируется в волокнистых структурах грануляционной и более зрелой соединительной ткани в глубине раны. В эндотелии микрососудов в относительно зрелых участках соединительной ткани продукты ИГХР не выявляются. В грануляционной ткани, напротив, клетки эндотелия демонстрируют иммунопозитивное окрашивание.

На седьмые сутки после ожога в группе контроля 1 в эпидермисе, волосяных фолликулах, сальных железах и волокнистых структурах дермы в краях ожоговой раны продукты ИГХР на TGF способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 не выявляются или присутствуют в очень небольшом количестве. Умеренная реакция выявлена в цитоплазме фибробластов и фиброцитов краев раны и в макрофагах ее дна. Лейкоцитарный вал местами в глубоком слое умеренно окрашивается на TGF способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 , оставаясь в ряде участков иммунонегативным. В волокнистых структурах грануляционной и соединительной ткани дна раны экспрессия TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 слабая, имеет очаговый характер (табл.2).

На седьмые сутки после ожога в опытной группе достоверно большая чем в группе контроля 1 интенсивность иммунопероксидазной реакции регистрируется в моноцитах, макрофагах дна раны и погибших мышечных волокнах. В них реакция оценивается как умеренная (табл.2).

Таблица 2
Активность фактора TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 в контрольной и опытной ожоговой ране на 7 сутки после травмы
Структурный элемент Интенсивность реакции на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 (от 0 до 3 баллов)
контроль 1опыт
Край ожоговой раны
Эпителий волосяных фолликулов --
Эпителий сальных желез - -
Фибробласты дермы1,6±0,08 1,7±0,08
Волокнистые структуры сосочкового слоя 0,7±0,030,8±0,04
Поверхностные отделы сетчатого слоя 0,9±0,040,4±0,02
Глубокие отделы сетчатого слоя1,0±0,05 0,08±0,02
Стенки сосудов - -
Базальный слой эпидермиса --
Шиповатый слой эпидермиса - -
Зернистый слой эпидермиса --
Роговой слой эпидермиса - -
Дно ожоговой раны
Струп+ +
ПЯЛ под струпом (глубокий слой) 1,6±0,071,7±0,07
Макрофаги в дне раны1,7±0,08 2,1±0,1*
Строма 0,8±0,030,9±0,04
Фибробласты 1,2±0,05 1,6±0,07
Эндотелий0,7±0,03 0,8±0,04
* достоверно различимые показатели в сравнении с контролем.

На тринадцатые сутки после ожога различия между контролем 1 и опытной группами в локализации и количестве продуктов реакции на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 не выявлены. Вместе с тем, установлены изменения в уровне экспрессии данного фактора по сравнению с предыдущим сроком. Они касаются глубокого слоя лейкоцитарного вала, моноцитов/макрофагов под слоем ПЯЛ, фибробластов, фиброцитов и эндотелия капилляров дна раны, где отмечается статистически достоверное повышение интенсивности ИГХР (табл.3 и 4).

Таблица 3
Активность фактора TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 в контрольной ожоговой ране на 13 сутки после травмы
Структурный элемент Интенсивность реакции на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 (от 0 до 3 баллов) (контроль 1)
7 сутки13 сутки
Край ожоговой раны
Эпителий волосяных фолликулов --
Эпителий сальных желез - -
Фибробласты дермы1,6±0,08 1,9±0,08
Волокнистые структуры сосочкового слоя 0,7±0,030,9±0,04
Поверхностные отделы сетчатого слоя 0,9±0,040,7±0,03
Глубокие отделы сетчатого слоя1,0±0,05 0,1±0,05
Стенки сосудов - -
Базальный слой эпидермиса --
Шиповатый слой эпидермиса - -
Зернистый слой эпидермиса .>
Роговой слой эпидермиса - -
Дно ожоговой раны
Струп+ +
ПЯЛ под струпом (глубокий слой) 1,6±0,072,4±0,08*
Макрофаги 1,7±0,08 2,6±0,1*
Строма0,8±0,03 1,1±0,05
Фибробласты 1,2±0,05 2,1±0,09*
Эндотелий0,7±0,03 1,6±0,07*
* достоверно различимые показатели в сравнении со сроком 7 дней в контроле

Таблица 4
Активность фактора TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 в опытной ожоговой ране на 13 сутки после травмы
Структурный элемент Интенсивность реакции на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 (от 0 до 3 баллов) (опыт)
7 суток13 суток
Край ожоговой раны
Эпителий волосяных фолликулов --
Эпителий сальных желез - -
Фибробласты дермы1,7±0,08 1,5±0,07
Волокнистые структуры сосочкового слоя 0,8±0,040,6±0,03
Поверхностные отделы сетчатого слоя 0,4±0,020,4±0,02
Глубокие отделы сетчатого слоя0,08±0,02 0,3±0,01
Стенки сосудов - -
Базальный слой эпидермиса --
Шиповатый слой эпидермиса - -
Зернистый слой эпидермиса --
Роговой слой эпидермиса - -
Дно ожоговой раны
Струп+ +
ПЯЛ под струпом (глубокий слой) 1,7±0,072,3±0,1*
Макрофаги 2,1±0,1 2,4±0,1*
Строма0,9±0,04 0,9±0,04
Фибробласты 1,6±0,07 2,3±0,1*
Эндотелий0,8±0,04 1,7±0,09*
* достоверно различимые показатели в сравнении со сроком 7 дней в опыте

На шестнадцатые сутки после ожога в контрольной группе 1 в эпидермисе, волосяных фолликулах, сальных железах и волокнистых структурах дермы в краях ожоговой раны продукты ИГХР на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 не выявляются или минимальны. Умеренная, местами выраженная реакция выявлена в цитоплазме фибробластов и фиброцитов. Лейкоцитарный вал в глубоком слое неравномерно умеренно и слабо реагирует с антителами к TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 , оставаясь на многих участках неокрашенным. Высокая интенсивность иммунопероксидазной реакции отмечается в цитоплазме моноцитов, макрофагов, эндотелии капилляров. В последних, имея преимущественно умеренную степень выраженности, она достигает максимума в части клеток. Фибробласты, фиброциты окрашены не на всех участках. Реакция в них оценивается как умеренная, снижаясь до минимальной по направлению вглубь раны. В волокнистых структурах грануляционной и соединительной ткани дна раны экспрессия TGF способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 слабая, имеет очаговый характер (табл.5).

Таблица 5
Активность фактора TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 в контрольной ожоговой ране на 16 сутки после травмы
Структурный элемент Интенсивность реакции на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 (от 0 до 3 баллов) (контроль 1)
13 сутки16 сутки
Край ожоговой раны способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922
Эпителий волосяных фолликулов --
Эпителий сальных желез - -
Фибробласты дермы1,9±0,08 2,1+0,1
Волокнистые структуры сосочкового слоя 0,9±0,040,5±0,02
Поверхностные отделы сетчатого слоя 0,7±0,030,5±0,02
Глубокие отделы сетчатого слоя0,1±0,05 0,6±0,02
Стенки сосудов - -
Базальный слой эпидермиса --
Шиповатый слой эпидермиса - -
Зернистый слой эпидермиса --
Роговой спой эпидермиса - -
Дно ожоговой раны способ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922
Струп+ +
ПЯЛ под струпом (глубокий слой) 2,4±0,081,2+0,06*
Макрофаги 2,6±0,1 2,3+0,07
Строма1,1±0,05 0,9+0,04
Фибробласты 2,1±0,092,3±0,08
Эндотелий 1,6±0,07 2,3±0,07*
* достоверно различимые показатели в сравнении со сроком 13 дней в контроле

На шестнадцатые сутки после ожога в опыте в краях раны положительная реакция на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 имеет место в цитоплазме стромальных клеток дермы - фибробластов, фиброцитов. Степень ее выраженности оценивается как умеренная - высокая. В эпидермисе и придатках кожи реакция - отрицательная. Различий между распределением продуктов ИГХР в сетчатом или в сосочковом слоях нет.

Струп и поверхностный слой лейкоцитарного вала не окрашены. Глубокий слой ПЯЛ демонстрирует положительную умеренную и выраженную степень реакции на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 . В подлежащей грануляционной ткани в большом количестве присутствуют клетки моноцитарно-макрофагального ряда. В их цитоплазме имеет место умеренная и выраженная иммунопероксидазная реакция, что достоверно выше, чем в группе сравнения. В цитоплазме фибробластов, фиброцитов, в эндотелии микрососудов также отмечается более высокая, умеренная и выраженная реакция. В волокнистых структурах грануляционной ткани и более зрелой соединительной ткани в глубине раны экспрессия TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 ограничивается слабой - умеренной степенью. Интенсивность реакции в этих элементах по мере удаления от поверхности раны не снижается (табл.6).

Таблица 6
Активность фактора TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 в опытной ожоговой ране на 16 сутки после травмы
Структурный элемент Интенсивность реакции на TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 (от 0 до 3 баллов)
контроль 1опыт
Край ожоговой раны
Эпителий волосяных фолликулов W-
Эпителий сальных желез - -
Фибробласты дермы2,1±0,1 2,7±0,1*
Волокнистые структуры сосочкового слоя 0,5±0,020,7±0,02
Поверхностные отделы сетчатого слоя 0,5±0,020,6±0,03
Глубокие отделы сетчатого слоя0,6±0,02 0,9±0,04
Стенки сосудов - -
Базальный слой эпидермиса --
Шиповатый слой эпидермиса - -
Зернистый слой эпидермиса --
Роговой слой эпидермиса - -
Дно ожоговой раны
Струп+ +
ПЯЛ под струпом (глубокий слой) 1,2±0,062,2±0,0б*
Макрофаги 2,3±0,07 2,8±0,07*
Строма0,9±0,04 0,8±0,04
Фибробласты 2,3±0,08 2,8±0,08*
Эндотелий2,3±0,07 2,7±0,08*
* достоверно различимые показатели в сравнении с 16 сутками в контроле

При иммуногистохимическом анализе маркера Ki-67, отражающего величину пролиферативного пула клеток, выявлено, что:

на 7 сутки после ожога достоверных различий между экспрессией этого показателя не выявлено. К 13 суткам после ожога в обеих группах отмечается повышение экспрессии Ki-67 в фибробластах, эндотелии капилляров, макрофагах и полиморфноядерных лейкоцитах дна раны. Более высокая пролиферативная активность регистрируется в непосредственной близости в краях раны в базальном слое эпидермиса. В этой зоне в опытной группе пролиферация эпителия в базальном и частично в шиповатом слоях эпидермиса достоверно выше, чем в контроле. На 16 сутки в обеих группах возрастает экспрессия Ki-67 в макрофагах и эндотелии сосудов в дне раны, что обусловлено необходимостью фагоцитоза погибших тканевых компонентов, активацией иммунных реакций, развитием грануляционной и соединительной ткани. В опыте в этот срок экспрессия Ki-67 фибробластами дна раны, формирующими основные волокнистые структуры внеклеточного матрикса, достоверно выше, чем в контроле.

При иммуногистохимическом анализе маркера CD68+ на клетках системы фагоцитирующих мононуклеаров как уникального регулятора клеточных и клеточно-матриксных взаимоотношений в очаге повреждения, включения в воспаление иммунной системы, активации репаративных механизмов, ограничения очага воспаления, определяя морфогенез пиогенной мембраны, осуществления избирательного фагоцитоза поврежденных тканей и регуляции репарации в продуктивную фазу, установлено, что увеличение экспрессии CD68 в моноцитарно-макрофагальных клеточных элементах достигает высоких величин в обеих группах (опыт и контроль 1) к 13 суткам в дне раны, на границе струпа и в подлежащей грануляционной ткани. Однако в опыте происходит их достоверно большее накопление во всех слоях ожоговой раны, опережающее контроль, включая и 16 сутки наблюдения, что может означать ранний переход воспалительного процесса в продуктивную фазу.

Иммуногистохимический анализ маркеров ММР-9 и ММР-2, как основных протеаз, участвующих в процессе заживления раны и эпителизации раневой поверхности, показал, что их активность изменяется по мере заживления ожоговой раны. Снижение активности указанных ферментов совпадает с активацией репаративной стадии. Синтез ММР происходит только в живых клетках. Эти ферменты участвуют в ремоделировании внеклеточного матрикса в течение раневого процесса, активируют превращение латентной формы TGFспособ лечения глубокого ожога кожи, патент № 2372922 в активную. ММР-2 действует на протеолитические процессы, ММР-9, действуя на пролиферацию Т-лимфоцитов, обеспечивает иммуносупрессию, стимулирует ангиогенез.

Снижение экспрессии ММР-9 регистрируется на 13 сутки в опытной группе в лейкоцитарном вале под струпом, опережая таковую в контроле, включая и 16 сутки наблюдения. До этого времени различий между группами (опыт и контроль 1) и по срокам с момента нанесения ожога нет. К 16 дню в опыте отмечается существенное угнетение экспрессии ММР-9 в строме и фибробластах грануляционной ткани, соединительной ткани в дне раны. Представляется, что раннее снижение активности деструктивных изменений, вызываемых ММР-9, способствует ускорению репаративных процессов.

Выраженность экспрессии ММР-2 и ее локализация в обеих группах до 16 суток не изменяется. Исключение составляет слой макрофагов в дне раны, граничащий с ПЯЛ, где реакция достоверно выше, чем в контрольной группе.

Коллагены IV и VII типов, являясь компонентами базальных мембран эпителия и сосудов, позволяют судить о завершенности ремоделирования ткани. Достоверные различия между опытной и контроль 1 группами в экспрессии коллагенов IV и VII типов выявляются на 13 сутки. В опыте коллагенизация дна раны наступает раньше и осуществляется активнее до 16 суток. Раньше, чем в контроле, и в большем объеме формируются базальные мембраны микрососудов в созревающей грануляционной ткани, заполняющей дно раны.

Таким образом, применение композиции для лечения глубокого ожога IIIБ степени, содержащей коллаген, хитозан медицинского назначения с молекулярной массой 100-700 kDa и степенью дезацетилирования свыше 95%, глиокозаминогликаны, а также имплантированные аллогенные фибробласты в кондиционированной питательной среде, существенно ускоряет процесс заживления, создавая благоприятные условия для полноценного восстановления дермального слоя кожи.

Литература

1. Патент РФ № 2193895, A61L 15/28, БИПМ № 34 от 2002.12.10.

2. Патент РФ № 2219954, A61L 15/28, БИМП № 36 от 2003.12.27.

3. Патент РФ № 2108114, A61L 15/28. БИМП № 10 от 10.04.98.

4. Патент № 2108078, A61L 15/00. (БИ № 10) 1998.04.10.

5. В.П.Туманов, Л.И.Будкевич // Педиатрия. Журнал им. Г.Н.Сперанского. - 1999. - № 5. - С.13.

6. Шумаков В.И., Онищенко Н.А., Расулов М.Ф. и др. // Вестник хирургии. - 2003. - Т.162, № 4. - С.38-42.

7. Расулов М.Ф., Севастьянов В.И., Егорова В.А. и др. // Патофизиология и экспериментальная терапия. - 2005. - № 2. - С.20-23.

8. Спичкина О.Г., Калмыкова Н.В., Воронкина И.В. // Скорая медицинская помощь. - 2006. - № 3. - С.178-180.

9. Патент РФ № 2254145, A61L 15/28, 15/32, 26/00. БИПМ № 17 от 20.06.2005.

10. Патент РФ № 2252787, A61L 15/28, 15/32, 27/60, БИПМ № 15 от 27.05.2005.

11. Клебановас Ю., Лашас Л., Лашене Д., Пангоните Д. Проблемы эндокринологии, 2005. - № 1. - с.42.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ лечения глубокого ожога кожи путем нанесения на раневую поверхность биодеградируемого материала, содержащего аллогенные культивированные фибробласты фетусов животного, отличающийся тем, что в качестве биодеградируемого материала на ожоговую поверхность кожи глубиной ШБ степени наносят губчатую композицию, приготовленную из 2%-ного раствора ацетата коллагена, 2%-ного раствора ацетата хитозана молекулярной массы 100-700 кДа и степенью дезацетилирования свыше 95%, в который на один грамм сухого хитозана добавлены: аскорбиновая кислота 1,8 г, хондроитинсерная кислота 5-100 мг, D-глюкуроновая кислота 10-100 мг, гепарин 2,5-5 мг и сывороточный фактор роста крупного рогатого скота «адгелон» 11-220 мкг.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2372922

patent-2372922.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K31/722 хитин; хитозан

Патенты РФ в классе A61K31/722:
стабилизатор липосомальных суспензий и способ его получения -  патент 2529179 (27.09.2014)
гемостатическая противоожоговая ранозаживляющая композиция -  патент 2526183 (20.08.2014)
композиции для лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (гэрб) -  патент 2524639 (27.07.2014)
многослойный материал с хитозановым слоем из нано- и ультратонких волокон -  патент 2522216 (10.07.2014)
местное гемостатическое средство -  патент 2519220 (10.06.2014)
способ лечения аллергического ринита -  патент 2494774 (10.10.2013)
антибактериальная композиция, включающая водорастворимый низкомолекулярный хитозан -  патент 2494746 (10.10.2013)
способ тканевой инженерии спинного мозга после его анатомического разрыва -  патент 2489176 (10.08.2013)
раствор для получения материала на основе хитозана, способ получения гемостатического материала из этого раствора (варианты) и медицинское изделие с использованием волокон на основе хитозана -  патент 2487701 (20.07.2013)
препарат для регенерации мягких тканей с антибактериальным эффектом -  патент 2485959 (27.06.2013)

Класс A61K31/375  аскорбиновая кислота, те витамин C; ее соли

Патенты РФ в классе A61K31/375:
улучшение памяти у пациентов с оценкой 24-26 баллов по краткой шкале оценки психического статуса -  патент 2529815 (27.09.2014)
способ персонифицированной профилактики эстрогензависимых заболеваний у здоровых женщин и женщин с факторами сердечно-сосудистого риска в возрасте 45-60 лет -  патент 2527357 (27.08.2014)
способ комплексного лечения хронического эндометрита у коров -  патент 2524623 (27.07.2014)
фармакологическая геропротекторная композиция и способ ее получения -  патент 2522547 (20.07.2014)
способ стимуляции заживления ран различного генеза природным антиоксидантом дигидрокверцетином -  патент 2522214 (10.07.2014)
комбинация ликопина, полифенола и витаминов для ухода за кератиновыми материалами -  патент 2517132 (27.05.2014)
способ лечения мужского бесплодия, обусловленного аутоиммунными реакциями против сперматозоидов -  патент 2517061 (27.05.2014)
препарат для профилактики и лечения желудочно-кишечных болезней новорожденных телят, протекающих с признаками диареи -  патент 2516969 (20.05.2014)
лечебно-профилактический бальзам для глаз -  патент 2512801 (10.04.2014)
способ производства биологически активного комплекса - порошка из молодых побегов облепихи -  патент 2506953 (20.02.2014)

Класс A61K31/726 глюкозаминоглюканы, те мукополисахариды

Патенты РФ в классе A61K31/726:
офтальмологический ирригационный раствор -  патент 2529787 (27.09.2014)
способ сопроводительного лечения при эндопротезировании крупных суставов -  патент 2527159 (27.08.2014)
композиция для комплексного лечения больных с первичной открытоугольной глаукомой и заболеваниями глазной поверхности -  патент 2517033 (27.05.2014)
раствор для получения покрытия на имплантатах и биоматериалах -  патент 2509554 (20.03.2014)
способ тканевой инженерии спинного мозга после его анатомического разрыва -  патент 2489176 (10.08.2013)
профилактика и лечение вторичных инфекций после вирусной инфекции -  патент 2481844 (20.05.2013)
фармацевтическая композиция на основе растительной дгк для лечения и профилактики заболеваний суставов -  патент 2478376 (10.04.2013)
фармацевтическая композиция, содержащая хондроитин сульфат и/или гиалуронидазу и липосомы для местного применения -  патент 2473350 (27.01.2013)
композиция для комплексного лечения больных с первичной открытоугольной глаукомой и заболеваниями глазной поверхности -  патент 2464985 (27.10.2012)
фармацевтическая композиция для комплексного лечения заболеваний глазной поверхности у больных с первичной открытоугольной глаукомой -  патент 2460517 (10.09.2012)

Класс A61K31/7012  соединения, содержащие свободную или этерифицированную карбоксильную группу, присоединенную непосредственно или через углеродную цепь к атому углерода сахаридного радикала, например глюкуроновая кислота, нейраминовая кислота

Патенты РФ в классе A61K31/7012:
офтальмологический ирригационный раствор -  патент 2529787 (27.09.2014)
сиаловая кислота для поддержки иммунной системы в пожилом возрасте -  патент 2506087 (10.02.2014)
фармацевтическая композиция, содержащая ферменты: коллагеназу и лизоцим и/или сангвиритрин -  патент 2504396 (20.01.2014)
профилактика и лечение вторичных инфекций после вирусной инфекции -  патент 2481844 (20.05.2013)
композиция для лечения хронических дегенеративных воспалительных заболеваний -  патент 2445114 (20.03.2012)
набор поливитаминов для женщин -  патент 2443422 (27.02.2012)
способ лечения дегенеративно-дистрофических заболеваний опорно-двигательного аппарата и посттравматических болевых синдромов -  патент 2433844 (20.11.2011)
способ профилактики спаечного процесса в полости брюшины при акушерско-гинекологических операциях -  патент 2386441 (20.04.2010)
способ лечения возрастных и косметических дефектов кожи лица -  патент 2352329 (20.04.2009)
лекарственное средство с гиполипидемическим эффектом "симваглизин" -  патент 2308947 (27.10.2007)

Класс A61K31/727 гепарин; гепаран

Патенты РФ в классе A61K31/727:
способ коррекции тромбофилических нарушений гемостаза во время беременности -  патент 2524653 (27.07.2014)
способ выбора тактики ведения беременных с плацентарной недостаточностью и синдромом задержки роста плода -  патент 2517374 (27.05.2014)
метод лечения андрогенной алопеции: местное нанесение на очаги облысения гепарина (в составе препаратов для местного лечения) -  патент 2517087 (27.05.2014)
композиция для костной пластики (варианты) -  патент 2516921 (20.05.2014)
способ лечения варикозной болезни нижних конечностей с использованием эндовазальной лазерной коагуляции вен -  патент 2514337 (27.04.2014)
способ получения низкомолекулярного гепарина -  патент 2512768 (10.04.2014)
раствор для получения покрытия на имплантатах и биоматериалах -  патент 2509554 (20.03.2014)
способ лечения дистрофических и воспалительных заболеваний переднего и заднего отделов глаза -  патент 2508920 (10.03.2014)
способ ведения пациентов при тромбоэмболии легочной артерии -  патент 2506899 (20.02.2014)
средство для роста волос (варианты) и способ лечения облысения -  патент 2503446 (10.01.2014)

Класс A61K31/715  полисахариды, те имеющие больше, чем пять сахаридных радикалов, соединенных друг с другом гликозидными связями; их производные, например простые эфиры, сложные эфиры

Патенты РФ в классе A61K31/715:
использование альгинатных олигомеров в борьбе с биопленками -  патент 2527894 (10.09.2014)
композиции для лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (гэрб) -  патент 2524639 (27.07.2014)
полисахарид из штамма bifidobacterium infantis и его применение для лечения или предупреждения воспалительных расстройств. -  патент 2511044 (10.04.2014)
способ получения водорастворимых фракций маннопротеинов и -глюкана -  патент 2504384 (20.01.2014)
фармацевтическая композиция для лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни -  патент 2501549 (20.12.2013)
глазные композиции, содержащие мукоадгезивные полисахариды, способные стимулировать восстановление эпителия роговицы -  патент 2493854 (27.09.2013)
композиционный энтеросорбент -  патент 2491941 (10.09.2013)
способ лечения шокового состояния у новорожденных с хирургической патологией -  патент 2491088 (27.08.2013)
способ лечения воспалительных заболеваний парадонта -  патент 2489137 (10.08.2013)
способ прогнозирования массивной интраоперационной кровопотери при операциях по поводу неорганных забрюшинных опухолей -  патент 2489087 (10.08.2013)

Класс A61K38/39 пептиды соединительной ткани, например коллаген, эластин, ламинин, фибронектин, витронектин, холодный нерастворимый глобулин (CIG)

Патенты РФ в классе A61K38/39:
способ местного лечения ран с помощью биологической повязки, содержащей живые клетки линии диплоидных фибробластов человека -  патент 2526811 (27.08.2014)
способ получения инъекционного заменителя синовиальной жидкости -  патент 2517237 (27.05.2014)
способ хирургического лечения несросшихся переломов и ложных суставов трубчатых костей при наличии дефицита мягких тканей в проекции несросшихся переломов и ложных суставов -  патент 2515146 (10.05.2014)
способ профилактики гнойно-воспалительных осложнений при лечении травматолого-ортопедических пациентов с использованием аппаратов внешней фиксации -  патент 2508062 (27.02.2014)
способ лечения скелетных осложнений у больных с литическими метастазами в длинные трубчатые кости -  патент 2505299 (27.01.2014)
способ комплексной переработки рыбного сырья для получения гиалуроновой кислоты и коллагена -  патент 2501812 (20.12.2013)
пептидные фрагменты для индукции синтеза белков внеклеточного матрикса -  патент 2501807 (20.12.2013)
способ замещения дефекта периферического нерва -  патент 2499565 (27.11.2013)
способ получения нового полимерного соединения, обладающего противовирусной активностью, сополимеризацией 2,5-дигидроксибензойной кислоты и желатина с помощью фермента лакказы -  патент 2494119 (27.09.2013)
стерильный аутологичный, аллогенный или ксеногенный имплантат и способ его изготовления -  патент 2478403 (10.04.2013)

Класс A61P41/00 Лекарственные средства, используемые в хирургии, например хирургические адъюванты для предотвращения спаек или для замещения стекловидного тела

Патенты РФ в классе A61P41/00:
способ лечения спаечной болезни -  патент 2529408 (27.09.2014)
способ местного лечения ран с помощью биологической повязки, содержащей живые клетки линии диплоидных фибробластов человека -  патент 2526811 (27.08.2014)
способ эндоваскулярной профилактики эндотоксинемии при лапароскопических вмешательствах у пациентов с острой абдоминальной патологией, осложненной перитонитом -  патент 2525670 (20.08.2014)
способ изготовления биодеградируемых мембран для предотвращения образования спаек после кардиохирургических операций -  патент 2525181 (10.08.2014)
способ послеоперационной профилактики несостоятельности толсто-толстокишечного анастомоза -  патент 2523822 (27.07.2014)
способ профилактики гнойно-септических осложнений у больных с острым гангренозным холециститом при операции из мини-доступа -  патент 2523629 (20.07.2014)
способ снижения эндотоксикоза при гастродуоденальных кровотечениях -  патент 2517601 (27.05.2014)
способ лечения гнойно-некротических заболеваний мягких тканей -  патент 2515395 (10.05.2014)
способ лечения хронических ран -  патент 2513142 (20.04.2014)
отверждаемый биокомпозиционный материал для замещения костных дефектов -  патент 2508131 (27.02.2014)

Класс A61B17/00 Хирургические инструменты, устройства или способы, например турникеты

Патенты РФ в классе A61B17/00:
устройство для блокируемого остеосинтеза диафизарных переломов длинных костей -  патент 2529702 (27.09.2014)
способ оценки эффекта электромагнитных волн миллиметрового диапазона (квч) в эксперименте -  патент 2529694 (27.09.2014)
устройства и системы для генерации высокочастотных ударных волн и способы их использования -  патент 2529625 (27.09.2014)
способ остеосинтеза вывиха акромиального конца ключицы -  патент 2529416 (27.09.2014)
способ выполнения лапароскопической фундопликации в зависимости от конституционального типа пациента -  патент 2529415 (27.09.2014)
способ лечения больных с синдромом внутрипеченочной портальной гипертензии -  патент 2529414 (27.09.2014)
способ хирургического лечения хронической ишемии нижних конечностей, обусловленной дистальным типом поражения сосудов -  патент 2529410 (27.09.2014)
способ лечения спаечной болезни -  патент 2529408 (27.09.2014)
способ анатомо-хирургического моделирования наружной ротационной контрактуры тазобедренного сустава в эксперименте -  патент 2529407 (27.09.2014)
имеющая покрытие нить с закрепляющими элементами для закрепления в биологических тканях -  патент 2529400 (27.09.2014)


Наверх