способ коррекции эндотелиальной дисфункции пикамилоном при l-name индуцированном дефиците оксида азота
Классы МПК: | A61K31/197 амино- и карбоксильная группы присоединены к одной и той же ациклической углеродной цепи, например гамма-аминомасляная кислота (ГАМК), бета-аланин, эпсилон-аминокапроновая кислота, пантотеновая кислота A61K31/198 альфа-аминокислоты, например аланин, этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТК) A61P9/10 для лечения ишемических или атеросклеротических заболеваний, например антиангинозные средства, коронарные вазодилататоры, средства для лечения инфаркта миокарда, ретинопатии, цереброваскулярной недостаточности почечного артериосклероза |
Автор(ы): | Покровский Михаил Владимирович (RU), Покровская Татьяна Григорьевна (RU), Артюшкова Елена Борисовна (RU), Ершов Илья Николаевич (RU), Белоус Александр Сергеевич (RU), Корокин Михаил Викторович (RU), Гудырев Олег Сергеевич (RU), Гладченко Михаил Петрович (RU), Гуреев Владимир Владимирович (RU), Бабко Анна Владимировна (RU), Новиков Олег Олегович (RU), Новикова Марина Юрьевна (RU), Кочкаров Владимир Исхакович (RU), Даниленко Людмила Михайловна (RU), Цыбульский Игорь Валерьевич (RU), Хардикова Елена Михайловна (RU), Лучкина Елена Вадимовна (RU), Цепелев Василий Юрьевич (RU) |
Патентообладатель(и): | Покровский Михаил Владимирович (RU), Покровская Татьяна Григорьевна (RU), Артюшкова Елена Борисовна (RU), Ершов Илья Николаевич (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2008-03-19 публикация патента:
20.08.2009 |
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиологии и фармакологии. Для этого в эксперименте белым крысам самцам линии Wistar моделируют эндотелиальную дисфункцию путем ежедневного внутрибрюшинного введения в течение 7 суток N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг. Затем в течение последующих 7 суток ежедневно вводят пикамилон в дозе 30 мг/кг внутрижелудочно. Способ обеспечивает эффективную коррекцию эндотелиальной дисфункции в специфических условиях моделирования. 2 табл.
Формула изобретения
Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, отличающийся тем, что в эксперименте белым крысам самцам линии Wistar с эндотелиальной дисфункцией на фоне ее моделирования внутрибрюшинным введением ингибитора эндотелиальной синтазы N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг ежедневно, в течение 7 сут, оценивая степень развития дисфункции по отношению показателей эндотелийнезависимой и эндотелийзависимой вазодилятации, внутрижелудочно вводят пикамилон (30 мг/кг) ежедневно, в течение 7 сут.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.
Наиболее близким к заявленному решению является способ фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции ГАМК-ергическими производными, описанный И.Н.Тюренковым, А.В.Воронковым, А.И.Робертус в статье «Фармакологическая коррекция эндотелиальной дисфункции, вызванной гормональной недостаточностью», Психофармакология и биологическая наркология, 2007, т.7, спец. выпуск, часть 2, с.1983, который заключается в введении ГАМК-ергических средств - РГПУ-189 (15 мг/кг), РГПУ-147 и РГПУ-38 (50 мг/кг) при моделировании экспериментального сахарного диабета и при недостаточности половых гормонов. Эндотелиальная функция тестировалась введением ацетилхолина с регистрацией кровотока в коре мозга.
Основным недостатком способа является коррекция эндотелиальной дисфункции ГАМК-ергическими производными в условиях снижения биодоступности оксида азота и гормональной недостаточности, вызванной введением стрептозоцина и кастрацией животных, а также отсутствие оценки функционального состояния сосудистого русла в условиях целостного организма при моделировании дефицита оксида азота. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при повреждении в системе L-аргининNO, которое связано в основном с недостаточностью эндотелиальной NO-синтазы, с помощью ГАМК-ергических средств неудовлетворительны.
Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при L-NAME индуцированном дефиците оксида азота, включающий использование ГАМК-ергического средства - пикамилона. Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным ежедневным введением лабораторному животному в течение 7 суток блокатора синтеза NO N-нитро-L-аргинин метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг, проводится ее коррекция путем ежедневного
внутрижелудочного введения пикамилона в дозе 30 мг/кг.
СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ. Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. ГАМК-ергическое средство - пикамилон вводится одновременно с L-NAME в дозе 30 мг/кг/сут. На 8 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедреную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы "Biopac". Функциональные пробы: эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелийнезависимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.
При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при р<0,05.
ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ
Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 сек приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных: для систолического давления (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) - 38,7±2,8 и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9±2,7 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 сек развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 сек после нормализации сердечного ритма. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 сек. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7-суток внутрибрюшинного введения L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9, СрАД - 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.
Одновременное введение L-NAME и пикамилона приводило к достоверному снижению показателей исходных значений АД (таблица 1).
Таблица 1
Динамика показателей АД и ЧСС при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции пикамилоном
Группы животных | Функциональные пробы | САД, мм рт.ст. | ДАД, мм рт.ст. | ЧСС, уд. в мин |
Интактные | Исходные | 137,7±3,7 | 101,9±4,3 | 420,0±9,0 |
ЭЗВ с АХ | 84,3±4,5 | 38,7±2,8 | 416,0±14,0 | |
ЭНЗВ с НП | 83,0±3,7 | 42,1±4,4 | 415,0±10,0 | |
Получавшие L-NAME (25 мг/кг) | Исходные | 190,3±6,7* | 145,0±3,9* | 428,0±11 |
ЭЗВ с АХ | 110,6±5,2* | 82,8±6,6* | 426,0±14,0 | |
ЭНЗВ с НП | 88,7±4,7 | 50,8±4,2 | 426,0±13,0 | |
L-NAME (25 мг/кг)+пикамилон 30 мг/кг | Исходные | 153,5±12,4** | 109,4±14,2** | 387,3±17,9** |
ЭЗВ с АХ | 105,0±6,3 | 54,4±3,9** | 380,1±16,1 | |
ЭНЗВ с НП | 100,5±3,8 | 39,4±2,5 | 389,9±12,9 | |
* - р<0,05 в сравнении с группой интактных; ** - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME |
Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных с введением ингибитора NO-синтазы L-NAME закономерно привела нас к необходимости выведения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.
Мы рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME. Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ нами использовано это отношение как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, где на фоне введения ингибитора NO-синтазы L-NAME вводился пикамилон, это отношение соответствовало значению 1,8±0,3 (таблица 2).
Таблица 2
Показатели, отражающие коррекцию эндотелиальной дисфункции на фоне L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота
Группы животных | Функциональные пробы | Прирост падения сосудистой реакции по СрАД (мм рт.ст.) | Время сосудистой реакции (сек) | Площадь сосудистой реакции(усл. ед.) | Отношение площадей сосудистой реакции АХ к НП |
Интактные | АХ | 59,9±2,9 | 42,2±0,8 | 1268,0±74,8 | 1,1±0,1 |
НП | 61,0±3,0 | 45,1±1,0 | 1375,3±93,7 | ||
L-NAME | АХ | 68,0±4,1 | 20,0±1,4 | б95,3±87,6* | 5,4±0,6* |
НП | 98,0±2,0 | 67,4±1,4 | 3322,7±11б,7* | ||
L-NAME+пикамилон 30 мг/кг | АХ | 65,4±11,3 | 39,0±2,7** | 1258,2±247,9** | 1,8±0,3** |
НП | 84,5±14,7 | 68,7±8,9 | 2955,2±553,7 | ||
* - р<0,05 в сравнении с группой интактных, ** - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME |
Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию эндотелиальной дисфункции пикамилоном на фоне L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота.
Класс A61K31/197 амино- и карбоксильная группы присоединены к одной и той же ациклической углеродной цепи, например гамма-аминомасляная кислота (ГАМК), бета-аланин, эпсилон-аминокапроновая кислота, пантотеновая кислота
Класс A61K31/198 альфа-аминокислоты, например аланин, этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТК)
Класс A61P9/10 для лечения ишемических или атеросклеротических заболеваний, например антиангинозные средства, коронарные вазодилататоры, средства для лечения инфаркта миокарда, ретинопатии, цереброваскулярной недостаточности почечного артериосклероза