способ получения ингибиторов нуклеозидфосфорилаз и нуклеозидаз

Формула изобретения

1. Способ получения соединения формулы (I) или его таутомера:

в которой V выбирают из СН₂ и W представляет собой NR¹;

Х представляет собой СН₂;

Y представляет собой водород;

Z выбирают из водорода, галогена, гидроксигруппы, уходящей сульфонатной группы, SQ, OQ и Q, где Q представляет собой необязательно замещенную атомом галогена алкильную, фенилалкильную или фенильную группу; и

R¹ представляет собой радикал формулы (II)

в которой А представляет собой СН;

В выбирают из ОН, NH₂, NHR⁶, SH и галогена, где R⁶ представляет собой необязательно замещенную алкильную группу;

D выбирают из водорода и NH₂ и

Е представляет собой N,

включающий взаимодействие соединения формулы (III)

в которой V выбирают из СН₂ и W представляет собой NH;

Х представляет собой СН ₂;

Y представляет собой водород;

Z выбирают из водорода, галогена, гидроксигруппы, уходящей сульфонатной группы, SQ, OQ и Q, где Q представляет собой необязательно замещенную алкильную, фенилалкильную или фенильную группу,

с соединением формулы (IV)

в которой значения А, В, D и Е определены выше,

и с формальдегидом или с эквивалентом формальдегида.

2. Способ по п.1, где Z представляет собой водород, галоген, гидроксигруппу, SQ или OQ, где Q представляет собой необязательно замещенную алкильную, фенилалкильную или фенильную группу.

3. Способ по п.1, где А представляет собой СН.

4. Способ по п.1, где Y представляет собой Н.

5. Способ по п.1, где W представляет собой NR¹, где значения определены выше, V представляет собой CH₂ и Х представляет собой CH₂.

6. Способ по п.5, где R¹ представляет собой радикал формулы (II), как определено в п.1, где А представляет собой СН и Е представляет собой N.

7. Способ по п.1, где D представляет собой Н.

8. Способ по п.1, где В представляет собой NH ₂, ОН или Cl.

9. Способ по п.1, где Z представляет собой метансульфонат, паратолуолсульфонат или трифторметансульфонат.

10. Способ по п.9, где Z представляет собой метансульфонат.

11. Способ по п.1, где осуществляют взаимодействие соединений формул (III) и (IV) с формальдегидом.

12. Способ по п.1, где осуществляют взаимодействие соединений формул (III) и (IV) с эквивалентом формальдегида, который представляет собой параформальдегид.

13. Способ по п.1, где соединение формулы (I) представляет собой:

(3R,4R)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин;

(3R,4R)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин;

(3R,4S)-4-(бензилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-4-(4-хлорфенилтиометил)1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4R)-1-[(6-хлор-9-деазапурин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин;

(3R,4R)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метансульфонил)пирролидин;

(3R,43)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-4-(этилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(пропилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(изопропилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-4-(бутилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(фенилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-4-(4-фторфенилтиометил)-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-4-(3-хлорфенилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(циклогексилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(4-пиридилтиометил)пирролидин;

(3R,4R)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метоксиметил)пирролидин;

(3R,4R)-4-(бензилоксиметил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4R)-1-[(9-деазагуанин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил]-3-гидрокси-4-(пропилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-4-(бутилтиометил)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деаза-6-хлорпурин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(2-фенилэтил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-пропилпирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-пропилпирролидин;

или

(3R,4S)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метилтиометил)пирролидин.

14. Способ получения соединения формулы (I), определенной в п.1, включающий:

(i) осуществление взаимодействия соединения формулы (III), определенной в п.1, с соединением формулы (IV), определенной в п.1, и с формальдегидом или с эквивалентом формальдегида, где любой один или несколько из заместителей W и Z соединения формулы (III) защищены подходящей защитной группой; и

(ii) удаление одной или нескольких защитных групп с получением соединения формулы (I).

15. Способ получения соединения формулы (I), определенной в п.1, включающий:

(i) осуществление взаимодействия соединения формулы (III), определенной в п.1, с соединением формулы (IV), определенной в п.1, и с формальдегидом или с эквивалентом формальдегида, где любой один или несколько из заместителей В и Е соединения формулы (IV) защищены подходящей защитной группой; и

(ii) удаление одной или нескольких защитных групп с получением соединения формулы (I).

16. Способ получения соединения формулы (I), определенной в п.1, включающий:

(i) осуществление взаимодействия соединения формулы (III), определенной в п.1, с соединением формулы (IV), определенной в п.1, и с формальдегидом или с эквивалентом формальдегида, где любой один или несколько из заместителей W и Z соединения формулы (III) защищены подходящей защитной группой и где любой один или несколько из заместителей В и Е соединения формулы (IV) защищены подходящей защитной группой; и

(ii) удаление одной или нескольких защитных групп с получением соединения формулы (I).

17. Способ по п.1, где Z представляет собой ОН.

18. Способ по п.5, где Z представляет собой ОН.

19. Способ по п.6, где Z представляет собой ОН.

20. Способ по п.1, где В представляет собой ОН.

21. Способ по п.5, где В представляет собой ОН.

22. Способ по п.6, где В представляет собой ОН.

23. Способ по п.1, где D представляет собой Н.

24. Способ по п.5, где D представляет собой Н.

25. Способ по п.6, где D представляет собой Н.

26. Способ по п.5, где Y представляет собой Н.

27. Способ по п.6, где Y представляет собой Н.

28. Способ по п.5, где Z представляет собой ОН и В представляет собой ОН.

29. Способ по п.6, где Z представляет собой ОН и В представляет собой ОН.

30. Способ по п.5, где Z представляет собой ОН и Y представляет собой Н.

31. Способ по п.6, где Z представляет собой ОН и Y представляет собой Н.

32. Способ по п.1, где В представляет собой NH₂, D представляет собой Н, Y представляет собой Н и Z представляет собой SQ.

33. Способ по п.5, где В представляет собой NH₂, D представляет собой Н, Y представляет собой Н и Z представляет собой SQ.

34. Способ по п.6, где В представляет собой NH ₂, D представляет собой Н, Y представляет собой Н и Z представляет собой SQ.

35. Способ по п.1, где соединение формулы (I) представляет собой (3R,4R)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин.

36. Способ по п.1, где соединение формулы (I) представляет собой (3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метилтиометил)пирролидин.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к способу получения определенных нуклеозидных аналогов. Конкретно, настоящее изобретение относится к способу, который включает осуществление взаимодействия формальдегида или эквивалента формальдегида с циклическим амином и гетероароматическим соединением с получением связанных через метиленовый мостик циклических аминдеазапуринов.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Нуклеозидные аналоги, которые являются эффективными ингибиторами пурин-нуклеозидфосфорилаз (PNP) и пурин-фосфорибозилтрансфераз (PPRT), применимы для лечения инфекций, вызываемых паразитами, злокачественных T-клеточных новообразований, аутоиммунных заболеваний и воспалительных нарушений {см., например, V.L. Schramm, Biochimica et Biophysica Acta, 1587 (2002) 107-117}. Аналоги также применимы для индукции иммуносупрессии при трансплантации органов.

Родственные нуклеозидные аналоги, которые являются эффективными ингибиторами 5'-метилтиоаденозинфосфорилазы (MTAP) и 5'-метилтиоаденозиннуклеозидазы (MTAN), применимы:

(a) в качестве противомикробных веществ и для снижения вирулентности микробных инфекций путем снижения продукции различных соединений пути распознавания;

(b) в качестве средств для лечения инфекций, вызываемых паразитами, таких как малярия, которая поражает эритроциты {см., например, G.A. Kicska et al., J. Biol. Chem., 277 (2002) 3226-3231}; и

(c) в качестве противоопухолевых соединений, потенциально в комбинированной терапии с метотрексатом или азасерином.

Заявителями ранее были раскрыты эффективные ингибиторы таких ферментов в основанном на деазапуринах классе соединений, названных иммуноциллинами, ковалентно связанных непосредственно с фрагментами азасахаров (патенты США №№ 5985848 и 6066722, "Inhibitors of Nucleoside Metabolism" и документ WO 02/19371, "Nucleoside Metabolism Inhibitors").

При поиске новых улучшенных нуклеозидных аналогов, которые являются эффективными ингибиторами упомянутых выше нуклеозидфосфорилаз и нуклеозидаз, заявителями был также обнаружен новый класс соединений, которые являются эффективными ингибиторами указанных нуклеозидфосфорилаз и гидролаз (международная заявка PCT/NZ03/00186, "Inhibitors of Nucleoside Phosphorylases and Nucleosidases").

Указанные нуклеозидные аналоги получают в ходе многостадийных химических синтезов. Следовательно, время и затраты, требуемые для каждого синтеза, могут быть значительными. Поэтому существует необходимость в более эффективных и менее затратных способах получения соединений этого нового класса.

Реакция Манниха представляет собой реакцию конденсации трех компонентов, а именно амина, формальдегида и содержащего активный атом водорода соединения, такого как гетероароматическое соединение, например индол (страницы 812-814 в Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry, 4th Edition, revised by B.S. Furniss, A.J. Hannaford, V. Rogers, P.W.G. Smith and A.R. Tatchell, Longmans, London, 1978).

Реакцию Манниха применяли для получения соединений, которые содержат 9-азапуриновый фрагмент, связанный через метиленовую группу с алифатическими или алициклическими аминами [G.A. Modnikova et al., "Pyrrolo[3,2-d]pyrimidines. III. 7-Aminomethyl-substituted pyrrolo[3,2-d]pyrimidines", Khim.-farm. Zh., 1983, 352-356 (English translation)]. С применением реакции Манниха также получали соединения, содержащие пиримидиновый радикал, связанный через метиленовую группу с циклическим вторичным амином [V.V. Filichev and E.B. Pedersen, "Synthesis of 1'-aza-C-nucleosides from (3R,4R)-4-(hydroxymethyl)pyrrolidin-3-ol", Tetrahedron, 57 (2001) 9163-9168].

Заявителями было обнаружено, что реакция Манниха может применяться для получения соединений, которые содержат 9-дазапуриновый или 8-аза-9-деазапуриновый фрагмент (или их 2-аа-аналоги), связанные через метиленовую группу с циклическим вторичным амином. Эти соединения описаны в качестве эффективных ингибиторов, или потенциально эффективных ингибиторов нуклеозидфосфорилаз и нуклеозидаз в международной заявке PCT/NZ03/00186.

Таким образом, объектом настоящего изобретения является способ получения данных соединений или, по меньшей мере, обеспечение подходящего выбора.

ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В первом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения соединения формулы (I)

в которой:

V выбирают из CH ₂ и NH, и W представляет собой NR¹ ; или

V представляет собой NR¹, и W выбирают из CH₂ и NH;

X выбирают из CH₂ и CHOH в R- или S-конфигурации, кроме как в случаях, когда W выбирают из NH и NR ¹, тогда X представляет собой CH₂ ;

Y выбирают из водорода, галогена или гидроксигруппы, кроме как в случаях, когда V выбирают из NH и NR ¹, тогда Y представляет собой водород;

Z выбирают из водорода, галогена, гидроксигруппы, уходящей сульфонатной группы, SQ, OQ и Q, где Q представляет собой необязательно замещенную алкильную, аралкильную или арильную группу; и

R ¹ представляет собой радикал формулы (II)

в которой:

A выбирают из N, CH и CR ², где R² выбирают из галогена, необязательно замещенного алкила, аралкила или арила, OH, NH ₂, NHR³, NR³ R⁴ и SR⁵, где каждый R³, R⁴ и R ⁵ представляет собой необязательно замещенную алкильную, аралкильную или арильную группу;

B выбирают из OH, NH ₂, NHR⁶, SH, водорода и галогена, где R⁶ представляет собой необязательно замещенную алкильную, аралкильную или арильную группу;

D выбирают из OH, NH₂, NHR ⁷, водорода, галогена и SCH₃, где R⁷ представляет собой необязательно замещенную алкильную, аралкильную или арильную группу; и

E выбирают из N и CH;

включающему взаимодействие соединения формулы (III)

в которой:

V выбирают из CH ₂ и NH, и W представляет собой NH; или

V представляет собой NH, и W выбирают из CH₂ и NH;

X выбирают из CH₂ и CHOH в R- или S-конфигурации, кроме как в случае, когда W представляет собой NH, тогда X представляет собой CH₂;

Y выбирают из водорода, галогена или гидроксигруппы, кроме как в случае, когда V представляет собой NH, тогда Y представляет собой водород; и

Z выбирают из водорода, галогена, гидроксигруппы, уходящей сульфонатной группы, SQ, OQ и Q, где Q представляет собой необязательно замещенную алкильную, аралкильную или арильную группу;

с соединением формулы (IV)

в которой значения A, B, D и E определены выше;

и с формальдегидом или с эквивалентом формальдегида.

Предпочтительно Z представляет собой водород, галоген, гидроксигруппу, SQ или OQ, где Q представляет собой необязательно замещенную алкильную, аралкильную или арильную группу. Также предпочтительно, чтобы A представлял собой CH. Дополнительно предпочтительно, чтобы Y представлял собой H.

Предпочтительно W представляет собой NR¹, V представляет собой CH ₂, и X представляет собой CH₂. Также предпочтительно, чтобы R¹ представлял собой радикал формулы (II) по п.1, где A представляет собой CH и E представляет собой N.

Дополнительно предпочтительно, чтобы D представлял собой H или NH₂. Дополнительно предпочтительно, чтобы B представлял собой NH ₂, OH или Cl.

Предпочтительные способы по настоящему изобретению также включают способы, в которых в соединении формулы (I) Z представляет собой метансульфонат, пара-толуолсульфонат или трифторметансульфонат. Наиболее предпочтительно Z представляет собой метансульфонат.

Предпочтительные способы по настоящему изобретению также включают способы, в которых осуществляют взаимодействие соединений формулы (III) и (IV) с формальдегидом. Альтернативно, предпочтительно осуществляют взаимодействие соединений формулы (III) и (IV) с эквивалентом формальдегида, таким как параформальдегид.

Наиболее предпочтительными способами по настоящему изобретению являются способы, в которых соединение формулы (I) представляет собой:

(3R,4R)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин;

(3R,4R)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин;

(3R,4S)-4-(бензилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-4-(4-хлорфенилтиометил)1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4R)-1-[(6-хлор-9-деазапурин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин;

(3R,4R)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метансульфонил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-4-(этилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(пропилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(изопропилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-4-(бутилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(фенилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-4-(4-фторфенилтиометил)-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-4-(3-хлорфенилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(циклогексилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(4-пиридилтиометил)пирролидин;

(3R,4R)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метоксиметил)пирролидин;

(3R,4R)-4-(бензилоксиметил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4R)-1-[(9-деазагуанин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил]-3-гидрокси-4-(пропилтиометил)пирролидин;

(3R,4S)-4-(бутилтиометил)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деаза-6-хлорпурин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(2-фенилэтил)пирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-пропилпирролидин;

(3R,4S)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-пропилпирролидин; или

(3R,4S)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метилтиометил)пирролидин.

Настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I), полученному в соответствии со способом по п.1.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения соединения формулы (I), определенной в п.1, включающему:

(i) осуществление взаимодействия соединения формулы (III), определенной в п.1, с соединением формулы (IV), определенной в п.1, и с формальдегидом или с эквивалентом формальдегида, где любой один или несколько из заместителей V, W, X, Y и Z соединения формулы (III) защищены подходящей защитной группой; и

(ii) удаление одной или нескольких защитных групп с получением соединения формулы (I).

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения соединения формулы (I), определенной в п.1, включающему:

(i) осуществление взаимодействия соединения формулы (III), определенной в п.1, с соединением формулы (IV), определенной в п.1, и с формальдегидом или с эквивалентом формальдегида, где любой один или несколько из заместителей A, B, D и E соединения формулы (IV) защищены подходящей защитной группой; и

(ii) удаление одной или нескольких защитных групп с получением соединения формулы (I).

В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения соединения формулы (I), определенной в п.1, включающему:

(i) осуществление взаимодействия соединения формулы (III), определенной в п.1, с соединением формулы (IV), определенной в п.1, и с формальдегидом или с эквивалентом формальдегида, где любой один или несколько из заместителей V, W, X, Y и Z соединения формулы (III) защищены подходящей защитной группой, и где любой один или несколько из заместителей A, B, D и E соединения формулы (IV) защищены подходящей защитной группой; и

(ii) удаление одной или нескольких защитных групп с получением соединения формулы (I).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к удобному способу синтеза соединений, которые являются эффективными ингибиторами PNP, PPRT, MTAN, MTAP и/или нуклеозидгидролаз (NH). Указанные соединения могут найти применение при лечении инфекций, вызываемых паразитами, злокачественных T-клеточных новообразований, аутоиммунных заболеваний и воспалительных нарушений. Указанные соединения могут также применяться в качестве противомикробных средств, в качестве противоопухолевых средств или в качестве средств для лечения инфекций, вызываемых паразитами.

Ранее известные пути синтеза соединений формулы (I) отнимали много времени и были затратными. В отличие от этого синтез по настоящему изобретению представляет собой простой путь получения полезного класса соединений. В способе синтеза для сочетания 9-дазапуринового или 8-аза-9-деазапуринового фрагмента (или их 2-аза-аналогов) с циклическим вторичным амином применяется реакция Манниха.

Таким образом, заявители обнаружили, что требуемые соединения формулы (I) могут быть успешно получены с хорошим выходом в ходе одностадийного синтеза.

Следует учесть, что изображение соединения формулы (I), где B и/или D представляет собой гидроксигруппу, является енольной таутомерной формой соответствующего амида, и это соединение существует, главным образом, в амидной форме. Представление в енольной таутомерной форме используется лишь с целью уменьшения числа структурных формул для представления соединений по настоящему изобретению.

По аналогии следует учесть, что изображение соединения формулы (I), где B и/или D представляет собой тиольную группу, является тиоенольной таутомерной формой соответствующего тиоамида, и это соединение существует, главным образом, в тиоамидной форме. Представление в тиоенольной таутомерной форме используется лишь с целью уменьшения числа структурных формул для представления соединений по настоящему изобретению.

Используемый в этом документе термин "уходящая сульфонатная группа" означает алкилсульфонат или арилсульфонат, такие как метансульфонат или бензолсульфонат, или их замещенную форму, такую как бромбензолсульфонат, трифторметансульфонат или пара-толуолсульфонат.

Используемый в этом документе термин "защитная группа" означает группу, которая избирательно защищает органическую функциональную группу, экранируя на время химическую функцию этой группы и позволяя осуществлять манипуляции с другими частями молекулы, не затрагивая функциональную группу. Подходящие защитные группы известны специалисту в данной области техники и описаны, например, в Protective Groups in Organic Synthesis (3rd Ed.), T.W. Greene and P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons Inc (1999).

Определенные выше соединения формулы (III) могут быть получены по известным методам, как описано в международной заявке PCT/NZ03/00186 и в процитированных в ней ссылках. Методики получения избранных соединений формулы (III) описаны в этом документе.

Определенные выше соединения формулы (IV) могут быть получены по известным методам. Конкретно, способы получения 3H,5H-пирроло[3,2-d]пиримидин-4-она (9-деазагипоксантина) и 2-аино-3H,5H-пирроло[3,2-d]пиримидин-4-она (9-деазагуанина), то есть представленных ниже соединений 1 и 2, описаны в международной заявке PCT/NZ00/00048, "Process for Preparing Inhibitors of Nucleoside Metabolism and Substrates", и в R.H. Furneaux and P.C. Tyler, J. Org. Chem., 64 (1999) 8411-8412. Кроме того, 9-деазааденин (3) может быть получен путем обработки 9-деазагипоксантина (1) POCl₃, а затем этанольным раствором аммиака.

Одним преимуществом нового представленного заявителями способа является то, что не принимающие непосредственного участия в реакции функциональные группы ни амина, ни гетероциклического компонента не должны быть защищены защитными группами. Тем не менее, в некоторых случаях может быть полезно использовать защищенную форму соединения формулы (III) и/или формулы (IV) в качестве компонентов реакции.

Защищенные подходящим образом формы соединений формулы (III) описаны в патентах США №№ 5985848 и 6066722, "Inhibitors of Nucleoside Metabolism" и в документе WO 02/19371, "Nucleoside Metabolism Inhibitors". Необходимо, чтобы защищенные подходящим образом формы соединений формулы (IV) содержали протон в 9-ом положении 9-деазапуринового или 8-аза-9-деазапуринового фрагмента (или их 2-аза-аналогов).

Защищенные подходящим образом формы соединений формулы (IV) описаны в международной заявке PCT/NZ03/00186, "Inhibitors of Nucleoside Phosphorylases and Nucleosidases". Необходимо, чтобы защищенные подходящим образом формы соединений формулы (III) содержали незащищенную аминогруппу в кольце.

ПРИМЕРЫ

Следующие примеры дополнительно иллюстрируют настоящее изобретение. Следует учесть, что настоящее изобретение не ограничивается данными примерами.

Пример 1: Реакция Манниха - Общая методика

Схема 1

Общая методика получения соединений формулы (3) с применением реакции Манниха, представленной на схеме 1; Пирролидингидрохлориды формулы (1) (1,0 мол. эквив.; представленный в таблице 1 как "аминовый реагент", если не указано иначе) и ацетат натрия (1,0 мол. эквив.) растворяли в воде и 1,4-диоксане (4:1 по объему, 2 мл на ммоль) и добавляли к раствору водный раствор формальдегида (1,0-1,5 мол. эквив.) и замещенный 9-деазапурин формулы (2) (0,8-1,5 мол. эквив.). Реакционную смесь перемешивали при температуре и в течение времени, которые представлены в таблице 1. Добавляли силикагель (1,0 г на ммоль соединения 1) и упаривали смесь досуха. Проводили очистку хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента градиент CH₂Cl₂:MeOH:NH ₄OH (от 95:5:1 до 80:20:1 по объему) с получением соединения формулы (3), как это подробно представлено в таблице 1, в виде свободного основания или соли уксусной кислоты, которую преобразовывали в HCl-сль путем добавления и выпаривания избытка конц. HCl [Evans, G.B.; Furneaux, R.H.; Tyler, P.C.; Schramm, V.L. Org. Lett. 2003, 5, 3639-3640.] Получение пирролидингидрохлоридов формулы (1) проиллюстрировано в примерах получения.

Таблица 1 Соединения, полученные по общей методике реакции Манниха
№ соединения	Температура (°C)	Аминовый реагент	Время реакции (ч)	Заместители				Выход (%)
				R1	R2	R3	R 4
4	95	5	16	OH	OH	OH	H	47
6	95	5	1	OH	OH	NH2	H	65
7	95	41	1	SBn	OH	NH2	H	72
8	95	39	1	SPh-p-Cl	OH	NH2	H	72
9	95	5	3	OH	OH	Cl	H	78
10	90	53	1	OSO2Me	OH	NH2	H	39
11	95	32	1	SMe	OH	NH2	H	39
12	85	33	2	SEt	OH	NH2	H	60
13	90	34	3	S-n-Pr	OH	NH2	H	59
14	95	35	3	S-изо-Pr	OH	NH2	H	38
15	90	36	3	SBu	OH	NH2	H	52
16	95	37	1	SPh	OH	NH2	H	57
17	90	38	1	SPh-p-F	OH	NH2	H	27
18	90	40	1,5	SPh-m-Cl	OH	NH2	H	52
19	95	44	3	SChx	OH	NH2	H	34
20	85	45	2	S-4-пиридил	OH	NH2	H	45
21	85	42	1,5	OMe	OH	NH2	H	59
22	90	43	1,5	OBn	OH	NH2	H	22
23	95	5	12	OH	OH	OH	NH2	57
24	90	34	3	SPr	OH	OH	H	78
25	90	36	3	SBu	OH	OH	H	72
26	95	49	12	C-Bn	OH	Cl	H	38
27	95	52	2.5	C-Et	OH	NH2	H	31
28	95	52	5	C-Et	OH	OH	H	36

Пример 1.01

(3R,4R)-1-[(9-Деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин (4)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха, используя в качестве исходного материала 9-дазагипоксантин (Furneaux and Tyler, J. Org. Chem., 1999, 64, 8411-8412) и (3R,4R)-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидингидрохлорид (5) (Evans et al, J. Med. Chem., 2003, 46, 5271-5276) с получением соединения 4 в виде соли уксусной кислоты. После преобразования в HCl-соль и проведения ¹H- и ¹³C-ЯМР-спектрального анализа было обнаружено, что соединение во всех отношениях идентично описанному ранее (Evans et al., J. Med. Chem. 2003, 46, 5271-5276).

Пример 1.02

(3R,4R)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин (6)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха, используя в качестве исходного материала 9-деазааденин (пример получения 3.01) и (3R,4R)-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин (5) с получением соединения 6 в виде соли уксусной кислоты. ¹H ЯМР (d₄-MeOH) 8,20 (с, 1H), 7,65 (с, 1H), 4,27 (с, 1H), 4,22 (квинтет, J=3,0 Гц, 1H), 3,59 (м, 2H), 3,46 (дд, J=11,1, 8,3 Гц, 1H), 3,26 (дд, J=11,4, 5,7 Гц, 1H), 3,11 (дд, J=11,4, 3,0 Гц, 1H), 2,95 (дд, J=11,2, 6,8 Гц, 1H), 2,37 (ушир.с, 1H), 1,82 (с, 3H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 152,9, 151,9, 147,1, 132,0, 115,8, 108,2, 73,6, 63,1, 61,9, 56,0, 50,8, 49,5, 23,7. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₁₂H₁₈N₅O ₂: 264,1461. Найдено 264,1457.

Пример 1.03

(3R,4S)-4-(Бензилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин (7)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 7 в виде соли уксусной кислоты. Соль уксусной кислоты преобразовывали в свободное основание путем проведения ионообменной хроматографии. ¹H ЯМР (d₄-MeOH) 8,17 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,26-7,16 (м, 5H), 3,93-3,90 (м, 1H), 3,83-3,74 (м, 2H), 3,68 (с, 2H), 3,03-2,97 (м, 1H), 2,80 (дд, J=10,2, 6,4 Гц, 1H), 2,66-2,58 (м, 2H), 2,38 (дд, J=12,5, 8,9 Гц, 1H), 2,30 (дд, J=9,5, 7,2 Гц, 1H), 2,20-2,14 (м, 1H). ¹³ C ЯМР (d₄-MeOH) 152,5, 151,4, 147,4, 140,4, 130,4, 130,4, 129,8, 115,5, 112,9, 77,3, 62,7, 59,2, 49,3, 48,6, 37,5, 35,6. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₁₉H₂₄N₅OS: 370,1702. Найдено 370,1694.

Пример 1.04

(3R,4S)-4-(4-Хлорфенилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин (8)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 8 в виде соли уксусной кислоты. ¹H ЯМР (d₄ -MeOH) 8,25 (с, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,35-7,23 (м, 5H), 4,54 (с, 2H), 4,30 (м, 1H), 3,74 (дд, J=11,9, 7,9 Гц, 1H), 3,59 (дд, J=12,2, 5,6 Гц, 1H), 3,40-3,15 (м, 4H), 2,89 (дд, J=13,5, 9,1 Гц, 1H), 2,47 (ушир.с, 1H), 1,98 (с, 3H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 153,0, 151,8, 146,1, 135,7, 134,0, 133,2, 132,2, 130,7, 115,7, 105,5, 74,6, 60,4, 57,3, 49,2, 47,7, 36,1, 23,0. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₁₈H₂₁ClN₅OS: 390,1155. Найдено 390,1264.

Пример 1.05

(3R,4R)-1-[(6-Хлор-9-деазапурин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин (9)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха, используя в качестве исходного материала 6-хор-9-деазапурин (K. Imai, Chem. Pharm. Bull., 1964, 12, 1030) и (3R,4R)-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин с получением соединения 9 в виде соли уксусной кислоты. ¹H ЯМР (D₂O) 8,34 (с, 1H), 7,98 (с, 1H), 4,48 (с, 2H), 4,31 (м, 1H), 3,68 (дд, J=12,1, 8,3 Гц, 1H), 3,53 (д, J=5,9 Гц, 2H), 3,45 (дд, J=12,6, 5,5 Гц, 1H), 3,32 (дд, J=12,6, 2,5 Гц, 1H), 3,13 (дд, J=12,0, 7,4 Гц, 1H), 2,40 (ушир.с, 1H), 1,82 (с, 3H). ¹³C ЯМР (d ₄-MeOH) 149,7, 148,6, 143,4, 137,6, 124,8, 104,5, 71,3, 60,7, 59,8, 54,4, 48,0, 47,8, 23,5. HRMS (MH⁺ ) рассчитано для C₁₂H₁₆ ClN₄O₂: 283,0962. Найдено 283,0973.

Пример 1.06

(3R,4R)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метансульфонил)пирролидин (10)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 10. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,17 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 4,30-3,82 (м, 5H), 3,10-3,00 (м, 1H), 3,06 (с, 3H), 2,94 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 2,71 (дд, J=10,3, 4,1 Гц, 1H), 2,53 (дд, J=10,1, 6,7 Гц, 1H), 2,43-2,34 (м, 1H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 152,6, 151,5, 147,2, 130,7, 115,6, 112,0, 73,8, 71,8, 62,4, 56,0, 49,4, 49,1, 37,5.

Пример 1.07

(3R,4S)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метилтиометил)пирролидин (11)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 11 в виде соли уксусной кислоты. После преобразования в HCl-соль и проведения ¹H- и ¹³C-ЯМР-спектрального анализа было обнаружено, что соединение во всех отношениях идентично описанному ранее (Evans et al., J. Med. Chem. 2003, 46, 5271-5276).

Пример 1.08

(3R,4S)-4-(Этилтиометил)-l-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин (12)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 12. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,16 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 4,00-3,82 (м, 3H), 3,12 (дд, J=9,9, 7,9 Гц, 1H), 2,92 (дд, J=10,5, 6,3 Гц, 1H), 2,76-2,68 (м, 2H), 2,55-2,41 (м, 4H), 2,25-2,15 (м, 1H), 1,21 (т, J=7,4 Гц, 3H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 152,5, 151,5, 147,3, 130,7, 115,6, 112,1, 77,0, 62,4, 59,1, 49,4, 48,8, 35,5, 27,2, 15,5. HRMS (MH ⁺) рассчитано для C₁₄H ₂₂N₅OS: 308,1540. Найдено 308,1535.

Пример 1.09

(3R,4S)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(пропилтиометил)пирролидин (13)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 13. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,17 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 4,00-3,79 (м, 3H), 3,08 (дд, J=9,8, 7,9 Гц, 1H), 2,86 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 2,72-2,62 (м, 2H), 2,50-2,38 (м, 4H), 2,22-2,12 (м, 1H), 1,55 (секстет, J=7,3 Гц, 2H), 0,95 (т, J=7,3 Гц, 3H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 152,5, 151,4, 147,4, 130,5, 115,6, 112,7, 77,2, 62,6, 59,2, 49,4, 49,0, 36,1, 35,6, 24,3, 14,1. HRMS (MH⁺ ) рассчитано для C₁₅H₂₄ N₅OS: 322,1696. Найдено 322,1709.

Пример 1.10

(3R,4S)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(изопропилтиометил)пирролидин (14)

Применяли разновидность приведенной выше общей методики проведения реакции Манниха, используя 20% 1,4-диоксан в воде в качестве растворителя и 0,9 мол. эквив. 9-деазааденина, с получением неочищенного указанного в заголовке соединения 14 (386 мг, 80%) после проведения колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя CH₂Cl₂:MeOH:NH ₄OH (8:1,8:0,2). Остаточные примеси могут быть удалены по методу колоночной хроматографии на силикагеле при элюировании CH₂Cl₂:NH ₃ (7н) в MeOH с получением указанного в заголовке соединения 14 (183 мг, 38%). ¹H ЯМР (MeOH-d ₄): м.д.: 8,16 (с, 1H), 7,49 (с, 1H), 3,99-3,94 (м, 1H), 3,82 (дд, J=18,7, 13,4 Гц, 1H), 3,04 (дд, J=9,7, 7,9 Гц, 1H), 2,95-2,82 (м, 2H), 2,75 (дд, J=12,5, 6,0 Гц, 1H), 2,66 (дд, J=10,3, 4,2 Гц, 1H), 2,50 (дд, J=12,5, 9,1 Гц, 1H), 2,38 (дд, J=9,7, 7,1 Гц, 1H), 2,21-2,10 (м, 1H), 1,23, 1,22 (2с, 3H каждый). ¹³C ЯМР (MeOH-d₄): м.д.: 152,48, 151,38, 147,40, 130,45, 115,54, 112,90, 77,29, 62,66, 59,26, 49,32, 49,09, 36,49, 34,66, 24,19.

Пример 1.11

(3R,4S)-4-(Бутилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин (15)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 15. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,16 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 3,99-3,79 (м, 3H), 3,08 (дд, J=9,7, 7,9 Гц, 1H), 2,87 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 2,75-2,69 (м, 2H), 2,51-2,38 (м, 4H), 2,22-2,12 (м, 1H), 1,55-1,32 (м, 4H), 0,90 (т, J=7,3 Гц, 3H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 152,5, 151,4, 147,4, 130,5, 115,6, 112,6, 77,1, 62,6, 59,2, 49,4, 49,0, 36,1, 33,3, 33,2, 23,3, 14,4. HRMS (MH⁺) рассчитано для C₁₆H₂₆N ₅OS: 336,1853. Найдено 336,1850.

Пример 1.12

(3R,4S)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(фенилтиометил)пирролидин (16)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 16. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,22 (с, 1H), 7,74 (с, 1H), 7,33-7,15 (м, 2H), 4,43 (с, 2H), 4,26 (м, 1H), 3,62 (дд, J=11,7, 7,9 Гц, 2H), 3,48 (дд, J=12,0, 5,6 Гц, 1H), 3,25 (т, дд, J=12,0, 3,3 Гц, 1H), 3,15 (м, 2H), 2,85 (дд, J=13,5, 9,1 Гц, 1H), 2,43 (м, 1H). ¹³C ЯМР (d ₄-MeOH) 152,9, 152,1, 146,8, 136,8, 132,7, 131,4, 130,6, 128,1, 115,8, 106,3, 74,9, 60,6, 57,4, 49,7, 47,7, 36,3. HRMS (MH⁺) рассчитано для C₁₈ H₂₅N₅OS: 356,1545. Найдено 356,1542.

Пример 1.13

(3R,4S)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-4-(4-фторфенилтиометил)-3-гидроксипирролидин (17)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 17. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,16 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,40-7,30 (м, 2H), 7,00-6,90 (м, 2H), 4,02-3,97 (м, 1H), 3,86-3,75 (м, 2H), 3,11 (дд, J=12,9, 5,9 Гц, 1H), 3,00 (т, J=8,7 Гц, 1H), 2,90-2,75 (м, 2H), 2,65-2,59 (м, 1H), 2,41-2,32 (м, 1H), 2,20-2,10 (м, 1H). ¹³C ЯМР (d ₄-MeOH) 165,5, 162,0, 152,5, 151,4, 147,4, 134,1, 134,0, 133,1, 130,4, 117,4, 117,1, 115,5, 112,9, 77,2, 62,7, 59,0, 49,3, 48,8, 39,1. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₁₈H₂₁N₅OFS: 374,1445. Найдено 374,1438.

Пример 1.14

(3R,4S)-4-(3-Хлорфенилтиометил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин (18)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 18. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,16 (с, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,25-7,05 (м, 4H), 4,01-3,97 (м, 1H), 3,87-3,76 (м, 2H), 3,18 (дд, J=12,9, 5,9 Гц, 1H), 2,99 (дд, J=9,8, 7,9 Гц, 1H), 2,94-2,86 (м, 2H), 2,64 (дд, J=10,2, 4,3 Гц, 1H), 2,41 (дд, J=9,9, 7,0 Гц, 1H), 2,26-2,15 (м, 1H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 152,5, 151,4, 147,4, 140,7, 136,1, 131,6, 130,4, 129,8, 128,6, 127,4, 115,5, 112,8, 77,1, 62,6, 58,9, 49,3, 48,7, 37,4. HRMS (MH⁺) рассчитано для C₁₈H₂₁N ₅OCIS: 390,1150. Найдено 390,1142.

Пример 1.15

(3R,4S)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(циклогексилтиометил)пирролидин (19)

Применяли разновидность приведенной выше общей методики проведения реакции Манниха, используя 20% 1,4-диоксан в воде в качестве растворителя и 0,9 мол. эквив. 9-деазааденина, с получением неочищенного указанного в заголовке соединения 19 (333 мг, 79%) после проведения колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя CH₂Cl₂:MeOH:NH ₄OH (8:1,8:0,2 по объему)). Остаточные примеси могут быть удалены по методу колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя CH₂Cl₂:NH ₃ (7н) в MeOH (9:1 по объему)) с получением указанного в заголовке соединения 19 (144 мг, 34%). ¹ H ЯМР (MeOH-d₄): м.д.: 8,15 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 3,97-3,92 (м, 1H), 3,82 (дд, J=19,1, 13,4 Гц, 2H), 3,06-3,00 (м, 1H), 2,84 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 2,75 (дд, J=12,5, 5,9 Гц, 1H), 2,67-2,58 (м, 2H), 2,48 (дд, J=12,5, 9,3 Гц, 1H), 2,37 (дд, J=9,8, 7,2 Гц, 1H), 2,20-2,08 (м, 1H), 1,94-1,92 (м, 2H), 1,74-1,72 (м, 2H), 1,60-1,58 (м, 1H), 1,36-1,19 (м, 5H). ¹³C ЯМР (MeOH-d ₄): м.д.: 152,48, 151,35, 147,32, 130,50, 115,48, 112,74, 77,21, 62,62, 59,18, 49,38, 49,26, 45,10, 35,27, 35,20, 34,18, 27,48, 27,39.

Пример 1.16

(3R,4S)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(4-пиридилтиометил)пирролидин (20)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 20. ¹ H ЯМР (D₂O) 8,43 (д, J=7,2 Гц, 1H), 8,42 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,77 (д, J=7,2 Гц, 1H), 4,64 (с, 2H), 4,52-4,47 (м, 1H), 3,94 (дд, J=12,1, 8,0 Гц, 1H), 3,67 (дд, J=12,6, 5,7 Гц, 1H), 3,50-3,15 (м, 4H), 2,78-2,64 (м, 1H). ¹³C ЯМР (D₂O) 163,9, 150,2, 144,6, 139,5, 135,4, 122,8, 113,2, 102,7, 73,0, 59,0, 55,9, 48,1, 44,4, 31,5. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₁₇H₂₁N₆OS: 357,1492. Найдено 357,1509.

Пример 1.17

(3R,4R)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(метоксиметил)пирролидин (21)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 21. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,19 (с, 1H), 7,63 (с, 1H), 4,18-4,05 (м, 3H), 3,40-2,28 (м, 3H), 3,30 (с, 3H), 3,10 (дд, J=11,0, 5,7 Гц, 1H), 2,95 (дд, J=11,0, 3,3 Гц, 1H), 2,77 (дд, J=10,8, 6,7 Гц, 1H), 2,41-2,29 (м, 1H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 152,7, 151,8, 147,2, 131,6, 115,7, 109,5, 74,3, 74,1, 62,2, 59,6, 56,5, 49,4, 49,0. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₁₃H₂₀N₅O ₂: 278,1612. Найдено 278,1626.

Пример 1.18

(3R,4R)-4-(Бензилоксиметил)-1-[(9-деазааденин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин (22)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 22. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH) 8,17 (с, 1H), 7,55 (с, 1H), 7,30-7,20 (м, 5H), 4,46 (ушир.с, 2H), 4,10-4,00 (м, 3H), 3,55-3,38 (м, 2H), 3,23-3,18 (м, 1H), 2,98 (дд, J=10,7, 5,8 Гц, 1H), 2,85 (дд, J=10,7, 3,4 Гц, 1H), 2,68 (дд, J=10,4, 6,9 Гц, 1H), 2,38-2,30 (м, 1H). ¹³C ЯМР (d ₄-MeOH) 152,6, 151,7, 147,2, 139,9, 131,3,129,8, 129,3, 129,1, 115,6, 110,4, 74,5, 74,3, 71,9, 62,3, 56,6, 49,4, 49,0.

Пример 1.19

(3R,4R)-1-[(9-Деазагуанин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидин (23)

(3R,4R)-3-Гидрокси-4-гидроксиметилпирролидингидрохлорид (5) (154 мг, 1,0 ммоль) и ацетат натрия (82 мг, 1,0 ммоль) растворяли в воде (2 мл) и добавляли к раствору водный раствор формальдегида (82 мкл, 1,0 ммоль) и 9-деазагуанин (Furneaux and Tyler, J. Org. Chem., 1999, 64, 8411-8412) (120 мг, 0,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 95°C в течение 12 ч. Добавляли силикагель (1,0 г) и упаривали смесь досуха. Проводили очистку по методу хроматографии на силикагеле, применяя в качестве элюента CH ₂Cl₂:MeOH:NH₄ OH (5:4:1 по объему), с получением указанного в заголовке соединения 23 в виде соли уксусной кислоты. После преобразования в HCl-соль и проведения ¹H- и ¹³ C-ЯМР-спектрального анализа было обнаружено, что соединение во всех отношениях идентично описанному ранее (Evans et al., J. Med. Chem. 2003, 46, 5271-5276).

Пример 1.20

(3R,4S)-1-[(9-Деазагипоксантин-9-ил]-3-гидрокси-4-(пропилтиометил)пирролидин (24)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 24. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH/D₂ O) 7,99 (с, 1H), 7,53 (с, 1H), 4,06-3,98 (м, 1H), 3,92-3,80 (м, 2H), 3,06 (дд, J=9,8, 8,0 Гц, 1H), 2,90 (дд, J=10,5, 6,5 Гц, 1H), 2,79-2,65 (м, 2H), 2,52-2,38 (м, 4H), 2,22-2,15 (м, 1H), 1,57 (секстет, J=7,3 Гц, 2H), 0,95 (т, J=7,3 Гц, 3H). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) 145,7, 143,7, 131,0, 113,6, 77,0, 62,1, 58,6, 48,9, 48,5, 35,9, 35,6, 24,2, 14,2.

Пример 1.21

(3R,4S)-4-(Бутилтиометил)-1-[(9-деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидроксипирролидин (25)

Следовали приведенной выше общей методике проведения реакции Манниха с получением соединения 25. ¹ H ЯМР (d₄-MeOH/CDCl₃ ) 7,86 (с, 1H), 7,38 (с, 1H), 4,00-3,92 (м, 1H), 3,82-3,75 (м, 2H), 3,07 (дд, J=9,8, 8,0 Гц, 1H), 2,85-2,70 (м, 3H), 2,55-2,42 (м, 3H), 2,37-2,15 (м, 2H), 1,60-1,32 (м, 4H), 0,90 (т, J=7,3 Гц, 3H). ¹³C ЯМР (d₄ -MeOH/D₂O) 156,6, 145,6, 142,9, 129,9, 119,6, 114,7, 77,4, 63,0, 59,6, 49,4, 49,1, 36,6, 33,6, 33,3, 23,5, 14,9. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₁₆H₂₅N₄O ₂S: 337,1693. Найдено 337,1684.

Пример 1.22

(3R,4S)-1-[(9-деаза-6-хлорпурин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-(2-фенилэтил)пирролидин (26)

Применяли разновидность приведенной выше общей методики проведения реакции Манниха, используя 0,9 мол. эквив. 6-хлор-9-деазапурина (K. Imai, Chem. Pharm. Bull., 1964, 12, 1030), с получением указанного в заголовке соединения 26 (схема 2). В отличие от стандартной методики, реакционная смесь не образовывала раствор, а коричневую взвесь, которую разбавляли 1,4-диоксаном перед предварительной адсорбцией на силикагель. Проводили колоночную хроматографию, элюируя CH₂Cl ₂:MeOH (4:1 по объему), а затем CH₂ Cl₂:MeOH:NH₄OH (5:4,5:0,5 по объему), с получением соединения 26 с выходом 38%. ¹H ЯМР (300 МГц, MeOH-d₄): м.д.: 8,71 (с, 1H), 8,12 (с, 1H), 7,17 (с, 5H), 4,55 (с, 1H), 4,18 (м, 1H), 3,56 (м, 2H), 3,31 (м, 1H), 3,04 (дд, J=11,6, 7,7 Гц, 1H), 2,64 (м, 2H), 2,21 (м, 1H), 1,87 (м, 1H), 1,61 (м, 1H). ¹³C ЯМР (300 МГц, MeOH-d ₄): м.д.: 151,62, 151,35, 145,02, 142,99, 138,11, 129,84, 129,82, 127,46, 126,81, 107,73, 75,68, 61,00, 58,48, 49,51, 47,56, 35,26, 34,88.

Схема 2

Пример 1.23

(3R,4S)-1-[(9-Деазааденин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-пропилпирролидин (27)

Применяли разновидность приведенной выше общей методики проведения реакции Манниха, используя 0,9 мол. эквив. 9-дазааденина, с получением неочищенного указанного в заголовке соединения 27 (136 мг, 73%) после проведения колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя CH₂Cl ₂:MeOH:NH₄OH (8:1,8:0,2 по объему)). Остаточные примеси могут быть удалены по методу колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя MeCN:NH₄OH (4:1 по объему)) с получением соединения 27 с выходом 31%. ¹H ЯМР (300 МГц, MeOH-d₄): м.д.: 8,18 (с, 1H), 7,51 (с, 1H), 3,91-3,85 (м, 3H), 3,10 (дд, J=9,6, 8,0 Гц, 1H), 2,82-2,72 (м, 2H), 2,22 (дд, J=9,6, 8,0 Гц, 1H), 2,04-1,95 (м, 1H), 1,56-1,44 (м, 1H), 1,39-1,21 (м, 3H), 0,92-0,87 (м, 3H). ¹³C ЯМР (300 МГц, MeOH-d₄): м.д.: 152,52, 151,45, 147,37, 130,59, 115,55, 112,50, 77,94, 62,63, 59,94, 49,55, 48,59, 36,89, 22,67, 14,91.

Пример 1.24

(3R,4S)-1-[(9-Деазагипоксантин-9-ил)метил]-3-гидрокси-4-пропилпирролидин (28)

Применяли разновидность приведенной выше общей методики проведения реакции Манниха, используя 0,9 мол. эквив. 9-дазагипоксантина, с получением неочищенного указанного в заголовке соединения 28 (90 мг, 61%) после проведения колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя CH₂Cl ₂:MeOH:NH₄OH (5:4,5:0,5 по объему). Остаточные примеси (9-деазагипоксантин) могут быть удалены по методу колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя CH ₂Cl₂:MeOH:NH₄ OH (8:1,8:0,2 по объему) с получением соединения 28 с выходом 36%. ¹H ЯМР (300 МГц, MeOH-d ₄, ˜30% CDCl₃): м.д.: 7,86 (с, 1H), 7,39 (с, 1H), 3,89-3,76 (м, 3H), 3,09 (дд, J=9,5, 7,9 Гц, 1H), 2,79-2,69 (м, 2H), 2,18-2,12 (м, 1H), 2,05-1,96 (м, 1H), 1,55-1,46 (м, 1H), 1,41-1,23 (м, 3H), 0,94-0,89 (м, 3H). ¹³C ЯМР (300 Мгц, MeOH-d ₄, ˜30% CDCl₃): м.д.: 145,59, 142,99, 129,93, 114,50, 78,14, 62,95, 60,24, 49,78, 48,94, 37,07, 22,80, 15,29.

Пример получения 1

Методики синтеза (3R,4S)-3-гидрокси-4-(алкил-, аралкил-, и арил-тиометил)пирролидинов

Общий способ получения: 4-Замещенные-4-тиопирролидины получали, по существу, по способу, подробно описанному в примере получения 1.01 для соединения 32, но с указанными для каждого примера получения модификациями и с использованием подходящего тиолята натрия. В случаях, когда тиолят натрия не использовали непосредственно, его предварительно получали путем обработки при 0°C перемешиваемой смеси NaH (2,85 ммоль) в DMF (5 мл) подходящим тиолом (2,85 ммоль). После перемешивания смеси в течение 10 минут добавляли раствор мезилата (450 мг, 1,53 ммоль) в виде раствора в DMF (5 мл) и перемешивали смесь при к.т. до полного расходования мезилата (0,5-4 ч), что регистрировали по методу ТСХ.

Пример получения 1.01

(3R,4S)-3-Гидрокси-4-метилтиометилпирролидин (32), схема 3

Метансульфонилхлорид (0,950 мл, 12,3 ммоль) добавляли к раствору (3R,4R)-N-трет-бутоксикарбонил-3-гидрокси-4-гидроксиметилпирролидина (29) (Evans et al., J. Med. Chem., 2003, 46, 5271-5276) (2,16 г, 9,94 ммоль) и диизопропилэтиламина (2,65 мл, 15,0 ммоль) в DCM (40 мл), охлажденном до -78°C в течение 5 минут. После перемешивания при -78°C в течение 40 минут добавляли водный 2M раствор HCl и разделяли органическую фазу. Водную фазу дважды экстрагировали DCM. Объединенный органический экстракт промывали нас. водным раствором NaHCO₃, затем соляным раствором и сушили (MgSO₄). После стандартного процесса обработки и проведения хроматографии получали (1,99 г, 6,74 ммоль, 68%) мезилата 30 в виде бесцветного стекловидного вещества. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₁₁H₂₁NO₆SNa: 318,0982. Найдено 318,0979. К перемешиваемому раствору тиометоксида натрия (200 мг, 2,85 ммоль) и DMF (3 мл) добавляли раствор мезилата 30 (450 мг, 1,53 ммоль) в DMF (5 мл) и перемешивали смесь в течение 1 ч. Добавляли толуол (50 мл) и H₂O (50 мл) и встряхивали, фазы разделяли, органический слой сушили (MgSO ₄) и удаляли растворитель при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали по методу хроматографии на силикагеле, элюируя 10-50% EtOAc/петролейным эфиром, с получением промежуточного продукта 31 (210 мг, 0,849 ммоль, 55%). Раствор полученного материала в метаноле (3 мл) обрабатывали конц. HCl (1 мл). Через 1 ч раствор концентрировали досуха с получением указанного в заголовке соединения 32 в виде твердого остатка (0,830 ммоль, 98%). Твердый остаток растворяли в H₂O (10 мл) или D ₂O (образцы для ЯМР-анализа) и трижды удаляли растворитель. ¹H ЯМР (D₂O) 4,40 (кв., J=3,1 Гц, 1H), 3,67 (дд, J=12,0, 6,6 Гц, 1H), 3,50 (дд, J=12,8, 5,1 Гц, 1H), 3,28 (дд, J=12,8, 3,0 Гц, 1H), 3,22 (дд, J=8,7, 3,4 Гц, 1H), 2,73-2,66 (м, 1H), 2,58-2,50 (м, 2H), 2,40-2,30 (м, 2H), 2,13 (с, 3H). ¹³C ЯМР (D ₂O) 73,5, 51,5, 48,6, 45,2, 34,3, 14,9.

Схема 3

Пример получения 1.02

(3R,4S)-4-(Этилтиометил)-3-гидроксипирролидин (33)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (260 мг, 0,880 ммоль) подвергали обработке с получением указанного в заголовке соединения 33 (100 мг, 0,506 ммоль, 58%). ¹H ЯМР (D₂O) 4,30-4,24 (м, 1H), 3,53 (дд, J=12,3, 7,2 Гц, 1H), 3,37 (дд, J=12,8, 5,2 Гц, 1H), 3,14 (дд, J=12,8, 3,1 Гц, 1H), 3,07 (дд, J=12,2, 5,7 Гц, 1H), 2,65-2,55 (м, 1H), 2,46 (кв., J=7,4 Гц, 2H), 2,40-2,30 (м, 2H) 1,09 (т, J=7,4 Гц, 3H). ¹³C ЯМР (D ₂O) 73,6, 51,5, 48,6, 45,6, 31,7, 26,0, 14,4. HRMS (MH ⁺) рассчитано для C₇H ₁₆NOS: 162,0947. Найдено 162,0952.

Пример получения 1.03

(3R,4S)-3-Гидрокси-4-(пропилтиометил)пирролидин (34)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (264 мг, 0,894 ммоль) подвергали обработке с получением соединения 34 (139 мг, 0,656 ммоль, 73%). ¹H ЯМР (D ₂O) 4,41-4,37 (м, 1H), 3,67 (дд, J=12,3, 7,2 Гц, 1H), 3,50 (дд, J=12,8, 5,2 Гц, 1H), 3,27 (дд, J=12,8, 3,1 Гц, 1H), 3,21 (дд, J=12,2, 5,6 Гц, 1H), 2,76-2,71 (м, 1H), 2,61-2,50 (м, 4H), 1,59 (секстет, J=7,3 Гц), 0,95 (т, J=7,3 Гц, 3H). ¹³C ЯМР (D₂O) 73,6, 51,5, 48,6, 45,7, 34,1, 32,1, 22,7, 13,1. HRMS (MH⁺) рассчитано для C₈H₁₈NOS: 176,1104. Найдено 176,1106.

Пример получения 1.04

(3R,4S)-3-Гидрокси-4-(изопропилтиометил)пирролидингидрохлорид (35)

К раствору 2-пропантиола (0,36 мл, 3,9 ммоль) в DMF (10 мл) при 0°C добавляли 60% NaH (145 мг, 3,6 ммоль). Через 10 минут перемешивания добавляли раствор мезилата 30 (565 мг, 1,91 ммоль) в DMF (10 мл). Продолжали перемешивание, пока температура реакционной смеси не достигала к.т. После завершения реакции реакционную смесь тушили добавлением водн. NaHCO ₃, добавляли толуол и подвергали реакционную смесь стандартной обработке с получением неочищенного промежуточного продукта, который подвергали хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом петролейного эфира:EtOAc (от 4:1 до 1:1 по объему), с получением чистого промежуточного продукта, (3R,4S)-N-трет-бутоксикарбонил-3-гидрокси-4-(изопропилтиометил)пирролидина, в виде бесцветного сиропа (490 мг, 97%). ¹ H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): м.д.: 4,18-4,11 (м, 1H), 3,72-3,60 (м, 2H), 3,28-3,18 (м, 1H), 3,13 (дд, J=11,1, 6,7 Гц, 1H), 2,95 (септ., J=6,7 Гц, 1H), 2,69-2,50 (м, 2H), 2,33-2,22 (м, 1H), 1,46 (с, 9H), 1,29, 1,27 (с, 3H каждый). ¹³C ЯМР (300 МГц, CDCl₃): м.д.: (заметьте, что некоторые пики раздваиваются вследствие медленной конверсии ротамеров) 154,93, 79,97, (75,48, 74,64), (52,81, 52,55), (49,69, 49,42), (46,13, 45,35), 35,71, 32,32, 28,87, 23,73, 23,69. Раствор этого материала в MeOH (10 мл) при 40°C обрабатывали 12н (конц.) HCl (4 мл) в течение 30 минут с получением неочищенного указанного в заголовке соединения 35, которое непосредственно использовали для проведения реакции Манниха.

Пример получения 1.05

(3R,4S)-4-(Бутилтиометил)-3-гидроксипирролидин (36)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (438 мг, 1,48 ммоль) подвергали обработке с получением соединения 36 (284 мг, 1,25 ммоль, 84%). ¹H ЯМР (D ₂O) 4,40-4,36 (м, 1H), 3,66 (дд, J=12,3, 7,2 Гц, 1H), 3,48 (дд, J=12,8, 5,2 Гц, 1H), 3,26 (дд, J=12,8, 3,1 Гц, 1H), 3,21 (дд, J=12,2, 5,6 Гц, 1H), 2,76-2,70 (м, 1H), 2,62-2,50 (м, 4H), 1,61-1,51 (м, 2H), 1,40-1,33 (м, 2H), 0,86 (т, J=7,3 Гц, 3H). ¹³C ЯМР (D₂O) 73,5, 51,5, 48,6, 45,7, 32,2, 31,7, 31,3, 21,7, 13,3. HRMS (MH ⁺) рассчитано для C₉H ₂₀NOS: 190,1260. Найдено 190,1257.

Пример получения 1.06

(3R,4S)-3-Гидрокси-4-(фенилтиометил)пирролидин (37)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (300 мг, 1,00 ммоль) подвергали обработке с получением соединения 37 (692 мг, 0,69 ммоль). ¹H ЯМР (D ₂O) 7,51-7,24 (м, 5H), 4,38-4,34 (м, 1H), 3,56 (дд, J=12,2, 7,7 Гц, 1H), 3,45 (дд, J=12,6, 5,2 Гц, 1H), 3,26-3,00 (м, 3H), 2,88 (дд, J=13,7, 8,3 Гц, 1H), 2,48-2,37 (м, 1H). ¹³C ЯМР (D₂O) 134,5, 130,5, 129,9, 127,6, 73,4, 51,5, 48,4, 45,5, 34,3.

Пример получения 1.07

(3R,4S)-(4-Фторфенилтиометил)-3-гидрокси-4-пирролидин (38)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (281 мг, 0,951 ммоль) подвергали обработке с получением соединения 38 (160 мг, 0,607 ммоль, 64%). ¹H ЯМР (D ₂O) 7,49-7,42 (м, 2H), 7,19-7,06 (м, 2H), 4,41-4,36 (м, 1H), 3,60 (дд, J=12,3, 7,7 Гц, 1H), 3,48 (дд, J=12,8, 5,2 Гц, 1H), 3,27-3,16 (м, 2H), 3,07 (дд, J=13,8, 6,9 Гц, 1H), 2,88 (дд, J=13,8, 8,3 Гц, 1H), 2,45-2,38 (м, 1H). ¹³ C ЯМР (D₂O) 164,2, 160,9, 133,7, 133,6, 129,4, 116,9, 116,6, 73,3, 51,5, 48,4, 45,5, 35,5. HRMS (MH ⁺) рассчитано для C₁₁H ₁₅NOSF: 228,0853. Найдено 228,0856.

Пример получения 1.08

(3R,4S)-(4-Хлорфенилтиометил)-3-гидрокси-4-пирролидин (39)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (245 мг, 0,83 ммоль) подвергали обработке с получением соединения 39 (212 мг, 0,76 ммоль, 91%). ¹H ЯМР (d ₄-MeOH) 7,51-7,39 (м, 2H), 7,35-7,31 (м, 2H), 4,38-4,33 (м, 1H), 3,59 (дд, J=12,0, 7,6 Гц, 1H), 3,47 (дд, J=12,4, 4,9 Гц, 1H), 3,28-3,18 (м, 3H), 2,93 (дд, J=13,6, 9,0 Гц, 1H), 2,49-2,38 (м, 1H). ¹³C ЯМР (D₂ O) 135,7, 134,1, 132,9, 130,8, 74,8, 52,9, 49,6, 47,5, 35,8.

Пример получения 1.09

(3R,4S)-4-(3-Хлорфенилтиометил)-3-гидроксипирролидин (40)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (300 мг, 1,02 ммоль) подвергали обработке с получением соединения 40 (192 мг, 0,685 ммоль, 67%). ¹H ЯМР (D ₂O) 7,33-7,15 (м, 4H), 4,39-4,35 (м, 1H), 3,59 (дд, J=12,2, 7,7 Гц, 1H), 3,47 (дд, J=12,7, 5,1 Гц, 1H), 3,28-3,04 (м, 3H), 2,89 (дд, J=13,7, 8,3 Гц, 1H), 2,49-2,41 (м, 1H). ¹³C ЯМР (D₂O) 136,9, 134,7, 131,0, 129,3, 128,1, 127,2, 73,4, 51,5, 48,4, 45,3, 34,0. HRMS (MH ⁺) рассчитано для C₁₁H ₁₅NOSCl: 244,0557(4). Найдено 244,0556(8).

Пример получения 1.10

(3R,4S)-4-(Бензилтиометил)-3-гидроксипирролидин (41)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (1,10 г, 3,7 ммоль) подвергали обработке с получением соединения 41 (730 мг, 2,81 ммоль, 76%). ¹H ЯМР (D ₂O) 7,40-7,27 (м, 5H), 4,26-4,22 (м, 1H), 3,74 (с, 2H), 3,56 (дд, J=12,4, 7,2 Гц, 1H), 3,37 (дд, J=12,8, 5,2 Гц, 1H), 3,21 (дд, J=12,8, 3,0 Гц, 3H), 2,07 (дд, J=12,4, 5,5 Гц, 1H), 2,61-2,52 (м, 1H), 2,47-2,34 (м, 2H). ¹³ C ЯМР (D₂O) 138,7, 129,5, 129,3, 127,9, 73,5, 51,5, 48,5, 45,4, 35,9, 31,8. HRMS (MH⁺ ) рассчитано для C₁₂H₁₈ NOS: 224,1109. Найдено 224,1102.

Пример получения 1.11

(3R,4R)-3-Гидрокси-4-(метоксиметил)пирролидин (42), схема 4

Диол 29 обрабатывали по схеме 4 с получением соединения 42. ¹H ЯМР (D ₂O) 4,30-4,26 (м, 1H), 3,52-3,28 (м, 4H), 3,22 (с, 3H), 3,15-3,00 (м, 2H), 2,48-2,37 (м, 1H). ¹³ C ЯМР (D₂O) 72,1, 71,6, 58,8, 52,0, 46,7, 45,7. HRMS (MH⁺) рассчитано для C ₆H₁₄NO₂: 132,1019. Найдено 132,1012.

Схема 4

Пример получения 1.12

(3R,4R)-4-(Бензилоксиметил)-3-гидроксипирролидин (43), схема 4

Диол 29 обрабатывали по схеме 4 с получением соединения 43. ¹H ЯМР (D ₂O, свободное основание) 7,32-7,15 (м, 5H), 4,36 (с, 2H), 3,92-3,85 (м, 1H), 3,35 (дд, J=9,8, 7,0 Гц, 1H), 3,24 (дд, J=9,8, 7,8 Гц, 1H), 2,97 (дд, J=11,8, 7,9 Гц, 1H), 2,75 (дд, J=12,4, 5,5 Гц, 1H), 2,57 (дд, J=12,4, 3,4 Гц, 1H), 2,36 (дд, J=11,8, 5,7 Гц, 1H), 2,15-2,05 (м, 1H). ¹³C ЯМР (D₂O) 137,6, 129,0, 128,8, 128,6, 74,7, 73,1, 71,0, 53,2, 48,0, 47,6. HRMS (MH⁺ ) рассчитано для C₁₂H₁₈ NO₂: 208,1332. Найдено 208,1329.

Пример получения 1.13

(3R,4S)-4-(Циклогексилтиометил)-3-гидроксипирролидингидрохлорид (44)

К раствору циклогексилмеркаптана (0,47 мл, 3,84 ммоль) в DMF (10 мл) при 0°C добавляли 60% NaH (145 мг, 3,6 ммоль). Через 10 минут перемешивания добавляли раствор мезилата 30 (565 мг, 1,91 ммоль) в DMF (10 мл). Продолжали перемешивание, пока температура реакционной смеси не достигала к.т. После завершения реакции реакционную смесь тушили добавлением водн. NaHCO ₃, добавляли толуол и подвергали реакционную смесь стандартной обработке с получением неочищенного промежуточного продукта, который подвергали хроматографии на силикагеле, элюируя петролейным эфиром:EtOAc (1:1 по объему) с получением чистого промежуточного продукта, (3R,4S)-N-трет-бутоксикарбонил-3-гидрокси-4-циклогексилтиометилпирролидина в виде бесцветного сиропа (428 мг, 71%). ¹ H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): м.д.: 4,17-4,09 (м, 1H), 3,72-3,60 (м, 2H), 3,28-3,18 (м, 1H), 3,15-3,09 (м, 1H), 2,74-2,64 (м, 2H), 2,60-2,53 (м, 1H), 2,32-2,23 (м, 1H), 1,96 (м, 2H), 1,81-1,77 (м, 2H), 1,66-1,61 (м, 1H), 1,45 (с, 9H), 1,35-1,24 (м, 5H). ¹³ C ЯМР (300 МГц, CDCl₃): м.д.: (заметьте, что некоторые пики раздваиваются вследствие медленной конверсии ротамеров) 154,91, 79,94, (75,57, 74,72), (52,80, 52,55), (49,70, 49,43), (46,24, 45,41), 44,26, 33,99, 33,93, 31,90, 28,87, 26,43, 26,12. Раствор этого материала в MeOH (10 мл) при 40°C обрабатывали 12н (конц.) HCl (4 мл) в течение 30 минут с получением неочищенного указанного в заголовке соединения 44, которое непосредственно использовали для проведения реакции Манниха.

Пример получения 1.14

(3R,4S)-3-Гидрокси-4-(4-пиридилтиометил)пирролидин (45)

Следуя представленной выше общей методике, мезилат 30 (348 мг, 1,18 ммоль) подвергали обработке с получением соединения 45 (105 мг, 0,426 ммоль, 36%). ¹H ЯМР (D ₂O) 8,42 (д, J=7,2 Гц, 2H), 7,82 (д, J=7,2 Гц, 2H), 4,51-4,46 (м, 1H), 3,74 (дд, J=12,4, 7,8 Гц, 1H), 3,57 (дд, J=12,8, 5,5 Гц, 1H), 3,44 (дд, J=13,6, 7,3 Гц, 1H) 3,34-3,22 (м, 3H), 2,78-2,60 (м, 1H). ¹³C ЯМР (D₂ O) 164,1, 139,4, 122,9, 73,4, 51,4, 48,4, 44,3, 31,3. HRMS (MH ⁺) рассчитано для C₁₀H ₁₅N₂OS: 211,0900. Найдено 211,0908.

Пример получения 2.01

(3R,4S)-3-Гидрокси-4-(2-фенилэтил)пирролидингидрохлорид (49), схема 5

К суспензии бензилтрифенилфосфонийбромида (1,75 г, 4,97 ммоль) в безводном THF (10 мл) в атмосфере аргона при 0°C добавляли 1,6M BuLi в THF (2,33 мл, 3,73 ммоль) и перемешивали темно-красный раствор без охлаждения в течение 10 минут. После повторного охлаждения до 0°C добавляли альдегид 46 (335 мг, 1,56 ммоль) [G.B. Evans, R.H. Furneaux, A. Lewandowicz, V.L. Schramm, and P. C. Tyler, Second-Generation Transition State Analogues of Human Purine Nucleoside Phosphorylase, J. Med. Chem., 46 (2003) 5271-5276] в THF (5 мл) и перемешивали смесь при к.т. в течение 12 ч. Затем тушили реакционную смесь добавлением воды (1 мл) и экстрагировали дихлорметаном (100 мл). Органическую фазу промывали нас. водн. NaHCO₃ (15 мл), затем водой (15 мл), сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии с получением смеси цис/транс-изомеров (приблизительно 1:3) (3R,4S)-N-трет-бутоксикарбонил-3-гидрокси-4-(2-фенилэтенил)пирролидина (47) в виде сиропа (290 мг, 64%). ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): м.д.: транс: 7,28 (м, 5H), 6,49 (д, J=15,9 Гц, 1H), 6,03 (дд, J=15,9, 8,1 Гц, 1H), 4,11 (м, 1H), 3,67 (м, 2H), 3,32 (м, 2H), 2,83 (м, 1H), 1,46 (с, 9H); цис: 7,27 (м, 5H), 6,58 (д, J=11,6 Гц, 1H), 5,43 (дд, J=11,6 Гц, 10,0 Гц, 1H), 4,11 (м, 1H), 3,65 (м, 2H), 3,21,(м, 2H), 2,88 (м, 1H), 1,44 (с, 9H). К раствору промежуточного продукта 47 (290 мг, 1,00 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляли 10% Pd/C (250 мг) и перемешивали суспензию в атмосфере водорода в течение 12 ч. После фильтрации растворитель удаляли в вакууме с получением (3R,4S)-N-трет-бутоксикарбонил-3-гидрокси-4-(2-фенилэтил)пирролидина (48) в виде сиропа, 254 мг (87%). ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): м.д.: 7,10 (м, 5H), 4,00 (м, 1H), 3,47 (м, 2H), 3,07 (м, 2H), 2,67 (м, 2H), 2,04 (м, 1H), 1,83 (м, 1H), 1,54 (м, 1H), 1,45 (с, 9H). ¹³C (300 МГц, CDCl ₃): м.д. (заметьте, что некоторые пики раздваиваются вследствие медленной конверсии ротамеров): 155,17, 142,03, 128,83, 128,71, 126,37, 79,88, (74,94, 71,26), (53,17, 52,90), (49,90, 49,34), (46,11, 45,52), 34,41, 33,69, 28,91. К раствору промежуточного продукта 48 (254 мг, 0,87 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли 12н (конц.) HCl (4 мл) и перемешивали раствор при 40°C в течение 30 минут. После удаления растворителя в вакууме и азеотропной перегонки с толуолом получали неочищенное указанное в заголовке соединение 49, (3R,4S)-3-гидрокси-4-(2-фенилэтил)пирролидингидрохлорид, в виде твердого вещества (202 мг, 0,89 ммоль, 102%). ¹H ЯМР (300 МГц, MeOH-d₄): м.д.: 7,14 (м, 5H), 4,22 (м, 1H), 3,52 (дд, J=11,8, 7,4 Гц, 1H), 3,39 (дд, J=12,3, 4,9 Гц, 1H), 3,14 (дд, J=12,3, 2,8 Гц, 1H), 3,02 (дд, J=11,8 Гц, 1H), 2,71 (м, 2H), 2,20 (м, 1H), 1,84 (м, 1H), 1,62 (м, 1H). ¹³C ЯМР (300 МГц, MeOH-d₄): м.д.: 142,94, 129,93, 129,89, 127,56, 75,56, 52,90, 48,55, 47,28, 35,18, 34,44.

Схема 5

Пример получения 2.02

(3R,4S)-3-Гидрокси-4-пропилпирролидингидрохлорид (52)

Синтез указанного соединения осуществляли, следуя тому же общему пути, что и представленный на схеме 5 [см. пример получения 2.01]. К суспензии этилтрифенилфосфонийбромида (2,9 г, 6,93 ммоль) в безводном THF (15 мл) в атмосфере аргона при 0°C добавляли 1,6M BuLi в THF (4 мл, 6,40 ммоль) и перемешивали темно-красный раствор без охлаждения в течение 10 минут. После повторного охлаждения до 0°C добавляли альдегид 46 (580 мг, 2,69 ммоль) в THF (10 мл) и перемешивали смесь при к.т. в течение 12 ч. Затем гасили реакцию добавлением воды (1 мл) и экстрагировали дихлорметаном (100 мл). Органическую фазу промывали нас. водн. NaHCO₃ (15 мл), затем водой (15 мл), сушили (MgSO₄) и концентрировали в вакууме. Остаток подвергали хроматографии с получением (3R,4S)-N-трет-бутоксикарбонил-3-гидрокси-4-пропенилпирролидина (50) в виде светло-желтого сиропа (165 мг, 27%). К раствору промежуточного продукта 50 (165 мг, 0,73 ммоль) в этаноле (10 мл) добавляли 10% Pd/C (60 мг) и перемешивали суспензию в атмосфере водорода в течение 3 ч. После фильтрации растворитель удаляли в вакууме с получением (3R,4S)-N-трет-бутоксикарбонил-3-гидрокси-4-пропилпирролидина (51) в виде сиропа (172 мг, 102%). ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): м.д.: 3,98-3,96 (м, 1H), 3,61-3,57 (м, 3H), 3,22-3,18 (м, 1H), 3,10-3,01 (м, 1H), 2,03 (м, 1H), 1,45 (с, 9H), 1,41-1,31 (м, 2H), 1,24-1,12 (м, 1H), 0,94-0,89 (м, 3H). ¹³C ЯМР (300 МГц, CDCl₃): м.д. (заметьте, что некоторые пики раздваиваются вследствие медленной конверсии ротамеров): 155,20, 79,69, (75,53, 74,76), (53,10, 52,80), (49,94, 49,38), (46,19, 45,67), 34,04, 28,83, 21,27, 14,47. К раствору промежуточного продукта 51 (172 мг, 0,75 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли 12н (конц.) HCl (4 мл) и перемешивали раствор при 40°C в течение 30 минут. После удаления растворителя в вакууме и азеотропной перегонки с толуолом получали неочищенное указанное в заголовке соединение 52, (3R,4S)-3-гидрокси-4-пропилпирролидингидрохлорид, в виде сиропа (138 мг, 0,83 ммоль, 111%). ¹ H ЯМР (300 МГц, MeOH-d₄): м.д.: 4,20-4,16 (м, 1H), 3,59-3,52 (м, 1H), 3,44-3,39 (м, 1H), 3,19-3,14 (м, 1H), 3,05-2,99 (м, 1H), 2,23-2,17 (м, 1H), 1,55-1,28 (м, 4H), 0,98-0,94 (м, 3H). ¹³ C ЯМР (300 МГц, MeOH-d₄): м.д.: 75,65, 52,82, 50,30, 47,45, 34,69, 22,30, 14,78.

Пример получения 3.01

9-Деазааденин

6-Хлор-9-деазапурин (3 г, 19,5 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору аммиака в этаноле (30 мл). Полученную суспензию нагревали при 130°C в течение 16 ч в герметичной пробирке. Гомогенный раствор охлаждали, добавляли вспученный силикагель и концентрировали раствор в вакууме. Полученное твердое вещество помещали на колонку с силикагелем и элюировали метанолом/CH₂ Cl₂ (4:1 по объему) с получением 9-деазааденина в виде бледно-желтого твердого вещества (2,16 г, 80%). ¹³C ЯМР (d₄-MeOH) м.д.: 153,1, 149,9, 145,2, 131,3, 113,8, 101,6.

Пример получения 4.01

(3R,4R)-3-Гидрокси-4-метансульфонилоксипирролидин (53)

Раствор HCl в 1,4-диоксане (4M, 2 мл) добавляли к перемешанному раствору мезилата 30 (169 мг, 0,572 ммоль) в метаноле (3 мл). После перемешивание при к.т. в течение 12 ч растворители удаляли в вакууме с получением остатка, к которому добавляли метанол (×2), а затем D₂ O, и упаривали с получением указанного в заголовке соединения 53 (120 мг, 0,518 ммоль, 91%). ¹H ЯМР (D ₂O) 4,55-4,35 (м, 3H), 3,74 (дд, J=12,5, 8,4 Гц, 1H), 3,50 (дд, J=12,7, 5,3 Гц, 1H), 3,35-3,20 (м, 2H), 3,25 (с, 3H), 2,82-2,67 (м, 1H). ¹³C ЯМР (D₂ O) 71,3, 69,2, 52,0, 46,0, 45,3, 36,9. HRMS (MH ⁺) рассчитано для C₆H ₁₄NO₄S: 196,0638. Найдено 196,0648.

Хотя настоящее изобретение было описано с помощью примеров, следует учесть, что разновидности и модификации могут быть сделаны без выхода за пределы объема настоящего изобретения. Кроме того, если известно о существовании эквивалентов конкретных признаков, такие эквиваленты включены в объем изобретения, как если бы они конкретно упоминались в заявке.

ПРОМЫШЛЕННАЯ ПРИМЕНИМОСТЬ

Настоящее изобретение относится к удобному пути синтеза соединений, которые являются ингибиторами PNP, PPRT, MTAN, MTAP и/или NH. Соединения могут быть полезны при лечении заболеваний, при которых ингибирование PNP, PPRT, MTAN, MTAP и/или NH является желательным. Такие заболевания включают рак, бактериальную инфекцию, протозойную инфекцию или опосредуемые T-клетками заболевания.