ранозаживляющая губка

Формула изобретения

Ранозаживляющая коллагеновая губка с 5%-ным содержанием экстракта черных листьев бадана, полученная сублимацией в течение 28-32 ч смеси 2%-ного раствора коллагена, очищенной воды и сухого экстракта черных листьев бадана, досушиванием полученных пластин в течение 8-10 ч и кондиционированием в течение 24 ч при комнатной температуре.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине и химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию лекарственных препаратов, используемых в качестве наружных средств при лечении ран.

Проблема заживления ран относится к числу важнейших разделов медицины, не утративших своего значения и в настоящее время. Комплексное лечение раневых повреждений включает, главным образом, хирургические и фармакотерапевтические методы. Для местного лечения раневых повреждений актуально применение комплексных препаратов, обладающих антимикробным, противовоспалительным, иммуномодулирующим, ранозаживляющим действием. Из большого числа имеющихся средств комбинированным действием обладают биологически активные вещества растительного происхождения. Проблема разработки лекарственных средств наружного применения на основе веществ растительного происхождения является актуальной.

В практической хирургии широко распространены раневые повязки в форме пленок, губок на основе полимеров, которые удобны при использовании, легко высвобождают действующие вещества и легко удаляются при снятии повязки. В этом отношении привлекательным является биополимер коллаген, обладающий хорошими формообразующими свойствами, резорбируется биожидкостями и клетками организма [Коллагенопластика в медицине. / Под ред. Кованова В.В., Сыченикова И.А. - М.: Мед., 1978. - 256 с.; Коллагеновая губка «Цитотимакол» - стимулятор заживления ран. / Малинин В.В., Бураков М.А., Сидорова Н.Д. и др. // Хим. фармацев. журнал. - 1998. - №11. - С.54-56].

Задача, на решение которой направлено заявляемое изобретение, заключается в создании аппликационной коллагеновой губки, обладающей ранозаживляющим действием. Поставленная задача решается тем, что заявляемая ранозаживляющая губка в качестве лекарственного средства содержит ранее полученный сухой экстракт из черных листьев бадана толстолистного (условное название - «бадатон»). [Лубсандоржиева П.Б., Цыренжапова О.Д., Николаев С.М., Николаева Г.Г. Способ получения суммы экстрактивных веществ, обладающих адаптогенной активностью: Патент РФ 2076727. Заявка №93028222/14. Заявл. 02.06.93. опубл. 10.04.97. Бюл. №10].

Технический результат, получаемый при осуществлении изобретения, выражается в расширении ассортимента высокоэффективных и безвредных лекарственных средств для лечения раневых повреждений.

Для достижения указанного технического результата бадатон смешивают с разведенным водой (1:1) 2%-ным раствором коллагена в гомогенизаторе до однородной массы, сушат в аппарате для сублимационной сушки при температуре минус 20-25°С при вакууме 16-17 Па в течение 30 часов, досушивают в течение 10 часов, затем для кондиционирования выдерживают при комнатной температуре в течение 24 часов. Полученные пластины высокопористой коллагеновой губки, условно названной - «баданопласт», разрезают на ровные прямоугольные пластины размером 30×30 мм. В полученных коллагеновых губках определяли влажность и рН водного раствора. Определение рН пластин «баданопласта» проведено потенциометрическим методом по ГФ XI изд. [Государственная Фармакопея СССР. Общие методы анализа. - 11 изд. - Вып.1. М.: Мед., 1989. стр.113. (ГФ XI изд.)], влажность весовым методом [ГФ XI изд. вып.1., стр.176].

Для определения рН пластины измельчали ножницами, брали навески 0,5 г, заливали 50 мл воды дистиллированной, выдерживали в течение 15 мин при периодическом перемешивании. рН раствора измеряют на иономере универсальном И-160.

Определение влажности пластин «баданопласт»: около 0,5 г (точная навеска) пластин «баданопласта» помещают в бюкс и высушивают в вакуум-сушильном шкафу в течение 3 часов при температуре 60±1°С и остаточном давлении, не превышающем 0,667 кПа (5 мм рт.ст.). Расчет массовой доли влаги в процентах проводят по разности масс до и после высушивания. Результаты анализов приведены в табл.1.

Вышеописанным способом были получены 7 составов, которые отличались друг от друга количественным содержанием бадатона (минимальное, среднее, максимальное). Полученная коллагеновая губка названа условно «баданопласт». Данные приведены в таблице 1.

Таблица 1 Физико-химические данные полученных пластин «баданопласт»
Номер состава	Внешний вид пластин	Содержание экстракта бадана в пластине, %	рН пластин	Массовая доля влаги, %
1	Пластины светло-серого цвета	0,3	4,32	10,48
2	Пластины светло-серого цвета	0,5	4,21	10,50
3	Пластины светло-серого цвета	0,6	4,43	9,19
4	Пластины светло-серого цвета	1,5	4,15	9,95
5	Пластины серого цвета	4,0	4,13	11,0
6	Пластины серого цвета	5,0	4,38	10,70
7	Ломкие, серого цвета пластины	10,0	4,54	10,80

При приготовлении коллагеновой губки с содержанием бадатона выше 5% (состав №7, табл.1) получаются хрупкие, ломкие пластины. При кондиционировании коллагеновой губки с 10%-ным содержанием бадатона из пор коллагена высыпается порошок бадатона. Таким образом, высокое содержание бадатона в коллагеновой губке «баданопласт» (состав №7. табл.1) не позволяет получить средство постоянного состава.

Для оценки фармакологической активности подобраны пластины «баданопласта» - составы №1, 2 (Табл.1) с минимальным содержанием бадатона (0,5%; 1,5%) и состав №5 со средним содержанием бадатона (5%). Фармакологическое исследование их влияния на заживление плоскостных кожно-мышечных ран показало наибольшую эффективность состава №5 с 5%-ным содержанием бадатона. Ниже приведены 3 примера получения «баданопласта» с 5%-ным содержанием бадатона.

Пример 1. В гомогенизатор загружали 250 мл воды для инъекций, 250 г вязкого бесцветного 2% раствора коллагена, 0,25 г сухого экстракта черных листьев бадана толстолистного. Полученную смесь перемешивали до однородной массы в аппарате «Erweka» (производства Германии) при скорости мешалки - 336 об/мин при температуре 30°С в течение 5 мин. Полученную однородную композицию коллагена с экстрактом бадана в специальной емкости переносили для сублимационной сушки в аппарат ТГ-5 (производства Германии). Массу разливали в кассету из нержавеющей стали размером 250×250 мм, высота столба жидкости не превышала 7 мм.

Кассету с разлитой массой устанавливали на охлажденные до минус 20-25°С полки сублиматора. После заморозки продукта до минус 20°С камера вакуумировалась до равновесной рабочему давлению 16 Па (минус 40°С). Далее устанавливалось стандартное течение процесса, период собственно сублимации. После 30 ч сушки температура материала совпадала с температурой полки, при которой препарат досушивали еще в течение 9 часов. Показания вакуума колебались в пределах 16,0-17,7 Па. Температура досушивания не превышала 28°С.

После выгрузки из сублимационной машины высушенные листы пластин «баданопласта» выдерживали в течение 24 часов при относительной влажности 70% и температуре 18-24°С в чистом помещении с целью кондиционирования. После кондиционирования пластины - сухие, гладкие, высокопористые светло-серого цвета с жемчужным оттенком. Влажность полученных пластин - 10,70%, рН - 4,38. Листы «баданопласта» разрезали на пластины размером 30×30 мм, герметично упаковывали в полимерные пакеты на пакетоделательной машине ПДМ-1.

Изучали влияние «баданопласта» на заживление плоскостных кожно-мышечных ран. Эксперименты проведены на крысах линии Вистар обоего пола массой 160-180 г. Модель плоскостной кожно-мышечной раны воспроизводили в асептических условиях по общепринятому методу [Пономарева-Астраханцева Л.З. Метод экспериментального получения ран и язв. // Воспроизведение заболеваний у животных для экспериментально-терапевтических исследований. - М., 1954. - С.66-73]. Животным опытной группы тотчас после операции производили аппликацию 0,5; 1,5 и 5% «баданопластом» и фиксировали его с помощью лейкопластыря. Замену испытуемого средства осуществляли ежедневно в утренние часы на протяжении всего эксперимента. У крыс контрольной группы раневая поверхность оставалась открытой в течение всего периода наблюдения. В качестве дополнительного контроля использовали коллагеновую губку (комбутек), в качестве препарата сравнения использовали пористый препарат альгипор, которые накладывали аналогичным образом. Коллагеновая губка (комбутек) представляет собой губчатое покрытие для ран, полученный из растворимого коллагена животного происхождения. Препарат нетоксичен, не вызывает раздражения тканей, не имеет антигенной активности, обладает антисептическими свойствами благодаря присадке антисептиков (Хилькин А.М., Шретер А.Б., Истранов Л.П., Леменев В.Л. Коллаген и его применение в медицине. - М.: Медицина. - 1976. - 208 с.; Сащикова В.Г., Васильев М.П., Пухова З.И. Применение волокнистого растворимого препарата коллагена при лечении трофических язв нижних конечностей // Вестник хирургии. - 1992. - №4. - С.71-75). Альгипор представляет собой пористый препарат, созданный на основе альгиновой кислоты. Альгипор обладает стимулирующим действием на репаративные процессы и, в первую очередь, на развитие соединительной ткани; также имеет антибактериальные свойства за счет присадок фурацилина и фурагина (Седларик К.М. Альгинаты для лечения ран // Хирургия. - 1993. - №1. - С.62-65). С целью оценки динамики заживления ран на 3, 7, 14, 21 и 28 сутки определяли площадь раневой поверхности планиметрическим методом (табл.2). На 3, 7 и 14 сутки проводили цитологическое исследование ран методом «раневых отпечатков» (табл.3) и на 21 сутки - гистологическое исследование ран.

Как следует из данных, приведенных в табл.2, применение «баданопласта» во всех исследуемых концентрациях оказывало ранозаживляющее действие. При этом наиболее выраженной ранозаживляющей активностью обладал 5% «баданопласт». Так, на 3 сутки эксперимента размер кожного дефекта у животных опытных групп на фоне применения 0,5 и 1,5% «баданопластом», а также коллагеновой губки и альгипора статистически не отличался от такового у животных контрольной группы, тогда как при использовании 5% «баданопласта» к этому сроку площадь повреждения была в среднем на 22% меньше по сравнению с контролем.

На 7, 14 и 21 сутки исследования у животных опытной группы на фоне применения 5% «баданопласта» отмечалось уменьшение площади раневого дефекта соответственно на 30, 49 и 82% по сравнению с аналогичными показателями у животных контрольной группы. При этом 0,5 и 1,5% «баданопласт», так же как коллагеновая губка и альгипор, в указанные сроки оказывали менее выраженное ранозаживляющее действие. В частности показано, что статистически значимый ранозаживляющий эффект у препарата сравнения альгипора проявляется на 7 сутки, а у коллагеновой губки - на 14 сутки эксперимента. На 28 сутки эксперимента у животных на фоне применения 5% «баданопласта» отмечалось полное закрытие раневого дефекта кожи, тогда как у крыс контрольной группы, а также при использовании коллагеновой губки, 0,5 и 1,5% «баданопласта» и альгипора оставалось соответственно в среднем 9,0; 4,7; 5,0; 4,3; и 4,5% незажившей раневой поверхности.

Таблица 2 Влияние «баданопласта» на динамику изменения площади плоскостных кожно-мышечных ран у белых крыс
Сроки опыта, сутки	Площадь раны, мм 2
	Контрольная группа	Коллагеновая губка	Баданопласт 0,5%	Баданопласт 1,5%	Баданопласт 5,0%	Альгипор
1	342,8±17,2	341,3±20,2	340,6±15,4	342,7±12,6	340,5±14,6	341,3±18,2
3	315,0±15,4	302,4±15,5	294,2±14,2	293,3±16,6	245,7±12,7*	296,3±10,3
7	168,2±11,1	144,6±10,3	143,3±12,1	131,2±11,2	117,6±9,7*	134,2±10,3*
14	100,5±9,2	70,5±6,4*	70,9±5,7*	65,7±3,6*	51,5±4,3*	64,6±4,5*
21	64,3±3,3	43,5±3,6*	42,1±2,2*	24,7±1,9*	11,5±1,8*	21,4±2,7*
28	31,1±1,8	16,2±1,7*	17,1±1,3*	14,8±1,1*	-	15,6±0,9*
Примечание: * - здесь и далее значения, достоверно отличающиеся от данных контрольной группы при Р 0,05.

Таблица 3 Влияние 5% «баданопласта» на клеточный состав «раневых отпечатков» кожно-мышечных ран у белых крыс.
Показатели	Группы животных	Сроки опыта, сутки
		3	7	14
Лейкоциты / из них разрушенные	Контрольная	++++/+++	+++/++	++/+
	«Баданопласт»	++++/++	++/+	++/-
	Альгипор	++++/++	+++/+-	++/+
Макрофаги / фагоцитирующие	Контрольная	-/-	+/+	++/+
	«Баданопласт»	+/+	++/+	++/++
	Альгипор	-/-	+/+	++/++
Фибробласты	Контрольная		-	+
	«Баданопласт»	-	++	+++
	Альгипор	-	+	++
Примечание: (-) отсутствие роста бактерий, (+) выраженное бактериостатическое действие, (++) бактериостатическое действие, (+++) слабое бактериостатическое действие, (++++) отсутствие антибактериального действия.

Данные цитологического исследования, приведенные в таблице 3, свидетельствуют, что применение 5% «баданопласта» оказывает положительное влияние на клеточную структуру раневой поверхности. В частности, на 3 сутки эксперимента в «раневых отпечатках» животных контрольной и опытных групп отмечалось большое количество нейтрофильных лейкоцитов. При этом в группе животных на фоне применения 5% «баданопласта» и альгипора количество деструктивных форм лейкоцитов было в среднем на 20% меньше, чем в контроле. Отмечалось также появление единичных фагоцитирующих макрофагов. На 7 сутки эксперимента в «раневых отпечатках» у крыс контрольной и опытных групп отмечалось уменьшение числа нейтрофильных лейкоцитов и появление макрофагов. При этом на фоне применения 5% «баданопласта» количество макрофагов было в среднем в 2 раза больше, чем в контроле, также отмечалось появление фибробластов. На 14 сутки у животных опытной группы с применением 5% «баданопласта» в «раневом отпечатке» преобладали фибробласты и фиброциты; фагоцитоз был более выражен, чем в контроле; свободно лежащие микробы не определялись.

Результаты гистологического исследования, проведенные на 21 сутки эксперимента, показали, что у животных контрольной группы отмечалось разрастание эпителия из базального эпителиального слоя клеток в виде пальцевидных врастаний вглубь. Эпителий был утолщен, раневая поверхность не полностью закрыта эпителиальным пластом. Во всех случаях дефект кожи у крыс контрольной группы заполнен грануляционной тканью, состоявшей из фибробластов различной степени зрелости и коллагеновых волокон, расположенных хаотично. У животных на фоне использования 5% «баданопласта» отмечалось заполнение дефекта кожи зрелой грануляционной тканью, коллагеновые волокна расположены преимущественно параллельными пучками, среди которых находятся зрелые фиброциты. Раневая поверхность полностью эпителизирована; в верхних слоях дермы отмечены зачатки волосяных фолликулов. При гистологическом исследовании ран на фоне использования препарата сравнения альгипора отмечено заполнение дефекта кожи плотной молодой грануляционной тканью, содержащей беспорядочно расположенные коллагеновые волокна, молодые фибробласты. Эпителизация краевая, раневой дефект эпителизирован не полностью. Воспалительные изменения вокруг раны незначительные.

Таким образом, «баданопласт» с 5%-ным содержанием бадатона оказывает наиболее выраженное ранозаживляющее действие.

Пример 2. В гомогенизатор загружали 250 мл воды для инъекций, 250 г вязкого бесцветного 2% раствора коллагена, 0,25 г сухого экстракта черных листьев бадана толстолистного. Полученную смесь перемешивали до однородной массы в аппарате «Erweka» (производства Германии) при скорости мешалки 336 об/мин при температуре 30°С в течение 5 мин. Полученную однородную композицию коллагена с экстрактом бадана в специальной емкости переносили для сублимационной сушки в аппарат ТГ-5 (производства Германии). Массу разливали в кассету из нержавеющей стали размером 250×250 мм, высота столба жидкости составила 9 мм.

Кассету с разлитой массой устанавливали на охлажденные до минус 20-25°С полки сублиматора. После заморозки продукта до минус 20°С камера вакуумировалась до равновесной рабочему давлению 16 па (минус 40°С). Далее устанавливалось стандартное течение процесса, период собственно сублимации. Сублимацию проводили в течение 32 ч, досушивали в течение 8 ч при температуре 25±3°С при вакууме 16-17 Па. После выгрузки из сублимационной машины высушенные листы пластин «баданопласта» выдерживали в течение 24 часов при относительной влажности 70% и температуре 18-24°С в чистом помещении с целью кондиционирования. После кондиционирования получали сухие, гладкие, высокопористые пластины. Влажность полученных пластин 10,20%, рН 4,42. Листы «баданопласта» разрезали на пластины размером 30×30 мм, герметично упаковывали в полимерные пакеты на пакетоделательной машине ПДМ-1.

Влияние «баданопласта» на заживление инфицированных кожно-мышечных ран.

Эксперименты проведены на крысах линии Вистар обоего пола массой 160-180 г. Модель инфицированной раны воспроизводили путем орошения плоскостной кожно-мышечной раны 1 мл суспензии штамма Staphylococcus aureus 209 Р с титром 1 млрд/мл [Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению лекарственных препаратов для местного лечения гнойных ран. - М., 1989. - 45 с.]. Аппликацию на рану 5% «баданопластом» производили начиная с первых суток и затем ежедневно на протяжении всего эксперимента. В качестве препарата сравнения использовали альгипор по аналогичной схеме. В качестве контроля служили животные с «естественным заживлением» раны. С целью оценки динамики заживления раневого процесса на 3, 7, 14, 21 и 28 сутки определяли площадь ран планиметрическим методом, а также проводили бактериологическое, цитологическое и гистологическое исследование раны. Полученные данные приведены в таблицах 4, 5.

Таблица 4 Влияние 5% «баданопласта» на площадь инфицированных кожно-мышечных ран у белых крыс.
Сроки опыта, сутки	Площадь раны, мм2
	Контрольная группа	«Баданопласт»	Альгипор
3	376,2±7,29	368,7±7,05	365,8±17,15
7	317,0±9,02	291,6±15,92	304,0±21,60
14	166,6±11,91	114,9±8,78*	140,8±16,60
21	57,6±4,65	10,4±8,78*	30,0±3,82*
28	24,5±2,10	-	11,4±1,1*

Как следует из данных, приведенных в таблице 4, применение 5% «баданопласта» способствовало ускорению заживления инфицированных кожно-мышечных ран, о чем свидетельствует уменьшение площади раневого дефекта на 3, 7, 14 и 21 сутки эксперимента соответственно на 2, 8, 31, 82% по сравнению с аналогичными показателями крыс контрольной группы. На 28 сутки эксперимента на фоне применения «баданопласта» отмечалась полная эпителизация раны, тогда как у крыс контрольной группы сохранялся кожный дефект. При этом препарат сравнения альгипор оказывал менее выраженное ранозаживляющее действие.

Бактериологическое исследование показало, что в биоптате ран крыс опытной группы на 3 сутки исследования бактериальная обсемененность раны составляла 6,50×10⁵ , тогда как у крыс контрольной группы к указанному сроку уровень бактериальной обсемененности раны составил 8,04×10 ⁷. На 7 сутки опыта на фоне применения «баданопласта» количество бактерий снижалось до 1,30×10³, при этом у животных контрольной группы уровень инфицирования к указанному сроку наблюдения составил в среднем 3,50×10 ⁶. На 14 сутки исследования уровень бактериальной обсемененности ран животных опытной и контрольной группы составил 9,60×10 ¹ и 9,28×10⁵ соответственно. На 21 сутки бактериальная обсемененность ран животных контрольной группы была 8,50×10³; у животных опытной группы рост бактерий не определялся. При этом установлено, что антибактериальная активность «баданопласта» превосходит таковую у препарата сравнения. Так, уровень бактериальной обсемененности ран животных на фоне применения альгипора на 3, 7, 14, 21 сутки составил соответственно 1,81×10⁶, 5,58×10⁵, 6,20×10 ⁴, 4,04×10².

Таблица 5 Влияние 5% «баданопласта» на клеточный состав «раневых отпечатков» инфицированных ран у белых крыс
Показатели	Группы животных	Сроки опыта, сутки
		3	7	14
Лейкоциты / из них разрушенные	Контрольная	++++/+++	+++/+++	+++/++
	«Баданопласт»	+++/++	+++/+	++/-
	Альгипор	++++/+++	+++/++	++/+
Макрофаги / фагоцитирующие	Контрольная	-/-	+/-	++/+
	«Баданопласт»	+/+	++/++	++/+
	Альгипор	-/-	+/+	++/++
Фибробласты	Контрольная	-	-	+
	«Баданопласт»	-	+	+++
	Альгипор	-	-	++
Примечание: (-) отсутствие роста бактерий, (+) выраженное бактериостатическое действие, (++) бактериостатическое действие, (+++) слабое бактериостатическое действие, (++++) отсутствие антибактериального действия.

Установлено, что на 3 сутки эксперимента в «раневых отпечатках» крыс контрольной и опытной групп отмечается значительное количество лейкоцитов. При этом в опытной группе разрушенных лейкоцитов было меньше, чем в контроле, а также отмечалось появление единичных макрофагов. Аналогичная тенденция наблюдалась и на 7 сутки эксперимента: в «раневых отпечатках» крыс опытной группы разрушенных лейкоцитов было меньше, чем в контроле, а также отмечалось большее число фагоцитирующих макрофагов и появление фибробластов. На 14 сутки на фоне применения «баданопласта» разрушенных лейкоцитов на наблюдалось; количество макрофагов уменьшалось; вместе с этим в «раневых отпечатках» отмечено преобладание фибробластов.

Гистологическое исследование показало, что применение 5% «баданопласта» приводило к формированию зрелой грануляционной ткани и полной эпителизации раны у животных опытной группы на 21-28 сутки. При этом в контрольной группе на 28 сутки полной эпителизации не отмечалось ни в одном случае, дефект кожи заполнен грануляционной тканью, тяжи коллагеновых волокон расположены рыхло.

Пример 3. В гомогенизатор загружали 250 мл воды для инъекций, 250 г вязкого бесцветного 2% раствора коллагена, 0,25 г сухого экстракта черных листьев бадана толстолистного. Полученную смесь перемешивали до однородной массы в аппарате «Erweka» (производства Германии) при скорости мешалки 336 об/мин при температуре 30°С в течение 10 мин. Полученную однородную композицию коллагена с экстрактом бадана в специальной емкости переносили для сублимационной сушки в аппарат ТГ-5 (производства Германии). Массу разливали в кассету из нержавеющей стали размером 250×250 мм, высота столба жидкости не превышала 9 мм.

Кассету с разлитой массой устанавливали на охлажденные до минус 20-25°С полки сублиматора. После заморозки продукта до минус 20°С камера вакуумировалась до равновесной рабочему давлению 16 Па (минус 40°С), далее устанавливалось стандартное течение процесса, период собственно сублимации. После 28 ч сушки пластины досушивали еще в течение 10 часов. Показания вакуума колебались в пределах 16-17 Па. Температура досушивания не превышала 25±3°С.

После выгрузки из сублимационной машины высушенные листы пластин «баданопласта» выдерживали в течение 24 часов при относительной влажности 70% и температуре 18-24°С в чистом помещении с целью кондиционирования. После кондиционирования получали сухие, гладкие, высокопористые пластины. Влажность полученных пластин 16,50%, рН 4,10.

Листы «баданопласта» разрезали на пластины размером 30×30 мм, герметично упаковывали в полимерные пакеты на пакетоделательной машине ПДМ-1.

Клиническое изучение «баданопласта» в сочетании с флебосклеротерапией при местном лечении трофических язв нижних конечностей проведено на базе хирургического отделения Республиканской клинической больницы им. Н.А.Семашко МЗ Республики Бурятия (г.Улан-Удэ). Было обследовано 89 больных с трофическими язвами, в числе которых 72 (80,9%) женщин и 17 (19,1%) мужчин. У 51 (57,3%) больного причиной возникновения трофических язв явилась посттромбофлебическая болезнь, после перенесенного острого тромбофлебита глубоких вен нижних конечностей. У 38 (42,7%) трофические язвы сформировались на фоне варикозной болезни нижних конечностей. У 15 (16,7) пациентов в анамнезе выполнялись флебэктомии по поводу варикозного расширения вен нижних конечностей. У 67 (75,3%) больных площадь раневой поверхности достигала 40 см²; у 9 (10,1%) больных - до 100 см² и язвы площадью более 100 см² встречались у 13 больных. У 21 (23,4%) пациента трофические язвы были на левой нижней конечности, у 16 (17,9%) - на правой и у 52 (58,7%) на обеих нижних конечностях. Сопутствующие заболевания выявлены у 76,4% больных; в том числе: ишемическая болезнь сердца - 33,7%; гипертоническая болезнь - 23,5%; ожирение - 44,1%; сахарный диабет - 10,2%; хронические заболевания дыхательной системы - 5,7%; облитерирующие заболевания сосудов нижних конечностей - 4,4%, заболевания почек - 2,8% больных.

Длительность заболевания составляла от 3 мес до 30 лет и более. 56,2% больных находились в трудоспособном возрасте (до 60 лет). Все больные были разделены на 3 группы:

1 группа - контрольная (15 больных), лечение проводили общепринятыми методами с применением медикаментозных средств и повязки с фурацилином. Язвенную поверхность обрабатывали 3% раствором перекиси водорода. При наличии гнойно-некротических масс использовали ируксол, водный раствор хлоргексидина, борную кислоту и затем накладывали повязку с фурацилином, в том числе повязку Унна. При появлении грануляций (начала очаговой эпителизации) последнюю заменяли на мазевые повязки - с солкосерилом, облепиховым или шиповниковым маслом.

2 группа - сравнения (29 больных), лечение проводили куриозином без склерозирующей терапии. Рану обрабатывали физиологическим раствором и антисептиком, после этого наносили 0,2% раствор куриозина из расчета 1 капля на 1 см² раны. После двухминутной экспозиции поверх марлевой салфетки накладывали пергаментную бумагу и выполняли бинтование конечности эластическим бинтом. Перевязку производили 1 раз в день.

3 группа - основная (45 больных), получали лечение в виде сочетания флебосклеротерапии с аппликацией 5% «баданопластом». Рану обрабатывали физиологическим раствором. Из пластины «баданопласта» вырезали фрагменты из расчета покрытия раны на две трети ее площади. После этого фрагменты «баданопласта» укладывали на рану в шахматном порядке, сверху накладывали абсорбционную повязку.

Для проведения флебосклеротерапии использовали 3% раствор тромбовара из расчета 2,0 мл на один сеанс (на одну ногу). Склерозирование начинали с вен, находящихся в области трофической язвы или расположенных в трофически измененных тканях, которые определяли визуально и пальпаторно. Для инъекции использовали инсулиновые шприцы, при появлении крови в шприце кончик иглы плотно прижимали к стенке вены и медленно вводили склерозант. После извлечения иглы из вены место пункции придавливали марлевым шариком и туго бинтовали эластическим бинтом. За 1 сеанс проводили 3-4 инъекции в одну голень. Далее снимали бинт и накладывали эластичный компрессионный бандаж (конечность бинтуют от стопы до коленного сустава). Если у больного имелся отек тканей, индурация, гиперпигментация, отсутствовали варикозно расширенные вены вследствие отека или лимфостаза, то рядом с трофической язвой выполняли блокаду 2% лидокаином в объеме 5,0 мл. Как правило, после 5-6 блокад отек значительно уменьшался или полностью исчезал, при этом отчетливо вырисовывалась конфигурация вен, проходящих около трофических расстройств голени, что позволяло выполнить флебосклеротерапию. Если при проведении блокады в игле появлялась кровь, то в это же место вводили 3% тромбовар в объеме 0,5 мл и проводили эластическую компрессию голени. При технически правильно выполненной склеротерапии некроза подкожно-жировой клетчатки в области введения склерозанта не наблюдалось. Число сеансов флебосклеротерапии зависело от степени трофических изменений тканей, размера язв, количества варикозно расширенных вен, характера варикоза вен (рассыпного или магистрального) и соответствовало от 3 до 9. Пункционную терапию заканчивали после достижения облитерации всех варикозно расширенных вен, расположенных в трофически измененных тканях. При оценке эффективности лечения в первую очередь учитывали клиническое течение заболевания: уменьшение или исчезновение болей и отека в нижней конечности, темпы очищения язвенного поражения, сроки появления грануляций и эпителизации язвы. Полученные данные приведены в таблице 6.

Как следует из данных, приведенных в табл.6, у больных, получавших базисную терапию (контрольная группа), уменьшение выраженности симптомов болезни (боль, гиперемия, отек и др.) отмечалось на 13-16 сутки, очищение язвенной поверхности и появление грануляций - на 19 сутки, а частичную эпителизацию (в среднем 70-80% язвенного дефекта) наблюдали на 39-40 сутки лечения. У больных группы сравнения на фоне лечения язвенных дефектов куриозином появление признаков грануляции отмечалось на 10 сутки, частичная эпителизация (на 70-80%) наступала на 18-20 сутки лечения.

Таблица 6 Влияние комплексного применения флебосклеротерапии и «баданопласта» на клинические показатели больных с трофическими язвами
Показатели	Группы больных
	Контрольная (стандартная терапия)	Сравнения (куриозин)	Основная (флебосклеротерапия + «баданопласт»)
Сроки исчезновения болей, сутки	13,0±1,6	8,1±0,8	4,1±0,9*
Сроки исчезновения отека, сутки	16,0±3,0	6,0±0,7	4,1±1,8*
Сроки появления грануляции, сутки	19,1±0,8	9,3±1,4	7,5±1,3*
Сроки заживления язв, сутки	39,4±1,1	18,2±1,2	15,6±1,3*

У больных 3 группы, получавших комплексную терапию в виде сочетания флебосклеротерапии и «баданопласта», на 4-5 день после начала лечения улучшалось самочувствие, уменьшались болевые ощущения в области патологического очага, отмечалась тенденция к уменьшению отечности, гиперемии и воспалительной инфильтрации по периферии язвенного поражения. К исходу 5-12 дня от начала лечения у больных этой группы раневая поверхность постепенно очищалась от некротических тканей, появлялись здоровые сочные грануляции, резко стихали воспалительные явления вокруг язв, а по периферии язвенной поверхности появлялся бледно-розовый венчик молодой эпителиальной ткани. По истечении двухнедельного срока лечения поверхность язвы полностью покрывалась эпителием.

Одним из важных критериев эффективности любого метода лечения является процент заживления трофических язв на госпитальном этапе. При сочетанном лечении трофических язв флебосклеротерапией и «баданопластом» уменьшение площади язвенных дефектов через 3, 5 и 7 суток уменьшалась соответственно на 19, 61 и 89% по сравнению с таковой до лечения. При этом у больных группы сравнения, получавших лечение куриозином, площадь язв в указанные сроки была соответственно меньше на 7, 26 и 45%. В контрольной группе больных значительного уменьшения площади язвенных дефектов в эти сроки не наблюдали.

Было также проведено цитологическое исследование «отпечатков» с поверхности трофических язв и гистологическое изучение биоптатов из трофических язв до лечения, а также на 7, 14 и 21 сутки от начала лечения.

Цитограмма мазков больных до лечения характеризовалась нейтрофилами (89,3%), причем большинство из них (91,2%) находились в состоянии распада. При морфологическом исследовании было обнаружено, что в дне и краях трофических язв преобладают некротические массы и фиброзно-гнойный экссудат. Грануляционная ткань была с выраженными структурными изменениями, характеризующихся наличием участков грануляционной ткани с рубцовыми включениями. Отмечались существенные микроциркуляторные нарушения в виде стаза, сладжа эритроцитов, микротромбозов, инфильтративно-продуктивного эндоваскулита, фибринозного некроза стенок сосудов, диапедеза эритроцитов и лейкодиапедеза. Отмечался также выраженный отек и лимфостаз ткани, нейтрофильная инфильтрация. Реакция макрофагов и тучных клеток была резко угнетена.

В контрольной группе больных, получавших стандартную терапию, цитологическое изучение мазков раневого отделяемого свидетельствовало о незначительном увеличении макрофагов и фибробластов только на 15-21 сутки, хотя воспалительная реакция оставалась выраженной (81,7±3,09 нейтрофилов в мазке). Только к 21 суткам появлялась очаговая типичная грануляционная ткань, уменьшался некроз, отек и воспалительная инфильтрация тканей, появлялась пролиферативная реакция. При этом процесс раневого заживления был замедлен, микроциркуляторные нарушения и воспалительный процесс оставались выраженными.

Цитологическое исследование больных группы сравнения показало, что под влиянием куриозина экссудат значительно быстрее очищался от дистрофически измененных и некротизированных нейтрофилов, в нем быстро, начиная с 5 суток, происходило нарастание числа незрелых мононуклеарных элементов и макрофагов, усиление фагоцитоза микробов и детрита, увеличение фибропластических элементов, а с 14 суток и эпителиальных клеток. Морфологические исследования показали, что активация репаративных процессов происходила на 7 сутки лечения, о чем свидетельствует пролиферация фибробластов, появление грануляционной ткани и следов эпителизации. При этом отмечалось уменьшение выраженности воспалительной реакции. К 14 суткам лечения грануляционная ткань заполняла тканевой дефект, а к 21 суткам отмечался бурный рост эпителиальных клеток.

У больных третьей группы, получавших сочетанную терапию в виде флебосклеротерапии и аппликаций «баданопластом», отмечено существенное ускорение репаративных процессов. В частности, у больных этой группы отмечалось быстрое очищение язвенной поверхности от некротических масс и фиброзно-гнойного экссудата, раннее появление грануляционной ткани типичной структуры и ее созревание, рубцевание, эпителизация и закрытие тканевого дефекта. Цитологическое исследование показало, что у больных этой группы на 7 сутки от начала лечения отмечается существенная активация фагоцитоза бактерий и детрита нейтрофилами и макрофагами; нормализация микроциркуляции, уменьшение выраженности отека тканей и других явлений воспалительного процесса.

Учитывая большую опасность развития гнойных осложнений у больных с трофическими язвами, на 7 сутки лечения у 30 больных разных групп были взяты пробы выделений из язв для бактериологического исследования (табл.7).

Таблица 7 Частота выделения микроорганизмов из трофических язв до лечения и через 7 суток от начала лечения
Вид микроорганизма	Частота выделения микроорганизмов, %
	До лечения	Через 7 суток
		Контрольная (стандартная терапия)	Сравнения (куриозин)	Основная (флебосклеротерапия + «баданопласт»)
Staphylococcus aureus	44,2	33,6	21,1	17,2
Pseudomonas aerugenosae	31,8	20,2	10,1	5,6
Proteus vulgaris	26,3	10,4	5,6	-
Streptococcus faecalis	19,2	2,2	1,9	-
Escherichia coli	13,3	12,3	3,4	1,3
Другие	6,1	5,6	2,9	1,1

Как следует из данных, приведенных в таблице 7, в мазках трофических язв, полученных до начала лечения, отмечалось выраженное бактериальное инфицирование, состоящее в основном из кокковой и палочковой микрофлоры. При проведении стандартной терапии (контрольная группа) на 7 сутки отмечалось незначительное снижение микробной контаминации, частота выделения указанных штаммов микроорганизмов оставалась достаточно высокой. Бактериологическое исследования мазков группы сравнения показало, что лечение куриозином способствует уменьшению инфицированности язвенной поверхности, однако, как видно из приведенной таблицы, у больных этой группы высевались все исследованные патогенные микроорганизмы. Более выраженное антибактериальное действие оказывало сочетанное применение склеротерапии и «баданопласта», о чем свидетельствует существенное изменение микробного фона у больных этой группы. В частности, микробиологическое исследование «отпечатков» трофических язв показало, что через 7 суток после начала лечения отмечается полное очищение язвенной поверхности от таких бактерий как: Proteus vulgaris и Streptococcus faecalis. Частота высевания других исследованных микроорганизмов также была существенно ниже, чем в контрольной группе и группе сравнения.

Таким образом, применение 5% «баданопласта» при лечении больных трофическими язвами нижних конечностей в сочетании с флебосклеротерапией позволяет улучшить гемодинамику, снизить микробную контаминацию язв, что способствует сокращению времени 1 фазы раневого процесса и стимулирует процессы регенерации.