Поиск патентов
ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных, способы их промышленного получения и применения

Классы МПК:C07K11/00 Депсипептиды, содержащие до 20 аминокислот с полностью определенной последовательностью; их производные
C07K11/02 циклические, например валиномицины
A61K38/15 депсипептиды; их производные
A61P35/00 Противоопухолевые средства
Автор(ы):, , , , , , ,
Патентообладатель(и):ФАРМА МАР, С.А. (ES)
Приоритеты:
подача заявки:
2001-07-02
публикация патента:

Настоящее изобретение относится к новым производным аплидина, обладающим противоопухолевой активностью и представленным общей формулой:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

27 з.п. ф-лы, 3 табл.

Настоящее изобретение относится к способам синтеза аплидина и новым противоопухолевым производным, способам их промышленного получения и применения.

Аплидин имеет следующую циклическую структуру с боковой цепью:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Дидемнины образуют класс циклических депсипептидов, которые были выделены из различных видов Trididemnum genus (Rinehart, Jr. et al. J, Am. Chem. Soc, 103, 1857-59 (1981), Rinehart, Jr. et al. Science, 212, 933-935 (1981) и обладают противоопухолевой и противовирусной активностями. Из их числа аплидин является одним из наиболее активных природных дидемнинов противоопухолевого действия. Описание выделения и противоопухолевой активности аплидина приведено в патенте США 5.834.586.

Описан ряд синтетических и природных аналогов аплидина (Rinehart, Jr. et al. J. Med. Chem, 1996, 39, 2819-2834), включающий различные модификации боковой цепи при сохранении той же структуры макроцикла.

Недавно описана родственная структура дидемнинов, получивших название тамандарины (Fenical, W. et al, J, Org. Chem., 2000, 65, 782-792), выделенных из неидентифицированных соединений асцидий семейства дидемнидовых. Найдено, что эти молекулы отличаются только наличием гидроксиизовалериановой кислоты (Hiv3), вместо гидроксиизовалерилпропионовой кислоты (Hip 3). Указанные соединения описаны как высоко активные противовирусные, противоопухолевые и иммунодепрессивные пептиды.

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Настоящее изобретение касается вышеуказанных соединений, получивших название производные аплидина, предназначенных для применения в медицине, в частности, для лечения опухолей. Изобретение касается также фармацевтических препаратов, включающих указанные соединения, предназначенных для лечения опухолей, например, солидных опухолей, и использования соединений при получении лекарственного средства для лечения опухолей. В особенности предпочтительно лечение солидных опухолей, таких как опухоли мочевого пузыря, молочной железы, ободочной или толстой кишки, желудка, печени, nscl = нмрл (немелкоклеточного рака легких), яичника, поджелудочной железы, глотки, предстательной железы, почек, scl = мрл (мелкоклеточного рака легких), ретинобластомы, меланомы, фибросаркомы, хондросаркомы или остеосаркомы, либо лечение лейкоза/лимфом, таких как ALL (промиелоцитный лейкоз), ALL (острый лимфобластический), CML (хронический миелогенный), ALL (В-клеточный), лейкоз (капиллярно-В-клеточный), лейкоз (плазмоклеточный), лимфома (Т-клеточная), лимфома (Т-клеток кожи), лимфома (недифференцируемая), лимфома (В-клеток Беркитта), лимфома (гистиоцитарная), лимфома (В-клеточная), лимфома (асцит Беркитта).

Примеры фармацевтических композиций по изобретению включают любые твердые (например, таблетки, пилюли, капсулы, гранулы) или жидкие формы (растворы, суспензии или эмульсии) с подходящей композицией, пригодной для перорального, местного или парентерального введения, и указанные композиции могут содержать чистое соединение или в комбинации с любым носителем или другими фармакологически активными соединениями. При парентеральном введении указанные композиции должны быть стерильными.

Для удобства соединение может быть конъюгировано с белком-носителем или другим подходящим средством для доставки в организм животного или человека. Конъюгация может осуществляться непосредственно между носителем и соединением или косвенно, через подходящий связующий агент.

Введение соединения или композиций по настоящему изобретению можно осуществлять любым подходящим способом, таким как внутривенное вливание, пероральный прием препаратов, внутрибрюшинное или внутривенное введение. Заявители предпочитают использовать время вливания до 24 часов, более желательно, 2-12 часов и, наиболее предпочтительно, 2-6 часов. Короткое время вливания, позволяющее проводить лечение, не оставляя в больнице на ночь, особенно желательно. Однако, при необходимости, вливание может длиться 12-24 часа или даже дольше. Вливание можно выполнять с подходящими интервалами, скажем в 2-4 недели. Фармацевтические композиции, содержащие соединение по изобретению, могут доставляться с помощью липосомального или наносферного инкапсулирования, в составах замедленного высвобождения или другими стандартными способами доставки.

Точная доза соединения изменяется в зависимости от конкретного состава, способа применения, конкретного местонахождения, реципиента и требующей лечения карциномы или опухоли. Другие факторы, такие как возраст, масса тела, пол, диета, время введения, скорость экскреции, состояние реципиента, лекарственные комбинации, реакции чувствительности и тяжесть заболевания, также должны приниматься во внимание. Введение можно осуществлять непрерывно или периодически в пределах максимальной допустимой дозы.

Соединения по данному изобретению могут быть использованы с другими лекарственными средствами для обеспечения комбинированной терапии. Дополнительные лекарства могут входить в состав той же композиции, либо предусматриваться в виде отдельной композиции для введения в тот же момент времени или в другое время. Идентичность дополнительного лекарства специально не ограничивается, и подходящие примеры включают:

a) лекарства с антимитотическим действием, в особенности те, которые имеют мишенью элементы цитоскелета, включая модуляторы микротрубочек, такие как таксановые лекарственные средства (такие как таксол, паклитаксел, таксотер, доцетаксел), подофилотоксины или алкалоиды барвинка (винкристин, винбластин);

b) антиметаболитные лекарственные средства, такие как 5-фторурацил, цитарабин, гемцитабин, аналоги пурина, такие как пентостатин, метотрексат);

c) алкилирующие агенты, такие как азотистые соединения горчицы (такие как циклофосфамид или ифосфамид);

d) лекарства, нацеленные на ДНК, такие как антрациклиновые лекарства: адриамицин, доксорубицин, фарморубицин или эпирубицин;

e) лекарственные средства,нацеленные на топоизомеразу, такие как этопозид;

f) гормоны и агонисты или антагонисты гормонов, такие как эстрогены, антиэстрогены (тамоксифен и родственные соединения) и андрогены, флутамид, лейпрорелин, гозерелин, ципротрон или октреотид;

g) лекарства, нацеленные на трансдукцию сигнала в опухолевых клетках, включая производные антител, такие как герцептин;

h) алкилирующие лекарственные средства, такие как лекарства на основе платины (цис-платин, карбонплатин, оксалиплатин, параплатин) или нитрозомочевины;

i) лекарственные средства, потенциально воздействующие на метастазы опухолей, такие как ингибиторы матриксной металлопротеиназы;

j) средства геновой терапии и антисенсорные средства;

k) терапевтические средства на основе антител; и

l) другие биологически активные соединения морского происхождения, особенно эктеинасцидины, такие как ЕТ-743.

Один из аспектов настоящего изобретения касается соединений формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где:

Х независимо означает -C(R) 2-, -O-, -S- или -NR-, где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы и их замещенных производных, которые замещены одной или более гетероциклической группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;

Х 2 независимо означает CR, О (и R2 отсутствует), S (и R2 отсутствует) или N, где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы и их замещенных производных, которые замещены одной или более гетероциклической группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;

Y означает -(COR') nCO-, где n равно 0 или 1 и R' означает органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы и их замещенных производных, которые замещены одной или более гетероциклической группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;

X 1 означает О или S;

каждый из R1 , R2 и R4 независимо означает Н или органическую группу, выбранную из амидогруппы RCONH- или ацильной группы RCO-, где R означает, как указано, алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу и замещенные производные, которые замещены одной или более гетероциклической группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой, и R1 или R2 , когда Х2 означает N, и R 4 дополнительно могут означать -SO2 R, где R принимает вышеуказанные значения;

или R 1 и R2 могут образовывать с Х 2 необязательно N-замещенный пролин, N-замещенный пролин аа8 имеет формулу

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где R3 независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы RSO 2- или ацильной группы RCO-, где R принимает указанные значения, или R3 означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу и замещенные производные, которые замещены одной или более карбонильной группой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;

или R 1 и R2 могут образовывать с Х 2 циклоалкильную, арильную или гетероциклическую группу, необязательно замещенную одной или более группами R 3;

или R1, R 2, Х2, R4 и азот, несущий R4, могут образовывать оксадиазаспироалкан, N-замещенный группой R5, где R 5 независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы RSO2- или ацильной группы RCO-, где R означает, как указано, алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и замещенные производные, которые замещены одной или более карбонильной группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;

или аа8 является замещенным органической группой, выбранной из группы RSO2- или ацильной группы RCO-, где R означает, как указано, алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и замещенные производные, которые замещены одной или более карбонильной группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;

и их фармацевтически приемлемых солей.

Предпочтительные соединения включают те соединения, в которых Х означает -NR-, где R принимает указанные значения. Более предпочтительно, Х означает -NH- или -NMe-, и наиболее желательно, чтобы Х означал -NH-.

Другие предпочтительные соединения включают те соединения, в которых Х означает -О-.

Группа Y предпочтительно означает -COR'CO-, где R 1 означает алкильную группу, в особенности, где R' означает -СНСН3-.

Другие предпочтительные соединения включают те соединения, в которых Y означает -СО-.

Ввиду указанных предпочтений предпочтительным классом соединений является тот класс, где Х означает - -NH- или -О- и Y означает -СОСНСН3СО- или -СО-.

Предпочтительно R4 означает метил.

Предпочтительно X1 означает =O.

Предпочтительно X 2R1 означает необязательно замещенную аралкилоксигруппу, такую как бензилоксигруппу.

Другие предпочтительные соединения включают те соединения, в которых X 2R1 означает необязательно замещенную аминогруппу, более предпочтительно, те, в которых X 2R1 означает группу -NHR 1, где R1 означает необязательно замещенную алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу или аралкильную группу, в особенности, алкильную группу или арильную группу, такую как фенильная группа или бутильная группа.

Дополнительные предпочтительные соединения включают те соединения, в которых X2R1 означает необязательно замещенную алкильную группу, в особенности, где X2R1 означает пропильную группу, изопропильную группу, пентильную группу или группу биотина.

Группу предпочтительных соединений представляют те соединения, в которых -C(=X2)R1 R2 образует необязательно замещенную ацильную группу аминокислоты. Подходящей необязательно замещенной ацильной группой аминокислоты является необязательно замещенный пролин или необязательно замещенный глицин, или необязательно замещенный валин, и, более конкретно, необязательно замещенный пролин означает необязательно замещенный норвалинпролин, необязательно замещенный аланинпролин, Вос-пролин, необязательно замещенный алкилпролин, или необязательно замещенный глицин означает гетероциклически замещенный глицин, или необязательно замещенный валин означает валин, Вос-валин или алкилвалин. Предпочтительно необязательно замещенный пролин означает норвалинпролин, Z-норвалинпролин, аланинпролин, Z-аланинпролин, Вос-аланинпролин, изобутирилпролин или необязательно защищенный D-лактилпролин, или гетероциклически замещенный глицин означает кумаринилглицин, или необязательно замещенный валин означает валин, Вос-валин или изобутирилвалин.

Еще одна группа предпочтительных соединений включает те соединения, в которых X1 означает S и X 2R1 означает группу -NHR 1, где R1 означает необязательно замещенную алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу или аралкильную группу. R1 предпочтительно означает алкильную группу или арильную группу, более желательно, фенильную группу или бутильную группу.

R 1 и R2 могут образовывать с X 2 гетероциклическую группу, необязательно замещенную одной или более группами R3. Например, гетероциклической группой может быть кумарин.

Предпочтительные соединения включают те соединения, в которых аа8 замещен органической группой RSO2-, где R принимает указанные значения, такие как метил.

R1, R 2, X2, R4 и несущий R4 азот могут образовывать оксадиазаспироалкан, N-замещенный R5, где R5 означает Н. N-замещенный оксадиазаспироалкан предпочтительно означает 6-окса-1,7-диазаспиро[4,4]нонан.

Примеры соединений по настоящему изобретению включают:

3-[Aip]-Z-дидемнин А,

8-[фенилмочевина]дидемнин А,

8-[бутилмочевина]дидемнин А,

3-[val]-8-[изобутирил]аплидин,

9-[норвалин]аплидин,

3-[Hiv]-9-[изобутирил]аплидин,

3-[Val]-9-[изобутирил]аплидин,

3-[hiv]-8-[изобутирил]дидемнин А,

3-[Hiv]-9-[Ala]аплидин,

3-[Hiv]-9-[Nva]аплидин,

8-[фенилтиомочевина]дидемнин А,

8-[кумарин]дидемнин А,

8-[бутилтиомочевина]дидемнин А,

3-[Hiv]-9-[D-Lac]аплидин,

8-[метилсульфонил]дидемнин А,

3-[val]-Z-дидемнин А,

3-[Hiv]-8-[Val]дидемнин А,

3-[Hiv]-8-[бутирил]аплидин,

3-[val]дидемнин А,

3-[Hiv]дидемнин А,

Z-дидемнин А,

9-[Z-Nva]аплидин,

3-[Hiv]-9-[Z-ala]аплидин,

8-[Gly]-9-[кумарин]дидемнин А,

8-[биотин]дидемнин А,

3-[Hiv]-7,8-[спиро]-9-[Boc]аплидин,

3-[Hiv]-Z-дидемнин А,

3-[Hiv]-9-[Z-Nva]аплидин,

7,8-[спиро]-9-[pyr]аплидин,

3-[Hiv]-9-[lac(OTBDMS)]аплидин,

3-[Hiv]-9-[Boc-Ala]аплидин,

7,8-[спиро]-9-[Boc]аплидин,

3-[Hiv]-8-[Boc-Val]аплидин,

8-[Val]-9-[изобутирил]дидемнин А,

3-[Hiv]-8-[гексаноил]дидемнин А,

3-[Val]-9-[Lac(OTBDMS)]аплидин,

3-[Aip]дидемнин А,

3-[Hiv]-9-[D-Lac(OTBDMS)]аплидин,

7,8-[спиро]-9-[изобутирил]аплидин,

3-[Hiv]-7,8-[спиро]-9-(Pyr]аплидин,

3-[Hiv]-7,8-[спиро]-9-[изобутирил]аплидин,

3-[Hiv]-7,8-[спиро]-9-[акрилоил]аплидин или

[Aip]3-аплидин.

Настоящее изобретение касается также соединений, имеющих следующие формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и родственных структур.

По одному из особенно предпочтительных вариантов выполнения настоящее изобретение касается способа синтеза с образованием аа3 = [Hiv]3 или [Val]3, либо [Aip] 3, являющихся составной частью ряда чрезвычайно эффективных и редких противоопухолевых средств, разработанных и заявленных для клинических испытаний, после того, как они стали доступными в адекватных количествах, и их простейших изомеров, в которых переставлены аминокислотные остатки. Указанный способ является энантио- и стереорегулируемым и быстрым, обладающим преимуществами стандартных способов методик синтеза в фазе раствора.

Предпочтительный вариант настоящего изобретения описывается формулой I, где аа3 независимо означают способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -аминокислоты L или D конфигурации. Если используется, Х независимо означает -С(R)2-, О, S или NR; где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы, включающей алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и их производные, замещенные гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой, галогеновой группой. Где R наиболее предпочтительно содержит приблизительно от 1 до 12 атомов углерода, более предпочтительно, приблизительно от 1 до 8 атомов углерода и, еще более желательно, приблизительно от 1 до 6 атомов углерода, наиболее предпочтительно, 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил и пропил, включая изопропил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях по настоящему изобретению. Где аа3 наиболее предпочтительно означает способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -(способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 '-гидроксиизовалерил)пропионил (Hip), (X=О, Y=-СОСНСН 3СО-) - серию А, или способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -(способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 '-аминоизовалерил)пропионил (Aip) (X=NH, Y=-СОСНСН 3СО-) - серию N или валин (X=NH, Y=-СО-) - серию V, или способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -гидроксиизовалерил (X=-O-, Y=-СО-) - серию Н, или N-метилвалин (X=NMe, Y=-СО-) - серию М. Где аа8 независимо означают способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -аминокислоты L или D конфигурации, если используются; где X2 независимо означает CR, О, S или N,

где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы, включающей алкенил, алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и их производные, замещенные гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой, галогеновой группой, где каждый из R1, R 2, R3 и R4 независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы, включающей алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и их производные, замещенные гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой, галогеновой группой. Аа8 может также быть пролиновым остатком, как в формуле II. Где R 3 независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы, включающей алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и их производные, замещенные гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой, галогеновой группой.

Где R3 наиболее предпочтительно может означать пировиноградную кислоту, аралкилоксикарбонильную группу или аминокислоту, либо пептиды. Алкильные группы предпочтительно имеют приблизительно от 1 до 12 атомов углерода, более предпочтительно, приблизительно от 1 до 8 атомов углерода, еще более желательно, приблизительно от 1 до 6 атомов углерода, и, наиболее предпочтительно, 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил и пропил, включая изопропил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях по настоящему изобретению. Как использовано здесь, термин алкил, если не указано особо, относится как к циклическим, так и нециклическим группам, если даже циклические группы состоят, по меньшей мере, из трех углеродных членов цикла. Предпочтительные аминокислоты означают защищенный или незащищенный D или L глицин, валин, лейцин, изолейцин, фенилаланин, тирозин, триптофан, метионин, цистеин, аспартат, аспарагин, глутаминовую кислоту, глутамин, лизин, аргинин, пролин, серин, треонин, гистидин и гидроксипролин. Предпочтительные пептиды могут быть составлены из вышеуказанных аминокислот.

Кроме того, аа8 и R4 могут быть связаны через производные 6-оксо-1,7-диазаспиро[4,4]нонана структуры:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где R5 наиболее предпочтительно может означать пировиноградную кислоту, аралкилоксикарбонильную группу или аминокислоту, либо пептиды. Алкильные группы предпочтительно имеют приблизительно от 1 до 12 атомов углерода, более предпочтительно, приблизительно от 1 до 8 атомов углерода, еще более желательно, приблизительно от 1 до 6 атомов углерода, и, наиболее предпочтительно, 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил и пропил, включая изопропил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях по настоящему изобретению. Как использовано здесь, термин алкил, если не указано особо, относится как к циклическим, так и нециклическим группам, если даже циклические группы состоят, по меньшей мере, из трех углеродных членов цикла. Предпочтительные аминокислоты означают защищенный или незащищенный D или L-глицин, валин, лейцин, изолейцин, фенилаланин, тирозин, триптофан, метионин, цистеин, аспартат, аспарагин, глутаминовую кислоту, глутамин, лизин, аргинин, пролин, серин, треонин, гистидин и гидроксипролин. Предпочтительные пептиды могут быть составлены из вышеуказанных аминокислот.

Как использовано здесь, термин "органическая группа" означает углеводородную группу, подразделяемую на алифатическую группу, циклическую группу или комбинацию из алифатической и циклической групп (например, аралкильные группы). В контексте настоящего изобретения, термин "алифатическая группа" означает насыщенный или ненасыщенный линейный или разветвленный углеводород. Указанный термин используется, например, как охватывающий алкильную, алкенильную и алкинильную группы. Термин "алкильная группа" означает насыщенную линейную или разветвленную углеводородную группу, включающую, например, метил, этил, изопропил, изобутил, трет-бутил, гептил, додецил, октадецил, амил, 2-этилгексил, 2-метилбутил, 5-метилгексил и тому подобные. Термин "алкенильная группа" означает ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную группу с одной или более двойными углерод-углеродными связями, такую как винильная группа. Термин "алкинильная группа" означает ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную группу с одной или более тройными углерод-углеродными связями. Термин "циклическая группа" означает замкнутую в кольцо углеводородную группу, подразделяемую на алициклическую группу, ароматическую группу или гетероциклическую группу. Термин "алициклическая группа" означает циклическую углеводородную группу, обладающую характеристиками, придающими ей сходство с алифатическими группами. Термин "ароматическая группа" или "арильная группа" означает моно- или полициклическую ароматическую углеводородную группу. Термин "гетероциклическая группа" означает замкнутую в кольцо углеводородную группу, в которой один или более атомов цикла означают элемент, отличный от углерода (например, азот, кислород, серу и т.д.).

Предпочтительные алкоксигруппы в соединениях по настоящему изобретению включают группы, имеющие один или более кислородных мостиков и приблизительно от 1 до 12 атомов углерода, более предпочтительно, приблизительно от 1 до 8 атомов углерода, еще желательней, приблизительно от 1 до 6 атомов углерода, и наиболее предпочтительно 1, 2, 3 или 4 атомов углерода.

Подходящие гетероароматические группы в соединениях по настоящему изобретению содержат один, два или три гетероатома, выбранных из атомов N, О или S, и включают, например, кумаринил, включая 8-кумаринил, хинолинил, включая 8-хинолинил, пиридил, пиразинил, пиримидил, фурил, пирролил, тиенил, тиазолил, оксазолил, имидазолил, индолил, бензофуранил и бензотиазол. Подходящие гетероалициклические группы в соединениях по настоящему изобретению содержат один, два или три гетероатома, выбранных из атомов N, О или S, и включают, например, группы: тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолино и пирролидинил.

Подходящие карбоциклические арильные группы в соединениях по настоящему изобретению включают одно- или полиядерные соединения, включающие полиядерные соединения, которые содержат отдельные и/или конденсированные арильные группы. Типичные карбоциклические арильные группы содержат 1-3 отдельных или конденсированных цикла и приблизительно от 1 до 18 атомов углерода в цикле. В особенности предпочтительные карбоциклические арильные группы включают фенил, включая замещенный фенил, такой как 2-замещенный фенил, 3-замещенный фенил, 2,3-замещенный фенил, 2,5-замещенный фенил, 2,3,5-замещенный и 2,4,5-замещенный фенил, где один или более фенильных заместителей означают электронопритягивающую группу, такую как галоген, циано, нитро, алаканоил, сульфинил, сульфонил и тому подобные; нафтил, включая 1-нафтил и 2-нафтил; дифенил; фенантрил и антрацил.

Необязательно защищенные аминогруппы могут быть защищены с применением известных для указанной цели групп. Подходящие защитные группы для аминов включают карбаматы, амиды и другие защитные группы, такие как алкил-, арилалкил-; сульфо- или галоген- арилалкил-; галогеналкил-, алкилсилилалкил-, арилалкил-, циклоалкилалкил-, алкиларилалкил-, гетероциклоалкил-, нитроарилалкил-, ациламиноалкил-, нитроарилдитиоарилалкил-, дициклоалкилкарбоксамидоалкил-, циклоалкил-, алкенил-, арилалкенил-, нитроарилалкенил-, гетероциклоалкенил-, гетероцикло-, гидроксигетероцикло-, алкилдитио-; алкокси- или галоген-, или алкилсульфиниларилалкил; гетероциклоацил- и другие карбаматы, и алаканоил-, галогеналаканоил-, арилалаканоил-, алкеноил-, гетероциклоацил-, ароил-, арилароил-, галогенароил-, нитроароил- и другие амиды, а также алкил, алкенил, алкилсилилалкоксиалкил, алкоксиалкил, цианоалкил, гетероциклический, алкоксиарилалкил, циклоалкил, нитроарил, арилалкил, алкокси- или гидроксиарилалкил и многие другие группы. Такие группы могут быть необязательно замещены вышеуказанными замещающими группами.

При ссылке здесь на замещенные группы в соединениях по настоящему изобретению имеется в виду конкретный радикал, который может быть замещен по одному или более имеющимся положениям одной или более подходящими группами, например, галогеном, таким как фтор, хлор, бром и иод; циано; гидроксилом; нитро; азидо; алаканоилом, таким как С1-6 алканоильная группа, такая как ацил и тому подобные; карбоксамидо; алкильными группами, включая алкильные группы приблизительно с 1-12 атомами углерода или 1-6 атомами углерода, и более предпочтительно, 1-3 атомами углерода; алкенильной или алкинильной группами, включая группы, имеющие одну или более ненасыщенных связей и приблизительно 2-12 углеродных или 2-6 углеродных атомов; алкоксигруппами, включая указанные группы, имеющие один или более кислородных мостиков и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; арилокси, таким как фенокси; алкилтиогруппами, включая указанные группы, имеющие одну или более простых тиоэфирных связей и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; алкилсульфинильными группами, включая указанные радикалы, имеющие одну или более сульфинильных связей и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; алкилсульфинильными группами, включая указанные радикалы, имеющие одну или более сульфонильных связей и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; аминоалкильными группами, такими как группы, имеющие один или более атомов N и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; карбоциклоарилом с 6 или более атомами, в частности, фенилом (например, R является замещенным или незамещенным дифенильным радикалом); и аралкилом, таким как бензил.

Как хорошо известно из данной области техники, высокая степень замещения не только допустима, но часто целесообразна. Соединения согласно настоящему изобретению могут быть замещены. В целях упрощения терминологии, используемой в данном описании, термины "группа" и "радикал" применяются для того, чтобы различать химические группы, предусмотренные для замещения или которые могут быть замещены, и соответствующие группы, для которых не предусматривается замещение или которые могут не быть замещенными таким образом. Таким образом, в случае использования термина "группа" для описания химического заместителя подразумевается незамещенная группа и эта группа с атомами О, N или S, например, в цепи, а также как карбонильная группа или другое стандартное замещение. Когда используют термин "радикал" для описания химического соединения или заместителя, подразумевается, что он включает только незамещенную химическую структуру. Например, подразумевается, что выражение "алкильная группа" включает не только насыщенные углеводородные алкильные заместители с полностью открытой цепью, такие метил, этил, пропил, изобутил и тому подобные, но также алкильные заместители, несущие дополнительные заместители, известные из уровня техники, такие как гидрокси, алкокси, амино, карбоксил, карбоксамидо, атомы галогенов, циано, нитро, алкилсульфонил и так далее. Таким образом, "алкильная группа" включает простые эфирные группы, галогеналкилы, спирты, тиолы, карбоксил, амины, гидроксиалкилы, сульфоалкилы и так далее. С другой стороны, выражение "алкильный радикал" ограничивается включением только насыщенных углеводородных алкильных заместителей с полностью открытой цепью, таких как метил, этил, пропил, изобутил и тому подобное.

Другие аспекты настоящего изобретения касаются способов синтеза.

Способ предусматривает получение фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способ включает сочетание Boc-D-allo-Ileu-OH с литийэнолятом бензилацетата.

Карбонильная группа фрагмента дидемнина формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

может быть восстановлена с получением фрагмента дидемнина формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Гидроксильная группа соединения формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

может быть защищена с получением фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Последующее снятие защитной группы с группы сложного бензилового эфира дает фрагмент дидемнина, имеющий структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Другой способ по настоящему изобретению для получения фрагмента дидемнина включает сочетание первого реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и второго реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где X выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где R означает аминозащитную группу и где R означает гидроксизащитную группу. Удобно, когда Х означает -О- и R означает трет-бутилдиметилсилил или Х означает -NH- и R означает Boc.

Другой способ по настоящему изобретению для получения фрагмента дидемнина включает сочетание первого реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и второго реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -O-, NMe и -NH-; где R означает аминозащитную группу и где R означает Н. Удобно, когда Х означает -О- и R означает Н; или Х означает -NH- и R означает Boc; или Х означает -NMe- и R означает Boc.

Способ по настоящему изобретению включает гидролиз фрагмента дидемнина формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящий к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -ОН и -NH 2.

Еще один способ включает гидролиз фрагмента дидемнина

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящий к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -NH 2 и -NHMe.

Разработан еще один способ получения фрагмента дидемнина, способ включает сочетание первого реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и второго реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -O-, -NMe и -NH-; где Y означает -(СОСНСН3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Способ, отличающийся тем, что включает гидролиз фрагмента дидемнина

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящий к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где X выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Настоящим изобретением представлен еще один способ получения фрагмента дидемнина, способ включает сочетание первого реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и второго реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Способ по настоящему изобретению включает снятие защитной группы с группы сложного бензилового эфира фрагмента дидемнина формулы

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Согласно настоящему изобретению способ получения фрагмента дидемнина включает сочетание первого реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и второго реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Способ включает снятие защиты фрагмента дидемнина

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Еще один способ по настоящему изобретению для получения фрагмента дидемнина включает циклизацию фрагмента формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящую к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Способ включает гидролиз аналога дидемнина

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящий к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Дополнительно разработан способ получения аналога дидемнина, способ включает сочетание первого реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и второго реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Еще один способ включает снятие защиты фрагмента дидемнина формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящую к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где X выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Способ получения фрагмента дидемнина включает сочетание фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и второго реагента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Другой способ включает снятие защиты фрагмента дидемнина формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Способ по настоящему изобретению для получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина формулы:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

с фрагментом

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(COCHCH3) nСО-; где n равно 0 или 1.

Способ получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-, и R означает изопропил; где Х означает -О- и R означает н-пропил и R означает н-пентил.

Способ по настоящему изобретению для получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Способ по настоящему изобретению включает снятие защиты аналога дидемнина

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Разработан способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Способ дополнительно включает снятие защиты аналога дидемнина

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Разработан способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и изобутирилхлорида, приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Разработан способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где R означает Boc, изобутирил, пирувил или акрилоил.

Способ получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где R означает SO2Me или Z-Nva.

Разработан способ по настоящему изобретению, включающий снятие защиты аналога дидемнина

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где R2 означает Nva.

Составной частью настоящего изобретения является способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где R означает Boc, изобутирил или пирувил.

Способ получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Разработан способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Разработан способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и метилсульфонилхлорида, приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Способ получения аналога дидемнина, включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и фрагмента, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуру

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где Х означает О и S, где R означает бутил и фенил.

Следует понимать, что все указанные способы являются иллюстрирующими данное изобретение и, по желанию, могут быть модифицированы. В частности, другие защитные группы могут быть применены для защиты аминогрупп или гидроксигрупп. Другие реагенты могут быть использованы для введения намеченных групп. По желанию, можно варьировать заместители при конкретном воплощении общей формулы соединений по данному изобретению и примеры предпочтительных значений заместителей. Модифицированные способы являются составной частью настоящего изобретения.

Для того, чтобы данное описание в необходимом объеме включало все раскрытия приоритетных заявок на патент и для обеспечения права заявленные приоритеты в соответствии с датами подачи, заявители включают в описание в качестве ссылок содержание патентных заявок GB 0016148.9 и GB 0103750.6.

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены синтетическими способами. Описанные здесь способы синтеза аплидина и производных могут также быть использованы для синтеза широкого ряда дидемнинов.

Структуры некоторых соединений приведены на фигуре 1:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Производные аа3-аплидина являются синтетическими циклическими депсипептидами, структурно подобными аплидину (соединению II) (аа3=Hip, известному так же как дегидродидемнин В), который является природным дидемнином, выделенным из соединений асцидий Aplidium albicans (фигура 1). Полученные молекулы отличаются наличием гидроксиизовалериановой кислоты (Hiv) (соединение I), или валина (соединение V), или метилвалина (соединение VI), или способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -(способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 '-аминоизовалерил)пропионила (Aip) (соединение VII), вместо гидроксиизовалерилпропионового (Hip) (II) звена, которое присутствует во всех других относящихся к классу дидемнина соединениях природного происхождения. Подобие этих двух структур недавно также было обнаружено при сравнении дидемнина В (соединение III), наиболее хорошо известного члена указанного класса депсипептидов, и нового циклического депсипептида, выделенного из неидентифицированных соединений бразильской асцидии семейства дидемнидовых: тамандарина А (соединение IV). Соединения I, V, VI и VII являются неприродными производными дидемнина.

Структурная гомология между III и IV отражается также на соответствующей им биологической активности. При сопоставлении обоих соединений показано, что IV сохраняет такие же уровни противоопухолевой активности in vitro в клоногенных испытаниях, а также ингибирующие свойства в отношении биосинтеза белка, и является немного более активным in vitro, чем III против карциномы поджелудочной железы. Однако, соединение IV не проявляет совершенно никакой специфичности в отношении какого-либо типа опухолей NCI 60-клеточной панели. Показано, что дидемнин В токсичен при дозах, близких к дозам, требуемым для терапевтического применения, и, похоже, что IV скорее является токсином широкого спектра, чем селективным агентом.

[Hiv]3-аплидин (I), наоборот, обладает теми же преимуществами, что обнаружены для аплидина (II) в отношении дидемнина В (III), то есть является более специфическим в отношении солидных опухолей, таких как опухоль толстой кишки, хондросаркома или остеосаркома, согласно MTS испытанию. Напротив, [Val]3-аплидин (V) и [MeVal]3-аплидин (VI) являются новыми соединениями, обладающими высоким уровнем противоопухолевой активности in vitro. Наконец, соединения V, VI и VII вызывают, очевидно, по сравнению с исходным аплидином, повышенное образование водородных связей на активном участке, и, таким образом, представляют собой более активные соединения. Вдобавок, существующая замена амидной связи сложноэфирной связью может повышать стабильность циклодепсипептидного ядра.

Здесь описан основной общий синтез различных серий производных аплидина. В качестве примера на фигуре 2 приведен ретросинтетический анализ.

Ключевые стадии включают эффективную макроциклизацию линейных предшественников 6, удобный стереоселективный синтез Ist-aa3-Leu-Pro звена (А1) и правого фрагмента D1. Заключительное соединение макроцикла 4 с различными боковыми цепями дает аа3-аа8-аплидин и производные. Надежность данного синтетического подхода успешно доказана при разработке практического синтеза аплидина II (аа3=Hip).

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Образование макроциклического ядра является основной ключевой стадией во всех сериях. В прежних синтезах дидемнинов достигнута успешная циклизация всех четырех возможных амидных связей. Однако, в настоящей работе, образование связи N(Me)-O(Me)-Tyr и Pro выбрано в качестве момента макроциклизации, что основано на предыдущих разработках, связанных с общим синтезом аплидина II (G.Jou, I.Gonzalez, F.Albericio, P.LLoyd-Williams, E.Giralt., J, Org. Chem. 1997, 62, 354-366 и патент ES-2102322).

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Макроциклическое ядро целевой молекулы разделяется на левое звено тетрапептида Ist-aa3-Leu-Pro A1 и дипептид Boc-Thr-(Z-NMe-OMe-Tyr)-OH D1.

Синтез правого фрагмента дипептида D1 уже описан. Однако синтез, схематически изображенный схемой 1, позволяет получать данный промежуточный продукт в килограммовых масштабах. Кислотную функциональность Boc-Thr(ОН)-ОН защищают фенацилбромидом, что дает непосредственно спирт D3, который эстерифицируют с помощью Z-N(Me)-О(Me)-Tyr-ОН, используя DCC в присутствии DMAP, получая D2. Удаление фенацильной группы с помощью Zn в уксусной кислоте дает чистый фрагмент D1.

Получение предшественника A1 для различных серий схематически изображено на схеме 2. Для серий SHPL, SVPL и SMPL первая стадия сочетания Leu-Pro-OBzl (A5) и промышленно выпускаемой кислоты (В1) дает непосредственно спирт A3, готовый для следующего взаимодействия с изостатином (C1). Для синтеза SAPL и SNPL серий, способ отличается от вышеуказанного тем, что В1 означает сложный способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -кетоэфир, синтезированный из [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -(способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 '-гидроксиизовалерил)пропионовой и [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -(способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 '-аминоизовалерил)пропионовой кислоты, соответственно. Синтез фрагмента В2 (SAPL и SNPL серии) схематически изображен на схеме 3. Гидрогенолиз с превращением В2 в В1 осуществляют непосредственно перед (в одном реакторе) реакцией сочетания с А5.

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Получение полного фрагмента А1 зависит от доступности части, представляющей собой изостатин, который получают из непротеиногенного аминозащищенного Boc-D-аллоизолейцина (С5) в больших количествах. Синтетический способ получения С1 схематически изображен на схеме 4.

Активация карбоксильной функциональности Boc-D-allo-Ile карбонилдиимидазолом с последующей конденсацией литийэнолятом бензилацетата дает сложный способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -кетоэфир (С4). Стереоселективное восстановление с помощью КВН4 в метаноле дает С3. Защита вторичной гидроксильной группы в виде простого эфира TBDMS (C2) и гидрогенолиз образовавшегося сложного бензилового эфира дают изостатин (С1).

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Последующие стадии получения соединений I, II, V и VII изображены на схеме 5.

Связывание фрагментов А1 и D1 с HBTU/HOBt дает линейный предшественник типа 7. Гидрогенолиз Cbz и бензильной защитных групп протекает чисто и спокойно с Pd(OH)2, что дает 6. Стадия макроциклизации с применением HATU/HOAt дает промежуточный продукт 5 с хорошим выходом (75%). Хлористый водород в диоксане используют для расщепления Вос-защитной группы, приводящего к амину 4. Указанное соединение связывают с Z-NMe-D-Leu-OH, получая 3, которое подвергают гидрогенолизу под воздействием Pd-С. Полученное соединение 2 связывают с Pyr-Pro-ОН боковой цепью, используя DIPCDI, что дает соответствующие соединения.

Интересно, что предшественники типа 2, являющиеся аналогами во всех вышеуказанных отношениях дидемнина А, служат исходными блоками, используемыми в синтезе для построения некоторых рассматриваемых соединений указанного класса, поскольку N-концевая, свободная вторичная аминогруппа является участком присоединения различных ацильных групп к циклическому депсипептиду.

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Более ранними исследованиями (Rinehart et al., J. Med. Chem, 1996, 39, 2819-2834) также обнаружено, что ацильные производные дидемнина A (dA) 3 активны как исходные соединения 2. Для серии aa3 заявителями также обнаружена активность в соединениях 3.

В таблицах 1 и 2 приведены значения IC 50, найденные для соединений 1.

Таблица 1

Цитотоксичность соединений типа [аа3]-аплидин IC50 (молярная)
Соединение/серия Р388А549НТ29 MEL28
Аплидин (II)/SAPL1 1,80Е-101,80Е-10 4,50Е-104,50Е-10
[Hiv]3-аплидин(I)/SHPL1 4,74Е-104,74Е-104,74Е-10 4,74Е-10
[Val] 3-аплидин(V)/SVPL11,13Е-10 1,13Е-101,13Е-101,13Е-10
[Aip]3-аплидин(VII)/SNPL1  9,01Е-10 9,01Е-10 

Методика: по Berjeron et al., Biochem and Bioph Res, Comm., 1984, 121, 3, 848-854.

P388 = лимфома мыши. А549 = карцинома легкого человека. НТ29 = карцинома ободочной кишки человека. MEL28 - меланома человека.

Таблица 2 Значения IC 50 (молярная) для семейства аплидина
   Дидемнин

В9LSAPL1
Аплидин SAPL1[Hiv]3 -Аплидин SHPL1
Солидные опухоли Линия
   III  
    II  
      I
Мочевой пузырь56372.50E-08 3.59E-089.02E-08
Молочная железаМХ-1 1.54E-061.67E-07 H/A
Ободочная или толстая кишка HT-298.07E-08 6.87E-071.02E-08
ЖелудокHs746t6.60E-09 2.52E-087.16E-08
ПеченьSK-HEP- 9.21E-089.44E-082.66E-07
 1    
НМРЛА549 1.21E-042.40E-05H/A
ЯичникSK-OV-3 1.63E-077.20E-08 -
Поджелудочная железа PANC-11.52E-101.7E-07 -
Глотка FADU9.79E-087.29E-08 3.71E-08
Предстательная железаPC-39.00E-08 5.13-07-
Предстательная железаDU-145 -- H/A
Предстательная железа LNCAP-- 1.46E-08
Почки 786-O2.90E-078.31 E-08-
МРЛ NCl-- -H/A
  H187    
РетинобластомаY-79- - 
МеланомаMel-28- -4.86E-07
ФибросаркомаSW 694 3.28E-061.49E-06H/A
ХондросаркомаCHSA -  3.45E-09
Остеосаркома OSA-FH-- 5.89E-09

 Дидемнин ВАплидин[Hiv] 3-
Лейкозы/лимфомы Линия9LSAPL1SAPL1 Аплидин
   III  SHPL1
    II 
     I
ALL (промиелоцитный лейкоз)HL-60 1.44Е-077.89Е-08Н/А
ALL (острый лимфобластический) Mott 35.45Е-075.95E-07 1.77Е-08
CML (хронический миелогенный)К5623.31Е-06 5.72Е-075.21Е-07
ALL (В-клеточный)CCRF-SB 6.55E-074.72Е-07 -
Лейкоз (капиллярно-В-кпеточный) Mo-B- --
Лейкоз (плазмоклеточный) ARH-77- 1.78Е-07-
Лимфома (Т-клеточная)H92.13Е-07 5.25Е-07Н/А
Лимфома (Т-клеток кожи)Hut 783.56Е-084.47Е-08 -
Лимфома (недифференцируемая) MC1168.84Е-09 9.21Е-073.82Е-07
Лимфома (В-клеток Беркитта)RAMOS ---
Лимфома (гистиоцитарная)U-937 1.87Е-075.62Е-07 -
Лимфома (В-клеточная) MoB-- -
Лимфома (асцит Беркитта) P3HR15.58Е-085.34Е-08 -
Методика:  МТТ МТТMTS (новая]
Н/А = не активный

Полученные здесь соединения приведены на схемах 5 и 6. Указанные соединения включают N способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -пропионил-[aa]3-dA, N способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -бутирил-[aa]3-dA, N способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -изобутирил-[aa]3-dA и N способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -пентаноил-[aa]3-dA.

Получены аналоги, имеющие два ацильных заместителя после N-концов аа3-dA ядра, для изучения влияния структурных факторов на специфичность в отношении некоторых опухолей. Получены диацильные соединения, изобутирил-Pro-ОН, О-изобутирил-Lac-Pro-ОН, N-бензил-Ala-Pro-ОН, и конденсированы с соединениями типа 2 DIPCDI способом, что дает, соответственно, после снятия защиты и очистки, [аа] 3- [изобутирил]9-аплидин, [О-изобутирил-Lac] 9-аплидин, [Ala]9-аплидин.

Предпочтительные производные аплидина: соединения серий: Н, V

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Соединения также связывают, получая активные соединения:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Синтез спироциклических фрагментов схематически представлен на схеме 7. Синтез исходит из ранее описанного соединения 8. Ссылки: a) Seebach, D. et al. J. Am. Chem. Soc. 1983, 105, 5390-5398. b) Genin, M. J. et al. J. Org. Chem. 1993, 58, 2334-2337.

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Предпочтительные производные аплидина: соединения серии А

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Спиросоединения также связывают, как в предыдущих сериях, получая активные соединения:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Спиро = [(5R)-1-(заместитель в позиции 9)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан] 7-9

(1) Данное соединение описано в литературе: Joc Org. Chem. 2000, 65, 782-792. Их синтез опубликован до их открытия (j): Org. Lett., 2000, vol 0, No. O, A-D.

Методика: по Berjeron et al, Biochem and Bioph Res. Comm., 1984, 121, 3, 848-854

388 = лимфома мыши. А549 = карцинома легкого человека. НТ-29 = карцинома ободочной кишки человека. MEL-28 - меланома человека. DU145 - карцинома предстательной железы человека.

388 = Murine lyrnphoma. А549 - human lung carcinoma. НТ-29 - human colon carcinoma. MEL-28 - human melanoma. DU145 = human prostate carcinoma

Список обозначений
Разное 
AAАминокислота
IstИзостатин
HipГидроксиизовалерилпропионовая кислота
HivГидроксиизовалериановая кислота
AipАминоизовалерилпропионовая кислота
LacМолочная кислота
LCЖидкостная хроматография (ЖХ)
HPLC Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)
TLCТонкослойная хроматография (ТСХ)
M.p.Температура плавления (т.пл.)
R tВремя удерживания
Quant.Количественный выход (кол.)
ESI-MSМасс-спектр ионизационного электрораспыления
Защитные группы
BnБензил
Bocтрет-Бутилоксикарбонил
TBDMSтрет-Бутилдиметилсилил
ZБензилоксикарбонил
РасФенилацетил
Растворители
THFТетрагидрофуран (ТГФ)
HexГексан
ACN Ацетонитрил
DCM Дихлорметан
EtOAc Этилацетат
DMF Диметилформамид (ДМФ)
MTBEМетил-трет-бутиловый эфир
Et2O Диэтиловый эфир
t-BuOH трет-Бутанол
TFA Трифторуксусная кислота
MeOH Метанол
EtOH Этанол
IPAИзопропанол
Реагенты
CDI1,1'-Карбонилдиимидазол
HOBt1-Гидроксибензотриазол
HBTUN-оксид N-[(1H-Бензотриазол-1-ил)(диметиламино)
 метилен]-N-метанаммонийгексафторфосфата
BOP-C1Хлорангидрид бис(2-оксо-3-оксазолидинил)
  фосфиновой кислоты
HATUN-оксид N-[(диметиламино)-1Н-1,2,3,-триазоло[4,5-b]пиридин-1-илметилен]-N-
 метилметанаммонийгексафторфосфата
HOAt1-Гидрокси-7-аза-бензотриазол
DCCДициклогексилкарбодиимид
DIPCDIN,N'-Диизопропилкарбодиимид
TBAFТетрабутиламмонийфторид
AcOHУксусная кислота
p-TsOHП-толуолсульфоновая кислота
DMAP4-Диметиламинопиридин
NMMN-Метилморфолин
DIPEAДиизопропилэтиламин
TEAТриэтиламин
TFAТрифторуксусная кислота

Общая методика

Все работы выполняют в инертной атмосфере аргона. Все растворители имеют реагентную чистоту (используются для обработки) или ВЭЖХ чистоту (используются как растворитель для реакции или очистки). Безводные растворители используют непосредственно в том виде, каком они поступают в продажу. Тетрагидрофуран свеже перегоняют перед применением для удаления стабилизатора. Все остальные реагенты являются промышленно выпускаемыми соединениями наибольшей доступной чистоты. Аналитическую тонкослойную хроматографию (ТСХ) осуществляют на алюминиевых пластинах с силикагелем Merck'a (60, F254), предварительно покрытых флуоресцентным индикатором. Визуализацию осуществляют, используя ультрафиолетовый свет (254 нм), фосфомолибденовую кислоту (5% м/о) в 95% этаноле или ванилин. Протонный или углеродный спектр магнитного резонанса (1Н, 13С-ЯМР) снимают на Varian-300 (300 МГц) спектрометре с Фурье-преобразованием, и химические сдвиги выражают в миллионных долях (м.д.) относительно CHCl3 в качестве внутреннего стандарта (7,26 м.д. для 1H и 77,0 для 13С). Мультиплеты обозначены как синглет (с), дублет (д), дублет дублетов (дд), дублет триплетов (дт), триплет (т), квартет (кв), мультиплет (м) и уширенный синглет (уш.с), и константы взаимодействия (J) выражены в Гц. Оптические вращения (в градусах) измеряют с помощью Jasco P1020 поляриметра. Масс-спектр ионизационного распыления электронов (ESI-MC) получают на Hewlett Packard Series 1100 MSD. Elemental. Флэш хроматографию на колонке выполняют на Е. Merck силикагеле 60 (240-400 меш) или RP C18 (40-63 мкм), используя системы растворителей, указанные в отдельных экспериментах.

Следующие методики описывают синтез промежуточных соединений, полученных на основании аплидина (SAPL), [Aiv]3-аплидин (SNPL), [Hiv] 3-аплидин (SHPL), [Val]3-аплидин (SVPL) и [MeVal]3-аплидин (SMPL).

Пример 1

Синтез Бензил(4R,5S)-4-(трет-бутоксикарбониламино)-5-метил-3-оксогептаноата (С4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору Boc-D-alloIle-OH (15,26 г, 65,9 ммоль) в сухом ТГФ (200 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют CDI (16,04 г, 98,96 ммоль). Через 15 мин смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. Полученный раствор охлаждают до -78°С и добавляют через канюлю к хорошо перемешиваемому раствору бензиллитийэнолята, охлажденного до -78°С (625 мл, 0,37 М), [полученному добавлением по каплям раствора бензилацетата (33,34 мл) в ТГФ (165 мл) к раствору литийдиизопропиламида (0,36 М) в ТГФ/гекс. 3:1 (642 мл) при -78°С]. Температуру следует поддерживать < -75°С. Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 60 мин. Затем смеси дают нагреться до -10°С (30 мин), вновь охлаждают до -78°С и гасят насыщенным водн. хлоридом аммония (200 мл), после чего экстрагируют DCM (3×500 мл) при комнатной температуре. Объединенные экстракты промывают последовательно водн. нас. NaHCO3 (500 мл) и насыщенным раствором соли (200 мл). Сушка (Na 2SO4) с последующим удалением растворителя дает масло, которое наносят на диоксид кремния С18 и заполняют доверху LC-RPC18 [Lichroprep RFC-18 (40-60 микрон) колонку. Элюирование с использованием градиента ACN-H2O (60-100% ACN)] дает продукт С4 в виде бесцветного масла (16,7 г, 70%). [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]20 D - 20,0 (с 1, CHCl3), ТСХ: Rf=0,32 (Merck, RP-C18, ACN-H2O 7:3).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,77 (д, 3Н), 0,94 (т, 3Н), 1,25 (с, 9Н), 1,60 (м, 1Н), 1,90 (м, 2Н), 3,58 (с, 2Н), 4,47 (дд, 1Н), 5,00 (д, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 7,35 (уш.с, 5Н).

Пример 2

Синтез бензилового эфира (3S,4R,5S)-N-(трет-бутоксикарбонил)изостатина (С3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

С4 (16,7 г, 45,9 ммоль) растворяют в метаноле (690 мл) при 0°С. К перемешиваемому раствору добавляют боргидрид калия (7,43 г, 137,8 ммоль) и через 30 мин реакцию гасят водн. HCl (0,1 Н), до рН 4, и смесь экстрагируют DCM (300 мл). Экстракт промывают последовательно водн. NaHCO3 (100 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (100 мл). Сушка (Na 2SO4) с последующим удалением растворителя дает спирт С3 (15,7 г, 93%) в виде бесцветного масла. Rf=0,45 (гекс. - EtOAc 2:1); [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D=-9,5 (с 0,76, CHCl 3) ; Rf=0,45 (EtOAc-гекс. 1:2).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,81 (д, 3Н), 0,90 (т, 3Н), 1,20 (м, 1Н), 1,36 (м, 1Н), 1,40 (с, 9Н), 1,90 (м, 1Н), 2,55 (дд, 1Н), 2,70 (дд, 1Н), 3,20 (д, 1Н), 3,61 (м, 1Н), 3,90 (м, 1Н), 4,40 (д, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 7,40 (уш.с, 5Н).

Пример 3

Синтез Boc-(3S,4R,5S)-Ist (TBDMS)-OBn (C2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору С3 (15,7 г, 42,9 ммоль) в сухом ДМФ (65 мл) при 0°С добавляют имидазол (8,77 г, 128,8 ммоль), DMAP (1,57 г, 12,81 ммоль) и TBDMS-C1 (19,42 г, 128,8 ммоль). Реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение ночи, затем распределяют между Et2 O (200 мл) и последовательно водн. HCl (100 мл, 0,1 н), водн. NaHCO3 (100 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (50 мл). После сушки (Na2SO 4) и удаления растворителя остаток очищают флэш ЖХ (силикагель, гекс.), получая C2 (19,96 г, 97%).

[способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D=10,6 (с 1,01, CHCl 3); Rf=0,73 (EtOAc-Гекс. 1:2).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,15 (с, 6Н), 0,82 (с, 9Н), 0,85 (д, 3Н), 0,89 (т, 3Н), 1,18 (м, 1Н), 1,35 (м, 1Н), 1,41 (с, 9Н), 1,77 (м, 1Н), 2,45 (дд, 1Н), 2,60 (дд, 1Н), 3,62 (м, 1Н), 4,20 (м, 1Н), 4,40 (д, 1Н), 5,05 (д, 1Н), 5,15 (д, 1Н), 7,40 (уш.с, 5Н).

Пример 4

Синтез Boc-(3S,4R,5S)-Ist (TBDMS)-OH (Cl)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору С2 (10,48 г, 21,8 ммоль) в ТГФ (110 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd/C 10% (2,096 г, 20 мас. %). Смесь перемешивают в атмосфере Н 2 (1 атм) в течение 16 ч, затем фильтруют через 0,45 мм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая 7,8 г бесцветного масла. Бесцветные кристаллы (6 г, 70%) получают после кристаллизации в ACN при -20°С. способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 (с 0,594, DCM) [Лит. [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 1,74 (с 2,64, CHCl 3). Synthesis, 1991, 294]; Rf=0,45 (Merck HPTLC, RP-C18, ACN-H2O 8:2).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,18 (с, 6Н), 0,82 (с, 9Н), 0,85 (д, 3Н), 0,89 (т, 3Н), 1,10-1,20 (м, 2Н), 1,42 (с, 9Н), 1,80 (м, 1Н), 2,50 (м, 2Н), 3,58 (м, 1Н), 4,11 (м, 1Н).

Пример 5

Синтез (2S)-2-трет-Бутил(диметил)силилокси-3-метилмасляной кислоты (SAPLB4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К перемешиваемому раствору (S)-2-гидрокси-3-метилмасляной кислоты (21,12 г, 181,9 ммоль) в ДМФ (91 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют имидазол (27,24 г, 400,11 ммоль) и DMAP (6,94 г, 54,56 ммоль). Спустя 5 мин добавляют трет-бутилдиметилхлорсилан (60,31 г, 400,11 ммоль). Смеси дают нагреться до 23°С и перемешивают в течение ночи. Сырую реакционную смесь распределяют между Et2O (250 мл) и водн. HCl (250 мл, 0,1 н). Органическую фазу промывают последовательно водн. NaHCO 3 (250 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (250 мл), сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая биссилилированный продукт в виде светло-желтого масла. Раствор указанного продукта в ТГФ (100 мл) добавляют по каплям (10 мин) к охлажденному (0°С) раствору КОН (30,47 г, 543 ммоль) в ТГФ/Н2 О (543 мл, 181 мл). Спустя 40 мин реакционную смесь распределяют между Н2O (300 мл) и Et 2O (500 мл). Водную фазу распределяют между охлажденной (0°С) водн. HCl (200 мл, 3н) и EtOAc (5×250 мл). Объединенные органические экстракты сушат (Na2SO 4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая SAPLB4 в виде светло-желтого масла (38,38 г, 91%).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,02 (м, 6Н), 0,90 (м, 15Н), 2,08 (м, 1Н), 4,06 (д, 1Н).

Пример 6

Синтез Бензил-(4S)-4-трет-бутил(диметил)силилокси-5-метил-3-оксогексаноата (SAPLB3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору (S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метилмасляной кислоты (15,31 г, 65,9 ммоль) в сухом ТГФ (200 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют CDI (16,04 г, 98,96 ммоль). Спустя 15 мин смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. Полученный раствор охлаждают до -78°С и добавляют через канюлю к хорошо перемешиваемому раствору, охлажденному до -78°С, бензиллитийэнолята (625 мл, 0,37 М), [полученному добавлением по каплям раствора бензилацетата (33,34 мл) в ТГФ (165 мл) к раствору литийдиизопропиламида (0,36 М) в ТГФ/гекс. 3:1 (642 мл) при -78°С]. Температуру следует поддерживать < -75°С. Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 60 мин. Затем смеси дают нагреться до -10°С (30 мин), вновь охлаждают до -78°С и гасят водн. хлоридом аммония (200 мл, нас.), после чего экстрагируют DCM (3×500 мл) при комнатной температуре. Объединенные экстракты промывают последовательно водн. NaHCO3 (500 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (200 мл). Сушка (Na2SO 4) с последующим удалением растворителя дает масло, которое наносят слоем на диоксид кремния С18 и заполняют сверху LC-RPC18 [Lichroprep RPC-18 (40-60 микрон) колонку. Элюирование с использованием градиента ACN-H2O (60-100% ACN)] дает SAPLB3 в виде бесцветного масла (16,1 г, 70%). [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D - 25,0 (с 0,5, МеОН); Rf=0,32 (Merck, RP-C18, ACN-H2O 7:3).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,02 (м, 6Н), 0,92 (м, 15Н), 1,92 (м, 1Н), 3,63 (с, 2Н), 3,80 (с, 2Н), 3,38 (д, 1Н), 5,17 (д, 1Н), 5,20 (д, 1Н), 7,35 (уш.с, 5Н).

Пример 7

Синтез Бензил-(4S)-4-трет-бутоксикарбониламино-5-метил-3-оксогексаноата (SNPLB3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLB3, из Вос-Val-OH (10 г, 46,0 ммоль) получают указанное в заглавии соединение, после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 10:1 - 5:1), в виде масла (6,9 г, 43%).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,77 (д, J=7, 3Н), 0,98 (д, J=7 3Н), 1,44 (с, 9Н), 2,22 (м, 1Н), 3,58 (с, 2Н), 4,31 (м, 1Н), 5,03 (м, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 7,34 (уш.с, 5Н).

ESI-MC Рассчит. для C19 H27NO5: 349,19. Найдено (m/z): 372,1 (M+Na)+.

Пример 8

Синтез Бензил-(2RS,4S)-4-трет-бутил(диметил)силилокси-2,5-диметил-3-оксогексаноата (SAPLB2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Сложный эфир SAPLB3 (15,12 г, 41,49 ммоль) в сухом ТГФ (43 мл) добавляют по каплям к раствору литийдиизопропиламина при -78°С [полученному добавлением по каплям бутиллития (1,6 М раствор в гекс.; 31,12 мл, 49,79 ммоль) к диизопропиламину (7,26 мл, 51,86 ммоль) в сухом ТГФ (83 мл) в атмосфере Ar при -78°С в течение 30 мин]. Смесь перемешивают в течение 0,5 ч и затем добавляют иодметан (52,11 мл, 829,8 ммоль). Смеси дают нагреться до 23°С и потом перемешивание продолжают в течение 24 ч. Добавляют дополнительное количество иодметана (2,67 мл, 42 ммоль) и смесь перемешивают еще 24 ч или до исчезновения исходного материала. Затем смесь распределяют между водн. NH 4Cl (50 мл, нас.) и EtOAc (2×200 мл). Органический слой промывают последовательно водн. NaHCO3 (100 мл, нас.), насыщенным раствором соли (100 мл), сушат (Na 2SO4), фильтруют и концентрируют, получая желтое масло (12 г). Чистый продукт (SAPLB2) получают после очистки путем ЖХ на диоксиде кремния при градиенте гекс. - Et2O 100:0 - 100:2 в виде диастереомерной смеси эпимеров на С2 (10 г, 63%).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,01 (с, 3Н), 0,02 (с, 3Н), 0,91 (м, 15Н), 1,30 (д, 3Н), 2,01 (м, Н), 4,01 (м, 1Н), 5,10 (д, 1Н), 5,15 (д, 1Н), 7,34 (уш.с, 5Н).

Пример 9

Синтез Бензил-(2RS,4S)-4-трет-бутоксикарбониламино-2,5-диметил-3-оксогексаноата (SNPLB2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLB2, исходя из SNPLB3 (10 г, 46,0 ммоль) получают указанное в заглавии соединение, после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 10:1 - 5:1), в виде диастереомерной смеси (1:1) эпимеров на С2 (4,4 г, 62%). Rf=0,4 и 0,37 (диоксид кремния, гекс./EtOAc 3:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,72 (м, 3Н), 0,86 (м, 3Н), 1,37 (м, 3Н), 1,44 (с, 9Н), 2,22 (м, 1Н), 3,79 (м, 1Н), 4,43 (м, 1Н), 5,02 (м, 1Н), 5,16 (м, 2Н), 7,34 (м, 5Н).

ESI-MC Рассчит. для C 20H29NO5: 363,29. Найдено (m/z): 364,1 (М+Н)+.

Пример 10

Синтез Leu-Pro-OBn в виде соли-хлоргидрата (А5)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую Boc-Leu-Pro-OBn (113,8 г, 272 ммоль) добавляют раствор хлористого водорода в диоксане (209 мл, 5,3 н) и перемешивание продолжают в течение 5 ч или до полного превращения по ТСХ (исчезновение исходного материала: Rf=0,47 (гекс. - EtOAc 2:1, диоксид кремния). Раствор концентрируют при пониженном давлении и полученное масло перегоняют с CHCl 3 (3×50 мл), CHCl3-МТВЕ (30 мл - 50 мл), МТВЕ (50 мл) и гекс. (50 мл). Остаток сушат в вакууме (16 ч) для удаления остаточного HCl, получают указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества. А5 (96,4 г, 100%) используют непосредственно, без дополнительной очистки, на следующей стадии, [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 22 - 85,21 (с=1, CHCl3).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,92 (д, J=7,1, 3Н), 0,96 (д, J=7,1, 3Н), 1,55 (м, 1Н), 1,82-2,14 (м, 5Н), 2,26 (м, 1Н), 3,42 (м, 1Н), 3,90 (м, 1Н), 4,32 (уш.с, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 5,01 (д, J=11,5, 1Н), 5,16 (д, J-11,5, 1Н), 7,34 (м, 5Н), 8,40 (уш.с, 3Н).

ESI-MC Рассчит. для С18Н26N 2O3: 318,19. Найдено (m/z): 319,2 (M+H)+.

Пример 11

Синтез TBDMS-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую дегазированный раствор SAPLB2 (20 г, 52,88 ммоль) в ТГФ безв. (158 мл), снабженную трубками для ввода-вывода газа, добавляют 10% Pd/C (6,0 г, 30 мас.%) в атмосфере Ar. Затем через смесь пропускают ток водорода в течение 8 ч или до полного превращения, согласно ТСХ (исчезновение исходного материала). Через полученную смесь барботируют Ar для вытеснения водорода и смесь фильтруют в атмосфере Ar на воронке из синтерированного стекла через слой целита в охлажденную колбу (-5°С), содержащую HOBt (7,17 г, 52,88 ммоль) и HBTU (21,0 г, 55,53 ммоль). Добавляют дополнительное количество ТГФ (158 мл) для промывки целита. К смеси добавляют (при -5°С) NMM (5,8 мл, 52,88 ммоль) и спустя 5 мин охлажденный (-5°С) свежеприготовленный раствор, содержащий: А5 (31,96 г, 89,81 ммоль), NMM (16 мл, 145 ммоль) и ДМФ (120 мл). Реакционной смеси дают нагреться до к.т. и перемешивают 14 ч. Сырую реакционную смесь фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. К оставшемуся раствору ДМФ добавляют EtOAc (300 мл) и промывают последовательно водн. HCl (200 мл, 0,1 н), водн. NaHCO3 (200 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (300 мл). Органическую фазу сушат (Na 2SO4), фильтруют и концентрируют. Полученный материал наносят на диоксид кремния (EtOAc как растворитель) и хроматографируют на силикагеле, элюируя при градиенте растворителя EtOAc:гекс. 1:5 - 1:1, что дает SAPLA4 (26,8 г, 78%) в виде вязкого бесцветного масла. Указанный продукт является 1:1 смесью диастереомеров, Rf=0,5 (диоксид кремния, гекс./EtOAc 1:1, темно-синий/ванилин).

ИК (пленка, ДСМ) 3295, 3060 и 3040, 2957, 2934, 2880, 2858, 1736, 1634, 1528, 1454, 1387, 1252, 1171, 1070 см -1.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,01 (с, 3Н), 0,03 (с, 3Н), 0,85-0,97 (м, 12Н), 0,92 (с, 9Н), 0,93 (с, 9Н), 1,33 (д, J=7,0, 3Н), 1,37 (д, J=7,0, 3Н), 2,40-2,65 (м, 3Н), 1,92-2,28 (м, 4Н), 3,64-3,76 (м, 1Н), 4,69-4,82 (м, 1Н), 5,05 (д, J=11,8, 1H), 5,20 (д, J=11,8, 2H), 6,73 (д, J=8,9, 1Н), 6,98 (д, J=9,0, 1Н), 7,34 (уш.с, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -5,24, -4,81, 15,70, 17,43, 17,57, 18,84, 21,48, 21,61, 18,05, 23,28, 24,43, 24,55, 24,76, 25,68, 28,87, 31,36, 31,77, 41,27, 41,67, 48,68, 48,55, 48,89, 58,71, 66,84, 83,84, 83,29, 128,09, 128,47, 135,40, 169,24, 170,67, 170,89, 171,16, 171,20, 209,11, 211,62.

m/z (FAB) 611,5 [(M+Na) +, 15], 589,5 [(M+H)+, 100]; m/z (FABHRMS) 589,369 045, C32H 52N2O6Si требует (М+Н)+, 589,367 291

Пример 12

Синтез Boc-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К дегазированному раствору SNPLB2 (2,3 г, 6,32 ммоль) в сухом ТГФ (30 мл) добавляют 10% Pd/C (0,74 г, 16 мас.%) и затем гидрируют при атмосферном давлении в течение 5ч 30 мин или до полного превращения, согласно ТСХ (исчезновение исходного материала). Полученную смесь фильтруют через слой целита и добавляют дополнительное количество ТГФ (20 мл) для промывки целита. К отфильтрованному раствору (при -5°С) добавляют ВОР-Cl (1,77 г, 6,96 ммоль) и NMM (765 мкл, 6,91 ммоль) и спустя 30 мин охлажденный (-5°С) раствор, содержащий: А5 (3,15 г, 8,85 ммоль), NMM (1,88 мл, 8,84 ммоль) и ДМФ (14 мл), полученный за 10 мин до добавления. Реакционной смеси дают нагреться до к.т. и перемешивают 17 ч. Сырую реакционную смесь фильтруют и твердые продукты промывают EtOAc (100 мл). Объединенные органические растворы последовательно промывают водн. KHSO4 (50 мл, 10%), водн. NaHCO3 (50 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (50 мл). Органическую фазу сушат (Na2 SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме, и полученный материал хроматографируют на силикагеле, элюируя при градиенте растворителя EtOAc:гекс. 1:4 - 1:1, что дает SNPLA4 (750 мг, 20%) в виде белого твердого вещества. Указанный продукт является смесью диастереомеров. Rf=0,26 и 0,17 (диоксид кремния, гекс./EtOAc 1:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,74-1,04 (м, 12Н), 1,31-1,70 (м, 6Н), 1,43 (с, 9Н), 2,01 (м, 3Н), 2,22 (м, 2Н), 3,60 (м, 2Н), 3,77 (м, 1Н), 4,40 (м, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,69 (м, 1Н), 5,14 (м, 2Н), 6,75 (д, J=8,7, 1Н), 7,04 (д, J=7,8, 1Н), 7,34 (уш.с, 5Н).

13 С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 16,74, 16,91, 20,22, 21,94, 23,53, 24,80, 25,06, 28,48, 29,14, 41,29, 41,41, 46,98, 49,45, 49,64, 51,26, 59,06, 63,70, 64,27, 67,08, 79,86, 80,10, 128,32, 128,48, 128,74, 135,74, 156,28, 169,15, 169,32, 171,18, 171,91.

ESI-MC Рассчит. для C 31H47N3O 7: 573,34. Найдено (m/z): 574,4 [(M+H)] +.

Пример 13

Синтез Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую А5 (2,06 г, 4,78 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°С, добавляют при перемешивании NMM (506 мг, 5,01 ммоль). Через 15 мин добавляют порциями (2S)-2-гидрокси-3-метилбутановую кислоту (гидроксиизовалериановую кислоту) (487 мг, 4,78 ммоль) и DCC (986 мг, 4,78 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до 23°С и перемешивают 14 ч. Суспензию разбавляют CHCl 3 (25 мл) и распределяют между водн. HCl (10 мл, 1н), водн. NaHCO3 (10 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (10 мл), сушат (Na2SO 4) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 1:1 - 1:3), получая SHPLA4 (1,13 г, 80%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,46 (гекс. - EtOAc 1:2).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,81, (д, J=7,0, 3H) 0,92 (м, 6Н), 0,97 (д, J=7,0, 3H), 1,42 (м, 1Н), 1,63 (м, 2Н), 2,00 (м, 3H), 2,19 (м, 2Н), 3,60 (м, 1Н), 3,85 (м, 1Н), 3,88 (д, J=4,8, 1H), 4,46 (м, 1Н), 4,80 (м, 1Н), 5,06 (д, J=12,3, 1Н), 5,14 (д, J=12,3, 1Н), 7,32 (м, 5Н), 7,41 (д, J=8,4, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 15,32, 19,08, 21,38, 23,11, 24,41, 24,69, 28,77, 31,31, 40,54, 46,81, 48,20, 58,82, 66,69, 75,76, 127,93, 128,14, 128,37, 135,28, 171,39, 171,95, 173,94.

Пример 14

Синтез Boc-Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую Вос-валин-ОН (652 мг, 3 ммоль) в DCM (6 мл) при 0°С, добавляют NMM (0,35 мл, 3,15 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин, добавляют порциями А5 (1,065 г, 3 ммоль), HOBt (405 мг, 3,0 ммоль) и DCC (650 мг, 3,15 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до 23°С и перемешивают 14 ч. Суспензию разбавляют DCM (25 мл) и промывают последовательно водн. KHSO4 (2×10 мл, 10%), водн. NaHCO3 (2×10 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (10 мл), сушат (Na 2SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают флэш ЖХ (диоксид кремния, градиент гекс. - EtOAc 2:1 - 1:1), получая SVPIA4 (1,48 г, 93%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,57 (гекс. - EtOAc 1:2).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,83-0,95 (м, 12Н), 1,2-1,4 (м, 1Н), 1,42 (с, 9Н), 1,40-1,51 (м, 1Н), 1,60-1,75 (м, 1Н), 1,82-2,20 (м, 5Н), 3,50-3,60 (м, 1Н), 3,74-3,78 (м, 1Н), 3,91 3,96 (м, 1Н), 4,52-4,57 (с, 1Н), 4,75-4,77 (м, 1Н), 5,04 (уш.с, 1Н), 5,05 (д, J=12,3, 1Н), 5,17 (д, J=12,3, 1Н), 6,60 (д, J=8,4, 1Н), 7,26-7,35 (м, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3 ) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 7,61, 19,19, 21,66, 23,23, 24,43, 24,78, 24,87, 25,55, 28,20, 28,87, 30,91, 33,86, 41,68, 46,73, 48,86, 58,77, 59,74, 66,82, 79,66, 128,08, 128,21, 128,46, 135,47, 155,66, 170,83, 171,33, 171,60.

ESI-MC Рассчит. для С28 Н43N3О 6: 517,32. Найдено (m/z): 518,2 [(M+H)] +.

Пример 15

Синтез Boc-Me-Val-Leu-Pro-OBu (SMPLA4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SVPIA4, исходя из А5 (1,07 мг, 3,00 ммоль) и Boc-(Me)Val-OH (694 мг, 3,00 ммоль) указанное в заглавии соединение получают в виде белого твердого вещества (1,39 г, 87%), после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 2:1 - 1:1). Rf=0,51 (гекс. - EtOAc 1:2).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,83-0,91 (м, 12Н), 1,45 (с, 9Н), 1,93-2,03 (м, 4Н), 2,18-2,22 (м, 2Н), 2,76 (с, 3H), 3,40-3,50 (м, 2Н) 3,55-3,62 (м, 1Н), 3,75-3,85 (м, 1Н), 4,00-4,10 (м, 1Н), 4,50-4,60 (м, 1Н), 4,70-4,82 (м, 1Н), 5,07 (д, J=11,2, 1H), 5,24 (д, J=11,2, 1Н), 6,20 (м, 0,5Н), 6,50 (м, 0,5Н), 7,26-7,35 (м, 5Н).

13 С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 18,43, 19,77, 21,53, 23,23, 24,47, 24,77, 25,89, 25,30, 28,85, 41,25, 46,67, 48,51, 58,75, 64,05, 66,79, 128,06, 128,18, 128,44, 135,49, 170,12, 170,80, 171,66.

ESI-MC Рассчит. для C29H45N 3O6: 531,33. Найдено (m/z): 532,3 (M+H)+.

Пример 16

Синтез Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую SAPLA4 (15,86 г, 26,97 ммоль), добавляют прозрачный бесцветный раствор тетрабутиламмонийфторида 1М в ТГФ (80,9 мл, 80,9 ммоль) и смесь энергично перемешивают при к.т. 15 мин (или до полной конверсии по ТСХ). Реакцию гасят добавлением Н2O (4 мл) и силикагеля (50 г). Сырой материал концентрируют и очищают флэш ЖХ (силикагель, град. гекс.:EtOAc 2:1 - 1:1), получая SAPLA3 (12,2 г, 95%) в виде белого твердого вещества (смесь диастереомеров). Rf=0,36 и 0,29 (диоксид кремния, гекс.:CHCl3:IPA; 1:5:1).

ИК (пленка, DCM) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 3450-3293, 3060 и 3040, 2961, 2946, 2883, 2852, 1746, 1632, 1533, 1454, 1357, 1387, 1265, 1173, 1095, 1045, 1018 см -1.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,71 (д, J=6,8, 3H), 0,81 (д, J=6,6, 3H), 0,88 (д, J=6,5, 3H), 0,91 (д, J=6,5, 3H), 0,94 (д, J=6,5, 3H), 0,99 (д, J=7,1, 3H), 1,07 (д, J=6,5, 3H), 1,36 (д, 6,5, 3H), 1,43-1,52 (м, 2Н), 1,60-1,66 (м, 1Н), 1,93-2,10 (м, 3H), 2,12-2,23 (м, 2Н), 3,53-3,58 (м, 1Н), 3,65 (кв, J=7,1, 1Н), 3,67-3,73 (м, 1Н), 3,89 (кв, J=7,1, 1Н), 3,96 (д, J=4,2, 1Н), 4,22 (д, J=4,1, 1Н), 4,54-4,56 (м, 1Н), 4,58-4,62 (м, 1), 4,69-4,73 (м, 1Н), 5,1 (д, J=12,1, 1H), 5,18 (д, J=12,1, 1H), 6,57 (д, J=8,5, 1H), 6,63 (д, J=8,5, 1H), 7,28-7,38 (м, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 14,06, 14,26, 15,85, 16,48, 20,07, 20,53, 22,02, 22,25, 25,37, 25,46, 29,45, 29,53, 31,59, 32,09, 41,13, 42,29, 49,93, 50,91, 51,02, 59,52, 67,60, 81,02, 128,78, 1,29,2, 169,48, 171,58, 172,17, 209,76.

m/z (FAB) 497,4 [(M+Na) +, 12], 475,5 [(M+H)+, 100]; m/z (FABHRMS) 497,263 162, C26H 38N2O6 требует (M+Na)+, 497,262 757. Анал. Рассчит. для C26H38N 2O6: С, 65,82; Н, 8,02; N, 5,91. Найдено: С, 65,97; Н, 8,18; N, 5,76.

Пример 17

Синтез Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SNPLA4 (750 мг, 1,30 ммоль) в диоксане (15 мл, безв.) добавляют раствор хлористого водорода в диоксане (39 мл, 5,3 н) и смесь перемешивают 5 ч или до полного превращения по ТСХ (исчезновение исходного материала). Раствор концентрируют при пониженном давлении и полученное масло перегоняют с CHCl 3 (15 мл), МТВЕ (15 мл) и гекс. (15 мл). Остаток сушат в вакууме для удаления остаточного HCl, получают пенистое твердое вещество. SNPLA3 (660 мг, колич.) используют непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.

ESI-MC Рассчит. для C26H39 N3O5: 473,29. Найдено 474,2 (М+Н)+.

Пример 18

Синтез Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую SVPLA4 (215 мг, 0,41 ммоль), добавляют раствор хлористого водорода в диоксане (1,5 мл, 5,3 н) и смесь перемешивают 5 ч или до полного превращения по ТСХ. Раствор концентрируют при пониженном давлении и полученное масло перегоняют с CHCl3 (5 мл), МТВЕ (5 мл) и гекс. (5 мл). Остаток сушат в вакууме для удаления остаточного HCl, получают пенистое твердое вещество, SVPLA3 (185 мг, колич.) используют непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,86-0,90 (м, 6Н), 1,04 (д, J=6,3, 3Н), 1,12 (д, J=6,3, 3Н), 1,45-1,55 (м, 1Н), 1-60-1,80 (м, 2Н), 1,82-2,11 (м, 2Н), 2,11-2,25 (м, 1Н), 2,25-2,40 (м, 1Н), 3,50-3,70 (м, 1Н), 3,80-3,95 (м, 2Н), 4,52-4,57 (с, 1Н), 4,70-4,85 (м, 1Н), 5,05 (д, J=12, 1Н), 5,20 (д, J=12,3, 1Н), 7,27-7,37 (м, 5Н), 7,91 (м, 1Н), 8,62 (уш.с, 2Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 18,57, 18,79, 21,83, 23,11, 24,50, 24,67, 24,90, 25,34, 28,92, 30,23, 33,25, 40,40, 47,04, 49,46, 49,94, 59,26, 60,02, 66,88, 128,16, 128,27, 128,51, 135,48, 167,54, 170,80, 171,94.

Пример 19

Синтез (Me)Val-Leu-Pro-OBn (SMPLA3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SVPLA3, исходя из SMPLA4 (940 мг, 1,94 ммоль) указанное в заглавии соединение (828 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества. Указанный продукт используют непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,93 (д, J=6,3, 6H), 1,07 (д, J=6,3, 3H), 1,21 (д, J=6,3, 3H), 1,47 (м, 1Н), 1,73 (м, 2Н), 2,00 (м, 3H), 2,23 (м, 1Н), 2,52 (м, 1Н), 2,83 (уш.с, 3H), 3,56-3,65 (м, 2Н), 3,77 (м, 1Н), 4,59 (м, 1Н), 4,66 (м, 1Н), 5,07 (д, J=12,3, 1Н), 5,19 (д, J=12,3, 1Н), 7,27-7,38 (м, 5Н), 7,90 (м, 1Н), 9,11 (м, 0,5Н), 9,61 (м, 0,5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 13,98, 18,37, 19,57, 21,33, 22,52, 23,16, 24,74, 28,77, 29,78, 31,54, 32,54, 39,87, 46,75, 50,09, 58,91, 66,85, 122,12, 128,06, 128,24, 128,47, 135,43, 166,22, 170,73, 171,54.

ESI-MC Рассчит. для С24Н 38CIN3O4: 431,2. Найдено (m/z): 432,3 (M+H)+.

Пример 20

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SAPIA3 (12,2 г, 25,44 ммоль) в безв. DCM (75 мл) при -5°С в атмосфере Ar добавляют порциями DMAP (0,932 г, 7,6 ммоль), С1 (11,89 г, 30,53 ммоль) и DCC (6,613 г, 32,05 ммоль), выдерживая при этом температуру < -5°С (баня лед-соль). Реакционную смесь перемешивают 14 ч при -5°С и затем фильтруют и концентрируют. Сырой материал перегоняют с ACN, охлаждают (-10°С), фильтруют и концентрируют снова. Полученный продукт растворяют в EtOAc (400 мл) и промывают последовательно водн. KHSO4 (2×200 мл, 10%), насыщенным раствором соли (200 мл), водн. NaHCO3 (200 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (200 мл). Органическую фазу сушат (Na2SO 4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая бесцветное масло, которое хроматографируют на силикагеле, элюируя при градиенте растворителя гекс. - EtOAc 3:1 - 2:1, что дает SAPLA2 (19,35 г, 90%) в виде белой пены (смесь диастереомеров).

ИК (пленка, DCM) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 3365-3200, 3069, 3038, 2959, 2930, 2882, 2857, 1746, 1688, 1640, 1533, 1456, 1389, 1258, 1171, 1086 см-1 .

1H-ЯМР (500 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,01 (с, 3H), 0,03 (с, 3H), 0,05 (с, 3H), 0,07 (с, 3H), 0,77-1,03 (м, 18Н), 0,84 (с, 9Н), 0,85 (с, 9Н), 1,33 (д, J=7,4, 3H), 1,32-1,36 (м, 2Н), 1,49 (д, J=7,5, 3H), 1,38-1,62 (м, 3H), 1,42 (с, 9Н), 1,44 (с, 9Н), 1,51-1,77 (м, 1Н), 1,88-2,37 (м, 3H), 2,17-2,33 (м, 2Н), 2,47-2,74 (м, 2Н), 3,34-3,72 (м, 1Н), 3,72-3,82 (м, 1Н), 3,99-4,40 (м, 1Н), 4,03-4,16 (м, 1Н), 4,49 (д, J=10,3, 1Н), 4,54-4,59 (м, 1Н), 4,63-4,70 (м, 2Н), 4,75 (д, J=4,5, 1Н), 4,77-4,81 (м, 1Н), 4,95-5,19 (м, 2Н), 5,22 (д, J=5,2, 1Н), 5,32 (д, J=10,5, 1Н), 6,38 (д, J=10,9, 1Н), 6,71 (д, J=7,4, 1Н), 6,76 (д, J=8,4, 1Н), 8,60 (д, J=9,5, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -5,05, -4,49, 11,83, 12,03, 13,01, 13,51, 13,83, 14,08, 16,92, 17,10, 17,85, 19,14, 19,65, 21,57, 22,09, 22,96, 23,28, 24,36, 24,60, 24,85, 25,73, 26,97, 27,33, 28,35, 28,46, 28,93, 29,09, 29,65, 34,12, 34,16, 40,45, 40,85, 41,18, 42,20, 46,74, 46,16, 47,99, 48,34, 48,90, 49,42, 57,62, 58,81, 58,96, 60,46, 66,62, 66,88, 68,18, 69,69, 78,98, 79,24, 79,84, 82,95, 128,08-128,49, 135,48 135,61, 155,85, 158,27, 157,44, 168,40, 169,07, 170,65, 170,86, 171,42, 171,79, 203,09 205,97.

m/z (FAB) 846,6 [(М+Н)+, 15], 746,6 (100); m/z (FABHRMS) 868,516 630, C46H75 N3O10Si требует (M+Na) + 868,511 930

Пример 21

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую SNPLA3 (хлоргидрат) (660 мг, 1,12 ммоль) в DCM (15 мл, безв.) при 0°С добавляют NMM (0,19 мл). Спустя 15 мин добавляют порциями С1 (632 мг, 1,62 ммоль), HOBt (266 мг, 1,73 ммоль) и DCC (331 мг, 1,60 ммоль). Колбе дают нагреться до комнатной температуры и перемешивание продолжают в течение ночи. Сырую реакционную смесь распределяют между DCM (50 мл) и водн. KHSO4 (2×20 мл, 10%). Органическую фазу промывают последовательно водн. NaHCO 3 (2×20 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (20 мл), сушат (Na2SO4 ), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный белый твердый продукт очищают флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 4:1 - 1:1), получая указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества (700 мг, 73%, смесь диастереомеров).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,05 (с, 3H), 0,08 (с, 3H), 0,09 (с, 3H), 0,68-1,05 (18Н, м), 0,87 (9Н, с), 1,05-1,85 (12Н, м), 1,42 (9Н, с), 1,85-2,10 (3H, м), 2,11-2,31 (2Н, м), 2,32-2,46 (2Н, м), 2,47-2,60 (м, 2Н), 3,34-3,90 (2Н, м), 3,93-4,30 (2Н, м), 4,50-4,89 (6Н, м), 4,90-5,12 (2Н, м), 5,07 (д, J=12,2, 2Н), 5,18 (д, J-12,2, 2Н), 5,60 (1Н, д, J=9,7), 5,67 (1H, д, J=10,2), 5,89 (1H, д, J=11,2), 6,56 (1H, д, J=7,3), 6,70 (1H, д, J=8,3), 6,76 (1H, д, J=6,8), 6,94 (д, J=6,8, 1H), 7,01-7,19 (м, 1H), 7,32 (уш.с, 5Н), 8,17 (1H, д, J=7,8), 8,28 (д, J=7,8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C45H79N 4O9Si: 844,54. Найдено (m/z): 845,5 (M+H)+.

Пример 22

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLA2, исходя из SHPLA4 (850 мг, 2,0 ммоль) и С1 (935 мг, 2,4 ммоль) указанное в заглавии соединение получают (1,53 г, 97%) после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 3:1 - 2:1). Rf=0,63 (гекс. - EtOAc 2:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) смесь BocNH ротамеров: способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,04 (с, 3H), 0,06 (с, 3H), 0,88 (с, 9Н), 0,78-1,04 (м, 18Н), 1,10-2,80 (м, 11Н), 1,44 (с, 9Н), 1,46 (с, 9Н), 3,57 (м, 2Н), 3,74 (м, 1Н), 3,85 (м, 1Н), 4,03 (м, 1Н), 4,23 (д, J=4,8, 1H), 4,48 (м, 1Н), 4,85 (м, 1Н), 4,90 (д, J=10, 1Н), 5,05 (м, 1Н), 5,20 (д, J=10, 1Н), 5,23 (д, J=10, 1Н), 6,64 (д, J=6,4, 1Н), 6,88 (д, J=8,6, 1Н), 7,32 (м, 5Н), 8,54 (д, J=8,3, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -5,14, -4,58, 11,84, 12,97, 17,78, 17,92, 18,98, 21,05, 23,11, 23,49, 25,61, 26,92, 28,36, 28,70, 30,12, 33,68, 38,72, 42,86, 46,51, 48,18, 58,67, 60,24, 66,52, 71,14, 79,40, 82,66, 127,96, 128,01, 128,33, 135,36, 157,30, 169,92, 171,10, 171,69, 171,97.

ESI-MC: Рассчит. для C42H 71N3O9: 789,50. Найдено 790,5 (М+Н)+.

Пример 23

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-VaI-Leu-Pro-OBn (SVPLA2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза SNPLA2, исходя из SVPLA3 (хлоргидрат) (1,2 г, 2,64 ммоль), С1 (1,23 г, 3,17 ммоль), DCC (654 мг, 3,17 ммоль), HOBt (464 мг, 3,43 ммоль), NMM (0,35 мл) и DCM (6 мл). Указанное в заглавии соединение получают в виде белого твердого вещества (1,87 г, 89%) после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 3:1 - 2:1).

1H-ЯМР (500 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,07 (уш.с, 6Н), 0,81-0,96 (м, 27Н), 1,11-1,38 (м, 3H), 1,39-1,47 (уш.с, 7Н), 1,51 (уш.с, 3H), 1,58-1,70 (м, 3H), 1,70-1,84 (м, 1Н), 1,86-2,60 (м, 4Н), 2,28-2,58 (м, 2Н), 3,58-3,62 (м, 1Н), 3,62-3,73 (м, 1Н), 3,73-3,90 (м, 1Н), 4,05-4,12 (м, 1Н), 4,13-4,19 (м, 1Н), 4,19-4,23 (м, 1Н), 4,49-4,54 (м, 1Н), 4,77-5,06 (м, 2Н), 5,18 (д, J=12,3, 1H), 5,55 (уш.с, 1Н), 6,44-6,61 (м, 2Н), 7,30-7,35 (м, 5Н), 7,94-7,98 (м, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C42H72N 4O8Si: 788,51. Найдено (m/z): 789,5 (М+Н)+.

Пример 24

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-(Me)Val-Leu-Pro-OBn (SMPLA2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую SMPLA3 (хлоргидрат) (176 мг, 0,38 ммоль) в DCM (2 мл, безв.) при 0°С добавляют NMM (41 мкл, 0,38 ммоль). Спустя 15 мин добавляют порциями С1 (176 мг, 0,46 ммоль) и DCC (93 мг, 0,46 ммоль). Колбе дают нагреться до комнатной температуры и перемешивание продолжают в течение ночи. Реакционную смесь распределяют между DCM (10 мл) и водн. KHSO4 (2×5 мл, 10%). Органическую фазу промывают последовательно водн. NaHCO3 (2×5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл), сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный белый твердый продукт очищают флэш ЖХ (диоксид кремния, градиент гекс. - EtOAc 3:1 - 2:1), получая SMPLA2 (127 мг, 42%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,51 (гекс. - EtOAc 1:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -0,08 (с, 3H), 0,05 (с, 3H), 0,75-0,86 (м, 27Н), 1,00-1,43 (м, 11Н), 1,52-1,65 (м, 1Н), 1,68-1,80 (м, 1Н), 1,83-2,01 (м, 3H), 2,08-2,24 (м, 2Н), 2,40 (м, 2Н), 2,87 (с, 3H), 3,50-3,57 (м, 3H), 3,71-3,76 (м, 1Н), 4,29 (м, 1Н), 4,47-4,63 (м, 4Н), 5,01 (д, J=12,9, 1Н), 5,11 (д, J=12,9, 1Н), 6,41 (д, J=7,8, 0,5H), 6,62 (д, J=7,8, 1Н), 7,01 (д, J=7,8, 0,5H), 7,23-7,28 (м, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,56, 13,57, 13,98, 17,83, 18,87, 19,46, 21,77, 22,94, 23,11, 24,50, 24,71, 24,80, 25,64, 25,76, 25,97, 27,29, 28,18, 28,75, 30,40, 34,18, 39,28, 40,85, 46,58, 48,61, 57,03, 58,65, 62,26, 66,63, 69,21, 78,72, 127,93, 128,05, 128,11, 128,33, 135,42, 155,91, 169,76, 170,48, 171,56, 172,01.

ESI-MC Рассчит. для С43H74N 4O8Si: 802,53. Найдено (m/z): 825,5 (M+Na)+.

Пример 25

Синтез Ist-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору, содержащему SAPLA2 (19,32 г, 22,8 ммоль) в безв. диоксане (78 мл), добавляют раствор соляной кислоты в безводном диоксане (4,2 н, 220 мл, 924 ммоль). Полученный раствор перемешивают при 21°С в течение 4,30 ч или до полного исчезновения исходного материала (ТСХ). Затем раствор концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в DCM (25 мл) и концентрируют для удаления остаточного HCl. Полученный остаток сушат в вакууме до полного удаления следов свободного HCl (3 ч), получая 17,3 г SAPLA1 (15,1 г, колич.) в виде белой пены (смесь диастереомеров).

Пример 26

Синтез Ist-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLA1, исходя из SNPLA2 (700 мг, 0,82 ммоль) получают указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества (545 мг, колич.), после осаждения Et2O (смесь диастереомеров).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,86-1,04 (м, 18Н), 1,02-1,22 (м, 3H), 1,23-1,58 (м, 5Н), 1,60-1,80 (м, 2Н), 1,82-2,01 (м, 3H), 2,24 (м, 2Н), 2,40-2,85 (м, 2Н), 3,24 (м, 1Н), 3,45 (м, 1Н), 3,60 (м, 1Н), 3,70-4,05 (м, 2Н), 4,46 (м, 2Н), 4,47-4,75 (м, 2Н), 5,10 (уш.с, 2Н), 7,34 (уш.с, 5Н), 7,98 (уш.с, 1Н), 8,10 (уш.с, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для С34H54N 4O7: 630,40. Найдено (m/z): 631,4 (М+Н)+.

Пример 27

Синтез Ist-Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLA1, исходя из SHPLA2 (1,53 г, 1,94 ммоль) получают указанное в заглавии соединение (1,12 г, колич.) в виде белого твердого вещества после осаждения Et2O.

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,86-1,04 (м, 18Н), 1,10-1,22 (м, 3H), 1,42 (м, 2Н), 1,70 (м, 2Н), 1,97 (м, 3H), 2,24 (м, 2Н), 2,83 (м, 1Н), 2,97 (м, 1Н), 3,34 (м, 1Н), 3,61 (м, 1Н), 3,75 (м, 1Н), 3,90 (м, 1Н), 4,56 (м, 2Н), 4,75 (м, 1Н), 5,04 (д, J=11, 1Н), 5,18 (д, J=11, 1Н), 7,34 (уш.с, 5Н), 8,21 (уш.с, 3H).

ESI-MC Рассчит. для C 31H49N3O 7: 575,36. Найдено (m/z): 576,3. (М+Н)+ .

Пример 28

Синтез Ist-Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLA1, исходя из SVPLA2 (1,87 г, 2,36 ммоль) получают указанное в заглавии соединение (1,40 г, колич.) в виде белого твердого вещества после осаждения Et2O.

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,01 (м, 15Н), 1,01-1,10 (м, 3H), 1,20-1,79 (м, 5Н), 1,81-2,05 (м, 4Н), 2,05-2,15 (м, 2Н), 2,50-2,68 (м, 2Н), 2,82-3,1 (м, 1Н), 3,20-3,35 (м, 1Н), 3,50-3,70 (м, 1Н), 3,80-3,90 (м, 1Н), 4,18-4,30 (м, 1Н), 4,35-4,45 (м, 1Н), 4,45-4,55 (м, 1Н), 4,60-4,70 (м, 1Н), 5,02 (д, J=12,3, 1Н), 5,15 (д, J=12,3, 1Н), 7,28-7,38 (м, 5Н), 7,5 (уш.с, 1Н), 7,9 (уш.с, 3H), 8,15 (уш.с, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 10,81, 14,67, 18,29, 19,32, 21,48, 23,14, 24,48, 24,76, 25,81, 30,29, 33,41, 40,31, 46,96, 49,35, 59,14, 59,94, 60,67, 66,94, 128,11, 128,32, 128,54, 135,32, 171,58, 171,74, 171,80, 172,57.

ESI-MC Рассчит. для C31H 50N4O6: 574,35. Найдено (m/z): 575,3 (M+H)+.

Пример 29

Фенациловый эфир N-трет-бутилоксикарбонилтреонина (D3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К перемешиваемой суспензии Boc-Thr-OH (21,91 г, 0,1 моль) в EtOAc (200 мл) при 0°С добавляют TEA (14 мл, 0,1 моль) и бромацетофенон (19,0 г, 0,1 моль). Реакционной смеси дают нагреться до 20°С, перемешивают 2 дня и затем разбавляют EtOAc (500 мл). После промывания последовательно водн. HCl (200 мл, 0,1 н), Н2O (100 мл), водн. NaHCO3 (200 мл, 1 н) и насыщенным раствором соли (200 мл) и сушки (Na2SO 4), фильтруют и концентрируют в вакууме, остаток порошкуют с Et2O и фильтруют. Полученный твердый продукт сушат в темноте, получая D3 (28,6 г, 85%). Rf=0,55 (гекс. - EtOAc 1:1, диоксид кремния); т.пл.=114,2°С; [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 22 -29,4 (с 2, EtOAc).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 1,31 (д, J=6,6, 3Н), 1,46 (с, 9Н), 3,77 (уш.д, ОН), 4,44 (дд, J=9,6, 1Н), 4,6 (кв, 1Н), 5,34 (д, J=16,5, 1Н), 5,37 (уш.д, ОН) 5,68 (д, J=16,8, 1Н), 7,51 (т, 2Н), 7,65 (т, 1Н), 7,92 (дд, 2Н).

Пример 30

N-Бензилоксикарбонил-N,О-диметил-L-тирозин (E1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К перемешиваемому раствору Z-Tyr-OH (63,24 г, 200 ммоль) в ТГФ (900 мл) при 0°С добавляют порциями тонко измельченный КОН (112,72 г, 2 моль) с последующим добавлением тетрабутиламмонийбисульфата (6,36 г, 10 мас. %). Затем добавляют по каплям за 30 мин диметилсульфат (127,2 мл, 1,33 моль), выдерживая реакционную смесь при температуре ниже 4°С. Реакционную смесь перемешивают дополнительно 30 мин и добавляют Н 2O (950 мл). После перемешивания в течение 5 ч при 0°С реакционную смесь разбавляют диэтиловым эфиром (1500 мл), водный слой отделяют и органический слой экстрагируют водн. NaHCO 3 (2×500 мл, нас.). Объединенные водные слои подкисливают до рН 1 с помощью водн. 1М KHSO4 и экстрагируют EtOAc (5×500 мл). Органические слои объединяют, сушат (Na 2SO4), фильтруют и концентрируют. Остаток осаждают диэтиловым эфиром и фильтруют, получая Е1 в виде белого твердого вещества {53,85 г, 78%).

[способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 22 -57,16 (с 2,23 CHCl3) (лит.[способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D -48 (с=2,23 CHCl 3) JACS, 112, 21, 1990).

Пример 31

Фенилациловый эфир О-(бензилоксикарбонил-N,О-диметил-L-тирозил) N-трет-бутилоксикарбонил-L-треонина (D2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору D3 (33,72 г, 100 ммоль) в DCM при 0°С добавляют DMAP (3,66 г, 30 ммоль) и Е1 (34,33 г, 100 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин при 0°С добавляют DCC (22,7 г, 110 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Затем смесь фильтруют и фильтрат концентрируют досуха. Остаток перегоняют с ACN (100 мл), вновь фильтруют и фильтрат концентрируют. Остаток растворяют в EtOAc (200 мл) и распределяют последовательно между водн. KHSO4 (100 мл, 10%), водн. NaHCO 3 (100 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (100 мл). Органическую фазу сушат (Na2SO 4), фильтруют и концентрируют. Остаток очищают флэш ЖХ (силикагель, градиент EtOAc-гекс.1:4 - 1:2), получая D2 (65,5 г, 98%). [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 22 -39,56 (с 1,06 CHCl3); Rf=0,55 (EtOAc:гекс.1:1).

Пример 32

О-(Бензилоксикарбонил-N,О-диметил-L-тирозил)-N-трет-бутилоксикарбонил-L-треонин (D1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К гомогенному раствору D2 (24,49 г, 38,4 ммоль) в водн. АсОН (211 мл, 90%) при 0°С добавляют порошкообразный Zn (18,65 г, 288,3 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 3 ч до исчезновения исходного материала (по ТСХ). Реакционную смесь фильтруют через целит и промывают EtOAc (200 мл). Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток перегоняют с Et2O (200 мл) и фильтруют. Фильтрат распределяют последовательно между водн. KHSO 4 (100 мл, 10%) и насыщенным раствором соли (100 мл). Органическую фазу сушат (Na2SO4 ) и концентрируют, получая масло, которое очищают флэш ЖХ (Lichroprep RPC18, ACN:H2O 1:1 (800 мл, затем 7:3 (600 мл)], получая D1 (15,53 г, 74%) в виде белого твердого вещества. [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 24 -27,6 (с 2,187, DCM); лит.[способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D -20,5 (с 2, DCM), JOC, 62, 2, 1997. Rf=0,58 [ACN/H2O (7:3)].

ИК (пленка, DCM) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 3400, 3050, 2900, 1715, 1613, 1514, 1456, 1402, 1368, 1248, 1165, 1061, 1036 см-1.

1H-ЯМР (200 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 1,29 (д, J=6,5, 3H), 1,45 (с, 9Н), 2,74 (с, 3H), 2,75 (с, 3H), 2,76-3,31 (м, 2Н), 3,77 (с, 3H), 4,42-4,52 (м, 1Н), 4,66-4,83 (м, 1Н), 5,01-5,16 (м, 2Н), 5,30-5,53 (м, 2Н), 6,72-6,81 (м, 2Н), 6,95-7,09 (м, 2Н), 7,35 (уш.с, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 16,44, 16,82, 28,23, 31,71, 31,97, 33,82, 33,68, 55,14, 56,87, 56,75, 60,39, 60,58, 67,51, 67,76, 71,83, 72,47, 80,40, 113,91, 127,59, 128,69, 129,77, 136,42, 156,00, 156,19, 156,71, 158,31, 159,47, 169,78.

m/z (FAB) 567,1 [(M+Na) +, 46], 545,1 [(M+H)+, 7], 445,1(100); m/z (FABHRMS) 567,233 280, C28H 35N2O9 требует (М+Na)+567,231 851.

Пример 33

Синтез Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPL7)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую HBTU (9,079 г, 23,9 ммоль), HOBt (3,490 г, 22,8 ммоль), SAPLA1 (15,258 г, 22,8 ммоль) и D1 (12,417 г, 22,8 ммоль), вводят через канюлю в атмосфере Ar при -5°С раствор безв. DCM (296 мл) и безв. ДМФ (148 мл). После 5 мин перемешивания добавляют по каплям с помощью шприца DIPEA (15,9 мл, 91,2 ммоль), выдерживая температуру ниже -5°С. Полученную реакционную смесь перемешивают 21 ч при -5°С. Добавляют МТВЕ (300 мл) и KHSO4 (200 мл, 10%) и образовавшуюся смесь фильтруют и концентрируют до 300 мл. Добавляют дополнительное количество МТВЕ (200 мл), слои разделяют и органическую фазу последовательно обрабатывают водн. KHSO 4 (200 мл, 10%), насыщенным раствором соли (200 мл), водн. NaHSO4 (200 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (200 мл). Органическую фазу сушат (Na 2SO4) и концентрируют при пониженном давлении, получая желтое масло (30 г). Масло растворяют в МТВЕ и обрабатывают гекс. при перемешивании. Осаждается твердый продукт, добавляют дополнительное количество гекс. Твердый продукт фильтруют, получая SAPL7 (18,33 г, 69% выход) в виде белого твердого вещества. Указанный продукт является смесью двух диастереомеров. Rf=0,80 и 0,59 (гекс.:EtOAc 1:2).

ИК (пленка, DCM) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 3350, 2961, 2927, 2893, 1744, 1688, 1638, 1514, 1454, 1368, 1304, 1248, 1171, 1067, 1036 см-1 .

1H-ЯМР (500 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,74-0,92 (м, 18Н), 1,05-1,15 (м, 2Н), 1,18-1,20 (м, 2Н), 1,23 (д, J=6,8, 3H), 1,25 (д, J=6,8, 3H), 1,29 (д, J=6,9, 3H), 1,42 (с, 9Н), 1,45 (с, 9Н), 1,50-1,66 (м, 3H), 1,89-2,02 (м, 4Н), 2,17-2,25 (м, 2Н), 2,37-2,42 (м, 1Н), 2,81 (с, 3H), 2,88 (с, 3H), 2,91 (с, 3H), 2,95 (с, 3H), 2,84-2,93 (м, 2Н), 3,17-3,25 (м, 1Н), 3,53-3,59 (м, 1Н), 3,75 (с, 3H), 3,88-3,98 (м, 4Н), 4,49 (д, J=3,1, 1Н), 4,51 (д, J=3,1, 1Н), 4,53-4,57 (м, 1Н), 4,68-4,72 (м, 1Н), 4,96-4,99 (м, 1Н), 5,02-5,33 (м, 4Н), 5,02 (д, J=3,2, 1Н), 5,23 (д, J=3,1, 1Н), 5,26-5,33 (м, 1Н), 5,47 (1д, J=9,5, 1H), 6,74 (д, J=7,8, 2H), 6,77 (д, J=7,7, 2H), 7,08 (д, J=7,7, 2H), 7,17 (д, J=7,5, 1H), 7,21 (д, J=9,5, 1H), 7,23-7,36 (м, 10Н), 7,75 (д, J=7,9, 1H), 7,79 (д, J=8,2, 1H).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,95, 13,27, 15,16, 16,47, 17,33, 18,79, 21,28, 23,65, 24,65, 24,72, 27,09, 28,08, 28,93, 31,20, 31,32, 33,62, 33,98, 38,38, 41,01, 47,12, 49,38, 54,96, 55,17, 57,89, 58,83, 60,01, 60,16, 67,18, 71,05, 71,32, 80,34, 81,24, 113,89, 127,51, 128,59, 129,69, 129,77, 135,52, 136,77, 156,93, 158,27, 169,87, 170,62, 171,15, 171,85, 172,39, 204,88.

m/z (FAB) 1181,2 [(M+Na) +, 20], 1159,2 [(M+H)+, 80], 1059,2 (100). Анал. рассчит. C62H 87N5O16: С, 64,30; Н, 7,502; N, 6,05. Найдено: С, 64,14; Н, 7,66; N, 5,95.

Пример 34

Синтез Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPL7)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL7, исходя из SNPLA1 (150 мг, 0,22 ммоль) и D1 (122 мг, 0,22 ммоль), указанное в заглавии соединение получают в виде белого твердого вещества (130 мг, 51%), после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 2:1 - 1:3) (смесь диастереомеров).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,74-1,03 (м, 18Н), 1,16-1,37 (м, 10Н), 1,45 (с, 9Н), 1,68 (м, 3H), 1,99 (м, 4Н), 2,22 (м, 2Н), 2,48 (м, 1Н), 2,82 (с, 3H), 2,84-3,10 (м, 2Н), 3,19 (м, 1Н), 3,51-3,69 (м, 2Н), 3,75 (с, 3H), 3,72-4,02 (м, 3H), 4,18 (м, 1Н), 4,50-4,73 (м, 4Н), 5,00-5,27 (м, 5Н), 5,49 (м, 2Н), 6,54 (д, J=9,2, 1Н), 6,78 (д, J=6,8, 2Н), 7,02 (д, J=6,8, 2Н), 7,18 (м, 1Н), 7,23-7,36 (м, 10Н), 7,52 (д, J=6,8, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для С 62Н88N6O 15: 1156,63. Найдено 1158,3 (М+Н)+ .

Пример 35

Синтез Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hiv-Leu-PrO-OBn (SHPL7)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL7, исходя из SHPLA1 (1,12 г, 1,94 ммоль) и SAPLD1 (544,6 мг, 1,94 ммоль), указанное в заглавии соединение (1,045 г, 61%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 1:1 - 1:2). Rf=0,46 (гекс. - EtOAc 1:2).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,74-1,02 (м, 18Н), 1,20 (м, 5Н), 1,40 (м, 3H), 1,46 (с, 9Н), 1,62 (м, 2Н), 1,82-2,20 (м, 3H), 2,20 (м, 2Н), 2,50 (м, 1Н), 2,78 (с, 3H), 2,90 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,67 (с, 3H), 3,79 (м, 1Н), 3,88 (м, 1Н), 4,06 (м, 2Н), 4,40 (м, 2Н), 4,82 (м, 2Н), 4,94 (м, 1Н), 4,98 (м, 1Н), 5,08 (м, 1Н), 5,28 (м, 3H), 5,56 (д, J=6,2, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 6,98 (д, J=6,5, 1Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,34 (м, 10Н), 7,52 (д, J=6,2, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,27, 13,77, 13,95, 16,75, 17,46, 18,31, 20,78, 20,96, 23,09, 24,35, 24,53, 26,74, 27,93, 28,63, 30,17, 33,76, 39,06, 40,01, 46,69, 48,17, 54,89, 57,04, 57,68, 58,65, 60,20, 60,60, 66,74, 67,08, 68,31, 70,30, 78,49, 79,90, 113,62, 127,36, 127,70, 128,14, 128,18, 128,31, 129,64, 135,19, 136,31, 155,86, 156,61, 158,09, 169,77, 170,70, 171,06, 171,17, 173,78.

ESI-MC Рассчит. для C59H83 N5O15: 1101,59. Найдено 1102,7 (M+H)+.

Пример 36

Синтез Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Val-Leu-Pro-OBn (SVPL7)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL7, исходя из SVPLA1 (1,44 г, 2,37 ммоль) и D1 (1,29 г, 2,37 ммоль), указанное в заглавии соединение (1,96 г, 75%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 2:1 - 1:3). Rf=0,56 (EtOAc).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,83-0,95 (м, 15Н), 1,0-1,22 (м, 4Н), 1,23-1,44 (м, 9Н), 1,60-1,65 (м, 1Н), 1,87-2,01 (м, 4Н), 2,09-2,20 (м, 3H), 2,77 (уш.с, 8Н), 2,84-3,01 (м, 1Н), 3,17-3,24 (м, 1Н), 3,51-3,60 (м, 1Н), 3,73 (с, 3H), 3-80-3,90 (м, 2Н), 4,03-4,15 (м, 1Н), 4,25-4,40 (м, 2Н), 4,40-4,52 (м, 1Н), 4,70-4,80 (м, 2Н), 5,00-5,26 (м, 4Н), 5,34-5,36 (м, 1Н), 5,58 (м, 1Н), 6,75 (д, 2Н, J=7,8), 6,96-7,09 (м, 1Н),7,04 (д, 2Н, J=8,1), 7,04-7,12 (м, 1Н), 7,16-7,20 (м, 1Н), 7,18-7,30 (м, 10Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,43, 13,63, 17,17, 18,35, 19,21, 21,40, 23,23, 24,49, 24,67, 26,87, 28,10, 28,79, 30,48, 32,11, 33,84, 38,47, 40,37, 41,22, 46,80, 48,61, 55,04, 56,88, 57,95, 58,75, 59,25, 60,82, 66,87, 67,33, 69,40, 70,50, 76,44, 80,45, 113,58, 127,51, 127,74, 127,88, 128,10, 128,25, 128,33, 128,46, 128,72, 129,64, 129,77, 135,35, 136,37, 156,77, 158,29, 169,83, 170,57, 171,3, 171,4, 172,81.

ESI-MC Рассчит. для С59H 84N6O14: 1100,60. Найдено (m/z): 1101,7 (M+H)+.

Пример 37

Синтез Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hip-Leu-Pro-OH (SAPL6)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SAPL7 (18,33 г, 15,8 ммоль) в ТГФ (без стабилизатора, 500 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd(OH)2-C (20% Pd, 7,33 г, 40% м/м). Смесь перемешивают в атмосфере Н2 (1 атм) в течение 20 ч, затем фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Добавляют толуол (30 мл) и вновь концентрируют при пониженном давлении и глубоком вакууме, получая SAPL6 (14,78 г, колич.) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (500 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,79-1,08 (м, 18Н), 1,09-1,18 (м, 3H), 1,26 (уш.с, 3H), 1,29 (д, J=7,1, 3H), 1,47 (с, 9Н), 1,50-1,66 (м, 3H), 1,84-1,94 (м, 1Н), 1,90-2,28 (м, 4Н), 2,35-2,50 (м, 4Н), 2,30-2,35 (м, 1Н), 2,44-3,18 (м, 4Н), 2,60 (м, 3H), 3,53-3,61 (м, 1Н), 3,77 (с, 3H), 3,88-4,07 (м, 4Н), 4,12-4,72 (м, 4Н), 5,18-5,24 (м, 1Н), 5,24 (уш.с, 1Н), 6,84 (д, J=7,9, 2Н), 7,08 (д, J=8,0, 2Н), 7,13 (д, J=8,2, 1Н), 7,18 (д, J=8,2, 1Н), 7,62-7,68 (уш.с, 1Н).

m/z (FAB) 972,7 [(M+K)+, 33], 934,9 (М)+, 100].

Пример 38

Синтез Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Aip-Leu-Pro-OH (SNPL6)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SNPL7 (130 мг, 0,11 ммоль) в смеси IPA:Н2O (2:1, 4 мл: 2 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd(OH)2-C (20% Pd, 45 мг, 35% м/м). Смесь перемешивают в атмосфере Н 2 (1 атм) в течение 20 ч, затем фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Добавляют IPA (10 мл) и вновь концентрируют при пониженном давлении и глубоком вакууме, получая SNPL6 (100 мг, колич.) в виде белого твердого вещества.

ESI-MC Рассчит. для C47H76N 6O13: 932,55. Найдено 934,0 (М+Н) +.

Пример 39

Синтез Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hiv-Leu-Pro-OH (SHPL6)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL6, исходя из SHPL7 (1,045 г, 0,95 ммоль). Указанное в заглавии соединение (825 мг, 99%) получают в виде белого твердого вещества.

ESI-MC Рассчит.для C44H 71N5O13: 877,50. Найдено 878,5 (М+Н)+.

Пример 40

Синтез Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Val-Leu-Pro-OH (SVPL6)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL6, исходя из SVPL7 (250 мг, 0,23 ммоль). Указанное в заглавии соединение (195 мг, 97%) получают в виде белого твердого вещества.

ESI-MC Рассчит. для C44H 72N6O12: 876,56. Найдено (m/z): 877,5 (М+Н)+.

Пример 41

Синтез цикло-N(Ме)-О(Me)-Tyr-O-(Boc-Thr)-Ist-Hip-Leu-Pro (SAPL5)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В охлажденный (-5°С) 5 л реактор, снабженный механической мешалкой, содержащий ACN (3,2 л), добавляют в атмосфере Ar при перемешивании HATU (14,436 г, 37,9 ммоль) и HOAt (5,254 г, 38,6 ммоль). Добавляют SAPL6 (14,77 г, 15,8 ммоль), растворенный в ACN (500 мл). NMM (3,65 мл, 33,18 ммоль) добавляют по каплям с помощью шприца, поддерживая температуру ниже -5°С. Полученной реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают 20 ч. Растворитель упаривают при пониженном давлении. Сырой продукт перегоняют с EtOAc (500 мл) и раствор фильтруют для удаления осадка. Раствор промывают последовательно воды. KHSO 4 (2×500 мл), насыщенным раствором соли (500 мл), водн. NaHCO3 (500 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (500 мл). Органическую фазу сушат (Na 2SO4) и концентрируют при пониженном давлении, получая желтое твердое вещество (17,52 г), которое очищают флэш-хроматографией (ЖХ) (силикагель, град. гекс.:EtOAc 3:1 - 1:1), получая SAPL5 (9,83 г, 68%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,60 (гекс.:EtOAc 1:3). [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D -209,4 (с 0,3, CHCl 3).

ИК (пленка, DCM) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 3343, 2961, 2927, 2893, 1734, 1640, 1514, 1454, 1368, 1302, 1248, 1167, 1018 см-1.

1H-ЯМР (500 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,78 (д, J=7,1, 3H), 0,85 (д, J=7,0, 3H), 0,87 (д, J=7,0, 3H), 0,89-0,93 (м, 9Н), 1,10-1,20 (м, 1Н), 1,20 (д, J=6,4, 3H), 1,30 (д, J=6,9, 3H), 1,36 (м, 2Н), 1,40 (м, 2Н), 1,44 (с, 9Н), 1,48-1,72 (м, 2Н), 1,72-1,78 (м, 1Н), 1,83-1,88 (м, 1Н), 2,01-2,17 (м, 3H), 2,27-2,29 (м, 1Н), 2,47-2,53 (м, 1Н), 2,53 (с, 3H), 2,93 (уш.с, 1Н), 3,14-3,19 (м, 2Н), 3,34-3,37 (дд, J 1=14,8, J2=4,l, 1Н), 3,54-3,56 (дд, J1 =10,5, J2=4,l, 1Н), 3,58-3,63 (м, 1Н), 3,68-3,72 (м, 1Н), 3,78 (с, 3H), 3,94-3,98 (м, 1Н), 3,98 (кв, J=7,5, 1Н), 4,07-4,11 (3д, J=3,8, 1Н), 4,57-4,61 (м, 2Н), 4,77-4,81 (м, 1Н), 4,97-4,98 (кв, J=3,5, 1Н), 5,02 (д, J=10,5, 1Н), 5,18 (д, J=4,2, 1Н), 6,81 (д, J=8,5, 2Н), 7,05 (д, J=8,5, 2Н), 7,19 (д, J=10,2, 1Н), 7,64 (д, J=10,1, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,56, 14,68, 14,97, 15,27, 16,61, 18,45, 20,64, 23,50, 24,71, 24,78, 26,92, 27,73, 27,94, 31,55, 33,94, 33,94, 38,27, 38,52, 40,64, 46,86, 49,54, 49,65, 55,16, 55,19, 55,84, 57,12, 65,96, 67,30, 71,00, 80,27, 81,41, 114,02, 130,22, 158,53, 168,30, 169,31, 170,12, 170,29, 171,20, 172,38, 204,51.

m/z (FAB) 938,9 [(M+Na)+, 55], 916,9 [(M+H) +, 100]; m/z (FABHRMS) 916,532 120, C47 H73N5O 13 требует (M+Na)+=916,528 300.

Пример 42

Синтез цикло-N(Me)-O(Me)-Tyr-O-(Boc-Thr)-Ist-Aip-Leu-Pro (SNPL5)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL5, исходя из SNPL6 (100 мг, 0,11 ммоль), указанное в заглавии соединение (40 мг, 57%) получают в виде белого твердого вещества после флэш ЖХ (силикагель, EtOAc:гекс.4:1 - чистый EtOAc). Rf=0,4 (EtOAc).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,76 (д, J=6,8, 3H), 0,83-0,96 (м, 15Н), 1,10-1,20 (м, 1Н), 1,25 (д, J=6,4, 3H), 1,27 (д, J=6,3, 3H), 1,32 (д, J=6,8, 3H), 1,41 (м, 2Н), 1,44 (с, 9Н), 1,50-1,70 (м, 2Н), 1,99-2,31 (м, 5Н), 2,61 (с, 3H), 2,91-3,04 (м, 1Н), 3,11-3,37 (м, 2Н), 3,48-3,64 (м, 3H), 3,69-3,81 (м, 1Н), 3,80 (с, 3H), 4,18 (м, 2Н), 4,46-4,67 (м, 3H), 4,81 (т, J=10,7, 1H), 5,01 (м, 1Н), 6,85 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3,2H), 7,33 (д, J=8,7, 1Н), 7,65 (д, J=9,2, 1Н), 7,86 (д, J=10,7, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C47H74N 6O12 914,54. Найдено (m/z) 915,5 (M+H)+.

Пример 43

Синтез цикло-N(Ме)-О(Me)-Tyr-O-(Boc-Thr)-Ist-Hiv-Leu-Pro (SHPL5)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL5, исходя из SHPL6 (2,45 г, 2,78 ммоль) указанное в заглавии соединение (2,1 г, 88%) получают в виде белого твердого вещества после кристаллизации DCM/н-гептан (1:3). Rf=0,33 (гекс.-EtOAc 1:3).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,04 (м, 18Н), 1,19 (м, 5Н), 1,41 (с, 9Н), 1,42 (м, 2Н), 1,63 (м, 1Н), 1,77 (м, 1Н), 1,90 (м, 1Н), 2,00-2,22 (м, 3H), 2,44 (м, 1Н), 2,58 (с, 3H), 2,95 (м, 1Н), 3,14 (м, 1Н), 3,26 (м, 1Н), 3,36 (м, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,68 (м, 2Н), 3,78 (с, 3H), 3,96 (м, 1Н), 4,12 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 4,61 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 4,94 (м, 1Н), 5,03 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,54 (д, J=7,3, 1Н), 7,69 (д, J=6,4, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,38, 14,57, 15,15, 18,11, 18,45, 20,67, 23,40, 24,70, 26,91, 27,89, 30,20, 33,57, 33,90, 38,51, 39,07, 46,62, 48,13, 55,16, 56,05, 56,23, 56,94, 65,67, 68,60, 71,13, 79,41, 80,01, 113,97, 129,69, 130,25, 155,75, 158,49, 168,51, 169,57, 170,24, 170,94, 171,06, 173,59.

ESI-MC: Рассчит. для C 44H69N5O 12 859,49. Найдено (m/z) 860,4 (M+H)+ .

Пример 44

Синтез цикло-N(Me)-O(Me)-Tyr-O-(Boc-Thr)-Ist-Val-Leu-Pro (SVPL5)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL5, исходя из SVPL6 (90 мг, 0,1 ммоль), 30 мг (35%) указанного в заглавии соединения получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (диоксид кремния, градиент гекс. - EtOAc от 1:4 до 1:10). Rf=0,35 (EtOAc).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,85-1,00 (м, 18Н), 1,14-1,38 (м, 8Н), 1,44 (с, 9Н), 1,57 (м, 2Н), 1,76-1,95 (м, 2Н), 2,01-2,21 (м, 2Н), 2,33 (дд, J 1=7,3, J2=14,7, 1Н), 2,53 (м, 1Н), 3,57 (с, 3H), 3,17 (дд, J1=10,7, J 2=14.7, 1Н), 3,35 (дд, J1=4,4, J 2=14,2, 1Н), 3,56 (дд, J1=3,9, J 2=10,3, 1Н), 3,59-3,77 (м, 4Н), 3,78 (с, 3H), 4,06 (дт, J1=3,9, J2=9,3, 1Н), 4,33 (дд, J1=2, 9, J2 =9,3, 1Н), 4,38 (дд, J1=6,8, J 2=10,3, 1Н), 4,58 (дд, J1=5,4, J 2=7,3, 1Н), 4,79 (т, J=10,3, 1Н), 4,98 (д, J=9,3, 1Н), 5,03 (дд, J1=2,4, J2 =6,3, 1Н), 6,81 (уш.с, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,24 (д, J=9,8, 1Н), 7,54 (д, J=9,8, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,48, 14,50, 15,20, 18,86, 19,44, 21,03, 23,64, 24,83, 24,96, 26,97, 28,01, 28,135, 30,21, 33,53, 33,96, 38,56, 38,61, 41,05, 41,66, 46,84, 48,53, 55,24, 55,51, 56,31, 57,14, 59,75, 65,85, 70,60, 80,52, 114,11, 129,75, 130,33, 156,77, 158,67, 168,53, 170,21, 170,29, 170,73, 171,02, 174,34.

ESI-MC Рассчит. для C44H70 N6O11: 858,51. Найдено (m/z): 859,5 (M+H)+.

Пример 45

Синтез цикло-N(Ме)-О(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Hip-Leu-Pro (SAPL4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую SAPL5 (8,79 г, 9,6 ммоль) в безв. диоксане (93 мл), добавляют раствор соляной кислоты в безв. диоксане (5,3 н, 122 мл, 647 ммоль). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 8 ч или до полного исчезновения исходного материала. После завершения взаимодействия раствор концентрируют при пониженном давлении. Остаток разбавляют CHCl3 (100 мл) и вновь концентрируют. Пенистый сырой продукт упаривают совместно с CHCl3 /гекс., что дает SAPL4 (8,17 г, 100% выход) в виде белого твердого вещества.

m/z (FAB) 838,3 [(M+Na)+ , 28], 816,3 [(M+H)+, 100].

Пример 46

Синтез цикло-N(Ме)-O(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Aip-Leu-Pro (SNPL4:

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL4, исходя из SNPL5 (40 мг, 43 мкмоль), указанное в заглавии соединение (36 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества после осаждения Et2O.

ESI-MC: Рассчит. для C42H65N 5O11 815,47. Найдено m/z 825,5 (М) +.

Пример 47

Синтез цикло-N(Ме)-О(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Hiv-Leu-Pro (SNPL4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL4, исходя из SHPL5 (500 мг, 0,58 ммоль). Указанное в заглавии соединение (440 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества после осаждения Et2O.

ESI-MC: Рассчит. для С39Н61N 5О10 759,44. Найдено m/z 760,4 (M+H) +.

Пример 48

Синтез цикло-N(Me)-O(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Val-Leu-Pro (SVPL4)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL4, исходя из SVPL5 (25 мг, 29 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (22 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества после совместного упаривания с МТВЕ.

ESI-MC Рассчит. для С39H62N 6О9: 758,5. Найдено (m/z): 759,5 [(М+Н)]+.

Пример 49

Z-N-Метил-D-лейцин (H1)

Ref: Coggins, J.R.; Benoiton, N.L. Can. J. Chem 1971, 49, 1968.

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К перемешиваемому раствору Z-D-Leu-OH (10,32 г, 38,9 ммоль) в безв. ТГФ (120 мл) при 0°С в атмосфере Ar добавляют по каплям через шприц иодметан (8,55 мл, 136,1 ммоль). Затем гидрид натрия (4,80 г, 120,6 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) добавляют порциями, поддерживая температуру при 0"С. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Следы растворителя удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в EtOAc (120 мл) и экстрагируют водн. NaHCO 3 (300 мл, нас.). Водную фазу промывают EtOAc (2×100 мл). Водную фазу охлаждают, добавляют твердую лимонную кислоту до рН 1-2 и раствор экстрагируют EtOAc (4×250 мл), сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют. Продукт кристаллизуют в EtOAc-гептан (1:3), получая H1 (7,84 г, 72%) в виде белого твердого кристаллического вещества. Т.пл.: 71-72°С. [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 25 +23 (с 1, EtOH).

Пример 50

Синтез Z-дидемнина A (SAPL3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую HATU (8,76 г, 23,0 ммоль), HOAt (3,17 г, 23,1 ммоль) SAPL4 (7,09 г, 15,8 ммоль) и H1 (3,486 г, 12,5 ммоль), добавляют безв. DCM (100 мл) и безв. ДМФ (50 мл) в атмосфере Ar и раствор перемешивают при -5°С (ледяная баня). NMM (2,3 мл, 21,0 ммоль) добавляют по каплям через шприц, поддерживая температуру при -5°С. Полученную реакционную смесь перемешивают при -5°С в течение 2 ч, затем оставляют нагреваться до комнатной температуры еще на 14 ч. Растворитель упаривают при пониженном давлении. Сырой продукт перегоняют с EtOAc (100 мл) и раствор фильтруют для удаления некоторого количества осадка. Раствор промывают последовательно водн. KHSO 4 (2×100 мл, 10%), насыщенным раствором соли (100 мл), водн. NaHCO3 (100 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (100 мл). Органическую фазу сушат (Na 2SO4) и концентрируют при пониженном давлении, получая желтый твердый продукт, который очищают флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс.:EtOAc 2:1 - 1:1), что дает SAPL3 (7,98 г, 89% выход) в виде белого твердого вещества. Rf=0,18 (гекс./EtOAc 1:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,79-1,00 (м, 24Н), 1,10-2,25 (м, 10Н), 1,18 (д, J=6,3, 3H), 1,25 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8, 3H), 2,28-2,34 (м, 1Н), 2,49 (дд, J1=10,7, J2=17,0, 1H), 2,54 (с, 3H), 2,83 (с, 3H), 2,95 (м, 1H), 3,02-3,24 (м, 2H), 3,31-3,40 (дд, J1=3,9, J 2=14,1, 1H), 3,53-3,64 (м, 2Н), 3,65-3,75 (м, 1H), 3,78 (с, 3H), 3,92-4,20 (м, 3H), 4,58 (т, J=4,8, 1H), 4,75-4,85 (м, 3H), 5,00 (м, 1H), 5,12-5,26 (м, 3H), 6,84 (д, J=8,3, 2H), 6,86 (уш.с, 1H), 7,07 (д, J=8,3, 2H), 7,21-7,44 (м, 6Н), 7,92 (д, J=8,3, 1H).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,57, 14,05, 15,18, 16,73, 18,52, 20,83, 22,62, 22,96, 23,66, 24,55, 24,81, 25,03, 25,28, 26,90, 27,86, 28,95, 31,28, 31,81, 33,91, 34,02, 38,51, 38,61, 47,03, 49,61, 55,21, 55,38, 55,50, 57,28, 66,10, 67,65, 67,93, 70,47, 81,44, 114,09, 127,83, 128,46, 129,74, 130,29, 158,60, 168,36, 169,59, 170,28, 171,20, 172,22, 204,80.

ESI-MC Рассчит. для C57 H84N6O 14 1076,60. Найдено m/z 1077,6 (M+H)+ .

Пример 51

Синтез [Aip]3-Z-дидемнина A (SNPL3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SNPL4 (35 мг, 41 мкмоль) и H1 (17 мг, 61 мкмоль), указанное в заглавии соединение (36 мг, 81%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc от 1:4 до чист. EtOAc). Rf=0,30 (EtOAc).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,74 (д, J=6,3, 3H), 0,80-1,00 (м, 21Н), 1,10-2,25 (м, 10Н), 1,21 (д, J=5,8, 3H), 1,24 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,3, 3H), 2,61 (с, 3H), 2,86 (с, 3H), 3,12-3,25 (дд, J1 =11,2, J2=14,1, 1H), 3,27-3,36 (дд, J 1=4,3, J2=14,1, 1H), 3,52-3,63 (м, 3H), 3,69-3,81 (м, 2Н), 3,80 (с, 3H), 4,09 (м, 3H), 4,47-4,63 (м, 3H), 4,76-4,92 (м, 2Н), 5,00 (м, 1H), 5,08 (м, 1H), 5,18 (с, 2Н), 6,85 (д, J=8,3, 2Н), 6,97 (д, J=6,97, 1H), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,35 (уш.с, 5Н), 7,48 (д, J=8,3, 1H), 7,67 (д, J=8,3, 1H), 7,87 (д, J=10,2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C 57H85N7O 13: 1075,62. Найдено m/z: 1076,6 (M+H)+ .

Пример 52

Синтез [Hiv]3-Z-дидемнина A (SHPL3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (116 мг, 0,15 ммоль) и H1 (63 мг, 0,23 ммоль), указанное в заглавии соединение (86 мг, 52%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc от 1:1 до 1:2). Rf=0,27 (гекс. - EtOAc 1:2).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,80-1,08 (м, 24Н), 1,18 (м, 3H), 1,21 (м, 4Н), 1,58 (м, 2Н), 1,74 (м, 1Н), 1,80-2,42 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,80 (с, 3H), 2,88 (м, 1Н), 3,15 (м, 1Н), 3,32 (м, 1Н) 3,60 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,83 (м, 1Н), 3,98 (м, 1Н), 4,42 (м, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,75 (м, 1Н), 4,84 (м, 1Н), 4,92 (д, J=3,8, 1Н), 5,00 (м, 1Н), 5,20 (м, 2Н), 6,65 (д, J=6,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,34 (м, 5Н), 7,50 (д, J=6,7, 1Н), 7,75 (д, J=7,2, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,58, 14,21, 15,39, 17,64, 18,63, 20,74, 21,88, 22,84, 23,48, 24,22, 24,75, 27,05, 27,84, 29,34, 29,99, 33,42, 33,86, 35,81, 38,52, 39,37, 46,63, 48,14, 55,13, 55,47, 55,53, 55,87, 56,92, 65,68, 67,72, 68,60, 70,61, 79,09, 113,95, 127,71, 127,86, 128,35, 129,63, 130,22, 158,48, 168,46, 169,36, 169,84, 170,29, 170,93, 171,00, 173,73.

ESI-MC Рассчит. для C 54H80N6O 13 1020,58. Найдено m/z 1021,5 (M+H)+ .

Пример 53

Синтез [Val]3-Z-дидемнина A (SVPL3)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SVPL4 (20 мг, 25 мкмоль) и SAPLH1 (11 мг, 37,5 мкмоль), указанное в заглавии соединение (19 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc от 1:1 до 1:5). Rf=0,44 (EtOAc).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,85-1,06 (м, 21Н), 1,10-1,4 (м, 5Н), 1,16 (д, J=6,6, 3H), 1,50-1,63 (м, 6Н), 1,72-1,87 (м, 2Н), 1,88-2,40 (м, 6Н), 2,58 (с, 3H), 2,86 (с, 3H), 3,17 (дд, J1 =10,5, J2=14,2, 1Н), 3,36 (дд, J 1=3,9, J2=14,2, 1H), 3,43 (уш.с, 1Н), 3,51-3,72 (м, 4Н), 3,79 (с, 3H), 3,98-4,16 (м, 1Н), 4,40-4,47 (м, 2Н), 4,58 (дд, J1=5,7, J2=7,8, 1Н), 4,67-4,85 (м, 2Н), 4,80-5,09 (м, 1Н), 5,16 (д, J=12,4, 1H), 5,24 (д, J=12,4, 1H), 6,84 (д, J=8,4, 1Н), 6,90-6,94 (уш.с, 1Н), 7,09 (д, J=8,4, 1Н), 7,28-7,50 (м, 6Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,99, 14,37, 15,70, 18,55, 19,82 21,40, 21,99, 22,81, 23,17, 23,98, 24,62, 25,00, 25,24, 27,28, 28,26, 29,93, 30,23, 33,58, 34,10, 36,16, 38,78, 41,98, 47,10, 48,79, 54,73, 55,45, 56,62, 57,40, 59,51, 66,02, 68,18, 70,37, 71,03, 114,30, 128,00, 128,27, 128,72, 129,86, 130,56, 136,49, 158,28, 158,85, 168,75, 169,27, 170,40, 170,75, 171,04, 173,91, 175,03.

ESI-MC Рассчит. для C54H81 N7O12: 1019,59. Найдено (m/z): 1020,5 (M+H)+.

Пример 54

Синтез дидемнина A (SAPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SAPL3 (6,59 г, 6,1 ммоль) в ТГФ (без стабилизатора, 262 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd(OH)2-C (20%, 3,29 г, 50% м/м). Смесь перемешивают в атмосфере Н2 (1 атм) в течение 20 ч, затем фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Добавляют CHCl3 (2×25 мл) и смесь вновь концентрируют при пониженном давлении, получая SAPL2 (5,51 г, 96%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,22 (CHCl3-трет-BuOH 90:10).

1H-ЯМР (500 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-0,92 (м, 24Н), 1,11-1,19 (м, 1Н), 1,22 (д, J=6,9, 3H), 1,32 (д, J=6,8, 3H), 1,30-1,35 (м, 1Н), 1,35-1,63 (м, 6Н), 1,71-1,81 (м, 2Н), 1,93-2,07 (м, 1Н), 2,07-2,18 (м, 2Н), 2,28-2,34 (м, 1Н), 2,49-2,52 (дд, J1=11, J 2=10,5, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,72 (уш.с, 3H), 2,79 (уш.с, 3H), 2,86-2,94 (уш.с, 1Н), 2,72-2,79 (уш.д, J=10,5, 1H), 3,15-3,18 (дд, J1=14,5, J2=10,5, 1Н), 3,33-3,36 (дд, J1=14,5, J 2=4,5, 1Н), 3,54-3,57 (дд, J1=10,5, J2=4,5, 1Н), 3,56-3,61 (м, 1Н), 3,78 (с, 3H), 3,96-4,00 (м, 1Н), 4,03-4,08 (м, 1Н), 4,11-4,80 (уш.с, 1Н), 4,56-4,62 (м, 1Н), 4,68-4,81 (м, 3H), 4,99-5,01 (кв, J=3,5, 1Н), 5,16 (уш.с, 1Н), 6,83 (д, J=8,5, 2Н), 6,95 (уш.с, 1Н), 7,07 (д, J=8,5, 2Н), 7,21-7,25 (уш.с, 1Н), 7,95 (уш.с, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,55, 14,95, 15,26, 16,82, 18,56, 20,89, 22,00, 23,08, 23,76, 24,58, 24,85, 25,10, 27,12, 29,35, 29,35, 29,65, 29,69, 31,36, 33,96, 34,14, 38,51, 38,64, 40,14, 55,38, 55,56, 57,31, 66,17, 67,85, 70,58, 80,96, 80,98, 81,57, 114,12, 130,33, 158,63, 168,41, 169,33, 169,70, 170,38, 171,24, 172,28, 172,28, 172,93, 204,83.

m/z (FAB) 944,2 [(M+H)+, 100].

Пример 55

Синтез [Aip]3 -дидемнина A (SNPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SNPL3 (33 мг, 35 мкмоль) в смеси IPA/H2O (2 мл:1 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd(OH)2-C (20%, 20 мг, 60% м/м). Смесь перемешивают в атмосфере Н 2 (1 атм) в течение 20 ч, затем фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Добавляют IPA (2×5 мл) и раствор вновь концентрируют при пониженном давлении, получая SNPL2 (32 мг, 97%) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,78 (д, J=6,8, 3H), 0,82-0,92 (м, 21Н), 1,11-2,58 (м, 21Н), 2,41 (с, 3H), 2,62 (с, 3H), 2,75-3,00 (м, 4Н), 3,15-3,18 (дд, J1=10,7, J2=14,7, 1H), 3,33-3,36 (дд, J1=14,5, J 2=4,2, 1H), 3,51-3,78 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,92 (м, 1H), 4,01-4,20 (м, 2Н), 4,50 (т, J=4,8, 1H), 4,59 (т, J=6,3, 1H), 4,75-4,91 (м, 2Н), 5,05 (м, 1H), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,70 (д, J=5,8, 1H), 7,78 (д, J=9,7, 1H), 7,89 (д, J=6,3, 1H), 8,14 (д, J=7,8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C 49H79N7O 11 941,58. Найдено m/z 942,7 (M+H)+ .

Пример 56

Синтез [Hiv]3-дидемнина A (SHPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL2, исходя из SHPL3 (86 мг, 0,08 ммоль), указанное в заглавии соединение (73 мг, 97%) получают в виде белого твердого вещества. Rf=0,36 (CHCl3/МеОН 95:5).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,02 (м, 24Н), 1,12-2,42 (м, 16Н), 2,54 (с, 3H), 2,64 (с, 3H), 2,95 (м, 1Н), 3,15 (м, 1Н), 3,35 (м, 1Н), 3,52-3,90 (м, 5Н), 3,78 (с, 3H), 4,04 (м, 1Н), 4,38 (м, 1Н), 4,48 (м, 1Н), 4,57 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 4,91 (д, J=5,3, 1Н), 5,22 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,54 (д, J=9,2, 1Н), 7,60 (д, J=9,4, 1Н), 8,68 (д, J=6,2, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,78, 14,07, 16,13, 17,90, 18,56, 20,98, 21,74, 22,94, 23,60, 24,44, 24,78, 25,06, 27,17, 27,92, 30,09, 33,34, 33,89, 38,71, 40,30, 46,86, 48,22, 54,99, 55,23, 56,97, 57,21, 65,81, 68,53, 70,37, 79,47, 114,03, 129,76, 130,29, 158,57, 168,18, 169,40, 169,86, 170,20, 170,92, 174,16.

ESI-MC Рассчит. для C46H74N 6O11 886,54. Найдено m/z 887,2 (M+H) +.

Пример 57

Синтез [Val]3 -дидемнина A (SVPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL2, исходя из SVPL3 (19 мг, 18 мкмоль), указанное в заглавии соединение (16 мг, 97%) получают в виде белого твердого вещества. Rf=0,36 (CHCl3/МеОН 95:5).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -0,82-1,02 (м, 21Н), 1,85-1,32 (м, 9Н), 1,42-1,83 (м, 7Н), 1,87-2,23 (м, 8Н), 2,34 (уш.с, 3H), 2,60 (уш.с, 1Н), 2,85 (дд, J1=5,7, J2=7,8, 1Н), 3,16 (дд, J1=10,8, J 2=14,2, 1Н), 3,37 (дд, J1=4,2, J 2=14,2, 1Н), 3,48 (уш.с, 1Н), 3,57-3,68 (м, 4Н), 3,79 (с, 3H), 3,95-4,15 (м, 2Н), 4,45-4,52 (м, 2Н), 4,61 (дд, J 1=4,8, J2=7,8, 1Н), 4,77 (т, J=9, 9, 1Н), 5,02-5,15 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,4, 1Н), 7,09 (д, J=8,4, 1Н), 7,59-7,62 (м, 2Н), 7,78-7,81 (м, 2Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,98, 14,46, 16,14, 18,50, 19,83, 21,50, 22,55, 22,81, 22,95, 23,46, 23,98, 27,33, 28,27, 28,33, 29,94, 33,71, 34,16, 38,94, 41,93, 42,11, 45,72, 47,18, 48,94, 53,64, 55,03, 55,50, 56,72, 57,55, 59,22, 59,56, 66,16, 70,71, 114,36, 118,53, 120,85, 130,02, 130,58, 168,71, 169,74, 170,23, 171,18, 175,10.

ESI-MC Рассчит. для C46H 75N7O10: 885,56. Найдено (m/z): 856,5 (M+H)+.

Пример 58

Синтез Pyr-Pro-OBn (F2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору H-Pro-OBn-HCl (10,0 г, 41,3 ммоль) в безв. ДМФ (50 мл) при 0°С в атмосфере Ar, NMM (4,55 мл, 43,8 ммоль) добавляют по каплям через шприц, поддерживая температуру при 0°С. Затем порциями добавляют HOBt (18,98 г, 124 ммоль). Через 15 мин пировиноградную кислоту (8,61 г, 97,79 ммоль), растворенную в безв. DCM (10 мл), добавляют по каплям через шприц, поддерживая температуру ниже 3°С. Наконец, DCC (22,17 г, 107,46 ммоль), растворенный в DCM (80 мл), добавляют по каплям с помощью компенсационной воронки. Смеси дают нагреться до комнатной температуры (2 ч) и перемешивают еще 12 ч. Реакционную смесь фильтруют для удаления осадка и раствор концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в EtOAc (500 мл) и промывают последовательно водн. KHSO4 (100 мл, 10%), водн. NaHCO 3 (400 мл, нас.), насыщенным раствором соли (400 мл), сушат (Na2SO4) и фильтруют. Остатки растворителя отгоняют при пониженном давлении и остаток перегоняют с ACN (100 мл), охлаждают до -30°С в течение 2 ч и фильтруют для удаления избытка N,N-дициклогексилкарбамида. Полученное коричневое масло (15,82 г) очищают флэш ЖХ (силикагель, град. гекс. - гекс.:EtOAc 2:1), что дает F2 (9,06 г, 66% выход) в виде белого твердого вещества. Rf=0,25 (гекс.:EtOAc 2:1).

ИК (пленка, DCM) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 3035, 2956, 2884, 1744, 1717, 1645, 1499, 1443, 1383, 1352, 1273, 1175, 1092 см-1.

1H-ЯМР (200 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 1,75-2,40 (м, 4Н), 2,37 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 3,45-3,82 (м, 2Н), 4,52-4,61 (м, 1Н), 4,88-4,97 (м, 1Н), 5,14-5,15 (м, 2Н), 5,17-5,20 (м, 2Н), 7,34 (уш.с, 5Н).

13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 22,11, 25,22, 26,5, 27,10, 28,53, 31,48, 47,53, 44,81, 59,76, 67,02, 67,31, 128,11, 128,64, 135,24, 170,1, 170,2, 198,0.

m/z (CI) 293 [(M+NH4) +, 100]. Анал. рассчит.C15H 17NO4: С, 65,44; Н, 6,22; N, 5,08. Найдено: С, 65,04; Н, 6,01; N, 5,11.

Пример 59

Синтез Pyr-Pro-OH (F1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Раствор F2 (8,63 г, 31,34 ммоль) и палладия на активированном угле (10%, 86 мг, 10% м/м) в дегазированном МеОН (125 мл) помещают в реактор Парра для работы при высоком давлении и продувают газообразным азотом (2×30 фунт/кв. дюйм). Реакционную смесь изолируют в атмосфере водорода (30 фунт/кв. дюйм) и перемешивают при 23°С в течение 4,5 ч. Смесь фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении. Остаток (6,29 г) наносят на SiO2 и заполняют сверху колонку (LC 5,5×10,0 см) и элюируют гекс.:EtOAc 1:2, получая F1 (4,64 г, 80%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,22 (гекс.:EtOAc 1:1). [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 20 -92,4 (с 0,12, CHCl3). Т.пл. 67-69°С.

ИК (пленка, DCM) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 3450-3000, 2961-2870, 1719, 1643, 1615, 1452, 1354, 1205, 1175, 1094, 1018 см-1.

1H-ЯМР (200 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 1,85-2,45 (м, 4Н), 2,43 и 2,47 (с, 3H), 3,42-3,85 (м, 2Н), 4,52-4,61 (м, 1Н), 4,88-4,97 (м, 1Н), 7,21-7,40 (уш.с, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 22,03, 25,23, 26,48, 27,00, 28,23, 31,44, 47,57, 48,37, 59,61, 59,39, 162,47, 162,52, 175,04, 176,29, 197,18.

m/z (CI) 220 [(M+N2H7 )+, 15], 203 [(M+NH4 )+, 100], 186 [(M+H)+ , 16]. Анал. рассчит. C8H 11NO4: С, 51,88; Н, 5,99; N, 7,56. Найдено: С, 52,13; Н, 5,85; N, 7,65.

Пример 60

Синтез аплидина (SAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К охлажденному (3°С) раствору F1 (4,908 г, 26,5 ммоль) в безв. DCM (40 мл), добавляют, в атмосфере азота, раствор DIPCDI (1,806 мг, 14,3 ммоль) в DCM (10 мл) и раствор перемешивают при 3°С 60 мин. Затем раствор SAPL2 (5,0 г, 5,3 ммоль) в DCM (50 мл) переносят с помощью канюли в первый раствор под давлением азота. После 90 ч (4 дней) при указанной температуре добавляют водн. HCl (50 мл, 0,1 н) и реакционную смесь перемешивают 15 мин. Затем органический слой декантируют и распределяют между KHSO4 (50 мл, 5%), водн. NaHCO3 (50 мл, 5%) и насыщенным раствором соли (25 мл). Органическую фазу сушат (Na2 SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученное светло-желтое твердое вещество очищают флэш ЖХ (Lichroprep RP-18, 40-63 мкм, градиент МеОН:Н 2O: TFA от 70:30:0,1 до 90:10:0,1), что дает SAPL1 (5,4 г, 93%) (смесь ротамеров). Rf=0,40 и 0,28 (DCM:AcOEt, 2:3), 0,52 и 0,45 (CHCl3-МеОН, 9,5:0,5); [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D -95,9 (с 1,8, CHCl 3).

1H-ЯМР (500 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,84-0,93 (м, 24Н), 1,16-1,70 (м, 9Н), 1,72-1,81 (м, 1Н), 1,81-1,90 (м, 1Н), 1,90-2,24 (м, 6Н), 2,30-2,39 (м, 1Н), 2,49 (с, 3H) 2,51 (с, 3H), 2,55 (с, 3H), 2,52-2,64 (м, 1Н), 2,85 (уш.с, 1Н), 2,94 (уш.с, 1Н), 3,09 (с, 3H), 3,13 (с, 3H), 3,15-3,18 (м, 1Н), 3,21-3,26 (дд, J1=15,8, J 2=6,1, 1Н), 3,32-3,36 (дд, J1=14,5, J2=4,1, 1Н), 3,54-3,60 (м, 1Н), 3,66-3,72 (м, 1Н), 3,78 (с, 3H), 3,80-3,87 (м, 1Н), 3,96-3,99 (м, 1Н), 4,03-4,11 (м, 2Н), 4,15-4,23 (2кв, J=7,5, 1Н), 4,55-4,57 (2д, J1=5,5, J2=2,2, 1Н), 4,59-4,62 (т, 1Н), 4,56-4,64 (дд, J1=6,5, J2=2,5, 1Н), 4,68-4,71 (т, 1Н), 4,76-4,81 (т, 1Н), 5,10-5,18 (м, 1Н), 5,17 (д, J=3,5, 1Н), 5,18 (д, J=3,5, 1Н), 5,27-5,31 (м, 2Н), 6,82 (д, J=8,5, 2Н), 6,83 (д, J=8,5, 2Н), 7,05 (д, J=8,5, 2Н), 7,06 (д, J=8,5, 2Н), 7,02 (д, J=7,1, 1Н), 7,16 (д, J=9,5, 1H), 7,17 (д, J=9,5, 1H), 7,59 (д, J=5,5, 1H), 7,77 (д, J=9,5, 1H), 7,83 (д, J=9,4, 1H).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,63, 11,68, 14,11, 14,70, 15,26, 15,30, 16,00, 16,20, 16,88, 16,93, 18,62, 18,85, 20,89, 20,94, 21,62, 21,36, 23,44, 23,57, 23,84, 23,93, 24,66, 24,77, 24,85, 25,02, 26,22, 26,34, 27,09, 27,6, 27,06, 27,30, 27,95, 27,99, 29,33, 29,69, 31,31, 31,37, 33,97, 34,06, 36,02, 36,45, 38,68, 38,76, 41,01, 41,15, 47,00, 48,42, 48,48, 48,86, 49,20, 49,51, 54,65, 54,75, 55,26, 55,58, 55,61, 57,14, 57,27, 57,47, 57,79, 66,24, 67,80, 67,99, 70,34, 70,67, 81,0, 81,52, 114,10, 130,31, 156,0, 158,65, 161,1, 161,60, 168,20, 169,53, 169,59, 170,45, 171,25, 171,80, 171,95, 172,26, 172,33, 197,5, 204,80, 204,85.

m/z (FAB) 1132,6 [(M+Na)+, 42], 1110,8 [(M+H) +, 100].

Пример 61

Синтез [Aip] 3-аплидина (SNPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SNPL2 (10 мг, 10,6 мкмоль) и F1 (10 мг, 54 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (8 мг, 68%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR =10,5 и 12,0 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,80-1,03 (м, 24Н), 1,11-1,70 (м, 9Н), 1,72-1,81 (м, 1Н), 1,81-1,90 (м, 1Н), 1,90-2,24 (м, 6Н), 2,30-2,39 (м, 1Н), 2,53 (с, 3H) 2,55 (с, 3H), 2,65 (с, 3H), 2,52-2,66 (м, 2Н), 2,94 (м, 1Н), 3,07 (с, 3H), 3,11 (с, 3H), 3,15-3,18 (м, 1Н), 3,22-3,31 (дд, J1=4,3, J2=15,1, 1Н), 3,54-3,60 (м, 2Н), 3,67-3,92 (м, 2Н), 3,80 (с, 3H), 3,98 (м, 1Н), 4,13-4,29 (м, 3H), 4,45-4,75 (м, 4Н), 4,81 (т, J=9,7, 1Н), 5,09 (м, 1Н), 5,18 (м, 1Н), 5,26-5,44 (м, 3H), 6,84 (д, J=8,3, 2H), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,30 (д, J=8,3, 1Н), 7,36 (д, J=8,3, 1Н), 7,68 (д, J=9,7, 1Н), 7,87 (д, J=4,3, 1Н), 8,09 (д, J=9,7, 1Н), 8,28 (д, J=10,2, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для С 57Н88N8O 14: 1108,64. Найдено (m/z): 1110,3 (M+H) +.

Пример 62

Синтез [Hiv]3 -аплидина (SHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SHPL2 (72 мг, 0,081 ммоль) и F1 (75 мг, 0,405 ммоль). Указанное в заглавии соединение (68 мг, 79%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (Lichroprep RPC18, градиент ACN/H2O/TFA от 70:30:0,5 до 90:10:0,5). Rf=0,49 (ACN/H2O/TFA 90:10:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,80-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,50 (м, 18Н), 1,50-2,30 (м, 6Н), 2,42 (м, 1Н), 2,53 (с, 3H), 2,55 (с, 3H), 2,57 (с, 3H), 2,96-3,40 (м, 3H), 3,05 (с, 3H), 3,10 (с, 3H), 3,63 (м, 5Н), 3,78 (с, 3H), 3,90 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 4,63 (м, 1Н), 4,69 (м, 1Н), 4,86 (м, 1Н), 5,02 (д, J=4,8, 1Н), 5,09 (м, 1Н), 5,20 (м, 1Н), 5,30 (м, 1Н), 6,83 (д, J=8,3, 2Н), 6,89 (д, J=6,3, 1Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,29 (д, J=9,7, 1Н), 7,34 (м, 2Н), 7,43 (д, J=5,3, 1Н), 7,74 (д, J=9,7, 1Н), 7,80 (д, J=10,2, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 12,06, 14,22, 14,30, 16,49, 16,76, 17,84, 19,17, 21,08, 21,41, 21,54, 22,54, 23,79, 23,94, 24,05, 24,16, 24,82, 24,96, 25,05, 25,98, 26,45, 27,37, 27,57, 28,21, 28,59, 30,31, 30,83, 31,56, 31,62, 33,74, 34,24, 36,02, 36,25, 38,91, 38,96, 39,46, 39,86, 46,92, 48,44, 48,71, 49,06, 54,95, 55,49, 57,16, 57,68, 58,23, 59,13, 66,16, 66,28, 69,10, 70,83, 71,14, 79,12, 114,31, 129,96, 130,12, 130,59, 158,86, 168,69, 168,81, 169,75, 169,82, 170,18, 170,45, 170,52, 170,69, 170,84, 171,21, 171,28, 172,47, 173,17, 174,66, 174,82, 197,63, 201,38.

ESI-MC Рассчит. для C54H83N 7O14: 1053,60. Найдено (m/z): 1054,9 (M+H)+.

Пример 63

Синтез [Val] 3-аплидина (SVPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SVPL2 (10 мг, 11 мкмоль) и F1 (10,5 мг, 57 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (8 мг, 69%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR =10,9 и 12,3 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,02 (м, 24Н), 1,13-1,38 (м, 9Н), 1,55 (м, 2Н), 1,67-1,81 (м, 4Н), 1,95-2,02 (м, 3H), 2,10-2,17 (м, 2Н), 2,26-2,39 (м, 2Н), 2,56 (с, 3H), 2,57 (с, 3H), 2,58 (с, 3H), 2,74-2,92 (м, 1Н), 3,10 (с, 3H), 3,15 (с, 3H), 3,20 (м, 1Н), 3,36 (дд, J 1=4,4, J2=14,2, 1Н), 3,49-3,72 (м, 5Н), 3,79 (с, 3H), 3,97-4,13 (м, 2Н), 4,38 (дд, J 1=4,6, J2=14,2, 1Н), 4,49 (м, 1Н), 4,60 (м, 1Н), 4,68-4,81 (м, 2Н), 5,11 (м, 1Н), 5,26-5,30 (м, 1Н), 5,33-5,40 (м, 1Н), 6,84 (д, J=7,8, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,36-7,52 (м, 2Н), 7,48 (д, J=9,6, 1Н), 7,61 (д, J=6,8, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для С54Н 84N8O13 1052,62. Найдено (m/z): 1053,6 (М+Н)+.

Пример 64

Синтез [Hiv]3-[изобутирил] 8-дидемнина A (8ISHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль) в DCM (200 мкл) при 0°С в атмосфере Ar добавляют DIPEA (3 мкл, 16,8 мкмоль) и изобутирилхлорид (1,4 мкл, 13,4 мкмоль). После 3 ч при 22°С добавляют DCM (3 мл) и смесь промывают последовательно водн. HCl (2 мл, 0,1 н), водн. NaHCO3 (2 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (2 мл), сушат (Na 2SO4), фильтруют и концентрируют в вакууме. Очистка остатка путем ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR =19 мин) дает указанное в заглавии соединение (10 мг, 94%) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (24Н, м), 1,13-1,65 (18Н, м), 1,72-2,58 (6Н, м), 2,56 (с, 3H), 2,89 (с, 3H), 2,92 (м, 2Н), 3,13 (м, 2Н), 3,36 (дд, J1=4,6, J2=15,6, 1H), 3,54-3,73 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,91 (м, 2Н), 4,40 (м, 1H), 4,60 (м, 1H), 4,89 (м, 1H), 4,99 (д, J=5,3, 1H), 5,03 (м, 1H), 5,20 (м, 1H), 6,73 (д, J=9,3, 1H), 6,84 (д, J=9,6, 2Н), 7,08 (д, J=9,6, 2Н), 7,55 (д, J=8,6, 1H), 7,82 (д, J=11, 1H).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,78, 14,63, 15,69, 17,92, 19,03, 19,31, 19,66, 21,03, 22,29, 23,19, 23,85, 24,71, 25,14, 27,27, 28,22, 30,39, 30,51, 31,15, 33,80, 34,25, 35,61, 38,85, 39,63, 46,98, 48,51, 53,29, 53,65, 55,49, 56,01, 56,35, 57,26, 66,07, 69,07, 70,94, 79,33, 114,31, 130,08, 130,60, 158,84, 168,79, 169,75, 170,34, 170,68, 171,36, 171,73, 174,02, 179,84.

ESI-MC Рассчит. для C 50H80N6O 12: 956,58. Найдено (m/z): 957,5 (M+H)+ .

Пример 65

Синтез [Val]3-[изобутирил] 8-дидемнина A (8ISVPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза 8ISHPL1, исходя из SVPL2 (20 мг, 22,6 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (19 мг, 88%) получают после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение АСМ/Н2 О 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=19 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,81-1,02 (м, 24Н), 1,14-1-38 (м, 5Н), 1,15 (д, J=6,6, 3H), 1,19 (д, J=6,6, 3H), 1,38-1,80 (м, 7Н), 1,80-2,40 (м, 6Н), 2,57 (с, 3H), 2,58-2,64 (м, 1Н), 2,85-2,92 (м, 1Н), 2,93 (с, 3H), 3,16 (дд, J1=10,5, J 2=14,4, 1Н), 3,36 (дд, J1=4,5, J 2=14,4, 1Н), 3,39 (уш.с, 1Н), 3,56 (дд, 1Н, J=4,5, 10,8), 3,59-3,72 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 4,01 (тд, J1 =3,3, J2=10,2, 1Н), 4,39-4,47 (м, 2Н), 4,58 (дд, J1=5,7, J2 =7,5, 1Н), 4,79 (т, J=9,9, 1H), 5,03-5,14 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,4, 2H), 7,04 (д, J=7,8, 1H), 7,08 (д, J=8,4, 1H), 7,36 (д, J=9,0, 1H), 7,45 (д, J=10,2, 1H), 7,51 (д, J=10,2, 1H).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 180,24, 175,10, 173,18, 171,14, 170,72, 170,42, 169,38, 168,73, 158,87, 130,60, 130,02, 114,33, 71,31, 70,50, 66,11, 59,47, 57,42, 56,56, 55,51, 54,93, 53,84, 48,83, 47,13, 41,94, 38,94, 35,67, 34,17, 33,63, 31,32, 31,10, 29,96, 28,32, 27,25, 25,30, 25,05, 24,82, 24,01, 23,22, 21,42, 19,88, 19,72, 11,25, 18,51, 15,60, 14,32, 11,96.

ESI-MC Рассчит. для С 50Н81N7О 11: 955,60. Найдено 956,8 (М+Н)+.

Пример 66

Синтез [Hiv]3-[бутирил] 8-дидемнина A (8BSHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуют методике, разработанной для синтеза 8ISHPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (9 мг, 84%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR=18,6 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,11-1,72 (м, 18Н), 1,75-2,51 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,84 (с, 3H), 2,92 (м, 2Н), 3,15 (м, 2Н), 3,35 [дд, J1=5,0, J2 =15,6, 1Н), 3,54-3,77 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,91 (м, 2Н), 4,40 (м, 1Н), 4,60 (м, 1Н), 4,89 (м, 1Н), 4,98 (д, J=6,0, 1Н), 5,04 (м, 1Н), 5,20 (м, 1Н), 6,78 (д, J1=9,6, 1Н), 6,84 (д, J1=9,6, 2Н), 7,08 (д, J 1=9,6, 2Н), 7,54 (д, J1=9,6, 1Н), 7,82 (д, J1=10,6, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,82, 14,15, 14,55, 15,72, 17,96, 18,67, 19,01, 21,05, 22,37, 23,13, 23,84, 24,71, 25,14, 27,30, 28,21, 29,92, 30,38, 30,63, 33,78, 34,25, 35,69, 35,97, 38,85, 39,61, 46,98, 48,52, 53,27, 55,49, 55,99, 56,25, 57,27, 66,07, 69,07, 70,96, 79,40, 114,31, 130,08, 130,59, 158,85, 168,78, 169,73, 170,42, 170,64, 171,36, 171,65, 174,07, 175,79.

ESI-MC Рассчит. для C 50H80N5O 12: 956,60. Найдено (m/z): 957,8 (М+Н)+ .

Пример 67

Синтез [Hiv]3-[гексаноил] 8-дидемнина A (8BSHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 8ISHPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 82%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H 2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR=27,8 мин).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,11-1,72 (м, 22Н), 1,80-2,51 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,84 (с, 3H), 2,93 (м, 2Н), 3,14 (м, 2Н), 3,35 (дд, J1=4,4, J2 =14,1, 1H), 3,54-3,76 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,91 (м, 2Н), 4,41 (м, 1H), 4,60 (м, 1H), 4,88 (м, 1H), 4,98 (д, J 1=5,3, 1H), 5,03 (м, 1H), 5,19 {м, 1H), 6,76 (д, J 1=8,7, 1H), 6,84 (д, J1=8,7, 2Н), 7,08 (д, J1=8,7, 2Н), 7,51 (д, J 1=8,8, 1H), 7,81 (д, J1=9,7, 1H).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,59, 13,94, 14,34, 15,49, 17,73, 18,77, 20,81, 22,14, 22,46, 22,90, 23,60, 24,47, 24,69, 24,90, 27,08, 27,97, 30,14, 30,40, 31,54, 33,53, 33,76, 34,02, 35,47, 38,62, 39,40, 46,76, 48,28, 53,04, 55,26, 55,78, 55,90, 57,04, 65,84, 68,82, 70,72, 79,17, 114,07, 129,84, 130,36, 158,61, 168,54, 169,51, 170,15, 170,41, 171,12, 171,42, 173,86, 175,75.

ESI-MC Рассчит. для C52H84N 6O12: 984,61. Найдено (m/z): 985,8 (M+H)+.

Пример 68

Синтез Изобутирил-Pro-OBn

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору H-Pro-OBn·HCl (500 мг, 2,07 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°С добавляют в атмосфере аргона NMM (680 мкл, 6,21 ммоль). Через 10 мин добавляют изобутирилхлорид (240 мкл, 2,27 ммоль), реакционной смеси дают нагреться до 20°С и перемешивают 5 ч. Смесь фильтруют и фильтрат промывают последовательно воды. HCl (15 мл, 1 н), воды. NaHCO3 (10 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (10 мл), затем сушат (Na 2SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 560 мг (98%) указанного в заглавии соединения. Rf=0,42 (гекс.:EtOAc 1:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 1,20-1,40 (2д, 6Н), 1,90-2,35 (м, 4Н), 2,35 (кв, 1Н), 3,40-3,80 (м, 2Н), 4,30 (м, 1Н), 5,20 (м, 2Н), 7,40 (м, 5Н).

Пример 69

Синтез Изобутирил-Pro-ОН

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору изобутирил-Pro-OBn (430 мг, 1,56 ммоль) в дегазированном МеОН добавляют Pd/C (10%) (43 мг, 10% м/м) и затем последовательно продувают сильной струей Ar и пробулькивают водород. Смесь перемешивают в атмосфере H2 14 ч и затем дегазируют и фильтруют. Раствор концентрируют и остаток кристаллизуют МТВЕ/гекс., получая 140 мг (48%) указанного в заглавии соединения в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3 ) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 1,20 (м, 6Н), 1,90-2,10 (м, 3H), 2,50 (м, 1Н), 2,70 (кв, 1Н), 3,40-3,70 (м, 2Н), 4,60 (дд, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C9H15NO 3: 185,11. Найдено (m/z): 186,1 (M+H)+ .

Пример 70

Синтез [Hiv]3-[изобутирил] 9-аплидина (9ISHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору изобутирил-Pro-ОН (10 мг, 54 мкмоль) в DCM (150 мкл) при 0°С добавляют DIPCDI (5 мкл, 32 мкмоль). Перемешивание продолжают 60 мин и затем смесь переносят в колбу, содержащую SHPL2 (10 мг, 11,2 моль) в DCM (150 л). После 4 ч при 2-4°С смесь разбавляют DCM (2 мл) и промывают последовательно водн. HCl (1 мл, 0,1 н), водн. NaHCO3 (1 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (1 мл), органическую фазу сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют. Остаток очищают ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR =13 и 14 мин), что дает 9ISHPL1 (9 мг, 72%) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,50 (м, 18Н), 1,52-2,70 (м, 10Н), 2,56 (с, 3H), 3,00-3,44 (м, 4Н), 3,08 (с, 3H), 3,55-3,72 (м, 5Н) 3,78 (с, 3H), 4,00 (м, 3H), 4,26 (м, 1Н), 4,62 (м, 2Н), 4,86 (м, 1Н), 5,02 (д, J=5,3, 1H), 5,30 (м, 2Н), 6,84 (д, J=9,0, 2Н), 7,07 (д, J=9,0, 2Н), 7,29 (д, J=11,0, 1Н), 7,80 (д, J=9,0, 1Н); 7,88 (д, J=11, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 12,04, 14,44, 16,91, 17,94, 18,96, 19,03, 19,15, 21,07, 21,59, 23,87, 24,10, 24,89, 25,08, 26,04, 27,54, 28,21, 28,87, 30,33, 31,61, 32,64, 33,77, 34,24, 36,19, 39,07, 39,33, 39,81, 46,87, 47,52, 48,45, 54,74, 55,49, 56,20, 57,08, 58,50, 66,41, 69,13, 71,48, 79,16, 114,27, 130,30, 130,59, 158,80, 168,55, 169,88, 170,86, 171,06, 171,22, 173,63, 174,92, 176,19.

ESI-MC Рассчит. для С55Н 87N7O13: 1053,64. Найдено (m/z): 1054,6 (M+H)+.

Пример 71

Синтез [Val]3-[изобутирил] 9-аплидина (9ISVPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ISHPL1, исходя из SVPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 77%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H 2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR=15,3 мин).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,01 (м, 24Н), 1,14-1,37 (м, 12Н), 1,148-2,35 (м, 8Н), 2,55 (с, 3H), 2,57-2,68 (м, 1Н), 2,77-2,83 (м, 1Н), 3,12 (с, 3H), 3,19-3,23 (м, 1Н), 3,35-3,41 (м, 2Н), 3,52-3,56 (м, 1Н), 3,58-3,70 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 4,03-4,13 (м, 1Н), 4,33-4,35 (м, 1Н), 4,44-4,48 (м, 1Н), 4,55-4,66 (м, 2Н), 4,70-4,83 (м, 1Н), 5,35-5,39 (м, 2Н), 6,82 (д, J=8,4, 2Н), 7,06 (д, J=8,4, 2Н), 7,25 (уш.с, 2Н), 7,37 (д, 10,5, 1Н), 7,46 (д, J=8,7, 1Н), 7,60 (д, J=9,3, 1Н), 8,07 (уш.с, 1Н).

13 С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 12,10, 14,44, 16,84, 18,63, 18,95, 19,92, 21,31, 21,61, 23,91, 24,05, 24,86, 25,00, 25,30, 26,06, 27,41, 28,33, 28,93, 30,00, 31,76, 32,65, 33,59, 31,16, 36,21, 39,17, 41,71, 42,19, 47,08, 47,57, 48,88, 54,37, 54,65, 55,50, 56,15, 57,33, 58,70, 59,33, 66,45, 70,92, 71,54, 114,29, 130,28, 130,59, 158,82, 168,41, 170,08, 170,52, 170,69, 171,03, 172,65, 173,80, 175,68, 176,42.

ESI-MC Рассчит. для C55H 88N8O13: 1052,65. Найдено (m/z): 1053,8 (M+H)+.

Пример 72

Синтез Z-NVa-Pro-OMe

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза F2, из Z-NVa-OH (261 мг, 1,04 ммоль), H-Pro-OMe-HCl (156,6 мг, 0,94 ммоль), указанное в заглавии соединение (315 мг, 87%) получают в виде бесцветного масла после очистки ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, градиент 3:1 - 1:1). Rt=0,42 (гекс. - EtOAc 1:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,97 (т, J=6,9, 2Н), 1,44 (секст., J=7,5, 2Н), 1,53-1,65 (м, 1Н), 1,68-1,77 (м, 1Н), 1,82-2,09 (м, 3H), 2,17-2,24 (м, 1Н), 3,43-3,80 (м, 2Н), 3,71 (с, 3H), 4,45-4,55 (м, 2Н), 5,07 (с, 2Н), 5,51 (д, J=8,4, 1Н), 7,32-7,35 (м, 5Н).

Пример 73

Синтез NVa-Pro-OH

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору Z-NVa-Pro-OMe (36 мг, 99 мкмоль) в смеси ТГФ и МеОН (130 мкл:130 мкл) при 0°С добавляют водн. LiOH (130 мкл, 15% м/м). После 6 ч перемешивания реакционную смесь распределяют между Н2O (3 мл) и диэтиловым эфиром (3×2 мл). Органическую фазу экстрагируют затем NaHCO 3 (3×2 мл). Объединенные водные фазы нейтрализуют (рН 5) водн. HCl (0,1 н) и экстрагируют Et2 O (3×3 мл). Органическую фазу сушат (Na2 SO4), фильтруют и концентрируют, получая указанное в заглавии соединение (36 мг, колич.) в виде бесцветного масла.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,96 (т, J=6,9, 2H), 1,41 (секст., J=7,4, 2H), 1,53-1,65-1,77 (м, 2H), 1,82-2,10 (м, 3H), 2,17-2,24 (м, 1Н), 3,52-3,81 (м, 2H), 4,45-4,58 (м, 2H), 5,07 (уш.с, 2H), 5,81 (д, J=8,4, 1Н), 7,30-7,35 (м, 5Н), 7,41 (уш.с, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C18H24N 2O5: 348,17. Найдено (m/z): 349,2 (M+H)+.

Пример 74

Синтез [ZNVa-Pro]9-аплидина (9NVSAPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SAPL2 (18 мг, 19 мкмоль) и Z-NVa-Pro-OH (34 мг, 97 мкмоль), указанное в заглавии соединение (16 мг, 66%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2 O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=29 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,84-0,96 (м, 27Н), 1,12-1,85 (м, 19Н), 2,00-2,25 (м, 7Н), 2,30-2,40 (м, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,62 (дд, J 1=10,5, J2=17,7, 1Н), 2,93 (д, 4,2, 1Н), 3,14 (с, 3H), 3,14-3,20 (м, 1Н), 3,28-3,34 (м, 2Н), 3,50-3,67 (м, 4Н), 3,77-3,80 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,82-3,91 (м, 1Н), 4,00-4,17 (м, 2Н), 4,27 (дд, J1=6,3, J 2=13,2, 1Н), 4,43-4,51 (м, 2Н), 4-58-4,63 (м, 1Н), 4,69-4,75 (м, 1Н), 4,77-4,82 (м, 1Н), 5,07 (д, 1Н, J=12,9, 2Н), 5,13 (д, J=12,9, 1Н), 5,32-5,41 (м, 2Н), 6,07 (д, J=8,7, 1Н), 6,83 (д, J=8,4, 2Н), 7,06 (д, J=8,4, 2Н), 7,17 (д, J=9, 9, 1Н), 7,32 (м, 5Н), 7,83 (д, J=9,0, 1H).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,68, 13,74, 14,56, 15,24, 16,39, 16,85, 18,61, 20,94, 21,26, 23,34, 23,70, 24,76, 24,90, 25,02, 26,00, 27,17, 27,81, 28,54, 31,29, 31,40, 33,30, 33,85, 33,86, 36,19, 38,62, 38,84, 41,31, 46,91, 47,21, 49,38, 49,49, 52,50, 54,96, 55,24, 55,25, 56,50, 57,17, 57,96, 62,53, 66,40, 67,93, 70,64, 81,37, 114,04, 127,89, 127,77, 128,32, 129,97, 130,29, 136,84, 156,72, 158,55, 168,48, 169,36, 169,58, 170,52, 171,27, 171,71, 172,54, 173,22, 205,08.

ESI-MC Рассчит. для C67H 100N8O16: 1277,3, Найдено (m/z): 1273,7 (M+H)+.

Пример 75

Синтез [Hiv]3-[Z-NVa-Pro] 9-аплидина (9NVSHPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 ммоль) и Z-NVa-Pro-OH (20 мг, 56 мкмоль), указанное в заглавии соединение (8 мг, 60%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2 O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=26,7 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,80 (м, 22Н), 1,82-2,35 (м, 6Н), 2,42 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 2,96-3,38 (м, 4Н), 3,10 (с, 3H), 3,48-3,72 (м, 5Н), 3,78 (с, 3H), 3,88 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,18 (м, 1Н), 4,47 (м, 1Н), 4,68 (м, 2Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J1=5,3, 1Н), 5,08 (м, 2Н), 5,28 (м, 1Н), 5,42 (м, 1Н), 6,10 (д, J=8,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2H), 7,07 (д, J=8,3, 2H), 7,31 (м, 6Н), 7,72 (д, J=4,3, 1H) 7,78 (д, J=8,7, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 12,06, 13,88, 14,22, 16,85, 17,76, 18,89, 19,18, 21,12, 21,47, 23,72, 23,98, 25,08, 26,25, 27,57, 28,15, 28,79, 30,32, 31,61, 33,45, 33,72, 34,07, 35,95, 38,92, 39,59, 39,90, 46,87, 47,44, 48,46, 52,76, 55,21, 55,49, 56,77, 57,17, 58,37, 66,41, 66,65, 69,22, 71,14, 79,07, 114,24, 127,87, 128,00, 128,56, 130,25, 130,55, 157,00, 158,79, 168,82, 169,86, 170,36, 170,58, 170,77, 171,30, 171,86, 173,28, 174,94.

ESI-MC Рассчит. для C 64H96N8O 15: 1216,7. Найдено m/z: 1217,5 (M+H)+ .

Пример 76

Синтез [NVa-Pro]9 -аплидина (9NVSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Дегазированную смесь 9NVSAPL2 (10 мг, 7,8 мкмоль) и Pd/C (10%, 5 мг) в IPA:H2O (0,2 мл: 0,1 мл) насыщают (и выдерживают при 1 атм) газообразным водородом при перемешивании в течение 14 ч. Затем смесь фильтруют (тефлон, 0,45 мкм) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение (8,8 мг, колич.) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,85-0,95 (м, 27Н), 1,18-1,51 (м, 18Н), 1,50-2,45 (м, 7Н), 2,59-2,83 (м, 1Н), 2,57 (с, 3H), 2,57-2,80 (м, 3H), 2,81-2,95 (м, 1Н), 3,14 (с, 3H), 3,15-3,40 (м, 3H), 3,52-3,79 (м, 4Н), 3,79 (с, 3H), 4,45-4,52 (м, 1Н), 4,61-4,65 (м, 1Н), 4,70-4,85 (м, 2Н), 5,17 (д, J=3,3, 1H), 5,36-5,39 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,1, 2Н), 7,86 (д, J=8,7, 2Н), 7,19 (д, J=10,2, 1Н), 7,82 (д, J=9,0, 1Н), 7,80-7,85 (м, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C 59H40N8O 14: 1138,69. Найдено (m/z): 1193,7 (M+H) +.

Пример 77

Синтез [Hiv]3 -[NVa-Pro]9-аплидина (9NVSHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9NVSAPL1, исходя из 9NVSHPL2 (10 мг, 8,2 мкмоль), указанное в заглавии соединение (8 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 30Н), 1,12-1,85 (м, 22Н), 1,92-2,35 (м, 6Н), 2,42 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 3,10-3,45 (м, 4Н), 3,10 (с, 3H), 3,50-3,70 (м, 5Н), 3,78 (с, 3H), 3,82 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,26 (м, 1Н), 4,65 (м, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 5,02 (д, J=5,3, 1Н), 5,32 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,38 (д, J=8,7, 1Н), 7,60 (д, J=4,3, 1Н), 7,80 (д, J=9,3, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 12,03, 14,13, 14,30, 16,80, 17,81, 18,72, 19,15, 21,09, 21,55, 23,73, 23,96, 25,07, 26,16, 27,55, 28,17, 28,72, 29,91, 30,33, 31,52, 33,80, 34,17, 36,00, 38,94, 39,51, 39,84, 46,88, 47,51, 48,45, 55,01, 55,49, 56,91, 57,15, 58,10, 66,37, 69,17, 71,10, 79,12, 114,29, 130,21, 130,57, 158,82, 163,66, 168,91, 169,86, 170,38, 170,75, 170,82, 171,30, 173,22, 174,79.

ESI-MC Рассчит. для C56H 90N8O13: 1082,66. Найдено m/z: 1083,7 (M+H)+.

Пример 78

Синтез [Hiv]3-[L-Lac(OTBDMS)] 9-аплидина [9LSHPL2(L)]

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль) и (L)-Lac (OTBDMS)-Pro-OH (17 мг, 56 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 68%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, градиент ACN/H2O 85:15 - 100:0 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=30,1 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,08 (с, 3H), 0,10 (с, 3H), 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,11-1,72 (м, 18Н), 1,75-2,51 (м, 6Н), 2,41 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 3,00-3,40 (м, 5Н), 3,11 (с, 3H), 3,53-3,82 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,91 (м, 2Н), 4,02 (м, 1Н), 4,27 (м, 1Н), 4,50 (м, 1Н), 4,63 (м, 2Н), 4,87 (м, 1Н), 5,01 (д, J=4,8, 1H), 5,27 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,7, 2Н), 7,07 (д, J 8,7, 2H), 7,29 (д, J=9,7, 1H), 7,63 (д, J=5,8, 1H), 7,88 (д, J=9,7, 1H).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -4,26, -4,12, 12,04, 14,40, 16,91, 17,97, 19,14, 20,60, 21,11, 21,66, 23,82, 24,11, 24,96, 25,08, 26,11, 26,37, 27,53, 28,18, 28,37, 30,33, 31,69, 33,75, 34,19, 36,23, 39,00, 39,36, 39,81, 46,87, 47,64, 48,45, 54,91, 55,37, 55,48, 56,81, 57,08, 58,37, 66,38, 69,14, 69,89, 71,42, 79,19, 82,66, 114,23, 130,36, 130,59, 158,77, 168,43, 469,86, 170,72, 171,01, 171,21, 172,03, 173,62, 174,91.

ESI-MC Рассчит. для C60 H99N7O 14Si: 1169,7. Найдено m/z: 1170,9 (M+H) +.

Пример 79

Синтез [Hiv]3 -[D-Lac(OTBDMS)]9-аплидина [9LSHPL2(D)]

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль) и (D)-Lac (OTBDMS)-Pro-OH (17 мг, 56 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 68%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, градиент ACN/H2O 85:15 - 100:0 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=30,4 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,03 (м, 3H), 0,06 (м, 3H), 0,87 (с, 9Н), 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,11-1,72 (м, 18Н), 1,75-2,30 (м, 6Н), 2,41 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 3,00-3,40 (м, 5Н), 3,06 (с, 3H), 3,56 (м, 1Н), 3,65 (м, 2Н), 3,78 (с, 3H), 3,90 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,17 (м, 1Н), 4,25 (м, 1Н), 4,39 (м, 1Н), 4,61 (м, 2Н), 4,86 (м, 1Н), 5,00 (д, J=4,8, 1Н), 5,25 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,29 (д, J=9,7, 1Н), 7,74 (д, J=5,3, 1Н), 7,87 (д, J=9,7, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -4,87, -4,84, 12,04, 14,38, 16,89, 17,94, 19,14, 20,24, 21,08, 21,60, 23,85, 24,12, 24,90, 25,06, 25,13, 26,01, 26,53, 27,53, 27,83, 28,20, 30,33, 31,51, 33,76, 34,20, 36,16, 38,99, 39,35, 39,82, 46,87, 47,02, 48,46, 54,79, 55,42, 55,48, 57,08, 57,18, 58,28, 66,39, 69,11, 71,43, 72,61, 79,18, 114,25, 130,29, 130,59, 158,79, 168,45, 169,86, 170,77, 170,81, 170,97, 171,20, 172,53, 173,67, 174,84.

ESI-MC Рассчит. для C 60H99N7O 14Si: 1169,7. Найдено m/z: 1170,8 (M+H) +.

Пример 80

Синтез [Val]3 -[L-Lac(OTBDMS)]9-аплидина [9LSVPL2(L)]

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SVPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль) и (L)-Lac(OTBDMS)-Pro-ОН (17 мг, 56 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 68%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2 O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=17,8 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,14 (с, 6Н), 0,71-1,06 (м, 27Н), 1,10-1,42 (м, ЮН), 1,43-1,84 (м, 8Н), 1,85-2,40 (м, 11Н), 2,57 (с, 3H), 2,80 (д, J=14,7, 1Н), 3,15 (с, 3H), 3,15-3,23 (м, 1Н), 3,33-3,42 (м, 2Н), 3,54 (дд, J1=4,2, J2=10,8, 1Н), 3,58-3,69 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,88-3,90 (м, 1Н), 4,05-4,12 (уш.т, 1Н), 4,32 (уш.с, 1Н), 4,43-4,68 (м, 4Н), 4,77 (т, J=10,5, 1H), 5,31-5,35 (м, 2Н), 6,83 (д, J=8,4, 2Н), 7,08 (д, J=8,7, 2Н), 7,39 (д, J=9,9, 1Н), 7,45 (д, J=9,0, 1Н), 7,60 (д, J=10,5, 1Н), 7,83 (д, J=4,5, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -4,67, -4,49, 11,84, 14,13, 16,67, 18,19, 18,41, 19,68, 20,48, 21,15, 21,40, 23,61, 23,92, 24,72, 24,80, 25,06, 25,88, 26,24, 27,17, 28,04, 28,13, 29,78, 31,57, 33,33, 33,81, 35,99, 38,84, 41,56, 41,95, 46,83, 47,52, 48,68, 54,09, 54,64, 55,26, 56,63, 57,13, 58,36, 59,12, 66,20, 70,10, 70,57, 71,27, 77,20, 114,01, 130,13, 130,36, 158,55, 168,09, 169,76, 170,07, 170,48, 170,77, 172,21, 172,33, 173,58, 175,45.

ESI-MC Рассчит. для C59H40N 8O14: 1168,72. Найдено (m/z): 1169,8 (M+H)+.

Пример 81

Синтез [Hiv] 3-[L-Lac]9-аплидина [9LSHPL1(L)]: тамандарина А

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору 9LSHPL2(L) (16 мг, 14 мкмоль) в ТГФ (500 мкл, безв.) при 0°С в атмосфере Ar добавляют TBAF (50 мкл, 1М в ТГФ). После 1 ч при 22°С смесь концентрируют в вакууме и сырой продукт очищают флэш ЖХ (силикагель, град. DCM:MeOH 1%-5%), получая указанное в заглавии соединение (813 мг, 88%) в виде белого твердого вещества.

Экспериментальные данные опубликованы: Fenical, W. et al., J. Org. Chem. 2000, 65, 782-792.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-0,96 (м, 18Н), 1,02 (д, J=3,4, 3H), 1,04 (д, J=3,4, 3H), 1,14-2,28 (м, 14Н), 1,24 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,8, 3H), 1,43 (д, J=6,8, 3H), 2,44 (дд, J1=7,8, J 2=17,1, 1Н), 2,58 (с, 3H), 3,00 (уш.с, 1Н), 3,10 (с, 3H), 3,14-3,31 (м, 2Н), 3,37-3,43 (м, 2Н), 3,56-3,72 (м, 5Н), 3,79 (с, 3H), 3,90 (т, J=7,8, 1Н), 4,02 (дт, J1 =3,4, J2=9,8, 1Н), 4,25 (д, J=3,9, 1Н), 4,30 (т, J=6,8, 1Н), 4,37 (дд, J1=7,3, J2=8,3, 1Н), 4,65 (м, 1Н), 4,71 (т, J=7,4, 1Н), 4,87 (т, J=11,2, 1Н), 5,03 (д, J=4,9, 1Н), 5,29 (дд, J1=3,4, J2=11,7, 1Н), 5,42 (м, 1Н), 6,83 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н], 7,34 (д, J=9,8, 1Н), 7,48 (д, J=5,4, 1Н), 7,76 (д, J=9,8, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C 54H85N7O 14: 1055,6. Найдено: 1056,7 (M+H)+ .

Пример 82

Синтез [Hiv]3-[D-Lac] 9-аплидина [9LSHPL1(D)]

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9LSHPL1(L), исходя из 9LSHPL2 (D) (20 мг, 17 мкмоль) и TBAF (50 мкл, 1М в ТГФ), получают указанное в заглавии соединение (14 мг, 78%) в виде белого твердого вещества, после очистки флэш ЖХ (силикагель, град. DCM:MeOH 1%-5%).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,78-1,08 (м, 18Н), 1,02 (д, J=3,9, 3H), 1,04 (д, J=3,4, 3H), 1,10-2,36 (м, 14Н), 1,20 (д, J=6,3, 3H), 1,34 (д, J=6,3, 3H), 1,37 (д, J=6,3, 3H), 2,38-2,50 (дд, J1 =7,8, J2=17,5, 1H), 2,56 (с, 3H), 3,10 (с, 3H), 3,13-3,20 (м, 1H), 3,22-3,28 (м, 1H), 3,37-3,42 (дд, J1=3,9, J2=4,3, 1H), 4,61-4,68 (м, 3H), 3,69-3,76 (м, 3H), 3,77 (м, 1H), 3,78 (с, 3H), 3,90 (т, J=7,8, 1H), 3,97-4,07 (м, 1H), 4,26 (м, 1H), 4,41 (кв, J=6,3, 1H), 4,63 (м, 1H), 4,71 (м, 1H), 4,86 (т, J=10,7, 1H), 5,01 (д, J=4,8, 1H), 5,21-5,37 (м, 2Н), 6,83 (д, J=8,3, 2Н), 7,06 (д, J=8,3, 2Н), 7,41 (м, 2Н), 7,77 (д, J=9,2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C54H 85N7O14: 1055,62. Найдено: 1056,6 (M+H)+.

Пример 83

Синтез [Val]3-[L-Lac] 9-аплидина [9LSVPL1(L)]

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9LSHPL1, исходя из 9LSHPL2(D) (5 мг, 4,3 мкмоль), получают указанное в заглавии соединение (4 мг, 88%) в виде белого твердого вещества, после очистки флэш ЖХ (силикагель, град. DCM:MeOH 1%-5%).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,02 (м, 18Н), 1,16-1,42 [и, 4Н), 1,32 (д, J=3,0, 3H), 1,40 (д, J=6,6, 3H), 1,56-1,83 (м, 8Н), 1,95-2,34 (м, 11Н), 2,58 (с, 3H), 2,84 (д, J=14,7, 1H), 3,15 (с, 3H), 3,15-3,23 (м, 1H), 3,36-3,42 (м, 1H), 3,55 (дд, J1=9,0, J2=10,5, 2H), 3,64-3,66 (м, 3H), 3,95 (дд, J1=3,3, J2=9,9, 1H), 4,08 (тд, J1=7,5, J2 =17,1, 1H), 4,32 (уш.с, 1H), 4,41 (дд, J1 =6,6, J2=9,9, 1H), 4,48 (дд, J 1=5,1, J2=10,5, 1H), 4,61 (дд, J 1=6,0, J2=6,6, 1H), 4,69-4,80 (м, 2H), 5,29-5,35 (м, 1H), 5,57 (м, 1H), 6,84 (д, J=8,1, 2H), 7,08 (д, J=8,7, 2H), 7,37 (д, J=3,9, 1H), 7,40 (д, J=5,4, 1H), 7,60 (д, J=10,8, 1H), 7,72 (д, J=3,9, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C54H86N 8O13: 1054,63. Найдено: 1055,8 (М+Н) +.

Синтез спиро[4,4]нонанового фрагмента:

Пример 84

Синтез N-[(2R)-2-аллил-N-(трет-бутоксикарбонил)пролил]D-лейцина (9)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К охлажденному (0°С) раствору 8 (1,53 г, 6 ммоль) в безв. DCM (33 мл) в атмосфере аргона добавляют: HOAt (980 мг, 7,2 ммоль), D-Leu-OBn.pTsOH (2,65 г, 12 ммоль), NMM (1,21 г, 12 ммоль) и DCC (1,48 г, 7,2 ммоль). Смесь перемешивают 2 ч при 0°С и затем 12 ч при к.т.; добавляют дополнительное количество D-Leu-OBn.pTsOH (0,66 г, 3 ммоль) и NMM (0,30 г, 3 ммоль) и смесь перемешивают еще 3 ч. Смесь фильтруют и растворитель концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в EtOAc (30 мл) и промывают последовательно NaHCO3 (2×25 мл, нас.), лимонной кислотой (2×25 мл, 10%) и насыщенным раствором соли (25 мл). Органический раствор сушат (Na 2SO4) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, 6:1), получая 9 (2,63 г, 96%) в виде бесцветного масла. [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 20 12,4° (с 1, МеОН). ВЭЖХ [колонка Bondapack C18 (Waters), 10 м, 3,9×300 мм, расход: 1 мл/мин, при 214 нм, элюент CAN/0,05% TFA (40:60)] tR=9,08 мин].

1H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d 6) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,86 (м, 6Н), 1,37 (с, 9Н), 1,55-1,72 (м, 5Н), 2,00 (м, 2Н), 2,64 (м, 1Н), 2,86 (м, 1Н), 3,15 (м, 1Н), 3,55 (м, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 5,05-5,11 (м, 4Н), 5,63-5,72 (м, 1Н), 7,28-7,35 (м, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, ацетон-d 6) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 21,6, 22,8, 24,6, 28,3, 34,7, 38,2, 41,3, 49,38, 51,0, 66,9, 69,7, 80,1, 119,1, 128,3, 132,7, 153,9, 172,8.

Ссылка, синтез 8: a) Seebach, D. et al. J. Am. Chem. Soc. 1983, 105, 5390-5398. b) Genin, М. J. et al. J. Org. Chem. 1993, 58, 2334-2337.

Пример 85

Синтез (5R,8RS)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-8-гидрокси-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (10)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору 9 (1,56 г, 3,42 ммоль) в МеОН/Н 2О (2:1, 108 мл) в атмосфере аргона добавляют раствор OsO 4 (2,5% м/м, 2,9 мл) в трет-бутаноле. Перемешивание продолжают еще 10 мин и добавляют NaIO4 (2,195 г, 10,3 ммоль). После 24 ч перемешивания реакционную смесь разбавляют H2O (100 мл) и экстрагируют BtOAc (3×50 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (50 мл), сушат (Na2SO 4) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, градиент 80:20 - 0:100%), получая диастереомеры 10а и 10b (вместе: 1,17 г, 76%) в виде белого твердого вещества.

10а: ВЭЖХ [Column Novapack C 18 (Waters), 3,9×150 мм, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =1 мл/мин, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =214 нм, элюент: СН3CN/0,05% TFA, (40/60)] tR=14,45 мин. Т.пл.: 140-141°С. [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 20 -4° (с 1, МеОН).

1H-ЯМР (300 МГц, ацетон-d 6) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,90 (м, 6Н), 1,29 (с, 9Н), 1,64-2,30 (м, 9Н); 2,68 [дд, 1Н, J1=6, J2=13, 1Н), 3,37 (м, 2Н), 4,51 (дд, 1Н), 5,13. (д, J=15, 2Н), 5,79 (т, J=5, 2Н), 7,40 (м, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, ацетон-d6) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 21,8, 23,8, 24,1, 24,9, 28,5, 39,6, 40,8, 41,5, 48,5, 66,8, 79,4, 79,8, 81,2, 129,1, 129,3, 128,6, 171,7, 172,0.

ESI-MC Рассчит. для C25H 36N2O6: 460,26. Найдено m/z: 483,4 (M+Na)+.

10b: ВЭЖХ [Column Novapack C18 (Waters), 3,9 x 150 мм, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =1 мл/мин, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =214 нм, элюент: СН3CN/0,05% TFA, (40/60)] tR=18,75 мин. Т.пл.: 134-135°С. [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 20+26 (с 1,2, МеОН).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,90 (6Н, м), 1,40 (9Н, с), 1,50-2,60 (9Н, м), 3,40 (2Н, м), 4,20-5,40 (5Н, м), 7,40 (5Н, м).

13 С-ЯМР (75 МГц, ацетон-d6) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 21,3, 23,2, 24,1, 24,9, 28,3, 38,9, 40,2, 42,5, 47,9, 53,2, 66,8, 77,5, 79,4, 80,6, 129,1, 171,2, 174,1.

ESI-MC Рассчит. для С25Н36 N2O6: 460,25. Найдено m/z: 483,5 (М+Na)+.

Пример 86

Синтез (5R)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана в виде трифторацетатной соли (11)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору 10 (430 мг, 0,93 ммоль) в TFA (10 мл) добавляют NaBH4 (106 мг, 2,8 ммоль). Смесь перемешивают 2 ч и затем реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток распределяют между Н 2O (5 мл) и DCM (20 мл). Органическую фазу сушат (Na 2SO4) и концентрируют в вакууме, получая 11 в виде оранжевого масла (318 мг, колич.). [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]D 20+15 (с 1, МеОН).

1H-ЯМР (300 МГц, ацетон-d 6) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,91 (м, 6Н), 1,50 (м, 1Н), 1,66-1,94 (м, 2Н), 2,11-2,72 (м, 6Н), 3,48-3,72 (м, 4Н), 4,74 (дд, J1 =6, J2=15, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 7,37 (м, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, ацетон-d 6) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 21,2, 23,2, 23,9, 25,5, 30,2, 34,6, 38,0, 42,2, 46,6, 53,9, 67,6, 69,6, 129,3, 161,1, 161,6, 170,9, 172,6.

ESI-MC Рассчит. для C20H28 N2O3: 344,21. Найдено m/z: 345,3 (M+H)+.

Пример 87

Синтез (5R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (12)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору 11 (150 мг, 0,44 ммоль) в ACN (5 мл) добавляют при перемешивании пентагидрат тетраметиламмонийгидроксида (158 мг, 0,87 ммоль) и Вос2O (144 мг, 0,66 ммоль). Спустя 6 ч добавляют дополнительное количество ТМАН.5 Н2O (158 мг) и Вос2 O (192 мг). Реакционную смесь перемешивают 2 ч и затем распределяют между Н2O (10 мл) и DCM (25 мл). Водную фазу лиофилизуют и очищают ЖХ-диоксид кремния (DCM-MeOH, градиент 92:8 - 60:40), получая 12 (100 мг, 64%) в виде белого твердого вещества.

Пример 88

Синтез (5R)-1-(изобутирил)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (13)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору 11 (169 мг, 0,49 ммоль) в безв. DCM (10 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют TEA (199 мг, 1,96 ммоль), DMAP (6 мг, 0,049 ммоль) и, по каплям, изобутирилхлорид (104 мг, 0,98 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают 24 ч. Сырой продукт распределяют между Н2O (10 мл) и DCM (10 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли (10 мл), сушат (Na 2SO4) и концентрируют в вакууме. Чистое соединение 13 (150 мг, 74%) в виде белого твердого вещества получают после ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, градиент 60:40 - 0:100).

ВЭЖХ [Column Novapack C18 (Waters), 3,9×150 мм, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =1 мл/мин, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =214 нм, элюент: СН3CN/0,05% TFA, (50/50)] tR=4,50 мин. Т.пл.: 87°С. [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]20 D+9,6 (с 1,4, МеОН).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,90 (2д, J=7, 6H), 1,09-1,12 (2д, 6Н), 1,37 (септет, J=6, 1Н), 1,61-2,10 (м, 7Н), 2,64 (м, 2Н), 3,14 (дд, J 1=9, J2=17, 1Н), 3,64 (м, 3H), 4,85 (дд, J1=5, J2=10, 1Н), 5,14 (д, J=6, 2Н), 7,32 (м, 5Н).

13 С-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 18,6, 18,7, 21,2, 23,1, 24,0, 24,8, 29,5, 32,5, 35,7, 37,6, 40,5, 47,8, 52,7, 66,7, 76,3, 170,8, 174,3, 174,9.

ESI-MC Рассчит. для С21H 34N2O: 414,25. Найдено m/z: 415,4 (M+H)+.

Пример 89

Синтез (5R)-1-(пирувил)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (14)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Пирувилхлорид получают по методике, описанной в литературе, Pansare, S.V.; Gnana R.R. "Asymmetric Allylation and reduction on an Ephedrine-Derived Template: Stereoselective Synthesis of способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -Hydroxy Acids и Derivatives" J. Org. Chem. 1998, 63, 4120-4124. способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ,способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 -Дихлорметилметиловый эфир (188 мг, 1,57 ммоль) добавляют к пировиноградной кислоте (115 мг, 1,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивают 20 мин и полученный раствор нагревают до 50-55°С и затем перемешивают дополнительно 30 мин. Реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры и добавляют DCM (3 мл).

К раствору 11 (150 мг, 0,33 ммоль) в безв. DCM (4 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют TEA (200 мг, 1,98 ммоль), DMAP (4 мг, 0,033 ммоль) и свежеприготовленный раствор пирувилхлорида при 0°С. Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают 6 ч. Сырой продукт промывают последовательно лимонной кислотой (5 мл, 10%), водн. NaHCO 3 нас. (5 мл) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органическую фазу сушат (Na2SO4 ) и концентрируют. Чистое соединение 14 (77 мг, 56%), в виде масла, получают после ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, 1:3).

ВЭЖХ [Column Novapack C18 (Waters), 3,9×150 мм, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =1 мл/мин, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =214 нм, элюент: ACN/0,05% TFA, (50/50)] t R=5,87 и 6,72 мин.

1H-ЯМР (200 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,92 и 0,95 (2д, J=6, 6H); 1,42 (м, 1Н); 1,61-2,39 (м, 7Н), 2,44 (с, 3H), 2,77 (м, 1Н), 3,22 (м, 1Н), 3,56-3,78 (м, 2Н), 3,92 (м, 1Н), 4,67 и 4,85 (дд, J1=6, J2=10, 1Н), 5,21 (с, 2Н), 7,34 (м, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 21,2, 23,0, 24,4, 24,8, 26,4, 29,3, 35,6, 37,3, 40,7, 48,9, 53,0, 66,8, 68,6, 135,0, 166,0, 170,8, 173,0, 198,0.

ESI-MC Рассчит. для C23H 30N2O5: 414,22. Найдено m/z: 415,4 (M+H)+.

Пример 90

Синтез (5R)-1-(2-метилакрилоил)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (15)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 13, исходя из 11 (200 мг, 0,43 ммоль) и метилакрилоилхлорида (89 мг, 0,86 ммоль), получают указанное в заглавии соединение (70 мг, 50%) в виде бесцветного масла, после очистки ЖХ (силикагель, гекс. - EtOAc, 2:1). ВЭЖХ [Column Novapack C18 (Waters), 3,9×150 мм, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =1 мл/мин, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =214 нм, элюент: ACN/0,05% TFA, (25/75)]. Rt=6,38 мин.

1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,91 (т, J=6, 6H), 1,44 (м, 1Н), 1,64-1,93 (м, 5Н), 1,93 (с, 3H), 1,96-2,12 (м, 2Н), 2,78 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 3,56-3,68 (м, 3H), 4,80 и 4,77 (2д, J=10, 1Н), 5,16 (с, 2Н), 5,19 (д, J=9, 2Н), 7,32 (м, 5Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 19,8, 21,4, 23,0, 24,2, 24,9, 29,9, 37,1, 37,7, 41,1, 50,2, 53,2, 66,6, 67,4, 116,9, 128,1, 128,3, 128,4, 135,0, 141,7, 170,7, 174,1.

ESI-MC Рассчит. для C24 H32N2O 4: 412,24. Найдено m/z: 413,3 (M+H)+ .

Пример 91

Синтез (5R)-1-(изобутирил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (16)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Дегазированный раствор 13 (134 мг, 0.32 ммол) в метаноле, содержащий 10% Pd/C (27 мг), гидрируют при 16 фунт/кв.дюйм в течение 24 ч. Смесь фильтруют через подушку из целита и фильтрованный раствор концентрируют при пониженном давлении, получая 16 (100 мг, 95%) в виде бесцветного масла. Т.пл. 68-69°С. [способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 ]20 D-2° (с 1,1, МеОН).

1H-ЯМР (300 МГц, ацетон-d 6) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,87-0,91 (2д, J=7, 6H), 1,09-1,12 (2д, 6H), 1,46 (м, 1Н), 1,70 (м, 2Н), 1,90-2,10 (м, 5Н), 2,49 (м, 1Н), 2,70 (м, 1Н), 3,30 (м, 1Н), 3,49 (дт, J1=8, J 2=10, 1Н), 3,61-3,75 (м, 2Н), 4,71 (дд, J 1=5, J2=11, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 16,4, 16,6, 21,1, 23,0, 24,3, 25,0, 30,8, 32,6, 36,6, 36,9, 40,6, 48,0, 53,4, 67,5, 171,8, 174,2, 176,2.

ESI-MC Рассчит. для C17H28 N2O4: 324,20. Найдено: 323,3 (M-1)+.

Пример 92

Синтез (5R)-1-(пирувил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (17)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Дегазированный раствор 14 (79 мг, 0,26 ммоль) в метаноле (20 мл), содержащий Pd/C (10%, 22 мг), гидрируют при атмосферном давлении 45 мин. Фильтрованный раствор концентрируют при пониженном давлении, получая 17 (79 мг, 95%) в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ [Column Novapack C18 (Waters), 3,9×150 мм, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =1 мл/мин, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =214 нм, элюент: ACN/0, 05% TFA, (20/80)]. Rt=13,14 мин.

1H-ЯМР (200 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,93 (м, 6Н), 1,43 (м, 1Н), 1,71-2,22 (м, 7Н), 2,34 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,74 (м, 1Н), 3,31 (м, 1Н), 3,74 (м, 2Н), 3,92 (м, 1Н), 4,80 (дд, J1=6, J 2=10, 1Н), 7,07 (уш.с, 1Н).

13 С-ЯМР (200 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 21,3, 23,2, 24,7, 25,1, 27,1, 29,9, 36,0, 37,0, 41,0, 49,3, 53,6, 69,1, 162,1, 172,7, 173,7, 197,5.

ESI-MC Рассчит. для С23H30N 2O5: 324,17. Найдено m/z: 325,1 (M+H) +.

Пример 93

Синтез (5R)-1-(2-метилакрилоил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (18)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору 15 (65 мг, 0,16 ммоль) в метаноле (2,5 мл) добавляют водн. NaOH (1,6 мл, 1 н) и Н 2O (1,6 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре 1 ч. Полученную смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток распределяют между Н2O (20 мл) и DCM (20 мл). Водную фазу подкисливают до рН 2 с помощью водн. HCl (10 мл, 0,1 н) и экстрагируют DCM (3×20 мл). Объединенные органические фазы промывают насыщенным раствором соли (25 мл), сушат (Na2SO4) и концентрируют при пониженном давлении, получая 18 (44 мг, 85%) в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ [Column Novapack C 18 (Waters), 3,9×150 мм, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =1 мл/мин, способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 =214 нм, элюент: ACN/0,05% TFA, (25/75)] R t=6,38 мин.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,86 (д, J=5, 3H), 0,89 (д, J=5, 3H), 1,42 (м, 1Н), 1,55-2,25 (м, 8Н), 2,56 (м, 1Н), 3,19-3,44 (м, 2Н), 3,57-3,67 (м, 2Н), 4,78 (д, J=11, 1Н), 4,82 (д, J=11, 1Н), 5,18 (д, J=6, 2Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 19,5, 21,2, 23,1, 24,2, 25,1, 30,9, 36,5, 37,6, 40,9, 50,5, 53,7, 67,5, 117,5, 140,6, 170,8, 174,2.

ESI-MC Рассчит. для С17Н26N 2O4: 322,19. Найдено: 323,2 (М+Н) +.

Пример 94

Синтез [(5R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан 7-9аплидина (9SBSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SAPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 12 (5 мг, 14 мкмоль), HATU (12,4 мг), HOAt (4,5 мг), NMM (3,3 мкл), DCM (140 мкл) и ДМФ (70 мкл), указанное в заглавии соединение (11 мг, 73%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2 O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, R t=30 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,85-0,97 (м, 24Н), 1,19-1,34 (м, 18Н), 1,48 (с, 9Н), 1,50-2,20 (м, 6Н), 2,32-2,36 (м, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,58-2,72 (м, 2Н), 2,97-3,08 (м, 1Н), 3,10-3,22 (м, 3H), 3,34 (дд, 1Н, J=3,9, 13,8), 3,46-3,79 (м, 6Н), 3,79 (с, 3H), 4,03-4,12 (м, 2Н), 4,28 (дд, 1Н, J=6,6, 13,2), 4,57-4,63 (м, 2Н), 4,79-4,88 (м, 2Н), 5,15 (д, 1Н, J=3,3), 5,21-5,23 (м, 1Н), 6,84 (д, 2Н, J=8,4), 7,07 (д, 2Н, J=8,7), 7,28 (д, 1Н, J=10,8), 7,79 (д, 1Н, J=6,6), 7,82 (д, 1Н, J=9,9).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,66, 15,21, 15,43, 16,79, 17,23, 18,69, 18,77, 21,24, 23,67, 23,95, 24,10, 24,90, 25,10, 25,38, 27,04, 28,23, 28,75, 29,93, 31,61, 34,50, 33,88, 34,16, 36,20, 36,57, 38,76, 39,09, 39,78, 41,29, 47,27, 47,76, 49,60, 49,96, 52,66, 55,50, 56,26, 57,38, 58,18, 66,74, 66,86, 68,34, 70,53, 80,75, 81,93, 114,33, 130,23, 130,54, 168,08, 169,83, 170,18, 170,80, 171,43, 172,55, 175,04, 205,04.

ESI-MC Рассчит. для C60 H93N7O 15 1151,7. Найдено m/z: 1152,4 (M+H)+ .

Пример 95

Синтез [Hiv]3-[(5R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан] 7-9-аплидина (9SBSHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 12 (5 мг, 14 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (6 мкл), DCM (150 мкл) и ДМФ (50 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 70%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, R t=28,1 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,80-1,07 (м, 24Н), 1,08-1-67 (м, 12Н), 1,48 (с, 9Н), 1,68-2,30 (м, ЮН), 2,41 (м, 1Н), 2,55 (с, 3H), 2,68 (м, 1Н), 2,94 (м, 1Н), 3,07-3,40 (м, 4Н), 3,42-3,72 (м, 6Н), 3,78 (с, 3H), 3,90 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,29 (м, 1Н), 4,63 (м, 1Н), 4,77 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J=4,8, 1H), 5,25 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,31 (д, J=9,7, 1Н), 7,50 (д, J=5,8, 1Н), 7,85 (д, J=9,7, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 12,07, 14,25, 17,12, 17,92, 19,15, 21,11, 21,18, 23,80, 24,00, 24,06, 24,86, 25,08, 25,15, 27,58, 28,21, 28,82, 30,33, 31,18, 33,78, 34,28, 35,77, 36,65, 39,07, 39,45, 39,86, 46,91, 48,14, 48,47, 52,62, 55,49, 57,13, 58,42, 66,36, 66,80, 69,14, 70,84, 79,19, 80,55, 114,27, 130,29, 130,59, 154,12, 158,81, 168,25, 169,84, 170,72, 170,80, 170,90, 171,25, 174,89.

ESI-MC Рассчит. для C57H 89N7O14 1095,6. Найдено m/z: 1096,9 (M+H)+.

Пример 96

Синтез [(5R)-1-(изобутирил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан] 7-9аплидина (9SISAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SAPL4 (11 мг, 12,9 мкмоль), 16 (5 мг, 15,4 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (3,6 мкл), DCM (155 мкл) и ДМФ (78 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 69%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2 O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=19 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,86-1,00 (м, 24Н), 1,12 (д, J=6,9, 3H), 1,18 (д, J=6,6, 3H), 1,34 (т, J=6,6, 2H), 0,90-1,30 (м, 7Н), 1,56-2,25 (м, 16Н), 2,30-2,80 (м, 3H), 2,55 (с, 3H), 2,95-3,06 (м, 1Н), 3,15-3,25 (м, 3H), 3,65 (дд, 1Н), 3,52-3,79 (м, 6Н), 3,79 (с, 3H), 3,98-4,15 (м, 1Н), 4,28 (дд, J1=6,6, J 2=10,3, 1Н), 4,59 (м, 2H), 4,79-4,85 (м, 2H), 5,17 (д, J=3,6, 1Н), 5,40-5,44 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,4, 2H), 7,06 (д, J=8,7, 2H), 7,24 (д, J=11,1, 1Н), 7,90 (д, J=9,3, 1Н), 8,56 (д, J=5,1, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,50, 14,92, 15,22, 16,68, 16,95, 18,50, 18,59, 18,81, 20,94, 23,42, 23,80, 24,49, 24,68, 24,90, 25,11, 26,91, 27,98, 30,93, 31,30, 35,58, 33,88, 34,16, 35,85, 36,24, 38,64, 38,84, 39,71, 41,29, 47,01, 47,76, 49,42, 49,62, 52,66, 55,26, 55,73, 57,12, 58,21, 66,57, 67,40, 68,10, 70,79, 81,57, 114,07, 130,05, 130,31, 158,57, 168,12, 169,66, 170,08, 170,56, 171,13, 171,96, 172,37, 174,04, 175,41, 205,04.

ESI-MC Рассчит. для С 59Н91N7О 14: 1121,66. Найдено: 1122,8 (М+Н)+ .

Пример 97

Синтез [Hiv]3-[(5R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан] 7-9-аплидина (9SISHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 16 (4,5 мг, 14 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (6 мкл), DCM (150 мкл) и ДМФ (50 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=16,9 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,80-1,07 (м, 24Н), 1,08-1,47 (м, 12Н), 1,48-2,30 (м, 16Н), 2,36 (м, 2Н), 2,56 (с, 3H), 2,65 (м, 1Н), 2,96 (м, 1Н), 3,18 (м, 2Н), 3,36 (м, 2Н), 3,65 (м, 6Н), 3,78 (с, 3H), 3,91 (м, 1Н), 4,02 (м, 1Н), 4,25 (м, 1Н) 4,63 (м, 1Н), 4,72 (м, 2Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J=4,8, 1Н), 5,45 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,7, 2Н), 7,07 (д, J=8,7 2Н), 7,27 (д, J=4,8, 1Н), 7,88 (д, J=9,7, 1Н), 8,32 (д, J=4,8, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C 56H87N7O 13 1065,6. Найдено m/z: 1066,7 (M+H)+ .

Пример 98

Синтез [(5R)-1-(пирувил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан] 7-9аплидина (9SPSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SAPL4 (10 мг, 11,7 мкмоль), 17 (5 мг, 15,4 мкмоль), HATU (12 мг), HOAt (5 мг), NMM (5 мкл), DCM (140 мкл) и ДМФ (70 мкл), указанное в заглавии соединение (9 мг, 63%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=14,4 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,90-1,00 (м, 24Н), 1,05-1,40 (м, 12Н), 1,40-2,25 (м, 16Н), 2,27-2,41 (м, 1Н), 2,42-2,70 (м, 3H), 2,54 (с, 3H), 2,92-2,98 (м, 1Н), 3,12-3-38 (м, 4Н), 3,54-3,78 (м, 4Н), 3,79 (с, 3H), 4,01-4,12 (м, 2Н), 4,20-4,26 (м, 2Н), 4,57-4,62 (м, 2Н), 4,77-4,82 (м, 2Н), 535,18 (д, J=3,0, 2H), 5,37-5,42 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,7, 2Н), 7,07 (д, J=8,7, 2Н), 7,20 (д, J=9,6, 1Н), 7,85 (д, J=9,6, 1Н), 98,04 (д, J=5,4, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,86, 14,97, 15,47, 16,78, 17,12, 18,84, 21,20, 21,27, 23,62, 24,14, 15,03, 25,15, 25,30, 27,35, 27,51, 28,19, 30,46, 31,52, 34,27, 35,95, 39,01, 40,07, 41,59, 47,25, 49,72, 53,08, 55,51, 55,81, 57,38, 58,21, 66,66, 68,19, 69,23, 70,74, 81,69, 85,15, 114,33, 130,13, 130,56, 158,85, 161,12, 168,49, 169,81, 169,91, 170,81, 171,38, 171,69, 172,60, 173,34, 197,64, 205,19.

ESI-MC Рассчит. для C58H 87N7O15: 1121,63. Найдено 1122,3 (М+Н)+.

Пример 99

Синтез [Hiv]3-[(5R)-1-(пирувил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан] 7-9аплидина (9SPSHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 17 (4,5 мг, 14 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (6 мкл), DCM (150 мкл) и ДМФ (50 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=13,6 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,80-1,10 (24Н, м), 1,11-1,80 (12Н, м), 1,81-2,30 (10Н, м), 2,45 (м, 1Н), 2,55 (с, 3H), 2,57 (с, 3H), 3,07-3,43 (м, 6Н), 3,52-3,77 (м, 6Н), 3,78 (с, 3H), 3,91 (м, 1Н), 4,03 (м, 1Н), 4,29 (м, 1Н), 4,63 (м, 1Н), 4,72 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 5,03 (д, J=4,3, 1Н), 5,45 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,29 (д, J=8,7, 1Н), 7,81 (д, J1=9,2, 1Н), 7,87 (д, J=4,8, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C 55H83N7O 14: 1065,6. Найдено 1066,4 (М+Н)+ .

Пример 100

Синтез [Hiv]3-[(5R)-1-(акрилоил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан] 7-9аплидина (9SASHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 18 (5,8 мг, 14 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (6 мкл), DCM (150 мкл) и ДМФ (50 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=16,4 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,85-0,96 (м, 18Н), 1,02-1,05 (м, 6Н), 1,14-1,45 (м, 12Н), 1,49-1,64 (м, 4Н), 1,68-1,77 (м, 1Н), 1,89-2,05 (м, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,10-2,28 (м, 4Н), 2,43 (дд, J1 =7,8, J2=17,1, 1Н), 2,57 (с, 3H), 2,60-2,68 (м, 1Н), 2,97 (уш.с, 1Н), 3,13-3,40 (м, 4Н), 3,54-3,77 (м, 5Н), 3,79 (с, 3H), 3,89-4,07 (м, 2Н), 4,27 (м, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 4,73 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 5,03 (д, J=4,4, 1Н), 5,30 (д, J=20, 1Н), 5,30-5,39 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,29 (с, 1Н), 7,88 (д, J=9,8, 1Н), 8,23 (д, J=7,4, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C56H 85N7O13: 1063,6. Найдено 1064,6 (М+Н)+.

Пример 101

Синтез [Hiv]3-[Z-Ala] 9-аплидина (9ZASHPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую Z-Ala-Pro-OH (36 мг, 112 мкмоль) в DCM (0,4 мл) при 0°С, в атмосфере аргона, добавляют DIPCDI (10 мкл, 64 мкмоль) и смесь перемешивают 60 мин. Затем добавляют раствор SHPL2 (20 мг, 22,5 мкмоль) в DCM (0,2 мл) и через 3 ч реакцию гасят добавлением водн. HCl (3 мл, 0,1 н). Смесь перемешивают 5 мин и затем разбавляют DCM (4 мл) и промывают последовательно водн. KHSO4 (4 мл, 10%), водн. NaHCO3 (4 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (4 мл). Органическую фазу сушат (Na 2SO4), фильтруют и концентрируют. Очистка остатка ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR=18,2 мин) дает 9ZASHPL2 (30 мг, 67%) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,50 (м, 18Н), 1,52-2,70 (м, 6Н), 2,45 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 2,96-3,38 (м, 4Н), 3,10 (с, 3H), 3,52-3,72 (м, 5Н), 3,85 (м, 1Н), 3,78 (с, 3H), 4,01 (м, 1Н), 4,18 (м, 1Н), 4,51 (м, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 4,71 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J1=5,3, 1Н), 5,06 (м, 2Н), 5,25 (м, 1Н), 5,42 (м, 1Н), 6,10 (д, J=8,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,31 (м, 6Н), 7,70 (д, J=4,3, 1Н), 7,77 (д, J=9,7, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,80, 13,97, 16,63, 17,02, 17,48, 18,93, 20,86, 21,15, 23,45, 23,76, 24,78, 25,96, 27,31, 27,92, 28,50, 30,06, 31,36, 33,44, 33,82, 35,66, 38,70, 39,38, 39,63, 46,54, 46,62, 46,98, 47,10, 48,19, 48,59, 54,89, 54,97, 55,22, 56,44, 56,90, 58,14, 66,16, 66,36, 68,95, 70,94, 78,78, 114,00, 127,75, 128,30, 129,90, 130,26, 156,31, 158,53, 168,67, 169,57, 170,06, 170,25, 170,65, 171,97, 173,08, 174,67.

ESI-MC Рассчит. для C 62H92N8O 15 1188,67. Найдено m/z 1189,7 (M+H)+ .

Пример 102

Синтез [Hiv]3-[Вос-Ala] 9-аплидина (9BASHPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), Boc-Ala-Pro-OH (17 мг, 57 мкмоль), DIPCDI (5 мкл) и DCM (300 мкл), указанное в заглавии соединение (9 мг, 70%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H 2O 85:15 - 100:1 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR=14,5 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,50 (м, 15Н), 1,40 (с, 9Н), 1,52-2,70 (м, 9Н), 2,45 (м, 1Н), 2,60 (с, 3H), 3,00-3,43 (м, 4Н), 3,10 (с, 3H), 3,62 (м, 5Н), 3,79 (с, 3H), 3,90 (м, 1Н), 4,02 (м, 1Н), 4,20 (м, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 4,67 (м, 2Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J1=4,3, 1Н), 5,26 (м, 1Н), 5,40 (м, 1Н), 5,76 (д, J=7,8, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,32 (д, J=9,7, 1Н), 7,73 (д, J=4,8, 1Н), 7,80 (д, J=9,7, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 12,06, 14,34, 16,88, 17,20, 27,77, 19,17, 21,10, 21,41, 23,72, 24,03, 25,06, 26,17, 27,60, 28,19, 28,60, 30,31, 31,63, 33,74, 35,96, 38,96, 38,93, 39,59, 39,86, 46,86, 47,27, 48,29, 48,45, 55,18, 55,42, 55,49, 56,59, 57,16, 58,44, 66,43, 69,14, 71,30, 79,05, 79,40, 114,29, 130,21, 130,54, 156,06, 158,83, 168,80, 169,87, 170,51, 170,64, 170,94, 171,31, 172,59, 173,45, 174,92.

ESI-MC Рассчит. здля C59H 94N8O15 1154,68. Найдено m/z 1155,6 (M+H)+.

Пример 103

Синтез [Hiv]3-[Ala] 9-аплидина (9ASHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В колбу, содержащую 9BASHPL2 (8 мг, 6,92 мкмоль), добавляют раствор соляной кислоты в безв. диоксане (1,5 мл, 5,3 н, 7,9 ммоль). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре 5 ч или до полного исчезновения исходного материала (ТСХ). Затем раствор концентрируют при пониженном давлении и остаток растворяют в DCM и вновь концентрируют. Белый пенистый сырой продукт осаждают DCM/гекс. (2 мл/4 мл), получая 9ASHPL1 (7,2 мг, колич.) в виде белого твердого вещества.

ESI-MC Рассчит. для C54H86 N8O13 1054,6. Найдено m/z: 1055,6 (М+Н)+.

Пример 104

Синтез [Hiv]3-[Вос-Pro] 8-дидемнина A (8PSHPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), Вос-Pro-ОН (13 мг, 57 мкмоль), DIPCDI (5 мкл) и DCM (300 мкл), указанное в заглавии соединение (9 мг, 74%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, градиент ACN/H2 O 85:15 - 100:0 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR=18,7 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-2,30 (м, 22Н), 1,47 (с, 9Н), 2,41 (м, 1Н), 3,04 (с, 3H), 3,10-3,74 (м, 7Н), 3,78 (с, 3H), 3,91 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,31 (м, 1Н), 4,59 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J=4,8, 1Н), 5,16 (м, 1Н), 5,36 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,17 (д, J=6,3, 1Н), 7,35 (д, J=9,7, 1Н), 7,85 (д, J=9,7, 1Н).

13 С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 12,04, 14,41, 16,76, 17,97, 19,12, 21,03, 21,66, 23,92, 24,00, 24,77, 25,09, 25,20, 27,53, 28,21, 28,72, 29,67, 30,35, 31,23, 33,80, 34,30, 36,24, 39,05, 39,37, 39,80, 46,90, 47,33, 48,42, 54,48, 55,49, 55,58, 55,84, 57,12, 58,08, 66,31, 69,11, 71,05, 79,23, 80,28, 114,29, 130,23, 130,59, 154,91, 158,82, 168,37, 169,88, 170,66, 170,86, 171,28, 171,40, 174,10, 174,79.

ESI-MC Рассчит. для C56H 91N7O14: 1085,6. Найдено m/z: 1086,7 (M+H)+.

Пример 105

Синтез [Hiv]3-[Pro] 8-дидемнина A (8PSHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ASHPL1, исходя из 8PSHPL2 (7 мг, 6,4 мкмоль), указанное в заглавии соединение (6 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества.

ESI-MC Рассчит. для C51H 81N7O12: 983,59. Найдено m/z: 984,6 (М+Н)+.

Пример 106

Синтез [Hiv]3-[Вос-Val] 8-дидемнина A (8VSHPL2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), Boc-Val-OH (12 мг, 56 мкмоль), DIPCDI (5 мкл) и DCM (300 мкл), указанное в заглавии соединение (9 мг, 82%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, градиент ACN/H2 O 85:15 - 100:0 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, tR=22,1 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 30Н), 1,12-1,82 (м, 12Н), 1,45 (с, 9Н), 1,84-2,40 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,96 (с, 3H), 2,97 (м, 3H), 3,13 (м, 1Н), 3,35 (м, 1Н), 3,56 (м, 1Н), 3,65 (м, 2Н), 3,79 (с, 3H), 3,85 (м, 1Н), 4,03 (м, 1Н), 4,24 (м, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 4,61 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 4,99 (д, J1 =5,3, 1Н), 5,07 (м, 1Н), 5,19 (м, 1Н), 5,60 (д, J=8,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,03 (д, J=8,7, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,46 (д, J=10,2, 1H), 7,84 (д, J=9,2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С56H91N 7О14: 1085,6. Найдено m/z: 1086,7 (M+H)+.

Пример 107

Синтез [Hiv] 3-[Val]8-дидемнина A (8VSHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ASHPL1, исходя из 8VSHPL2 (8 мг, 7,4 мкмоль), указанное в заглавии соединение (7 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества.

ESI-MC Рассчит. для C51H 83N7O12: 985,61. Найдено (m/z): 986,6 (М+Н)+.

Пример 108

Синтез [Hiv]3-[Val] 8-[изобутирил]9дидемнина A (8V9ISHPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору 8VSHPL1 (6 мг, 5,8 мкмоль) в DCM (200 мкл) при 0°С в атмосфере Ar добавляют NMM (3,3 мкл, 30 мкмоль) и изобутирилхлорид (2 мкл, 19 мкмоль). После 5 ч перемешивания при к.т. реакционную смесь разбавляют DCM (5 мл) и промывают последовательно воды. KHSO4 (5 мл, 10%), водн. HCO3Na (5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органический раствор сушат (Na 2SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 8V9ISHPL1 (6 мг, 97%) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,82-1,10 (м, 36Н), 1,12-1,85 (м, ЮН), 1,90-2,45 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,90 (м, 1Н), 3,00 (с, 3H,), 3,13 (м, 2Н), 3,36 (дд, J1=4,3, J2=14,1, 1Н), 3,64 (м, 6Н), 3,78 (с, 3H), 3,87 (м, 1Н), 3,97 (м, 1Н), 4,21 (м, 1Н), 4,34 (м, 2Н), 4,61 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 4,98 (д, J=4,8, 1Н), 5,17 (м, 2Н), 6,24 (д, J=6,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,32 (д, J=6,3, 1Н), 7,35 (д, J=4,3, 1Н), 7,81 (д, J=9,7, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C 55H89N7O 13, 1055,6. Найдено m/z: 1056,7 (M+H)+ .

Пример 109

Синтез [кумарин]8 дидемнина A (8CSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SAPL2 (20 мг, 21 мкмоль) и кумарин-3-карбоновой кислоты (20 мг, 107 мкмоль), указанное в заглавии соединение (18 мг, получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H2 O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t R=16,5 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,78-1,00 (м, 24Н), 1,20-2,50 (м, 22Н), 2,56 (с, 3H), 2,92 (с, 3H), 3,08-3,25 (м, 2Н), 3,90 (м, 1Н), 3,60 (м, 2Н), 3,70 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,92-4,25 (м, 3H), 4,60 (м, 1Н), 4,80 (м, 2Н), 5,15 (м, 1Н), 5,18 (д, J=3,4, 1Н), 5,28 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,20 (д, J=6,3, 1Н), 7,37 (м, 2Н), 7,45 (д, J=9,7, 1Н), 7,58 (м, 2Н), 7,96 (м, 1Н), 8,23 (м, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C59 H82N6O 15: 1114,58. Найдено: 1116,3 (М+Н)+ .

Пример 110

Синтез метилового эфира кумарин-3-карбониламиноуксусной кислоты (8G9C2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

В круглодонную колбу, содержащую метилглицин (89 мг, 1,00 ммоль), 3-карбоксикумарин, безв. DCM (25 мл), в атмосфере Ar, добавляют при комнатной температуре N'-(3-диметиламинопропил)-N-этилкарбодиимидгидрохлорид (EDC) (479 мг, 2,50 ммоль) и DMAP (489 мг, 4,00 ммоль). Полученную смесь перемешивают 1 ч 30 мин (полная конверсия по ТСХ). Затем добавляют DCM (20 мл) и раствор промывают последовательно водн. NaHCO3 (10 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (10 мл). Органическую фазу сушат (Na2 SO4), фильтруют и концентрируют. Полученный оранжевый твердый продукт очищают флэш ЖХ (силикагель, град. гекс.:EtOAc 1:1 - 2:1), что дает указанное в заглавии соединение (445 мг, колич.) в виде бесцветного масла. Rf=0,08 (гекс./BtOAc 1:1).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 3,79 (с, 3H), 4,25 (д, J=5,4, 2H), 7,40 (м, 2H), 7,74 (д, J=7,3, 1Н), 7,68 (м, 2H), 8,91 (с, 1Н), 9,25 (с, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для С13H 11NO5: 261,06. Найдено: 283,1 (M+Na) +.

Пример 111

Синтез кумарин-3-карбониламиноуксусной кислоты (8G9C1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору метилового эфира кумарин-3-карбониламиноуксусной кислоты (312 мг, 1,19 ммоль) в ТГФ (12 мл) в атмосфере Ar при 0°С (ледяная баня) добавляют по каплям раствор LiOH в Н 2O (0,2 М). Реакционную смесь энергично перемешивают при комнатной температуре до полной конверсии по ТСХ (2 часа). Раствор частично концентрируют и добавляют Et2O (10 мл). Органический слой промывают NaHCO3 (10 мл, нас.) и объединенные водные слои подкисливают 10% KHSO 4 (pH 3-4) и экстрагируют диэтиловым эфиром (3×20 мл). Органический слой концентрируют при пониженном давлении, получая 8G9C1 (280 мг, 95%) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 4,18 (д, J=5,3, 2Н), 7,41 (м, 1Н), 7,45 (д, J=7,8, 1H), 7,74 (д, J=7,3, 1H), 7,78 (т, J=8,3, 1H), 7,85 (д, J=7,8, 1H], 8,89 (с, 1H), 9,41 (м, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С 12Н9NO5: 247,05. Найдено: 248,0 (М+Н)+.

Пример 112

Синтез [Gly]8-[кумарин] 9дидемнина A (8G9CSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SAPL2 (20 мг, 21 мкмоль) и кумарин-3-карбоновой кислоты (26 мг, 105 мкмоль), указанное в заглавии соединение (18 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (Symetry Prepспособы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 C18, изократное соотношение ACN/H2 O 60:40 (расход: 3 мл/мин, 150×7,8 мм, при 270 нм, t R=17,5 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,85-0,94 (м, 24Н), 1,23-2,17 (м, 21Н), 2,30-2,44 (м, 1H), 2,56 (с, 3H), 3,01 (с, 3H), 3,10-3,24 (м, 2Н), 3,40 (дд, J1=5,4, J2=14,2, 1H), 3,59-3,74 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,99-4,21 (м, 4Н), 4,37-4,44 (м, 1H), 4,60 (м, 1H), 4,68 (м, 1H), 4,81 (т, J=9,8, 1H), 5,18 (д, J=3,4, 1H), 5,25 (дд, J1=2,9, J 2=5,9, 1H), 5,20-5,45 (м, 1H), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,19-7,28 (м, 1H), 7,34-7,42 (м, 2Н), 7,63-7,72 (м, 2Н), 7,88 (д, J=8,3, 2Н), 9,00 (с, 1H), 9,57 (м, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C61H 85N7O16: 1171,61. Найдено: 1172,5 (М+Н)+.

Пример 113

Синтез N-метилсульфонил-Pro-OBz (Р2)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору Pro-OBn (HCl) (300 мг, 1,24 ммоль) в DCM (25 мл, безв.) при 0°С в атмосфере Ar добавляют по каплям с помощью шприца DIPEA (0,7 мкл) и метансульфонилхлорид (116 мкл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют DCM (10 мл) и раствор промывают последовательно водн. KHSO4 (15 мл, 10%), водн. NaHCO 3 (15 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (15 мл). Органическую фазу сушат (Na2SO4 ), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая чистый Р2 (350 мг, 1,24 ммоль, колич.) в виде белого твердого вещества. Rf=0,55 (гекс./AcOEt 1:1).

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 1,91-2,08 (м, 3H), 2,19-2,31 (м, 1Н), 2,93 (с, 3H), 3,38-3,54 (м, 2Н), 3,65 (с, 3H), 4,51 (дд, J1=3,4, J2=8,3, 1Н), 5,11 (д, J=12,2, 1Н), 5,18 (д, J=12,2, 1Н), 7,31 (м, 5Н).

ESI-MC Рассчит. для C 13H17NO4S: 283,09. Найдено: 284,1 (М+Н)+.

Пример 114

Синтез N-метилсульфонил-Pro-ОН (P1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Дегазированную смесь N-метилсульфонил-Pro-OBz (Р2) (250 мг, 0,88 ммоль) и Pd(OH)2/C (20% Pd, 100 мг, 40% м/м) в IPA:Н2O (26 мл: 13 мл) насыщают H2 и выдерживают при 1 атм газообразного водорода 3 ч. Затем смесь фильтруют через тефлоновый фильтр (0,45 мкм) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение (128 мг, 75% выход) в виде белого твердого вещества, без дополнительной очистки.

1 H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 1,94-2,03 (м, 2Н), 2,07-2,14 (м, 1Н), 2,22-2,35 (м, 1Н), 2,96 (с, 3H), 3,44 (м, 2Н), 4,44 (дд, J1 =3,9, J2=8,8, 2Н), 9,10 (м, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3 ) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 24,96, 31,08, 38,46, 48,06, 60,66, 174,75.

ESI-MC Рассчит. для C6H11 NO4S: 193,22. Найдено: 194,0 (М+Н) +.

Пример 115

Синтез [Метилсульфонил] 9аплидина (9MSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) и N-метилсульфонил-Pro-ОН (10 мг, 53 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 74%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (Symetry Prep С18, изократное соотношение ACN/H2 O 60:40 (расход: 3 мл/мин, 150×7,8 мм, при 270 нм, t R=9 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,78-1,00 (м, 24Н), 1,20-2,50 (м, 26Н), 2,56 (с, 3H), 2,93 (м, 1Н), 3,04 (с, 3H), 3,06 (с, 3H), 3,08-3,25 (м, 2Н), 3,28-3,50 (м, 2Н), 3,60 (м, 2Н), 3,70 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 4,05 (м, 2Н), 4,17 (м, 1Н), 4,60 (м, 2Н), 4,81 (м, 2Н), 5,10 (м, 1Н), 5,19 (д, J=3,4, 1Н), 5,33 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 6,86 (м, 1Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,09 (м, 1Н), 7,82 (д, J=9,2, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C55H 87N7O15S: 1117,60. Найдено: 1118,7 (M+H)+.

Пример 116

Синтез [Метилсульфонил]8дидемнина A (8MSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) в DCM (200 мкл, безв.) при 0°С в атмосфере Ar добавляют DIPEA (3 мкл) и метансульфонилхлорид (0,85 мкл). Реакционную смесь перемешивают при 5°С в течение ночи. Добавляют DCM (10 мл) и раствор промывают последовательно водн. KHSO 4 (5 мл, 10%), водн. NaHCO3 (5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органическую фазу сушат (Na2SO4), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая чистый 8MSAPL1 (11 мг, колич.) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,83-0,97 (м, 24Н), 1,10-1,45 (м, 10Н), 1,50-1,65 (м, 5Н), 1,76-1,82 (м, 2Н), 2,00-2,20 (м, 3H), 2,27-2,36 (м, 1Н), 2,45-2,55 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 2,90 (с, 3H), 3,02 (с, 3H), 3,08 (д, J=16,6, 1Н), 3,17 (дд, J1=10,7, J2=14,1, 1Н), 3,37 (м, 1Н), 3,60 (м, 2Н), 3,70 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,99-4,11 (м, 3H), 4,49 (м, 1Н), 4,59 (м, 1Н), 4,78 (м, 2Н), 5,06 (м, 1Н), 5,19 (д, J=3,9, 1Н), 6,68 (д, J=8,8, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,33 (д, J=9,8, 1Н), 7,61 (д, J=8,8, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C50H80N 6O14S: 1020,55. Найдено: 1022,1 (М+Н) +.

Пример 117

Синтез [биотин] 8дидемнина A (8BISAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору HATU (24 мг, 61 мкмоль), HOAt (8 мг, 63 мкмоль), SAPL2 (20 мг, 21,4 мкмоль) и d-биотина (7,8 мг, 32 мкмоль) в безв. DCM (400 мкл) при 0°С в атмосфере Ar добавляют по каплям с помощью шприца NMM. Полученную смесь перемешивают 2 ч при 0°С и затем при комнатной температуре еще 14 ч. Добавляют DCM (10 мл) и раствор промывают последовательно водн. KHSO4 (5 мл, 10%), водн. NaHCO 3 (5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органическую фазу сушат (Na2SO4 ), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Указанное в заглавии соединение (18 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (Symetry Prep С18, градиент ACN/H 2O 60:40 - 100:0 в 10 мин (расход: 3 мл/мин, 150×7,8 мм, при 270 нм, tR=6 мин).

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,78-1,00 (м, 24Н), 1,20-1,98 (м, 23Н), 2,00-2,62 (м, 7Н), 2,53 (с, 3H), 2,80-3-00 (м, 2Н), 2,86 (с, 3H), 3,16 (м, 2Н), 3,35 (м, 2Н), 3,57 (м, 2Н), 3,70 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 4,01 (м, 2Н), 4,10 (м, 1Н), 4,31 (м, 1Н), 4,46 (м, 1Н), 4,56 (м, 1Н), 4,82 (м, 2Н), 5,00 (м, 1Н), 5,14 (м, 2Н), 5,67 (с, 1Н), 6,23 (с, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,28 (д, J=8,5, 1Н), 7,35 (д, J=7,8, 1Н), 8,01 (д, J=8,7, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C59H 92N8O14S: 1168,65. Найдено: 1169,6 (М+Н)+.

Пример 118

Синтез [фенилкарбамид]8дидемнина A (8PUSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

К раствору SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) в DCM (200 мкл, безв.) при 0°С в атмосфере Ar добавляют фенилизоцианат (1,3 мкл, 12 мкмоль) и реакционную смесь перемешивают при к.т. 4 часа. Добавляют DCM (10 мл) и раствор промывают последовательно водн. KHSO4 (5 мл, 10%), водн. NaHCO 3 (5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органическую фазу сушат (Na2SO4 ), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая чистый 8PUSAPL1 (11 мг, 94%) в виде белого твердого вещества.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl 3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,85-0,94 (м, 24Н), 1,11-1,43 (м, 4Н), 1,22 (д, J=6,8, 3H), 1,35 (д, J=6,8, 3H), 1,49-1,83 (м, 5Н), 1,73 (с, 3H), 2,02 (м, 1Н), 2,14 (м, 2Н), 2,34 (дт, J1=3,4, J2=6,8, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,91 (с, 3H), 3,04 (д, J=16,6, 1H), 3,17 (дд, J1=11,2, J2=14,6, 1Н), 3,36 (дд, J 1=3,9, J2=14,2, 1Н), 3,57 (дд, J 1=4,4, J2=10,7, 1Н), 3,59-3,63 (м, 1Н), 3,67-3,75 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,96-4,10 (м, 2Н), 4,19 (кв, J=6,8, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,74 (дд, J1 =3,9, J2=8,8, 1Н), 4,78-4,85 (м, 1Н), 5,05 (м, 2Н), 5,17 (д, J=3,4, 1Н), 6,52 (с, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,03-7,09 (м, 3H), 7,22-7,32 (м, 4Н), 7,39 (д, J=8,3, 2Н), 7,93 (д, J=8,8, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,70, 15,51, 17,16, 18,74, 21,11, 22,41, 23,29, 23,98, 24,94, 25,10, 25,32, 26,97, 28,18, 30,36, 31,57, 34,44, 36,51, 38,86, 41,64, 45,23, 47,30, 49,80, 50,08, 54,60, 55,50, 56,06, 57,51, 62,77, 66,45, 68,17, 70,72, 81,93, 114,36, 120,76, 123,86, 129,12, 130,04, 130,57, 138,78, 141,00, 157,78, 158,87, 169,92, 170,68, 171,49, 172,43, 173,44, 181,47, 192,38, 204,93, 206,66.

ESI-MC Рассчит. для С56Н 83N7O13: 1161,60. Найдено: 1062,6 (M+H)+.

Пример 119

Синтез [фенилтиокарбамид]8дидемнина A (8PTSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 8PUSAPL1, исходя из SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) и фенилтиоизоцианата (1,3 мкл, 12 мкмоль), после 15 ч перемешивания, получают указанное в заглавии соединение (11 мг, 93%) в виде белого твердого вещества, без дополнительной очистки.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,84-0,99 (м, 24Н), 1,14-1,46 (м, 9Н), 1,46-1,78 (м, 9Н), 1,98-2,19 (м, 3H), 2,34 (м, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,91 (м, 1Н), 3,00 (с, 3H), 3,08-3,21 (м, 1Н), 3,36 (дд, J1 =4,4, J2=14,1, 1Н), 3,55-3,64 (м, 2Н), 3,66-3,74 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,96-4,12 (м, 2Н), 4,21 (кв, J=6,8, 1Н), 4,59 (т, J=5,3, 1Н), 4,75 (дд, J1 =3,4, J2=8,3, 1Н), 4,83 (т, J=10,3, 1Н), 5,05-5,12 (м, 2Н), 5,16 (д, J=3,4, 1Н), 6,30 (т, J=7,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,21-7,37 (м, 6Н), 7,93 (д, J=8,8, 1Н), 8,08 (д, J=8,8, 1Н).

13С-ЯМР (75 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 11,68, 15,28, 15,85, 17,15, 18,73, 21,12, 22,73, 23,66, 24,01, 25,13, 25,33, 26,62, 28,16, 29,92, 31,53, 32,42, 32,90, 34,41, 36,77, 38,86, 41,69, 47,28, 50,12, 55,50, 56,48, 57,51, 59,87, 66,47, 70,75, 81,91, 114,37, 125,25, 125,95, 126,57, 127,54, 129,12, 129,77, 130,06, 130,57, 135,43, 158,88, 168,54, 169,90, 170,70, 171,49, 172,38, 190,41.

ESI-MC Рассчит. для C 56H83N7O 12S: 1077,58. Найдено: 1078,5 (М+Н)+ .

Пример 120

Синтез [бутилкарбамид] 8дидемнина A (8BUSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 8PUSAPL1, исходя из SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) и бутилтиоизоцианата (1,4 мкл, 12 мкмоль), после 4 ч перемешивания, получают указанное в заглавии соединение (9 мг, 78%) в виде белого твердого вещества, без дополнительной очистки.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,85-0,94 (м, 24Н), 1,10-1,80 (м, 24Н), 2,03 (м, 1Н), 2,13 (м, 2Н), 2,33. (м, 1Н), 2,55 (с, 3H), 2,72 (с, 3H), 3,02 (д, J=16,1, 1Н), 3,17 (дд, J1=11,2, J 2=14,2, 1Н), 3,23-3,40 (м, 3H), 3,62-3,78 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 4,03 (м, 2Н), 4,19 (кв, J=6,8, 1Н), 4,58 (м, 2Н), 4,71 (дд, J1=3,4, J2=8,3, 1Н), 4,82 (м, 1Н), 5,00 (м, 2Н), 5,16 (д, J=3,4, 1Н), 5,22-5,28 (м, 2Н), 6,85 (д, J=8,8, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,21-7,29 (м, 1Н), 7,96 (д, J=9,2, 1Н).

ESI-MC Рассчит. для C 54H87N7O 13: 1041,64. Найдено: 1042,7 (M+H)+ .

Пример 121

Синтез [бутилтиокарбамид] 8дидемнина A (8BTSAPL1)

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

Следуя методике, разработанной для синтеза 8PUSAPL1, исходя из SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) и бутилтиоизоцианата (1,5 мкл, 12 мкмоль), после 15 ч взаимодействия, получают указанное в заглавии соединение (10 мг, 86%) в виде белого твердого вещества, без дополнительной очистки.

1H-ЯМР (300 МГц, CDCl3) способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887 0,86-0,97 (м, 24Н), 1,14-1,78 (м, 27Н), 1,99-2,14 (м, 3H), 2,34 (м, 1H), 2,55 (с, 3H), 2,88 (с, 3H), 3,01 (д, J=16,6, 1H), 3,16 (дд, J1=11,2, J 2=14,6, 1H), 3,36 (дд, J1=4,4, J 2=14,2, 1H), 3,49-3,74 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 4,02 (д, J=6,8, 2Н), 4,21 (кв, J=6,8, 1H), 4,58 (м, 1H;, 4,70 (дд, J 1=2,9, J2=8,3, 1H), 4,82 (т, J=10,3, 1H), 5,07-5,12 (м, 2Н), 5,09 (д, J=3,9, 1H), 5,60 (м, 1H), 6,36 (дд, J1=5,4, J2=8,3, 1H), 6,84 (д, J=8,8, 2Н), 7,08 (д, J=8,8, 2Н), 7,84 (д, J=8,3, 1H), 7,91 (д, J=9,3, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C 54H87N7O 12S: 1057,61. Найдено: 1080,7 (М+Na)+ .

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где X независимо означает -О- или -NH-;

Y означает -СО- или -СОСНСН3СО-;

R4 означает Н или алкильную группу;

X1 представляет О или S; и

когда Y означает -СО-, тогда

а) Х2 независимо означает CR, О (и R2 отсутствует) или N, где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы; и

R1 и R2 каждый независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы, амидогруппы RCONH-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, где когда R1 и R2 каждый независимо означает органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы, или когда R амидогруппы RCONH- представляет алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, эти группы необязательно замещены гетероциклической группой, которая представляет гетероароматическую или гетероалициклическую группу, содержащую один, два или три гетероатомов, выбранных из азота, кислорода или серы; или

в) где группа аа8 образует необязательно N-замещенный пролин формулы

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где R3 независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы RSO 2- или ацильной группы RCO-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, которые необязательно замещены одной или более необязательно защищенной аминогруппой; или

с) R1 и R 2 могут образовывать с Х2 необязательно замещенную гетероциклическую группу, которая представляет гетероароматическую или гетероалициклическую группу, содержащую один, два или три гетероатомов, выбранных из азота, кислорода или серы; или

d) aa8 замещена на органическую группу, выбранную из группы RSO2-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу;

когда Y означает -СОСНСН3СО-, тогда

а) Х2 означает N, и R 1 и R2 каждый независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы или ацильной группы RCO-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, которые необязательно замещены гетероциклической группой, которая представляет гетероароматическую или гетероалициклическую группу, содержащую один, два или три гетероатомов, выбранных из азота, кислорода или серы; или

в) где группа aa8 образует необязательно N-замещенный пролин формулы

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

где R3 независимо группу RSO 2-, где R означает алкильную группу, которая необязательно замещена одной или более необязательно защищенной аминогруппой, гидроксигруппой;

c) R1 и R 2 могут образовывать с Х2 гетероциклическую группу, которая представляет гетероароматическую или гетероалициклическую группу, содержащую один, два или три гетероатомов, выбранных из азота, кислорода или серы; или

d) aa8 замещен на органическую группу, выбранную из группы RSO2-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, при условии исключения соединения следующей формулы

способы синтеза аплидина и новых противоопухолевых производных,   способы их промышленного получения и применения, патент № 2299887

и его фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение по п.1, где Х означает -NH-.

3. Соединение по п.1, где Х означает -O-.

4. Соединение по любому из пп.1-3, где Y означает -СО-.

5. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где R4 означает метил.

6. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где X1 означает О.

7. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где Y означает СО и X 2R1 означает необязательно замещенную аралкилоксигруппу.

8. Соединение по п.7, где X 2R1 означает бензилоксигруппу.

9. Соединение по любому из пп.1-6, где X2 R1 означает необязательно замещенную аминогруппу.

10. Соединение по п.9, где X2R 1 означает группу -NHR1, где R 1 означает необязательно замещенную алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу или аралкильную группу.

11. Соединение по п.10, где R1 означает алкильную группу или арильную группу.

12. Соединение по п.11, где R 1 означает фенильную группу или бутильную группу.

13. Соединение по любому из пп.1-6, где Y означает СО и X 2R1 означает необязательно замещенную алкильную группу.

14. Соединение по п.13, где X 2R1 означает пропильную группу, изопропильную группу, пентильную группу или группу биотина.

15. Соединение по любому из пп.1-6, где -C(=O)X2R 1R2 образует необязательно замещенную ацильную группу аминокислоты.

16. Соединение по п.15, где необязательно замещенной ацильной группой аминокислоты является необязательно замещенный пролин.

17. Соединение по п.16, где необязательно замещенный пролин означает необязательно замещенный норвалинпролин, необязательно замещенный аланинпролин, Вос-пролин, необязательно замещенный алкилпролин.

18. Соединение по п.16, где необязательно замещенный пролин означает норвалинпролин, Z-норвалинпролин, аланинпролин, Z-аланинпролин, Вос-аланинпролин, изобутирилпролин или необязательно защищенный D-лактилпролин.

19. Соединение по любому из пп.1-5, где X1 означает S и X2R1 означает группу - NHR1, где R 1 означает замещенную алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу или аралкильную группу.

20. Соединение по п.21, где R1 означает алкильную группу или арильную группу.

21. Соединение по п.20, где R 1 означает фенильную группу или бутильную группу.

22. Соединение по любому из пп.1-6, где R1 и R2 вместе с Х2 образуют необязательно замещенную гетероциклическую группу.

23. Соединение по п.22, где гетероциклическая группа означает кумарин.

24. Соединение по любому из пп.1-5, где аа8 замещен на органическую группу RSO2-, где R принимает указанные значения.

25. Соединение по п.24, где R означает метил.

26. Соединение по п.1, которое выбирают из группы, включающей

8-[фенилмочевина]дидемнин А,

8-[бутилмочевина]дидемнин А,

3-[val]-8-[изобутирил]дидемнин А,

3-[Hiv]-9-[изобутирил]аплидин,

3-[Val]-9-[изобутирил]аплидин,

3-[Hiv]-8-[изобутирил]дидемнин А,

3-[Hiv]-9-[Ala]аплидин,

3-[Hiv]-9-[Nva-Pro]аплидин,

8-[фенилтиомочевина]дидемнин А,

8-[кумарин]дидемнин А,

8-[бутилтиомочевина]дидемнин А,

8-[метилсульфонил]дидемнин А,

3-[val]-Z-дидемнин А,

3-[Hiv]-8-[Val]дидемнин А,

3-[Hiv]-8-[бутирил]дидемнин А,

3-[Hiv]-9-[Z-ala]аплидин,

3-[Hiv]-Z-дидемнин А,

3-[Hiv]-9-[Z-Nva-Pro]аплидин,

3-[Hiv]-9-[Boc-Ala]аплидин,

3-[Hiv]-8-[Boc-Val]дидемнин А,

3-[Hiv]-8-[Val]-9-[изобутирил]дидемнин А,

3-[Hiv]-8-[гексаноил]дидемнин А,

3-[Hiv]-8-[Pro]дидемнин А,

9-[метилсульфонил] аплидин.

27. Соединение по п.26, которое представляет 8-[фенилмочевина]дидемнин А.

28. Соединение по любому из предшествующих пунктов в форме фармацевтической соли.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2299887

patent-2299887.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс C07K11/00 Депсипептиды, содержащие до 20 аминокислот с полностью определенной последовательностью; их производные

Патенты РФ в классе C07K11/00:
применение пептида актг (4-7)-пгп гепатопротекторного воздействия -  патент 2528741 (20.09.2014)
композиция для улучшения функции мозга и способ улучшения функции мозга -  патент 2501808 (20.12.2013)
способ получения производных лизобактина -  патент 2434878 (27.11.2011)
ацилированные нонадепсипептиды в качестве производных лизобактина -  патент 2414477 (20.03.2011)
производные кахалалида f -  патент 2395520 (27.07.2010)
кахалалидные соединения -  патент 2280039 (20.07.2006)
нуклеиновая кислота, кодирующая лидерную последовательность (варианты), вектор на основе плазмиды р6803-platform (варианты), лидерный пептид (варианты) и способ получения белков -  патент 2209244 (27.07.2003)
циклопептолид, штамм гриба, способ получения циклопептолида, терапевтический состав -  патент 2155772 (10.09.2000)
эндопаразитицидное средство -  патент 2124364 (10.01.1999)
полипептиды или их соли, фармацевтическая композиция, обладающая противовирусной активностью в отношении вируса иммунодефицита человека -  патент 2073685 (20.02.1997)

Класс C07K11/02 циклические, например валиномицины

Класс A61K38/15 депсипептиды; их производные

Класс A61P35/00 Противоопухолевые средства

Патенты РФ в классе A61P35/00:
способ лечения рака толстой кишки -  патент 2529831 (27.09.2014)
способ оценки эффекта электромагнитных волн миллиметрового диапазона (квч) в эксперименте -  патент 2529694 (27.09.2014)
новые (поли)аминоалкиламиноалкиламидные, алкил-мочевинные или алкил-сульфонамидные производные эпиподофиллотоксина, способ их получения и их применение в терапии в качестве противораковых средств -  патент 2529676 (27.09.2014)
производные 1, 2-дигидроциклобутендиона в качестве ингибиторов фосфорибозилтрансферазы никотинамида -  патент 2529468 (27.09.2014)
фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа -  патент 2529373 (27.09.2014)
модульный молекулярный конъюгат для направленной доставки генетических конструкций и способ его получения -  патент 2529034 (27.09.2014)
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
лечение опухолей с помощью антитела к vegf -  патент 2528884 (20.09.2014)
способ лечения местнораспространенного неоперабельного рака поджелудочной железы -  патент 2528881 (20.09.2014)
новые бензолсульфонамидные соединения, способ их получения и применение в терапии и косметике -  патент 2528826 (20.09.2014)

Наверх