производные вариолина, способы их получения (варианты), промежуточные продукты, фармацевтическая композиция и способы лечения (варианты)

Формула изобретения

1. Соединение формулы (I)

где каждый из R₁ и R ₂ независимо выбирают из группы, включающей Н, ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NO ₂, NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO ₂R', С₁-С₁₂ алкил, С₁-С₁₂галогеналкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу; и

R₃ выбирают из группы, включающей ОН и ОМе,

где группу R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С ₁-С₁₂алкил, С₁ -С₁₂галогеналкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил, замещенный или незамещенный арилалкенил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу,

и когда группа R₁ или R ₂ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-7-членное гетероциклическое кольцо;

арильная группа и арильная часть аралкильной и арилалкенильной группы представляют собой карбоциклическую арильную группу, содержащую 6 атомов углерода в карбоциклическом кольце;

аралкильная группа представляет C₁-С₆алкильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

арилалкенильная группа представляет С₂-С ₆алкенильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

гетероароматическая группа представляет гетероциклическую ароматическую группу, содержащую от 5 до 7 атомов в кольце, где гетероатомы в кольце выбираются из азота;

заместители в арильных и гетероароматических группах и в арильной части аралкильных и арилалкенильных групп выбирают из группы, включающей С ₁-С₁₂алкил, С₁ -С₁₂галогеналкил, С₁ -С₁₂алкокси, С₁-С ₁₂алкилтио, NH₂, C ₁-С₆алкиламино, ди(С ₁-С₆алкил)амино, C ₁-C₄алканоиламино, ди(С ₁-С₄алканоил)амино, NO ₂, CN и галоген;

его производные, в которых атом азота кватернизован,

и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры, за исключением соединений, в которых

R ₁ и R₂ означают амино и R ₃ означает гидрокси.

2. Соединение по п.1, в котором R₁ выбирают из группы, включающей ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NH ₂, NHR', N(R')₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO₂ R', С₁-С₁₂алкил, С₁-С₁₂галогеналкил, где группу R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С₁-С ₁₂алкил, С₁-С₁₂ галогеналкил, арил (который может быть необязательно замещен группой, выбираемой из C₁-С ₆алкила, C₁-С₆ алкокси, C₁-С₆алкилтио, NH₂, C₁-С ₆алкиламино, ди(С₁-С ₆алкил)амино, NO₂, CN и галогена), аралкил и арилалкенил (арильная часть которых может быть необязательно замещена группой, выбираемой из C₁-С ₆алкила, C₁-С₆ алкокси, C₁-С₆алкилтио, NH₂, C₁-С ₆алкиламино, ди(С₁-С ₆алкил)амино, NO₂, CN и галогена), и в котором, когда группа R₁ представляет группу формулы N(R')₂ или N(COR') ₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-7-членное гетероциклическое кольцо.

3. Соединение по п.1, в котором R₁ выбирают из группы, включающей OR', SR', SOR', NH ₂, NHR', N(R')₂, NHCOR', N(COR')₂ и NHSO₂ R', где группу R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей C₁-С ₆алкил, C₁-С₆ галогеналкил, арил (который может быть необязательно замещен группой, выбираемой из C₁-С ₆алкила, C₁-С₆ алкокси и галогена), аралкил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из C ₁-С₆алкила, C₁ -С₆алкокси и галогена), и аралкенил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из C₁-С₆алкила, C ₁-C₆алкокси и галогена), и в котором, когда группа R₁ представляет группу формулы N(R')₂ или N(COR') ₂, две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-7-членное гетероциклическое кольцо.

4. Соединение по п.1, в котором R ₁ выбирают из группы, включающей С₁ -С₄алкокси, С₁-С ₄алкилтио, С₁-С₄ алкилсульфинил, амино, С₁-С ₄алкиламино, ди(С₁-С ₄алкил)амино, С₁-С ₄алканоиламино, ди(С₁-С ₄алканоил)амино, С₁-С ₄галогеналканоиламино, ариламино (где арильная часть может быть необязательно замещена С₁-С ₄алкоксигруппой), бензиламино (где фенильная часть бензильной части может быть необязательно замещена С₁ -С₄алкоксигруппой), циннамоиламино или дициннамоиламино (где фенильная часть каждой циннамоильной части может быть необязательно замещена С₁-С ₄алкоксигруппой) или 5-7-членное азотсодержащее гетероциклическое кольцо, присоединенное к остальной части молекулы через его атом азота.

5. Соединение по п.1, в котором R ₁ выбирают из группы, включающей метокси, тиометил, метилсульфинил, амино, метиламино, этиламино, бензиламино, ацетиламино, трифторацетиламино, диацетиламино, циннамоиламино, дициннамоиламино, п-метоксибензиламино и пиперидино.

6. Соединение по п.1, в котором R ₁ выбирают из группы, включающей амино, бензиламино, ацетиламино, трифторацетиламино, диацетиламино, циннамоиламино, дициннамоиламино и п-метоксибензиламино.

7. Соединение по п.1, в котором R₂ выбирают из группы, включающей ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NH ₂, NHR', N(R')₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO₂ R', С₁-С₁₂алкил и С₁-С₁₂галогеналкил, где группу R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С₁-С ₁₂алкил, С₁-С₁₂ галогеналкил, арил (который может быть необязательно замещен группой, выбираемой из C₁-С ₆алкила, C₁-С₆ алкокси, C₁-С₆алкилтио, NH₂, C₁-С ₆алкиламино, ди(С₁-С ₆алкил)амино, NO₂, CN и галогена), аралкил или арилалкенил (арильная часть которых может быть необязательно замещена группой, выбираемой из C₁-С ₆алкила, C₁-С₆ алкокси, C₁-С₆алкилтио, NH₂, C₁-С ₆алкиламино, ди(С₁-С ₆алкил)амино, NO₂, CN и галогена), и в котором, когда группа R₂ представляет группу формулы N(R')₂ или N(COR') ₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-7-членное гетероциклическое кольцо.

8. Соединение по п.1, в котором R₂ выбирают из группы, включающей OR', SR', SOR', NH ₂, NHR', N(R')₂, NHCOR', N(COR')₂ и NHSO₂ R', где группу R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей C₁-С ₆алкил, C₁-С₆ галогеналкил, арил (который может быть необязательно замещен группой, выбираемой из C₁-С ₆алкила, C₁-С₆ алкокси и галогена), аралкил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из С ₁-С₆алкила, C₁ -С₆алкокси и галогена), аралкенил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из C₁-С₆алкила, C ₁-С₆алкокси и галогена), и в котором, когда группа R₂ представляет группу формулы N(R')₂ или N(COR') ₂, две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-7-членное гетероциклическое кольцо.

9. Соединение по п.1, в котором R ₂ выбирают из группы, включающей С₁ -С₄алкокси, С₁-С ₄алкилтио, С₁-С₄ алкилсульфинил, амино, C₁-C ₄алкиламино, ди(С₁-С ₄алкил)амино, С₁-С ₄алканоиламино, ди(С₁-С ₄алканоил)амино, С₁-С ₄галогеналканоиламино, ариламино (где арильная часть может быть необязательно замещена С₁-С ₄алкоксильной группой), бензиламино (где фенильная часть бензильной части может быть необязательно замещена C ₁-C₄алкоксильной группой), циннамоиламино или дициннамоиламино (где фенильная часть каждой циннамоильной части может быть необязательно замещена С₁ -С₄алкоксильной группой) и 5-7-членное азотсодержащее гетероциклическое кольцо, присоединенное к остальной части молекулы через его атом азота.

10. Соединение по п.1, в котором R₂ выбирают из группы, включающей тиометил, метилсульфинил, амино, метиламино, этиламино, ацетиламино, диацетиламино, циннамоиламино и п-метоксибензиламино.

11. Соединение по п.1, в котором R₂ выбирают из группы, включающей амино, ацетиламино, диацетиламино и п-метоксибензиламино.

12. Соединение по п.1, в котором R₃ означает ОН.

13. Соединение по п.1, в котором R ₃ означает ОМе.

14. Соединения следующей формулы:

представляющие собой соединения с номерами, указанными в приведенной ниже таблице,

где R₁ , R₂ и R₃ имеют значения, указанные в таблице:

№ соединения	R 1	R2	R3
13	SMe	SMe	OMe
14	SOMe	SOMe	OMe
15	NHPMB	NHPMB	OMe
16	NHPMB	NHPMB	OH
19	SMe	SMe	H
20	SOMe	SOMe	H
23а	N(Ac) 2	NH2	H
23b	N(Ac) 2	NHAc	H
23 с	N(Ac) 2	N(Ac)2	H
23d	NHAc	NH2	H
23e	NHAc	NHAc	H
24a	N(циннамоил)2	NH2	H
24b	N(циннамоил) 2	NH-циннамоил	H
25	NHSO 2Me	NH2	H
26	NHCOCF3	NH 2	H
27	OMe	NH 2	H
28d	NHBu	NH 2	H
28b	NHEt	NH 2	H
28a	пиперидинил	NH 2	H
28c	NMeBu	NH 2	H
29	NHPMB	NHPMB	H

где Me означает метил, Et - этил, Bu - бутил, Ac - ацетил, и NHPMB - п-метоксибензиламино.

15. Способ получения соединения формулы (I):

где R₁ и R ₂ независимо выбирают из группы, включающей Н, ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NO ₂, NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO ₂R', С₁-С₁₂ алкил, С₁-С₁₂галогеналкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу; и

R₃ выбирают из группы, включающей ОН и ОМе,

где группу R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С ₁-С₁₂алкил, С₁ -С₁₂галогеналкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил, замещенный или незамещенный арилалкенил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу,

и когда группа R₁ или R ₂ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-7-членное гетероциклическое кольцо;

арильная группа и арильная часть аралкильной и арилалкенильной группы представляет карбоциклическую арильную группу, содержащую 6 атомов углерода в карбоциклическом кольце;

аралкильная группа представляет C₁-С₆алкильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

арилалкенильная группа представляет С₂-С ₆алкенильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

гетероароматическая группа представляет гетероциклическую ароматическую группу, содержащую от 5 до 7 атомов в кольце, где гетероатомы в кольце выбираются из азота;

заместители в арильных и гетероароматических группах и в арильной части аралкильных и арилалкенильных групп выбирают из группы, включающей С ₁-С₁₂алкил, С₁ -С₁₂галогеналкил, С₁ -С₁₂алкокси, С₁-С ₁₂алкилтио, NH₂, C ₁-С₆алкиламино, ди(С ₁-С₆алкил)амино, C ₁-C₄алканоиламино, ди(С ₁-С₄алканоил)амино, NO ₂, CN и галоген;

его производных, в которых атом азота кватернизован,

его фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров,

который включает циклизацию промежуточного соединения формулы (II)

где R_1a, R _2a и R_3a означают группы, представляющие собой либо непосредственно группы R₁, R ₂ и R₃ (соответственно), либо группы R₁, R₂ и R ₃ (соответственно), в которых реакционноспособные функциональные группы защищены; и

Y₁ и Y ₂ означают группы, которые могут быть удалены с образованием конденсированной трициклической пиридопирролопиримидиновой кольцевой структуры,

с получением соединения формулы (III)

и, при необходимости, превращение любой из групп, обозначенных как R_1a, R _2a и R_3a, в любую из групп, обозначенных как R₁, R₂ и R ₃ соответственно.

16. Способ по п.15, где Y ₁ означает гидроксильную группу.

17. Способ по п.15 или 16, где Y₂ означает атом хлора.

18. Способ по любому из пп.15-17, где R_1a =R_2a.

19. Способ по п.18, где R _1a и R_2a означают метилтиогруппы.

20. Способ по любому из пп.15-19, который катализируют кислотой.

21. Способ по любому из пп.15-20, в котором в качестве промежуточного соединения формулы (III) используют соединение, полученное взаимодействием промежуточного соединения формулы (II) с триалкилсиланом формулы R_aR_bR _cSiH, где R_a, R_b и R_c могут иметь одинаковые или разные значения, и каждый из них представляет C₁ -C₁₂алкильную группу.

22. Способ по любому из пп.15-21, в котором используют промежуточное соединение формулы (II), полученное в результате взаимодействия промежуточного соединения формулы (IV)

где R_3а и Y ₂ имеют значения, указанные в п.15, и М означает металл, с соединением формулы (V)

где R_1a и R _2a имеют значения, указанные в п.15.

23. Способ по любому из пп.15-21, в котором используют промежуточное соединение формулы (II), полученное в результате взаимодействия соединения формулы (VI)

где R_1a имеет значения, определенные как указано в п.15, и М означает металл, с промежуточным соединением формулы (VII)

где R_3а и Y ₂ имеют значения, определенные как указано в п.15, и Z означает удаляемую группу.

24. Способ получения соединения формулы (I)

где каждый из R₁ и R ₂ независимо выбирают из группы, включающей Н, ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NO ₂, NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO ₂R', C₁-С₁₂ алкил, С₁-С₁₂галогеналкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу; и

R₃ выбирают из группы, включающей ОН и ОМе,

где группу R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С ₁-С₁₂алкил, С₁ -С₁₂галогеналкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил, замещенный или незамещенный арилалкенил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу,

и когда группа R₁ или R ₂ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-7-членное гетероциклическое кольцо;

арильная группа и арильная часть аралкильной и арилалкенильной группы представляет карбоциклическую арильную группу, содержащую 6 атомов углерода в карбоциклическом кольце;

аралкильная группа представляет C₁-С₆алкильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

арилалкенильная группа представляет С₂-С ₆алкенильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

гетероароматическая группа представляет гетероциклическую ароматическую группу, содержащую от 5 до 7 атомов в кольце, где гетероатомы в кольце выбираются из азота;

заместители в арильных и гетероароматических группах и в арильной части аралкильных и арилалкенильных групп выбирают из группы, включающей С ₁-С₁₂алкил, С₁ -С₁₂галогеналкил, С₁ -С₁₂алкокси, С₁-С ₁₂алкилтио, NH₂, C ₁-С₆алкиламино, ди(С ₁-С₆алкил)амино, C ₁-C₄алканоиламино, ди(С ₁-С₄алканоил)амино, NO ₂, CN и галоген;

его производных, в которых атом азота кватернизован,

его фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров,

включающий нижеследующие стадии:

a) превращение соединения формулы (VIII)

где R_1a имеет значения, указанные в п.15, и Х означает атом галогена, в соединение формулы (VI), указанное в п.23;

b) взаимодействие соединения формулы (VI) с соединением формулы L₁-CO-L ₂, где L₁ и L₂ имеют одинаковые или разные значения и представляют удаляемую группу, с образованием соединения формулы (V), указанного в п.22;

с) взаимодействие соединения формулы (V) с соединением формулы (IV) с образованием соединения формулы (II), указанного в п.15;

d) циклизацию соединения формулы (II) с образованием соединения формулы (III), указанного в п.15;

e) превращение, при необходимости, любых групп, обозначенных как R_1a, R _2a и R_3а, в любые группы, обозначенные как R₁, R₂ и R ₃ соответственно.

25. Способ получения соединения формулы (I)

где каждый из R₁ и R ₂ независимо выбирают из группы, включающей H, ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NO ₂, NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO ₂R', C₁-С₁₂ алкил, С₁-С₁₂галогеналкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу; и

R₃ выбирают из группы, включающей ОН и ОМе;

где группу R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С ₁-С₁₂алкил, С₁ -С₁₂галогеналкил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил, замещенный или незамещенный арилалкенил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу;

и когда группа R₁ или R ₂ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-7-членное гетероциклическое кольцо;

арильная группа и арильная часть аралкильной и арилалкенильной группы представляет карбоциклическую арильную группу, содержащую 6 атомов углерода в карбоциклическом кольце;

аралкильная группа представляет C₁-С₆алкильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

арилалкенильная группа представляет С₂-С ₆алкенильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

гетероароматическая группа представляет гетероциклическую ароматическую группу, содержащую от 5 до 7 атомов в кольце, где гетероатомы в кольце выбираются из азота;

заместители в арильных и гетероароматических группах и в арильной части аралкильных и арилалкенильных групп выбирают из группы, включающей С ₁-С₁₂алкил, С₁ -С₁₂галогеналкил, С₁ -С₁₂алкокси, С₁-С ₁₂алкилтио, NH₂, C ₁-С₆алкиламино, ди(С ₁-С₆алкил)амино, C ₁-C₄алканоиламино, ди(С ₁-С₄алканоил)амино, NO ₂, CN и галоген;

его производных, в которых атом азота кватернизован,

его фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров, включающий нижеследующие стадии:

a) превращение соединения формулы (VIII), указанного в п.24, в соединение формулы (VI), указанное в п.23;

b) взаимодействие соединения формулы (VI) с соединением формулы (VII), указанным в п.23, с образованием соединения формулы (II), указанного в п.15;

c) циклизацию соединения формулы (II) с образованием соединения формулы (III), указанного в п.15;

d) превращение при необходимости любых групп, обозначенных как R_1a, R _2a и R_3a, в любые группы, обозначенные как R₁, R₂ и R ₃ соответственно.

26. Способ по п.15, где R ₁ и R₂ представляют аминогруппы, а R₃ имеет значения, указанные в п.15, который включает

a) обработку соединения формулы (III), где R_1a и R_2a представляют метилсульфинил, и R_3а имеет значения, указанные в п.15, соединением формулы NH₂Prot, где Prot означает аминозащитную группу, с образованием соединения формулы (III), где R_1a и R _2a представляют защищенную аминогруппу и R _3а имеет значения, указанные в п.15; и

b) удаление аминозащитной группы с образованием соединения формулы (I), где R₁ и R₂ представляют аминогруппы и R₃ имеет значения, указанные в п.15.

27. Способ по п.15, где R₁ означает метилтио- или аминогруппу, R₂ означает аминогруппу и R₃ имеет значения, указанные в п.15, который включает

a) необязательное окисление соединения формулы (III), где R_1a и R _2a означают метилтио и R_3а имеет значения, указанные в п.15, в соединение формулы (III), где R _1a и R_2a представляют метилсульфинил; и

b) обработку соединения формулы (III), где R _1a и R_2a представляют метилтио или метилсульфинил, реагентом, выбираемым из азида натрия и аммиака.

28. Фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, содержащая эффективное количество фармакологически активного соединения вместе с носителем или разбавителем, в которой указанное фармакологически активное соединение является соединением по любому из пп.1-14.

29. Соединение по любому из пп.1-14, обладающее противоопухолевой активностью, для получения фармацевтической композиции.

30. Соединение по любому из пп.1-14, обладающее противоопухолевой активностью, для лечения или профилактики рака.

31. Соединение по любому из пп.1-14, обладающее противоопухолевой активностью, пригодное для получения фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака.

32. Способ лечения или профилактики рака у млекопитающего, который включает введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему эффективного количества соединения по любому из пп.1-14.

33. Соединение формулы (I) определенное как указано в п.15, предназначенное для лечения или профилактики раковых заболеваний, выбираемых из рака яичника, рака предстательной железы, рака молочной железы и меланомы.

34. Способ лечения или профилактики раковых заболеваний у млекопитающего, выбираемых из рака яичника, рака предстательной железы, рака молочной железы и меланомы, который включает введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему эффективного количества соединения формулы (I), определенного как указано в п.15.

35. Соединение формулы (II)

где Y₁ означает гидроксильную группу, Y₂ означает атом галогена, R _1a и R_2a являются одинаковыми или различными и означают С₁-С ₄-алкилтиогруппу, а R_3а означает С₁-С₄-алкил или С ₁-С₄-алкоксигруппу.

36. Соединение по п.35, в котором Y₂ означает атом хлора.

37. Соединение по п.35 или 36, где R_1a =R_2a.

38. Соединение по п.37, в котором R_1a и R_2a означают метилтиогруппы.

Приоритет по пунктам и признакам:

11.07.2000 по п.14, относящийся к соединению 19;

15.12.2000 по п.14, относящийся к соединениям 20 и 29;

11.07.2001 по пп.1-39.

Описание изобретения к патенту

Область техники

Настоящее изобретение относится к противоопухолевым соединениям, в частности к новым противоопухолевым аналогам вариолина В и дезоксивариолина В. Настоящее изобретение относится также к способам синтеза, в частности к способам получения как новых соединений по данному изобретению, так и известных соединений вариолина В и дезоксивариолина В, включая новые промежуточные соединения, получение которых является одной из составных частей таких способов синтеза. Кроме того, настоящее изобретение относится к новым, ранее не описанным применениям известных соединений вариолина.

Предпосылки изобретения

Вариолины представляют новый класс морских алкалоидов, выделяемых из редкого, труднодоступного вида антарктической губки Kirkpatricka varialosa, типичным примером которых является вариолин В (1).

Все вариолины имеют конденсированное пиридо[3',2':4,5] пирроло[1,2-c]пиримидиновое ядро (2), в котором к атому углерода С5 присоединено либо гетероциклическое ароматическое кольцо, либо сложноэфирная группа, как это имеет место в вариолине В (1) и вариолине D (3).

Известно, что вариолины обладают противоопухолевой активностью и другими полезными свойствами. Полная структура и противоопухолевая активность указанных и родственных соединений описаны в статьях N.B.Perry et al., Tetrahedron, 1994, 50, 3987-92, и G.Trimurtulu et al., Tetrahedron, 1994, 50, 3993-4000. Однако до сих пор было показано, что вариолины, описанные в указанных статьях, обладают только ограниченным спектром противоопухолевой активности.

Ограниченная доступность природного сырья сделала необходимым поиск альтернативных способов синтеза природных соединений и родственных аналогов.

Способ синтеза родственного дезоксивариолина В (4) описан в статье M.Alvarez et al., Tetrahedron Lett., 2001, 42, 315-317 (которая была опубликована до даты подачи настоящей заявки, но после дат приоритета).

Путь получения дезоксивариолина В, описанный в вышеуказанной статье, приведенной в качестве ссылки, включает в общей сложности не менее четырнадцати стадий, в процессе выполнения которых из 7-азаиндола образуют конденсированное трициклическое пиридопирролопиримидиновое ядро, затем осуществляют реакцию гетероарильного сочетания для введения четвертого ароматического кольца и получают промежуточное соединение (5). Замещая аминогруппу сульфоновой группой (6), получают дезоксивариолин В (4).

Однако, как указывалось выше, данный способ синтеза является длинным и сложным. Кроме того, в научной литературе отсутствует описание способа синтеза вариолина В (или любого природного вариолина).

Поэтому желательно создать способ, позволяющий синтезировать дезоксивариолин В и его производные при выполнении меньшего числа стадий по сравнению с описанным выше способом.

Желательно также создать способ, позволяющий синтезировать непосредственно вариолин В, а также его дезоксипроизводное.

Помимо этого, желательно получить новые соединения, обладающие противоопухолевой активностью, которая сравнима или превышает аналогичную активность природного вариолина В.

Способы синтеза по настоящему изобретению включают впервые разработанный способ получения вариолина В (1), обеспечивают короткое и быстрое получение дезоксивариолина В (4) и промежуточных соединений, таких как (5) и (6). Указанные промежуточные соединения использованы для получения новых противоопухолевых соединений, имеющих конденсированное трициклическое пиридопирролопиримидиновое ядро вариолинов.

Краткое изложение существа изобретения

В соответствии с данным изобретением разработаны новые способы синтеза вариолина В, дезоксивариолина В и подобных соединений, в которых используется преимущество скрытого элемента симметрии этих соединений. Новый подход позволяет создать структуру ядра вариолина, включающую конденсированное пиридопирролопиримидиновое ядро с присоединенным к нему гетероциклическим ароматическим кольцом в положении С5, в результате выполнения меньшего числа стадий по сравнению с известным способом синтеза.

Таким образом, простые моногетероароматические молекулы можно превратить в ряд новых и известных производных вариолина, обладающих потенциальным противоопухолевым лечебным действием.

Таким образом, первым объектом данного изобретения является

соединение формулы (I)

где R₁ и R ₂ независимо выбирают из группы, включающей Н, ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NO ₂, NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO ₂R', CN, галоген, С=(О)Н, C(=O)R', CO ₂H, CO₂R', C₁ -C₁₂алкил, С₁-С ₁₂галогеналкил, С₂-С ₁₂алкенил, С₂-С₁₂ алкинил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу;

R₃ выбирают из группы, включающей Н, ОН и ОМе;

где R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С₁-С ₁₂алкил, С₁-С₁₂ галогеналкил, С₂-С₁₂ алкенил, С₂-С₁₂алкинил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил, замещенный или незамещенный арилалкенил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу;

и группа R ₁, R₂ или R₃ представляет группу формулы N(R')₂ или N(COR')₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-14-членное гетероциклическое кольцо;

арильная группа и арильная часть аралкильной и арилалкенильной группы представляет карбоциклическую арильную группу, имеющую от 6 до 14 атомов углерода в карбоциклическом кольце либо в двух или более конденсированных кольцах;

аралкильная группа представляет С ₁-С₆алкильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

арилалкенильная группа представляет С₂-С₆ алкенильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

гетероароматическая группа представляет гетероциклическую ароматическую группу, имеющую от 5 до 14 атомов в одном кольце либо в двух или более конденсированных кольцах, в которых по крайней мере один атом в кольце выбирают из группы, включающей атомы азота, кислорода и серы, причем такая гетероциклическая ароматическая группа конденсирована с вышеуказанной арильной группой;

заместители в арильных и гетероароматических группах и в арильной части аралкильных и арилалкенильных групп выбирают из группы, включающей С₁-С ₁₂алкил, С₁-С₁₂ галогеналкил, С₁-С₁₂ алкокси, С₁-С₁₂алкилтио, NH₂, С₁-С ₄алкиламино, ди(С₁-С ₄алкил)амино, С₁-С ₄алканоиламино, ди(С₁-С ₄алканоил)амино, NO₂, CN и галоген;

его производные, в которых атом азота кватернизован,

его соли и сложные эфиры,

за исключением соединений, в которых

R₁ означает амино, тиометил, метилсульфинил или метилсульфонил, R₂ означает амино и R₃ означает водород или

R ₁ и R₂ означают амино и R ₃ означает гидрокси.

Данное изобретение относится также к способу синтеза как новых вышеописанных производных вариолина формулы (I), так и известных производных вариолина, описанных в известном уровне техники.

Вторым объектом данного изобретения является способ получения соединения формулы (I)

где R₁ и R ₂ независимо выбирают из группы, включающей Н, ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NO ₂, NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO ₂R', CN, галоген, С=(О)Н, C(=O)R', CO ₂H, CO₂R', C₁ -C₁₂алкил, С₁-С ₁₂галогеналкил, С₂-С ₁₂алкенил, С₂-С₁₂ алкинил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу; и

R₃ выбирают из группы, включающей Н, ОН и ОМе;

где R' или каждую из групп R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С₁-С ₁₂алкил, С₁-С₁₂ галогеналкил, С₂-С₁₂ алкенил, С₂-С₁₂алкинил, замещенный или незамещенный арил, замещенный или незамещенный аралкил, замещенный или незамещенный арилалкенил и замещенную или незамещенную гетероароматическую группу;

и где группа R₁, R₂ или R ₃ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, где все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-14-членное гетероциклическое кольцо;

арильная группа и арильная часть аралкильной и арилалкенильной группы представляет карбоциклическую арильную группу, имеющую от 6 до 14 атомов углерода в карбоциклическом кольце либо в двух или более конденсированных кольцах;

аралкильная группа представляет С₁-С₆алкильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

арилалкенильная группа представляет С₂-С ₆алкенильную группу, замещенную вышеуказанной арильной группой;

гетероароматическая группа представляет гетероциклическую ароматическую группу, имеющую от 5 до 14 атомов в одном кольце либо в двух или более конденсированных кольцах, в которых по крайней мере один атом в кольце выбирают из группы, включающей атомы азота, кислорода и серы, причем такая гетероциклическая ароматическая группа сконденсирована с вышеуказанной арильной группой;

заместители в арильных и гетероароматических группах и в арильной части аралкильных и арилалкенильных групп выбирают из группы, включающей С₁-С ₁₂алкил, С₁-С₁₂ галогеналкил, С₁-С₁₂ алкокси, С₁-С₁₂алкилтио, NH₂, С₁-С ₄алкиламино, ди(С₁-С ₄алкил)амино, С₁-С ₄алканоиламино, ди(С₁-С ₄алканоил)амино, NO₂, CN и галоген;

его производных, в которых атом азота кватернизован,

и его солей и сложных эфиров,

который включает получение промежуточного соединения формулы (II)

где R_1а, R _2а и R_3а означают любые группы, представленные соответственно R₁, R₂ и R₃, и все такие группы, в которых реакционноспособные функциональные группы защищены, и

Y₁ и Y₂ означают группы, которые могут быть удалены с образованием конденсированной трициклической пиридопирролопиримидиновой кольцевой структуры.

Как будет описано ниже, новые соединения формулы (I) проявляют биологическую активность против разных линий раковых клеток млекопитающих. Противоопухолевая активность указанных соединений направлена против лейкоза, рака легкого, рака ободочной кишки, рака почки, рака предстательной железы, рака яичника, рака молочной железы, сарком и меланом. Кроме того, известные соединения формулы (I) проявляют не описанную ранее активность против целого ряда раковых заболеваний.

Таким образом, третьим объектом данного изобретения является способ лечения или профилактики рака у млекопитающего, который включает введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему эффективного количества нового соединения по данному изобретению.

Четвертым объектом данного изобретения является способ лечения или профилактики раковых заболеваний, выбираемых из рака яичника, рака почки, рака предстательной железы, рака молочной железы и меланомы у млекопитающего, который включает введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему эффективного количества нового соединения по данному изобретению или известного соединения вариолина.

Другие объекты данного изобретения относятся к стадиям синтеза некоторых предпочтительных соединений, более подробно описанных ниже, и промежуточных соединений, в частности соединений приведенной выше формулы (II).

Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления изобретения

В соответствии с определениями, используемыми в настоящей заявке, алкильные группы могут представлять группы с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно имеющие от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода, еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода и наиболее предпочтительно 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил и пропил, включая изопропил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях по настоящему изобретению. В используемом здесь значении термин «алкил» за исключением особо оговоренных случаев относится к циклическим и нециклическим группам, причем циклические группы содержат по крайней мере три атома углерода в кольце.

Галогеналкильные группы представляют вышеуказанные алкильные группы (включая циклоалкильные группы), которые замещены одним или несколькими атомами галогена (предпочтительно атомами фтора, хлора, брома или иода) и предпочтительно имеют от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода, еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода и наиболее предпочтительно 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил и пропил, включая изопропильные группы, замещенные 1, 2 или 3 атомами галогена, которые могут иметь одинаковые или разные значения, в частности фторметил, фторхлорметил, трифторметил и трихлорметил, являются особенно предпочтительными галогеналкильными группами в соединениях по настоящему изобретению.

Предпочтительные алкенильные и алкинильные группы в соединениях по настоящему изобретению содержат одну или несколько ненасыщенных связей и от 2 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до около 8 атомов углерода, еще предпочтительнее от 2 до около 6 атомов углерода, гораздо предпочтительнее 2, 3 или 4 атома углерода. Термины «алкенил» и «алкинил» в используемом здесь значении относятся как к циклическим, так и нециклическим группам, причем нециклические группы с прямой или разветвленной цепью обычно являются более предпочтительными.

Предпочтительные алкоксильные группы в соединениях по настоящему изобретению включают группы, содержащие одну или несколько (но предпочтительно только одну) кислородных связей и от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода, еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода и наиболее предпочтительно 1, 2, 3 или 4 атома углерода.

Предпочтительные алкилтиогруппы в соединениях по настоящему изобретению содержат одну или несколько (но предпочтительно только одну) простых тиоэфирных связей и от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода. Алкилтиогруппы, содержащие 1, 2, 3 или 4 атома углерода, являются особенно предпочтительными.

Предпочтительные алкилсульфинильные группы в соединениях по настоящему изобретению включают группы, содержащие одну или несколько сульфоксидных (SO) групп и от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода. Алкилсуфинильные группы, содержащие 1, 2, 3 или 4 атома углерода, являются особенно предпочтительными.

Предпочтительные алкилсульфонильные группы в соединениях по настоящему изобретению включают группы, содержащие одну или несколько сульфонильных (SO₂) групп и от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода. Алкилсульфонильные группы, содержащие 1, 2, 3 или 4 атома углерода, являются особенно предпочтительными.

Предпочтительные алканоильные группы в соединениях по настоящему изобретению включают группы, содержащие одну или несколько карбонильных (СО) групп и от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода (включая углерод карбонильной группы). Алканоильные группы, содержащие 1, 2, 3 или 4 атома углерода, в частности формильные, ацетильные, пропионильные, бутирильные и изобутирильные группы, являются особенно предпочтительными.

Предпочтительные алкиламиногруппы в соединениях по настоящему изобретению содержат одну или несколько (но предпочтительно только одну) NH-связей и от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода. Алкиламиногруппы, содержащие 1, 2, 3 или 4 атома углерода, в частности метиламино, этиламино, пропиламино и бутиламиногруппы, являются особенно предпочтительными.

Предпочтительные диалкиламиногруппы в соединениях по настоящему изобретению содержат один или несколько (но предпочтительно только один) атомов азота, присоединенных к двум алкильным группам, каждая из которых может содержать от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода. Алкильные группы могут иметь одинаковые или разные значения. Диалкиламиногруппы, в которых каждая алкильная группа содержит 1, 2, 3 или 4 атома углерода, в частности диметиламино, диэтиламино, N-метилэтиламино, N-этилпропиламино, дипропиламино, дибутиламино и N-метилбутиламиногруппы, являются особенно предпочтительными.

Предпочтительные алканоиламиногруппы в соединениях по настоящему изобретению содержат одну NH-CO-связь, присоединенную к алкильной группе, содержащей от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода. Алканоиламиногруппы, содержащие 1, 2, 3 или 4 атома углерода, в частности формиламино, ацетиламино, пропиониламино и бутириламиногруппы, являются особенно предпочтительными. Ацетиламиногруппа является наиболее предпочтительной.

Предпочтительные диалканоиламиногруппы в соединениях по настоящему изобретению содержат один атом азота, присоединенный к двум вышеуказанным алканоильным группам, которые могут иметь одинаковые или разные значения и содержат от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода. Диалканоиламиногруппы, в которых каждая алканоильная группа содержит 1, 2, 3 или 4 атома углерода, в частности диформиламино, формилацетиламино, диацетиламино, дипропиониламино и дибутириламиногруппы, являются особенно предпочтительными. Диацетиламиногруппа является особенно предпочтительной.

Предпочтительные алкилсульфониламиногруппы в соединениях по настоящему изобретению содержат одну NH-SO ₂-связь, присоединенную к алкильной группе, содержащей от 1 до около 12 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до около 8 атомов углерода и еще предпочтительнее от 1 до около 6 атомов углерода. Алкилсульфониламиногруппы, содержащие 1, 2, 3 или 4 атома углерода, в частности метансульфониламино, этансульфониламино, пропансульфониламино и бутансульфониламино, являются особенно предпочтительными.

В соединениях формулы (I) R ₁ предпочтительно выбирают из группы, включающей ОН, OR', SH, SR', SOR', SO₂R', NH ₂, NHR', N(R')₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO₂ R', C(=O)R', CO₂H, CO ₂R', C₁-C₁₂ алкил, С₁-С₁₂галогеналкил, где R' или каждую из R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С₁-С₁₂ алкил, С₁-С₁₂галогеналкил, арил (который может быть необязательно замещен группой, выбираемой из С₁-С₆алкила, С ₁-С₆алкокси, С₁ -С₆алкилтио, NH₂, С₁-С₆алкиламино, ди(С₁-С₆алкил)амино, NO₂, CN и галогена), аралкил или арилалкенил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из С₁-С₆ алкила, С₁-С₆алкокси, С₁-С₆алкилтио, NH ₂, С₁-С₆алкиламино, ди(С₁-С₆алкил)амино, NO₂, CN и галогена), и, когда группа R ₁ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-12-членное гетероциклическое кольцо.

Более предпочтительно R₁ выбирают из группы, включающей OR', SR', SOR', NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂ и NHSO ₂R', где R' или каждую из R' независимо выбирают из группы, включающей С₁-С ₆алкил, С₁-С₆ галогеналкил, арил (который может быть необязательно замещен группой, выбираемой из С₁-С ₆алкила, С₁-С₆ алкокси и галогена), аралкил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из С ₁-С₆алкила, С₁ -С₆алкокси и галогена), аралкенил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из С₁-С₆алкила, С ₁-С₆алкокси и галогена), и, когда группа R₁ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-10-членное гетероциклическое кольцо.

Еще предпочтительнее R₁ выбирают из группы, включающей С ₁-С₄алкокси, С₁ -С₄алкилтио, С₁-С ₄алкилсульфинил, амино, С₁-С ₄алкиламино, ди(С₁-С ₄алкил)амино, С₁-С ₄алканоиламино, ди(С₁-С ₄алканоил)амино, С₁-С ₄галогеналканоиламино, ариламино (где арильная часть может быть необязательно замещена С₁-С ₄алкоксильной группой), бензиламино (где фенильная часть бензильной части может быть необязательно замещена С ₁-С₄алкоксильной группой), циннамоиламино или дициннамоиламино (где фенильная часть каждой циннамоильной части может быть необязательно замещена С₁ -С₄алкоксильной группой) или 5-7-членное азотсодержащее гетероциклическое кольцо, присоединенное к остальной части молекулы через его атом азота.

Гораздо предпочтительнее R₁ выбирают из группы, включающей метокси, тиометил, метилсульфинил, амино, метиламино, этиламино, бензиламино, ацетиламино, трифторацетиламино, диацетиламино, циннамоиламино, дициннамоиламино, п-метоксибензиламино и пиперидино.

Наиболее предпочтительно R₁ выбирают из группы, включающей амино, бензиламино, ацетиламино, трифторацетиламино, диацетиламино, циннамоиламино, дициннамоиламино и п-метоксибензиламино.

R₂ предпочтительно выбирают из группы, включающей OH, OR', SH, SR', SOR', SO ₂R', NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂, NHSO ₂R', C(=O)R', CO₂H, CO ₂R', C₁-C₁₂ алкил и С₁-С₁₂галогеналкил, где R' или каждую из R' независимо выбирают из группы, включающей ОН, С₁-С₁₂ алкил, С₁-С₁₂галогеналкил, арил (который может быть необязательно замещен группой, выбираемой из С₁-С₆алкила, С ₁-С₆алкокси, С₁ -С₆алкилтио, NH₂, С₁-С₆алкиламино, ди(С₁-С₆алкил)амино, NO₂, CN и галогена), аралкил или арилалкенил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из С₁-С₆ алкила, С₁-С₆алкокси, С₁-С₆алкилтио, NH ₂, С₁-С₆алкиламино, ди(С₁-С₆алкил)амино, NO₂, CN и галогена), и, когда группа R ₂ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, все группы R' могут иметь одинаковые или разные значения либо две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 5-12-членное гетероциклическое кольцо.

Более предпочтительно R₂ выбирают из группы, включающей OR', SR', SOR', NH₂, NHR', N(R') ₂, NHCOR', N(COR')₂ и NHSO ₂R', где R' или каждую из R' независимо выбирают из группы, включающей С₁-С ₆алкил, С₁-С₆ галогеналкил, арил (который может быть необязательно замещен группой, выбираемой из С₁-С ₆алкила, С₁-С₆ алкокси и галогена), аралкил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из С ₁-С₆алкила, С₁ -С₆алкокси и галогена), аралкенил (арильная часть которого может быть необязательно замещена группой, выбираемой из С₁-С₆алкила, С ₁-С₆алкокси и галогена), и, когда группа R₂ представляет группу формулы N(R') ₂ или N(COR')₂, две группы R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать 5-10-членное гетероциклическое кольцо.

Еще предпочтительнее R₂ выбирают из группы, включающей С ₁-С₄алкокси, С₁ -С₄алкилтио, С₁-С ₄алкилсульфинил, амино, С₁-С ₄алкиламино, ди(С₁-С ₄алкил)амино, С₁-С ₄алканоиламино, ди(С₁-С ₄алканоил)амино, С₁-С ₄галогеналканоиламино, ариламино (где арильная часть может быть необязательно замещена С₁-С ₄алкоксильной группой), бензиламино (где фенильная часть бензильной части может быть необязательно замещена С ₁-С₄алкоксильной группой), циннамоиламино или дициннамоиламино (где фенильная часть циннамоильной части может быть необязательно замещена С₁-С ₄алкоксильной группой) и 5-7-членное азотсодержащее гетероциклическое кольцо, присоединенное к остальной части молекулы через его атом азота.

Гораздо предпочтительнее R₂ выбирают из группы, включающей тиометил, метилсульфинил, амино, метиламино, этиламино, ацетиламино, диацетиламино, циннамоиламино и п-метоксибензиламино.

Наиболее предпочтительно R ₂ выбирают из группы, включающей амино, ацетиламино, диацетиламино и п-метоксибензиламино.

R₃ предпочтительно означает Н.

Как должно быть очевидно специалисту в данной области, приведенные выше предпочтительные определения R ₁, R₂ и R₃ могут быть объединены с образованием разных комбинаций, и все соединения, включающие такие комбинации вышеуказанных предпочтительных определений, входят в объем данного изобретения. Предпочтительной является комбинация, состоящая из двух вышеуказанных определений, и особенно предпочтительной является комбинация, включающая все три предпочтительных определения.

Приведенные ниже соединения являются наиболее предпочтительными:

N'-бисацетилдезоксивариолин;

N'-бисацетил-N-ацетилдезоксивариолин;

N'-бисацетил-N-бисацетилдезоксивариолин;

N'-ацетилдезоксивариолин;

N'-ацетил-N-ацетилдезоксивариолин;

N'-бисциннамоилдезоксивариолин;

N'-бисциннамоил-N-циннамоилдезоксивариолин;

N'-метансульфонилдезоксивариолин;

N'-трифторацетилдезоксивариолин;

2'-метоксидезоксивариолин;

2'-пиперидинилдезоксивариолин;

N'-этилдезоксивариолин;

N'-бутил-N'-метилдезоксивариолин;

N'-бензилдезоксивариолин.

Соединения формулы (I) содержат основную группу и поэтому могут образовывать соль. Тип таких солей не имеет принципиального значения для настоящего изобретения при условии, что в случае использования данного соединения для лечебных целей такие соли должны быть фармацевтически приемлемыми, то есть более биологически активными, примерно такими же биологически активными или не менее биологически активными, чем свободные основания, и менее токсичными, примерно такими же токсичными или не более токсичными, чем свободные основания. Указанные свойства можно легко оценить, выполняя простые испытания, известные специалистам в данной области. Однако, когда соединение используют для других целей (например, в качестве промежуточного продукта в процессе получения другого соединения), вышеуказанное ограничение является необязательным. Примеры приемлемых солей включают соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, сульфат и фосфат; соли органических кислот, такие как ацетат, бензоат, оксалат, малеат, фумарат, тартрат, цитрат и сукцинат, и соли сульфоновой кислоты, такие как метансульфонат, бензолсульфонат и п-толуолсульфонат. Предпочтительными солями являются гидрохлорид, гидробромид, тартрат и сукцинат.

Некоторые соединения формулы (I) содержат карбоксильную группу и поэтому могут образовывать сложный эфир. Тип таких сложных эфиров не имеет принципиального значения для настоящего изобретения при условии, что в случае использования данного соединения для лечебных целей сложные эфиры должны быть фармацевтически приемлемыми, то есть более биологически активными, примерно такими же биологически активными или не менее биологически активными, чем свободные кислоты, и менее токсичными, примерно такими же токсичными или не более токсичными, чем свободные кислоты. Желательно, чтобы сложноэфирная группа была физиологически удаляемой, то есть чтобы сложный эфир легко превращался in vivo в свободную кислоту. Указанные свойства можно легко оценить, выполняя простые испытания, известные специалистам в данной области.

Соединения по настоящему изобретению содержат по крайней мере четыре третичные аминогруппы, из которых одна или несколько групп (но предпочтительно только одна группа) могут быть кватернизованы с образованием соли четвертичного аммония. В данном случае также присутствует противоион; примеры приемлемых противоионов приведены выше со ссылкой на соли. Способ кватернизации одного или нескольких атомов азота хорошо известен специалистам в данной области. Желательно, чтобы группа, присоединенная к третичной аминогруппе с образованием четвертичных аммониевых соединений, представляла С₁-С ₆алкильную группу, наиболее предпочтительно метильную группу.

Различные производные вариолина формулы (I), в том числе известные соединения вариолина, получают новым способом, который входит в объем настоящего изобретения.

Составной частью способа по данному изобретению является получение промежуточного соединения приведенной ниже формулы (II)

В промежуточном соединении формулы (II) R _1а, R_2а и R_3а означают любые группы, представленные соответственно R ₁, R₂ и R₃, и все такие группы, в которых реакционноспособные функциональные группы защищены, и Y₁ и Y ₂ означают группы, которые могут быть удалены с образованием конденсированной трициклической пиридопирролопиримидиновой кольцевой структуры. Промежуточные соединения формулы (II) являются новыми соединениями и также входят в объем настоящего изобретения.

Для получения групп R_1а, R _2а и R_3а с защищенными реакционноспособными функциональными группами можно использовать любые защитные группы, известные в данной области. В этой связи можно сослаться на издание T.W.Greene et al., "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley & Sons, 1991.

Любые группы, которые могут быть удалены с образованием конденсированной трициклической пиридопирролопиримидиновой кольцевой структуры, можно использовать в качестве групп Y ₁ и Y₂. Группа Y₁ предпочтительно является гидроксильной группой или неустойчивой сложноэфирной группой, такой как ацетат, метансульфонат, п-толуолсульфонат или трифторметансульфонат, более предпочтительно гидроксильной группой. Группа Y₂ предпочтительно представляет атом галогена, более предпочтительно атом хлора.

Желательно, чтобы промежуточное соединение формулы (II) было симметричным, то есть R_1а и R_2а должны иметь одинаковые значения, как описано ниже. Это позволяет получить данное промежуточное соединение в результате добавления двух эквивалентов реагента к веществу-предшественнику, что в свою очередь уменьшает число стадий синтеза. Более предпочтительно R_1а и R_2а являются метилтиогруппами.

Промежуточное соединение формулы (II) можно получить несколькими способами. Один предпочтительный способ включает взаимодействие промежуточного соединения формулы (IV)

где R_3а и Y ₂ имеют указанные выше значения и М означает металл,

с соединением формулы (V)

где R_1а и R _2а имеют указанные выше значения.

В соединении формулы (IV) тип атома металла М не имеет принципиального значения при условии, что данное соединение является достаточно реакционноспособным для присоединения к соединению формулы (V). Примеры приемлемых металлированных соединений включают такие соединения, в которых М означает Li, Na, K, Mg или Zn; в металлированных соединениях, содержащих ионы двухвалентных металлов, может также присутствовать еще один противоион, такой как галоген, или такое соединение может представлять диметаллорганическое соединение. М предпочтительно означает Li.

Соединение формулы (IV) обычно получают in situ металлированием соответствующего галогенсодержащего соединения. Приемлемые реагенты хорошо известны в данной области, и такие примеры включают сам металл или другое более активное металлирующее соединение, например производное алкилметалла. Предпочтительными являются производные алкиллития и особенно предпочтительным является бутиллитий.

Соединение формулы (V) предпочтительно получают в результате взаимодействия промежуточного соединения формулы (VI)

где R_1а имеет указанные значения и М означает металл,

с соединением формулы L ₁-CO-L₂, где L₁ и L₂ имеют одинаковые или разные значения и представляют удаляемую группу.

В соединении формулы (VI) тип атома металла М не имеет принципиального значения при условии, что данное соединение является достаточно реакционноспособным для присоединения к соединению формулы L₁ -CO-L₂. Примеры приемлемых металлированных соединений включают соединения, приведенные в качестве примеров для соединения формулы (IV). М предпочтительно означает Li.

Соединение формулы (VI) обычно получают in situ металлированием соответствующего галогенсодержащего соединения, то есть соединения формулы (VIII)

где R_1а имеет указанные выше значения и Х означает атом галогена, предпочтительно бром или иод.

Соединение формулы (VIII), в которой R _1а означает метилтио и Х означает хлор, можно приобрести коммерческим путем. Соответствующие соединения, в которых Х представляет атом другого галогена, можно получить из соответствующего хлорсодержащего соединения, как это описано в научной литературе, см. Majeed A.J.; Antonsen P.; Benneche T.; Undheim K., Tetrahedron, 1989, 45, 993, и в приведенном ниже справочном примере 1.

Приемлемые реагенты и способы металлирования соединения формулы (VIII) с получением соединения формулы (VI) хорошо известны в данной области. Такие примеры включают сам металл или другое более активное металлирующее соединение, например производное алкилметалла. Предпочтительными являются производные алкиллития и особенно предпочтительным является бутиллитий.

В соединении формулы L₁ -CO-L₂ группы L₁ и L₂ могут иметь одинаковые или разные значения и представляют удаляемую группу, конкретный тип которой не имеет принципиального значения. Неограничивающими примерами приемлемых удаляемых групп являются галоген, С ₁-С₆алкокси, ди(С ₁-С₆алкил)амино, азотсодержащая гетероциклическая группа (особенно имидазол) или неустойчивая сложноэфирная группа, приведенная выше в определении Y₁. Диэтилкарбонат является особенно предпочтительным примером соединения формулы L₁-CO-L₂.

В альтернативном предпочтительном варианте осуществления изобретения соединение формулы (II) получают в результате взаимодействия вышеописанного промежуточного соединения формулы (VI) с промежуточным соединением формулы (VII)

где R_3а и Y ₂ имеют указанные выше значения и Z означает удаляемую группу.

В соединении формулы (VII) группа Z является удаляемой группой, примеры которой приведены выше со ссылкой на Y ₁, L₁ и L₂. Особенно предпочтительно, если Z представляет атом галогена, в частности хлора, так как два эквивалента металлированного соединения формулы (VI) можно в чистом виде добавлять к соединению формулы (VII).

После удаления групп Y₁ и Y₂ промежуточное соединение формулы (II) предпочтительно циклизуют с получением промежуточного соединения формулы (III)

где R_1а, R _2а и R_3а имеют указанные выше значения.

Группы Y₁ и Y₂ предпочтительно удаляют в результате взаимодействия промежуточного соединения формулы (II) с триалкилсиланом формулы R _aR_bR_cSiH, где R_a, R_b и R _c могут иметь одинаковые или разные значения, и каждый из них представляет С₁-С ₁₂алкильную группу. В качестве указанного реагента предпочтительно используют триэтилсилан.

Указанную реакцию предпочтительно выполняют в присутствии кислоты, конкретный тип которой не имеет принципиального значения. Предпочтительной является сильная органическая кислота, такая как п-толуолсульфоновая кислота или трифторуксусная кислота, и особенно предпочтительной является трифторуксусная кислота.

Промежуточное соединение формулы (III) затем можно превратить в соединение формулы (I) в результате взаимопревращения функциональных групп, способ выполнения которого известен специалистам в данной области. В качестве примера можно отметить, что аминогруппы известного соединения дезоксивариолина В (4), полученного способом по настоящему изобретению, можно легко превратить в разные функциональные производные, как это показано на схеме I и проиллюстрировано примерами ниже.

Схема I

В соответствии с альтернативным подходом можно получить другую группу аналогов, вводя функциональную группу в положении С5 гетероароматического кольца вариолинов. Это можно легко осуществить, окисляя промежуточное соединение (5) в сульфон (6) или сульфоксид (22), с последующим выполнением реакций нуклеофильного замещения, как это показано на схеме II.

Схема II

Два особенно важных взаимопревращения не были ранее описаны для вариолинов.

Поэтому еще одним объектом настоящего изобретения является способ получения соединения формулы (I), где R₁ и R₂ представляют аминогруппы и R₃ имеет указанные выше значения, который включает:

а) обработку соединения формулы (III), где R_1а и R _2а представляют метилсульфинил и R_3а имеет указанные выше значения, соединением формулы NH ₂Prot, где Prot означает аминозащитную группу, с получением соединения формулы (II), где R_1а и R _2а представляют защищенные аминогруппы и R _3а имеет указанные выше значения, и

b) удаление аминозащитной группы с получением соединения формулы (I), где R ₁ и R₂ представляют аминогруппы и R₃ имеет указанные выше значения.

Тип аминозащитной группы не имеет принципиального значения. Примеры приемлемых защитных групп, способы их присоединения и удаления описаны в издании T.W.Greene et al., «Protective Groups in Organic Synthesis», John Wiley & Sons, 1991, которое приведено в качестве ссылки.

Защитная группа предпочтительно является замещенной или незамещенной бензильной группой или фталимидной группой, в частности п-метоксибензильной (РМВ) группой. Указанную группу можно удалить любым известным способом, например, в кислотных условиях (особенно в присутствии сильной органической кислоты, например трифторметансульфоновой кислоты или трифторуксусной кислоты), в окислительных условиях, например, в присутствии дихлордицианобензохинона (DDQ) или в восстановительных условиях, например, в присутствии водорода и палладиевого катализатора.

Предпочтительный вариант такого способа проиллюстрирован на приведенной ниже схеме III, где превращение дисульфоксида (20) в дезоксивариолин В (4) достигается в результате выполнения двух стадий через бис-амин (29).

Схема III

Еще одним объектом данного изобретения является способ получения соединения формулы (I), где R ₁ представляет метилтио- или аминогруппу, R ₂ представляет аминогруппу и R₃ имеет значения, указанные в пункте 1, из соединения формулы (III), где R_1а и R_2а представляют метилтио и R_3а имеет значения, указанные в пункте 19, который включает:

а) необязательное окисление соединения формулы (III), где R_1а и R _2а означают метилтио, в соединение формулы (III), где R _1а и R_2а представляют метилсульфинил, и

b) обработку соединения формулы (III), где R _1а и R_2а представляют метилтио или метилсульфинил, реагентом, выбираемым из азида натрия и аммиака.

На стадии необязательного окисления а) вышеописанного способа можно использовать любой окислитель, способный окислять простые тиоэфиры в сульфоксиды. Неограничивающие примеры приемлемых окислителей включают перекись водорода, периодат натрия, трет-BuOCl, перборат натрия и перкислоты, такие как перуксусная кислота, м-хлорпербензойная кислота (mCPBA) или монопероксифталат магния (ММРР), из которых предпочтительны перкислоты и особенно предпочтительна м-хлорпербензойная кислота (mCPBA).

Предпочтительный вариант такого способа проиллюстрирован на приведенной ниже схеме IV, где промежуточное соединение (19) превращают в дезоксивариолин В (4) в одну стадию через промежуточный сульфоксид (20).

Схема IV

Новая методика, используемая для создания структуры ядра вариолина, позволяет выполнить синтез дезоксивариолина В (4) из простого моногетероароматического исходного вещества (7) в результате выполнения всего пяти стадий. Указанный синтез гораздо короче последовательности синтеза дезоксивариолина В, описанной в известном уровне технике.

В альтернативном варианте такого способа, проиллюстрированном на приведенной ниже схеме V, промежуточный простой дитиоэфир (19) превращают в тиодезоксивариолин (5) в одну стадию посредством обработки раствором аммиака.

Схема V

Особенно предпочтительный вариант способа по настоящему изобретению проиллюстрирован на приведенной ниже схеме VI. Конкретные условия выполнения данного способа подробно описаны в примерах соединений, примерах способов получения и справочных примерах.

Новый способ синтеза по настоящему изобретению позволяет создать структуру ядра вариолина, включающую конденсированное пиридопирролопиримидиновое ядро, несущее гетероциклическое ароматическое кольцо в положении С5, как показано в формуле (13), из простого моногетероароматического исходного вещества (7) в результате выполнения всего четырех стадий.

Схема VI

Непосредственное манипулирование функциональной группой позволяет превратить промежуточное соединение (13) в известное соединение вариолина В (1) в результате выполнения еще четырех стадий, как это проиллюстрировано на приведенной ниже схеме VII.

Схема VII

Указанная короткая последовательность синтеза из восьми стадий с использованием коммерчески доступного исходного вещества (7) представляет впервые описанный способ синтеза вариолина В.

Подобная методика обеспечивает быстрое получение главного промежуточного соединения (19), используемого для синтеза дезоксивариолина В и родственных аналогов, как это проиллюстрировано на приведенной ниже схеме VIII и более подробно описано в примерах соединений, примерах способов получения и справочных примерах.

Схема VIII

Вышеописанные способы получения вариолина В или дезоксивариолина В можно легко модифицировать для получения других производных. В частности, данное изобретение относится к новым соединениям, которые можно получить из промежуточных соединений, полученных новым способом, который входит в объем настоящего изобретения.

Таким образом, настоящее изобретение относится к способам синтеза вариолина В (1), дезоксивариолина В (4) и родственных промежуточных соединений, таких как соединение формулы (5), и к способам получения аналогов вариолина. Пути синтеза согласно данному изобретению включают несколько стадий превращения, обеспечивающих получение требуемого продукта. Каждая стадия сама по себе представляет способ, входящий в объем данного изобретения. Данное изобретение не ограничено описанными способами и может включать альтернативные способы, например соответствующее изменение порядка стадий превращения в случае необходимости.

В более подробном изложении синтез вариолина В в соответствии с особенно предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения включает восемь нижеследующих стадий:

(а) превращение коммерчески доступного 4-хлор-2-тиометилпиримидина (7) в иодзамещенное соединение (8);

(b) взаимодействие соединения (8) с диэтилкарбонатом с получением симметричного кетона (9);

(с) добавление соединения (9) к раствору литиированной формы производного пиридина (11) с получением триарилового спирта (12);

(d) последовательные дезоксигенирование и циклизацию триарилового спирта (12) с использованием триэтилсилана в сочетании с трифторуксусной кислотой;

(е) окисление промежуточного соединения (13) м-хлорпербензойной кислотой (mCPBA) в дисульфоксид (14);

(f) обработку соединения (14) п-метоксибензиламином с получением бис-амина (15);

(g) превращение метоксигруппы соединения (15) в спирт (16) с использованием этантиолата натрия;

(h) удаление п-метоксибензильных защитных групп соединения (16) при помощи трифторметансульфоновой кислоты с получением вариолина В (1).

Такой синтез проиллюстрирован на приведенной ниже схеме IX. Указанные способы более подробно рассмотрены в примерах соединений, примерах способов получения и справочных примерах.

Схема IX

В другой предпочтительной модификации исходное вещество (7) превращают в дезоксивариолин В в результате выполнения других приведенных ниже пяти стадий, которые включают:

(а) превращение коммерчески доступного 4-хлор-2-тиометилпиримидина (7) в иодзамещенное соединение (8);

(b) взаимодействие соединения (8) с производным пиридина (17) с получением триарилового спирта (18);

(с) последовательно осуществляемые дезоксигенирование и циклизацию триарилового спирта (18) с использованием триэтилсилана в сочетании с трифторуксусной кислотой;

(d) окисление простого дитиоэфира (19) м-хлорпербензойной кислотой (mCPBA) в дисульфоксид (20);

(е) обработку соединения (20) раствором аммиака с получением дезоксивариолина В (4).

Такой синтез проиллюстрирован на приведенной ниже схеме X. Указанные способы более подробно рассмотрены в примерах соединений, примерах способов получения и справочных примерах.

Схема Х

Как должно быть очевидно специалисту в данной области, описанные схемы реакций могут быть модифицированы и/или объединены различным образом, и соединения, полученные в результате таких изменений, входят в объем данного изобретения. В частности, исходное вещество и/или реагенты и реакции могут быть изменены для соответствия другим комбинациям замещающих групп в формулах с (I) по (VIII).

Фармацевтические композиции

Примеры фармацевтических композиций включают любые твердые (таблетки, пилюли, капсулы, гранулы и т.д.) или жидкие (растворы, суспензии или эмульсии) формы, предназначенные для перорального, местного или парентерального введения, которые могут содержать чистое соединение или в сочетании с любым носителем или другими фармакологически активными соединениями. При парентеральном введении указанные композиции должны быть стерильными.

Требуемые дозы соединений могут изменяться в зависимости от конкретного препарата, способа введения и, в особенности, локализации, хозяина и вида опухоли, которая требует лечения. При этом необходимо учитывать другие факторы, такие как возраст, масса тела, пол, режим питания, время введения, скорость выведения из организма, состояние нуждающегося субъекта, вводимые комбинации лекарственных средств, чувствительность к лекарственным средствам и тяжесть заболевания. Введение можно осуществлять непрерывно или периодически с учетом максимально допустимой дозы.

Соединения или композиции по настоящему изобретению можно вводить любым приемлемым способом, таким как внутривенное вливание, пероральное, внутрибрюшинное и внутривенное введение.

Цитотоксическая активность

Соединения по настоящему изобретению испытаны в соответствии с описанной ниже методикой испытания.

Колориметрический анализ с использованием сульфородамина В (SRB) был адаптирован для количественного измерения роста и жизнеспособности клеток: см. Skehan, P.A. et al., J.Natl. Cancer Inst., 1990, 82, 1107-1112. Указанный анализ выполняют с использованием 96-луночных микропланшетов для культуры клеток диаметром 9 мм (Faircloth G.T.; Stewart D. and Clement J.J., Journal of Tissue and Culture Methods, 1983, 11, 201-205; Mosmann, T. Journal of Immunological Methods, 1983, 65, 55-63).

Большинство линий клеток, полученных из Американской коллекции типовых культур (АТСС), относятся к разным типам злокачественных опухолей человека. Клетки выдерживают в среде RPMI 1640 с 10% FBS, содержащей 0,1 г/л пенициллина и 0,1 г/л сульфата стрептомицина, и затем инкубируют при 37°С, 5% СО₂ и 98% влажности. Для выполнения экспериментов клетки собирают из субконфлюэнтных культур, используя трипсин, и повторно суспендируют в свежей среде до посева.

Клетки высевают на 96-луночные титрационные микропланшеты в количестве 5×10 ³ клетки/лунку в 195 мкл аликвотах среды и оставляют для прикрепления к поверхности планшета, выращивая клетки в среде, не содержащей лекарственного средства, в течение 18 часов. Затем образцы подвергают воздействию 5 мкл аликвот лекарственных средств в концентрации от 10 до 10-8 мкг/мл, растворенных в ДМСО/EtOH (0,2% в физиологическом растворе с фосфатным буфером). После воздействия в течение 48 часов измеряют противоопухолевое действие SRB-методом: клетки фиксируют, добавляя 50 мкл холодной 50% (мас./об.) трихлоруксусной кислоты (ТСА), и инкубируют в течение 60 минут при 4°С. Планшеты промывают деионизированной водой и сушат. В каждую лунку титрационного микропланшета добавляют 100 мкл раствора SRB (0,4% мас./об. в 1% уксусной кислоте) и инкубируют в течение 10 минут при комнатной температуре. Несвязанный SRB удаляют, производя промывку 1% уксусной кислотой. Планшеты подвергают воздушной сушке и связанный краситель солюбилизируют трис-буфером. Оптическую плотность измеряют при помощи автоматического спектрофотометра для прочтения планшетов при одной длине волны, равной 490 нм.

Вычисляют средние значения ± стандартное отклонение для данных, полученных с использованием образцов из трех лунок. Указанным способом можно вычислить некоторые параметры реакции клеток: GI = торможение роста, TGI = полное торможение роста (цитостатический эффект) и LC = лизис клеток (цитотоксический эффект).

Результаты приведены в таблицах 1 и 2. Хотя соединения (1), (4), (5) и (6) сами по себе не входят в объем настоящего изобретения, результаты, приведенные в таблицах, свидетельствуют о противоопухолевой активности, которая ранее не была обнаружена у указанных соединений.

Данная заявка претендует на приоритет заявок на патент Великобритании №0017055.5, поданной 11 июля 2000 г, и №0030689.4, поданной 15 декабря 2000 г. Оба документа включены в данное описание изобретения в качестве ссылки в той части описания изобретения, которая полностью не отображается в описании изобретения настоящей заявки.

Таблица 1 Данные исследования противоопухолевой активности in vitro
GI50	50% торможение роста
TGI	Полное торможение роста (цитостатический эффект)
LC50	50% чистый лизис клеток (цитотоксический эффект)
	Тип опухоли	NSCL кишки	ободочной	меланома
Соединение	Линия клеток	А-549	НТ-29	SW-620	MEL-28
Вариолин В1 (природный)	GI50 (M):	7.Е-07	7.Е-07	1.Е-07	7.Е-07
	TGI (M):	1.Е-06	1.Е-06	3.Е-07	1.Е-06
	LC50 (M):	3.Е-06	3.Е-06	2.Е-06	2.Е-06
Дезоксивариолин 4	GI50 (M):	1.Е-07	7.Е-08	7.Е-08	7.Е-08
	TGI (M):	2.Е-07	2.Е-07	3.Е-07	1.Е-07
	LC50 (M):	4.Е-07	1.Е-05	1.Е-05	3.Е-07
Тиодезоксивариолин 5	GI50 (M):	1.Е-06	6.Е-07	3.Е-06	6.Е-08
	TGI (M):	3.Е-06	2.Е-06	1.Е-05	3.Е-07
	LC50 (M):	1.Е-05	1.Е-05	3.Е-05	6.Е-06

Таблица 1 (продолжение)

Тип опухоли

Яичника

Почки

Предстательной железы

Молочной железы

Соединение

Линия клеток

OVCAR-3

A498

DU-145

MCF-7

MB-231

Вариолин В1 (природный)

GI50 (M):

1.Е-07

1.Е-07

7.Е-07

3.Е-07

TGI (M):

3.Е-07

3.Е-07

2.Е-06

1.Е-06

LC50 (M):

2.Е-06

1.Е-06

2.Е-06

3.Е-06

Дезоксивариолин 4

GI50 (M):

1.Е-07

7.Е-08

1.Е-07

1.Е-07

7.Е-08

TGI (M):

3.Е-07

2.Е-07

3.Е-07

3.Е-07

3.Е-07

LC50 (M):

4.Е-07

7.Е-07

7.Е-06

4.Е-06

3.Е-05

Тиодезоксивариолин 5

GI50 (M):

1.Е-06

6.Е-07

3.Е-07

2.Е-06

2.Е-06

TGI (M):

2.Е-06

2.Е-06

1.Е-06

6.Е-06

6.Е-07

LC50 (M):

3.Е-06

3.Е-06

3.Е-06

3.Е-05

1.Е-05

Таблица 2 Данные исследования противоопухолевой активности in vitro (М)

Соединение №

Молекулярная масса

R1

R 2

R3

19

339,4

SMe

SMe

H

20

371,4

SOMe

SOMe

H

22

324,4

SOMe

NH2

H

23а

361,4

N(Ac)2

NH2

H

23b

403,4

N(Ac)2

NHAc

H

23c

445,4

N(Ac)2

N(Ac) 2

H

23d

319,3

NHAc

NH2

H

23e

361,4

NHAc

NHAc

H

24a

407,4

N(циннамил) 2

NH2

H

24b

667,7

N(циннамил)2

NHциннамил

H

26

373,3

NHCOCF3

NH2

H

27

292,3

OMe

NH2

H

28d

367,4

NHBn

NH2

H

28b

305,3

NHEt

NH2

H

28a

345,4

пиперидинил

NH2

H

28c

347,42

NMeBu

NH2

H

29

517,6

NHPMB

NHPMB

H

1

293,3

NH2

NH 2

OH

6

340,4

SO2Me

NH 2

H

Таблица 2 (продолжение)

Соединение №

А-549

НТ-29

GI50

TGI

LC50

GI50

TGI

LC50

19

5,9 10-6

1,2 10-5

2,9 10-5

5,9 10-6

1,5 10-5

2,9 10-5

20

5,4 10-5

>1,3 10-4

>1,3 10-5

1,1 10-4

>1,3 10-4

>1,3 10-4

22

1,2 10-6

6,2 10-6

9,2 10-5

9,2 10-7

1,5 10-5

>1,5 10-4

23а

2,8 10-7

1,4 10-6

2,8 10-6

1,4 10-7

2,8 10-7

2,8 10-6

23b

7,4 10-7

2,0 10-6

7,4 10-6

1,0 10-7

1,7 10-6

2,5 10-6

23с

2,2 10-6

1,3 10-5

2,2 10-5

1,1 10-6

2,0 10-6

1,8 10-5

23d

6,3 10-7

1,6 10-6

3,2 10-6

6,3 10-7

1,6 10-6

3,2 10-6

23e

2,2 10-6

5,5 10-6

2,8 10-5

5,5 10-6

>2,8 10-5

>2,8 10-5

24a

1,2 10-7

1,2 10-6

1,2 10-5

4,9 10-6

1,2 10-5

>1,2 10-4

24b

3,0 10-6

7,5 10-6

7,5 10-5

1,5 10-6

1,5 10-5

7,5 10-5

26

2,7 10-7

1,3 10-6

2,7 10-5

8,0 10-7

1,3 10-5

1,1 10-4

27

6,8 10-8

3,4 10-7

2,7 10-6

1,7 10-7

3,4 10-7

3,4 10-5

28d

1,4 10-6

2,7 10-6

2,7 10-5

1,4 10-6

2,4 10-6

2,2 10-5

28b

>3,3 10 -5

>3,3 10 -5

>3,3 10 -5

>3,3 10 -5

>3,3 10 -5

>3,3 10 -5

28a

8,7 10-6

2,3 10-5

>2,9 10-5

5,8 10-6

2,0 10-5

>2,9 10-5

28c

2,9 10-6

8,7 10-6

2,3 10-5

2,9 10-6

8,7 10-6

2,3 10-5

29

>9,7 10-5

>9,7 10-5

>9,7 10-5

>9,7 10-5

>9,7 10-5

>9,7 10-5

1

1,7 10-7

6,8 10-7

1,7 10-4

1,0 10-6

1,7 10-5

>1,7 10-4

6

4,4 10-6

1,5 10-4

>1,5 10-4

2,9 10-5

1,5 10-4

>1,5 10-4

Примеры

В приведенных ниже примерах описаны способы получения целевых и промежуточных соединений по настоящему изобретению. В примерах способов получения описаны способы получения известных соединений, входящие в объем настоящего изобретения. Получение промежуточных соединений, не входящих в объем настоящего изобретения, описано в справочных примерах.

Общая экспериментальная часть

За исключением особо оговоренных случаев все реакции выполняют в инертной атмосфере в предварительно высушенной стеклянной посуде. Все органические экстракты промывают водой и насыщенным раствором соли и сушат над MgSO₄ до концентрирования в вакууме. Температуры плавления определены в аппарате с нагревом Кофлера и не скорректированы.

Пример 1. Соединение 13

Смесь триарилового спирта 12 (100 мг, 0,237 ммоль) (полученного в приведенном ниже примере 16) и трифторуксусной кислоты (37 мкл, 0,48 ммоль) растворяют в 1,2-дихлорэтане (0,5 мл). Образовавшийся оранжевый раствор переносят в пробирку Янга с резиновой мембраной, содержащую триэтилсилан (0,30 мл, 1,9 ммоль). В сильном потоке аргона мембрану заменяют тефлоновой® завинчивающейся крышкой и герметично закрытый реакционный сосуд нагревают при 100°С в течение 43 часов. Сосуд охлаждают, открывают и содержимое разводят СН₂Cl ₂ (12 мл). Раствор нейтрализуют 5% раствором NaHCO ₃ (8 мл) и разделяют фазы. Водный слой повторно экстрагируют СН₂Cl₂ и органические экстракты обрабатывают стандартным способом. Сырое вещество очищают флэш-хроматографией на силикагеле, производя градиентное элюирование (48-75% EtOAc/гексаны), и получают в порядке элюирования:

(1) структуру ядра вариолина 13 в виде желтого твердого вещества (41 мг, 47%):

т.пл.: 192-194°С; ¹ Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃): 2.65 (с, 3Н), 2.70 (с, 3H), 4.03 (с, 3Н), 6.92 (д, J=5.4 Гц, 1H), 7.40 (д, J=5.4 Гц, 1H), 7.71 (д, J=6.8 Гц, 1H), 7.98 (д, J=6.8 Гц, 1H), 8.48 (м, 2H); ¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃): 14.1, 14.9, 55.6, 101.9, 102.5, 108.5, 110.8, 117.7, 135.9, 138.6, 143.5, 144.3, 154.2, 155.6, 159.6, 161.1, 171.2; HRMS: вычислено для C_l7H₁₅ N₅O³²S ₂ (М⁺) 369.0718, найдено 369,0720,

и (2) нециклизованный простой эфир 13а в виде вязкой смолы (28 мг, 28%)

¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl ₃): 2.36 (с, 3Н), 2.44 (с, 3Н), 3.84 (с, 3Н) 6.57 (д, J=5.9 Гц, 1H), 6.80 (д, J=5.9 Гц, 1H), 7.17 (д, J=4.9 Гц, 1H), 7.79 (с, 1H), 8.27 (д, J=5.9 Гц, 1H), 8.30 (д, J=5.9 Гц. 1H), 8.49 (д, J=4.9 Гц, 1H); ¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl ₃): 14.0 (x2), 56.2, 71.8, 103.5, 106.4, 112.9, 120.8, 150.7, 152.5, 157.1. 158.0, 166.0, 167.1, 167.3, 172.1, 172.4; HRMS: вычислено для C₁₇H₁₆ ³⁵ClN₅O ₂ ³²S₂ (M ⁺) 421.0434, найдено 421.0444.

Пример 2. Соединения 14 и 15

Бис-сульфид 13 (37 мг, 0,10 ммоль) растворяют в CHCl₃ (5 мл) в атмосферных условиях и охлаждают на бане с температурой -40°С. Предварительно охлажденный (-40°С) раствор м-хлорпербензойной кислоты в CHCl ₃ (10 мг/мл) по каплям добавляют к раствору до полного исчезновения исходного вещества (использовано примерно 2 экв. m-CPBA) по результатам анализа ТСХ. Раствор нагревают до комнатной температуры и нейтрализуют насыщенным раствором NaHCO ₃. Полученный раствор повторно экстрагируют CH ₂Cl₂ и после стандартной обработки получают желтое твердое вещество, которое в основном представляет смесь диастереомерных бис-сульфоксидов. Сырую смесь используют без очистки, однако бис-сульфоксиды 14 имеют нижеследующие спектроскопические характеристики.

¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃) (большинство сигналов для диастереоизомеров совпадают, однако, поскольку они представляют несколько соединений, все указанные сигналы квалифицируются как мультиплеты): 3.02 (м, 3H), 3.19 (м, 3Н), 4.12 (м, 3Н), 7.00-7.01 (м, 1H), 7.98-7.99 (м, 1H), 8.12-8.14 (м, 1H), 8.48-8.49 (м, 1H), 8.64-8.67 (м, 1H), 8.79-8.81 (м, 1H).

Сырое окисленное вещество нагревают с избытком п-метоксибензиламина (0,15 мл, 1,1 ммоль) при 85°С в течение 15 часов. Сырую красную пасту очищают флэш-хроматографией на силикагеле, производя градиентное элюирование (2,5-4% МеОН/CH₂Cl ₂). Желтые фракции повторно хроматографируют, производя градиентное элюирование (от 50% EtOAc/CH₂ Cl₂ до 100% EtOAc), и получают бис-амин 15 в виде желтого твердого вещества (43 мг, 78% на протяжении двух стадий).

Т.пл. 74-77°С; ¹ Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃): 3.81 (с, 6H), 3.99 (с, 3H), 4.66 (д, J=5.6 Гц, 2H), 4.85 (д, J=5.5 Гц, 2H), 5.51 (м, 1H), 6.82 (д, J=5.6 Гц, 1H), 6.89-6.91 (м, 4Н), 7.00 (д, J=5.2 Гц, 1H), 7.29 (м, 1H), 7.34 (д, J=8.5 Гц, 2H), 7.39 (д, J=8.5 Гц, 2Н), 7.43 (м, 1H), 8.16 (д, J=5.6 Гц, 1H), 8.26 (д, J=5.1 Гц, 1H), 10.39 (м, 1H); ¹³C ЯМР (75 МГц, CDCl₃): 44.3, 44.9, 55.3 (2×СН₃), 55.5, 101.3, 101.6, 101.8, 111.4, 112.2, 114.0 (×2), 128.5, 128.8, 130.5, 131.4, 137,5, 141.5, 141.9, 144.7, 148.7, 154.6 (шир.), 158.7, 158.9, 159.4, 160.9, 162.6; HRMS: вычислено для C ₃₁H₂₉N₇О ₃ (M⁺) 547.2332, найдено 547.2334.

Пример 3. Соединение 16

NaH (60%, 60 мг, 1,5 ммоль) трижды промывают петролейным эфром и суспендируют в сухом ДМФА (1,5 мл). Перемешиваемую суспензию охлаждают на льду и по каплям добавляют этантиол (0,14 мл, 1,9 ммоль). После прекращения выделения газа прозрачный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 10 минут. Порцию раствора NaS в Et (1,1 мл) добавляют к раствору бис-амина 15 (40 мг, 0,073 ммоль) в сухом ДМФ (1,5 мл) и смесь перемешивают при 50°С в течение 7 часов. Полученный раствор охлаждают, добавляют водный раствор NH₄Cl и смесь экстрагируют EtOAc (3 раза). Органические экстракты трижды промывают водой, чтобы удалить ДМФА, и выполняют обычную обработку. Образовавшееся желтое твердое вещество очищают флэш-хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента 3% МеОН/CH₂ Cl₂, и получают спирт 16 в виде желтого твердого вещества (34 мг, 87%).

¹ Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃): 3.80 (с, 3Н), 3.81 (с, 3H), 4.61 (д, J=5.5 Гц, 2H), 4.85 (д, J=5.4 Гц, 2H), 5.35 (м, 1H), 6.76 (д, J=5.5 Гц, 1H), 6.88-6.92 (м, 4H), 7.03 (д, J=6.8 Гц, 1H), 7.06 (д, J=5.7 Гц, 1H), 7.32 (д, J=8.4 Гц, 2H). 7.40 (д, J=8.4 Гц, 2H), 7.68 (д, J=6.8 Гц, 1H), 8.05 (д, J=5.5 Гц, 1H), 8.29 (д, J=5.7 Гц, 1H), 10.94 (м, 1H), 15.75 (шир. с, 1H); ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): 44.3, 45.2, 55.3 (2×СН₃), 100.3, 100.5, 106.9, 107,5, 111.4, 114.1 (2×С), 128.8, 129.2, 130.2 (2×С), 137,5, 142.8, 143.8, 145.4, 149.7, 158.6, 158.9, 159.0, 159.5, 159.8, 160.0; HRMS: вычислено для C ₃₀H₂₇N₇О ₃ (M⁺) 533.2175, найдено 533.2185.

Пример 4. Соединение 19

Смесь спирта 18 (полученного в приведенном ниже примере 17) (1,04 г, 2,65 ммоль), триэтилсилана (3,4 мл, 21,5 ммоль) и трифторуксусной кислоты (0,81 мл, 10,6 ммоль) нагревают с обратным холодильником в течение 3 часов. Полученную смесь охлаждают, красный остаток растворяют в CH₂ Cl₂ (40 мл) и добавляют насыщенный раствор NaHCO₃. Коричневую смесь перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре и слои разделяют. Водный слой эктрагируют CH₂Cl₂ (3×50 мл), объединенные органические слои сушат, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Красный остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента этилацетат:гексан (1:4) - этилацетат:гексан (1:3), и получают пиридопирролопиримидин 19 (0,3 г, 33%) в виде бледно-желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃ ): 8.64 (дд, J=8.1 и 1.7 Гц, 1H), 8.60 (дд, J=4.6 и 1.7 Гц, 1H), 8.51 (д, J=5.4 Гц, 1H), 8.06 (д, J=6.4 Гц, 1H), 7.82 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.51 (дд, J=8.5 и 4.6 Гц, 1H), 7.34 (д, J=5.4 Гц, 1H), 2.73 (с, 3H), 2.68 (с, 3H).

Пример 5. Соединения 20 и 29

Окисление бис-сульфида 19 в бис-сульфокид 20 осуществляют способом по примеру 2.

Смесь п-метоксибензиламина (2 мл) и бис-сульфинилдезоксивариолина 20 (30 мг, 8,1×10 ^-5 моль) перемешивают при 95°С в течение 2 часов и упаривают при пониженном давлении. Красный остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента дихлорметан (DCM)/MeOH (0,2%) - DCM/MeOH (2%), и получают N',N-бис(п-метоксибензил)дезоксивариолин 29 (21 мг, 49%) в виде желтого масла.

¹ Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 10.4 (шир.с, 1H), 8.56 (д, J=7.8 Гц, 1H), 8.31 (д, J=5.4 Гц, 1H), 8.27 (дд, J=5.2 и 1.1 Гц, 1H), 7.63 (д, J=6.8 Гц, 1H), 7.42-7.33 (м, 12H), 6.98 (д, J=5.4 Гц, 1 H), 6.93-6.89 (м, 4H), 5.52 (шир.с, 1H), 4.89 (д, J=5.4 Гц, 2H), 4.69 (д, J=5.9 Гц, 2H). 3.81 (с, 3H), 3.80 (с, 3H).

Пример 6. Соединение 28а

Пиперидин (0,04 мл, 0,4 ммоль) добавляют к раствору сульфинилдезоксивариолина 22 (7 мг, 2,1×10 ^-5 моль) (полученного в приведенном ниже примере способа получения 5) в ТГФ (2 мл). Желтый раствор перемешивают при 70°С в течение ночи и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (3%), и получают пиперидинилдезоксивариолин 28а (5,6 мг, 78%) в виде желтого масла.

¹ Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 8.63 (дд, J=8.4 и 1.5 Гц, 1H), 8.38 (дд, J=4.8 и 1.7 Гц, 1H), 8.35 (д, J=5.4 Гц, 1H), 7.60 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.50 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.46 (дд, J=8.0 и 4.6 Гц, 1H), 6.84 (д, J=5.4 Гц, 1H), 3.92 (шир.с, 4H), 1.73 (шир.с, 6H). MS (электрораспылительная ионизация, ESI) 346 (M+1).

Пример 7. Соединение 28b

Этиламин (0,34 мл, 2 М раствор в МеОН) добавляют к раствору сульфинилдезоксивариолина 22 (полученного в приведенном ниже примере способа получения 5) (11 мг, 3,4×10 ^-5 моль) в ТГФ (2 мл). Желтый раствор перемешивают при 70°С в течение ночи и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (4%), и получают N'-этилдезоксивариолин 28b (5,5 мг, 53%) в виде желтого масла.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 8.67 (дд, J=7.9 и 1.4 Гц, 1H), 8.36 (д, J=4.4 Гц, 1H), 8.22 (д, J=4.8 Гц, 1H), 7.52 (шир.с, 2H), 7.45 (дд, J=7.8 и 4.1 Гц, 1H), 6.93 (д, J=5.1 Гц, 1H), 3.54 (д, J=6.8 Гц, 2H), 1.29 (т, J=7.0 Гц, 3H). (ESI) 306 (M+1).

Пример 8. Соединение 28с

Бутилметиламин (0,029 мл, 0,24 ммоль) добавляют к раствору сульфинилдезоксивариолина 22 (полученного в приведенном ниже примере способа получения 5) (8 мг, 2,4×10 ^-5 моль) в ТГФ (2 мл). Желтый раствор перемешивают при 70°С в течение ночи и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (4%), и получают N'-бутилметилдезоксивариолин 28с (2 мг, 62% с учетом выделенного исходного вещества) в виде желтого масла.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.75 (д, 1H), 8.41 (дд, 1H), 8.39 (д, J=5.5 Гц, 1H), 7.78 (д, J=6.5 Гц, 1H), 7.68 (д, J=6.5 Гц, 1H), 7.42 (дд, J=8.0 и 4.5 Гц, 1H), 6.89 (д, J=5.6 Гц, 1H), 3.60 (шир.с, 2H), 3.41 (с, 3H), 1.62 (шир.с, 4H), 1.05 (шир.с, 3H). (ESI) 348 (M+1).

Пример 9. Соединение 28d

Бензиламин (0,050 мл, 0,45 ммоль) добавляют к раствору сульфинилдезоксивариолина 22 (4 мг, 1,2×10 ^-5 моль) в ТГФ (1,5 мл). Желтый раствор перемешивают при 70°С в течение ночи и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (4%), и получают N'-бензилдезоксивариолин 28d (2,1 мг, 47%) в виде желтого масла. ¹ Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 8.81 (шир.с, 1H), 8.75 (д, J=7.1 Гц, 1H), 8.64 (д, J=6.0 Гц, 1H), 7.49-7.31 (м, 8H), 6.99 (д, J=6.2 Гц, 1H), 4.78 (д, J=5.8 Гц, 2H). (ESI) 368 (M+1).

Пример 10. Соединение 27

Раствор сульфонилдезоксивариолина 6 (полученного в приведенном ниже примере способа получения 5) (5,8 мг, 1,7×10 ^-5 моль) в МеОН (2 мл) добавляют к раствору метоксида натрия в МеОН (2 мл) при 0°С. Желтый раствор перемешивают при 24°С в течение 4 часов, гасят насыщенным раствором NH ₄Cl и экстрагируют этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические слои сушат, фильтруют и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (1%) - DCM/MeOH (3%), и получают метоксидезоксивариолин 27 (2,6 мг, 53%) в виде желтого твердого вещества.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.78 (dd, J=8.1 и 1.5 Гц, 1H), 8.51 (д, J=5.43 Гц, 1H), 8.41 (дд, J=4.6 и 1.5 Гц, 1H), 7.69 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.63 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.50 (дд, J=8.1 и 4.6 Гц, 1H), 7.34 (д, J=5.4 Гц, 1H), 4.14 (с, 3H). (ESI) 293 (M+1).

Пример 11. Соединение 26

Трифторуксусный ангидрид (6 мкл, 4,3х10 ^-5 моль) добавляют к раствору дезоксивариолина 4 (4 мг, 1,4×10^-5 моль) в ТГФ (1,5 мл). Желтый раствор перемешивают при 24°С в течение ночи и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток растворяют в DCM (5 мл) и промывают насыщенным раствором NaHCO₃ (4 мл). Органический слой сушат, фильтруют и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%)-DCM/MeOH (4%), и получают N'-трифторацетилдезоксивариолин 26 (0,9 мг, 43% с учетом выделенного исходного вещества) в виде желтого масла.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.99 (дд, J=8.4 и 1.1 Гц, 1H), 8.57 (д, J=5.6 Гц, 1H), 8.42 (дд, J=4.6 и 1.3 Гц, 1H). 7.91 (д, J=6.7 Гц, 1H), 7.79 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.58 (дд, J=8.3 и 4.3 Гц, 1H), 7.52 (д, J=5.6 Гц, 1H). (ESI) 374 (M+1).

Пример 12. Соединение 25

Метансульфонилхлорид (5,5 мкл, 5×10 ^-5 моль) добавляют к раствору дезоксивариолина 4 (полученного в приведенном ниже примере способа получения 2 или 4) (5 мг, 1,8×10^-5 моль) и Et ₃N (5 мкл, 3,6×10^-5 моль) в ТГФ (1,5 мл). Желтый раствор перемешивают при 24°С в течение ночи и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток растворяют в DCM (5 мл) и промывают насыщенным раствором NaHCO ₃ (4 мл). Органический слой сушат, фильтруют и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (4%), и получают N'-метансульфонилдезоксивариолин 25 (1,5 мг, 46% с учетом выделенного исходного вещества) в виде желтого масла.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.89 (дд, J=7.9 и 1.1 Гц, 1H), 8.76 (д, J=5.7 Гц, 1H), 8.42 (дд, J=4.2 и 1.2 Гц, 1H), 7.78 (д, J=6.4 Гц, 1H), 7.72 (д, J=6.5 Гц, 1H), 7.64 (д, J=5.6 Гц, 1H), 7,57 (дд, J=8.3 и 4.3 Гц, 1H), 3.15 (с, 3H).

Пример 13. Соединения 24а и 24b

Циннамоилхлорид (9 мкл, 5,4×10 ^-5 моль) добавляют к раствору дезоксивариолина 4 (5 мг, 1,8×10^-5 моль) (полученного в приведенном ниже примере способа получения 2 или 4) и Et₃ N (12 мкл, 5,4×10^-5 моль) в ТГФ (2 мл). Сразу же одной порцией добавляют диметиламинопиридин (DMAP) (1 мг, 0,9×10^-5 моль), желтый раствор перемешивают при 24°С в течение ночи и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток растворяют в DCM (5 мл) и промывают насыщенным раствором NaHCO₃ (4 мл). Органический слой сушат, фильтруют и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (1%) - DCM/MeOH (4%), и получают N'-бисциннамоилдезоксивариолин 24а (1,1 мг, 21% в расчете на выделенное исходное вещество) и N'-бисциннамоил-N-циннамоилдезоксивариолин 24b (0,6 мг, 9% с учетом выделенного исходного вещества) в виде желтых масел.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.78 (д, J=6.4 Гц, 1H), 8.69 (дд, J=7,4 и 1.1 Гц, 1H), 8.38 (дд, J=4.6 и 1.2 Гц, 1H), 7.91 (д, J=15.3 Гц, 2H), 7.64-7.32 (м, 14H), 6.90 (д, J=15.6 Гц, 2H). (ESI) 560 (M+Na), 538 (M+1).

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.82 (д, J=6.4 Гц, 1H), 8.79 (дд, J=7,4 и 1.1 Гц, 1H), 8.58 (дд, J=4.6 и 1.3 Гц, 1H), 8.01-7.82 (м, 4H), 7.71 (д, J=15.3 Гц, 2H), 7.64 (дд, J=8.3 и 4.2 Гц, 1H), 7,58-7.31 (м, 16H), 6.90 (д, J=15.6 Гц, 3H). (ESI) 668 (M+1), 690 (M+Na).

Пример 14. Соединения 23а, 23b и 23с

Ацетилхлорид (3,5 мкл, 4,8×10 ^-5 моль) добавляют к раствору дезоксивариолина 4 (9 мг, 3,2×10^-5 моль) (полученного в приведенном ниже примере способа получения 2 или 4) и Et₃ N (9 мкг, 6,5×10^-5 моль) в ТГФ (2 мл). Оранжевую суспензию перемешивают при 24°С в течение ночи и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток растворяют в DCM (5 мл) и промывают насыщенным раствором NaHCO ₃ (4 мл). Органический слой сушат, фильтруют и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (5%), и получают N'-бисацетилдезоксивариолин 23а (1 мг, 26% с учетом выделенного исходного вещества), N'-бисацетил-N-ацетилдезоксивариолин 23b (1 мг, 23% с учетом выделенного исходного вещества) и N'-бисацетил-N-бисацетилдезоксивариолин 23с (0,5 мг, 10% с учетом выделенного исходного вещества) в виде желтых масел.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.76 (д, J=5.6 Гц, 1H), 8.68 (дд, J=6.9 и 1.1 Гц, 1H), 8.42 (дд, J=4.1 и 1.2 Гц, 1H), 7.73 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.66 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.54-7.42 (м, 2H), 2.41 (с, 6H). (ESI) 384 (M+Na).

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.82 (д, J=5.6 Гц, 1H), 8.72 (дд, J=7.8 и 1.2 Гц, 1H), 8.53 (дд, J=4.4 и 1.2 Гц, 1H), 7.90 (д, J=6.4 Гц, 1H), 7.87 (д, J=6.5 Гц, 1H), 7.70 (д, J=5.4 Гц, 1H), 7.60 (дд, J=8.3 и 4.9 Гц, 1H), 2.68 (с, 3H), 2.40 (с, 6H). (ESI) 426 (M+Na), 404 (М+1).

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.88 (д, J=5.4 Гц, 1H), 8.63 (дд, J=8.3 и 1.7 Гц, 1H), 8.56 (дд, J=4.6 и 1.3 Гц, 1H), 8.36 (д, J=6.7 Гц, 1H), 7.99 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.75 (д, J=5.5 Гц, 1H), 7,58 (дд, J=8.3 и 4.6 Гц, 1H), 2.43 (с, 12H). (ESI) 468 (M+Na).

Пример 15. Соединения 23d и 23е

Ацетилхлорид (1,5 мкл, 1,8×10 ^-5 моль) добавляют к раствору дезоксивариолина 4 (полученного в приведенном ниже примере способа получения 2 или 4) (5 мг, 1,8×10^-5 моль) и Et ₃N (4 мкл, 2,7×10^-5 моль) в ТГФ (1,5 мл) при -78°С. Оранжевую суспензию перемешивают в течение ночи, очень медленно повышая температуру до комнатной температуры, и затем упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток растворяют в DCM (5 мл) и промывают насыщенным раствором NaHCO₃ (4 мл). Органический слой сушат, фильтруют и упаривают при пониженном давлении. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (1%) - DCM/MeOH (4%), и получают N'-ацетил-N-ацетилдезоксивариолин 23d (1 мг, 26%) и N'-ацетилдезоксивариолин 23е (0,5 мг, 10%) в виде желтых масел.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.83 (дд, J=7,4 и 1.4 Гц, 1H), 8.52 (д, J=6.2 Гц, 1H), 8.41 (дд, J=4.2 и 1.4 Гц, 1H), 7.75-7.71 (м, 2H), 7,56-7,48 (м, 1H), 7.39 (д, J=6.3 Гц, 1H), 2.43 (с, 3H). (ESI) 342 (M+Na).

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.91 (дд, J=7.4 и 1.4 Гц, 1H), 8.58 (д, J=6.2 Гц, 1H), 8.52 (дд, J=4.2 и 1.4 Гц, 1H), 8.19 (д, J=6.4 Гц, 1H), 8.03 (шир.с, 1H), 7.85 (д, J=6.5 Гц, 1H), 7.61 (дд, J=8.3 и 4.9 Гц, 1H), 7.39 (д, J=6.1 Гц, 1H), 2.65 (с, 3H), 2.43 (с, 3H). (ESI) 384 (M+Na).

Пример 16. Соединение 12

2-Хлор-4-метоксипиридин (11) (справочный пример 3) (0,633 г, 4,41 ммоль) растворяют в только что перегнанном ТГФ (18 мл) и реакционную смесь охлаждают до температуры ниже -90°С. н-BuLi в гексанах (1,6 М раствор, 2,9 мл, 4,5 ммоль) добавляют к перемешиваемому раствору в течение 17 минут, поддерживая температуру ниже -97°С. Оранжевый раствор перемешивают при -78°С в течение 1 часа, в результате чего он приобретает темно-красную окраску. Реакционную смесь вновь охлаждают до температуры ниже -90°С и в течение 11 минут добавляют раствор кетона (9) (1,14 г, 4,09 ммоль) в ТГФ (10 мл), поддерживая температуру ниже -90°С. Темную смесь перемешивают при -78°С в течение 3,5 часов, гасят метанолом и оставляют нагреваться до комнатной температуры. Затем реакционную смесь встряхивают с водным раствором NH₄Cl, экстрагируют этилацетатом (3 раза) и подвергают стандартной обработке. Сырую смесь очищают флэш-хроматографией на силикагеле, производя градиентное элюирование (70-75% EtOAc/гексаны), и получают триариловый спирт 12 в виде кремового твердого вещества (1,32 г, 76%).

¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl ₃): 2.49 (с, 6Н), 3.43 (с, 3Н), 6.55 (с, 1H), 6.76 (д, J=5.4 Гц, 1H), 7.39 (д, J=5.4 Гц, 2H), 8.25 (д, J=5.4 Гц, 1H), 8.46 (д, J=5.4 Гц, 2H); ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl ₃): 14.1, 55.8, 78.0, 107.1, 113,7, 124.8, 149.8, 152.3, 157.2, 165.9, 171.0, 171.1; IR (раствор CDCl₃): 3344 см^-1; HRMS: вычислено для C ₁₇H₁₆ ³⁵ClN ₅O₂ ³²S ₂ (M⁺) 421.0434, найдено 421.0448.

Пример 17. Соединение 18

BuLi (6,9 мл, 2,5 М раствор в гексане) добавляют по каплям к раствору иодпиримидина 8 (справочный пример 1) (4,3 г, 17 ммоль) в ТГФ (50 мл) при -100°С. Черный раствор перемешивают в течение 30 минут при той же температуре. При помощи канюли добавляют раствор 2-хлорникотиноилхлорида 17 (1 г, 5,7 ммоль) в ТГФ (7 мл), предварительно охлажденный при -78°С. Интенсивно окрашенную красную смесь перемешивают в течение 3 часов при -95°С и добавляют насыщенный раствор NH₄Cl (50 мл). Слои разделяют и водный слой экстрагируют диэтиловым эфиром (3×100 мл). Объединенные органические слои сушат, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Красный остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента этилацетат:гексан (1:3,5) - этилацетат:гексан (1:1,5), и получают спирт 18 (1,3 г, 58%) в виде бледно-оранжевого твердого вещества.

¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 8.56 (д, J=5.1 Гц, 2H), 8.37 (дд, J=4.7 и 1.5 Гц, 1H), 7.39 (д, J=5.1 Гц, 2H), 7.22 (дд, J=7.8 и 1.9 Гц, 1H), 7.17 (дд, J=7.8 и 4.4 Гц, 1H), 2.48 (с, 6H).

Пример способа получения 1. Соединение 1 (вариолин)

(данное соединение не входит в объем настоящего изобретения)

Спирт 16 (полученный в приведенном выше примере 3) (33 мг, 0,062 ммоль) растворяют в чистой трифторметансульфоновой кислоте (0,4 мл) в атмосферных условиях. Колбу герметично закрывают и темно-красный раствор оставляют выстаиваться при комнатной температуре в течение 5 часов. Затем колбу охлаждают на льду и по каплям добавляют МеОН (2 мл). В результате добавления концентрированного водного раствора аммиака (2 мл) образуется ярко-желтый осадок. Суспензию вводят в верхнюю часть хроматографической колонки, содержащей диоксид кремния для хроматографии с обращенной фазой, которую предварительно уравновешивают 50% МеОН/воды. Желтую суспензию вводят в колонку с 20% МеОН/воды (50 мл). Полярность системы элюирующих растворителей уменьшают до системы 80% МеОН/вода (50 мл) и затем до системы 85% МеОН/вода, содержащей 0,1% ТФУК, после чего начинается элюирование желтого продукта. Ярко-желтые фракции объединяют и концентрируют в вакууме, получая при этом вариолин В в виде его трифторацетата (соль). Добавляют МеОН (10 мл) и затем концентрированный водный раствор аммиака (1-2 мл), получая свободное основание. Растворители удаляют при пониженном давлении, продукт сушат (35°С, 0,03 мм рт.ст.) в течение ночи и получают вариолин В (1) (10 мг, 55%), который по всем характеристикам идентичен природному веществу.

Пример способа получения 2. Соединение 4 (дезоксивариолин)

(данное соединение не входит в объем настоящего изобретения)

Раствор mCPBA (Aldrich, 70%) (98 мг, 0,39 ммоль) в DCM (4 мл), предварительно высушенном над Na ₂SO₄, добавляют по каплям к охлажденному (-30°С) раствору простого дитиоэфира 19 (пример 4) (61 мг, 0,18 ммоль) в DCM (5 мл). Желтый раствор перемешивают в течение 15 минут при 0°С. Добавляют насыщенный водный раствор Na ₂S₂O₃ (5 мл) и органический слой промывают насыщенным раствором NaHCO ₃ (5 мл). Объединенные водные слои экстрагируют DCM (3×10 мл). Объединенные органические экстракты сушат, фильтруют и концентрируют. Желтый остаток выливают в герметично закрытую пробирку с диоксаном (4 мл) и добавляют 32% раствор аммиака (8 мл). Коричневую смесь перемешивают в течение 14 часов при 85°С. Полученную желтую смесь упаривают в вакууме, добавляют DCM/MeOH (10:1) (11 мл) и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Желтое твердое вещество очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (5%), и получают дезоксивариолин 4 (14 мг, 29%, 2 стадии) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО): 8.92 (дд, J=8.1 и 1.5 Гц, 1H), 8.45 (дд, J=4.6 и 1.4 Гц, 1H), 8.22 (д, J=5.5 Гц, 1H), 7.68 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.63 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.58 (дд, J=8.1 и 4.6 Гц, 1H), 7.06 (д, J=5.4 Гц, 1H). (ESI) 278 (M+1).

Пример способа получения 3. Соединение 5 (тиодезоксивариолин)

(данное соединение не входит в объем настоящего изобретения)

32% раствор аммиака (3 мл) добавляют к раствору простого дитиоэфира 19 (пример 4) (12 мг, 0,035 ммоль) в диоксане (2 мл). Коричневую смесь перемешивают в течение 14 часов при 85°С в герметично закрытой пробирке. Образовавшуюся желтую смесь упаривают в вакууме, добавляют DCM (5 мл), раствор сушат и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Желтое твердое вещество очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (3%), и получают тиодезоксивариолин 5 (8 мг, 73%) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 8.72 (дд, J=8.1 и 1.5 Гц, 1H), 8.48 (д, J=5.4 Гц, 1H), 8.39 (дд, J=4.8 и 1.6 Гц, 1H), 7.66 (д, J=6.8 Гц, 1H), 7,56 (д, J=6.7 Гц, 1H), 7.48 (дд, J=8.1 и 4.6 Гц, 1H), 7.32 (д, J=5.3 Гц, 1H), 2.67 (с, 3H). (ESI) 309 (M+1).

Пример способа получения 4. Соединение 4 (дезоксивариолин)

(данное соединение не входит в объем настоящего изобретения)

N',N-бис(п-метоксибензил)дезоксивариолин 29 (пример 5) (15 мг, 2,9×10^-5 моль) обрабатывают чистой трифторметансульфоновой кислотой (1,5 мл) и перемешивают в течение 17 часов при 24°С. Черный раствор упаривают при пониженном давлении, черную суспензию растворяют в DCM (4 мл) и промывают насыщенным раствором NaHCO ₃ (5 мл). Водный слой экстрагируют DCM (3×5 мл) и объединенные органические слои сушат, фильтруют и упаривают. Коричневый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (1%) - DCM/MeOH (5%), и получают дезоксивариолин 4 (1,5 мг, 19%) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО): 8.92 (дд, J=8.1 и 1.5 Гц, 1H), 8.45 (дд, J=4.6 и 1.4 Гц, 1H), 8.22 (д, J=5.5 Гц, 1H), 7.68 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.63 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.58 (дд, J=8.1 и 4.6 Гц, 1H), 7.06 (д, J=5.4 Гц, 1H). (ESI) 278 (M+1).

Пример способа получения 5. Соединения 6 и 22

(данные соединения не входят в объем настоящего изобретения)

Раствор mCPBA (Aldrich, 70%) (70 мг, 0,30 ммоль) в DCM (3 мл), предварительно высушенном над Na ₂SO₄, по каплям добавляют к раствору тиодезоксивариолина 5 (39 мг, 0,13 ммоль) в DCM (7 мл). Желтый раствор перемешивают в течение 2 часов при 24°С. Добавляют насыщенный водный раствор Na₂S ₂O₃ (5 мл) и органический слой промывают насыщенным раствором NaHCO₃ (5 мл). Объединенные водные слои экстрагируют DCM (3×20 мл). Объединенные органические экстракты сушат, фильтруют и концентрируют. Желтый остаток очищают флэш-хроматографией, используя в качестве элюента DCM/MeOH (2%) - DCM/MeOH (5%), и получают сульфинилдезоксивариолин 22 (15 мг, 35%) в виде желтого масла и сульфонилдезоксивариолин 6 (25 мг, 58%) в виде желтого твердого вещества.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.86 (дд, J=8.1 и 1.5 Гц, 1H), 8.74 (д, J=5.6 Гц, 1H), 8.43 (дд, J=4.6 и 1.3 Гц, 1H), 7.77 (д, J=6.8 Гц, 1H), 7.72 (д, J=6.6 Гц, 1H), 7.67 (д, J=5.8 Гц, 1H), 7,54 (дд, J=8.0 и 4.6 Гц, 1H), 3.02 (с, 3H). (ESI) 325 (M+1).

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl ₃): 8.80 (дд, J=8.1 и 1.4 Гц, 1H), 8.71 (д, J=5.6 Гц, 1H), 8.41 (дд, J=4.8 и 1.4 Гц, 1H), 7.76 (д, J=5.6 Гц, 1H), 7.74 (д, J=6.4 Гц, 1H), 7.64 (д, J=6.4 Гц, 1H), 7,52 (дд, J=8.2 и 4.8 Гц, 1H), 3.40 (с, 3H).

Справочный пример 1. Соединение 8

Иодпиримидин 8 получают экпериментальным способом, описанным в научной литературе: Majeed A.J.; Antonsen O.; Benneche T.; Undheim K. Tetrahedron 1989, 45, 993.

Справочный пример 2. Соединение 9

Предварительно охлажденный (-97°С) раствор н-BuLi в гексанах (1,55 М, 10,0 мл, 15,5 ммоль) медленно добавляют в течение 21 минуты к раствору 4-иод-2-метилтиопиримидина (8) (3,90 г, 15,5 ммоль) в только что перегнанном ТГФ (47 мл) при -97°С (баня со смесью метанола и жидкого N ₂). Внимательно следят за тем, чтобы температура не поднималась выше -97°С. Закончив добавление, черную смесь перемешивают в течение 30 минут при -97°С, после чего в течение примерно 3 минут добавляют предварительно охлажденный (-97°С) раствор диэтилкарбоната (0,94 мл, 7,8 ммоль) в ТГФ (4 мл). Смесь выдерживают в течение 15 минут при -97°С, после чего баню оставляют нагреваться до -35°С в течение 2 часов и затем до комнатной температуры. Реакционную смесь встряхивают с водным раствором NH₄Cl и экстрагируют EtOAc (3 раза). Сырое вещество подвергают обычной обработке и частично очищают вакуумной перегонкой в аппарате Кугельрора (160°С, 0,03 мм рт.ст.). Затем продукт очищают флэш-хроматографией на силикагеле, производя градиентное элюирование (25, 30 и затем 50% EtOAc/гексаны), и получают чистый кетон 9 в виде желтого твердого вещества (1,14 г, 53%).

T.пл. 106-107°С; ¹Н ЯМР (500 МГц, CDCl₃): 2.51 (с, 6H), 7.54 (д, J=4.9 Гц, 2H), 8.79 (д, J=4.9 Гц, 2H); ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl ₃): 14.2, 114.9, 158.8, 159.2, 173.2, 190.7; IR (KBr disc): 1695 см^-1; HRMS: вычислено C ₁₀H₁₁N₄О ³²S₂ (M⁺) 278.0296, найдено 278.0289.

Справочный пример 3. Соединение 11

4-Метокси-2-пиридон (10) (0,805 г, 6,43 ммоль) и только что перегнанный POCl₃ (8 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 15 часов. Избыток POCl ₃ удаляют в вакууме, образовавшееся вязкое масло охлаждают на льду и осторожно нейтрализуют насыщенным раствором NaHCO ₃. Смесь экстрагируют EtOAc (3 раза) и экстракты обрабатывают обычным образом, получая при этом коричневое масло. Полученное вещество частично очищают вакуумной перегонкой в аппарате Кугельрора (100°С, 0,07 мм рт.ст.). Дистиллят растирают с петролейным эфиром и белый осадок отфильтровывают. Фильтрат концентрируют, продукт окончательно очищают флэш-хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента 30% EtOAc/гексаны, и получают 2-хлор-4-метоксипиридин (11) в виде бесцветного масла (0,586 г, 63%).