способ снижения токсичности амфотерицина в

Формула изобретения

1. Способ снижения токсичности амфотерицина В, включающий смешивание последнего с водорастворимым полимером, отличающийся тем, что амфотерицин В смешивают с предварительно активированным путем облучения ионизирующим излучением декстраном с мол. массой 30-60 кДа и концентрацией 1,0-10,0%, в соотношении амфотерицин В: полимер, равном 1:800.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что декстран активируют путем облучения потоком ускоренных электронов или гамма-излучением в дозах 1,0-5,0 Мрад.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к фармакологии и медицине и может быть использовано для снижения токсичности амфотерицина В.

Лекарственные средства назначают с целью получения определенного фармакологического эффекта, однако наряду с желательными эффектами практически все химические вещества оказывают неблагоприятное действие, к которому относятся отрицательное побочное действие неаллергической природы, аллергические реакции, токсические и другие эффекты (Харкевич Д.А. Фармакология, М.: Медицина, 1993, с. 543).

В основе базисной терапии микозов в основном используют амфотерицин В, который относится к группе полиеновых антибиотиков, продуцируемых Streptomyces nodosus. Существенным недостатком амфотерицина В является его высокая токсичность. В частности, амфотерицин В обладает высокой нефро- и гепатотоксичностью. Другим недостатком амфотерицина В является то, что он недостаточно эффективно преодолевает тканевые барьеры, что отражается на его лечебной эффективности. В связи с этим терапия микозов амфотерицином В является весьма продолжительной, до 4-8 недель, что также способствует проявлению его побочного токсического действия.

Известен способ снижения токсичности амфотерицина В путем получения на его основе N-метилглюкаминовой соли, которая используется в виде фармакопейного препарата амфоглюкамин. Однако при таком подходе токсичность исходного амфотерицина В снижается недостаточно, а лечебная эффективность амфоглюкамина сопоставима с амфотерицином В (М.Д.Машковский Лекарственные средства. Пособие по фармакотерапии для врачей. Издание 10-е, стереотипное. М.: Медицина, 1987, Т.2, с.271-272). Аналогичным недостатком обладают и липосомальные формы амфотерицина В (Robinson R.F., Nahata M.C. A comparative review of conventional and lipid formulations of amphotericin В J. Clin. Pharm. Ther, 1999, V.24, N.4, Р.249-257).

Наиболее ближайшим к заявляемому способу - прототипом - является способ снижения токсичности синтетических антибактериальных и стероидных средств путем растворения последних в полиглюкине с мол. массой 10-60 кДа в соотношении лекарственное средство : полимер, равном 1:(1-2) (Патент РФ №2185193, кл. А 61 К 47/30, оп.20.07.2002)

Недостатками известного способа являются его недостаточная эффективность, так как токсичность используемых низкомолекулярных лекарственных средств снижается в основном за счет уменьшения курсовой лечебной нагрузки, необходимость приготовления используемой смеси непосредственно перед введением больному, а также ограниченные функциональные возможности способа, разработанного только для офтальмологии.

Технической задачей изобретения является повышение эффективности способа за счет более существенного снижения токсичности и повышения терапевтической эффективности амфотерицина В.

Поставленная техническая задача достигается предлагаемым способом, заключающимся в следующем.

Амфотерицин В в стандартных терапевтических дозах суспендируют в водном растворе декстрана с мол. массой 30-60 кДа и концентрацией 1-10% в соотношении лекарственное средство : полимер, равном 1:800. Предварительно раствор декстрана облучают ионизирующим излучением (потоком ускоренных электронов или гамма-излучением) в дозах 1-5 Мрад. В результате получают смесь, которая содержит активный компонент и активированный облучением декстран, при этом за счет иммобилизации на облученном полимере активного компонента последний в сравнении с его неиммобилизованной формой в эквивалентных дозах обладает более высокой терапевтической активностью и более низкой токсичностью.

Определяющим отличием предлагаемого способа от прототипа является то, что в качестве полимера используют предварительно активированный ионизирующим излучением декстран с мол. массой 30-60 кДа и концентрацией 1-10%, который смешивают с амфотерицином В в соотношении 800:1, что позволяет повысить коэффициент снижения токсичности амфотерицина В при одновременном увеличении его терапевтической активности.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения:

Пример 1

10% водный раствор декстрана с молекулярной массой 30 кДа облучают потоком ускоренных электронов в дозе 5,0 Мрад. В облученный раствор вносят амфотерицин В до конечной концентрации 125 мкг в 1 мл (соотношение декстран : амфотерицин В равно 800:1). Смесь суспендируют 10 минут и получают готовую фармацевтическую композицию с выходом 99%, которая представляет собой вязкую опалесцирующую жидкость характерного оранжевого цвета.

Пример 2

1,0% водный раствор декстрана с молекулярной массой 60 кДа облучают тормозным гамма-излучением в дозе 1,0 Мрад. В облученный раствор вносят амфотерицин В до конечной концентрации 125 мкг в 1 мл (соотношение декстран : амфотерицин В равно 800:1). Смесь суспендируют 10 минут и получают готовую фармацевтическую композицию с выходом 99%, которая представляет собой вязкую опалесцентную жидкость характерного оранжевого цвета.

Снижение токсичности амфотерицина В путем его комбинации с облученными декстраном было изучено на модели экспериментального кандидоза у мышей (таблицы 1, 2).

В таблице 1 представлены данные по количеству гранулем в подпеченочных лимфатических узлах и площадь некрозов в гранулемах при экспериментальном кандидозе у мышей при лечении амфотерицином В и амфотерицином В, иммобилизованном на радиационно-активированном декстране. Из таблицы 1 видно, что при лечении экспериментального кандидоза у мышей иммобилизованной формой амфотерицина В количество гранулем, диаметр гранулем и диаметр некрозов в гранулемах существенно ниже (более чем в два раза) в сравнении с аналогичными показателями при лечении свободным амфотерицином В. Полученные данные свидетельствуют о том, что иммобилизованный на декстране амфотерицин В обладает более высокой лечебной эффективностью, чем свободная форма амфотерицина В.

В таблице 2 представлены результаты морфометрического исследования объемной плотности зон дистрофически измененных нефроцитов и некрозов в почках мышей при экспериментальном кандидозе и его лечении амфотерицином В и амфотерицином В, иммобилизованном на радиационно-активированном декстране. Из таблицы 2 видно, что объемные плотности зон дистрофии и некрозов в нефроцитах при лечении кандидоза иммобилизованным на декстране амфотерицином В существенно ниже (в 1,5-2 раза и более в зависимости от длительности лечения), чем аналогичные показатели при лечении свободным амфотерицином В. Полученные данные свидетельствуют о том, что иммобилизованный на декстране амфотерицин В обладает более низкой токсичностью, чем свободная форма амфотерицина В.

Таким образом, использование заявляемого способа позволит существенно снизить токсичность амфотерицина В.

Таблица 1 Результаты исследования лечебного эффекта амфотерицина В, иммобилизованного на декстране, в сравнении со свободным амфотерицином В на модели экспериментального кандидоза у мышей
Параметры	Период наблюдения после начала лечения (дни)
	10
	Контроль (нелеченые животные)
Кол-во гранулем	1,16±0,10
Диаметр гранулем (мкм)	40,25±0,60
Диаметр некрозов в гранулемах (мкм)	0,25±0,007
	Амфотерицин В
Кол-во гранулем	0,86±0,08
Диаметр гранулем (мкм)	35,30±0,55
Диаметр некрозов в гранулемах (мкм)	0,13±0,01
	Амфотерицин В, иммобилизованный на декстране
Кол-во гранулем	0,35±0,06
Диаметр гранулем (мкм)	17,65±0,30
Диаметр некрозов в гранулемах (мкм)	0,03±0,05

Таблица 2 Результаты исследования токсического действия амфотерицина В, иммобилизованного на декстране, в сравнении со свободным амфотерицином В при лечении экспериментального кандидоза у мышей
Параметры	10 день лечения кандидоза			28 день лечения кандидоза			56 день лечения кандидоза
	Контроль	Амфотерицин В	Амфотерицин В, иммобилизованный на декстране	Контроль	Амфотерицин В	Амфотерицин В, иммобилизованный на декстране	Контроль	Амфотерицин В	Амфотерицин В, иммобилизованный на декстране
Дистрофия %	47,18±2,05	40,76±1,38	23,8±1,33	39,69±1,23	34,08±1,02	16,93±0,73	34,48±0,97	32,82±0,85	20,74±0,88
Некроз %	13,7±1,41	13,92±1,21	5,86±0,73	18,78±0,85	14,08±0,77	8,17±0,62	15,49±0,73	10,44±0,53	10,0±0,63