способ получения препарата из медицинской пиявки

Формула изобретения

1. Способ получения препарата из медицинских пиявок, заключающийся в том, что пиявок промывают, лиофильно высушивают, измельчают в порошок, из которого изготавливают лекарственные формы, отличающийся тем, что предварительно пиявок выдерживают в режиме активного голодания не менее 4 месяцев до полного освобождения кишечного канала от крови, а измельчение в порошок проводят в две стадии - грубое измельчение и измельчение до ультратонкого порошка с размерами частиц порядка 10^-9 м, лиофильное высушивание осуществляют после грубого измельчения до ультратонкого порошка и после процесс получения препарата ведут при температуре не выше 4°С, обеспечивающей сохранение биоактивных веществ препарата.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что дополнительное лиофильное высушивание осуществляют одновременно с измельчением или после него.

Описание изобретения к патенту

Область техники.

Изобретение относится к фармацевтике, а именно к способам получения биологически активных препаратов, действие которых направлено на блокирование тромбообразования, растворение старых тромбов, снижение кровяного давления, модулирование иммунной системы, на предупреждение и регресс атеросклероза. Способ может быть использован в медицинской промышленности при получении лекарственных препаратов, при изготовлении различных готовых форм, обладающих антитромботическим, тромболитическим, антиатеросклеротическим, гипотензивным и иммуномодулирующим действием.

Предшествующий уровень техники.

Известен способ получения лечебного препарата из медицинской пиявки (Hirudo medicinalis), при котором получается препарат, обладающий только тромболитическим действием, но не обладающий противотромболитическим, антиатеросклеротическим и гипотензивным действием (см., например, РСТ WO 091/08233, 1990).

Наиболее близким техническим решением к изобретению является способ получения препарата из медицинской пиявки, заключающийся в том, что пиявок промывают, лиофильно высушивают, измельчают в порошок, из которого изготавливают готовые лекарственные формы (см., например, патент РФ №2033173, М.Кл. А 61 К 35/62, 31.01.92). Препарат по этому способу получения обладает антитромболитическим, тромболитическим, антиатеросклеротическим и гипотензивным действием. Однако препарат содержит примеси крови кишечного канала пиявки. Кроме того, он получается в виде крупнодисперсного порошка с высоким содержанием влаги, что не позволяет полностью высвободить содержащиеся в нем биологически активные соединения.

С целью устранения этих недостатков и получения препарата с более высокой биологической активностью, в способе получения препарата из медицинской пиявки, заключающемся в том, что пиявок промывают, лиофильно высушивают, измельчают в порошок, из которого изготавливают готовые лекарственные формы, по изобретению предварительно пиявок выдерживают в режиме активного голодания до полного освобождения кишечного канала от крови, а измельчение в порошок проводят в две стадии - грубое измельчение и измельчение до ультратонкого порошка, лиофильное высушивание проводят между стадиями измельчения.

Повышение биологической активности обеспечивается за счет снижения количества балластного белка в виде непереваренной крови в кишечном канале пиявок, вследствие чего возможно провести без увеличения активной поверхности балластного белка измельчение препарата в две стадии до ультратонкого состояния порошка (размеры частиц порядка 10^-9 м). Режим активного голодания в отличие от освобождения животных от насосанной ими крови путем выдавливания ее через ротовое отверстие пиявки состоит в том, что пиявок содержат в обычных, привычных для них физиологических условиях до полного переваривания крови кишечного канала. Для надежного снижения количества балластного белка в виде непереваренной крови в кишечном канале пиявок необходимо выдержать в режиме активного голодания не менее 4 месяцев. Об отсутствии примесей крови в препарате можно судить по цвету конечного продукта без коричневого оттенка, который придает препарату присутствие в нем крови кишечного канала. Об отсутствии крови в кишечном канале можно убедиться также путем вскрытия нескольких пиявок из массы животных, предназначенных для получения препарата.

С целью сохранения активности компонентов, входящих в состав препарата, которые определяют его лечебные свойства, процесс получения препарата ведут ниже температуры разложения биоактивных веществ препарата. Оптимальной является температура не выше +4°С. При этой температуре не происходит денатурация белков и разложение органических соединений, обладающих биологической активностью.

Для повышения качества получаемого препарата и его биоактивности удаляют излишнюю влагу, для чего ультратонкий порошок дополнительно лиофильно высушивают. Это высушивание можно проводить и одновременно с измельчением препарата до ультратонкого порошка.

Для облегчения дальнейшей работы с препаратом, например, при его капсулировании полученный ультратонкий порошок подвергают антистатической обработке, снимающей электрические заряды.

Измельчение до ультратонкого состояния (размеры частиц порядка 10^-9 м) лиофильно высушенного препарата ведут либо при очень низких температурах (криогенное измельчение), либо при ультразвуковом воздействии, либо при их одновременном действии. Это позволяет получать ультратонкий порошок, в котором наиболее полно сохранены органические соединения и микроэлементы.

Лучший вариант осуществления изобретения.

Выполнение способа хорошо поясняется на конкретном примере. Берут 20 штук медицинских пиявок, голодавших 5 месяцев, промывают водой, охлаждают до -10°С и измельчают с помощью шаровой мельницы. Понижают температуру полученного материала до -20°С и высушивают в вакууме. Полученный порошок измельчают при температуре -70°С с помощью криовибромельницы и дополнительно лиофильно высушивают. Средняя масса полученного препарата в расчете на одну пиявку составляет 0,30 г.

Активности экстракта препарата, полученного по предлагаемому способу, аттестуемые в соответствии с ФСП (Фармакопейная статья предприятия), следующие:

Таблица
Показатели	Допустимые по ФСП	По изобретению
Антитриптическая активность	250 АТЕ/г	330 АТЕ/г
Антихимотриптическая активность	500 АТЕ/г	800 АТЕ/г
Антикоагулянтная активность	3500 АТЕ/г	5200 АТЕ/г
Общий азот	11-15%	18%
Потеря массы при высушивании	12%	1,0%

Из представленных в таблице данных видно, что биологические активности экстракта препарата на 50-60 процентов превышают цифры, обозначенные в ФСП как допустимые. Повышение активностей удалось добиться за счет высокой степени измельчения конечного продукта и соблюдения низкотемпературного режима при обработке пиявок на различных стадиях получения препарата. Дополнительным фактором высокого качества препарата является пониженная по отношению к заданной норме влажность субстанции препарата, что было достигнуто дополнительной лиофилизацией полученного продукта.

Промышленная применимость.

Разработанная на основе настоящего изобретения технология получения различных лекарственных форм препарата из медицинской пиявки опробована в производственных условиях и показала хорошие результаты.