способ коррекции эндотелиальной дисфункции
Классы МПК: | A61K31/198 альфа-аминокислоты, например аланин, этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТК) A61K31/401 пролин; его производные, например каптоприл A61P9/08 вазодилататоры для широких показаний G09B23/28 в медицине |
Автор(ы): | Покровский Михаил Владимирович (RU), Покровская Татьяна Григорьевна (RU), Кочкаров Владимир Исхакович (RU), Артюшкова Елена Борисовна (RU), Даниленко Людмила Михайловна (RU), Гладченко Михаил Петрович (RU), Залозных Яна Игоревна (RU), Лазаренко Галина Степановна (RU), Приходько Валерия Васильевна (RU), Пашин Евгений Николаевич (RU), Железнова Зинаида Тихоновна (RU), Прусаченко Владимир Константинович (RU), Новиков Олег Олегович (RU), Новикова Марина Юрьевна (RU) |
Патентообладатель(и): | Покровский Михаил Владимирович (RU), Покровская Татьяна Григорьевна (RU), Кочкаров Владимир Исхакович (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2005-05-04 публикация патента:
10.03.2006 |
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии. Способ характеризуется тем, что в эксперименте лабораторному животному с эндотелиальной дисфункцией, на фоне ее моделирования, вводят внутрижелудочно ингибитор АПФ эналаприл в дозе 0,5 мг/кг и внутрибрюшинно L-аргинин в дозе 200 мг/кг однократно в сутки. Это позволяет активизировать коррекцию дисфункции эндотелия за счет усиления ферментативного образования NO, донатором которого является L-аргинин. 2 табл.
Формула изобретения
Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, включающий использование эналаприла, относящегося к ингибиторам АПФ, отличающийся тем, что в эксперименте лабораторному животному с эндотелиальной дисфункцией, на фоне ее моделирования, вводят внутрижелудочно эналаприл в дозе 0,5 мг/кг и внутрибрюшинно L-аргинин в дозе 200 мг/кг однократно в сутки.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.
Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции с помощью эналаприла, относящегося к ингибиторам АПФ, описанный Агеевым Ф.Т., Овчинниковым А.Г. Ингибиторы ангиотензин-превращающего фермента в лечении сердечно-сосудистых заболеваний. (Квинаприл и эндотелиальная дисфункция), Глава II. Дисфункция эндотелия, Часть V. ИАПФ при эндотелиальной дисфункции: экспериментальные данные. Москва, 2001 г. Изд-во компании "Пфайзер", http://www.viagra.nnov.ru/info/10911-ingibitors4.html|, который заключается в пероральном приеме этих препаратов у больных для коррекции эндотелиальной дисфункции.
Основным недостатком способа является узкая патогенетическая направленность и опосредованность действия эналаприла при эндотелиальной дисфункции, связанная с его низкой афинностью (сродством) к тканевой (эндотелиальной) ренинангиотензинальдостероновой системе (РААС), в то время как основная причина развития данного патофизиологического состояния - снижение активности клеток сосудистого эндотелия в образовании оксида азота (NO) - остается некомпенсированной. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при недостаточности NO-синтаз с помощью эналаприла неудовлетворительны.
Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции, включающий использование эналаприла, относящегося к ингибиторам АПФ, и донатора NO - L-аргинина.
Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным введением лабораторному животному в течение 7 суток блокатора синтеза NO L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг проводится ее коррекция внутрижелудочным введением эналаприла в дозе 0,5 мг/кг однократно в сутки и внутрибрюшинным введением донатора NO L-аргинина в дозе 200 мг/кг также однократно в сутки, которая приводит к активизации коррекции эндотелиальной дисфункции, так как L-аргинин является основным субстратом для синтеза NO и одновременно активатором его ферментативного пути образования в сосудистом эндотелии.
СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ
Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. На 7 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАЛ) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы "Bioshell". Функциональные пробы: эндотелий зависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.
При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при р<0,05.
ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ.
Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 сек приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных для систолического давления (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) - 38,7±2,8 и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9±2,7 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 сек развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 сек после нормализации сердечного ритма. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 сек. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7-суток внутрибрюшинного введения L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9, СрАД - 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения AX (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.
Одновременное введение L-NAME и эналаприла (0,5 мг/кг внутрижелудочно) не приводило к оптимальному снижению показателей исходных значений АД (САД - 183,9±11,4, ДАД - 138,9±7,0 мм рт.ст.), а в экспериментах, где еще дополнительно вводился L-аргинин (200 мг/кг внутрибрюшинно), отмечалось потенциирование гипотензивного действия, так как исходные цифры АД были существенно ниже: САД - 142,7±14,6, ДАД - 116,0±12,2 мм рт.ст. (таблица 1).
Таблица 1 | ||||
Динамика показателей АД и ЧСС при моделировании дефицита оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции эналаприлом с использованием L-аргинина | ||||
Группы животных | Функциональные пробы | САД, мм рт.ст. | ДАД, мм рт.ст. | ЧСС, уд. в мин. |
Интактные | Исходные | 137,7±3,7 | 101,9±4,3 | 420,0±9,0 |
ЭЗВ с АХ | 84,3±4,5 | 38,7±2,8 | 416,0±14,0 | |
ЭНЗВ с НП | 83,0±3,7 | 42,1±4,4 | 415,0±10,0 | |
Получавшие L-NAME | Исходные | 190,3±6,7* | 145,0±3,9* | 428,0±11 |
(25 мг/кг) | ЭЗВ с АХ | 110,6±5,2* | 82,8±6,6* | 426,0±14,0 |
ЭНЗВ с НП | 88,7±4,7 | 50,8±4,2 | 426,0±13,0 | |
L-NAME(25 | Исходные | 183,9±11,4* | 138,9±7,0* | 377,0±9,0 |
мг/кг)+Эналаприл | ЭЗВ с АХ | 98,0±3,3* | 61,6±4,7* | 381,0±11,0 |
(0,5 мг/кг) | ЭНЗВ с НП | 88,7±4,0 | 42,7±3,3 | 381,0±11,0 |
L-NAME+Эналаприл | Исходные | 142,7±14,6** | 116,0±12,2** | 372,0±17,0 |
(0,5 мг/кг) +L- | ЭЗВ с АХ | 85,0±7,5** | 53,0±5,7** | 357,0±16,0 |
аргинин (200 мг/кг) | ЭНЗВ с НП | 84,8±7,8 | 46,7±3,0 | 376,0±14,0 |
* - р<0,05 в сравнении с группой интактных | ||||
** - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME+эналаприл |
Также отмечалось потенциирование снижения показателей артериального давления в ответ на введение АХ. Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных с введением ингибитора NO-синтазы L-NAME закономерно привело нас к необходимости выведения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.
Мы рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME.
Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ нами использовано это отношение как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, где на фоне введения ингибитора NO-синтазы L-NAME вводился только эналаприл, это отношение соответствовало значению 3,2±0,1, а в группе с дополнительным введением к эналаприлу донатора NO L-аргинина - 2,5±0,1 (таблица 2).
Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать активизацию коррекции эндотелиальной дисфункции эналаприла при сочетанном его применении с L-аргинином.
Класс A61K31/198 альфа-аминокислоты, например аланин, этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТК)
Класс A61K31/401 пролин; его производные, например каптоприл
Класс A61P9/08 вазодилататоры для широких показаний