соль малеиновой кислоты (2s)-n-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2r)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида и способ ее получения

Формула изобретения

1. Соль малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида, представленная формулой 1

2. Способ получения соединения формулы 1 по п.1, отличающийся тем, что свободное соединение формулы 1 по п.1 подвергают взаимодействию с малеиновой кислотой в присутствии спиртового(ых) растворителя(ей).

3. Способ получения кристаллической формы соединения формулы 1 по п.1, отличающийся тем, что свободное соединение формулы 1 по п.1 подвергают взаимодействию с малеиновой кислотой в присутствии спиртового(ых) растворителя(ей) для получения аморфной формы соли малеиновой кислоты формулы 1 с последующей ее перекристаллизацией.

4. Способ по п.2 или 3, в котором спиртовой(ые) растворитель(и) представляет(ют) собой один или несколько растворителей, выбранных из группы, включающей метанол, этанол, пропанол, бутанол, изопропанол и октанол.

Описание изобретения к патенту

Техническая область изобретения

Данное изобретение относится к соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида нижеследующей формулы (1) и способу ее получения

Предпосылки изобретения

Свободное соединение формулы (1), т.е. соединение без добавки кислот, и его фармацевтически приемлемые соли, гидраты, сольваты и изомеры являются предметами выложенной публикации патента Кореи № 2000-047461 и WO 0039124 и могут быть эффективно использованы как новые ингибиторы тромбина.

Если лекарственное средство не обладает физическими свойствами, необходимыми для его разработки, то может быть использовано несколько способов для их усовершенствования. В частности, в случае низкой растворимости лекарственного средства получают соли лекарственного средства, что является общим способом повышения растворимости. Методы получения солей лекарственных средств обычно хорошо известны (например, Pharmaceutical Salts, Journal of Pharmaceutical Sciences, Donald C. Monkhouse et al, 1, 66(1), 1977; and Salt selection for basic drugs, International Journal of Pharmaceutics, Philip L. Gould, 201, 33, 1986).

Физическое свойство лекарственного средства имеет огромное значение для способа получения и разработки исходного лекарственного средства и конечного препарата. Лекарственное средство в твердом виде может иметь некоторые преимущества, такие как легкость при обращении и хранении, при контроле его качества. Кроме того, в процессе разработки конечного продукта лекарственного средства может упрощаться создание дозированных лекарственных форм и их введение. Лекарственное средство в твердом виде можно грубо разделить на кристаллическую и аморфную формы в соответствии с его кристалличностью. Некоторые лекарственные средства могут быть получены как в кристаллической, так и аморфной форме, в то время как другие лекарственные средства могут быть получены только или в кристаллической, или в аморфной форме. Кристаллическая и аморфная формы могут сильно отличаться по физико-химическим свойствам. Например, уже сообщалось, что некоторые лекарственные средства обладают различной растворимостью и биологической доступностью в зависимости от кристаллической или аморфной формы (например, Pharmaceutical Solids: A Strategic Approach to Regulatory Considerations, Stephen Byrn et al., Pharmaceutical Research, 945, 12(7), 1995). Поэтому по причинам, изложенным выше, кристалличность лекарственного средства очень важна для его получения и введения.

За исключением отдельных случаев, нетрудно получить лекарственное средство, обладающее определенной кристалличностью, в процессе исследования и разработки. В литературе уже сообщалось, что кристалличность лекарственного средства может быть важным преимуществом, заключающимся в том, что на конечной стадии получения лекарственного средства оно может быть очищено перекристаллизацией, представляющей собой относительно легкий способ очистки, и кристаллическое лекарственное средство, физико-химические свойства которого могут быть легко идентифицированы, дает преимущество даже в контроле качества при производстве препарата (см. An integrated approach to the selection of optimal salt form for a new drug candidate, Abu T. M. Serajuddin et al, International Journal of Pharmaceutics, 209, 105, 1994). Таким образом, в случае, когда лекарственное средство получают в аморфной форме, его кристаллизация очень важна для его разработки и получения. Кроме того, так как расплывание лекарственного средства затрудняет его получение и контроль качества, то предпочтительно, чтобы лекарственное средство не расплывалось. То же самое применимо и для солей лекарственного средства, и поэтому предпочтительными свойствами для различных синтезированных солей являются хорошая растворимость, кристалличность и отсутствие расплывания.

Некоторые соединения могут трудно абсорбироваться из-за низкой скорости растворения. Для подтверждения этого предварительно готовят диск площадью 0,5 см² и затем измеряют скорость его растворения в различной среде. Измеряют растворенное количество во времени и это значение делят на площадь диска. Полученная величина представляет собой скорость растворения на единицу площади. Обычно, если данная величина равна 1 мг/мин/pH² или больше, то можно говорить, что для лекарственного средства проблемы отсутствия абсорбции вследствие низкой скорости растворения не существует. Если данная величина равна 0,1 мг/мин/pH² или меньше, то можно говорить, что для данного лекарственного средства имеет место проблема абсорбции из-за низкой скорости растворения (см. Howard C. Ansel, Nicholas G. Popovich amd Loyd V. Allen, 1995, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 6-th ed., Williams & Wilkins, pp. 109 and Jens T. Carstensen, 1996, Modern Pharmaceutics: Gilbert S. Banker and Christopher T. Rhodes (Ed.), Drugs and the pharmaceutical sciences, Vol. 72, 3-rd ed., Dekker, pp. 233). Таким образом, определение скорости растворения на единицу площади имеет очень важное значение для прогнозирования проблем абсорбции, которые могут возникнуть позднее при испытании лекарственного средства in vivo. Поэтому соединение, имеющее высокую скорость растворения на единицу площади, следует выбирать в качестве кандидата для разработки лекарственного средства.

Краткое описание изобретения

Заявители провели тщательное и интенсивное исследование среди солей, синтезированных до сих пор, для выявления солей лекарственного средства, обладающих кристалличностью и отличными физическими свойствами, такими как очень высокая растворимость, отсутствие расплывания, очень высокое растворение на единицу площади. В итоге было обнаружено, что соль малеиновой кислоты лекарственного средства является наиболее подходящей и обеспечивает данное изобретение.

Таким образом, данное изобретение предлагает соль малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида, представленную следующей формулой (1):

В другом аспекте данного изобретения предлагается способ получения соединения формулы 1, отличающийся тем, что свободное соединение формулы 1 подвергают взаимодействию с малеиновой кислотой в присутствии спиртового(ых) растворителя(ей).

В другом аспекте данного изобретения предлагается способ получения кристаллической формы соединения формулы 1, отличающийся тем, что свободное соединение формулы 1 подвергают взаимодействию с малеиновой кислотой в присутствии спиртового(ых) растворителя(ей) с получением аморфной формы соли малеиновой кислоты формулы 1, которую затем перекристаллизовывают.

Краткое описание чертежей

На чертеже представлена диаграмма порошковой рентгенографии кристаллической формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида.

Подробное описание изобретения

Подробное описание данного изобретения приводится ниже.

Соединение формулы 1 согласно данному изобретению может быть получено взаимодействием свободного соединения формулы 1 с малеиновой кислотой в присутствии спиртового(ых) растворителя(ей). Свободное соединение формулы 1, используемое в реакции, получают по способу, описанному в выложенной публикации патента Кореи № 2000-047461 и в WO 0039124. Обычно растворитель(и), который(е) необходимо использовать в реакции, могут быть доступными типами спиртов, которые представляют собой алкановые спирты, содержащие от 1 до 8 атомов углерода, например, но без ограничения только ими, метанол, этанол, пропанол, бутанол, изопропанол, октанол и другие, предпочтительно метанол и этанол, наиболее предпочтителен метанол.

Соль малеиновой кислоты согласно данному изобретению получают в аморфной форме в соответствии с описанной выше реакцией, но она может быть также получена в кристаллической форме путем перекристаллизации с использованием подходящего(их) растворителя(ей). Обычно растворители, которые необходимо использовать при получении аморфной формы или для перекристаллизации, могут быть доступными типами спиртов, которые представляют собой алкановые спирты, содержащие от 1 до 8 атомов углерода, например, но без ограничения только ими, метанол, этанол, пропанол, бутанол, изопропанол, октанол и т.д., предпочтительно метанол и этанол, наиболее предпочтителен метанол. Кроме того, растворителями, которые необходимо использовать для перекристаллизации, помимо указанных выше в качестве примера спиртов, могут быть вода и органические растворители, например н-гексан, этилацетат, бутилацетат, ацетонитрил, хлороформ, диэтиловый эфир, ацетон и др., и другие обычно доступные растворители. Вышеуказанное свободное соединение может раствориться или может быть растворено при нагревании с использованием одного растворителя или более в смеси указанных растворителей и может быть перекристаллизовано. Установлено, что указанная соль малеиновой кислоты не расплывается даже при любой относительной влажности, изменение массы соли относительно невелико, скорость растворения соли в значительной степени превосходит скорость растворения свободного соединения, поскольку соль малеиновой кислоты была кристаллизована. Эти данные подтверждают, что соль малеиновой кислоты превосходит свободное соединение по растворимости, растворению и абсорбции в желудочно-кишечном тракте.

Так как свободное соединение может быть эффективно использовано в качестве ингибитора тромбина, как описано в выложенной публикации патента Кореи № 2000-047461 и в WO 0039124, то соль малеиновой кислоты согласно данному изобретению также применима как ингибитор тромбина.

Ниже данное изобретение будет проиллюстрировано более детально соответствующими примерами, сравнительными примерами, примерами испытаний. Однако следует понимать, что данные примеры представлены в качестве предпочтительных конкретных воплощений настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничивающие объем данного изобретения. Другие аспекты данного изобретения будут очевидными для специалиста в данной области, к которой принадлежит настоящее изобретение.

ПРИМЕРЫ

Пример 1

Получение аморфной формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-{(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида

Свободное соединение формулы 1 (1 г) растворяли в метаноле (30 мл) и затем к раствору добавляли воду (30 мл). К содержимому добавляли по каплям эквивалент малеиновой кислоты и затем смесь перемешивали в течение одного часа. Растворитель удаляли отгонкой при пониженном давлении для получения указанной в заголовке аморфной формы соли малеиновой кислоты (1,1 г, выход 95%).

Пример 2

Получение кристаллической формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида (1)

Свободное соединение формулы 1 (3 г) диспергировали в метаноле (50 мл), к содержимому добавляли 1 М раствор малеиновой кислоты в метаноле (30 мл) и затем смесь перемешивали в течение 0,5 часа. К смеси добавляли ацетонитрил (300 мл). Смесь перемешивали в течение 1 часа и затем оставляли до образования белых кристаллов. Кристаллы отфильтровывали, промывали ацетонитрилом и затем сушили в вакууме (2,25 г, выход 61,7%).

Пример 3

Получение кристаллической формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида (2)

Свободное соединение формулы 1 (2,3 г) диспергировали в этаноле (100 мл), к содержимому добавляли 1 М раствор малеиновой кислоты в метаноле (4,3 мл) и затем смесь перемешивали в течение 0,5 часа. К смеси добавляли ацетонитрил (500 мл). Смесь перемешивали в течение 1 часа и затем оставляли до образования белых кристаллов. Кристаллы отфильтровывали, промывали ацетонитрилом и сушили в вакууме (1,04 г, выход 38,3%).

Пример 4

Получение кристаллической формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида (3)

Свободное соединение формулы 1 (3,9 г) растворяли в изопропаноле (100 мл), к раствору добавляли 1 М раствор малеиновой кислоты в метаноле (7,2 мл) и затем смесь перемешивали в течение 0,5 часа. К реакционной смеси добавляли ацетонитрил (500 мл). Смесь перемешивали в течение одного часа и оставляли до получения белых кристаллов. Кристаллы отфильтровывали, промывали ацетонитрилом и затем сушили в вакууме (3,3 г, выход 72,8%).

Пример 5

Перекристаллизация аморфной формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида

Аморфную форму соли малеиновой кислоты (1 г), полученную в примере 1, растворяли в метаноле (20 мл). Затем к содержимому добавляли ацетонитрил (80 мл) и раствор выдерживали до образования белых кристаллов. После фильтрования кристаллы промывали ацетонитрилом и сушили в вакууме (0,62 г, выход 62%).

Пример испытаний 1

Исследование кристаллической формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида порошковой рентгенографией

40 мг кристаллической формы соли малеиновой кислоты, полученной в примере 2, тонким слоем наносили на держатель образца и исследовали с помощью порошковой рентгенографии в соответствии со следующими условиями. Исследование проводили на аппарате Rigaku Geigeflex D/max-III C при 35 кВ, 20 мА. Скорость сканирования (2) составляла 5/мин, время отбора проб: 0,03 сек, режим сканирования: непрерывный, Cu-мишень (Ni фильтр).

Результат исследования порошковой рентгенографией приведен на чертеже, положения пиков, показанных на данном чертеже, перечислены в табл. 1.

Таблица 1 Пики порошковой рентгенографии для соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида
Пик
2
6,149
6,754
12,254
13,261
13,91
14,345
16,661
17,577
17,966
18,506
19,592
20,368
21,082
22,445
23,198
23,701
24,364
24,897
26,171
26,601
27,127
28,16
28,76
29,292
30,212
31,077
31,559
32
34,005

Пример испытаний 2

Исследование абсорбции влаги и обезвоживания аморфной формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида

После того как 40 мг аморфной формы соли малеиновой кислоты, полученной в примере 1, тонким слоем наносили на химический стакан, образец увлажняли за счет абсорбции путем выдерживания при каждой относительной влажности, равной 33%, 57%, 64%, 75% и 93%, в течение двух или более дней и его состояние фиксировали. Для получения значений каждой относительной влажности, указанной выше и приведенной в табл.2, готовили насыщенные водные растворы солей, помещали их в эксикатор, который закрывали.

Таблица 2
Относительная влажность 33%	MgCl 2 насыщенный водный раствор
Относительная влажность 57%
Относительная влажность 64%	NaNO2 насыщенный водный раствор
Относительная влажность 75%	NaCl насыщенный водный раствор
Относительная влажность 93%	KNO3 насыщенный водный раствор

Аморфная форма соли малеиновой кислоты свободного соединения затвердевала при относительной влажности 75% и расплывалась при относительной влажности 93%.

Пример испытаний 3

Исследование абсорбции влаги и обезвоживания кристаллической формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида

100 мг кристаллической формы соли малеиновой кислоты, полученной в примере 2, тонким слоем наносили на химический стакан и затем выдерживали при каждой относительной влажности 33%, 57%, 64%, 75% и 93% в течение двух или более дней для абсорбции влаги. Далее измеряли изменение массы образца с фиксированием его состояния. Для получения значений относительной влажности, указанной выше и приведенной в табл.2 примера испытаний 2, готовили насыщенные водные растворы солей, помещали их в эксикатор, который закрывали.

Массы, характеризующие абсорбцию влаги, увеличивались на 1,4%, 3,0%, 4,3%, 4,1% и 6,7% по отношению к начальной массе формы при относительной влажности 33%, 57%, 64%, 75% и 93% соответственно, аналогично изменялись массы, характеризующие обезвоживание по отношению к абсорбции влаги. В отличие от аморфной формы кристаллическая форма соли малеиновой кислоты не расплывалась даже при относительной влажности 93%.

Пример испытаний 4

Исследование кристаллической формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбометил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида порошковой рентгенографией в процессе абсорбции влаги и обезвоживания

40 мг соли малеиновой кислоты, полученной в примере 2, тонким слоем наносили на держатель образца. Затем сразу образец высушивали в вакууме в присутствии Р₂О₅ , затем образец выдерживали для абсорбции влаги в течение двух и более дней при относительной влажности (каждой) 33%, 53%, 64%, 75% и 93% соответственно, проводили на образце исследования порошковой рентгенографией согласно условиям, указанным в примере испытаний 1, для наблюдения изменения кристаллической формы во время абсорбции влаги. При снижении относительной влажности то же самое исследование повторяли для изучения изменения кристаллической формы во время обезвоживания. Для получения вышеуказанных значений относительной влажности, приведенных в табл.2 примера испытаний 2, готовили насыщенные водные растворы солей и помещали их в эксикатор, который закрывали. Диаграмма порошковой рентгенографии кристаллической формы соли малеиновой кислоты не показала никаких изменений в процессе абсорбции влаги и обезвоживания.

Пример испытаний 5

Исследование скорости растворения на единицу площади для кристаллической формы соли малеиновой кислоты (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида

200 мг кристаллической формы соли малеиновой кислоты, полученной в примере 2, помещали в форму. Под давлением получали диск площадью 0,5 см², данный диск добавляли к каждому из буферных растворов (600 мл) с pH 3,8 и 7,4 для проведения испытания на растворение. Периодически отбирали порцию раствора и измеряли его концентрацию для определения скорости растворения на единицу площади. Скорость растворения на единицу площади соли малеиновой кислоты составляла 11,8 мг/мин/pH² при рН 3,8 и 1,7 мг/мин/см² при рН 7,4.

Сравнительный пример 1

Получение дигидрохлоридной соли

Вышеуказанное исходное соединение (3 г) добавляли к 6 N HCl (90 мл), смесь перемешивали в течение 4 час (контролируя окончание реакции посредством ВЭЖХ). Затем раствор концентрировали при пониженном давлении, добавляли в него 2-пропанол (30 мл) и смесь перемешивали в течение 10 мин при нагревании, пока не получали чистый раствор. Раствор охлаждали до комнатной температуры, затем к нему медленно при перемешивании добавляли 30 мл гексана. Полученные белые вещества отфильтровывали, промывали гексаном и высушивали в атмосфере азота. Полученная дигидрохлоридная соль имела аморфную форму, при попытке ее перекристаллизации кристаллическая форма не была получена.

Сравнительный пример 2

Исследование скорости растворения на единицу площади свободного соединения (2S)-N-{5-[амино(имино)метил]-2-тиенил}метил-1-{(2R)-2-[(карбоксиметил)амино]-3,3-дифенилпропаноил}-2-пирролидинкарбоксамида

Опыт, аналогичный указанному в примере испытаний 5, был проведен для свободного соединения формулы 1. Скорость растворения на единицу площади указанного свободного соединения составляла 1,3 мг/мин/pH² при рН 3,8 и 0,3 мг/мин/см² при рН 7,4.

Сравнительный пример испытаний 1

Способ, описанный в примере испытаний 2, использовали для аморфного дигидрохлорида, полученного в сравнительном примере 1. На основании наблюдений изменения соли при каждом значении относительной влажности установлено, что данная соль расплывалась при относительной влажности 75%. Полученный результат контрастирует с результатом примера испытаний 3, в котором соль малеиновой кислоты согласно данному изобретению не расплывалась даже при относительной влажности 93%. Следовательно, можно заключить, что соль малеиновой кислоты является наилучшей среди солей различных кислот.

Промышленная применимость

Из сравнения величин, полученных в примере испытаний 5 и в сравнительном примере 2, следует, что соль малеиновой кислоты проявила скорость растворения на единицу площади, значительно превосходящую для свободного соединения даже при нейтральном рН и при рН 3,8. В частности, как подтверждено в примерах испытаний 2, 3 и 4, кристаллическая форма соли малеиновой кислоты по данному изобретению имеет отличные свойства, такие как незначительное изменение в процессе абсорбции влаги и обезвоживания, а также отсутствие расплывания при относительной влажности 93%. Следовательно, соль малеиновой кислоты наиболее применима в качестве ингибитора тромбина.