производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе

Классы МПК:C07D313/00 Гетероциклические соединения, содержащие кольца из более чем шести членов только с одним атомом кислорода в качестве гетероатома
C07D405/12 связанные цепью, содержащей гетероатомы
A61K31/335  только с атомами кислорода в качестве гетероатомов, например фунгихромин
A61P35/00 Противоопухолевые средства
Автор(ы):, , , ,
Патентообладатель(и):ИВАКС ДРАГ РИСЕРЧ ИНСТИТЬЮТ ЛИМИТЕД ЛАЙАБИЛИТИ КОМПАНИ (HU)
Приоритеты:
подача заявки:
2000-08-02
публикация патента:

Данное изобретение относится к новым производным боррелидина общей формулы (I), где R представляет группу общей формулы -COOR 1, -CONR2R3, -CONR4 CONR2R5 или -CH2OR6 , где R1 представляет С2-6-алкильную группу; C1-6-алкильную группу, замещенную гидроксильной группой или 5-8-членной насыщенной азотсодержащей гетероциклической группой (которая, помимо атома азота, может включать атом кислорода) или 5- или 6-членной азотсодержащей ароматической гетероциклической группой; или С3-6-циклоалкильную группу; R2 и R3 являются одинаковыми или различными и независимо представляют атом водорода или C1-6-алкильную группу, которая необязательно может быть замещенной гидроксильной, С 2-5-алкоксикарбонильной или 5-8-членной насыщенной азотсодержащей гетероциклической группой (которая, помимо атома азота, может включать атом кислорода) или 5- или 6-членной ароматической гомоциклической группой или ароматической гетероциклической группой, содержащей атом кислорода и/или азота; 5- или 6-членную циклоалкильную или гетероарильную группу; R4 и R5 являются одинаковыми или различными и независимо представляют атом водорода или С3-6-циклоалкильную группу; R6 представляет атом водорода, и таутомерам, сольватам данных соединений, их смесям и кислотно-аддитивным солям. Изобретение относится также к фармацевтическим композициям, включающим соединения общей формулы (I) в качестве активного ингредиента. Ингибиторы ангиогенеза данного изобретения ингибируют образование новых сосудов в тканях живых организмов и могут использоваться для профилактики и ингибирования ангиогенеза, возникающего при росте опухоли, и для профилактики образования метастазов опухоли. Технический результат - получение новых производных боррелидина, обладающих ценным физиологическим действием. 2 с. и 6 з.п. ф-лы.

производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723

Формула изобретения

1. Производные боррелидина общей формулы (I)

производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723

где R представляет группу общей формулы -COOR1 , -CONR2R3, -CONR4CONR4 R5 или -CH2OR6, где R 1 представляет С2-6-алкильную группу; C 1-6-алкильную группу, замещенную гидроксильной группой или 5-8-членной насыщенной азотсодержащей гетероциклической группой (которая, помимо атома азота, может включать атом кислорода) или 5- или 6-членной азотсодержащей ароматической гетероциклической группой; или С3-6-циклоалкильную группу;

R 2 и R3 являются одинаковыми или различными и независимо представляют атом водорода или C1-6-алкильную группу, которая необязательно может быть замещенной гидроксильной, С2-5-алкоксикарбонильной, или 5-8-членной насыщенной азотсодержащей гетероциклической группой (которая, помимо атома азота, может включать атом кислорода), или 5- или 6-членной ароматической гомоциклической группой, или ароматической гетероциклической группой, содержащей атом кислорода и/или азота; 5- или 6-членную циклоалкильную или гетероарильную группу;

R4 и R5 являются одинаковыми или различными и независимо представляют атом водорода или С3-6-циклоалкильную группу;

R6 представляет атом водорода,

и его таутомеры, сольваты, их смеси и кислотно-аддитивные соли всех указанных соединений.

2. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей 3-пиколиламид боррелидина и его кислотно-аддитивные соли, 2-пиколиламид боррелидина и его кислотно-аддитивные соли, амид боррелидина и N,N-дициклогексилкарбамидоамид боррелидина.

3. Соединение общей формулы (I) по п.1, которое представляет собой 3-пиколиламид боррелидина или его гидрохлоридную соль.

4. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующим действием в отношении ангиогенеза, а также антиметастатическим действием, содержащая в качестве активного ингредиента соединение общей формулы (I), где R, R1, R2, R3 , R4, R5 и R6 имеют значения, определенные в п.1, или его таутомер или терапевтически приемлемую соль вместе с фармацевтически приемлемым носителем, растворителем, разбавителем и/или наполнителем.

5. Соединение по п.1 для применения в качестве лекарственного средства, обладающего ингибирующим действием в отношении ангиогенеза, а также антиметастатическим действием.

6. Соединение по п.1, применимое для получения фармацевтической композиции для терапевтического ингибирования, контроля и/или регресса ангиогенеза (развития кровеносных сосудов).

7. Соединение по п.6, применимое для получения фармацевтической композиции для предотвращения образования метастазов опухолей.

8. Соединение по п.6, применимое для получения фармацевтической композиции для поддерживающей терапии при лечении рака.

Описание изобретения к патенту

Данное изобретение относится к новым производным боррелидина, точнее к производным боррелидина, полученным в результате превращения карбоксильной группы, находящейся на циклопентановом кольце боррелидина. Кроме того, изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к применению данных соединений для получения фармацевтических композиций.

Новые соединения согласно данному изобретению проявляют ценную биологическую активность: они обладают значительным ингибирующим действием в отношении ангиогенеза, а также антиметастатическим действием.

Известно, что ангиогенез представляет собой явление, при котором в организме образуются кровеносные сосуды и образуется новая сосудистая система. Ангиогенез имеет самые разные формы, в зависимости от роста и функции эндотелиальных клеток, но в любом случае он может рассматриваться как определенный вид последовательных реакций. Ангиогенез имеет место в нормальных физиологических условиях как, например, часть процессов развития и репродукции в зародыше, плоде, плаценте, матке и аналогичных органах. Однако, оно может являться и частью патологического процесса, который сопровождает заживление мелких ран, инфекцию, а также рост опухоли, и способствует, таким образом, образованию метастазов опухоли.

Из опубликованных в литературе результатов клинических наблюдений давно известно, что большая часть пациентов с раковыми опухолями умирает в результате развития метастазов. Эта ситуация была улучшена в последние годы за счет применения лучевой терапии и химиотерапии, но достигнутые результаты никоим образом не являются обнадеживающими.

Благодаря данным, полученным при изучении патологических признаков злокачественных заболеваний, в последние годы получило развитие новое направление разработки противоопухолевых лекарственных средств. Это новое направление состоит в том, что разработка новых активных средств теперь направлена, помимо изыскания активных средств, ингибирующих рост тканей опухолей, также и на другие патобиологические явления (иммортализация, метастазы, апоптоз, ангиогенез), ответственные за поддержание злокачественного характера опухоли. Среди указанных явлений особого внимания заслуживает реваскуляризация (образование новых кровеносных сосудов), которая гарантирует непрерывное снабжение кровью растущие опухоли, поскольку при его отсутствии клетки опухоли гибнут. Согласно заключениям, сделанным из биологических исследований опухолей, развитие злокачественных заболеваний может рассматриваться как функция ангиогенеза, и переход предракового периода в инвазивный период и дальнейшая индукция перехода популяции опухолевых клеток из состояния покоя к пролиферации могут быть тесно связаны с образованием кровеносных сосудов.

Таким образом, в настоящее время поиск новых противоопухолевых лекарственных средств направлен на теоретическую разработку и синтез молекул для новых сайтов действия, с помощью которых лечение рака может быть произведено более эффективно, чем прежде.

Среди таких новых молекул приоритет отдается группе антиангиогенных средств, которые посредством ингибирования образования новых сосудов и, следовательно, образования метастазов могут открыть новый этап в терапии опухолевых заболеваний.

Известны некоторые соединения, проявляющие ингибирующее действие в отношении ангиогенеза. Примерами таких соединений, но не ограничиваясь только ими, являются следующие: ангиостатические стероиды [Folkman, J. et al., Science 221, 719 (1993)], подобные кортизону, который ингибирует функцию эндотелиальных клеток; медроксипрогестеронацетат, который ингибирует продуцирование плазминоген-активатора эндотелиальными клетками [Nicosia, R.F. and Ottinetti A., Lab. Invest. 63, 115 (1990)]; фумагиллин, который ингибирует образование канальцев [Ingber, D. et al., Nature 348, 555 (1990)]; полисахаридсульфат (SD-4152), который ингибирует миграцию и размножение эндотелиальных клеток; и ретиноевая кислота, ответственная за дифференциацию и трансформацию эндотелиальных клеток [Tsutomu Oikawa, Kekkan to Naihi 2, 470 (1992)]. Однако в клинической практике данные вещества не проявили себя в качестве ингибиторов ангиогенеза: одни из них вследствие сильного побочного эффекта, другие вследствие недостаточного целевого эффекта.

Первым эффективным в клинических испытаниях ингибитором ангиогенеза стал производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 -интерферон [Bronty-Boye, D. and Zetter, В.Е., Science 208, 516 (1980); Sidky, Y.A. and Borden, E.C., Cancer Res., 47, 5155 (1987)]. В настоящее время проводятся клинические испытания некоторых соединений, имеющих различную химическую структуру, проявляющих ингибирующее действие в отношении ангиогенеза; такими соединениями являются, например, производные фумагиллина, например, AGM-1470 [Kusaka, M. еt al., Biophys. Res. Comm. 174, 1070 (1991)]; 3-(2,4-диметил-пиррол-5-ил)индолин-2-он (SU-5416), патент США №5792783; 5-метилизоксазол-4-карбоксил-N-[4-(трифторметил)фенил]амид (лефлуномид, SU-101), патент США №5610173; 2(R)-изобутил-3(S)-дигидрокси-N-[2,2-диметил-1(S)-(N-метилкарбамоил)пропил]сукцинамид (маримастат); 3производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 -[{3-[(4-аминобутил)амино]пропил}амино]-5производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 -холестан-7,24-диол-24-гидросульфат (скваламин), патент США №5192756; ZD4190 - ингибитор фактора эндотелиального роста сосудов и т.д.

Ранее японскими авторами было описано, что известный боррелидин [химическое название: 2'-(7-циано-8,16-дигидрокси-9,11,13,15-тетраметил-18-оксооксациклооктадека-4,6-диен-2-ил)циклопентан-1'-карбоновая кислота], который является макролидным антибиотиком, включающим 18-членное кольцо [Keller-Schierlein, W., Experientia 22, 476 (1966); Helvetica Chim. Acta 50, 731 (1967); Anderson, B.F. et al., Aust. J. Chem. 42, 717 (1989)], обладает ингибирующим действием в отношении ангиогенеза вследствие способности индуцировать апоптоз клеток, образующих капиллярные канальцы [Wakabayashi, Т. et al., J. Antibiot. 50, 671 (1997)]. Кроме того, было доказано, что он эффективен в отношении клеточных линий WiDr рака толстой кишки человека и РС-3 рака простаты человека (опубликованные Заявки на патент Японии № 8-173167 и 9-227549).

Известно также, что боррелидин проявляет антибактериальное, антивирусное, гербицидное и инсектицидное действие и имеет среднее значение LD50 (Glasby, J.S., Encyclopedia of Antibiotics, p. 145, J. Wiley (editor), 1979).

Из литературы известно и подтверждено исследованиями авторов данной заявки, что активность боррелидина направлена на два биологических явления, способствующих образованию опухоли: пролиферацию, с одной стороны, и образование капилляров эндотелиальными клетками, то есть ангиогенез, с другой стороны. Хотя имеется различие по чувствительности в отношении указанных двух клеточных функций (имеет место примерно пятикратное различие в пользу образования капилляров), такая селективность проявляется в еще меньшей степени, когда рассматривается ингибирование пролиферации клеток, направленное на другие виды клеток.

Данное изобретение относится к разделению двух видов биологического действия на клетки посредством модификации структуры боррелидина. Точнее, изобретение относится к получению новых производных боррелидина превращением карбоксильной группы, расположенной на циклопентановом кольце молекулы боррелидина, которые оказывают в значительной степени более сильное действие на образование капилляров с помощью эндотелиальных клеток, чем на клеточную пролиферацию. А именно, в соответствии с гипотезой авторов данного изобретения, в клинической практике необходимо ингибирующее ангиогенез действующее вещество, которое при этом пролиферацию клеток ингибирует только в более высоких дозах. (В данном описаниии подчеркивается, что селективность известных ингибиторов ангиогенеза преимущественно состоит в том, что они более выраженно ингибируют пролиферацию эндотелиальных клеток, чем деление других клеток организма.)

В результате проведенных исследований авторами данного изобретения неожиданно было установлено, что новые производные боррелидина общей формулы (I)

производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723

полностью удовлетворяют указанным выше требованиям.

Такое открытие является неожиданным для квалифицированного в данной области техники специалиста, поскольку в литературе описаны лишь несколько производных боррелидина, т.е. его сложный метиловый эфир и диацетат сложного метилового эфира были получены Anderson К. and Rickards R.W. [Nature 206, 269 (1965)], а также сложный бензиловый эфир и бис-О-(4-нитробензоил)производное сложного метилового эфира боррелидина были описаны Berqer J. еt аl. [Arch. Biochem. 22, 476 (1949), и при этом у указанных выше авторов нет никаких упоминаний о какой бы то ни было биологической активности данных соединений. С другой стороны, согласно литературным данным, ингибирующим действием в отношении ангиогенеза обладают только те производные боррелидина, в которых карбоксильная группа, расположенная на циклопентановом кольце, не является замещенной. Такие соединения описаны, например, в опубликованной заявке на патент Японии №09227549-А (Kokai), где приведены соединения, в которых нитрильная или карбоксильная группа в молекуле боррелидина присоединена к атому углерода в положении 7, и атом водорода или низшая алкильная группа присоединена к атому углерода в положении 9.

Исходя из изложенного выше, данное изобретение относится к соединениям общей формулы (I), где R представляет группу общей формулы -COOR1, -CONR 2R3, -CONR4CONR4R 5 или -CH2OR6, где

R 1 представляет С2-6-алкильную группу; C 1-6-алкильную группу, замещенную гидроксильной, амино-, ди(С1-4-алкил)аминогруппой или 5-8-членной насыщенной азотсодержащей гетероциклической группой (которая может включать, помимо атома азота, атом кислорода или один или два дополнительных атома азота) или 5- или 6-членной азотсодержащей ароматической гетероциклической группой (которая может содержать, помимо атома азота, атом кислорода или один или два дополнительных атома азота); или С1-6-циклоалкильную группу;

R2 и R3 являются одинаковыми или различными и независимо представляют атом водорода или С1-6-алкильную группу, которая необязательно может быть замещенной атомом галогена, гидроксильной, аминогруппой, С2-5-алкоксикарбонильной, ди(C1-4-алкил) аминогруппой или 5-8-членной насыщенной азотсодержащей гетероциклической группой (которая может включать, помимо атома азота, атом кислорода или один или два дополнительных атома азота) или 5- или 6-членной ароматической гомоциклической группой или ароматической гетероциклической группой, содержащей атом кислорода и/или азота; 5- или 6-членную циклоалкильную или гетероарильную группу;

R4 и R5 являются одинаковыми или различными и независимо представляют атом водорода, C1-6-алкильную группу, С3-6-циклоалкильнуго группу или необязательно замещенную фенильную группу;

R 6 представляет атом водорода, C1-6-алкильную, С3-6-циклоалкильную или С2-6-алифатическую ацильную группу, которая может быть необязательно замещенной атомом галогена, амино-, ди(C1-6-алкил)амино- или необязательно замещенной фенильной группой; необязательно замещенную карбамоильную группу, необязательно замещенную бензоильную группу или C1-4-алкилсульфонильную группу

и их таутомерам, сольватам, их смесям и кислотно-аддитивным солям всех указанных соединений.

Следует отметить, что на графическом изображении общей формулы (I) знаки (R) и (S) обозначают абсолютную конфигурацию соответствующих атомов углерода.

В перечисленных значениях заместителей соединений общей формулы (I) определение “алкильная группа” относится к группам как с прямой, так и с разветвленной цепью. Такими группами являются, например, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, трет-пентил, 1-этилпропил, гексил и изогексил.

Циклоалкильная группа может быть циклопропильной, циклопентильной или циклогексильной группой.

Атом галогена может быть атомом хлора или брома.

В значениях R1, R2 и R3 5-8-членная насыщенная азотсодержащая гетероциклическая группа может, например, представлять собой, но не ограничиваясь перечисленным, 1-пирролидинил, 1-пиперидинил, гексагидро-1Н-азепин-1-ил, октагидроазоцин-1-ил, пиперазинил и морфолинил.

В значениях R2 и R 3 С2-5 алкоксикарбонильная группа может, например, представлять собой (вместе с алкильной группой, при которой она является заместителем), но не ограничиваясь перечисленным, карбометоксиметил, карбо-трет-бутилоксиметил, карбометоксиэтил и карбометоксипропил.

В значениях R2 и R 3 5- или 6-членная ароматическая гомоциклическая группа может, например, представлять собой, но не ограничиваясь перечисленным, фенил или замещенный фенил.

В значениях R1, R2 и R3 определения “5- или 6-членная ароматическая гетероциклическая группа, содержащая кислород и/или азот” и “гетероарильная группа”, соответственно, относятся, например, но не ограничиваясь перечисленным, к следующим группам: фурил, пирролил, оксазолил, изоксазолил, имидазолил, пиразолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, 1,3,5-триазинил, 2-пиридил, 3-пиридил и 4-пиридил.

В значениях R6 определение “С 2-6-алифатическая ацильная группа” относится, например, к ацетильной, пропионильной, бутаноильной, изобутаноильной, втор-бутаноильной, трет-бутаноильной, н-капроильной или изокапроильной группе. Термин “C1-4-алкилсульфонильная группа” относится, например, к метансульфонильной или этансульфонильной группе. Кроме того, термин “необязательно замещенная карбамоильная группа” относится к карбамоилу, C1-6-алкилкарбамоилу, С3-6 -циклоалкилкарбамоилу или карбамоилу, замещенному C2-6 -алифатической ацильной группой, которая необязательно может быть замещена атомом галогена и может представлять собой, например, хлорацетилкарбамоил.

Термин “соли”, образованные соединениями общей формулы (I), следует относить к солям, образованным с физиологически приемлемыми неорганическими и органическими кислотами. Такими кислотами, приемлемыми для образования солей, являются, например, хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота или серная кислота. В качестве органических кислот могут использоваться, например, муравьиная кислота, уксусная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, янтарная кислота, молочная кислота, лимонная кислота или метансульфоновая кислота.

Преимущественная группа соединений общей формулы (I) в соответствии с данным изобретением включает соединения общей формулы (I), в которых R представляет группу общей формулы –CONR2 R3, где R2 и R3 представляют атом водорода или один из R2 и R3 представляет атом водорода, а другой представляет C1-6-алкил, замещенный 5- или 6-членной ароматической гетероциклической группой, содержащей атом азота.

Для получения соединений общей формулы (I) могут использоваться реакции этерификации, амидирования и восстановления, которые в основном известны из литературы, например монографии Synthetic Organic Chemistry (Wagner, R.B. and Zook, H.D., Wiley, New York, 1956).

Соединения общей формулы (I) могут быть получены при использовании указанных выше методик, например, в соответствии со следующими способами:

a) взаимодействие хлорангидрида кислоты, образованного из боррелидина с подходящим спиртом или амином,

b) прямая этерификация или амидирование боррелидина в присутствии карбодиимида и основания,

c) переэтерификация сложного эфира, образованного из боррелидина, с подходящим спиртом,

d) взаимодействие сложного метилового эфира боррелидина с подходящим амином,

e) образование активного сложного эфира из боррелидина, например, с N-гидроксибензтриазолом, последующее взаимодействие с подходящим спиртом или амином,

f) образование смешанного ангидрида из боррелидина, например, с эфиром хлормуравьиной кислоты, последующее взаимодействие с подходящим амином,

g) восстановление смешанного ангидрида, образованного из боррелидина с гидридом металла, до спирта,

h) алкилирование и ацилирование, соответственно, спирта, полученного из боррелидина.

Авторами данного изобретения установлено, что новые сложноэфирные производные боррелидина согласно данному изобретению наиболее предпочтительно могут быть получены взаимодействием активного производного, образованного из боррелидина и N-гидроксибензтриазола в присутствии карбодиимида, с подходящим спиртом.

Реакция проводится в инертных растворителях, наиболее предпочтительно в тетрагидрофуране. В данном способе дициклогексилкарбодиимид (DCC) используется в качестве карбодиимида, а диметиламинопиридин (DMAP) используется в качестве основания. Уместно использовать избыток 10 молей спиртового компонента. Реакцию осуществляют при температуре в интервале от 0° С до 50° С, предпочтительно при 20° С при перемешивании в течение 1-8 часов, предпочтительно в течение 3 часов.

Амидные производные боррелидина предпочтительно могут быть получены, например, из производных смешанных ангидриднов, образованных с эфиром хлормуравьиной кислоты. Реакцию можно проводить в инертных растворителях, не содержащих воды, таких как, например, тетрагидрофуран, дихлорметан, четыреххлористый углерод. В качестве связывающих кислоту агентов могут использоваться триэтиламин, пиридин и диметиламинопиридин. Может использоваться 1-10 молей связывающего амина. Реакцию проводят при перемешивании при температуре в интервале от -20° С до +20° С в течение 1-8 часов. В наиболее предпочтительном способе данного изобретения производное смешанного ангидрида образуется в тетрагидрофуране, не содержащем воды, при -20° С, в присутствии триэтиламина, с изобутилхлорформиатом, затем проводят реакцию с 5 молями амина в течение 3 часов.

Спиртовое производное боррелидина наиболее предпочтительно может быть получено из подходящего производного смешанного ангидридна боррелидина восстановлением, осуществляемым с водным комплексным гидридом металла, предпочтительно боргидридом натрия, в тетрагидрофуране при -20° С.

Алкилирование и ацилирование, соответственно, спиртового производного боррелидина может проводиться способом, хорошо известным как таковой в данной области техники.

Для квалифицированного в данной области техники специалиста очевидно, что если при получении соединений общей формулы (I) исходные вещества содержат некоторые заместители с реакционноспособной(ыми) группой(ами), не подлежащей(ими) превращению в данной реакции, то такая(ие) группа(ы) может быть защищена способом, известным в органической химии как таковым, и защитная(ые) группа(ы) удаляется(ются) после проведения данной реакции так, чтобы другие части молекулы не подверглись нежелательному превращению. Для защиты указанных групп могут использоваться защитные группы, обычно используемые для этой цели и хорошо известные в данной области. Такие защитные группы известны, например, из монографии Greene T.W. and Wuts P., “Protective Groups in Organic Synthesis” (John Wiley & Sons, New York, 1991).

Некоторые соединения общей формулы (I) согласно данному изобретению содержат основной атом N, который может использоваться при образовании солей. Такие основания общей формулы (I) можно подвергать превращению с получением (предпочтительно, фармацевтически приемлемых) кислотно-аддитивных солей известным путем, например растворением основания в подходящем органическом растворителе и добавлением подходящей кислоты или раствора кислоты в подходящем органическом растворителе. Полученную таким образом соль выделяют фильтрованием или выпариваем растворителя в вакууме и, если это необходимо, она может быть очищена известным способом, например, перекристаллизацией.

Как указано выше, соединения общей формулы (I) данного изобретения обладают ценной биологической активностью, а именно они проявляют значительный ингибирующий эффект в отношении ангиогенеза с преимущественным селективным действием.

Ингибирующее действие в отношении ангиогенеза соединений по настоящему изобретению определено измерением воздействия на пролиферацию и образование капилляров эндотелиальными клетками. Методы количественной оценки биологической активности описаны ниже.

Изучение влияния на клеточную пролиферацию

Эндотелиальные клетки ECV 304 (DSMZ No. АСС310) получали размножением in vitro в монослойной культуре в культуральной среде RPMI 1640 (SIGMA, США), содержащей 10% фетальную телячью сыворотку (Protein GMK, Godolio, Венгрия). Боррелидин и его новые производные общей формулы (I) данного изобретения добавляли в фазе экспоненциального роста культуры (exponential period of the culture) для получения различных конечных концентраций (0,1-100 мкг/мл). Рост культуры клеток исследовали в аппарате Fluoroscan Ascent FL на основании изменения количества ДНК, измеренного с помощью красителя Hoechst 33342.

Подобное ингибирующее действие боррелидина и соединений формулы (I) данного изобретения на пролиферацию эндотелиальных клеток можно было наблюдать и на культуре клеток, выделенной из пупочного канатика человека (HUVEC).

Изучение влияния на эндотелиальное образование капилляров

Гель базального мембранного белка, полученный из опухоли EHS мышей, который индуцирует образование капилляров, вводили в эндотелиальные клетки ECV 304. Обработку боррелидином и новыми производными боррелидина общей формулы (I) данного изобретения проводили по такой же методике, как описанная в опыте изучения клеточной пролиферации. Степень участия клеток в образовании капилляров определяли с помощью микроскопа и морфометрической программы, и полученные таким образом данные выражали в процентах относительно необработанного контроля.

Результаты

Доказано, что два описанных выше метода подходят для демонстрации того, что новые производные боррелидина согласно изобретению удовлетворяют требованиям селективного ингибирования образования капилляров. А именно, утверждается, что по сравнению с боррелидином ингибирующее действие новых производных общей формулы (I) на клеточную пролиферацию определенно снижается, в то время как ингибирующее действие на процесс формирования капилляров изменяется только в незначительно степени или не изменяется совсем. Показатель относительной селективности для каждого соединения определяли перемножением отношений концентраций действующих веществ, ингибирующих пролиферацию клеток на 50% и ингибирующих образование капилляров. (Отношения получали делением соответствующей концентрации ингибирования нового соединения данного изобретения на соответствующую концентрацию ингибирования боррелидина). Исходя из вычисленного таким образом показателя селективности, по сравнению с боррелидином соединение примера 1 ингибирует образование капилляров в 60 раз, соединение примера 3 в 37 раз, соединение примера 2 в 7,5 раз и соединение примера 4 в 6 раз лучше, чем клеточную пролиферацию.

Результаты количественного определения ингибирования образования капиллярных канальцев подтверждались методом “образования микрососудов” [Parish et al., Cancer Res. 59, 3433 (1999)]. Данный метод позволил изучить образование новых сосудов в культуре ткани, полученной из артерии плаценты человека. Было заявлено, что производные боррелидина данного изобретения значительно ингибируют размножение эндотелиальных клеток и еще лучше - образование канальцев.

На основании полученных результатов испытаний авторы данного изобретения смогли заключить, что новые производные боррелидина данного изобретения воздействуют, главным образом, на клеточный механизм, который способен прерывать образование капилляров из эндотелиальных клеток, но оказывают влияние на пролиферацию таких клеток только при более высокой концентрации. Открытие авторов изобретения, состоящее в том, что в одной и той же культуре эндотелиальных клеток новые производные боррелидина данного изобретения ингибируют образование канальцев при более низкой концентрации, чем пролиферацию, является не только новым, но и неожиданным. Следовательно, селективность проявляется не в различной чувствительности для различных клеток, а она может наблюдаться между межклеточными контактами, управляющими образованием капилляров, и клеточной пролиферацией.

Исследования противоопухолевого действия в системах моделей метастазов

1. В опыте на модели легочной аденокарциномы Льюиса [Holmgren et al., Nature Medicine 1, 149 (1995)] боррелидин в очень небольшой степени ингибирует распространение метастазных узелков после удаления первичной опухоли в легком. С другой стороны, соединение примера 15 весьма значительно ингибирует рост микрометастазов не только при интраперитонеальном, но и при пероральном введении одной пятой токсической дозы.

2. В опыте на модельной тестовой системе, содержащей линию 38 клеток толстой кишки в системе “селезенка - печень” [Dong, Z. et al., J. Natl. Cancer Inst. 86, 913 (1994); Shaheen, R.M. et al., Cancer Research 89, 5412 (1999)] способность клеток аденокарциномы толстой кишки мыши, трансплантированных в селезенку, образовывать метастазы значительно снижается после субтоксического введения соединения примера 15.

Соединения данного изобретения могут использоваться для терапевтических целей сами по себе или, предпочтительно, в форме фармацевтических композиций. Такие композиции включены в объем данного изобретения.

Данные фармацевтические композиции содержат соединения общей формулы (I) в количестве, необходимом для получения нужного эффекта, в сочетании с носителями, наполнителями, разбавителями и/или другими вспомогательными фармацевтическими материалами, известными сами по себе в данной области и обычно используемыми в фармацевтической промышленности.

Например, в качестве носителей, разбавителей и наполнителей, указанных выше, могут использоваться вода, спирты, желатин, лактоза, сахароза, крахмал, пектин, стеарат магния, стеариновая кислота, тальк, различные животные или растительные масла, а также гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль. В качестве вспомогательных фармацевтических материалов могут, например, использоваться консерванты, антиоксиданты, различные природные или синтетические эмульгаторы, диспергирующие или смачивающие агенты, красители, вкусовые добавки, буферы, дезинтеграторы и другие материалы, улучшающие биологическое применение активного ингредиента.

Фармацевтические композиции данного изобретения могут находиться в обычных формах, таких как препараты для перорального введения, которые могут быть получены с использованием перечисленных выше вспомогательных фармацевтических материалов. Такие композиции для перорального введения могут представлять собой твердые фармацевтические формы, такие как таблетки, капсулы, порошки, пилюли, драже или гранулы, или жидкие фармацевтические формы, такие как сиропы, растворы, эмульсии или суспензии. Препараты для ректального введения могут представлять собой свечи. Препараты для парентерального введения, вводимые минуя желудочно-кишечный тракт, могут представлять собой, например, растворы для инъекции или вливания. Кроме того, фармацевтические композиции данного изобретения могут представлять собой препараты для наружного применения, такие как мази, кремы, растворы для компрессов, растворы для промывки глаз, глазные капли и т.д.

Хотя доза соединений данного изобретения, необходимая для получения необходимого фармацевтического действия, зависит, помимо прочего, от индивидуального состояния и возраста пациента и, в конечном счете, определяется врачом, для профилактики и/или лечения заболеваний, в которых необходимо ингибирование связанного с данным заболеванием ангиогенеза, может использоваться доза в интервале от примерно 0,5 мг до примерно 100 мг на 1 кг массы тела. Такая доза может вводиться ежедневно несколькими порциями, принимая во внимание состояния системы поглощения.

Фармацевтические композиции, включающие соединения общей формулы (I) данного изобретения, могут использоваться в дополнение к хирургическому вмешательству и лучевой терапии в качестве вспомогательных средств, прежде всего, для лечения и профилактики роста опухолей и для ограничения образования метастазов рака. Кроме того, они могут использоваться для лечения других заболеваний и состояний, при которых ингибирование, контроль и регрессия образования новых сосудов приводит к благоприятному эффекту; примерами таких заболеваний являются артрит, различные офтальмологические случаи (например, субретинальное образование сосудов), а также псориаз.

Исходя из изложенного выше, данное изобретение предоставляет также способ лечения ангиогенных заболеваний у млекопитающих, вызванных избыточным аномальным ангиогенезом, который включает введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, эффективной дозы соединения общей формулы (I).

Далее соединения данного изобретения и способ их получения иллюстрируются приведенными ниже примерами, которые, однако, не ограничивают объем данного изобретения.

Пример 1

Сложный 2-морфолиноэтиловый эфир боррелидина [(I), R=СОО(СН 2)24Н8NО]

120 мг (0,245 ммоль) боррелидина растворяют при перемешивании при 20° С в 5 мл абсолютного тетрагидрофурана, затем к полученному раствору добавляют 38 мг (0,245 ммоль) 1-гидроксибензтриазола, 30 мг (0,245 ммоль) диметиламинопиридина и 65 мг (0,31 ммоль) дициклогексилкарбодиимида. После перемешивания в течение 30 минут добавляют 0,3 мл (0,32 г, 2,45 ммоль) 4-(2-гидроксиэтил)морфолина. После перемешивания в течение 3 часов при 20° С исходное соединение (Rf=0,43) исчезает и образуется продукт (Rf=0,51), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 50 мл хлороформа, промывают водой (2× 50 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 65:35, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом маслянистого продукта (133 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS (масс-спектрометрия с термораспылением).

(Обозначения 1", 2", 3", 5" и 6" в спектральных данных относятся к морфолиновому кольцу)

Характеристические спектральные данные

1H-ЯМР (CDCl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,93, д,т; Н-4: 6,20, ддд; Н-5: 6,36, дд; Н-6: 6,82, д; Н-8: 4,10; Н-16: 3,84, м; -O-СН 2-СН2-: 4,12, м и 4,30, м; -СН2 -СН2-1": ~2,50; Н2-2" и Н 2-6": ~2,50; H2-3" и Н2 -5": 3,68, т.

13С-ЯМР (СDСl3 ; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 (м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,4, д; С-4: 138,5, д; С-5: 126,9, д; С-6: 143,9, д; С-7: 116,0, с; 7-CN: 118,2, с; С-8: 73,1, д; С-16: 70,0, д; С-18: 172,4, с; 1'-СО-O: 176,0, с; O-CH2-CH2: 61,8, т; CH2 -CH2-1": 57,0, т; С-2",6": 53,8, т; С-3",5": 66,9, д.

TS (EI, 70 eV; m/z): 602, [M] +производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 113, [CH2=CH-морфолинил]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 100, [СН2=морфолинил]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 .

Пример 2

Сложный 2-(2-пиридил)этиловый эфир боррелидина [(I), R=COO(CH2)2-C5 H4N]

К активному сложному 1-гидроксибензтриазоловому эфиру, полученному из 150 мг (0,306 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 1, добавляют 0,35 мл (0,38 г, 3,06 ммоль) 2-(2-гидроксиэтил)пиридина. После перемешивания в течение 3 часов при 20° С исходный боррелидин (Rf=0,43) исчезает и образуется продукт (Rf=0,58), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 1:1, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (171 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

(Обозначения 2", 3", 4", 5" и 6" в спектральных данных относятся к морфолиновому кольцу)

Характеристические спектральные данные

1Н-ЯМР (СDСl3 ; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,90, д,т; Н-4: 6,15, ддд; Н-5: 6,36, дд; Н-6: 6,80, д; Н-8: 4,12; Н-16: 3,85, м; -О-СН 2-СН2-: 4,35-4,60, м; -СН2-СН 2-2": 3,10, т; Н-3": 7,17, д; Н-4": 7,62, м; Н-5": 7,15, м; Н-6": 6,52, д.

13С-ЯМР (CDCl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,2, д; С-4: 138,6, д; С-5: 126,8, д; С-6: 144,0, д; С-7: 115,9, с; 7-CN: 118,2, с; С-8: 73,1, д; С-16: 70,1, д; С-18: 172,4, с; 1'-СО-O: 176,0, с; О-СН2-СН2: 63,8, т; СН2 -СН2-2": 37,3, т; С-2": 157,9, с; С-3": 123,3, д; С-4": 136,4, д; С-5": 126,9, д; С-6": 149,4, д.

TS (EI, 70 eV; m/z): 594, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 .

Пример 3

Амид боррелидина [(I), R=CONH 2]

150 мг (0,306 ммоль) боррелидина при перемешивании растворяют в 10 мл абс. тетрагидрофурана, затем при -20° С добавляют 47 мкл (0,33 ммоль) триэтиламина и 44 мкл (0,33 ммоль) изобутилхлорформиата. После перемешивания в течение 30 минут при -20° С соль триэтиламин производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 НСl отфильтровывают и к раствору добавляют 100 мкл (1,5 ммоль) 25% водного раствора гидроксида аммония. После перемешивания реакционной смеси в течение 3 часов исходный боррелидин (R f=0,43) исчезает и образуется продукт (Rf=0,33), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). Значение рН реакционной смеси доводят до 7, добавляя 1-2 капли уксусной кислоты, затем реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (2× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и раствор упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 55:45, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом отверждающегося маслянистого продукта (109 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

1H-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,90, д,т; Н-4: 6,16, ддд; Н-5: 6,30, дд; Н-6: 6,75, д; Н-8: 4,04; 8-ОН: 2,95; Н-16: 3,75, м; MH2: 5,55-5,72.

13С-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,6, д; С-4: 138,8, д; С-5: 126,8, д; С-6: 144,0, д; С-7: 115,9, с; 7-CN: 118,3, с; С-8: 73,0, д; С-16: 69,8, д; С-18: 172,4, с; 1'-CONH 2: 178,1, с.

TS (EI, 70 eV; m/z): 488, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 470, [М-Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 452, [М-2Н2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 , 435, [М-Н2O-NН3]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 417, [М-2Н2О-NН3]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 .

TS (CI, изобутан; m/z): 489, [М+Н]+, 471, [М+Н -H2O]+.

Пример 4

2-Морфолиноэтиламид боррелидина [(I), R=CONH(CH2) 2-C4H8NO]

К раствору смешанного ангидрида, полученного в соответствии с методикой примера 3 из 150 мг (0,306 ммоль) боррелидина, добавляют 0,25 мл (1,9 ммоль, 0,25 г) 4-(2-аминоэтил)морфолина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (Rf=0,43) исчезает и появляется продукт (Rf=0,22), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 95:5, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (172 мг) подтверждают спектроскопическими данными (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

(Обозначения 2", 3", 5" и 6" в спектральных данных относятся к морфолиновому кольцу)

Характеристические спектральные данные

1H-ЯМР (CDCl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 5,00, д,т; Н-4: 6,20, ддд; Н-5: 6,35, дд; Н-6: 6,80, д; Н-8: 4,10; Н-16: 3,82, м; NH: 6,15, т; NH-CH2-CH2-N: 3,20-3,45, м; NH-CH 2-CH2-N: 2,32, м; Н-2"-6": 2,45, м; Н-3"-5": 3,70, м.

13С-ЯМР (СDСl 3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,5, д; С-4: 139,1, д; С-5: 126,5, д; С-6: 144,1, д; С-7: 115,8, с; 7-CN: 118,3, с; С-8: 73,1, д; С-16: 69,2, д; С-18: 172,2, с; 1'-CO-N: 175,5, с; NH-CH2-CH2-N: 57,1, т-36,3, т; С-2",6": 53,3, т; С-3",5": 66,8 т.

TS (EI, 70 eV; m/z): 601, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 585, [М-H2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 113,

[СН2=СН-морфолинил]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 100, [СН2=морфолинил]+.

Пример 5

Боррелидиновый спирт [(I), R1=CH2 OH]

Раствор смешанного ангидрида, полученного из 150 мг (0,306 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, по каплям добавляют к раствору 60 мг (1,5 ммоль) NaBH 4 в 2 мл воды и охлаждают до -20° С. После перемешивания в течение 5 часов исходный боррелидин (Rf=0,43) исчезает и появляется продукт (Rf=0,52), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). К реакционной смеси добавляют 1-2 капли уксусной кислоты для разложения избытка NaBH4 , затем реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (2× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток (185 мг) хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 3:1, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (117 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

1H-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,92, д,т; Н-4: 6,20, ддд; Н-5: 6,35, дд; Н-6: 6,80, д; Н-8: 4,10; Н-16: 3,87, м; 1'-СН 2-ОН: 3,45 м.

13С-ЯМР (СDСl 3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,7, д; С-4: 139,1, д; С-5: 126,7, д; С-6: 144,1, д; С-7: 115,8, с; 7-CN: 118,3, с; С-8: 73,0, д; С-16: 70,5, д; С-18: 172,3, с; 1'-СН 2-ОН: 66,4, т.

TS (EI, 70 eV; m/z): 475, [М] +производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 457, [M-H2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 439, [М-2Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723

TS (CI, изобутан; m/z): 476, [М+Н]+; 458, [М+Н-H2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 440, [М+Н-2Н2O]+.

Пример 6

N,N'-Дициклогексилкарбамидоамид боррелидина [(I), R=СОN(С6Н11)СОNНС6Н11 ] 98 мг (0,2 ммоль) боррелидина при перемешивании растворяют при 20° С в 2 мл абс. тетрагидрофурана, затем к полученному раствору добавляют 124 мг (0,6 ммоль) дициклогексилкарбодиимида. Реакционную смесь перемешивают при этой же температуре, и ход реакции контролируют с помощью тонкослойной хроматографии. На пластине с нанесенным на нее силикагелем и системой элюирования: хлороформ/метанол 95:5 исходный боррелидин (Rf=0,43) исчезает спустя 5 часов и появляется продукт (Rf=0,74). После этого реакционную смесь упаривают досуха и неочищенный продукт (240 мг) хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 8:2, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (105 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

1H-ЯМР (CDCl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,93, д,т; Н-4: 6,28, ддд; Н-5: 6,36, дд; Н-6: 6,84, д; Н-8: ~4,10; Н-16: 3,85, м; циклогексильные группы: 3,65 м, 1Н; 4,05, м, 1Н; 1,4-2,1, м, 20Н.

13С-ЯМР (CDCl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 77,0, д; С-4: 139,0, д; С-5: 126,7, д; С-6: 144,1, д; С-7: 115,7, с; 7-CN: 118,2, с; С-8: 73,1, д; С-16: 69,1, д; С-18: 172,7, с; 1'-CO-N: уширенный сигнал, не возникающий из основной (фоновой) линии; N-CO-N: 153,6, с; циклогексильные группы: 50,1, д; 40,9, д (уширенный сигнал); 32,7, т (2С); 32,6, т (2С); 24,7, т; 25,9, т (2С); 26,0, т (2С).

TS (EI, 70 eV; m/z): 695, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 570, [М-O=С=N-С6Н11]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 552, [570-Н2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 .

TS (CI, изобутан; m/z): 696, [M+H]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 571, [М+Н-O=C=N-С6Н11]+ ; 553, [571-Н2О]+; 83, [С6Н 11]+.

Пример 7

Бензиламид боррелидина [(I), R=CONHCH2-C6H5]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 200 мг (0,41 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 220 мкл (2 ммоль, 2,14 мг) бензиламина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (Rf=0,52) исчезает и появляется продукт (Rf=0,69), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 3:7). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 8:2, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (135 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

1H-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,95, д,т; Н-4: 6,24, ддд; Н-5: 6,35, дд; Н-6: 6,79, д; Н-8: 4,10, м; Н-16: 3,80, м; 1'-CONH- 5,98, т; NH-CH2-Ph: 4,26, дд, и 4,44, дд; Ph: 7,15-7,35, м, 5Н.

13С-ЯМР (СDСl 3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,7, д; С-4: 138,8, д; С-5: 126,7, д; С-6: 144,0, д; С-7: 115,8, с; 7-CN: 118,3, с; С-8: 73,0, д; С-16: 69,8, д; С-18: 172,4, с; 1'-CO-NH-: 175,4, с; NH-CH2-Ph: 43,8, т; Ph: 138,2, с; 128,7, д; 127,7, д; 127,6, д.

TS (EI, 70 eV; m/z): 578, [М] +производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 560, [M-H2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 542, [M-2H2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 435, [M-2Н2О-C6H5CH 2NH2]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 106, [C7H8N]+; 91, [С 7Н7]+.

TS (CI, изобутан; m/z): 579, [М+Н]+; 561, [М+Н-Н2O]+ ; 106, [C7H8N]+; 91, [С 7Н7]+.

Пример 8

2-Пиколиламид боррелидина [(I), R=CONHCH2-C5 H4N]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 200 мг (0,41 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 206 мкл (2 ммоль, 216 мг) 2-пиколиламина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (R f=0,52) исчезает и появляется продукт (Rf=0,29), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 3:7). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 1:1, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (188 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

1 H-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 5,00, дт; Н-4: 6,20, ддд; Н-5: 6,40, дд; Н-6: 6,80, д; Н-8: 4,15, м; Н-16: 3,82, м; 1'-CONH-: 7,14, т; NН-СН2-2-Рy: 4,55, д; Рy: 7,20-7,36, м, 2Н; 7,70, тд, 1Н и 8,50, д, 1Н.

13С-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,7, д; С-4: 139,2, д; С-5: 126,5, д; С-6: 144,2, д; С-7: 115,7, с; 7-CN: 118,2, с; С-8: 73,1, д; С-16: 69,3, д; С-18: 172,3, с; 1'-CO-NH-: 175,6, с; NH-CH2-2Py: 44,3, т; Ру: 156,3, с; 122,8, д; 137,2, д; 122,5, д; 148,8, д.

TS (EI, 70 eV; m/z): 579, [M]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 561, [М-Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 336, [C20H22N3O 2]+; 109, [С5Н4NСН 23]+; 107, [С6H 7N2]+; 92, [C6H6 N]+.

TS (CI, изобутан; m/z): 580, [М+Н] +.

Пример 9

4-Пиколиламид боррелидина [(I), R=CONHCH2-C5H4N]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 200 мг (0,41 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 206 мкл (2 ммоль, 216 мг) 4-пиколиламина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (Rf=0,43) исчезает и появляется продукт (Rf=0,24), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями дихлорметана и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 15:85, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (201 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

1H-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,98, дт; Н-4: 6,22, м; Н-5: 6,36, дд; Н-6: 6,78, д; Н-8: 4,10, м; Н-16: 3,78, м; 1'-CONH-: 6,55, т; NH-CH2-4Py: 4,18, дд и 4,62, дд; Ру: 7,15, д, 2Н и 8,48, д, 2Н.

13С-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,6, д; С-4: 138,7, д; С-5: 126,7, д; С-6: 143,9, д; С-7: 116,0, с; 7-CN: 118,4, с; С-8: 72,9, д; С-16: 69,5, д; С-18: 172,2, с; 1'-CO-NH-: 176,0, с; NH-CH2-4Py: 42,3, т; Рy: 149,7, д; 122,2, д и 147,7, с.

TS (EI, 70 eV; m/z): 579, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 561, [М-Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 336, [C20H22N3O 2]+; 107 [C6H7N2 ]+; 93, [С6H7N]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 92, [С6Н6N]+.

TS (CI, изобутан; m/z): 580, [M+H]+; 562, [М+Н-Н 2O]+.

Пример 10

2-Фурфуриламид боррелидина [(I), R=СОNНСН24Н3О]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 200 мг (0,41 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 177 мкл (2 ммоль, 194 мг) 2-фурфуриламина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (Rf=0,52) исчезает и появляется продукт (Rf=0,70), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/этилацетат 3:7). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3х30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями дихлорметана и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 65:35, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (105 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

ИК: 3357; 2958; 2213: 1723: 1651 см-1

1Н-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,88, дт; Н-4: - 6,15, м; Н-5: 6,30, дд; Н-6: 6,75, д; Н-8: 4,03, м; Н-16: 3,76, м; 1'-CONH-: 5,86, т; NH-CH2-2Fu: 4,28, дд и 4,48, дд; Fu: 6/13, дд; 6,25, д и 7,27, д.

13С-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,7, д; С-4: 138,8, д; С-5: 126,7, д; С-6: 144,1, д; С-7: 115,7, с; 7-CN: 118/2, с; С-8: 73,1, д; С-16: 69,6, д; С-18: 172,5, с; 1'-CO-NH-: 175,2, с; NH-CH2-2Fu: 36,8, т; Fu: 151,0, с; 110,5, д; 107,5, д; 142,2, д.

TS (EI, 70 eV; m/z): 568, [M] +производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 550, [М-Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 96, [C5H6NO]+; 81, [С 5Н5O]+.

TS (CI, изобутан; m/z): 569, [М+Н]+; 551, [М+Н-H2O]+ ; 96, [C2H6NO]+; 81, [C 5H5O]+.

Пример 11

3-Пиридиламид боррелидина [(I), R=CONH-C5H4 N]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 200 мг (0,41 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 188 мг (2 ммоль) 3-аминопиридина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (Rf=0,43) исчезает и появляется продукт (Rf=0,25), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями дихлорметана и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 1:9, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (144 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

ИК: 3318; 2958; 2212; 1730; 1542 см-1

1H-ЯМР (СDСl 3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,92, дт; Н-4: 6,20, м; Н-5: 6,35, дд; Н-6: 6,76, д; Н-8: 4,08, д; Н-16: 3,76, м; -CO-NH-3Рy: 7,70, с; Рy: 8,53, д; 8,22-8,36, м, 2Н и 7,25 т.

13С-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,5, д; С-4: 138,5, д; С-5: 126,9, д; С-6: 143,9, д; С-7: 115,9, с; 7-CN: 118,2, с; С-8: 73,1, д; С-16: 70,6, д; С-18: 172,4, с; 1’-СО-МН-: 174,6, с; Ру: 145,1, д; 126,9, с; 140,6, д; 123,7, д; 135,1, д.

TS (EI, 70 eV; m/z): 565, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 547, [М-Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 322, [C20H22N3O 2]+; 121, [C6H5N2 O]+; 95, [C5H7N2 ]+.

TS (CI, изобутан; m/z): 566, [М+Н]+ ; 548, [М+Н-Н2O]+; 95, [С5 Н7N2]+.

Пример 12

Сложный трет-бутиловый эфир боррелидинилглицина [(I), R=CONHCH 2-COOC4H9]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 200 мг (0,41 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 280 мг (1,67 ммоль) гидрохлорида сложного трет-бутилового эфира глицина и 235 мкл (1,69 ммоль, 170 мг) триэтиламина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (Rf=0,52) исчезает и появляется продукт (Rf=0,73), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/этилацетат 3:7). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и метанола с возрастающим содержанием метанола. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 96:4, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (129 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

1Н-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,92, дт; Н-4: 6,22, м; Н-5: 6,38, дд; Н-6: 6,82, д; Н-8: 4,10, дд; Н-16: 3,85, м; -CO-NH-СН2: 6,15, т; NH-CH2-CO-: 3,88, дд и 3,99, дд; tBu: 1,48, с, 3Н.

13С-ЯМР (СDСl 3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,7, д; С-4: 139,0, д; С-5: 126,7, д; С-6: 144,2, д; С-7: 115,7, с; 7-CN: 118,2, с; С-8: 73,1, д; С-16: 69,5, д; С-18: 172,5, с; 1'-CO-NH-: 175,5, с; NH-CH2-CO: 42,2, т; СН2-СО-О: 169,5, с; O-С-(СН3)3: 82,5, с; O-С-(СН 3)3: 28,0, кв.

TS (EI, 70 eV; m/z): 602, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 528, [М-С4H9ОН]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 435, [М-2Н2O-C5H13NO 2]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 .

TS (CI, изобутан; m/z): 603, [М+Н]+; 547, [М+Н-C4H8]+; 529, [М+Н-С 4Н9OН]+.

Пример 13

Циклогексиламид боррелидина [(I), R=CONH-С6Н 11]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 200 мг (0,41 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 234 мкл (2 ммоль, 203 мг) циклогексиламина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (R f=0,52) исчезает и появляется продукт (Rf=0,68), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/этилацетат 3:7). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и метанола с возрастающим содержанием метанола. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 96:4, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (205 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

ИК: 3344; 2931; 2213; 1717; 1647; 1541 см-1

1Н-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,94, дт; Н-4: 6,25, м; Н-5: 6,35, дд; Н-6: 6,83, д; Н-8: 4,10, дд; Н-16; 3,88, м; -CO-NH-: 5,35, д; циклогексил-СН: 3,75, м, 1Н.

13 С-ЯМР (CDCl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,8, д; С-4: 139,0, д; С-5: 126,7, д; С-6: 144,1, д; С-7: 115,7, с; 7-CN: 118,2, с; С-8: 73,2, д; С-16: 69,7, д; С-18: 172,5, с; 1'-CO-NH-: 174,3, с; циклогексил: 50,47, д; 33,3, т; 33,4, т; 25,3, т; 24,7, т; 24,8, т.

TS (EI, 70 eV; m/z): 570, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 552, [М-Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 534, [М-2Н2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 327, [C20H27N2O 2]+; 224, [C13H22NO 2]+.

TS (CI, изобутан; m/z): 571, [М+Н] +; 553, [М+Н-Н2О]+.

Пример 14

1-Этаноламид боррелидина [(I), R=CONH-CH2 CH2OH]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 200 мг (0,41 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 124 мкл (2 ммоль, 125 мг) этаноламина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (Rf =0,43) исчезает и появляется продукт (Rf=0,26), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл хлороформа, промывают водой (3× 30 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 3:7, объединяют и упаривают досуха. Структуру полученного таким образом затвердевающего маслянистого продукта (198 мг) подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

ИК: 3350; 2958; 2212; 1719; 1646 см-1

1H-ЯМР (CDCl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,98, дт; Н-4: 6,28, м; Н-5: 6,38, дд; Н-6: 6,83, д; Н-8: 4,10, д; Н-16: 3,82, м; -CO-NH-CH2: 6,32, т; NH-CH2-CH2 -: 3,38, м; -CH2-CH2-OH: 3,70, м.

13С-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,7, д; С-4: 139,0, д; С-5: 126,6, д; С-6: 144,1, д; С-7: 115,8, с; 7-CN: 118,4, с; С-8: 73,1, д; С-16: 69,4, д; С-18: 172,3, с; 1'-СО-NН-: 176,7, с; NH-CH2-CH2: 42,3, т; -СН 2-СH2-ОН: 61,7, т.

TS (EI, 70 eV; m/z): 532, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 514, [М-H2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 496, [М-H2O]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 478 [М-3Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 289 [С16Н21N2O3 ]+; 271 [C16H19N2 O2]+; 186 [С2H162]+.

TS (CI, изобутан; m/z): 533, [М+Н]+; 515, [М+Н-H2O]+.

Пример 15

3-Пиколиламид боррелидина [(I), R=CONHCH 2-C5H4N]

К раствору смешанного ангидрида, полученного из 4,0 г (8,2 ммоль) боррелидина в соответствии с методикой примера 3, добавляют 4,2 мл (41,2 ммоль, 4,46 г) 3-пиколиламина. После перемешивания в течение 3 часов исходный боррелидин (Rf=0,43) исчезает и появляется продукт (Rf=0,24), что подтверждается тонкослойной хроматографией (силикагелевая пластина, элюентная система: хлороформ/метанол 95:5). Реакционную смесь упаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 500 мл хлороформа, промывают водой (3× 1500 мл), сушат над сульфатом натрия и упаривают досуха. Сухой остаток хроматографируют на колонке с силикагелем со смесями хлороформа и этилацетата с возрастающим содержанием этилацетата. Фракции, содержащие продукт, элюированный смесью состава 2:8, объединяют и упаривают досуха. К полученному таким образом затвердевающему маслянистому веществу (3,62 г) добавляют 4 мл этилацетата и 20 мл н-гексана, твердое вещество растирают и затем отфильтровывают. Таким образом получают 3,04 г продукта. Т.пл.: 99-105° С.

Элементный анализ для С34Н49N3O5 (М: 579,785):

вычислено: С=70,43%, Н=8,52%, N=7,25%;

найдено: С=70,45%, Н=8,88%, N=6,91%.

УФ: производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 max (EtOH)=256 нм (производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 =29166).

Структуру продукта подтверждают данными спектроскопии (Н-ЯМР, С-ЯМР, TS).

Характеристические спектральные данные

ИК: 3325; 2958; 2212; 1732; 1651; 1251 см-1

1Н-ЯМР (СDСl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,98, дт; Н-4: 6,22, м; Н-5; 6,39, дд; Н-6: 6,81, д; Н-8: 4,10, д; Н-16: 3,80, м; 1'-CO-NH-: 6,50, т; NH-CH2-3Py: 4,25, дд и 4,60, дд; Ру: 7,25, дд; 7,63, д и 8,43-8,53, м, 2Н.

13 С-ЯМР (CDCl3; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 76,5, д; С-4: 138,7, д; С-5: 126,7, д; С-6: 144,0, д; С-7: 116,0, с; 7-CN: 118,5, с; С-8: 73,0, д; С-16: 69,7, д; С-18: 172,2, с; 1'-CO-NH-: 175,8, с; NH-CH2-3Py: 41,1, т; Рy: 148,8, д; 134,2, с; 135,7, д; 123,6, д; 148,6, д.

TS (EI, 70 eV; m/z): 579, [М]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 561, [М-Н2О]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 336, [С20Н22Н3О 2]; 107, [C6H7N2] +; 93, [C6H7N]+производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 ; 92, [С6Н6N]+.

TS (CI, изобутан; m/z): 580, [М+Н]+.

Получение хлористоводородной соли

350 мг (0,6 ммоль) указанного выше продукта растворяют в 5 мл тетрагидрофурана, затем с перемешиванием при температуре 0°С добавляют 70 мкл 37% водного раствора хлористоводородной кислоты. Растворитель выпаривают под вакуумом и воду удаляют азеотропной отгонкой с бензолом. Сухой остаток растирают с абсолютным эфиром. Твердое вещество отфильтровывают и промывают эфиром. Таким образом получают 330 мг продукта.

Т.пл.: 114-119° С.

Элементный анализ для С34Н49N 3O5· HCl· 2H2 О (М=652,246):

вычислено: С=62,61%, Н=8,35%, N=6,44%, Cl=5,44%,Н 2О=5,52%;

найдено: С=64,16%, Н=8,22%, N=6,44%, Cl=5,67%, H2O=5,57%.

УФ: производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 max (EtOH)=256 нм (производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 =30170).

Характеристические спектральные данные

1Н-ЯМР (ДМСО-d6; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): Н-2: 4,85, дт; Н-4: 6,30, м; Н-5: 6,48, дд; Н-6: 6,95, д; Н-8: 4,08, д; Н-16: 3,70, м; 1'-CO-NH-: 8,60, т; NH-СН2-3Рy: 4,26, дд и 4,54, дд; Рy: 7,92, дд; 8,30, д и 8,68-8,82, м, 2Н.

13 С-ЯМР (ДМСО-d6; производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 [м.д.], производные боррелидина и фармацевтическая композиция на их основе, патент № 2247723 тмс=0; мультиплетность): С-2: 75,6, д; С-4: 139,1, д; С-5: 127,5, д; С-6: 143,4, д; С-7: 116,6, с; 7-CN: 119,4, с; С-8: 70,8, д; С-16: 70,0, д; С-18: 171,1, с; 1'-CO-NH-: 175,9, с; NH-CH2-3Py: 38,2, т; Ру: 143,4, д; 141,5, д; 141,3, д; 139,3, с; 126,6, д.

Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2247723

patent-2247723.pdf

Класс C07D313/00 Гетероциклические соединения, содержащие кольца из более чем шести членов только с одним атомом кислорода в качестве гетероатома

равномерномеченный тритием (3as,5s,6r,7ar,7bs,9as,10r,12as,12bs)-10-[(2s,3r,4r,5s)-3,4-дигидрокси-5,6-диметил-2-гептанил]-5,6-дигидрокси-7а,9а-диметилгексадекангидро-3н-бензо[c]индено[5,4-е]оксепин-3-он -  патент 2499786 (27.11.2013)
промежуточные соединения и способы получения зеараленоновых макролидных аналогов -  патент 2478630 (10.04.2013)
синтез эпотилонов, их промежуточных продуктов, аналогов и их применения -  патент 2462463 (27.09.2012)
карбоциклические и гетероциклические арилсульфоны, их применение и фармацевтическая композиция на их основе, обладающая свойствами ингибитора -секретазы -  патент 2448964 (27.04.2012)
способы, композиции и устройства для получения макроциклических соединений -  патент 2428422 (10.09.2011)
амиды -амино- -гидрокси- -арилалкановой кислоты -  патент 2413716 (10.03.2011)
способ карбонилирования простых алкиловых эфиров -  патент 2411232 (10.02.2011)
способ получения 4-бензоил-1н-бензо[c]оксепин-3-она -  патент 2405777 (10.12.2010)
способ получения производных эпотилона, новые производные эпотилона, а также новые промежуточные соединения для реализации способа и способы их получения -  патент 2404985 (27.11.2010)
промежуточные соединения для получения транс-5-хлор-2-метил-2,3,3f,12b-тетрагидро-1н-дибенз[2,3:6,7]-оксепино[4,5-c]пиррола -  патент 2397164 (20.08.2010)

Класс C07D405/12 связанные цепью, содержащей гетероатомы

6-замещенные изохинолины и изохинолиноны полезные в качестве ингибиторов rho-киназы -  патент 2528229 (10.09.2014)
аналоги хроменона в качестве модуляторов сиртуина -  патент 2527269 (27.08.2014)
диаминогетероциклическое карбоксамидное соединение -  патент 2526253 (20.08.2014)
способ модуляции транспортеров атф-связывающей кассеты -  патент 2525115 (10.08.2014)
замещенные аминоинданы и их аналоги, и их применение в фармацевтике -  патент 2522586 (20.07.2014)
соединения, ингибирующие (блокирующие) горький вкус, способы их применения и получения -  патент 2522456 (10.07.2014)
производные пиридина в качестве ингибиторов рецепторов фактора роста эндотелия сосудов 2 подтипа (vegfr-2) и протеинтирозинкиназы -  патент 2522444 (10.07.2014)
5-фторпиримидиновые производные в качестве фунгицидов -  патент 2522430 (10.07.2014)
хиназолинон, хинолон и родственные аналоги в качестве модуляторов сиртуина -  патент 2519779 (20.06.2014)
производные 4-изопропилфенилглюцита в качестве ингибиторов sglt1 -  патент 2518896 (10.06.2014)

Класс A61K31/335  только с атомами кислорода в качестве гетероатомов, например фунгихромин

высокочистый пентамицин -  патент 2515936 (20.05.2014)
производные феноксихроманкарбоновой кислоты, замещенные в 6-ом положении -  патент 2507200 (20.02.2014)
комбинация для профилактики, коррекции и терапии боли, связанной с нейродегенерацией или ассоциированной с соматоформными расстройствами -  патент 2506077 (10.02.2014)
сублингвальная спреевая композиция, содержащая дигидроартемизинин -  патент 2501550 (20.12.2013)
биодеградируемый полимерный носитель для доставки противоопухолевого лекарственного средства -  патент 2500428 (10.12.2013)
биодеградируемый полимерный носитель для доставки противоопухолевого лекарственного средства (варианты) -  патент 2493848 (27.09.2013)
композиционный препарат для лечения пневмонии поросят -  патент 2487709 (20.07.2013)
фармацевтический состав для инъекций, способ его получения и перфузионный раствор на основе фармацевтического состава -  патент 2481827 (20.05.2013)
4,7-диметил-2-(2,4,5-триметоксифенил)-3,4,4a,5,8,8a-гексагидро-2h-4,8-эпоксихромен, обладающий анальгезирующей активностью -  патент 2477283 (10.03.2013)
способ определения эффективности лечения рака предстательной железы -  патент 2460544 (10.09.2012)

Класс A61P35/00 Противоопухолевые средства

способ лечения рака толстой кишки -  патент 2529831 (27.09.2014)
способ оценки эффекта электромагнитных волн миллиметрового диапазона (квч) в эксперименте -  патент 2529694 (27.09.2014)
новые (поли)аминоалкиламиноалкиламидные, алкил-мочевинные или алкил-сульфонамидные производные эпиподофиллотоксина, способ их получения и их применение в терапии в качестве противораковых средств -  патент 2529676 (27.09.2014)
производные 1, 2-дигидроциклобутендиона в качестве ингибиторов фосфорибозилтрансферазы никотинамида -  патент 2529468 (27.09.2014)
фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа -  патент 2529373 (27.09.2014)
модульный молекулярный конъюгат для направленной доставки генетических конструкций и способ его получения -  патент 2529034 (27.09.2014)
модулирующие jak киназу хиназолиновые производные и способы их применения -  патент 2529019 (27.09.2014)
лечение опухолей с помощью антитела к vegf -  патент 2528884 (20.09.2014)
способ лечения местнораспространенного неоперабельного рака поджелудочной железы -  патент 2528881 (20.09.2014)
новые бензолсульфонамидные соединения, способ их получения и применение в терапии и косметике -  патент 2528826 (20.09.2014)
Наверх