ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические препараты на их основе

Классы МПК:C07D211/34 атомами углерода, связанными тремя связями с гетероатомами (из которых одна может быть с галогеном), например с эфирными или нитрильными группами
C07D213/54 радикалы, замещенные атомами углерода, связанными тремя связями с гетероатомами (из которых одна может быть с галогеном), например с эфирными или нитрильными группами
C07D213/70 атомы серы
C07D213/73 незамещенные амино- или иминогруппами
C07D213/81 амиды; имиды
C07D239/26 только с атомами водорода, углеводородными или замещенными углеводородными радикалами, непосредственно связанными с атомами углерода кольца
A61K31/44  не конденсированные пиридины; их гидрированные производные их
A61K31/445  не конденсированные пиперидины, например пиперокаин
A61K31/495  содержащие шестичленные кольца только с двумя атомами азота в качестве гетероатомов, например пиперазин
A61P7/00 Лекарственные средства для лечения нарушений состояния крови или внеклеточной жидкости
Автор(ы):, ,
Патентообладатель(и):АстраЗенека АБ (SE)
Приоритеты:
подача заявки:
2000-05-03
публикация патента:

Изобретение относится к новым серусодержащим соединениям формулы (I)

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

их фармацевтически приемлемым солям или сольватам или сольватам солей, где R1 представляет C1 -C6алкил, циклоалкил, арил, алифатический или ароматический гетероциклил, замещенные одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино, R2 представляет Н, алкил, алкилтио, алкокси или циклоалкил, R3 представляет COOR5, SO(OR5), SO3R5 и др., R4 представляет SH или S-CO-C1-C 6алкил, R5 представляет Н или C1 -C6алкил, R6 представляет Н, Х представляет C(Z)2 или NR6CO, Y представляет C(Z) 2, Z представляет Н, C1-C6алкил, арил или циклоалкил. Указанные соединения ингибируют карбоксипептидазу U и могут быть использованы для предупреждения и лечения заболеваний, связанных с карбоксипептидазой U. 8 н. и 6 з.п. ф-лы.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к новым соединениям и их фармацевтически приемлемым солям, которые ингибируют основные карбоксипептидазы, более конкретно карбоксипептидазу U и, благодаря этому, могут быть использованы в предупреждении и лечении заболеваний, при которых ингибирование карбоксипептидазы U является полезным. В других аспектах изобретение относится к соединениям по изобретению для применения в терапии; к способам получения таких новых соединений; к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента; и к применению активных соединений в изготовлении лекарств для медицинского применения, указанного выше.

Предпосылки изобретения

Фибринолиз является результатом ряда ферментативных реакций, приводящих к расщеплению фибрина плазмином. Активация плазминогена является центральным процессом в фибринолизе. Расщепление плазминогена с получением плазмина осуществляют активаторы плазминогена - активатор плазминогена тканевого типа (t-PA) или активатор плазминогена урокиназного типа (u-РА). В ходе начального расщепления фибрина плазмином образуются карбоксиконцевые остатки лизина, которые служат в качестве высокоаффинных сайтов связывания плазминогена. Так как плазминоген, связанный с фибрином, активируется в плазмин намного легче, чем свободный плазминоген, этот механизм обеспечивает регулирование фибринолиза по типу положительной обратной связи.

Одним из эндогенных ингибиторов фибринолиза является карбоксипептидаза U (CPU). CPU также известна как плазменная карбоксипептидаза В, активный ингибитор тромбин-активируемого фибринолиза (TAFIa), карбоксипептидаза R и индуцируемая карбоксипептидазная активность. CPU образуется во время коагуляции и фибринолиза из своего предшественника проCPU под действием протеолитических ферментов, например тромбина, тромбин-тромбомодулинового комплекса или плазмина. CPU расщепляет основные аминокислоты на карбоксильном конце фибриновых фрагментов. Потеря карбокси-концевых лизинов и, в результате этого, лизиновых сайтов связывания плазминогена затем способствует ингибированию фибринолиза.

Ожидается, что ингибирование потери лизиновых сайтов связывания плазминогена и, в результате этого, увеличение скорости образования плазмина, эффективные ингибиторы карбоксипептидазы U будут облегчать фибринолиз.

2-Меркаптометил-3-гуанидиноэтилтиопропионовая кислота известна как ингибитор карбоксипептидазы N. Недавно было показано, что это соединение ингибирует CPU [Hendriks, D. et al., Biochimica et Biophysica Acta, 1034 (1990) 86-92].

Гуанидиноэтилмеркаптоянтарная кислота известна как ингибитор карбоксипептидазы N. Недавно было показано, что это соединение ингибирует CPU [Eaton, D.L. et al., The Journal of Biological Chemistry, 266 (1991) 21833-21838].

Описание изобретения

Неожиданно было обнаружено, что соединения формулы I особенно эффективны в качестве ингибиторов карбоксипептидазы U и, в связи с этим, пригодны в качестве лекарств для лечения или профилактики состояний, при которых ингибирование карбоксипептидазы U является полезным.

Так, в одном аспекте данное изобретение относится к соединениям общей формулы I,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

или их фармацевтически приемлемым солям или сольватам, или сольватам таких солей, где

R1 представляет собой

C16алкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

или арил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R2 представляет собой Н, ацил, ациламино, алкил, алкилкарбамоил, алкилтио, алкокси, ароил, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арил, карбамоил, карбокси, циано, циклоалкил, формил, гуанидино, галоген, гетероциклил, гидрокси, оксо, нитро, тиол, группу Z2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- или Z2N-CO-NZ-;

R3 представляет собой COOR5, SO(OR 5), SO3R5, Р=O(ОR5 )2, B(OR5)2, P=OR5 (OR5), или тетразол, или любой изостер карбоновой кислоты;

R4 представляет собой SH, S-CO-C 16алкил или S-СО-арил;

R5 представляет собой Н, С16алкил или арил;

R6 представляет собой Н или С16алкил;

Х представляет собой О, S, SO, SO 2, C(Z)2, N(Z), NR6SO2 , SO2NR6, NR6CO или CONR 6;

Y представляет собой C(Z)2;

Z независимо представляет собой Н, С16алкил, арил, циклоалкил или гетероциклил.

Предпочтительными соединениями по настоящему изобретению являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, где

R1 представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

или арил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R2 представляет собой Н, ацил, ациламино, алкил, алкилкарбамоил, алкилтио, алкокси, ароил, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арил, карбамоил, карбокси, циано, циклоалкил, формил, гуанидино, галоген, гетероциклил, гидрокси, оксо, нитро, тиол, группу Z2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- или Z2N-CO-NZ-;

R3 представляет собой COOR5;

R4 представляет собой SH, S-CO-C16алкил или S-CO-арил;

R 5 представляет собой Н, C16алкил или арил;

R6 представляет собой Н или C 16алкил;

Х представляет собой О, S, SO, SO2, C(Z)2, N(Z), NR6SO 2, SO2NR6 или CONR6;

Y представляет собой C(Z)2;

Z независимо представляет собой Н, С16алкил, арил, циклоалкил или гетероциклил.

Более предпочтительными соединениями по настоящему изобретению являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, где

R1 представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R2 представляет собой Н, C13алкил, амино, галоген или гидрокси;

R3 представляет собой COOR5;

R4 представляет собой SH, S-CO-C1 6алкил или S-CO-арил;

R5 представляет собой Н, C16алкил или арил;

Х представляет собой C(Z)2;

Y представляет собой C(Z)2 ;

Z независимо представляет собой Н или С16алкил.

Еще более предпочтительными соединениями согласно настоящему изобретению являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, где

R1 представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота;

R2 представляет собой Н, F или С1алкил;

R 3 представляет собой COOR5;

R4 представляет собой SH, S-CO-C16алкил или S-СО-арил;

R5 представляет собой Н, C 16алкил или арил;

Х представляет собой C(Z)2;

Y представляет собой C(Z)2 ;

Z независимо представляет собой Н или С16алкил.

Наиболее предпочтительными соединениями согласно настоящему изобретению являются соединения формулы I или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты, или сольваты таких солей, где

R1 представляет собой циклопентил, пиридил, пиримидинил, пиперидинил или тиазолил;

R2 представляет собой Н, F или С1алкил;

R3 представляет собой COOR5;

R 4 представляет собой SH;

R5 представляет собой Н;

Х представляет собой CHZ;

Y представляет собой CHZ;

Z независимо представляет собой Н или С 16алкил.

В описании изобретения и прилагаемой формуле использованы следующие определения терминов.

Термин "основная группа" означает основную группу, причем сопряженная кислота указанной основной группы имеет рКа от приблизительно -5 до приблизительно 25, предпочтительно от 1 до 15.

Термин "изостер карбоновой кислоты" означает кислотную группу, имеющую рКа от приблизительно -5 до приблизительно 25, предпочтительно от 1 до 15.

Термин "С16алкил" означает прямую или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную, замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую от 1 до 6 углеродных атомов в цепи, причем эта алкильная группа может быть возможно прервана одним или более чем одним гетероатомом, выбранным из О, N или S. Примеры указанного алкила включают в себя, без ограничений, метил, этил, этенил, этинил, н-пропил, изопропил, пропенил, изопропенил, пропинил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, бутенил, изобутенил, бутинил и пентил и гексил с прямой или разветвленной цепью.

Термин "C 13алкил" означает прямую или разветвленную, насыщенную или ненасыщенную, замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую от 1 до 3 углеродных атомов в цепи, причем алкильная группа может быть возможно прервана одним или более чем одним гетероатомом, выбранным из О, N или S. Примеры указанного алкила включают в себя, без ограничений, метил, этил, этенил, этинил, н-пропил, изопропил, пропенил, изопропенил, пропинил.

Термин "С1алкил" означает замещенную или незамещенную алкильную группу, имеющую 1 углеродный атом. Пример указанного алкила включает в себя, без ограничений, метил.

Термин "С16алкокси" означает алкил-O-группу, где С16алкил такой, как определено выше.

Термин "С13алкокси" означает алкил-O-группу, где С13алкил такой, как определено выше.

Термин "гетероциклил" означает замещенную или незамещенную, 4-10-членную моноциклическую или многоциклическую кольцевую систему, в которой один или более чем один атом в кольце или в кольцах является элементом, отличным от углерода, например азотом, кислородом или серой, в частности 4-, 5- или 6-членные ароматические или алифатические гетероциклические группы, и включает, без ограничений, азетидиновую, фурановую, тиофеновую, пиррольную, пирролиновую, пирролидиновую, диоксолановую, оксатиолановую, оксазолановую, оксазольную, тиазольную, имидазольную, имидазолиновую, имидазолидиновую, пиразольную, пиразолиновую, пиразолидиновую, изоксазольную, изотиазольную, оксадиазольную, фуразановую, триазольную, тиадиазольную, пирановую, пиридиновую, пиперидиновую, диоксановую, морфолиновую, дитиановую, оксатиановую, тиоморфолиновую, пиридазиновую, пиримидиновую, пиразиновую, пиперазиновую, триазиновую, тиадиазиновую, дитиазиновую, азаиндольную, азаиндолиновую, индольную, индолиновую, нафтиридиновую группы и, что очевидно, включают все изомеры вышеназванных групп. Очевидно, что например термин "азетидинил" включает в себя 2- и 3-изомеры, а термины "пиридил" и "пиперидинил" включают в себя 2-, 3- и 4-изомеры.

Термин "циклоалкил" означает насыщенное или ненасыщенное, замещенное или незамещенное, неароматическое кольцо, состоящее из 3, 4, 5, 6 или 7 углеродных атомов, и включает в себя, без ограничений, группы циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил, циклопентадиенил, циклогексадиенил или циклогептадиенил.

Термин "галоген" включает в себя группы фторо, хлоро, бромо и йодо.

Термин "арил" означает замещенный или незамещенный С6 14 ароматический углеводород и включает в себя, без ограничений, фенил, нафтил, инденил, антраценил, фенантренил и флуоренил.

Термин "арилокси" означает арил-O-группу, где арил такой, как определено выше.

Термин "ацил" означает алкил-СО-группу, где алкил такой, как определено выше.

Термин "ароил" означает арил-СО-группу, где арил такой, как определено выше.

Термин "алкилтио" означает алкил-S-группу, где алкил такой, как определено выше.

Термин "арилтио" означает арил-S-группу, где арил такой, как определено выше.

Термин "ароиламино" означает ароил-N(Z)-группу, где ароил и Z такие, как определено выше.

Термин "ациламино" означает ацил-N(Z)-группу, где ацил и Z такие, как определено выше.

Термин "карбамоил" означает H2N-CO-rpynny.

Термин "алкилкарбамоил" означает Z2N-CO-rpynny, где Z такой, как определено выше.

Термин "замещенный" означает группу "С 1алкил", "С13алкил", "C16алкил", "циклоалкил", "гетероциклил" или "арил", как определено выше, которая замещена одной или более чем одной ацильной, ациламино, алкильной, алкилкарбамоильной, алкилтио, алкокси, ароильной, ароиламино, арилокси, арилтио, амидино, амино, арильной, карбамоильной, карбокси, циано, циклоалкильной, формильной, гуанидино, галогено, гетероциклильной, гидрокси, оксо, нитро, тиольной, тио, Z 2N-CO-O-, ZO-CO-NZ- или Z2N-CO-NZ-группой.

Кроме того, соединения формулы I, где R4 представляет собой меркапто, могут находиться в форме димера, соединенного через -S-S-связь, который также включен в данное изобретение.

Как чистые энантиомеры, так и рацемические смеси, и неравные смеси двух энантиомеров входят в объем настоящего изобретения. Очевидно, что все возможные диастереомерные формы входят в объем настоящего изобретения. Также включены в данное изобретение производные соединений формулы I с биологической функцией соединений формулы I, такие как пролекарства.

В зависимости от условий способа получения соединения формулы I получают либо в нейтральной, либо в солевой форме или в виде сольвата, например гидрата, и все они входят в объем настоящего изобретения.

Получение

Согласно настоящему изобретению предложены также способы А-С получения соединений общей формулы I.

Способ А

Способ А получения соединений общей формулы I, где R1, R 2, R3, R4 и Y такие, как определено выше, R4 представляет собой Н, и Х представляет собой C(Z)2, включает в себя следующие стадии:

а) соединения общей формулы II,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R1 такой, как определено для формулы I, a X представляет собой C(Z)2, которые либо имеются в продаже, либо могут быть получены с использованием известных методик, могут быть превращены в соединение общей формулы III,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где L является подходящей уходящей группой, такой как хлоро, бромо, иодо, трифлат или тозил, в стандартных условиях с использованием подходящего реагента, такого как РРh3 /СВr4, TosCl/пиридин или (СF3SO2 )2O/ТЕА;

б) соединения общей формулы III затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы IV,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R2 и R3 такие, как определено для формулы I, которые либо имеются в продаже, либо могут быть получены с использованием известных методик, в присутствии подходящего основания, такого как К2СО3 или NaH, в стандартных условиях до образования соединений общей формулы V

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

в) соединения общей формулы V, где R1 и R 3 такие, как определено для формулы I, Х представляет собой C(Z)2, и R2 представляет собой Н, затем могут быть превращены в соединения общей формулы VI

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

путем обработки формальдегидом в присутствии подходящего основания, такого как Et2NH, в стандартных условиях;

г) соединения общей формулы VI также могут быть получены путем обработки соединений общей формулы VII,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R3 и R5 такие, как определено для формулы I, алкилирующим агентом общей формулы III в присутствии подходящего основания, такого как LDA или NaH, в стандартных условиях до образования соединений общей формулы VIII

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

д) соединения общей формулы VIII затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соответствующим альдегидом или кетоном OC(Z) 2 в присутствии подходящего основания, такого как KOtBu, LDA или NaH, в стандартных условиях с получением соединения общей формулы VI

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

е) соединения общей формулы VI далее могут быть подвергнуты взаимодействию с соединениями общей формулы IX,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R5 является подходящей защитной группой, такой как Ac, Bz, РМВ или Вn, одни или в присутствии подходящего основания, такого как NaOMe, NaH или триэтиламин, или, альтернативно, в присутствии свободно-радикального инициатора, такого как AIBN, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R1, R2, R4 и Y такие, как определено для формулы I, a R2 представляет собой Н, и Х является C(Z)2.

Способ Б

Способ Б получения соединений общей формулы I, где R1, R 2, R3 и R4 такие, как определено в формуле I, Y представляет собой CH2, a X представляет собой О, S, SO, SO2, C(Z)2 или N(Z), включает в себя следующие стадии:

а) соединение общей формулы X,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R1 такой, как определено для формулы I, а Х представляет собой О, S или N(Z), подвергают взаимодействию с алкилирующим агентом общей формулы XI,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R2 и R3 такие, как определено для формулы I, a L является подходящей уходящей группой, такой как хлоро, бромо, иодо, трифлатная или тозилатная группа, в стандартных условиях с использованием подходящих реагентов, таких как NaH, Аg2СО3 или Bu4NHSO4 /NaOH, до образования соединений общей формулы XII

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

б) соединения общей формулы XII затем могут быть подвергнуты взаимодействию с диоксидом углерода в присутствии подходящего основания, такого как LDA или KHMDS, в стандартных условиях до образования соединения общей формулы XIII

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

в) соединения общей формулы XIII затем могут быть подвергнуты взаимодействию с алкилхлорформиатом, таким как СlCООМе, в присутствии основания, такого как триэтиламин, и после этого образовавшийся смешанный ангидрид может быть восстановлен подходящим восстанавливающим агентом, таким как NaBH4, в стандартных условиях с образованием соединения общей формулы XIV

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

г) соединения общей формулы XIV затем могут быть подвергнуты взаимодействию с соединением общей формулы IX

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R5 является подходящей защитной группой, такой как Ас или Bz, в присутствии подходящего реагента, такого как PPh3/DIAD, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R1, R2, R3 и R4 такие, как определено выше, Y является СН2, и Х представляет собой О, S, C(Z)2 или N(Z);

д) соединения общей формулы I, где R1 , R2, R3 и Y такие, как определено выше, а Х является S, затем могут быть подвергнуты взаимодействию с подходящим окисляющим реагентом, таким как МСРВА, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R1 , R2, R3 и R4 и Y такие, как определено выше, а Х является SO или SO2.

Способ В

Способ В получения соединений общей формулы I, где R1, R2, R3 и R4 и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой NR 6CO, CONR6, SO2NR6 или NR6SO2, включает в себя следующие стадии:

а) соединение общей формулы XV,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R2, R3 и R6 и Y такие, как определено для формулы I, a R5 является подходящей защитной группой, такой как Ac, Bz, PMB или Вп, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы XVI

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R1 такой, как определено для формулы I, a X представляет собой СООН или SO2Cl, в присутствии подходящих связывающих агентов, таких как PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP или пиридин, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R1, R2, R3 и R4 и Y такие, как определено выше, а Х является NR6CO или NR6SO2 ;

б) соединение общей формулы XVII,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R2, R3 и Y такие, как определено для формулы I, X представляет собой СООН или SO2Cl, и R5 является подходящей защитной группой, такой как Ас, Bz, PMB или Вn, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы XVIII,

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R6 такой, как определено для формулы I, в присутствии подходящих связывающих реагентов, таких как PyBOP/DIPEA, DCC/HOBt, EDC/TEA/DMAP или пиридин, в стандартных условиях с получением соединений общей формулы I, где R1, R 2, R3 и R4 и Y такие, как определено выше, а Х представляет собой CONR6 или SO2 NR6.

Для специалистов в данной области техники очевидно, что в способах, описанных выше, функциональные группы промежуточных соединений могут нуждаться в защите подходящими защитными группами.

Функциональные группы, которые желательно защищать, включают гидрокси, амино, меркапто и карбоксила. Подходящие защитные группы для гидрокси включают триалкилсилил или диарилалкилсилил (например, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил или триметилсилил), тетрагидропиранил и бензил. Подходящие защитные группы для амино, амидино или гуанидино включают трет-бутилоксикарбонил и бензилоксикарбонил. Подходящие защитные группы для меркапто включают в себя СО-С1-6алкил, пара-метоксибензил и тритил. Подходящие защитные группы для карбоксила включают C 1-6алкиловый и бензиловый сложные эфиры.

Защитные группы могут быть удалены способами, которые известны специалистам в данной области техники и которые описаны ниже.

Некоторые защищенные производные соединений формулы I, которые могут быть получены до последней стадии удаления защиты с образованием соединений формулы I, являются новыми.

Использование защитных групп описано в "Protective Groups in Organic Synthesis", 2nd edition, T.W.Greene & P.G.M.Wutz, Wiley-lnterscience (1991). Защитной группой может быть также смола, такая как смола Ванга или 2-хлортритилхлоридная смола.

Для специалистов в данной области очевидно, что хотя сами по себе такие защищенные производные соединений формулы I могут и не обладать фармакологической активностью, их можно вводить парентерально или перорально, и после этого они метаболизируются в организме с образованием соединений по настоящему изобретению, которые фармакологически активны. Такие производные, следовательно, могут быть охарактеризованы как пролекарства. Все пролекарства соединений формулы I входят в объем данного изобретения.

Очевидно также, что все полиморфы, аморфные формы, ангидраты, гидраты, сольваты соединений по настоящему изобретению входят в объем данного изобретения.

Фармацевтические препараты

В еще одном аспекте данное изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента.

Для клинического применения соединения по настоящему изобретению вводят в состав фармацевтических препаратов для перорального, внутривенного, подкожного, трахейного, бронхиального, интраназального, легочного, чрескожного, буккального, ректального, парентерального или других способов введения. Фармацевтический препарат содержит соединение по настоящему изобретению в комбинации с одним или более чем одним фармацевтически приемлемым ингредиентом. Носитель может быть в форме твердого, полутвердого или жидкого разбавителя или капсулы. Такие фармацевтические препараты являются еще одним объектом изобретения. Обычно количество активных соединений составляет 0,1-95% от массы препарата.

В ходе приготовления фармацевтических препаратов, содержащих соединение по настоящему изобретению, выбранное соединение можно смешивать с твердыми, порошкообразными ингредиентами, такими как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, крахмал, амилопектин, производные целлюлозы, желатин или другой подходящий ингредиент, а также с разрыхляющими агентами и смазывающими агентами, такими как стеарат магния, стеарат кальция, стеарилфумарат натрия и полиэтиленгликолевые воски. Данную смесь можно затем переработать в гранулы или спрессовать в таблетки.

Мягкие желатиновые капсулы могут быть приготовлены из капсул, содержащих смесь активного соединения или соединений по настоящему изобретению, растительного масла, жира или другого подходящего наполнителя для мягких желатиновых капсул. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы активного соединения. Твердые желатиновые капсулы могут также содержать активное соединение в комбинации с твердыми порошкообразными ингредиентами, такими как лактоза, сахароза, сорбит, маннит, картофельный крахмал, кукурузный крахмал, амилопектин, производные целлюлозы или желатин.

Лекарственные единицы для ректального введения могут быть приготовлены (1) в форме суппозиториев, которые содержат активное вещество, смешанное с нейтральной жировой основой; (2) в форме желатиновых ректальных капсул, которые содержат активное вещество в смеси с растительным маслом, парафиновым маслом или другим подходящим наполнителем для желатиновых ректальных капсул; (3) в форме готовой микроклизмы; или (4) в форме сухого препарата для микроклизмы, который нужно разводить в подходящем растворителе непосредственно перед введением.

Жидкие препараты могут быть приготовлены в форме сиропов или суспензий, например растворов или суспензий, содержащих активный ингредиент и остаток, состоящий, например, из сахара или сахарных спиртов и смеси этанола, воды, глицерина, пропиленгликоля и полиэтиленгликоля. Если требуется, такие жидкие препараты могут содержать красящие агенты, корригенты, консерванты, сахарин и карбоксиметилцеллюлозу или другие загустители. Жидкие препараты могут быть изготовлены также в форме сухого порошка, предназначенного для разведения в подходящем растворителе перед применением.

Растворы для парентерального введения могут быть приготовлены в виде раствора соединения по настоящему изобретению в фармацевтически приемлемом растворителе. Эти растворы могут также содержать стабилизирующие ингредиенты, консерванты и/или буферные ингредиенты. Растворы для парентерального введения могут быть приготовлены также в виде сухого препарата, предназначенного для разведения в подходящем растворителе перед применением.

Типичная суточная доза активного вещества варьируется в широких пределах и зависит от различных факторов, таких как, например, индивидуальная потребность каждого пациента, путь введения и заболевание. В общем случае, пероральные и парентеральные дозировки находятся в пределах от 0,1 до 1000 мг в сутки активного вещества.

Медицинское и фармацевтическое применение

Соединения по изобретению либо сами по себе являются ингибиторами карбоксипептидазы U, либо, в случае пролекарств, становятся ими после введения. Таким образом, ожидается, что соединения по изобретению будут полезны при тех состояниях, при которых ингибирование карбоксипептидазы U является полезным, например при лечении или профилактике тромбозов или гиперкоагуляции в крови и тканях млекопитающих, включая человека.

Известно, что гиперкоагуляция может приводить к тромбоэмболическим заболеваниям. Состояния, связанные с гиперкоагуляцией и тромбоэмболическими заболеваниями, которые могут быть упомянуты, включают резистентность к протеину С и наследственные или приобретенные дефициты антитромбина III, протеина С, протеина S и гепаринового кофактора II. Другие состояния, о которых известно, что они связаны с гиперкоагуляцией или тромбоэмболическим заболеванием, включают циркуляторный и септический шок, циркулирующие антифосфолипидные антитела, гомоцистеинемию, гепарин-индуцированную тромбоцитопению и дефекты фибринолиза. Таким образом, соединения по изобретению показаны как для терапевтического, так и/или профилактического лечения этих состояний. Соединения по изобретению также показаны для лечения состояний, при которых имеет место нежелательный избыток проCPU/CPU.

Конкретные болезненные состояния, которые могут быть упомянуты как предназначенные для терапевтического и/или профилактического лечения, включают венозный тромбоз и легочную эмболию, артериальный тромбоз (например, при инфаркте миокарда, неустойчивой стенокардии, удара вследствие тромбоза и периферического артериального тромбоза) и системную эмболию, обычно из предсердия во время артериальной фибрилляции или из левого желудочка после трансмурального инфаркта миокарда.

Кроме того, ожидается, что соединения по изобретению будут иметь применение для профилактики реокклюзии или рестеноза (то есть тромбоза) после тромболиза, чрескожной транслюминальной ангиопластики (РТА) и операций коронарного шунтирования; для предупреждения повторного тромбоза после микрохирургического вмешательства и сосудистой хирургии в целом.

Дополнительные показания включают терапевтическое и/или профилактическое лечение диссеминированной внутрисосудистой коагуляции, вызванной бактериями, множественной травмой, интоксикацией или любым другим механизмом, антикоагулянтное лечение, когда кровь находится в контакте с чужеродными поверхностями в организме, такими как сосудистые трансплантаты, сосудистые стенты, сосудистые катетеры, механические и биологические протезные клапаны или любое другое медицинское устройство, и антикоагулянтное лечение, когда кровь находится в контакте с медицинскими устройствами вне организма, такими как используемый во время сердечно-сосудистой хирургической операции аппарат "сердце-легкие" или устройства, используемые при гемодиализе.

Соединение по изобретению можно также объединять и/или совместно вводить с любым антитромботическим агентом с иным механизмом действия, таким как антитромбоцитные агенты ацетилсалициловая кислота, тиклопидин, клопидогрель, ингибиторы рецепторов тромбоксана и/или синтетазы, антагонисты рецепторов фибриногена, миметики простациклина и ингибиторы фосфодиэстеразы, и антагонисты ADP-рецептора (Р2Т) (ADP - аденозин-5’-дифосфат), и ингибиторы тромбина.

Соединения по изобретению можно объединять и/или совместно вводить с тромболитиками, такими как активатор тканевого плазминогена (природный, рекомбинантный или модифицированный), стрептокиназа, урокиназа, проурокиназа, анизоилированный плазминоген-стрептокиназный активаторный комплекс (APSAC), активаторы плазминогена слюнной железы животных и тому подобное, при лечении тромботических заболеваний, в частности инфаркта миокарда и удара.

In vitro эксперименты

Ингибирующий эффект соединений по настоящему изобретению оценивали, используя анализ, описанный в Dirk Hendriks, Simon Scharpe and Marc van Sandre, Clinical Chemistry, 31, 1936-1939 (1985); и Wei Wang, Dirk F.Hendriks, Simon S.Scharpe, The Journal of Biological Chemistry, 269, 15937-15944 (1994).

Примеры

Общие методики экспериментов

Масс-спектры снимали на тройном квадрупольном масс-спектрометре Finnigan Mat TSQ 700, оснащенном интерфейсом электрораспыления (FAB-MS (ионизация бомбардировкой быстыми атомами-масс-спектрометрия)), и на масс-спектрометре VG Platform II, оснащенном интерфейсом электрораспыления (LC-MS (жидкостная хроматография-масс-спектрометрия)). 1Н ЯМР и 13С ЯМР измерения выполняли на спектрометрах Varian UNITY plus 400, 500 и 600, работающих на 1H частотах 400, 500 и 600 МГц соответственно. Химические сдвиги приведены в м.д. (миллионных долях) с растворителем в качестве внутреннего стандарта. Органические экстракты сушили, используя MgSO4 или NaSO4 в качестве осушающего агента. Хроматографическое разделение выполняли, используя Merck Silica gel 60 (0,063-0,200 мм). ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) разделение выполняли на колонке HIGHCROM KR100-10C8.

Пример 1

2-Меркаптометил-3-пиперидин-4-ил-пропионовая кислота

а) 3-Пиперидин-4-ил-пропионовая кислота

Раствор 3-пиридин-4-ил-акриловой кислоты (4,20 г, 28,0 ммоль) в воде (50 мл) и аммиака (водный, 25%, 4 мл) гидрировали при 60 бар (60·105 Па) в стальном автоклаве высокого давления в присутствии рутения (5% на оксиде алюминия, 439 мг). Когда давление водорода оставалось постоянным (3 суток), катализатор удаляли из реакционной смеси фильтрацией. Катализатор промывали этанолом и водой, и этанол удаляли из раствора на роторном испарителе, и водный раствор сушили сублимацией с получением 3-пиперидин-4-ил-пропионовой кислоты (4,30 г, 100%).

б) 4-(2-Карбокси-этил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Раствор 3-пиперидин-4-ил-пропионовой кислоты (4,79 г, 30,5 ммоль), ди-трет-бутилдикарбоната (6,98 г, 32,0 ммоль) и NaHCO3 (2,69 г, 32,0 ммоль) в смеси THF/вода (1:1, 50 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 22 часов. Еще одну порцию ди-трет-бутилдикарбоната (2,00 г, 9,10 ммоль) добавляли вместе с каталитическим количеством DMAP, полученную смесь перемешивали в течение еще четырех суток. THF удаляли при пониженном давлении, и водную фазу экстрагировали CH2Cl2. Водную фазу затем подкисляли до рН 2 1 М HCl, а кислую фазу экстрагировали CH2Cl 2. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили и концентрировали в вакууме с получением 4-(2-карбокси-этил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира в виде белого твердого вещества (6,36 г, 81%).

в) 4-(3-Бензилсульфанил-2-карбокси-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

BuLi (1,6 M, 15,3 мл, 24,4 ммоль) добавляли к раствору диизопропиламина (3,43 мл, 24,4 ммоль) в THF (3 мл) при -78°С в атмосфере аргона. Через несколько минут раствор оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение периода времени 15 минут. Полученный в результате раствор LDA медленно добавляли к раствору 4-(2-карбокси-этил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (3,07 г, 11,9 ммоль) в THF (7 мл) при -78°С. Полученный раствор перемешивали при -78°С в течение 10 минут. В это время добавляли THF (20 мл) для того, чтобы растворить анион, который затвердел. Дианион охлаждали до -78°С и добавляли бромметилтиобензиловый эфир (2,72 г, 12,5 ммоль) в виде раствора в THF (3 мл). Раствор перемешивали при -78°С в течение 30 минут, при 0°С в течение 30 минут, а затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь подкисляли 1 М HCl, разбавляли ЕtOАс, и органическую фазу промывали водой и сушили. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (МеОН/СНСl 3, 1:9) с получением 4-(3-бензилсульфанил-2-карбокси-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира в виде бледно-желтого масла (3,12 г, 66%).

г) 4-(2-Карбокси-3-меркапто-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Металлический натрий (513 г, 22,5 ммоль) добавляли порциями в течение 5 минут к раствору 4-(3-бензилсульфанил-2-карбокси-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,9 г, 2,29 ммоль) в THF и жидком аммиаке (50 мл) при -69°С в атмосфере аргона. После перемешивания в течение 15 минут порциями добавляли хлорид аммония (1,7 г, 31,5 ммоль). Охлаждающую баню удаляли, и аммиак выпаривали, используя струю аргона. Добавляли 0,5 М NaOH, и смесь промывали гептаном. Водную фазу подкисляли 2 М HCl и экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу промывали рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(2-карбокси-3-меркапто-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,7 г, 100%).

д) 2-Меркаптометил-3-пиперидин-4-ил-пропионовая кислота

К раствору 4-(2-карбокси-3-меркапто-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,7 г, 2,29 ммоль) в метиленхлориде (8 мл) в атмосфере аргона добавляли триэтилсилан (731 мкл, 4,58 ммоль), затем TFA (4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 60 минут, а затем концентрировали при пониженном давлении. После очистки ВЭЖХ (10серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 224470830% ацетонитрил, 0,1% TFA в воде) получили указанное в заголовке соединение в виде TFA соли (447 мг, 61%).

1 H ЯМР (400 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.34-1.50 (m, 2Н), 1.54-1.76 (m, 3H), 1.90-1.99 (m, 1H), 2.0-2.1 (m, 1H), 2.9-3.05 (m, 5H), 3.38-3.48 (m, 2H).

MS(+) 204(M+1).

Пример 2

3-(1-Ацетил-пиперидин-4-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

Раствор TFA соли 2-меркаптометил-3-пиперидин-4-ил-пропионовой кислоты (0,1 г, 0,32 ммоль) в уксусном ангидриде (2 мл) перемешивали в течение ночи в атмосфере аргона, а затем концентрировали при пониженном давлении. После очистки ВЭЖХ (10серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 224470850% ацетонитрил, 0,1% TFA в воде) получили указанное в заголовке соединение (63 мг, 80%).

1H ЯМР (500 МГц, СD 3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.0-1.22 (m, 2H), 1.46-1.55 (m, 1H), 1.55-1.66 (m, 2H), 1.67-1.79 (m, 1H), 1.81-1.92 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 2.55-2.73 (m, 4H), 3.03-3.12 (m, 1H), 3.85-3.94 (m, 1H), 4.45-4.53 (m, 1H).

MS(+) 246(M+1).

Пример 3

3-Меркапто-5-метил-2-пиперидин-4-илметил-гексановая кислота

а) 4-Гидроксиметил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

К раствору 4-(гидроксиметил)пиперидина (5,00 г, 43,41 ммоль в THF/H2O (1:1, 120 мл)) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (9,47 г, 43,41 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь затем вливали в Н2О (500 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×250 мл). Органические слои объединяли и промывали водой. Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали, а затем концентрировали при пониженном давлении с получением 4-гидроксиметил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (9,01 г, 96%).

б) 4-Бромметил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

К раствору 4-гидроксиметил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (8,75 г, 40,64 ммоль) в диэтиловом эфире (200 мл) при 0°С в атмосфере азота добавляли трифенилфосфин (21,32 г, 81,28 ммоль) и тетрабромид углерода (26,96 г, 81,28 ммоль). Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в атмосфере азота в течение 48 часов. Реакционную смесь фильтровали через слой Celite, и органический фильтрат промывали 5% Nа2S2O3, водой, рассолом и сушили. Смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (этилацетат/гексан, 1:9) с получением 4-бромметил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (8,26 г, 73%).

в) 4-[2-трет-Бутоксикарбонил-2-(диэтокси-фосфорил)-этил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

трет-Бутилдиэтилфосфоноацетат (75,0 г, 297,32 ммоль) добавляли по каплям к суспензии гидрида натрия (8,03 г, 334,58 ммоль) в DMF (450 мл) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0°С в течение 0,5 часов и при комнатной температуре в течение 0,5 часа. 4-Бромметил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (20,68 г, 74,34 ммоль) в DMF (50 мл) добавляли по каплям к реакционной смеси, и реакционную смесь нагревали до 60°С и перемешивали в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, вливали в Н2 О и экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли и промывали водой. Органический слой сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (этилацетат/гексан, 3:7) с получением 4-[2-трет-бутоксикарбонил-2-(диэтокси-фосфорил)-этил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира и непрореагировавшего трет-бутилдиэтилфосфоноацетата. Согласно ВЭЖХ продукт имел чистоту 47%. Этот продукт затем очищали вакуумной дистилляцией до чистоты 77%. Эту смесь использовали в следующей реакции.

г) 4-(2-трет-Бутоксикарбонил-5-метил-гекс-2-енил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

4-[2-трет-Бутоксикарбонил-2-(диэтокси-фосфорил)-этил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (8,1 г) в 20 мл DME (1,2-диметоксиэтане) добавляли по каплям к суспензии гидрида натрия (1,04 г, 43,13 ммоль) в DME (20 мл) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 0,75 часа, и к смеси добавляли по каплям изовалеральдегид (7,76 г, 90,1 ммоль). Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 48 часов. Смесь разбавляли эфиром и промывали водой. Органический слой сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 9,4 г желтого масла. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (этилацетат/гексан, 1:50) с получением 4-(2-трет-бутоксикарбонил-5-метил-гекс-2-енил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (1,53 г, 24%) для двух реакций.

д) 4-[2-трет-Бутоксикарбонил-3-(4-метокси-бензилсульфанил)-5-метил-гексил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Раствор 4-(2-трет-бутоксикарбонил-5-метил-гекс-2-енил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (2,0 г, 5,24 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли к смеси карбоната калия (0,54 г, 3,93 ммоль) и 4-метокси-серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708-толуолтиола (1,17 г, 10,48 ммоль) в DMF (50 мл) в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 часов и оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Реакционную смесь затем вливали в Н2O и экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли и промывали водой. Органический слой сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 3,76 г неочищенного вещества. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (этилацетат/гексан, 1:10) с получением 4-[2-трет-бутоксикарбонил-3-(4-метокси-бензилсульфанил)-5-метил-гексил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (1,77 г, 63%).

е) 3-Меркапто-5-метил-2-пиперидин-4-илметил-гексановая кислота

Смесь Н2O (2,6 мл) и TFA (26 мл) замораживали, а затем оставляли нагреваться до комнатной температуры в атмосфере азота. Добавляли 4-[2-трет-бутоксикарбонил-3-(4-метокси-бензилсульфанил)-5-метил-гексил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (2,62 г, 4,89 ммоль), и эту смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 часов. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией с обращенной фазой (MeOH/H2O, 3:2) с получением указанного в заголовке соединения в виде TFA соли (0,40 г, 22%).

1H ЯМР (300 МГц) (CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 0.88 (d), 0.94 (d), 1.43 (m), 1.70 (br), 1.94 (m), 2.48 (m), 2.90 (m), 2.99 (m), 3.34 (m).

MS (+) 260,2 (M-TFA).

Пример 4

3-Меркапто-4-фенил-2-пиперидин-4-илметил-масляная кислота

а) 4-(2-трет-Бутоксикарбонил-4-фенил-бут-2-енил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Раствор 4-[2-трет-бутоксикарбонил-2-(диэтокси-фосфорил)-этил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (3,0 г) в DME (8 мл) добавляли по каплям к суспензии гидрида натрия (0,26 г, 10,51 ммоль) в DME (8 мл) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 0,75 часов. Фенилацетальдегид (5,26 г, 43,81 ммоль) добавляли по каплям к смеси при 0°С. Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов. Смесь разбавляли эфиром и промывали водой. Органический слой сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 8,6 г желтого масла. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (этилацетат/гексан, 1:50серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 22447081:10) с получением 4-(2-трет-бутоксикарбонил-4-фенил-бут-2-енил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (1,32 г, выход 62% для двух реакций).

б) 4-[2-трет-Бутоксикарбонил-3-(4-метокси-бензилсульфанил)-4-фенил-бутил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

4-(2-трет-Бутоксикарбонил-4-фенил-бут-2-енил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (0,8 г, 1,93 ммоль) в DMF (10 мл) добавляли к суспензии карбоната калия (0,20 г, 1,44 ммоль) и 4-метокси-серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708-толуолтиола (0,54 мл, 3,85 ммоль) в DMF (10 мл) в атмосфере азота. Смесь нагревали до 75°С в течение 24 часов и оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Реакционную смесь затем вливали в Н 2O и экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли и промывали водой. Органический слой сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1,8 г неочищенного вещества. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (этилацетат/гексан, 1:10) с получением 4-[2-трет-бутоксикарбонил-3-(4-метокси-бензилсульфанил)-4-фенил-бутил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,55 г, 50%).

в) 3-Меркапто-4-фенил-2-пиперидин-4-илметил-масляная кислота

Смесь H2O (0,65 мл) и TFA (6,5 мл) замораживали, а затем оставляли нагреваться до комнатной температуры в атмосфере азота. Добавляли 4-[2-трет-бутоксикарбонил-3-(4-метокси-бензилсульфанил)-4-фенил-бутил]-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (0,65 г, 1,14 ммоль), и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 часов. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией с обращенной фазой (MeOH/H2O, 1:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде TFA соли (0,27 г, 58%).

1H ЯМР (300 МГц) (ДМSO): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.22 (m), 1.49 (m), 1.67 (br), 2.21 (d), 2.98 (m), 7.25 (m, 5H), 8.27 (br), 8.57 (br), 12.59 (br).

MS (+) 294,3 (M-TFA).

Пример 5

2-(2-Амино-пиридин-4-илметил)-3-меркапто-пропионовая кислота

а) N-(4-Метил-пиридин-2-ил)-ацетамид

2-Амино-4-метилпиридин (99,0 г, 91,5 ммоль) в уксусном ангидриде (250 мл) нагревали до 70°С в течение двух часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли диэтиловый эфир (100 мл). Продукт кристаллизовали в виде белых игольчатых кристаллов. После фильтрации и сушки в вакууме получили N-(4-метил-пиридин-2-ил)-ацетамид (130 г, 95%).

б) 2-Ацетиламино-изоникотиновая кислота

Смесь N-(4-метил-пиридин-2-ил)-ацетамида (40,0 г, 0,26 ммоль) и воды (400 мл) нагревали при 90°С, пока раствор не становился гомогенным. Осторожно маленькими порциями добавляли КМnO 4 (100 г, 0,62 ммоль) при интенсивном механическом перемешивании в течение 2 часов. Реакционную смесь выдерживали при 90-95°С в течение еще 3 часов, а затем фильтровали через Celite, пока она еще была горячей. Фильтрат концентрировали до приблизительно 100 мл, и добавляли концентрированную HCl, чтобы довести рН до приблизительно 4. Реакционную колбу охлаждали в ледяной бане, и белое твердое вещество отфильтровывали. Кристаллы промывали холодной водой и хлороформом и сушили в вакууме с получением 2-ацетиламино-изоникотиновой кислоты (12,0 г, 25%).

в) 2-Амино-изоникотиновой кислоты этиловый эфир

2-Ацетиламино-изоникотиновую кислоту (10,8 г, 60,0 ммоль) суспендировали в этаноле (150 мл) и добавляли BF3OEt2 (22 мл, 138 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи, и после охлаждения до комнатной температуры добавляли 10% NaHCO3 (250 мл). Продукт экстрагировали хлороформом, и объединенные органические экстракты промывали водой и сушили. После фильтрации и концентрирования получили 2-амино-изоникотиновой кислоты этиловый эфир (7,46 г, 79%) в виде бледно-желтых кристаллов.

г) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-изоникотиновой кислоты этиловый эфир

К раствору 2-амино-изоникотиновой кислоты этилового эфира (5,00 г, 30 ммоль) в трет-BuOH (45 мл) и ацетоне (15 мл) добавляли DMAP (50 мг, 0,41 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (16,4 г, 75,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и добавляли гексан (60 мл). Реакционную смесь охлаждали в холодильнике в течение 3 часов и фильтровали с получением 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-изоникотиновой кислоты этилового эфира (8,71 г, 79%).

д) (4-Гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

Раствор 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-изоникотиновой кислоты этилового эфира (35,0 г, 95,5 ммоль) в THF (350 мл) обрабатывали LiAlH4 (7,25 г, 191 ммоль) и кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа в атмосфере азота. Реакционную смесь аккуратно выливали на колотый лед, и продукт экстрагировали несколько раз СНСl3 и СНСl3:МеОН (9:1). Объединенные органические экстракты сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (4-гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (18,5 г, 86%) в виде бледно-желтого твердого вещества.

е) (4-Бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

(4-Гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (8,00 г, 35,6 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (150 мл) и обрабатывали РРh 3 (11,2 г, 42,8 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную колбу охлаждали в ледяной бане и небольшими порциями добавляли СВr 4 (14,2 г, 42,8 ммоль). Ледяную баню удаляли через 30 минут, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и добавляли ацетонитрил (50 мл). Реакционную колбу помещали в холодильник на 3 часа, и осадок отфильтровывали и промывали холодным ацетонитрилом. Белое твердое вещество сушили в вакууме с получением (4-бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (8,38 г, 82%).

ж) 2-(2-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир.

К раствору NaH (80%, 0,17 г, 4,00 ммоль) в THF (5 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляли диэтилмалонат (0,64 г, 4,00 ммоль). После перемешивания смеси в течение 15 минут эту смесь добавляли к нагретой до температуры дефлегмации смеси (4-бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (1,00 г, 3,48 ммоль) в THF (10 мл), и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. Смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток распределяли между водой и хлороформом. Органический слой промывали водой и рассолом и сушили. После фильтрации и выпаривания растворителя неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (MeOH/CH2Cl2 , 1:100) с получением 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,80 г, 55%).

з) 2-(2-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (0,19 г, 3,43 ммоль) в этаноле (5 мл) добавляли к раствору 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,20 г, 3,27 ммоль) в этаноле (5 мл) и метиленхлориде (5 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. Смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли воду. Водный слой промывали диэтиловым эфиром, подкисляли до рН 4 1 М HCl и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали водой, рассолом и сушили. После фильтрации и выпаривания в вакууме неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (CH3OH/CH 2Cl2, 1:20) с получением 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,90 г, 81%).

и) 2-(2-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир

Раствор диэтиламина (0,26 г, 2,67 ммоль) в метиленхлориде (4 мл) добавляли к смеси 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,90 г, 2,66 ммоль) и 37% водного раствора формальдегида (0,24 г, 3,00 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре, выливали на лед с водой и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали 5% NаНСО3 и сушили. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (1% метанол в CH2Cl 2) с получением 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,58 г, 71%).

к) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(2-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Раствор 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,48 г, 1,57 ммоль) и триэтиламина (0,17 г, 1,64 ммоль) добавляли к тиоуксусной кислоте (3 мл) при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Смесь выливали на ледяную воду и экстрагировали CH2Cl2. Органическую фазу промывали насыщенным NaHCO3 (водный) и сушили. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (2,5%-ный МеОН в CH2Cl2 ) с получением 2-ацетилсульфанилметил-3-(2-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (0,60 г, 100%).

л) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(2-амино-пиридин-4-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

TFA (0,5 мл) добавляли к раствору 2-ацетилсульфанилметил-3-(2- трет-бутоксикарбониламино-пиридин-4-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (50 мг, 0,13 ммоль) в метиленхлориде в атмосфере аргона. Раствор перемешивали в течение 60 минут и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-ацетилсульфанилметил-3-(2-амино-пиридин-4-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (52 мг, 100%).

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.15 (t, 3H), 2.32 (s, 3Н), 2.73-2.83 (m, 2H), 2.86-2.93 (m, 1Н), 3.01-3.07 (dd, 1H), 3.12-3.18 (dd, 1Н), 4.03-4.12 (m, 2H), 6.39 (s, 1H), 6.43 (d,1H), 7.77 (d,1H).

м) 2-(2-Амино-пиридин-4-илметил)-3-меркапто-пропионовая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(2-амино-пиридин-4-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (52 мг, 0,13 ммоль) растворяли в концентрированной HCl (2 мл) в атмосфере аргона. Раствор нагревали до температуры дефлегмации в течение 1 часа. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (32 мг, 100%).

1H ЯМР (500 МГц, CD 3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.70 (bs, 2H), 2.85-3.0 (m, 3Н), 6.76 (bs, 1H), 6.81 (bs, 1H), 7.67 (bs, 1H).

MS(+) 213(M+1).

Пример 6

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

а) 6-Аминоникотиновой кислоты этиловый эфир

2-Амино-5-пиридинкарбоновую кислоту (25,0 г, 181 ммоль) суспендировали в этаноле (190 мл) и добавляли SOCl2 (15 мл, 206 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 10 часов и добавляли еще SOCl2 (16 мл). Через 3 суток кипячения с обратным холодильником (и добавления еще SOCl2 (10 мл) каждые сутки) реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли диэтиловый эфир. После 24 часов при -20°С смесь фильтровали. Неочищенную соль растворяли в метаноле (214 мл) и добавляли раствор NaOH (40,0 г, 23,5 ммоль) в метаноле (90 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа и добавляли THF (270 мл). Реакционную смесь фильтровали через набивку из диоксида кремния (THF/MeOH) и концентрировали при пониженном давлении с получением 6-амино-никотиновой кислоты этилового эфира (36,2 г, 97%).

б) 6-трет-Бутоксикарбониламино-никотиновой кислоты этиловый эфир

К раствору 6-амино-никотиновой кислоты этилового эфира (36,0 г, 217 ммоль) в трет-BuOH (308 мл) и ацетоне (103 мл) добавляли DMAP (0,53 г, 4,34 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (72,0 г, 330 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов, затем добавляли еще ди-трет-бутилдикарбонат (2,60 г). После 10 часов перемешивания при комнатной температуре добавляли гексан (470 мл). Реакционную смесь охлаждали до -20°С в течение 2 часов и фильтровали. Фильтрат промывали смесью гексан/дихлорметан (3:1) и сушили в вакууме с получением 6-трет-бутоксикарбониламино-никотиновой кислоты этилового эфира (40,5 г, 70%).

в) (5-Гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

К перемешиваемому раствору 6-трет-бутоксикарбониламино-никотиновой кислоты этилового эфира (3,50 г, 13,1 ммоль) в THF (20 мл) в атмосфере азота добавляли LiAlH4 (0,91 г, 24,0 ммоль) в THF (20 мл) за промежуток времени 2 часа. Реакционную смесь перемешивали в течение 6 часов, затем добавляли (осторожно) NH4Cl (насыщенный) до тех пор, пока раствор не станет нейтральным. Смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (5-гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (2,00 г, 68%).

г) (5-Бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

Трифенилфосфин (8,70 г, 33,1 ммоль) и тетрабромид углерода (17,0 г, 51,2 ммоль) добавляли к суспензии (5-гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (7,00 г, 31,2 ммоль) в CH2Cl 2 (200 мл) при комнатной температуре. Перемешивание продолжали в течение 5 часов, затем выпаривали растворитель. Добавляли ацетонитрил (200 мл), и смесь охлаждали до -20°С в течение 2 часов. Смесь затем фильтровали, и кристаллический остаток промывали холодным ацетонитрилом (2×10 мл) с получением (5-бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (5,96 г, 67%).

д) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К суспензии NaH (0,49 г, 16,3 ммоль, 80%) в THF (15 мл) при 0°С добавляли диэтилмалонат (2,61 г, 16,3 ммоль). Смесь перемешивали в течение 15 минут, а затем добавляли по каплям к нагретой до температуры дефлегмации смеси (5-бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (3,90 г, 13,6 ммоль) в THF (25 мл), и полученный раствор кипятили с обратным холодильником в течение 15 минут. После выпаривания растворителя неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (метанол/СН2Сl2, 1:100 2,5:100) с получением 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (2,18 г, 44%).

е) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (0,37 г, 6,54 ммоль) в этаноле (5 мл) добавляли к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (2,18 г, 5,95 ммоль) в этаноле (25 мл) и метиленхлориде (10 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. Эту смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток растворяли в воде. Водный слой промывали эфиром, подкисляли до рН 4 1 М HCl и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали водой, рассолом и сушили. После фильтрации и концентрирования при пониженном давлении неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (метанол/СН 2Сl2, 1:20) с получением 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,00 г, 50%).

ж) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,29 г, 3,00 ммоль), воду (2 мл) и метиленхлорид (2 мл) добавляли к смеси 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,00 г, 2,96 ммоль) и 37% водного раствора формальдегида (0,25 г, 3,05 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре, а затем выливали на лед с водой и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали 5% NаНСО3 и сушили. После фильтрации и концентрирования при пониженном давлении получали 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир (0,75 г, 83%).

з) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир (0,49 г, 1,60 ммоль) и триэтиламин (0,17 г, 1,64 ммоль) добавляли к тиоуксусной кислоте (3 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. Эту смесь выливали на лед с водой и экстрагировали СН2 Сl2. Органическую фазу промывали насыщенным NaHCO 3 и сушили. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (МеОН/СН2Сl2, 2,5:100) с получением 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (0,36 г, 61%).

и) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

TFA (0,5 мл) добавляли к раствору 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (100 мг, 0,26 ммоль) в метиленхлориде (2 мл) в атмосфере аргона. Раствор перемешивали в течение 60 минут и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (104 мг, 100%).

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.21 (t, 3H), 2.33 (s, 3Н), 2.78-2.97 (m, 3H), 3.05-3.13 (m, 1Н), 3.14-3.21 (m, 1Н), 4.08-4.15 (m, 2Н), 6.99 (d, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.85 (d, 1Н).

к) 3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (38 мг, 0,096 ммоль) растворяли в концентрированной HCl (2,0 мл) в атмосфере аргона. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем нагревали до температуры дефлегмации в течение 1 часа. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение (25,7 мг, 100%) в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, СD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.74-2.78 (m, 2Н), 2.84-2.94 (m, 3H), 7.02 (d, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.89 (d, 1H).

MS(+) 213(M+1).

Пример 7

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-2-метил-пропионовая кислота

а) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-метил-малоновой кислоты трет-бутилового эфира этиловый эфир

Раствор трет-бутилэтилметилмалоната (457 г, 2,26 ммоль) в DMF (4 мл) добавляли по каплям к суспензии NaH (90 мг, 2,26 ммоль, 60% в масле) в DMF (4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 минут. Добавляли раствор (5-бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (500 мг, 1,74 ммоль) в DMF (2,5 мл), и эту реакционную смесь перемешивали в течение 70 минут. Добавляли ЕtOАс, и смесь промывали водой и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После хроматографии (гептан/ЕtOАс, 3:1 1:3) получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-метил-малоновой кислоты трет-бутилового эфира этиловый эфир (437 мг, выход 61%).

б) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-метил-малоновой кислоты моно-трет-бутиловый эфир

1 М NaOH (2 мл) добавляли к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-метил-малоновой кислоты трет-бутилового эфира этилового эфира (0,42 г, 1,03 ммоль) в THF/EtOH (4 мл, 1:1). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 16 часов. Добавляли CH2Cl2, и эту смесь промывали 0,5 М НСl и рассолом и сушили. После концентрирования при пониженном давлении получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-метил-малоновой кислоты моно-трет-бутиловый эфир (348 мг, 89%).

в) 3-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-гидроксиметил-2-метил-пропионовой кислоты трет-бутиловый эфир

Метилхлорформиат (75 мкл, 0,92 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-метил-малоновой кислоты моно-трет-бутилового эфира (348 мг, 0,915 ммоль) и Et 3N (123 мкл, 0,92 ммоль) в THF (6 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 минут, фильтровали и добавляли по каплям к суспензии NaBH4 (39 мг, 1,04 ммоль) в THF (6 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре, добавляли 0,2 М HCl, затем ЕtOАс. Органическую фазу промывали рассолом и сушили. После концентрирования при пониженном давлении и последующей хроматографии (толуол/ЕtOАс, 3:1 1:3) получили 3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-гидроксиметил-пропионовой кислоты трет-бутиловый эфир (190 мг, 57%).

г) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты трет-бутиловый эфир

Диэтилазодикарбоксилат (160 мкл, 1,01 ммоль) добавляли по каплям к раствору 3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-гидроксиметил-пропионовой кислоты трет-бутилового эфира (180 мг, 0,49 ммоль) и трифенилфосфина (266 мг, 1,01 ммоль) в THF (6 мл), и эту реакционную смесь перемешивали в течение 5 минут. Добавляли тиолуксусную кислоту (96 мкл, 1,34 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов. После концентрирования при пониженном давлении и последующей хроматографии (толуол/ЕtOАс, 10:1 1:1) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты трет-бутиловый эфир (137 мг, 65%).

д) 3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-2-метил-пропионовая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты трет-бутиловый эфир (4 мг, 9.4 мкмоль) растворяли в концентрированной HCl в атмосфере аргона. Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (2,5 мг, 100%).

1H ЯМР (500 МГц, CD 3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.20 (s, 3H), 2.62 (d, 1H), 2.76-2.83 (m, 2H), 2.95 (d, 1Н), 6.94 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.80 (dd, 1H).

MS(+) 227 (M+1).

Пример 8

2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-2-меркаптометил-масляная кислота

а) [5-(5-Этил-2,2-диметил-4,6-диоксо-[1.3]диоксан-5-илметил)-пиридин-2-ил]-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

(5-Бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (1,0 г, 3,48 ммоль) добавляли к раствору 2,2-диметил-5-этил-1,3-диоксан-4,6-диона (600 мг, 3,48 ммоль) и триэтиламина (0,51 мл, 3,66 ммоль) в диметилсульфоксиде (40 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи и добавляли воду (100 мл). Отфильтровывали осадок и получали [5-(5-этил-2,2-диметил-4,6-диоксо-[1.3]диоксан-5-илметил)-пиридин-2-ил]-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (1,15 г, 87%).

б) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-этил-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор металлического натрия (140 мг, 6,08 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляли к раствору [5-(5-этил-2,2-диметил-4,6-диоксо-[1.3]диоксан-5-илметил)-пиридин-2-ил]-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (1,15 г, 3,04 ммоль) в этаноле (10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 90 минут, а затем добавляли метиленхлорид. Смесь промывали 0,5 М HCl, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-этил-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,05 г, 95%).

в) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-гидрокси-метил-масляной кислоты этиловый эфир

Метилхлорформиат (150 мкл, 1,95 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-этилмалоновой кислоты моноэтилового эфира (700 мг, 1,91 ммоль) и Et3 N (275 мкл, 1,97 ммоль) в THF (15 мл) при -20°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 50 минут, фильтровали и добавляли по каплям к суспензии NaBH4 (80 мг, 2,1 ммоль) в THF (15 мл) при -20°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Добавляли 0,2 М HCl, затем метиленхлорид. Органическую фазу промывали рассолом и сушили. После концентрирования при пониженном давлении с последующей хроматографией (толуол/ЕtOАс, 3:1 1:3) получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-гидроксиметил-масляной кислоты этиловый эфир (300 мг, 45%).

г) 2-Ацетилсульфанилметил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этиловый эфир

Диизопропилазокарбоксилат (296 мкл, 1,53 ммоль) добавляли по каплям к раствору трифенилфосфина (402 мг, 1,53 ммоль) в THF (4 мл) при 0°С в атмосфере аргона, и эту реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Раствор тиолуксусной кислоты (109 мкл, 1,53 ммоль) и 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-2-гидроксиметил-масляной кислоты этилового эфира (0,27 г, 0,77 ммоль) в THF (2 мл) добавляли по каплям в течение 10 минут. Реакционную смесь перемешивали в течение 60 минут при 0°С, а затем в течение 16 часов при комнатной температуре. После концентрирования при пониженном давлении с последующей хроматографией (гептан/ЕtOАс, 10:1 1:1) получили 2-ацетилсульфанилметил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этиловый эфир (193 мг, 61%).

д) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-2-меркаптометил-масляная кислота

2-Ацетилсульфанилметил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этиловый эфир (12,3 мг, 30 мкмоль) растворяли в концентрированной HCl (2 мл) в атмосфере аргона. Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 24 часов. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (8,3 мг, 100%).

1H ЯМР (500 МГц, CD 3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 0.91 (t, 3Н), 1.71 (m, 2Н), 2.68 (m, 2H), 2.92 (m, 2H), 6.96 (d, 1H), 7.65 (bs, 1Н), 7.82 (dd, 1H).

MS(-) 239 (M-1).

Пример 9

3-(6-Амино-5-метил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-2-метил-пропионовая кислота

а) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-3-метил-5-(2,2,5-триметил-4,6-диоксо-[1.3]диоксан-5-илметил)-пиридин

2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-бромметил-3-метил-пиридин (1,6 г, 4,0 ммоль) добавляли к раствору 2,2,5-триметил-1,3-диоксан-4,6-диона (630 мг, 4,0 ммоль) и триэтиламина (0,58 мл, 4,2 ммоль) в диметилсульфоксиде (40 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи и добавляли воду (100 мл). Смесь экстрагировали ЕtOАс, объединенные органические экстракты промывали водой и рассолом и сушили. После концентрирования при пониженном давлении получили неочищенный 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-метил-5-(2,2,5-триметил-4,6-диоксо-[1.3]диоксан-5-илметил)-пиридин (2,06 г).

б) 2-(6-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино1-5-метил-пиридин-3-ил-метил)-2-метил-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор металлического натрия (184 мг, 8,0 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляли к раствору неочищенного 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-метил-5-(2,2,5-триметил-4,6-диоксо-[1.3]диоксан-5-илметил)-пиридина (2,06 г, ~4,0 ммоль) в этаноле (20 мл) в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали в течение 60 минут, а затем добавляли метиленхлорид. Смесь промывали 0,5 М HCl и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино]-5-метил-пиридин-3-илметил)-2-метил-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,9 г).

в) 3-(6-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-2-гидроксиметил-2-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир

Метилхлорформиат (338 мкл, 4,4 ммоль) добавляли по каплям к раствору неочищенного 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-илметил)-2-метил-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,9 г) и Et3N (641 мкл, 4,6 ммоль) в THF (30 мл) при -20°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 50 минут, фильтровали и добавляли по каплям к суспензии NaBH4 (182 мг, 4,8 ммоль) в THF (30 мл) при -20°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре, добавляли 0,5 М HCl, а затем метиленхлорид. Органическую фазу промывали рассолом и сушили. После концентрирования при пониженном давлении с последующей хроматографией (толуол/ЕtOАс, 10:1 1:3) получили 3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-2-гидроксиметил-2-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир (885 мг, 49%).

г) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир

Диизопропилазокарбоксилат (755 мкл, 3,91 ммоль) добавляли по каплям к раствору трифенилфосфина (1,026 г, 3,91 ммоль) в THF (10 мл) при 0°С, и эту реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Раствор тиолуксусной кислоты (279 мкл, 3,91 ммоль) и 3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-2-гидроксиметил-2-метил-пропионовой кислоты этилового эфира (885 мг, 1,96 ммоль) в THF (5 мл) добавляли по каплям в течение 10 минут. Реакционную смесь перемешивали в течение 60 минут при 0°С, а затем в течение 16 часов при комнатной температуре. После концентрирования при пониженном давлении с последующей хроматографией (гептан/ЕtOАс, 10:1 1:3) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир с примесями (1,46 г).

д) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-5-метил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир

Неочищенный 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир (1,46 г) растворяли в TFA (5 мл) и перемешивали в течение 60 минут. После концентрирования при пониженном давлении с последующей хроматографией (толуол/EtOAc, 1:1 1:10 0:1) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-5-метил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир с небольшим количеством примесей (696 мг, 84%).

е) 3-(6-Амино-5-метил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-2-метил-пропионовая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-5-метил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир (17 мг, 40 мкмоль) растворяли в концентрированной HCl (2 мл) в атмосфере аргона. Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 150 минут. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (10,7 мг, 96%).

1H ЯМР (500 МГц, CD 3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.20 (s, 3H), 2.23 (s, 3Н), 2.61 (d, 1H), 2.79 (2d, 2H), 2.94 (d, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.69 (m, 1H).

MS(+) 241 (M+1).

Пример 10

3-Меркапто-2-[(пиперидин-4-карбонил)-амино]-пропионовая кислота

CH2Cl2 (70 мл) добавляли к 4-метокситритилхлоридной смоле (7 г, нагрузка L=0,91 ммоль/г, 6,37 ммоль) в атмосфере аргона, смолу оставляли набухать в течение 10 минут и добавляли 2-амино-3-меркапто-пропионовой кислоты этилового эфира HCl-соль (5,9 г, 32 ммоль). Затем добавляли TFA (70 мл) небольшими порциями за 10 минут. Взвесь встряхивали при комнатной температуре в течение 1 часа и концентрировали при пониженном давлении. Когда она становилась почти сухой, добавляли толуол (150 мл), и эту смесь снова концентрировали при пониженном давлении. Эту процедуру повторяли дважды. Теперь желтую смолу промывали DMF (3×60 мл), СН2Сl2 (2×60 мл), TEA: СН2Сl2 (1:1, 2×60 мл), CH 2Cl2 (2×60 мл), МеОН (2×60 мл) и сушили под вакуумом в течение ночи.

Чтобы вычислить нагрузку 2-амино-3-меркапто-пропионовой кислоты этилового эфира на смолу, 50 мг продукта обрабатывали 10% TFA в СН2Сl2 в течение 1 минуты, и эту процедуру повторяли 4 раза. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 2-амино-3-меркапто-пропионовой кислоты этилового эфира (9,8 мг), что указывает на нагрузку приблизительно 0,6 ммоль/г.

Раствор пиперидин-1,4-дикарбоновой кислоты моно-трет-бутилового эфира (28 мг, 0,12 ммоль) в DMF (1 мл) добавляли к смоле (100 мг, L=0,6 ммоль/г, 0,06 ммоль) пластмассовым шприцем, затем добавляли РуВОР (62 мг, 0,12 ммоль) в DMF (0,5 мл) и DIPEA (41 мкл, 0,24 ммоль). Реакционную смесь оставляли при комнатной температуре в течение 2 часов с периодическим перемешиванием, и процедуру повторяли еще раз. Затем смолу промывали DMF (2×2 мл), CH2Cl2 (2×2 мл), МеОН (2×2 мл), CH2Cl2 (2×2 мл) и THF (2×2 мл). THF (800 мкл) добавляли шприцем, и смолу оставляли набухать в течение 10 минут. Затем добавляли воду (250 мкл) и 10 М NaOH (50 мкл). Реакционную смесь оставляли стоять при комнатной температуре с периодическим перемешиванием. Смолу затем промывали смесью ТНР:вода (1:1, 2×2 мл), THF (2×2 мл), CH2 Cl2 (2×2 мл), МеОН (2×2 мл) и CH2 Cl2 (2×2 мл).

10% TFA в СН2Сl 2 (1 мл) добавляли шприцем, и через 5 минут раствор собирали в тарированной пробирке. Эту процедуру повторяли еще раз, и объединенные органические фазы концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде TFA соли (15,3 мг, 74%).

1H ЯМР (500 МГц, CD 3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.85-2.10 (m, 4H), 2.65-2.72 (m, 1H), 2.85-2.92 (m, 1H), 2.95-3.08 (m, 3Н), 3.40-3.47 (m, 2H), 4.55-4.60 (m, 1H).

Пример 11

2-[(Азетидин-2-карбонил)-амино]-3-меркапто-пропионовая кислота

Указанное в заголовке соединение получали из азетидин-1,2-дикарбоновой кислоты 1-трет-бутилового эфира способом, описанным в Примере 14. Выход: 13,8 мг (72%).

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.54-2.63 (m, 1H), 2.82-3.05 (m, 3Н), 3.93-4.15 (m, 2H), 4.66-4.71 (m, 1H), 5.05-5.10 (m, 1H).

Пример 12

3-Меркапто-2-[(пиперидин-3-карбонил)-амино]-пропионовая кислота

Указанное в заголовке соединение получали из пиперидин-1,3-дикарбоновой кислоты 1-трет-бутилового эфира способом, описанным в Примере 14. Выход: 15,1 мг (73%).

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.73-2.10 (m, 4H), 2.84-2.92 (m, 2H), 2.95-3.14 (m, 2H), 3.15-3.29 (m, 3Н), 4.56-4.62 (m, 1H).

Пример 13

2-[(Азетидин-3-карбонил)-амино1-3-меркапто-пропионовая кислота

Указанное в заголовке соединение получали из азетидин-1,3-дикарбоновой кислоты моно-трет-бутилового эфира способом, описанным в Примере 14. Выход: 13,5 мг (71%).

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.86-3.02 (m, 2H), 3.72-3.80 (m, 1H), 4.20-4.24 (d, 4H), 4.62-4.67 (m, 1H).

Пример 14

3-(6-Амино-5-метил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

а) 5-Бром-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-метил-пиридин

2-Амино-5-бром-3-метилпиридин (15,0 г, 80,2 ммоль) в трет-бутаноле обрабатывали ди-трет-бутилдикарбонатом (43,6 г, 200 ммоль) и DMAP (0,60 г, 4,91 ммоль). Реакционную смесь оставляли при температуре окружающей среды в течение ночи, а затем концентрировали при пониженном давлении. Добавляли гексан, и продукт выпадал в осадок в виде твердого вещества. После фильтрации получили 5-бром-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-метил-пиридин (22,0 г, 71%).

б) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-3-метилпиридин

Раствор 5-бром-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-метил-пиридина (26,0 г, 67,1 ммоль), трет-бутил-диметил-трибутилстаннанил-метокси-силана (47,6 г, 109 ммоль) и бис(трифенилфосфин)палладий(II)дихлорида (0,90 г, 1,42 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (80 мл) перемешивали при 90°С в течение двух суток. Смесь охлаждали до 0°С и добавляли диэтиловый эфир (200 мл), а затем насыщенный водный фторид калия (40 мл). Смесь интенсивно перемешивали в течение 30 минут и фильтровали. Органическую фазу промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гексан/EtOAc, 100:0 95:5) получили 2-[N,N-бис(трет-бутокси-карбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-3-метилпиридин (18,0 г, 59%).

в) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-3-метил-пиридин.

Тетрабутиламмония фторид (25,1 г, 79,6 ммоль) добавляли к раствору 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилокси-метил)-3-метилпиридина (18,0 г, 39,8 ммоль) в THF (150 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После концентрирования при пониженном давлении с последующей флэш-хроматографией (гексан/EtOAc, 50:50) получили 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-3-метилпиридин (8,0 г, 59%).

г) 5-Бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-метил-пиридин

Трифенилфосфин (7,43 г, 28,3 ммоль) и СВr4 (9,49 г, 28,6 ммоль) добавляли к раствору 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-3-метилпиридина (8,00 г, 23,6 ммоль) в дихлорметане (220 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов, а затем концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гексан/EtOAc, 80:20) получили 5-бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-метилпиридин (8,0 г, 77%).

д) 2-(6-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил-метил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К суспензии NaH (0,24 г, 6,0 ммоль, 60%) в DMF (5 мл) добавляли диэтилмалонат (0,91 мл, 6,0 ммоль), и эту смесь перемешивали в течение 15 минут. Добавляли раствор 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-бромметил-3-метил-пиридина (2,0 г, 5,0 ммоль) в DMF (5 мл), и полученный раствор перемешивали в течение 120 минут при 60°С. Добавляли этилацетат, и эту смесь промывали водой и рассолом и сушили. После выпаривания растворителя неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (СН3ОН/СН2Сl2, 1:100 1:20) с получением 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,2 г, 50%).

е) 2-(6-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил-метил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (154 мг, 2,75 ммоль) в этаноле (2 мл) добавляли к раствору 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,2 г, 2,50 ммоль) в этаноле (10 мл) и метиленхлориде (4 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. Смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток растворяли в воде. Добавляли этилацетат, и органический слой промывали 0,5 М HCl, водой, рассолом и сушили. После фильтрации и концентрирования при пониженном давлении получили неочищенный 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир (1,0 г, 88%).

ж) 2-(6-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил-метил)-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,26 г, 2,67 ммоль) добавляли к смеси 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,0 г, 2,2 ммоль) и 37% водного раствора формальдегида (0,24 г, 3,00 ммоль) в метиленхлориде (2 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре и добавляли этилацетат. Органический слой промывали водой и 5% NaHCO3 и сушили. После концентрирования при пониженном давлении с последующей флэш-хроматографией (толуол/этилацетат, 3:1 1:2) получили 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир (0,68 г, 73%).

з) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Триэтиламин (0,234 мл, 1,68 ммоль) добавляли к раствору 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,68 г, 1,61 ммоль) в тиоуксусной кислоте (3 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляли этилацетат, и органическую фазу промывали водой, насыщенным NaHCO3 и рассолом и сушили. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (толуол/этилацетат, 3:1 1:2) с получением чистого 2-ацетил-сульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (489 мг, 61%) и 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира с небольшим количеством примесей (0,34 г, 43%).

и) 3-(6-Амино-5-метил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (17 мг, 0,034 ммоль) растворяли в концентрированной HCl (3,0 мл). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение (8,9 мг, 100%) в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.26 (s, 3H), 2.72-2.75 (m, 2H), 2.83-2.91 (m, 3H), 7.60 (s, 1H), 7.77 (s, 1H).

MS (+) 227 (М+1).

Пример 15

3-(6-Амино-4-метил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

а) 2-Амино-5-бром-4-метилпиридин

2-Амино-4-метилпиридин (110 г, 1,02 моль) в бромоводородной кислоте (1 л, 48%) перемешивали при 70°С и по каплям добавляли раствор перекиси водорода (300 мл, 15%) за один час с такой скоростью, чтобы температура реакционной смеси оставалась 70-80°С. Смесь перемешивали в течение 90 минут при 70°С и выливали на колотый лед. рН доводили до значения 4-5 карбонатом натрия, и выпавшее в осадок твердое вещество (содержащее главным образом дибромированные продукты) отфильтровывали и отбрасывали. Потом рН поднимали до 9, и выпавший в осадок продукт собирали фильтрацией. После перекристаллизации из толуола получили 2-амино-5-бром-4-метилпиридин (76,3 г, 40%).

б) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-бром-4-метилпиридин

2-Амино-5-бром-4-метилпиридин (5,70 г, 30,5 ммоль) в хлороформе обрабатывали ди-трет-бутилдикарбонатом (20,0 г, 91,60 ммоль) и DMAP (0,60 г, 4,91 ммоль). Реакционную смесь оставляли стоять при температуре окружающей среды в течение ночи, а затем концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гексан/EtOAc, 95:5) получили 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-бром 4-метилпиридин (8,02 г, 68%).

в) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-4-метилпиридин

Раствор 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-бром-4-метил-пиридина (15,0 г, 38,70 ммоль), трет-бутил-диметил-трибутилстаннанилметокси-силана (25,4 г, 58,3 ммоль) и бис(трифенилфосфин)палладий(II)дихлорида (0,90 г, 1,42 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (50 мл) перемешивали при 90°С в течение двух суток. Эту смесь охлаждали до 0°С и добавляли диэтиловый эфир (200 мл), а затем насыщенный водный фторид калия (40 мл). Смесь интенсивно перемешивали в течение 30 минут и фильтровали. Органическую фазу промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гексан/EtOAc, 95:5) получили 2-[N,N-бис(трет-бутокси-карбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-4-метилпиридин (10,0 г, 57%).

г) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-4-метил-пиридин

Тетрабутиламмония фторид (13,9 г, 44,1 ммоль) добавляли к раствору 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-4-метилпиридина (10,0 г, 24,3 ммоль) в THF (100 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. После концентрирования при пониженном давлении с последующей флэш-хроматографией (гексан/EtOAc, 50:50) получили 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-4-метилпиридин (5,0 г, 67%).

д) 5-Бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин

Трифенилфосфин (4,69 г, 17,9 ммоль) и СВr4 (4,89 г, 14,8 ммоль) добавляли к раствору 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-4-метилпиридина (5,00 г, 22,0 ммоль) в дихлорметане (130 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов, а затем разбавляли дихлорметаном. Органическую фазу промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гексан/EtOAc, 80:20) получили 5-бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метилпиридин (5,35 г, 90%).

е) 2-(6-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-ил-метил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К суспензии NaH (0,24 г, 6,0 ммоль, 60%) в DMF (5 мл) добавляли диэтилмалонат (0,91 мл, 6,0 ммоль), и эту смесь перемешивали в течение 15 минут. Добавляли раствор 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-бромметил-4-метил-пиридина (2,0 г, 5,0 ммоль) в DMF (5 мл), и полученный раствор перемешивали в течение 120 минут при 60°С. Добавляли этилацетат, и эту смесь промывали водой и рассолом, и сушили. После выпаривания растворителя неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (СН3ОН/СН2Сl2, 1:100 1:20) с получением чистой фракции 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,15 г, 48%) и загрязненной фракции 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,1 г).

ж) 2-(6-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-ил-метил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (141 мг, 2,52 ммоль) в этаноле (2 мл) добавляли к раствору 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,1 г, 2,29 ммоль) в этаноле (10 мл) и метиленхлориде (4 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. Смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток растворяли в воде. Добавляли этилацетат, и органический слой промывали 0,5 М HCl, водой, рассолом и сушили. После фильтрации и концентрирования при пониженном давлении получили неочищенный 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир (1,0 г, 97%).

з) 2-(6-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-ил-метил)-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,26 г, 2,67 ммоль) добавляли к смеси 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,0 г, 2,2 ммоль) и 37% раствора формальдегида (0,24 г, 3,00 ммоль) в метиленхлориде (2 мл) при 0°С. Эту смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре и добавляли этилацетат. Органический слой промывали водой и 5% NaHCO3 и сушили. После концентрирования при пониженном давлении и последующей флэш-хроматографии (толуол/этилацетат, 3:1серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 22447081:1) получили 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир (0,81 г, 88%).

и) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино]-4-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Триэтиламин (0,279 мл, 2,0 ммоль) добавляли к раствору 2-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,8 г, 1,9 ммоль) в тиоуксусной кислоте (3 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Добавляли этилацетат, и органическую фазу промывали водой, насыщенным NаНСО3 и рассолом и сушили. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (толуол/этилацетат, 3:1серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 22447081:2) с получением чистого 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (200 мг, 21%) и слегка загрязненного 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (0,68 г).

к) 3-(6-Амино-4-метил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-4-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (36 мг, 0,072 ммоль) растворяли в концентрированной HCl (3,0 мл). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение (18,7 мг, 98%) в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.42 (s, 3Н), 2.72-2.95 (m, 5Н), 6.81 (s, 1H), 7.58 (s, 1Н).

MS (+) 227 (M+1).

Пример 16

2-Меркаптометил-3-пиперидин-4-ил-масляная кислота

а) 4-Формил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Перйодинан (26,9 г, 63,5 ммоль) добавляли к раствору 1-трет-бутоксикарбонил-пиперидин-4-метанола (10,5 г, 48,8 ммоль) в метиленхлориде (200 мл), и эту смесь перемешивали в течение 90 минут. Добавляли диэтиловый эфир, и осадок удаляли экстракцией смесью 10% Nа2S2O3/насыщенный NaHCO3 (1:1, 300 мл). Органический слой промывали 0,5 М NaOH и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гексан/EtOAc, 8:2) получили 4-формил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (8,5 г, 81%).

б) 2-(1-трет-Бутоксикарбонил-пиперидин-4-илметилен)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К раствору диэтилмалоната (710 мкл, 4,7 ммоль) и 4-формил-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (1,0 г, 4,7 ммоль) в метиленхлориде (5 мл) добавляли пиперидин (46 мкл, 0.47 ммоль) и уксусную кислоту (27 мкл, 0,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 72 часов при комнатной температуре, а затем в течение 16 часов при 45°С. Добавляли EtOAc, и эту смесь промывали водой и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (гептан/EtOAc, 3:1 1:3) с получением 2-(1-трет-бутоксикарбонил-пиперидин-4-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,69 г, 40%).

в) 2-[1-(1-трет-Бутоксикарбонил-пиперидин-4-ил)-этил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир

MeLi (5,34 мл, 8,54 ммоль, 1,6 М в диэтиловом эфире) добавляли по каплям к суспензии Cul (0,74 г, 3,88 ммоль) в THF (5 мл) при -78°С в атмосфере аргона, и эту смесь перемешивали в течение 30 минут. Раствор 2-(1-трет-бутоксикарбонил-пиперидин-4-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,69 г, 1,94 ммоль) в THF (5 мл) добавляли по каплям, и эту реакционную смесь перемешивали в течение 120 минут при -78°С, а затем оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение 60 минут. Добавляли концентрированный водный NН4OН, и эту смесь затем экстрагировали EtOAc, промывали концентрированным водным NН4OН и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (гептан/EtOAc, 3:1 1:6) с получением 2-[1-(1-трет-бутоксикарбонил-пиперидин-4-ил)-этил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,39 г, 54%).

г) 2-[1-(1-трет-Бутоксикарбонил-пиперидин-4-ил)-этил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (84 мг, 1,16 ммоль) в ЕtOН (2 мл) добавляли по каплям к раствору 2-[1-(1-трет-бутоксикарбонил-пиперидин-4-ил)-этил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,39 г, 1,01 ммоль) в метиленхлориде (4 мл) и ЕtOН (10 мл) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли EtOAc, и эту смесь промывали 0.5 М HCl и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 416 мг неочищенного 2-[1-(1-трет-бутоксикарбонил-пиперидин-4-ил)-этил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира.

д) 4-(2-Этоксикарбонил-1-метил-аллил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Формальдегид (132 мг, 1,65 ммоль, 37% в воде) добавляли к раствору неочищенного 2-[1-(1-трет-бутоксикарбонил-пиперидин-4-ил)-этил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира (416 мг) в метиленхлориде (2 мл) при 0°С. Добавляли по каплям диэтиламин (153 мкл, 1,47 ммоль), и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли EtOAc, и эту смесь промывали водой и насыщенным NaHCO3, сушили и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (толуол/EtOAc, 3:1) с получением 4-(2-этоксикарбонил-1-метил-аллил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,18 г, выход 49% за две стадии).

е) 4-(3-Ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-1-метил-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

TEA (86 мкл, 0,617 ммоль) добавляли к раствору 4-(2-этоксикарбонил-1-метил-аллил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,18 г, 0,59 ммоль) в тиоуксусной кислоте (2 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 6 часов еще добавляли тиоуксусную кислоту (2 мл), и эту смесь перемешивали при 45°С в течение ночи. Добавляли EtOAc, и эту смесь промывали водой, насыщенным NаНСО3 и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (толуол/EtOAc, 5:1-1:1) с получением 4-(3-ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-1-метил-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира с небольшим количеством примесей (0,17 г, 75%).

ж) 2-Ацетилсульфанилметил-3-пиперидин-4-ил-масляной кислоты этиловый эфир

TFA (2 мл) добавляли к раствору 4-(3-ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-1-метил-пропил)-пиперидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,17 г, 0,439 ммоль) в метиленхлориде (10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 90 минут и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали, используя ВЭЖХ (10серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 224470850% ацетонитрил в воде, 0,1% TFA) с получением 2-ацетилсульфанилметил-3-пиперидин-4-ил-масляной кислоты этилового эфира (101 мг, 54%) в виде TFA соли.

з) 2-Меркаптометил-3-пиперидин-4-ил-масляная кислота

Концентрированную соляную кислоту (4 мл) добавляли к TFA соли 2-ацетилсульфанилметил-3-пиперидин-4-ил-масляной кислоты этилового эфира (0,101 г, 0,252 ммоль) в атмосфере аргона. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 часов, а затем концентрировали при пониженном давлении с получением диастереомерной смеси указанного в заголовке соединения (73,7 мг) в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, СD3OD) для главного диастереомера: серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.10 (d, 3H), 1.36-1.58 (m, 2H), 1.71-1.78 (m, 2H), 1.93-1.99 (m, 1H), 2.05-2.11 (m, 1H), 2.60-2.66 (m, 2H), 2.80-2.86 (m, 1H), 2.94-3.02 (m, 2H), 3.38-3.45 (m, 2H).

MS (+) 218 (M+1).

Пример 17

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-масляная кислота

а) (5-Формил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

(5-Гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (7,00 г, 31,2 ммоль) растворяли в сухом ДМSO (50 мл), и реакционную колбу погружали в водяную баню при 15°С. Добавляли TEA (13,1 мл, 94,0 ммоль), затем порциями добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (15,0 г, 94,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение еще 45 минут и выливали на колотый лед. Продукт экстрагировали диэтиловым эфиром, и объединенные органические экстракты промывали рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После перекристаллизации из смеси гексан/CH 2Cl2 получили (5-формил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (5,40 г, 78%) в виде белых кристаллов.

б) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметилен)-малоновой кислоты диэтиловый эфир.

К раствору диэтилмалоната (710 мкл, 4,7 ммоль) и (5-формил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (1,04 г, 4,7 ммоль) в смеси метиленхлорид/DMF (1:1, 5 мл) добавляли пиперидин (46 мкл, 0,47 ммоль) и уксусную кислоту (27 мкл, 0,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 72 часов при комнатной температуре, а затем в течение 16 часов при 45°С. Медленно добавляли гептан с получением 2-(6-трет-бутоксикарбонил-амино-пиридин-3-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,69 г, 40%) в виде серых кристаллов.

в) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир

MeLi (6,5 мл, 10,4 ммоль, 1,6 М в диэтиловом эфире) добавляли по каплям к взвеси Cul (0,9 г, 4,73 ммоль) в THF (28 мл) при -78°С в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Раствор 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,84 г, 2,3 ммоль) в THF (7 мл) добавляли по каплям, и эту реакционную смесь перемешивали в течение 180 минут при -78°С. Добавляли по каплям насыщенный водный NH 4OH, и эту смесь экстрагировали EtOAc. Органическую фазу промывали насыщенным водным NH4OH и NaCl, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (толуол/EtOAc, 3:1 1:6) получили 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир (0,723 г, 82,4%) в виде белого твердого вещества.

г) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (113,6 мг, 2,04 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли по каплям к раствору 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,7 г, 1,84 ммоль) в метиленхлориде (4 мл) и ЕtOН (10 мл) при 0°С в атмосфере аргона, и эту реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Добавляли 1 М КОН (100 мл), и эту смесь промывали метиленхлоридом. Водную фазу подкисляли до рН 2, используя 2 М HCl, и экстрагировали EtOAc. Органическую фазу сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира (423 мг, 65%).

д) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,153 мл, 1,473 ммоль) добавляли к раствору 2-[1 -(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира (423 мг, 1,2 ммоль) и формальдегида (132 мг, 1,626 ммоль, 36% в воде) в метиленхлориде (2 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли EtOAc, и раствор промывали водой, NaHCO3 и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (толуол/EtOAc, 3:1) получили 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-акриловой кислоты этиловый эфир (158 мг, 41%).

е) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-масляной кислоты этиловый эфир

TEA (0,076 мл, 0,542 ммоль) добавляли к раствору 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-этил]-акриловой кислоты этилового эфира (158 мг, 0,493 ммоль) в тиоуксусной кислоте (2 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь перемешивали при 45°С в течение ночи. Добавляли EtOAc, и раствор промывали NaHCO3 и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (толуол/EtOAc, 5:1серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 22447081:1) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-масляной кислоты этиловый эфир с небольшим количеством примесей (178 мг, 91%).

ж) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-пиридин-3-ил)-масляной кислоты этиловый эфир

TFA (2 мл) добавляли к раствору 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-масляной кислоты этилового эфира (178 мг, 0,449 ммоль) в метиленхлориде (2 мл). Смесь перемешивали в течение 60 минут и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (толуол/EtOAc, 1:6) получили не совсем чистый 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-пиридин-3-ил)-масляной кислоты этиловый эфир (176 мг, 95%). После дополнительной очиcтки ВЭЖХ (10серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 224470870% ацетонитрил в воде, 0,1% TFA) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-пиридин-3-ил)-масляной кислоты этиловый эфир (104 мг, 56%) в виде TFA соли.

з) 3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-масляная кислота

Концентрированную соляную кислоту (4 мл) добавляли к 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-амино-пиридин-3-ил)-масляной кислоты этиловому эфиру (104 мг, 0,253 ммоль) в атмосфере аргона. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 5 часов, а затем концентрировали при пониженном давлении с получением диастереомерной смеси указанного в заголовке соединения (61 мг, 92%) в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, D2O) для основного диастереомера: серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.26 (d, 3H), 2.49-2.53 (m, 2H), 2.64-2.77 (m, 1Н), 2.95-3.02 (m, 1H), 7.02 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.88 (m, 1Н).

MS (+) 227 (M+1).

Пример 18

3-(6-Амино-2-метил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

а) (5-Бром-6-метил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

5-Бром-6-метил-пиридин-2-иламин (25,0 г, 133,7 ммоль) в смеси THF/трет-бутанол (1:10, 550 мл) обрабатывали ди-трет-бутилдикарбонатом (39,3 г, 180,0 ммоль) и DMAP (2,40 г, 19,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов при 40°С и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (метиленхлорид) получили (5-бром-6-метил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (17,0 г, 44%).

б) [5-трет-Бутил-диметил-силанилоксиметил)-6-метил-пиридин-2-ил]-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

Раствор (5-бром-6-метил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (27,5 г, 95,8 ммоль), трет-бутил-диметил-трибутилстаннанил-метоксисилана (43,5 г, 100,2 ммоль) и бис(трифенилфосфин)палладий(II)дихлорида (1,00 г, 1,40 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (350 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 48 часов. Дополнительно бис(трифенилфосфин)палладий(II)дихлорид (1,00 г, 1,40 ммоль) добавляли каждые 12 часов. Смесь охлаждали до 0°С и добавляли диэтиловый эфир (300 мл), а затем насыщенный водный фторид калия (100 мл). Смесь интенсивно перемешивали в течение 60 минут и фильтровали. Органическую фазу промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (MeOH/CH 2Cl2, 1:99) получили 5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-6-метил-пиридин-2-ил]-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (15 г, 47%).

в) (5-Гидроксиметил-6-метил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

Тетрабутиламмония фторид (19,6 г, 62,4 ммоль) добавляли к раствору 5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-6-метил-пиридин-2-ил]-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (10,5 г, 31,23 ммоль) в THF (100 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду, и продукт концентрировали хлороформом. Органическую фазу сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (MeOH/CH2Cl2, 2,5:77,5) получили 5-гидроксиметил-6-метил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (6,0 г, 81%).

г) 5-Бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин

Трифенилфосфин (9,83 г, 37,5 ммоль) и СВr4 (17,7 г, 53,5 ммоль) добавляли к раствору (5-гидроксиметил-6-метил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (8,50 г, 35,7 ммоль) в дихлорметане (30 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре, а затем промывали дихлорметаном. Органическую фазу промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (СН2 Сl2 получили 5-бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин (4,05 г, 38%).

д) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир.

Раствор диэтилмалоната (1,21 мл, 7,97 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли по каплям к суспензии NaH (348 мг, 7,97 ммоль, 55% в минеральном масле) в DMF (5 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали в течение 45 минут и добавляли по каплям раствор (5-бромметил-6-метил-пиридин-2-ил)карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (2,0 г, 6,64 ммоль) в DMF (5 мл). Смесь перемешивали в течение ночи (0°С-20°С). Добавляли EtOAc, и раствор промывали водой и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гептан/EtOAc, 4:1) получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир (1,87 г, 74%).

е) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (300 мг, 5,35 ммоль) в ЕtOН (4 мл) добавляли к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,85 г, 4,86 ммоль) в смеси ЕtOН/метиленхлорид (2:1, 21 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 40 часов при комнатной температуре и добавляли EtOAc. Смесь промывали 0,5 М HCl и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,45 г).

ж) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (359 мг, 4,90 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,44 г, 4,09 ммоль) и формальдегида (464 мг, 5,72 ммоль, 37% в воде) в метиленхлориде (35 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли метиленхлорид, и раствор промывали Na2CO3 и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (1,03 г, 79%).

з) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

TEA (0,556 мл, 3,99 ммоль) добавляли к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (1,23 г, 3,84 ммоль) в тиоуксусной кислоте (10 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 64 часов. Добавляли EtOAc, и раствор промывали Na2CO3 и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (толуол/EtOAc, 5:1серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 22447081:1) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (1,33 г, 87%).

и) 3-(6-Амино-2-метил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

Концентрированную соляную кислоту (2 мл) добавляли к 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-2-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловому эфиру (77 мг, 0,19 ммоль) в атмосфере аргона. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 110 минут, а затем концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (39 мг, 76%) в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.49 (s, 3H), 2.73-2.92 (m, 5H), 6.81 (d, 1H), 7.77 (d, 1Н).

MS (+) 227 (M+1).

Пример 19

2-Ацетилсульфанилметил-3-(2-амино-пиримидин-5-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

а) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-бромпиримидин

2-Амино-6-бромпиримидин (9,00 г, 51,7 ммоль) в смеси THF/трет-бутанол (1:1, 100 мл) обрабатывали ди-трет-бутилдикарбонатом (34,0 г, 156,0 ммоль) и DMAP (3,00 г, 24,5 ммоль). Реакционную смесь оставляли стоять при температуре окружающей среды в течение ночи и концентрировали при пониженном давлении. Остаток распределяли между дихлорметаном и водой и доводили рН до 4 1 М HCl. Раствор экстрагировали дихлорметаном, сушили и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт суспендировали в гексане и фильтровали с получением 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-бромпиримидина (15,0 г, 77%).

б) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-пиримидин

Раствор 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-бромпиримидина (16,0 г, 45,0 ммоль), трет-бутил-диметил-трибутилстаннанилметокси-силана (20,5 г, 47,1 ммоль) и бис(трифенилфосфин)палладий(II)дихлорида (1,00 г, 1,40 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (50 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Добавляли дополнительно бис(трифенилфосфин)палладий(II)дихлорид (1,00 г, 1,40 ммоль), и раствор кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. Смесь охлаждали до 0°С, и добавляли диэтиловый эфир (200 мл), затем насыщенный водный фторид калия (50 мл). Смесь интенсивно перемешивали в течение 60 минут и фильтровали. Органическую фазу промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (MeOH/CH2 Cl2, 1:99) получили 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-пиримидин (10,2 г, 55%).

в) 2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-пиримидин

Тетрабутиламмония фторид (15,3 г, 48,6 ммоль) добавляли к раствору 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-(трет-бутил-диметил-силанилокси-метил)-пиримидина (10,0 г, 24,3 ммоль) в THF (100 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду, и продукт экстрагировали хлороформом. Органическую фазу сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (MeOH/CH2Cl 2, 2,5:77,5) получили 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-пиримидин (4,20 г, 53%).

г) 5-Бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин

Трифенилфосфин (2,71 г, 10,73 ммоль) и СВr4 (4,89 г, 14,8 ммоль) добавляли к раствору 2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-гидроксиметил-пиримидина (3,20 г, 9,83 ммоль) в дихлорметане (30 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, а затем разбавляли дихлорметаном. Органическую фазу промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (CH2 Cl2) получили 5-бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин (2,55 г, 67%).

д) 2-(2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

Раствор диэтилмалоната (0,704 мл, 4,64 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли по каплям к суспензии NaH (200 мг, 4,64 ммоль, 55% в минеральном масле) в DMF (4 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут и по каплям добавляли раствор 5-бромметил-2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидина (1,5 г, 3,86 ммоль) в DMF (4 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Добавляли EtOAc, и эту смесь промывали водой и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гептан/EtOAc, 3:2) получили 2-(2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир (0,87 г, 40%).

е) 2-(2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (106 мг, 1,88 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли к раствору 2-(2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,80 г, 1,71 ммоль) в смеси EtOH/метиленхлорид (2:1, 12 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре и добавляли EtOAc. Смесь промывали 0,5 М HCl и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,67 г, 89%).

ж) 2-(2-[N,N-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,124 г, 1,69 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2-(2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,62 г, 1,41 ммоль) и формальдегида (160 мг, 2,0 ммоль, 37% в воде) в метиленхлориде (15 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли EtOAc, и раствор промывали водой, NаНСО3 и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 2-(2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,54 г, 94%).

з) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино]-пиримидин-5-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

TEA (0,189 мл, 1,35 ммоль) добавляли к раствору 2-(2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,53 г, 1,30 ммоль) в тиоуксусной кислоте (13 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 часов. Добавляли EtOAc, и эту смесь промывали Nа2СО3 и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (гептан/EtOAc, 5:1серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 22447084:1) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(2-[N,N-бис-(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (0,56 г, 89%).

и) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(2-амино-пиримидин-5-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

TFA (1,5 мл) добавляли к раствору 2-ацетилсульфанилметил-3-(2-[N,N-бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-пиримидин-5-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (225 мг, 0,46 ммоль) в метиленхлориде (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 120 минут и концентрировали при пониженном при давлении с получением указанного в заголовке соединения (172 мг, 94%) в виде TFA соли.

1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.22 (t, 3Н), 2.35 (s, 3Н), 2.80-3.00 (m, 3H), 3.00-3.22 (m, 2Н), 4.13 (q, 2H), 8.43 (s, 2H).

Пример 20

2-(6-Амино-пиримидин-3-илметил)-3-меркапто-масляная кислота

а) 3-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-(диэтокси-фосфорил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

К суспензии NaH (1,17 г, 60% в минеральном масле, 29,3 ммоль) в DMF (70 мл) добавляли триэтилфосфоноацетат (6,01 г, 26,82 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 0°С в течение 15 минут. К реакционной смеси добавляли (5-бромметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (7,0 г, 24,38 ммоль) при 0°С, и эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакцию гасили медленным добавлением насыщенного водного хлорида аммония (70 мл). Смесь экстрагировали EtOAc, промывали рассолом и сушили. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (CH2Cl2/EtOAc, 1:0 1:1 0:1) с получением 3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-(диэтокси-фосфорил)-пропионовой кислоты этилового эфира (5,1 г, 50%).

б) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-бут-2-еновой кислоты этиловый эфир

К суспензии NaH (278,8 мг, 60% в минеральном масле, 6,97 ммоль) в THF (25 мл) при 0°С добавляли раствор 3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-(диэтокси-фосфорил)-пропионовой кислоты этилового эфира (2,5 г, 5,81 ммоль) в THF (30 мл). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 0°С в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли ацетальдегид (512 мг, 11,6 ммоль) по каплям при 0°С. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры, а затем перемешивали в течение 16 часов. В реакционный сосуд добавляли ацетальдегид (2,0 г), и реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение еще 16 часов. Реакцию гасили медленным добавлением насыщенного водного хлорида аммония (30 мл). Смесь экстрагировали EtOAc, промывали рассолом и сушили с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (EtOAc/гексан, 1:8) с получением этил 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-бут-2-еновой кислоты этилового эфира в виде смеси изомеров (1,1 г, 60%).

в) 3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этиловый эфир

К тиолуксусной кислоте (15 мл) добавляли Et3N (1,5 г, 14,8 ммоль) и этил 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-бут-2-еновой кислоты этиловый эфир (920 мг, 2,9 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 40-45°С в течение 7 суток (дополнительно тиолуксусную кислоту (1,5 мл) добавляли к реакционной смеси каждые двое суток). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем разбавляли EtOAc (50 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным NaHCO3, рассолом и сушили. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали затем на трех хроматографических колонках (CH2Cl2, EtOAc/гексан, 1:5 и ацетон/гексан, 1:8) с получением 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира в виде диастереомерной смеси (780 мг, 68%). Диастереомерную смесь разделяли, используя препаративную хиральную хроматографию, согласно методике, описанной ниже, с получением четырех изомеров 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/А, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Б, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил-метил)-масляной кислоты этилового эфира/В и 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Г.

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил-метил)-масляной кислоты этиловый эфир/Г

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил-метил)-масляной кислоты этиловый эфир/Г выделяли из смеси 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/А, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутокси-карбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Б, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/В и 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутокси-карбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Г на колонке CHIRALCEL OJ, элюируя смесью изогексан:ацетонитрил:изопропиловый спирт:диэтиламин (99; 0,5; 0,5; 0,1). По данным ВЭЖХ с использованием колонки CHIRALPACK OJ, элюируемой смесью изогексан:этанол:диэтиламин (99; 1; 0,5), энантиомерный избыток составил более 99%.

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этиловый эфир/A

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил-метил)-масляной кислоты этиловый эфир/А выделяли из смеси 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/А, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутокси-карбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Б, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/В и 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутокси-карбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Г на колонке CHIRALCEL OJ, элюируя смесью изогексан:1-пропанол:диэтиламин (98; 2; 0,1). По данным ВЭЖХ с использованием колонки CHIRALPACK OJ, элюируемой смесью изогексан:этанол:диэтиламин (99; 1; 0,5), энантиомерный избыток составил более 99%.

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этиловый эфир/Б

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил-метил)-масляной кислоты этиловый эфир/Б выделяли из смеси 3-ацетил-сульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/А, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбонил-амино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Б, 3-ацетил-сульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/В и 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбонил-амино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Г на колонке CHIRALCEL OJ, элюируя смесью изогексан:1-пропанол:диэтиламин (99; 1; 0,5). По данным ВЭЖХ с использованием колонки CHIRALPACK OJ, элюируемой смесью изогексан:этанол:диэтиламин (99; 1; 0,5), энантиомерный избыток составил более 99%.

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил-метил)-масляной кислоты этиловый эфир/В

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил-метил)-масляной кислоты этиловый эфир/В выделяли из смеси 3-ацетил-сульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/А, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Б, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/В и 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Г на колонке CHIRALCEL AS, элюируя смесью гексан:этанол:диэтиламин (99:1:0,5). По данным ВЭЖХ с использованием колонки CHIRALPACK AS, элюируемой смесью изогексан:этанол:диэтиламин (99; 1; 0,5), энантиомерный избыток составил более 87%.

г) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-масляная кислота/А

Раствор 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/А (45 мг, 0,11 ммоль) в концентрированной HCl (2 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 28,4 мг указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (400 МГц, D 2О): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.89 (d, 1Н), 7.71 (s, 1H), 7.03 (d, 1H), 3.23-3.33 (m, 1H), 3.1-3.2 (m, 1H), 2.75-2.9 (m, 2H), 1.47 (d, 3H).

MS (+) 227 (M+1).

д) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-масляная кислота/Б

Раствор 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/Б (55 мг, 0,14 ммоль) в концентрированной HCl (2 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 39,4 мг указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (400 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.89 (d, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.03 (d, 1H), 3.23-3.33 (m, 1H), 3.1-3.2 (m, 1H), 2.75-2.9 (m, 2H), 1.47 (d, 3H).

MS (+) 227 (M+1).

е) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-масляная кислота/В

Раствор 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/В (9 мг, 0,02 ммоль) в концентрированной HCl (0,5 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 6,4 мг указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (400 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.82-7.9 (m, 1H), 7.67 (br s, 1H), 7.0 (d, 1H), 3.16-3.28 (m, 1H), 2.96-3.04 (m, 1H), 2.76-2.86 (m, 2H), 1.47 (d, 3H).

MS (+) 227 (M+1).

ж) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-масляная кислота/Г

Раствор 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-масляной кислоты этилового эфира/В (9 мг, 0,02 ммоль) в концентрированной HCl (0,5 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 6,8 мг указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (400 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.82-7.9 (m, 1H), 7.67 (br s, 1H), 7.0 (d, 1H), 3.16-3.28 (m, 1H), 2.96-3.04 (m, 1H), 2.76-2.86 (m, 2H), 1.47 (d, 3Н).

MS (+) 227 (M+1).

Пример 21

2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-пентановая кислота

а) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пент-2-еновой кислоты этиловый эфир

К раствору NaH (290,5 мг, 60% в минеральном масле, 7,5 ммоль) в THF (25 мл) при 0°С добавляли раствор 3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-(диэтокси-фосфорил)-пропионовой кислоты этилового эфира (2,5 г, 5,81 ммоль) в THF (30 мл). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 0°С в течение 1 часа. К реакционной смеси добавляли пропиональдегид (725 мг, 12,5 ммоль) по каплям при 0°С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 0°С в течение 16 часов. Добавляли пропиональдегид (2,5 г), и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 16 часов. Реакцию гасили медленным добавлением насыщенного NH4Cl (30 мл). Смесь экстрагировали EtOAc, промывали рассолом и сушили. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (EtOAc/гексан, 1:8) с получением 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пент-2-еновой кислоты этилового эфира в виде смеси изомеров (1,2 г, 60%).

б) 3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этиловый эфир

К тиолуксусной кислоте (15 мл) добавляли Еt3N (1,8 г, 17 ммоль) и 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пент-2-еновой кислоты этиловый эфир (1,1 г, 3,3 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 65°С в течение 8 суток (дополнительно тиолуксусную кислоту (1,5 мл) добавляли к реакционной смеси каждые двое суток). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем разбавляли EtOAc. Органический слой отделяли, промывали насыщенным NаНСО3, рассолом и сушили. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем очищали на двух хроматографических колонках (CH2 Cl2 и EtOAc/гексан, 1:5) с получением 350 мг смеси целевых продуктов и непрореагировавших исходных веществ. Неочищенный продукт далее очищали ВЭЖХ (EtOAc/гексан, 1:9), а затем колоночной хроматографией (ацетон/гексан, 1:8) с получением указанного в заголовке соединения в виде диастереомерной смеси (180 мг, 18%). Диастереомерную смесь 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира разделяли, используя препаративную хиральную хроматографию, согласно методике, описанной ниже, с получением четырех изомеров 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира/А, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира/Б, 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира/В и 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира/Г. Диастереомерную смесь разделяли на двух колонках CHIRALCEL OJ, которые были соединены одна с другой, элюируя смесью изогексан:изопропиловый спиртметанол (97:1:2). Энантиомерный избыток определяли посредством аналитической ВЭЖХ, используя две колонки CHIRALCEL OJ, которые были соединены одна с другой, элюируя смесью изогексан:изопропиловый спирт: метанол (97:1:2). Для 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира А-В энантиомерный избыток составил более 99%, а для 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира Г он составил 97%.

в) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-пентановая кислота/А

Раствор 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира/А (50,4 мг, 0,12 ммоль) в концентрированной НСl (2 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1,5 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 33,9 мг указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.87 (dd, 1Н), 7.67 (d, 1H), 7.0 (d, 1H), 3.02-3.16 (m, 2H), 2.79-2.87 (m, 2H), 1.79-1.88 (m, 1 Н), 1.53-1.64 (m, 1 Н), 1.07 (t, 3H).

MS (+) 241 (M+1).

г) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-пентановая кислота/Б

Раствор 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира/Б (51,6 мг, 0,13 ммоль) в концентрированной HCl (2 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1,5 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 34,7 мг указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.87 (dd, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.0 (d, 1H), 3.02-3.16 (m, 2H), 2.79-2.87 (m, 2H), 1.79-1.88 (m, 1H), 1.53-1.64 (m, 1H), 1.07 (t, 3H).

MS (+) 241 (M+1).

д) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-пентановая кислота/В

Раствор 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира/В (4,3 мг, 0,01 ммоль) в концентрированной HCl (2 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1,5 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 2,9 мг указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.86 (dd, 1H), 7.66 (br s, 1H), 7.0 (d, 1H), 2.94-3.04 (m, 2H), 2.74-2.9 (m, 2H), 1.88-1.97 (m, 1H), 1.55-1.66 (m, 1H), 1.05 (t, 3H).

MS (+) 241 (M+1).

e) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-пентановая кислота/Г

Раствор 3-ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пентановой кислоты этилового эфира/Г (19,2 мг, 0,05 ммоль) в концентрированной HCl (2 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1,5 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 12,9 мг указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.86 (dd, 1Н), 7.66 (br s, 1H), 7,0 (d, 1H), 2.94-3.04 (m, 2H), 2.74-2.9 (m, 2H), 1.88-1.97 (m, 1H), 1.55-1.66 (m, 1H), 1.05 (t, 3H).

MS (+) 241 (M+1).

Пример 22

3-(6-Амино-5-хлор-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

а) 6-Амино-5-хлор-никотиновой кислоты этиловый эфир

N-Хлорсукцинимид (21,7 г, 0,162 моль) добавляли к суспензии 6-амино-никотиновой кислоты этилового эфира (18,0 г, 0,108 моль) в ацетонитриле (270 мл), и эту смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в дихлорметане, промывали водой и сушили. После флэш-хроматографии (2,5%-ный МеОН в СН2Сl2) получили чистый 6-амино-5-хлор-никотиновой кислоты этиловый эфир (17.23 г, 79%).

б) 6-бис(трет-Бутоксикарбонил)-амино-5-хлор-никотиновой кислоты этиловый эфир

DMAP (0,11 г, 0,9 ммоль) и (Вос) 2O (21,54 г, 99 ммоль) добавляли к раствору 6-амино-5-хлор-никотиновой кислоты этилового эфира (9,0 г, 45 ммоль) в дихлорметане (250 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 24 часов. DMAP (0,02 эквивалента) и (Вос)2O (3×0,5 эквивалента) добавляли во время реакции. Реакционную смесь промывали водой и сушили. Неочищенный продукт промывали гексаном с получением чистого 6-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино-5-хлор-никотиновой кислоты этилового эфира (11,87 г, 66%).

в) (3-хлор-5-гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

LiAlH4 (2,4 г, 63,2 ммоль) добавляли порциями за промежуток времени 3,5 часа к раствору 6-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино-5-хлор-никотиновой кислоты этилового эфира (11,5 г, 28,6 ммоль) в THF (70 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем осторожно добавляли NH4Cl (насыщенный), затем воду. Раствор фильтровали, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного (3-хлор-5-гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (5,86 г, 79%).

г) (5-Бромметил-3-хлор-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

Трифенилфосфин (2,61 г, 9,7 ммоль), а затем тетрабромид углерода (4,58 г, 13,8 ммоль) добавляли к суспензии (3-хлор-5-гидроксиметил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (2,38 г, 9,2 ммоль) в CH2 Cl2 (60 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли ацетонитрил (40 мл), и эту смесь выдерживали до -20°С в течение ночи. Смесь затем фильтровали, и кристаллический остаток промывали холодным ацетонитрилом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и еще одну порцию бромида получали как описано выше. (5-Бромметил-3-хлор-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир (1,86 г, 63%) получили в виде белых кристаллов.

д) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

Диэтилмалонат (1,87 мл, 12.31 ммоль) добавляли к суспензии NaH (0,54 г, 12,31 ммоль, 55%) в сухом DMF (15 мл) при -8°С. Эту смесь перемешивали в течение 15 минут, а затем добавляли по каплям к раствору (5-бромметил-3-хлор-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (3,30 г, 10.26 ммоль) в сухом DMF (50 мл) при 0°С. Полученный раствор перемешивали в течение 40 минут при 0°С, а затем осторожно добавляли NH4 Cl (5 мл, насыщенный). Перемешивание при комнатной температуре в течение ночи и концентрирования при пониженном давлении дало остаток, который растворяли в смеси вода/СH2Сl 2. Водный слой экстрагировали CH2Cl2 , и объединенные органические экстракты сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (1% МеОН в CH2Cl2) получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир (2,45 г, 60%) в виде липкого прозрачного масла.

е) 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (0,44 г, 6,72 ммоль, 85%) в этаноле (5 мл) добавляли к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (2,45 г, 6,11 ммоль) в этаноле (25 мл) и метиленхлориде (10 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток растворяли в воде. Водный слой промывали эфиром, подкисляли до рН 4 1 М HCl и экстрагировали метиленхлоридом и этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водой, рассолом и сушили. После фильтрации и концентрирования при пониженном давлении получили неочищенный продукт, который очищали флэш-хроматографией (10%-ный МеОН в CH2Cl2 с получением 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,41 г, 62%) в виде желто-белой стекловидной пены.

ж) 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир

К смеси 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,40 г, 3,64 ммоль) и 37% водного раствора формальдегида (0,29 мл, 3,75 ммоль) в CH2 Cl2 (2 мл) при 0°С добавляли по каплям диэтиламин (3,67 мл, 3,67 ммоль), а затем воду (2,5 мл) и CH2 Cl2 (2,5 мл). Смесь перемешивали в течение 20 часов при комнатной температуре, а затем выливали на лед с водой и экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали 5% NaHCO3, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (1-2,5% МеОН в СН2Сl 3) получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир 0,81 г (65%).

з) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Тиоуксусную кислоту (4 мл) добавляли к суспензии 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,732 г, 2,16 ммоль) и триэтиламина (0,31 мл, 2,23 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона, выливали на лед с водой и экстрагировали CH2Cl2. Органическую фазу промывали насыщенным NaHCO3 до прекращения выделения газа, а затем сушили. Неочищенный продукт очищали дважды флэш-хроматографией (CH 2Cl2, 1-2,5% МеОН в CH2Cl2 и гексан/EtOAc, 5:2 1:1) с получением чистого 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этилового эфира (0,79 г, 87%).

и) 3-(6-Амино-5-хлор-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

Раствор 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этилового эфира (55 мг, 0,132 ммоль) в концентрированной HCl (4 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 90 минут. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде HCl соли (36 мг, 96,4%).

1H ЯМР (400 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.70-2.97 (m, 5H), 7.73 (s, 1Н), 8.09 (s, 1H).

MS (+) 248 (M+1).

Пример 23

3-(6-Амино-5-гидроксиметил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

а) 6-бис(трет-Бутоксикарбонил)амино-5-винил-никотиновой кислоты этиловый эфир

Смесь 5-бром-6-бис(трет-бутоксикарбонил)амино-никотиновой кислоты этилового эфира (4,50 г, 10,1 ммоль), винилтрибутилолова (3,52 г, 11.1 ммоль) и тетракиспалладийтрифенилфосфина (0,50 г, 0,40 ммоль) в THF (15 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 24 часов. Добавляли тетракиспалладийтрифенилфосфин (0,50 г) и через 24 часа кипячения с обратным холодильником реакционную смесь охлаждали и разбавляли дихлорметаном (100 мл). Добавляли насыщенный водный KF (25 мл), и раствор перемешивали в течение 1 часа. Добавляли воду, и продукт экстрагировали дихлорметаном, органическую фазу сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (1% МеОН в дихлорметане) получили 6-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино-5-винил-никотиновой кислоты этиловый эфир 3,20 г (81%).

б) (5-Гидроксиметил-3-винил-пиридин-2-ил)карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

DIBAL (25 мл, 1 М в гексане) добавляли по каплям к раствору 6-бис(трет-бутоксикарбонил)-амино-5-винил-никотиновой кислоты этилового эфира (2,00 г, 5,1 ммоль) в THF (40 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Осторожно добавляли NH4Cl (насыщенный), а затем воду, и эту смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток суспендировали в 5% МеОН в дихлорметане и фильтровали через силикагель. Фильтрат сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением (5-гидроксиметил-3-винил-пиридин-2-ил)карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (1,00 г, 78%).

в) (5-Бромметил-3-винил-пиридин-2-ил)карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

К перемешиваемой суспензии (5-гидроксиметил-3-винил-пиридин-2-ил)карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (10,0 г, 40,0 ммоль) в CH2Cl2 (150 мл) и THF (60 мл) добавляли трифенилфосфин (11,5 г, 44,0 ммоль), а затем тетрабромид углерода (19,9 г, 60.0 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем концентрировали при пониженном давлении. Добавляли ацетонитрил (100 мл), и эту смесь выдерживали при -20°С в течение ночи. Смесь затем фильтровали, и кристаллический осадок промывали холодным ацетонитрилом. Продукт очищали флэш-хроматографией (1% МеОН в дихлорметане) с получением (5-бромметил-3-винил-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (4,5 г, 36%).

г) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

Диэтилмалонат (2,30 г, 14,3 ммоль) добавляли к суспензии NaH (0,61 г, 14,3 ммоль, 55%) в сухом DMF (75 мл) при 0°С. Эту смесь перемешивали в течение 15 минут, а затем добавляли по каплям к раствору (5-бромметил-З-хлор-пиридин-2-ил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (4,50 г, 14,3 ммоль) в сухом DMF (100 мл) при 0°С. Полученный раствор перемешивали в течение 40 минут при 0°С, а затем осторожно добавляли NH4 Cl (30 мл, насыщенный). После концентрирования при пониженном давлении получили остаток, который растворяли в смеси вода/СН 2Сl2. Водный слой экстрагировали СН 2Сl2, и объединенные органические экстракты сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (1% МеОН в СН2Сl2 ) получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир (4,30 г, 77%).

д) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (0,71 г, 12,6 ммоль, 85%) в этаноле (10 мл) добавляли к раствору 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (4,30 г, 11,0 ммоль) в этаноле (25 мл) и дихлорметане (10 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 6 часов при комнатной температуре. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток растворяли в воде. Водный слой промывали эфиром, подкисляли до рН 4 1 М HCl и экстрагировали дихлорметаном. Органический слой промывали водой и рассолом и сушили. После фильтрации и концентрирования при пониженном давлении с последующей флэш-хроматографией (10% МеОН в CH2Cl2) получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир (3,05 г, 76%).

е) 2-(6-трет-Бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,85 мл, 8,80 ммоль) добавляли по каплям к смеси 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (3,05 г, 8,37 ммоль) и 37% водного раствора формальдегида (0,71 г, 8,80 ммоль) в CH2Cl 2 (2 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре, а затем выливали на лед с водой и экстрагировали дихлорметаном. Органический слой промывали 55% NaHCO3 и сушили. После флэш-хроматографии (1% МеОН в CH2Cl2) получили 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир (1,70 г, 61%).

ж) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Тиоуксусную кислоту (4 мл) добавляли к суспензии 2-(6-трет-бутокси-карбониламино-5-винил-пиридин-3-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,73 г, 2,16 ммоль) в триэтиламине (0,31 мл, 2,23 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение ночи, выливали на лед с водой и экстрагировали СН2Сl2. Органическую фазу промывали насыщенным NaHCO3 до прекращения выделения газа, а затем сушили. После флэш-хроматографии (1% МеОН в CH 2Cl2) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-хлор-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (0,51 г, 70%).

з) 3-(6-трет-Бутоксикарбониламино-5-гидроксиметил-пиридин-3-ил)-меркапто-метил-пропионовой кислоты этиловый эфир

Озон барботировали через раствор 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-винил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (0,65 г, 1,60 ммоль) в этаноле (25 мл) при -78°С. Затем через смесь барботировали O2 в течение 5 минут, а затем N2 в течение 15 минут. Смесь NaBH4 (0,30 г, 8,00 ммоль) в воде осторожно добавляли к смеси при -78°С, и реакционную смесь оставляли стоять до достижения температуры 0°С. Перемешивание продолжали в течение 3 часов. Добавляли ацетон (10 мл), и реакционную смесь упаривали до 1/3 начального объема. Добавляли 50% NaCl (водный), и смесь экстрагировали дихлорметаном, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-гидроксиметил-пиридин-3-ил)-меркаптометил-пропионовой кислоты этилового эфира (0,38 г, 63%).

и) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-гидрокси-метил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Смесь неочищенного 3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-гидрокси-метил-пиридин-3-ил)-меркаптометил-пропионовой кислоты этилового эфира (0,38 г, 1,0 ммоль) и КНСО3 (0,11 г, 1,1 ммоль) в уксусном ангидриде (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Затем добавляли NH4Cl (насыщенный) и воду. Смесь экстрагировали дихлорметаном, сушили и концентрировали при пониженном давлении. После флэш-хроматографии (CH2Cl2, 2,5% МеОН в CH2Cl 2) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-гидроксиметил-пиридин-3-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (0,23 г, 60%).

к) 3-(6-Амино-5-гидроксиметил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

Раствор 3-(6-трет-бутоксикарбониламино-5-гидроксиметил-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пропионовой кислоты этилового эфира (50 мг, 135 ммоль) в концентрированной HCl (2 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 60 минут. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде HСl соли (37 мг, 98,3%).

1H ЯМР (400 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.70-2.95 (m, 5Н), 4.65 (s, 2Н), 7.68 (s, 1H), 7.88 (s, 1H).

MS (+) 244 (M+1).

Пример 24

2-Меркаптометил-3-пирролидин-3-ил-пропионовая кислота

а) (1-Бензил-пирролидин-3-ил)-метанол

Red-Al (160 мл 3,5 M раствора в толуоле, 560 ммоль) добавляли к раствору 1-бензил-5-оксо-пирролидин-3-карбоновой кислоты (20 г, 91 ммоль) в сухом THF (650 мл) в атмосфере аргона. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2,5 часов, а затем выливали на смесь колотого льда и NaOH (20%). Фазы разделяли, водную фазу экстрагировали толуолом, и объединенные органические экстракты сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 17,9 г неочищенного продукта в виде желтого масла.

б) 3-Гидроксиметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

10%-Pd-C (6,1 г) и формиат аммония (10 г, 158 ммоль) добавляли к раствору (1-бензил-пирролидин-3-ил)-метанола (6,1 г, 32 ммоль) в метаноле (220 мл) в атмосфере аргона. После кипячения с обратным холодильником в течение 15 минут реакционную смесь, пока она теплая, фильтровали через набивку из целита, затем целит промывали метанолом, и объединенные органические фазы концентрировали. Остаток растворяли в THF (35 мл) и воде (35 мл), раствор охлаждали до 0°С и добавляли К2 СО3 (22 г, 159 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (6,95 г, 32 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. THF удаляли при пониженном давлении, добавляли воду, и водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические фазы сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 4,64 г неочищенного продукта. После флэш-хроматографии (гептан/EtOAc: 1/0серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 224470868/32) неочищенного продукта получили 3-гидроксиметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (3,82 г, 60%) в виде бесцветного масла.

в) 3-Трифторметансульфонилоксиметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Метансульфонилхлорид (0,4 мл, 5,17 ммоль) добавляли по каплям к раствору 3-гидроксиметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (1 г, 4,97 ммоль) и триэтиламина (1,04 мл, 7,46 ммоль) в CH2Cl2 (15 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После фильтрации добавляли CH2Cl 2, и органическую фазу промывали 1 М HCl, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-трифторметансульфонилоксиметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (1,4 г, 97%).

г) 3-Бромметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Смесь 3-трифторметансульфонилоксиметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (3,85 г, 13,8 ммоль) и LiBr (3,61 г, 42 ммоль) в сухом ацетоне (30 мл) кипятили с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в СН2Сl2 и промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 6 г неочищенного продукта. В результате очистки флэш-хроматографией (гептан/EtOAc: 1/0серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 224470868/32) получили 3-бромметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (2,84 г, 78%) в виде бесцветного масла.

д) 2-(1-трет-Бутоксикарбонил-пирролидин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

Диэтилмалонат (1,93 мл, 12,7 ммоль) добавляли по каплям к раствору NaH (60%; 0,51 г, 12,8 ммоль) в сухом THF (15 мл) при 0°С. Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, после чего ее добавляли к нагреваемой с обратным холодильником смеси 3-бромметил-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (2,8 г, 10,6 ммоль) в сухом THF (30 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение еще 19 часов, а затем концентрировали почти до сухости. Добавляли воду (1 л), и продукт экстрагировали CH2 Cl2. Объединенные органические фазы сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 3,3 г неочищенного продукта. В результате очистки флэш-хроматографией (CH2Cl 2/EtOAc: 1/0 68/32) получили 2-(1-трет-бутоксикарбонил-пирролидин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир (1,64 г, 45%).

е) 2-(1-трет-Бутоксикарбонил-пирролидин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (0,26 г, 4,6 ммоль) в этаноле (7 мл) добавляли к раствору 2-(1-трет-бутоксикарбонил-пирролидин-3-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,52 г, 4,4 ммоль) в этаноле (7 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, концентрировали при пониженном давлении, и остаток растворяли в воде (500 мл). Водный слой промывали диэтиловым эфиром, подкисляли до рН 3 0,5 М HCl и экстрагировали диэтиловым эфиром. Органическую фазу сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(1-трет-бутоксикарбонил-пирролидин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,13 г, 81%).

ж) 3-(2-Этоксикарбонил-аллил)-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Диэтиламин (0,34 мл, 3,3 ммоль) добавляли к смеси 2-(1-трет-бутокси-карбонил-пирролидин-3-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,69 г, 2,19 ммоль) в 36% водном растворе формальдегида (0,27 мл, 3,5 ммоль), CH2Cl 2 (1,6 мл) и воды (1,6 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали на лед с водой (500 мл) и экстрагировали CH2 Cl2. Объединенные органические фазы промывали 5% NaHCO 3, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-(2-этоксикарбонил-аллил)-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,55 г, 87%) к виде бесцветного масла.

з) 3-(3-Ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-пропил)-пирролидин-1 -карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

Тиоуксусную кислоту (5 мл), охлажденную до 0°С, добавляли к смеси 3-(2-этоксикарбонил-аллил)-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,72 г, 2,54 ммоль) и триэтиламина (0,37 мл, 2,67 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 минут, при комнатной температуре в течение 23 часов, а затем выливали на лед с водой (400 мл). Водный слой экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические фазы промывали насыщенным NaHCO3, сушили и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (СН2Сl2/EtOAc: 1/0 68/32) с получением 3-(3-ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-пропил)-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,72 г, 79%) в виде масла.

и) 2-Меркаптометил-3-пирролидин-3-ил-пропионовая кислота

Раствор 3-(3-ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-пропил)-пирролидин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,52 г, 1,45 ммоль) в концентрированной HCI (15 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1 часа. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением диастереомерной смеси указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли (0,33 г, 100%).

1 H ЯМР (500 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.60-1.92 (m, 3Н), 2.19-2.32 (m, 1Н), 2.32-2.42 (m, 1H), 2.66-2.83 (m, 3Н), 2.84-2.96 (m, 1H), 3.23-3.32 (m, 1H), 3.40-3.58 (m, 2H).

MS (+) 190 (M+1).

Пример 25

3-(цис-4-Амино-циклопент-2-енил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

а) цис-Метансульфоновой кислоты 4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметиловый эфир

Метансульфонилхлорид (0,76 мл, 9,8 ммоль) добавляли к раствору цис-(4-гидроксиметил-циклопент-2-енил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (2 г, 9,4 ммоль) и триэтиламина (1,96 мл, 14,1 ммоль) в CH2Cl2 (30 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После фильтрации добавляли CH2Cl 2, и органическую фазу промывали 1 М HCl, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением цис-метансульфоновой кислоты 4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметилового эфира (2,64 г, 96%).

б) цис-(4-Бромметил-циклопент-2-енил)-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир

Смесь цис-метансульфоновой кислоты 4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметилового эфира (2,51 г, 8,6 ммоль) и LiBr (2,24 г, 25,8 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в CH2Cl 2 и промывали водой, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением цис-(4-бромметил-циклопент-2-енил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (2,23 г, 94%).

в) 2-(цис-4-трет-Бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

Диэтилмалонат (1,29 мл, 8,5 ммоль) добавляли к смеси NaH (60%, 0,34 г; 8,5 ммоль) в DMF (10 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 минут добавляли раствор цис-(4-бромметил-циклопент-2-енил)-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (1,95 г, 7,1 ммоль) в DMF (12 мл), и реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 19 часов. Добавляли EtOAc, и органическую фазу экстрагировали водой и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 2,44 г неочищенного продукта. В результате очистки флэш-хроматографией (CH2Cl2/EtOAc: 1/0 68/32) получили 2-(4-цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир (1,47 г, 58%).

г) 2-(цис-4-трет-Бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (0,19 г; 3,4 ммоль) в этаноле (6 мл) добавляли к раствору 2-(2-цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,15 г; 3,2 ммоль) в этаноле (6 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, концентрировали и добавляли смесь льда с водой (400 мл). Водную фазу промывали диэтиловым эфиром (эмульсию, образовавшуюся во время экстракции, обрабатывали рассолом, чтобы достичь хорошего разделения фаз), подкисляли до рН 3 0,5 М HCl и экстрагировали диэтиловым эфиром. Органическую фазу сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,86 г, 81%) в виде белых кристаллов.

д) 2-(цис-4-трет-Бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,31 мл, 3,0 ммоль) добавляли к смеси 2-(цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,66 г, 2,0 ммоль) в 36% водном растворе формальдегида (0,25 мл, 3,2 ммоль), CH2Cl 2 (1,6 мл) и воды (1,6 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали на лед с водой (40 мл) и экстрагировали CH2 Cl2. Во время экстракции разделение фаз улучшали добавлением рассола. Объединенные органические экстракты промывали 5% NaHCO 3, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,56 г, 94%) в виде масла.

е) 2-Аиетилсульфанилметил-3-(цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Тиоуксусную кислоту (4 мл), охлажденную до 0°С, добавляли к смеси 2-(цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енилметил)-акриловой кислоты этилового эфира (0,56 г, 1,9 ммоль) и триэтиламина (0,28 мл, 2,00 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 минут при комнатной температуре в течение 19 часов, а затем выливали на лед с водой (400 мл). Водный слой экстрагировали CH2Cl2. Органическую фазу промывали насыщенным NaHCO3, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 1,7 г неочищенного продукта. В результате очистки флэш-хроматографией (CH2Cl 2/EtOAc: 1/0 68/32) получили 2-ацетилсульфанилметил-3-(цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (0,46 г, 65%).

ж) 3-(цис-4-Амино-циклопент-2-енил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

Раствор 2-ацетилсульфанилметил-3-(цис-4-трет-бутоксикарбониламино-циклопент-2-енил)-пропионовой кислоты этилового эфира (86 мг, 0,23 ммоль) в концентрированной HCl (5 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением диастереомерной смеси указанного в заголовке соединения в виде гидрохлоридной соли (65 мг).

1H ЯМР (400 МГц, D2 O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.35-1.47 (m, 2Н), 1.60-1.72 (m, 1H), 1.74-1.92 (m, 2H), 1.92-2.04 (m, 1H), 2.67-2.92 (m, 10Н), 4.34-4.43 (m, 2H), 5.79-5.85 (br s, 2H), 6.12 (d, 1H), 6.18 (d, 1H).

Пример 26

2-Меркаптометил-3-пиперазин-1-ил-пропионовая кислота

а) 4-(2-Этоксикарбонил-аллил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

К раствору 2-бромметил-акриловой кислоты этилового эфира (1,93 г, 10 ммоль) в N,N-диметилформамиде (25 мл) добавляли пиперазин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир (1,86 г, 10 ммоль), а затем по каплям добавляли этилдиизопропиламин (1,71 мл, 10 ммоль). После перемешивания в течение 16 часов при комнатной температуре растворитель удаляли при пониженном давлении и добавляли воду (50 мл) и дихлорметан (50 мл). После перемешивания в течение 2 минут слои разделяли, органический слой промывали водой и рассолом и сушили над сульфатом магния. Растворитель удаляли при пониженном давлении с получением неочищенного 4-(2-этоксикарбонил-аллил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (2,456 г, 82%).

б) 4-(3-Ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-пропил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловый эфир

К неочищенному 4-(2-этоксикарбонил-аллил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловому эфиру (2,45 г, 8,2 ммоль) добавляли тиолуксусную кислоту (7,5 мл) в атмосфере аргона. Смесь охлаждали до 0°С и добавляли по каплям триэтиламин (1,14 мл, 8,2 ммоль). Смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 суток и добавляли тиолуксусную кислоту (2,5 мл). Перемешивание продолжали в течение 1 суток, затем осторожно добавляли водный насыщенный раствор гидрокарбоната натрия до нейтральной реакции, и смесь экстрагировали три раза дихлорметаном. Объединенные органические слои промывали дважды водным насыщенным гидрокарбонатом натрия и один раз рассолом. После сушки над сульфатом магния растворитель удаляли при пониженном давлении, и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 1,7% метанол в дихлорметане) с получением 4-(3-ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-пропил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты трет-бутилового эфира (0,29 г, 9,4%).

в) 2-Меркаптометил-3-пиперазин-1-ил-пропионовая кислота

К 4-(3-ацетилсульфанил-2-этоксикарбонил-пропил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты трет-бутиловому эфиру (0,095 г, 0,25 ммоль) добавляли насыщенную аргоном соляную кислоту (3 мл, 37%), и эту смесь нагревали в атмосфере аргона до температуры дефлегмации в течение 2,5 часов. Раствор концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде дигидрохлоридной соли (0,071 г, количественно).

1H ЯМР (400 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 3.86-3.49 (m, 10Н), 3.36-3.28 (m, 1H), 3.01-2.88 (m, 2H).

МС 205 (М+Н).

Пример 27

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пентановая кислота

а) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К перемешиваемой суспензии йодида меди (5,71 г, 30 ммоль) в диэтиловом эфире (120 мл) в атмосфере аргона добавляли этилмагнийбромид (3 М раствор в диэтиловом эфире, 20 мл, 20 ммоль) за 10 минут при 0°С. После 5 минут перемешивания смесь охлаждали до -78°С и по каплям добавляли раствор 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (5,47 г, 15,0 ммоль) в тетрагидрофуране (60 мл) за 0,5 часа. В течение этого промежутка времени добавляли тетрагидрофуран (40 мл). Смесь оставляли перемешиваться при -40°С в течение 2,5 часов. Затем добавляли при интенсивном перемешивании раствор хлорида аммония (5%) в водном растворе аммиака (5%), обеспечивая возможность доступа воздуха, и смесь нагревали до комнатной температуры. Смесь экстрагировали дважды этилацетатом. Объединенные органические слои промывали последовательно водным раствором аммиака (5%) и рассолом и сушили над сульфатом магния. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и остаток перекристаллизовывали из смеси диизопропилового эфира и тетрагидрофурана (5:1, об./об.) с получением 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (3,23 г, 55%).

б) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир (3,23 г, 8,19 ммоль) растворяли в смеси дихлорметана (12 мл) и этанола (24 мл, 99,5%). К этому раствору добавляли по каплям раствор гидроксида калия (0,528 г, 87%, 8,20 ммоль) в этаноле (16 мл, 99,5%) при 0°С за 0,5 часа. Перемешивание продолжали в течение 16 часов, в течение которых смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. После концентрирования при пониженном давлении до 5-10 мл добавляли воду (50 мл), и полученную эмульсию перемешивали в течение 0,5 часа, а затем фильтровали. Фильтрат промывали дважды смесью этилацетата и диэтилового эфира (2:1, об./об.). Водный слой подкисляли добавлением раствора лимонной кислоты в воде (10%) до достижения рН от 4 до 5 и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над сульфатом магния, и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира (2,47 г, 82%).

в) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбонил-пиридин-3-ил)-пропил]-акриловой кислоты этиловый эфир.

К раствору 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пропил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира (2,45 г, 6,69 ммоль) в дихлорметане (11 мл) добавляли водный раствор формальдегида (0,49 мл, 37%) и диэтиламина (0,62 мл, 6,4 ммоль) при 0°С. После интенсивного перемешивания смеси в течение 16 часов добавляли воду (40 мл) и этилацетат (40 мл). После дополнительных 2 минут перемешивания при комнатной температуре слои разделяли, и водный слой экстрагировали дважды этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и рассолом. После сушки над сульфатом магния растворитель удаляли при пониженном давлении с получением 2-[1-(6-трет-бутоксикарбонил-пиридин-3-ил)-пропил]-акриловой кислоты этилового эфира (1,21 г, 54%).

г) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этиловый эфир

2-[1-(6-трет-Бутоксикарбонил-пиридин-3-ил)-пропил]-акриловой кислоты этиловый эфир (1,20 г, 3,59 ммоль) растворяли в тиолуксусной кислоте (4 мл) в атмосфере аргона и добавляли триэтиламин (0,56 мл, 4,0 ммоль). Смесь нагревали до 60°С. Через 22 часа добавляли тиолуксусную кислоту (2 мл). Еще через 14 часов смесь охлаждали до комнатной температуры и медленно добавляли насыщенный водный гидрокарбонат натрия до получения нейтрального раствора. Его экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водным насыщенным гидрокарбонатом натрия и рассолом, и сушили над сульфатом магния. После концентрирования при пониженном давлении остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 1,7% метанол в дихлорметане) с получением 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этилового эфира (1,22 г, 83%).

Смесь диастереомеров разделяли препаративной хиральной хроматографией, используя колонку CHIRALPAK AD (250×4,6 мм) в качестве стационарной фазы и смесь гексан (смесь изомеров)/этанол (85:15), содержащую диэтиламин (0,05%) при скорости потока 1 мл/мин с концентрацией образца 5 мг/мл.

Энантиомерный избыток определяли аналитической хиральной ВЭЖХ на такой же колонке с использованием смеси гексан/этанол (85:15) в качестве элюента.

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этиловый эфир/А:

Время удерживания 10,72 минуты, ее (энантиомерный избыток) = 99%.

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этиловый эфир/Б:

Время удерживания 14,41 минуты, ее = 98%.

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этиловый эфир/В:

Время удерживания 23,01 минуты, ее = 98%.

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этиловый эфир/Г:

Время удерживания 29,83 минуты, ее = 97%.

д) 3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пентановая кислота

Соляную кислоту (38%, 4 мл) добавляли к 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этиловому эфиру (0,041 г, 0,1 ммоль) в атмосфере аргона, и эту смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов. После концентрирования при пониженном давлении и сушки (45°С, 0,3 мбар (0,3×10-8 Па)) получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (0,027 мг, 97%).

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пентановая кислота/А

Это соединение получили из 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этилового эфира/А способом, описанным выше.

1H ЯМР (300 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.79 (dd, 1H), 7.69 (d, 1Н), 7.05 (d, 1H), 2.81 (m, 2H), 2.51 (m, 2H), 1.66 (m, 2H), 0.72 (t, 3H).

MS + 241 (М+Н).

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пентановая кислота/Б

Это соединение получили из 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этилового эфира/Б способом, описанным выше.

1H ЯМР (300 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.85 (dd, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 2.98-2.64 (m, 4H), 1.89 (m, 1H), 1.60 (m, 1H), 0.74 (t, 3H).

MS + 241 (М+Н).

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-пентановая кислота/В

Это соединение получили из 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этилового эфира/В способом, описанным выше.

1H ЯМР (300 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.85 (dd, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 2.98-2.64 (m, 4H), 1.89 (m, 1H), 1.60 (m, 1H), 0.74 (t, 3H).

MS + 241 (М+Н).

3-(6-Амино-пиридин-3-ил]-2-меркаптометил-пентановая кислота/Г

Это соединение получили из 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-пентановой кислоты этилового эфира/Г способом, описанным выше.

1H ЯМР (300 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.79 (dd, 1H), 7.69 (d, 1Н), 7.05 (d, 1H), 2.81 (m, 2H), 2.51 (m, 2H), 1.66 (m, 2H), 0.72 (t, 3H).

MS + 241 (М+Н).

Пример 28

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-4-метил-пентановая кислота

а) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К перемешиваемому раствору цианида меди (3,58 г, 40 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) при -15°С добавляли раствор изопропилмагниябромида (40 мл, 2 M, 80 ммоль) в тетрагидрофуране в атмосфере аргона за 15 минут. После перемешивания в течение еще 15 минут по каплям добавляли раствор 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (3.78 г, 10,4 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) за 15 минут. После перемешивания в течение 16 часов смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. Затем при интенсивном перемешивании добавляли раствор хлорида аммония (5%) в водном растворе аммиака (5%), обеспечивая возможность доступа воздуха. Смесь экстрагировали дважды этилацетатом. Объединенные органические слои промывали последовательно водным раствором аммиака (5%) и рассолом и сушили над сульфатом магния. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 1,7% метанол в дихлорметане) с получением неочищенного 2-[1-(трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (2,85 г, 25%).

б) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

К раствору 2-[1-(трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,569 г, 3,84 ммоль) в смеси дихлорметана (6 мл) и этанола (12 мл, 95%) при 0°С по каплям добавляли раствор гидроксида калия (0,272 г, 85%, 4,2 ммоль) в этаноле (6 мл, 95%) за 40 минут. После перемешивания в течение еще 1 часа смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры, и перемешивание продолжали в течение 18 часов. Затем добавляли воду (30 мл) и дихлорметан (30 мл), и через 3 минуты перемешивания слои разделяли. Органический слой экстрагировали один раз водой, и объединенный водный слой промывали один раз эфиром. Затем добавляли водный раствор лимонной кислоты, чтобы довести рН до 4, и раствор экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали рассолом и сушили над сульфатом магния. После выпаривания растворителя получили неочищенный 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир (0,94 г, 64%).

в) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбонил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-акриловой кислоты этиловый эфир

К раствору 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,94 г, 2,47 ммоль) в дихлорметане (4 мл) добавляли водный раствор формальдегида (0,18 мл, 37%) и диэтиламин (0,23 мл, 2,32 ммоль) при 0°С. После интенсивного перемешивания смеси в течение 16 часов добавляли воду (30 мл) и этилацетат (30 мл). После дополнительного перемешивания в течение 2 минут при комнатной температуре слои разделяли, и водный слой экстрагировали дважды этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и рассолом. После сушки над сульфатом натрия растворитель удаляли при пониженном давлении, и остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 1,7% метанол в дихлорметане) с получением 2-[1-(6-трет-бутоксикарбонил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-акриловой кислоты этилового эфира (0,24 г, 28%).

г) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-4-метил-пентановой кислоты этиловый эфир

2-[1-(6-трет-Бутоксикарбонил-пиридин-3-ил)-2-метил-пропил]-акриловой кислоты этиловый эфир (0,431 г, 1,24 ммоль) растворяли в тиолуксусной кислоте (4 мл) в атмосфере аргона и добавляли триэтиламин (0,21 мл, 1,5 ммоль). Смесь нагревали до 60°С. Через 24 часа добавляли тиолуксусную кислоту (2 мл). Еще через 20 часов смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и медленно добавляли насыщенный раствор гидрокарбоната натрия до получения нейтрального раствора. Его экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали водным насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и рассолом и сушили над сульфатом магния. После концентрирования при пониженном давлении остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 1,7% метанол в дихлорметане) с получением 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-4-метил-пентановой кислоты этилового эфира (0,284 г, 54%) в виде смеси диастереомеров (6:1).

д) 3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-4-метил-пентановая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-4-метил-пентановой кислоты этиловый эфир (0,085 г, 0,20 ммоль) растворяли в насыщенной аргоном соляной кислоте (5 мл, 37%) и нагревали с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 5,5 часов. После концентрирования при пониженном давлении и сушки при 45°С/0,3 мбар (0,3×10 -8 Па) получили указанное в заголовке соединение в виде смеси диастереомеров (6:1) в форме гидрохлоридной соли (0,058 г, 99%).

1H ЯМР (300 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.81 (m, 1H), 7.62 (m, 1H), 6.98 (m, 1H), 3.18-3.06 (m, 1Н), 2.93-2.40 (m, 3H), 2.23-1.93 (m, 1H), 0.93-0.74 (m, 6H).

MS 255 (М+Н).

Пример 29

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-3-фенил-пропионовая кислота

а) 2-[(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-фенил-метил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К интенсивно перемешиваемой суспензии цианида меди (I) (1,71 г, 19,06 ммоль) в сухом THF (18 мл) добавляли раствор фенилмагнийбромида (12,7 мл 3 М в эфире, 38,11 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры, при этом образовывался темно-коричневый раствор. Через 150 минут добавляли при 0°С раствор 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,74 г, 4,76 ммоль) в сухом THF (19 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 3 суток, затем добавляли водный хлорид аммония. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали рассолом и сушили. После удаления растворителей в вакууме получили остаток, который суспендировали в гексане. После отфильтровывания кристаллов получили 2-[(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-фенил-метил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир (1,85 г, 88%).

б) 2-[(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-фенил-метил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (0,226 г, 4,11 ммоль) в этаноле (14 мл) добавляли к раствору 2-[(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-фенил-метил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,82 г, 4,11 ммоль) в этаноле (12 мл) и метиленхлориде (13 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Еще КОН (80 мг, растворенные в 3 мл этанола) добавляли при 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение еще 18 часов. Смесь концентрировали при пониженном давлении, и к остатку добавляли этилацетат и 0,5 М HCl. Органический слой промывали рассолом и сушили. После фильтрации и упаривания в вакууме остаток суспендировали в гексане. После отфильтровывания кристаллов получили 2-[(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-фенил-метил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир (1,7 г, 98%).

в) 2-[(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-фенил-метил]-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,52 г, 5,04 ммоль) добавляли к смеси 2-[(6-трет-бутоксикарбонил-амино-пиридин-3-ил)-фенил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира (1,7 г, 4,1 ммоль) и 37% водного раствора формальдегида (0,42 г, 5,6 ммоль) в метиленхлориде (6,5 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, а затем разбавляли этилацетатом. Органический слой промывали водным насыщенным гидрокарбонатом натрия и рассолом и сушили. После фильтрации и выпаривания в вакууме неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (CH2Cl2 ) с получением 2-[(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-фенил-метил]-акриловой кислоты этилового эфира (0,36 г, 23%).

г) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-3-фенил-пропионовой кислоты этиловый эфир

Триэтиламин (0,105 г, 1,04 ммоль) добавляли к раствору 2-[(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-фенил-метил]-акриловой кислоты этилового эфира (0,36 г, 0,94 ммоль) в тиоуксусной кислоте (4 мл) при 0°С. Смесь нагревали при 45°С в течение 24 часов. Добавляли этилацетат, и органическую фазу промывали водным насыщенным бикарбонатом натрия и рассолом и сушили. После фильтрации и выпаривания в вакууме неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (толуол/этилацетат, 1:05:1) с получением чистого 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-3-фенил-пропионовой кислоты этилового эфира (0,314 г, 73%).

д) 3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-3-фенил-пропионовая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-3-фенил-пропионовой кислоты этиловый эфир (58 мг, 0,125 ммоль) растворяли в концентрированной HCl (3,0 мл). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 130 минут в атмосфере аргона. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (41 мг, 100%).

1H ЯМР (500 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 8.03-7.83 (m, 2Н), 7.5-7.3 (m, 5H), 7.05-6.95 (m, 1H), 4.27-4.15 (m, 1H), 3.6-3.45 (m, 1H), 2.84-2.58 (m, 2H).

MS (+) 289 (M+1).

Пример 30

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-3-фенил-масляная кислота

а) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К интенсивно перемешиваемой суспензии цианида меди (I) (0,66 г, 7,32 ммоль) в сухом THF (5 мл) добавляли раствор бензилмагнийбромида (5 мл, 2,93 М в эфире, 14,64 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры, при этом образовывался темно-коричневый раствор. Через 60 минут добавляли при 0°С раствор 2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,67 г, 1,83 ммоль) в сухом THF (4 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем добавляли водный хлорид аммония. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали рассолом и сушили. После удаления растворителя в вакууме получили остаток, который очищали флэш-хроматографией (СН2Сl 2/этилацетат, 1:0серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708100:15) с получением 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,44 г, 53%).

б) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

Раствор КОН (0,067 г, 1,03 ммоль) в этаноле (3 мл) добавляли к раствору 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,44 г, 0,96 ммоль) в этаноле (3 мл) и метиленхлорида (2 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 48 часов при комнатной температуре. Смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли этилацетат и 0,5 М HCl. Органический слой промывали рассолом и сушили. В результате фильтрации и выпаривания в вакууме получили 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-малоновой кислоты моноэтиловый эфир (0,37 г, 90%).

в) 2-[1-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-акриловой кислоты этиловый эфир

Диэтиламин (0,27 мл, 2,59 ммоль) добавляли к смеси 2-[1-(6-трет-бутоксикарбонил-амино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-малоновой кислоты моноэтилового эфира (0,37 г, 0,86 ммоль) и 37% водного раствора формальдегида (0,22 мл, 2,9 ммоль) в метиленхлориде (3,5 мл) при 0°С. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли еще формальдегид (0,24 мл) и диэтиламин (0,24 мл). Перемешивание при комнатной температуре продолжали в течение 18 часов, а затем добавляли этилацетат и воду. Органический слой промывали водным насыщенным бикарбонатом натрия и рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-акриловой кислоты этилового эфира (0,34 г, 99%).

г) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-4-фенил-масляной кислоты этиловый эфир

Триэтиламин (0,096 г, 0,95 ммоль) добавляли к раствору 2-[1-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-фенил-этил]-акриловой кислоты этилового эфира (0,34 г, 0,86 ммоль) в тиоуксусной кислоте (3,5 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Смесь нагревали при 45°С в течение 24 часов. Добавляли этилацетат, и органическую фазу промывали водным насыщенным бикарбонатом натрия и рассолом и сушили. После фильтрации и выпаривания в вакууме неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (СН2Сl2 /этилацетат, 1:0 100:5) с получением 2-ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-4-фенил-масляной кислоты этилового эфира (0,264 г, 65%).

д) 3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-4-фенил-масляная кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-4-фенил-масляной кислоты этиловый эфир (0,14 г, 0,3 ммоль) растворяли в концентрированной HCl (5,0 мл). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 4,5 часов в атмосфере аргона. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (100 мг, 98%).

1H ЯМР (500 МГц, D 2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.90-7.83 (m, 1Н), 7.43 (d, 1H), 7.34-7.18 (m, 3H), 7.17-7.06 (m, 2Н), 7.01-6.9 (m, 1H), 3.4-2.5 (m, 6H).

MS (+) 303 (M+1).

Пример 31

2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-5-фенил-пентановая кислота

а) Этил-(Е,Z)-2-({6-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-пиридинил}метил)-5-фенил-2-пентеноат

К суспензии NaH (310 мг, 7,12 ммоль, 55% в минеральном масле) в THF (25 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляли раствор (этил-3-{6-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-пиридинил}-2-(диэтоксифосфорил)пропаноата (2,55 г, 5,95 ммоль) в THF (25 мл). Через 1 час добавляли по каплям раствор 3-фенилпропаналя (1,59 г, 11,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 17 часов при комнатной температуре, затем гасили NH4Cl (50 мл, насыщенный, водный). Смесь экстрагировали этилацетатом, органический слой промывали рассолом, сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. После колоночной хроматографии (CH 2Cl2/EtOAc 20:1 10:1) получили этил-(E,Z)-2-({6-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-пиридинил}метил)-5-фенил-2-пентеноат (2,49 г, 100%).

б) Этил-3-(ацетилсульфанил)-2-({6-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-пиридинил}метил)5-фенил-2-пентаноат

Триэтиламин (1,22 мл, 0,617 ммоль) добавляли к раствору этил-(Е,Z)-2-({6-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-пиридинил}метил)-5-фенил-2-пентеноата (400 мг, 0,597 ммоль) в тиоуксусной кислоте (10 мл) при 40°С. После перемешивания в течение 90 часов смесь концентрировали при пониженном давлении. После колоночной хроматографии (CH 2Cl2/EtOAc 20:1 10:1), затем (толуол/EtOAc, 10:1), а затем (гептан/EtOAc 2:1) получили этил-3-(ацетилсульфанил)-2-({6-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-пиридинил}метил)-5-фенилпентаноат (126 мг, 27%) в виде смеси диастереомеров 1:1.

в) 2-(6-Амино-пиридин-3-илметил)-3-меркапто-5-фенил-пентановая кислота

Этил-3-(ацетилсульфанил)-2-({6-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-3-пиридинил}метил)-5-фенилпентаноат (9 мг, 18,5 мкмоль) растворяли в концентрированной HCl (1 мл) в атмосфере аргона. Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 4,5 часов. После концентрирования при пониженном давлении получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (6,4 мг, 98%) в виде смеси диастереомеров 1:1.

1H ЯМР (400 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.78-2.20 (m, 2H), 2.70-3.04 (m, 6H), 6.88, 6.92 (2d, 1Н), 7.22-7.39 (m, 5H), 7.52, 7.54 (2d, 1Н), 7.69, 7.75 (2d, 1Н).

MS (+) 317 (M+1).

Пример 32

3-[3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-этоксикарбонил-пропилдисульфанил]-2-(6-амино-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

а) 3-[3-(6-трет-Бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-этоксикарбонил-пропилдисульфанил]-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

3-Ацетилсульфанил-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил-метил)-пропионовой кислоты этиловый эфир (150 мг, 0,392 ммоль) растворяли в этаноле (15 мл), насыщенном NН3 (газ). После перемешивания в течение 160 минут, смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в EtOH (10 мл), после чего добавляли раствор I2 в EtOH (0,5 М, 0,784 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при комнатной температуре, затем разбавляли CH2Cl2, промывали насыщенным Nа2 S2O3 и насыщенным водным NаНСО3 , сушили, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-[3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-этоксикарбонил-пропилдисульфанил]-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этилового эфира (130 мг, 98%).

б) 3-[3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-этоксикарбонил-пропилдисульфанил]-2-(6-амино-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Этилацетат, насыщенный HCl (газ) (15 мл), добавляли к раствору 3-[3-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-ил)-2-этоксикарбонил-пропил-дисульфанил]-2-(6-трет-бутоксикарбониламино-пиридин-3-илметил)-пропионовой кислоты этилового эфира (130 мг, 0,191 ммоль) в этилацетате (7 мл) при 0°С. Реакционную смесь оставляли стоять до достижения комнатной температуры и перемешивали в течение 19 часов, затем упаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в воде, добавляли насыщенный водный Nа2СО3, и водную фазу экстрагировали CH2Cl2. Органический слой сушили и концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (90 мг, 98%).

1 H ЯМР (400 МГц, CDCl3): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 1.19 (t, 3Н), 1.20 (t, 3Н), 2.68-2.86 (m, 6H), 2.90-3.01 (m, 4Н), 4.07-4.14 (m, 4Н), 6.45 (d, 2H), 7.28 (m, 2H), 7.87 (s, 2H).

MS (+) 479 (M+1).

Пример 33

3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-гексановая кислота

а) N-(5-Бутирил-пиридин-2-ил)-2,2-диметил-пропионамид

Раствор N-(5-бромпиридин-2-ил)-2,2-диметил-пропионамида (3,582 г, 13,9 ммоль) в диэтиловом эфире (36 мл) охлаждали до -78°С в атмосфере аргона и по каплям добавляли н-бутилитий (1,6 М, 19 мл, 30,4 ммоль) за 20 минут. Через 5 минут после окончания добавления смесь оставляли нагреваться до 0°С. Добавляли N-метокси-N-метилбутирамид (3,65 г, 27,8 ммоль) менее чем за 5 минут, и перемешивание продолжали в течение 45 минут. Прозрачный раствор подкисляли 2 н. соляной кислотой до рН 2. После интенсивного перемешивания в течение 15 минут смесь нейтрализовали гидрокарбонатом натрия, и слои разделяли. Водный слой экстрагировали три раза диэтиловым эфиром. Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили и концентрировали при пониженном давлении. Полученное в результате масло сушили под вакуумом, создаваемом масляным насосом, для удаления избытка реагента. После флэш-хроматографии (дихлорметан/метанол 60:1) получили неочищенный N-(5-бутирил-пиридин-2-ил)-2,2-диметил-пропионамид (2,47 г, 71%) в виде светло-оранжевого масла, которое дополнительно не очищали.

б) N-[5-(1-Гидрокси-бутил)-пиридин-2-ил]-2,2-диметил-пропионамид

К раствору N-(5-бутирил-пиридин-2-ил)-2,2-диметил-пропионамида (2,47 г, 9,95 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляли боргидрид натрия (185 мг, 5,0 ммоль). Через 40 минут перемешивания при комнатной температуре смесь подкисляли 1 н. соляной кислотой до рН 2 и перемешивали в течение 10 минут. После нейтрализации гидрокарбонатом натрия смесь экстрагировали три раза дихлорметаном. Объединенные органические экстракты промывали дважды раствором гидрокарбоната натрия и один раз рассолом. После сушки и концентрирования при пониженном давлении остаток очищали флэш-хроматографией (дихлорметан/метанол 30:10 с получением N-[5-(1-гидрокси-бутил)-пиридин-2-ил]-2,2-диметил-пропионамида (1,025 г, 41%).

в) 2-{1-[6-(2,2-Диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-бутил}-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

К раствору N-[5-(1-гидрокси-бутил)-пиридин-2-ил]-2,2-диметил-пропионамида (1,025 г, 4,09 ммоль) в трихлорметане (12 мл) добавляли тионилхлорид (6 мл), и эту смесь нагревали до 55°С в течение 1 часа. Затем раствор концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного N-[5-(1-хлор-бутил)-пиридин-2-ил]-2,2-диметил-пропионамида гидрохлорида в виде бесцветного твердого вещества.

К раствору диэтилмалоната (1,31 г, 8,2 ммоль) в диметилформамиде (20 мл) добавляли гидрид натрия (60%-ная дисперсия в минеральном масле, 350 мг, 8,7 ммоль), и эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. После охлаждения до 0°С добавляли раствор промежуточного N-[5-(1-хлор-бутил)-пиридин-2-ил]-2,2-диметил-пропионамида гидрохлорида в диметилформамиде (5 мл). После 1 часа перемешивания раствор концентрировали при пониженном давлении и добавляли этилацетат (25 мл), а затем раствор хлорида аммония (полунасыщенный) для нейтрализации. Слои разделяли, водный слой экстрагировали этилацетатом, и объединенные органические слои промывали три раза водой и рассолом и сушили. После концентрирования при пониженном давлении остаток фильтровали через силикагель с использованием смеси дихлорметан/метанол (30:1) в качестве растворителя.

Этот неочищенный 2-{1 -[6-(2,2-диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-бутил}-малоновой кислоты диэтиловый эфир растворяли в смеси дихлорметана (2,5 мл) и этанола (5 мл) при 0°С и добавляли раствор гидроксида калия (87%, 111 мг, 5,4 ммоль) в этаноле (4 мл). Эту смесь оставляли медленно нагреваться до комнатной температуры, и перемешивание продолжали в течение 24 часов. Затем добавляли дихлорметан (20 мл), воду (20 мл) и рассол (3 мл). Смесь интенсивно перемешивали в течение 2 минут. Затем слои разделяли, водный слой промывали дихлорметаном. Объединенные водные слои подкисляли (рН 5) лимонной кислотой и экстрагировали три раза дихлорметаном. Объединенные органические слои промывали рассолом и сушили. После концентрирования при пониженном давлении получили неочищенный 2-{1-[6-(2,2-диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-бутил}-малоновой кислоты моноэтиловый эфир (258 мг, 41%).

г) 2-{1-[6-(2,2-Диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-бутил}-акриловой кислоты этиловый эфир

К раствору 2-{1 -[6-(2,2-диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-бутил}-малоновой кислоты моноэтилового эфира (712 мг, 1,95 ммоль) в THF (6,5 мл) при 0°С добавляли формальдегид (37% в воде, 0,3 мл) за 5 минут. Перемешивание продолжали в течение 10 мин, затем по каплям добавляли пиперидин (0,26 мл, 2,63 ммоль) за 10 минут. Смесь оставляли нагреваться в течение ночи до комнатной температуры. Через 14 часов смесь концентрировали при пониженном давлении до одной трети ее объема, а затем добавляли эфир и воду (15 мл каждого). Через 2 минуты интенсивного перемешивания слои разделяли, водный слой экстрагировали эфиром, и объединенные органические слои промывали водой, 4%-ной лимонной кислотой, водой и рассолом. После сушки и концентрирования при пониженном давлении получили 2-{1-[6-(2,2-диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-бутил}-акриловой кислоты этиловый эфир (550 мг, 85%) в виде бесцветного твердого вещества.

д) 2-Ацетилсульфанилметил-3-[6-(2,2-диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-гексановой кислоты этиловый эфир

2-{1-[6-(2,2-Диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-бутил}-акриловой кислоты этиловый эфир (550 мг, 1,65 ммоль) растворяли в атмосфере аргона в тиолуксусной кислоте (4 мл), и по каплям добавляли триэтиламин (0,24 мл, 1,7 ммоль). После перемешивали в течение 16 часов при 50°С добавляли тиолуксусную кислоту (2 мл), и перемешивание продолжали в течение 14 часов. Раствор охлаждали до комнатной температуры и нейтрализовали добавлением раствора гидрокарбоната натрия. Смесь экстрагировали три раза этилацетатом, объединенные экстракты промывали раствором гидрокарбоната натрия и рассолом. После сушки и концентрирования при пониженном давлении остаток очищали флэш-хроматографией (дихлорметан/метанол, 60:1) с получением 2-ацетилсульфанилметил-3-[6-(2,2-диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-гексановой кислоты этилового эфира (619 мг, 92%) в виде вязкого масла.

е) 3-(6-Амино-пиридин-3-ил)-2-меркаптометил-гексановая кислота

2-Ацетилсульфанилметил-3-[6-(2,2-диметил-пропиониламино)-пиридин-3-ил]-гексановой кислоты этиловый эфир (40,4 мг, 99 мкмоль) растворяли в атмосфере аргона в водной соляной кислоте (37%, 4,2 мл) и нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. После концентрирования при пониженном давлении (0,3 торр, 40°С) получили указанное в заголовке соединение в виде гидрохлоридной соли (28 мг, 97%).

1H ЯМР (300 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 7.86 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.02 (t, 1H), 2.98-2.42 (m, 4H), 1.85-1.54 (m, 2H), 1.19-1.00 (m, 2H), 0.87-0.77 (m, 3Н).

MS (+) 225 (M+1).

Пример 34

3-(2-Амино-тиазол-5-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

а) 2-(2-Амино-тиазол-5-илметилен)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

К раствору 2-амино-тиазол-5-карбальдегида (47%; 6 г; 23 ммоль) в CH2Cl2 (30 мл) и DMF (30 мл) добавляли через молекулярные сита 4 серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 диэтилмалонат (3,5 мл; 23 ммоль), пиперидин (1,1 мл, 11,5 ммоль) и уксусную кислоту (0,7 мл, 11,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали комнатной температуре в течение 96 часов. Затем добавляли EtOAc, и реакционную смесь фильтровали через целит для удаления образовавшегося осадка. К фильтрату добавляли EtOAc (500 мл), и органическую фазу промывали NаНСО3 и рассолом. Органическую фазу сушили и концентрировали с получением 4,9 г неочищенного продукта. После добавления петролейного эфира к раствору неочищенного продукта в этаноле и последующей фильтрации получили 2-(2-амино-тиазол-5-илметилен)-малоновой кислоты диэтиловый эфир (1,13 г, 18%).

б) 2-(2-Амино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

NaCNBH3 (1,88 г, 29,9 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 2-(2-амино-тиазол-5-илметилен)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1,13 г; 4,2 ммоль) в этаноле при 0°С. рН раствора контролировали добавлением к раствору небольшого количества бромкрезолового зеленого. По каплям добавляли концентрированную НСl до тех пор, пока раствор не становился желтым. Ледяную баню убирали, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Добавляли воду, и продукт экстрагировали CH 2Cl2. Объединенные органические фазы сушили и концентрировали с получением 2-(2-амино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (1 г, 87,8%).

в) 2-(2-трет-Бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир

Вос2O (0,6 г, 27,5 ммоль) добавляли к раствору триэтиламина (0,4 мл; 30,1 ммоль), 4-(диметиламино)пиридина (0,34 г, 27,8 ммоль) и 2-(2-амино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (0,75 г; 27,5 ммоль) в CH2 Cl2 (5 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Дополнительно Вос 2O (0,15 г; 0,7 ммоль) добавляли при 0°С, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли СН2Сl2, и органическую фазу экстрагировали 0,3 М KHSO4 и рассолом. Органическую фазу сушили и концентрировали с получением 0,78 г неочищенного продукта. ЯМР показал, что приблизительно 40% 2-(2-амино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира остались. Вос2О добавляли (0,6 г; 27,5 ммоль) к раствору неочищенного продукта (0,78 г), триэтиламина (0,4 мл; 30,1 ммоль), 4-(диметиламино)пиридина (0,34 г; 27,8 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и процедуру обработки повторяли. Неочищенный продукт (1 г) очищали флэш-хроматографией (гептан/EtOAc; 1:1) и ВЭЖХ с получением 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты диэтилового эфира (184 мг, 17,9%).

г) 2-(2-трет-Бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты моноэтиловый эфир

2-(2-трет-Бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты диэтиловый эфир (158 мг; 0,43 ммоль) растворяли в этаноле (1 мл) и THF (0,5 мл), и добавляли раствор КОН (24 мг; 0,43 ммоль) в этаноле (0,14 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 96 часов, а затем выливали на лед с водой. Водную фазу экстрагировали диэтиловым эфиром, подкисляли до рН 3 добавлением 0,5 М HCl и экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические фазы сушили и концентрировали с получением 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (97 мг, 66,4%).

д) 2-(2-трет-Бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-акриловой кислоты этиловый эфир

К смеси 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-малоновой кислоты моноэтилового эфира (94 мг; 0,27 ммоль), 36% водного раствора формальдегида (36 мкл; 1,2 ммоль), СН2Сl 2 (0,2 мл) и воды (0,2 мл) добавляли при 0°С диэтиламин (30 мкл; 0,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали на лед с водой и экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические фазы промывали 5% NaHCO3, сушили и концентрировали с получением 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (69 мг, 80,9%).

е) 2-Ацетилсульфанилметил-3-(2-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-5-ил)-пропионовой кислоты этиловый эфир

Триэтиламин (32 мкл, 0,23 ммоль) добавляли к раствору 2-(2-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-5-илметил)-акриловой кислоты этилового эфира (67 мг, 0,21 ммоль) в тиоуксусной кислоте (0,4 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов, а затем выливали на лед с водой. Водный слой экстрагировали CH2Cl2. Объединенные органические фазы промывали насыщенным NaHCO3, сушили и концентрировали с получением 190 мг неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (гептан/EtOAc, 1:0 68:32) с получением 2-ацетилсульфанилметил-3-(2-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-5-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (43 мг, 51,6%).

ж) 3-(2-Амино-тиазол-5-ил)-2-меркаптометил-пропионовая кислота

Раствор 2-ацетилсульфанилметил-3-(2-трет-бутоксикарбониламино-тиазол-5-ил)-пропионовой кислоты этилового эфира (43 мг, 0,11 ммоль) в концентрированной HCl (1,5 мл) кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1,5 часов. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением 30 мг неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (8 мг; 21%) в виде гидрохлоридной соли.

1H ЯМР (500 МГц, D2O): серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708 2.75-3.1 (m, 5H), 7.0 (br s, 1H).

MS (+) 219 (M+1).

Сокращения

Ac = ацетат

aq = водный

AIBN = серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708,серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708’-азоизобутиронитрил

Вn = бензил

Вu = бутил

Bz = бензоил

DCC = дициклогексилкарбодиимид

DIAD = диизопропилазодикарбоксилат

DIBAL = диизобутилалюминий

DIPEA = диизопропилэтиламин

DMAP = N,N-диметиламинопиридин

DME = 1,2-диметоксиэтан

DMF = диметилформамид

DMSO = диметилсульфоксид

EDC = 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид

ее = энантиомерный избыток

Et = этил

EtOAC = этилацетат

EtOH = этанол

h = час

НОАс = уксусная кислота

HOBt= 1-гидроксибензотриазол

ВЭЖХ = высокоэффективная жидкостная хроматография

KHMDS = бис(триметилсилил)амид калия

LDA = диизопропиламид лития

МСРВА = 3-хлорпербензойная кислота

Me = метил

МеОН = метанол

min = минуты

РМВ = 4-метоксибензил

Ph = фенил

Рr = пропил

РуВОР = (бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфония гексафторфосфат

Red-Al = бис-(2-метоксиэтокси)алюмогидрид натрия

TEA = триэтиламин

TFA = трифторуксусная кислота

THF = тетрагидрофуран

Tos = толуол-4-сульфонил

Пример 35

В результате проведения анализа, описанного в разделе “In vitro эксперименты” для соединений по изобретению, получение которых описано в предшествующих примерах, были получены следующие данные по их способности ингибировать карбоксипептидазу U:

рIС50 CPU при рН 7,4pIC50 CPU при рН 7,4
Пример (* = рН 8)Пример (* = рН 8)
Пример 15,5*Пример 21/А5
Пример 33,4*Пример 21/Б 4
Пример 43,3*Пример 21/В6,3
Пример 55,5* Пример 21/Г4,5
Пример 66,6Пример 225
Пример 76,2*Пример 234,9
Пример 83,6*Пример 24 5,8
Пример 95,8Пример 256
Пример 102,7* Пример 265,4
Пример 11 4,0*Пример 27/А6,1
Пример 123,9*Пример 27Б4,9
Пример 134,8*Пример 27/В 6,1
Пример 146 Пример 27/Г5,7
Пример 15 5,1Пример 285,7
Пример 165,1Пример 295
Пример 175,9Пример 30 5,2
Пример 185,2Пример 316,1
Пример 20/А4 Пример 335,7
Пример 20/Б 5,4Пример 345,9
Пример 20/В6,4
Пример 20/Г5

Как видно из представленных результатов, соединения по изобретению являются активными ингибиторами карбоксипептидазы U.

Пример 36

Соединения по изобретению могут быть представлены, например, в виде следующих препаратов.

1. Раствор для парентерального введения

Активное соединение (соединение по изобретению) 5 г

Хлорид натрия для инъекций 6 г

1 М гидроксид натрия для доведения рН до значения рН 5-7

Вода для инъекций до 1000 мл

Активное соединение и хлорид натрия растворяют в воде. рН доводят до значения рН 5-7 добавлением водного гидроксида натрия и затем добавляют воду до конечного объема. Полученный раствор стерилизуют фильтрованием и немедленно разливают в стерильные ампулы на 10 мл, которые герметично запаивают.

2. Таблетки для перорального введения

Активное соединение (соединение по изобретению) 150 г

Алюмосиликат натрия 20 г

Парафин 120 г

Микрокристаллическая целлюлоза 20 г

Гидроксипропилцеллюлоза 5 г

Стеарилфумарат натрия 3 г

Активное соединение, алюмосиликат натрия, парафин и микрокристаллическую целлюлозу смешивают и добавляют водный раствор гидроксипропилцеллюлозы. Полученную смесь высушивают и размалывают с получением гранул, которые затем смешивают со стеарилфумаратом натрия. Готовую смесь прессуют в таблетки в таблеточной машине с получением 1000 таблеток, каждая из которых содержит 150 мг активного соединения.

Соединения по изобретению также могут быть приготовлены в виде комбинированного препарата совместно, например, с таким антитромбоцитарным агентом, как аспирин. Примером такого препарата является следующий препарат.

3. Таблетки для перорального введения (комбинированный препарат)

Активное соединение (соединение по изобретению) 100 г

Ацетилсалициловая кислота (аспирин) 100 г

Лактоза 400 г

Поливинилпирролидон 60 г

Микрокристаллическая целлюлоза 60 г

Стеарат магния 12 г

Активное соединение, аспирин и лактозу смешивают с водным раствором поливинилпирролидона. Смесь высушивают и размалывают с образованием гранул, которые затем смешивают с микрокристаллической целлюлозой и стеаратом магния. Затем полученную смесь прессуют в таблетки в таблеточной машине, получая 1000 таблеток, каждая из которых содержит 100 мг активного соединения и 100 мг аспирина.

Кроме того, препараты соединений по изобретению могут вводиться совместно с препаратами антитромботических агентов с иным механизмом действия, например совместно с препаратом аспирина. В таком случае эти препараты могут быть представлены в виде следующего набора компонентов:

4. Набор компонентов

Картонная упаковка, содержащая блистерную упаковку с 10 таблетками активного соединения, изготовленными в соответствии с прописью (2), и блистерную упаковку с 10 таблетками аспирина по 100 мг, изготовленными традиционным способом.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение общей формулы I

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, где

R1 представляет собой

С16алкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

алифатический гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота, возможно замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

ароматический гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

или арил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R2 представляет собой Н, алкил, алкилтио, алкокси или циклоалкил;

R3 представляет собой COOR 5, SO(OR5), SO3R5, P=O(OR 5)2, B(OR5)2, P=OR 5(OR5) или тетразол, или изостер карбоновой кислоты, представляющий собой кислотную группу, имеющую рКа от приблизительно -5 до приблизительно 25;

R4 представляет собой SH или S-СО-С16алкил;

R 5 представляет собой Н или С16алкил;

R6 представляет собой Н;

Х представляет собой C(Z)2 или NR6CO;

Y представляет собой C(Z)2;

Z независимо представляет собой Н, С16алкил, арил или циклоалкил.

2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, где

R1 представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

алифатический гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота, возможно замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

ароматический гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

или арил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R2 представляет собой Н, алкил, алкилтио, алкокси или циклоалкил;

R3 представляет собой COOR5;

R4 представляет собой SH или S-CO-C16алкил;

R 5 представляет собой Н или С16алкил;

R6 представляет собой Н;

Х представляет собой C(Z)2;

Y представляет собой C(Z)2 ;

Z независимо представляет собой Н, С16алкил, арил или циклоалкил.

3. Соединение по п.1 или 2, или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, где

R1 представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

алифатический гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота, возможно замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

ароматический гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

гетероциклил, содержащий по меньшей мере один гетероатом, выбранный из S или О, и замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R2 представляет собой Н или С13алкил;

R3 представляет собой COOR5;

R4 представляет собой SH или S-CO-С16алкил;

R5 представляет собой Н или С16алкил;

Х представляет собой C(Z)2;

Y представляет собой C(Z)2;

Z независимо представляет собой Н или С16алкил.

4. Соединение по любому из пп.1-3 или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, где

R1 представляет собой

циклоалкил, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

алифатический гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота, возможно замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

ароматический гетероциклил, содержащий по меньшей мере один атом азота, замещенный одной или более чем одной основной группой, такой как амино, амидино и/или гуанидино;

R2 представляет собой Н или С1алкил;

R3 представляет собой COOR5;

R4 представляет собой SH или S-CO-C16алкил;

R5 представляет собой Н или С16алкил;

Х представляет собой C(Z)2;

Y представляет собой C(Z)2 ;

Z независимо представляет собой Н или C16алкил.

5. Соединение по любому из пп.1-4 или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, где

R1 представляет собой

циклопентил, пиридил, пиримидинил, пиперидинил или тиазолил;

R2 представляет собой Н или С1алкил;

R3 представляет собой COOR5;

R4 представляет собой SH;

R5 представляет собой Н;

Х представляет собой CHZ;

Y представляет собой CHZ;

Z независимо представляет собой Н или С 16алкил.

6. Способ получения соединения по любому из пп.1-5, где R1, R3, R 4 и Y такие, как определено в п.1, Х представляет собой C(Z)2, и R2 представляет собой Н, при котором

соединение формулы VI

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R1, R3 и Y такие, как определено в п.1, а Х представляет собой C(Z)2, подвергают взаимодействию с соединением формулы IX

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R5 является подходящей защитной группой, такой как ацетил (Ас), бензоил (Bz), 4-метоксибензил (РМВ) или бензил (Вn), одним или в присутствии подходящего основания, такого как NaOMe, NaH или триэтиламин, или, альтернативно, в присутствии свободно-радикального инициатора, такого как серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708,серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708’-азоизобутиронитрил (AIBN), в стандартных условиях.

7. Способ получения соединения по любому из пп.1-5, где R1, R2, R 3 и R4 такие, как определено в п.1, Y представляет собой СН2, и Х представляет собой C(Z)2 , при котором

соединение формулы XIV

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R1, R2 и R3 такие, как определено в п.1, а Х представляет собой C(Z)2 , подвергают взаимодействию с соединением общей формулы IX

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R5 является подходящей защитной группой, такой как Ас или Bz, в присутствии подходящего реагента, такого как трифенилфосфин/диизопропилазодикарбоксилат (PPh3 /DIAD), в стандартных условиях.

8. Способ получения соединения по любому из пп.1-5, где R1, R2, R 3, R4 и Y такие, как определено в п.1, и Х представляет собой NR6CO, при котором соединение общей формулы XV

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R2, R3, R6 и Y такие, как определено в п.1, a R5 является подходящей защитной группой, такой как Ac, Bz, PMB или Вn, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы XVI

серусодержащие соединения, способы их получения и фармацевтические   препараты на их основе, патент № 2244708

где R1 такой, как определено в п.1, а Х представляет собой СООН, в присутствии подходящих связывающих реагентов, таких как (бензотриазол-1-илокси)трипирролидинфосфония гексафторфосфат/диизопропилэтиламин (PyBOP/DIPEA), дициклогексилкарбодиимид/1-гидроксибензотриазол (DCC/HOBt), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид/триэтиламин/N,N-диметиламинопиридин (EDC/TEA/DMAP) или пиридин, в стандартных условиях.

9. Фармацевтический препарат, обладающий ингибирующей активностью в отношении карбоксипептидазы U и содержащий соединение по любому из пп.1-5 в качестве активного ингредиента в комбинации с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

10. Соединение по любому из пп.1-5 для изготовления лекарства для лечения или профилактики состояний, связанных с ингибированием карбоксипептидазы U.

11. Соединение по любому из пп.1-5 для изготовления лекарства для ингибирования карбоксипептидазы U.

12. Фармацевтический препарат для применения в лечении или профилактике состояний, связанных с ингибированием карбоксипептидазы U, содержащий соединение по любому из пп.1-5 в комбинации с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

13. Фармацевтический препарат, обладающий ингибирующей активностью в отношении карбоксипептидазы U и содержащий

1) соединения формулы I или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, и

2) один или более чем один антитромботический агент с иным механизмом действия, такой как антитромбоцитарный агент, ингибитор рецепторов тромбоксана, ингибитор синтетазы, антагонист рецепторов фибриногена, миметик простациклина, ингибитор фосфодиэстеразы или антагонист рецептора (Р2T) аденозин-5’-дифосфата (ADP-рецептора (Р2Т),

в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем.

14. Набор компонентов, обладающий ингибирующей активностью в отношении карбоксипептидазы U, включающий в себя

1) фармацевтический препарат, содержащий соединение формулы I или его фармацевтически приемлемые соль или сольват, или сольват такой соли, в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем; и

2) фармацевтический препарат, содержащий один или более чем один антитромботический агент с иным механизмом действия, такой как антитромбоцитарный агент, ингибитор рецепторов тромбоксана, ингибитор синтетазы, антагонист рецепторов фибриногена, миметик простациклина, ингибитор фосфодиэстеразы или антагонист ADP-рецептора (Р2Т),

в смеси с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем;

причем соединение (1) и агент (2) представлены в формах, которые подходят для введения совместно друг с другом.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2244708

patent-2244708.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс C07D211/34 атомами углерода, связанными тремя связями с гетероатомами (из которых одна может быть с галогеном), например с эфирными или нитрильными группами

Патенты РФ в классе C07D211/34:
агенты, связывающиеся с psma, и их применение -  патент 2494096 (27.09.2013)
(r)-арилалкиламинопроизводные и содержащие их фармацевтические композиции -  патент 2458051 (10.08.2012)
вторичные амины в качестве ингибиторов ренина -  патент 2425032 (27.07.2011)
иммунодепрессантные соединения и композиции -  патент 2405768 (10.12.2010)
производные циклического амина, способы их получения и фармацевтические композиции, их содержащие -  патент 2392270 (20.06.2010)
азотсодержащие гетероциклические производные и лекарственные средства, содержащие их в качестве активного ингредиента -  патент 2366655 (10.09.2009)
производные пирролидина и пиперидина -  патент 2326120 (10.06.2008)
ингибиторы карбоксипептидазы b плазмы (крови) -  патент 2323223 (27.04.2008)
дипептиднитрильные ингибиторы катепсина к -  патент 2293732 (20.02.2007)
дипептиднитрильные ингибиторы катепсина к -  патент 2265601 (10.12.2005)

Класс C07D213/54 радикалы, замещенные атомами углерода, связанными тремя связями с гетероатомами (из которых одна может быть с галогеном), например с эфирными или нитрильными группами

Класс C07D213/70 атомы серы

Патенты РФ в классе C07D213/70:
новые лиганды ванилоидных рецепторов и их применение для изготовления лекарственных средств -  патент 2487120 (10.07.2013)
ингибитор связывания s1p1 -  патент 2468009 (27.11.2012)
соединение сульфонамида или его соль -  патент 2425029 (27.07.2011)
гетероциклические ингибиторы мек и способы их применения -  патент 2414455 (20.03.2011)
производные феноксиуксусной кислоты -  патент 2360901 (10.07.2009)
новые 2-пиридинилэтилбензамидные соединения -  патент 2352562 (20.04.2009)
амиды антраниловой кислоты, способ их получения и их применение, способ лечения заболевания новообразованием и фармацевтический препарат, обладающий ингибирующей активностью в отношении тирозинкиназного рецептора vegf -  патент 2318811 (10.03.2008)
ингибиторы катепсин-цистеинпротеазы -  патент 2312861 (20.12.2007)
n-фениларилсульфонамид, фармацевтическая композиция, содержащая указанное соединение в качестве активного ингредиента, соединение, являющееся промежуточным в синтезе указанного соединения, и способ его получения -  патент 2299202 (20.05.2007)
производные урацила, гербицидная композиция, способ борьбы с сорняками и промежуточные продукты (варианты) -  патент 2264395 (20.11.2005)

Класс C07D213/73 незамещенные амино- или иминогруппами

Патенты РФ в классе C07D213/73:
замещенные арилсульфонамиды как противовирусные средства -  патент 2423352 (10.07.2011)
новые производные 2,6-диаминопиридин-3-она -  патент 2385866 (10.04.2010)
конденсированные производные пиридина, применимые в качестве антагонистов аденозинового рецептора a2b -  патент 2370496 (20.10.2009)
2,5-дизамещенные 3-меркаптопентановые кислоты и способ их получения -  патент 2365583 (27.08.2009)
способ производства 2,3-дихлорпиридина -  патент 2359960 (27.06.2009)
моноциклические гетероциклы, ингибирующие киназу -  патент 2350603 (27.03.2009)
2,4-бис(трифторэтокси)пиридиновое соединение и содержащее его лекарственное средство -  патент 2346942 (20.02.2009)
новые производные аминопиридина в качестве антагонистов mgiur5 -  патент 2330020 (27.07.2008)
применение производных анилина в качестве ингибиторов фосфодиэстеразы 4 -  патент 2321583 (10.04.2008)
полициклическое соединение, фармацевтическая композиция, обладающая свойствами антагониста рецептора h3, и способ лечения с его применением -  патент 2301231 (20.06.2007)

Класс C07D213/81 амиды; имиды

Патенты РФ в классе C07D213/81:
новый агонист бета рецептора тиреоидного гормона -  патент 2527948 (10.09.2014)
способ и процесс приготовления и производства дейтерированной омега-дифенилмочевины -  патент 2527037 (27.08.2014)
бисамидные производные и их применение в качестве инсектицидных соединений -  патент 2515966 (20.05.2014)
антагонисты рецептора сфингозин-1-фосфата (s1p) и способы их применения -  патент 2505527 (27.01.2014)
хелаты металлов, имеющие перфторированный пэг радикал, способы их получения и их применение -  патент 2470014 (20.12.2012)
способ получения амидного производного -  патент 2469025 (10.12.2012)
моногидрат 4-[4-({[4-хлор -3(трифторметил)фенил]карбамоил}амино)-3-фторфенокси]-n-метилпиридин-2-карбоксамида -  патент 2466992 (20.11.2012)
новые соединения -  патент 2456273 (20.07.2012)
амиды 3-арил-3-гидрокси-2-аминопропионовой кислоты, амиды 3-гетероарил-3-гидрокси-2-аминопропионовой кислоты и родственные соединения, обладающие обезболивающим и/или иммуностимулирующим действием -  патент 2433999 (20.11.2011)
сложноэфирные производные и их медицинское применение -  патент 2431480 (20.10.2011)

Класс C07D239/26 только с атомами водорода, углеводородными или замещенными углеводородными радикалами, непосредственно связанными с атомами углерода кольца

Патенты РФ в классе C07D239/26:
1н-хиназолин-2,4-дионы -  патент 2509764 (20.03.2014)
производные 1,1,1-трифтор-2-гидрокси-3-фенилпропана -  патент 2481333 (10.05.2013)
гетероциклические соединения в качестве положительных модуляторов метаботропного глутаматного рецептора 2 (рецептора mglu2) -  патент 2479577 (20.04.2013)
фторсодержащее сераорганическое соединение и его пестицидная композиция -  патент 2468008 (27.11.2012)
производные арил- и гетероарилэтилацилгуанидина, их получение и их применение в терапии -  патент 2446165 (27.03.2012)
конденсированные бициклические карбоксамидные производные, используемые в качестве ингибиторов схсr2 для лечения воспалений -  патент 2404962 (27.11.2010)
соединения, которые усиливают рецептор глутамата, и их применение в медицине -  патент 2403242 (10.11.2010)
фенильные производные, содержащие ацетиленовую группу -  патент 2384565 (20.03.2010)
производные амидов, несущие циклопропиламинокарбонильный заместитель, пригодные в качестве ингибиторов цитокинов -  патент 2382028 (20.02.2010)
производные бензамида, способ их получения и их применение, фармацевтическая композиция и способ обеспечения ингибирующего действия по отношению к hdac -  патент 2376287 (20.12.2009)

Класс A61K31/44  не конденсированные пиридины; их гидрированные производные их

Патенты РФ в классе A61K31/44:
глазные капли на основе композиции фармацевтически приемлемой аддитивной соли кислоты и метилэтилпиридинола, содержащие композицию витаминов группы в -  патент 2528912 (20.09.2014)
новый агонист бета рецептора тиреоидного гормона -  патент 2527948 (10.09.2014)
производное бензола или тиофена и его применение в качестве ингибитора vap-1 -  патент 2526256 (20.08.2014)
системное лечение кровососущих паразитов и паразитов-консументов крови посредством перорального введения антипаразитного средства -  патент 2526169 (20.08.2014)
соединения, ингибирующие (блокирующие) горький вкус, способы их применения и получения -  патент 2522456 (10.07.2014)
офтальмологическое фармацевтические композиции для неоангиогенных патологий глаза -  патент 2519739 (20.06.2014)
средство наружной терапии для больных атопическим дерматитом -  патент 2517520 (27.05.2014)
содержащее конденсированную кольцевую структуру производное и его применение в медицине -  патент 2512547 (10.04.2014)
пролекарства нестероидных противовоспалительных средств (nsaia) c очень высокой скоростью проникновения через кожу и мембраны и новые медицинские применения указанных пролекарств -  патент 2509076 (10.03.2014)
конъюгаты гидрокодона с бензойной кислотой, производными бензойной кислоты и гетероарилкарбоновой кислотой, пролекарства, способы их получения и их применение -  патент 2505541 (27.01.2014)

Класс A61K31/445  не конденсированные пиперидины, например пиперокаин

Патенты РФ в классе A61K31/445:
новые противомикробные средства -  патент 2522582 (20.07.2014)
ароиламино- и гетероароиламино-замещенные пиперидины в качестве ингибиторов glyt-1 -  патент 2517701 (27.05.2014)
способ получения плевромутилинов -  патент 2512591 (10.04.2014)
3- или 4-замещенные пиперидиновые соединения -  патент 2504543 (20.01.2014)
новые 4-(азациклоалкил)бензол-1,3-диоловые соединения в качестве ингибиторов тирозиназ, способ их получения и их применение в лечении человека и в косметических средствах -  патент 2499794 (27.11.2013)
соединения, представляющие собой стиролильные производные, для лечения офтальмических заболеваний и расстройств -  патент 2494089 (27.09.2013)
комбинация частичного агониста никотиновых рецепторов и ингибитора ацетилхолинестеразы, содержащая ее фармацевтическая композиция и ее применение в лечении когнитивных расстройств -  патент 2493851 (27.09.2013)
способ лечения остеоартроза височно-нижнечелюстного сустава -  патент 2486927 (10.07.2013)
композиции, синтез и способы применения ингибиторов холинэстеразы на основе инданона -  патент 2478619 (10.04.2013)
лекарственное средство, содержащее производное карбостирила и донепезил, для лечения болезни альцгеймера -  патент 2469723 (20.12.2012)

Класс A61K31/495  содержащие шестичленные кольца только с двумя атомами азота в качестве гетероатомов, например пиперазин

Патенты РФ в классе A61K31/495:
2, 5-дизамещенные арилсульфонамидные антагонисты ссr3 -  патент 2527165 (27.08.2014)
замещенные аминоинданы и их аналоги, и их применение в фармацевтике -  патент 2522586 (20.07.2014)
применение аминных производных фуллеренов с60 и с70 и композиций на их основе в качестве противомикробных средств -  патент 2522012 (10.07.2014)
низкомолекулярные ингибиторы n-концевой активации рецептора андрогенов -  патент 2519948 (20.06.2014)
способ прогнозирования течения инфаркта миокарда на основании оценки выраженности митохондриальной дисфункции -  патент 2519700 (20.06.2014)
агенты, связывающиеся с амилоидами -  патент 2517174 (27.05.2014)
способ оптимизации интеллектуальной деятельности обучающихся -  патент 2516117 (20.05.2014)
новые соединения миметиков обратного действия, способ их получения и применения -  патент 2515983 (20.05.2014)
фенилалкилпиперазины, модулирующие активность tnf -  патент 2512567 (10.04.2014)
фармацевтическая композиция для купирования первичной реакции на облучение и ранней преходящей недееспособности -  патент 2509557 (20.03.2014)

Класс A61P7/00 Лекарственные средства для лечения нарушений состояния крови или внеклеточной жидкости

Патенты РФ в классе A61P7/00:
способ получения лекарственных соединений, содержащих дабигатран -  патент 2529798 (27.09.2014)
способ профилактики тромбозов у лиц с сердечно-сосудистыми заболеваниями и хронической болью -  патент 2528904 (20.09.2014)
модифицированный фактор виллебранда с удлиненным полупериодом существования in vivo, его применения и способы получения -  патент 2528855 (20.09.2014)
6-замещенные изохинолины и изохинолиноны полезные в качестве ингибиторов rho-киназы -  патент 2528229 (10.09.2014)
производное сложного эфира тиенопиридина, содержащее цианогруппу, способ его получения, его применение и композиция на его основе -  патент 2526624 (27.08.2014)
способ коррекции нарушений гемостаза при хроническом калькулезном холецистите на фоне хронического гепатита или цирроза печени -  патент 2526117 (20.08.2014)
гетероциклические соединения и способы применения -  патент 2525116 (10.08.2014)
способ лечения синдрома эндогенной интоксикации, обусловленного гиперпротеолизом -  патент 2524647 (27.07.2014)
терапевтические полипептиды, их гомологи, их фрагменты и их применение для модуляции агрегации, опосредованной тромбоцитами -  патент 2524129 (27.07.2014)
способ активации регенерации миелоидной ткани старых лабораторных животных -  патент 2523574 (20.07.2014)


Наверх