количественное определение эналаприла

Формула изобретения

Количественное определение эналаприла, заключающееся в электрохимическом концентрировании вещества на поверхности электрода с последующей регистрацией вольтамперных кривых, отличающееся тем, что концентрирование проводят на стеклоуглеродном электроде в течение (Тэ) 60 с при потенциале (Еэ) 0,3 В на фоне 0,02-0,01 н. хлорида лития и 30 мкл концентрированного гидроокиси натрия до рН 8-9 с последующей регистрацией вольтамперных кривых, начиная с потенциала (Ен) 0,3 В, при скорости развертки потенциала 20 мВ/с, а концентрацию эналаприла определяют по высоте волны в диапазоне потенциалов - (0,55-0,5)В относительно хлорсеребряного электрода.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к инверсионно-вольтамперометрическому способу определения органического вещества, эналаприла (ЭНАП).

Препарат используется при лечении заболеваний сердечно-сосудистой системы. Эналаприл обеспечивает длительное ингибирование ангиотензин конвертазы (АСЕ), что приводит к снижению концентрации ангиотензина II в плазме, уменьшению секреции альдостерона и одновременному мягкому повышению содержания калия в сыворотке. Гидрохлортиазид, входящий в состав ЭНАПА, оказывает диуретическое и гипотензивное действие; он способствует выделению ренина. Препарат не оказывает воздействия на физические и умственные способности пациента.

В последние годы (1990-1995 г.г.) появилось небольшое количество работ по количественному определению эналаприла. В основном это методики по высокоэффективной жидкостной хроматографии [1-2], газожидкостной хроматографии [3]. Однако использование хроматографических методов ограничивается веществами и объектами с низкими температурой кипения и достаточно высокой летучестью, а также возможности потери определяемого вещества в процессе концентрирования.

Сведения по определению микроколичеств эналаприла вольтамперометрическим и инверсионно-вольтамперометрическим методами также отсутствуют.

Известен инверсионно-вольтамперометрический способ определения лекарственного препарата [4]. Осадок вещества концентрируют (Т_э= 170-190 с) на фоне 0,2 н. хлорида лития на поверхности ртутно-пленочного электрода при потенциале электролиза (E_э), равном -(1,80-1,75) В, с последующей регистрацией вольтамперных кривых при следующих значениях E: от -(1,1-1,0) В, относительно хлорсеребряного электрода.

Наиболее близким способом определения является инверсионно-вольтамперометрический способ определения лекарственного вещества, взятый за прототип [5]. Осадок вещества концентрируют на поверхности стеклоуглеродного электрода при потенциале элекролиза (E_э), равном 0,10-0,20 В, на фоне буферного раствора Бриттона-Робинсона pH 7-8 в течение (Т_э) 20-30 с с последующей регистрацией вольтамперных кривых при линейной скорости развертки потенциала 20 мВ/с. Использование условий, приведенных в способе прототипа, делает невозможным применение данного способа для определения эналаприла в растворах.

Целью изобретения является увеличение чувствительности и экспрессности способа определения эналаприла методом адсорбционной инверсионной вольтамперометрии. Поставленная цель достигается тем, что проводят электрохимическое накопление вещества на поверхности электрода с последующей регистрацией поляризационных кривых.

Новым в способе является то, что электрохимическое накопление эналаприла проводят на поверхности стеклоуглеродного электрода при потенциале электролиза (Е_э), равном 0,3 В, на фоне 0,02-0,01 н. хлорида лития с 30 мкл концентрированной гидроокиси натрия до pH 8-9 в течение 60 с с последующей регистрацией поляризационных кривых, начиная с потенциала (E_н) 0,3 В при линейной скорости развертки потенциала 20 мВ/с, а концентрацию препарата определяют по высоте аналитического сигнала в интервале потенциалов -(0,55-0,5) В относительно хлорсеребряного электрода.

В предлагаемом способе определения эналаприла проводят на фоне 0,02-0,01 н. хлорида лития с 30 мкл концентрированной гидроокиси натрия до pH 8-9, который ранее не применялся для определения микроколичеств органических соединений электрохимическими методами. Концентрация и pH фонового электролита подобраны экспериментально. При pH 8-9 фиксируется четкая аналитическая полуволна, которая хорошо воспроизводится при последующих съемках вольтамперных кривых. При pH 6-8 волна имеет размытый вид, что затрудняет обработку аналитического сигнала. В кислой и слабокислой среде сигнал эналаприла отсутствует вообще.

Другим отличительным признаком являются установленные условия электрохимического накопления: E_э равен 0,3 В.

При значениях E_э > 0,3 В величина регистрируемой катодной волны уменьшается, что снижает чувствительность определения, а при E_э > 0,3 В происходит частичное накопление осадка.

Важным для определения эналаприла методом инверсионной вольтамперометрии является выбор скорости развертки. Оптимальной экспериментально установленной является скорость 20 мВ/с. Увеличение скорости линейно меняющегося потенциала увеличивает чувствительность, но при этом растет ток заряжения (увеличивается остаточный ток и уменьшается разрешающая способность способа, затрудняется обработка полярограмм).

Время предварительного электролиза выбирают в зависимости от концентрации определяемого вещества.

Оптимальное значение Т_э равно 60 с, при этом достигается максимальное значение величины тока растворения накопленных осадков с поверхности стеклоуглеродного электрода и хорошая воспроизводимость для количественного определения органического вещества (Sr < 0,33). При Т_э < 60 с величина тока растворения не достигает максимального значения, что снижает чувствительность определения препарата.

В предлагаемом способе в качестве индикаторного электрода использовали стеклоуглеродный электрод (СУ) из-за хорошей воспроизводимости аналитического сигнала и низкого значения остаточного тока.

Установленные условия впервые позволили количественно определять ЭНАП путем регистрации вольтамперных кривых при потенциалах -(0,55-0,5) В на фоне 0,02 н. -0,01 н. хлорида лития и 30 мкл концентрированной гидроокиси натрия до pH 8-9. Нижняя граница определяемых содержаний (C_н) этого соединения равна 1 10^-10 г/мл. Относительное стандартное отклонение (Sr) для диапазона концентраций 2,5 10^-9 - 2,5 10^-5 г/мл не превышает 0,11.

Все условия определения эналаприла подобраны экспериментально. Приготовления фоновых и стандартных растворов органического вещества являются общепринятыми.

Пример 1. Определение эналаприла методом инверсионной вольтамперометрии.

В кварцевый стаканчик емкостью 20 мл наливают 0,02 н.-0,01 н. раствор хлорида лития и 30 мкл концентрированной гидроокиси натрия. Раствор деаэрируют азотом с содержанием кислорода 0,001% в течение 20 с и, не прекращая перемешивания, проводят электролиз раствора при условии E_э = 0,30 В, Т_э = 60 с.

Отключают газ и фиксируют вольтамперограмму при скорости развертки потенциала 20 мВ/с, начиная с E_н, равного 0,30 В. Отсутствие пиков свидетельствует о чистоте фона. Затем добавляют 10 мкл стандартного раствора эналаприла (2,5 10^-7 г/мл), перемешивают раствор и проводят электрохимическое концентрирование осадка в тех же условиях.

Аналитический сигнал для указанной концентрации ЭНАПА регистрируют в диапазоне потенциалов -(0,55-0,5) В при чувствительности прибора 1 10^-8 A/мм. Время единичного анализа не превышает 3-5 мин.

Установленные экспериментальные условия определения эналаприла методом инверсионной вольтамперометрии позволяют экспрессно определять лекарственный препарат в водных и биологических средах.

Разработанную методику можно использовать для фармакокинетических исследований.

Источники информации

1. Sain Ravi, Sain C.L. /Simutauems quautitation of enalapril maleate and hudroclorthiazide on daug dosage from using nigh performance liguid chromatography / Indian J. Pharm. Sci. -1992. - v.54, N 6. - p.250-252.

2. Saue R. T. , Nerurkar V.R., Bagool M.A./ Simutauems quautitation of enalapril maleate and hudroclorthiazide liguid chromatography// Indian J. Pharm. Sci. - 1991. - v.53, N 3 p.l45-143.

3. Logan B. K., Patrick K. S./Photodegration of nifedipine relative to nitrendipine evaluated by liquid and gas chromatography / J.Chromatogr.Biomed.Appl. - 1990. -529, N 1. -C.175-181.

4. Ивановская Е.А./Количественное определение дигоксина в сыворотке крови методом инверсионной вольтамперометрии. // Патент РФ N 2132553. От 30.05.96 г.

5. Ивановская Е. А./ Инверсионно-вольтамперометрический способ определения кардила.// Патент РФ N 2130607 от 06.10.95 г.