производные пиперазинилпентамида и фармацевтическая композиция для ингибирования вич-протеазы

Формула изобретения

1. Производные пиперазинилпентамида формулы



в которой V - простая связь, или , или -SO₂-Q-, где Q - простая связь или -O-, -NR- или гетероцикл, необязательно замещенный -C_1-4-алкилом;

R¹ представляет собой

(1) -C_1-4-алкил, незамещенный или замещенный одним или более заместителем из группы:

а) атом галогена,

б) C_1-3-алкоксигруппа,

в) арил, незамещенный или замещенный одним или более C_1-4-алкилами, аминогруппами, гидроксигруппами или арилами,

г) -W-арил или -W-бензил, где W представляет собой -O-, -S- или -NH-,

д) 5 - 7-членный циклоалкил, незамещенный или замещенный одним или несколькими:

I) атомами галогена,

II) C_1-3-алкоксигруппами или

III) арилами,

е) гетероцикл, незамещенный или замещенный одним или более заместителями, выбранными из: оксигруппы, атомов галогена, C_1-4-алкоксигруппы, C_1-4-алкила, алкилов, алкилов или бутилоксикарбонилов,

ж) алкил,

з) алкил,

и) -NH-SO₂C_1-3-алкил,

й) -NR₂, где R представляет собой водород или C_1-4-алкил,

к) -COOR или

л) -((CH₂)_mO_n)R, где m равен 2,3,4 или 5 и n равно 0,1,2 или 3, или

(2) арил, незамещенный или замещенный одним или более заместителем из группы:

а) атом галогена,

б) гидроксил,

в) -NO₂ или -NR₂,

г) C_1-4-алкил

д) C_1-3-алкокси, незамещенный или замещенный одним или несколькими C_1-3-алкоксигруппами,

е) -COOR,

ж)

з) -CH₂NR₂,

и)

й) -CN,

к) -CF₃,

л)

м) арил-C_1-3-алкокси,

н) арил,

о) -NRSO₂R,

п) -OP(O) (OR_x)₂, где R_x - водород или арил,

р) -R⁵, как определен ниже, или

(3) гетероцикл, незамещенный или замещенный одной или более из групп: оксо, атом галогена, аминогруппа, C_1-4-алкоксигруппа, C_1-4-алкил, или бутоксикарбонил,

(4) карбоциклическую группу, незамещенную или замещенную одной или более группами из: атомов галогена, аминогрупп или C_1-4-алкоксигрупп;

R³ представляет собой бензил, незамещенный или замещенный одной или несколькими (1) гидроксильными группами, (2) C_1-3-алкоксигруппами, замещенными одной или более -OH, или (3)



R⁵ представляет собой

(1) -W-(CH₂)_m - NR⁶R⁷, где W имеет указанные выше значения, m равен 2, 3, 4 или 5 и R⁶ и R⁷ независимо представляют собой:

а) водород,

б) C_1-6-алкил, незамещенный или замещенный одной или несколькими

I) C_1-3-алкоксигруппами, или

II) -NR₂,

в) одинаковые или разные группы и связанные вместе с образованием 5 - 7-членного гетероцикла, такого как группа морфолино, содержащего до двух дополнительных гетероатомов, выбираемых из -O- -S- или -SO₂,

где R - водород или C₁ - C₄-алкил, гетероцикла, необязательно замещенного C_1-4-алкилом, или

г) ароматический гетероцикл, незамещенный или замещенный одним или несколькими

I) C₁ - C₄-алкилами или

II) -NR₂,

(2) -(CH₂)_q - NR⁶R⁷, где q равен 1, 2, 3, 4 или 5 и R⁶ и R⁷ имеют указанные значения, но R⁶ или R⁷ не являются H или незамещенными C₁ - C₆-алкилами, или

(3) бензофурил, индолил, азациклоалкил, азабицикло-C₇ - C₁₁-циклоалкил или бензопиперидинил, незамещенный или замещенный C_1-4-алкилом,

R¹² представляет собой



а гетероцикл представляет собой 5 - 7-членную моно- или бициклическую систему либо 7 - 10-членную бициклическую систему, содержащую азот, кислород или серу в качестве гетероатома,

или их фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1 формулы



где V - простая связь;

R¹ представляет собой

1) -C_1-4-алкил, незамещенный или замещенный одним или более из:

а) атомов галогена,

б) C_1-3-алкоксигрупп,

в) арила, незамещенного или замещенного одним или более C_1-4-алкилами, аминогруппами, гидроксигруппами или арилами,

г) -W-арила или -W-бензила, где W представляет собой -O-, -S- или -NH-,

д) 5 - 7-членных циклоалкильных групп, незамещенных или замещенных одним или более

I) атомами галогена,

II) C_1-3-алкоксигруппами или

III) арилами,

е) гетероциклических групп, незамещенных или замещенных одной или несколькими: оксигруппами, атомами галогена, C_1-4-алкоксигруппами, C_1-4-алкилами, алкилами, алкилами, или бутилоксикарбонильными группами,

ж) алкилов,

з) алкилов,

и) -NH-SO₂C_1-3-алкилов,

й) -NR₂, где R представляет собой водород или C_1-4-алкил,

к) -COOR или

л) -((CH₂)_mO)_nR, где m равен 2, 3, 4 или 5 и n равен 0, 1, 2 или 3;

R³ представляет собой бензил, незамещенный или замещенный одной или несколькими (1) гидроксильными группами, (2) C_1-3-алкоксигруппами, замещенными одним или несколькими -OH, или (3)



R¹² представляет собой



3. Соединение по п.2 формулы



где V - простая связь;

R¹ представляет собой:

(1) -C₁ - C₄-алкил, незамещенный или замещенный одним или более:

в) арилами, незамещенными или замещенными одним или более C_1-4-алкилами, аминогруппами, гидроксильными группами или арильными группами,

д) 5 - 7-членными циклоалкильными группами, незамещенными или замещенными одним или более

(I) атомами галогена,

(II) C_1-3-алкоксигруппами или

(III) арилами,

е) гетероциклическими группами, незамещенными или замещенными одной или более оксогруппами, атомами галогена, C₁ - C₄-алкоксигруппами, C_1-4-алкилами, C_1-3-алкилами, алкилами, или бутилоксикарбонильными группами;

R³ представляет собой бензил, незамещенный или замещенный одной или более (1) гидроксильными группами, (2) C_1-3-алкоксигруппами, замещенными одним или более -OH, или (3):



R¹² представляет собой



или его фармацевтически приемлемая соль.

4. Соединение по п.3 формулы



отличающееся тем, что

V - простая связь;

R¹ представляет собой:

1) -C_1-4-алкил, незамещенный или замещенный одним или более:

в) арилами, незамещенными или замещенными одним или более C_1-4-алкилами, аминогруппами, гидроксильными группами или арильными группами,

д) 5 - 7-членными циклоалкильными группами, незамещенными или замещенными одним или более

I) атомами галогена,

II) C_1-3-алкоксигруппами или

III) арилами,

е) гетероциклическими группами, причем упомянутые гетероциклические группы представляют собой пиперидинил, пиридил, тиенил, пирролил, тиазолил, имидазолил, фурил, бензимидазолил, пиразинил, изоксазолил, пиридазинил или хинолинил, причем упомянутые гетероциклические группы являются незамещенными или замещенными одной или несколькими оксогруппами, атомами галогена, C_1-4-алкоксигруппами, C_1-4-алкилами, алкилами, алкилами или Бокгруппами;

R³ представляет собой бензил, незамещенный или замещенный одной или более (1) гидроксильными группами, (2) C₁ - C₃-алкоксигруппами, замещенными одним или более - OH, или (3)



R¹² представляет собой



или его фармацевтически приемлемая соль.

5. Соединение по п.4 формулы



отличающееся тем, что

V - простая связь,

R¹ представляет собой C_1-4-алкил, замещенный пиридилом или арилом,

R³ представляет собой бензил, незамещенный или замещенный одной или более (1) гидроксильными группами, (2) C_1-3-алкоксигруппами, замещенными одним или более - OH, или (3)



R¹² представляет собой



или его фармацевтически приемлемая соль.

6. Соединение по п.1 формулы



или его фармацевтически приемлемая соль, отличающееся тем, что R¹ выбирают из:







































7. Производные пиперазинилпентамида формулы



или его фармацевтически приемлемая соль.

8. Фармацевтическая композиция для ингибирования ВИЧ-протеазы, включающая активный компонент и фармацевтически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве активного компонента она содержит соединение по п.1 в эффективном количестве.

9. Фармацевтическая композиция по п.8 для ингибирования ВИЧ-инфекции, включающая фармацевтически приемлемый носитель и активный компонент, отличающаяся тем, что в качестве активного компонента она содержит соединение формулы



или его фармацевтически приемлемые соли.

10. Соединения по п.1 для получения композиций для ингибирования ВИЧ-инфекции.

11. Соединения по п.1 для получения медикамента для профилактики заражения ВИЧ у пациента.

12. Соединения по п.1 для лечения заражения ВИЧ у пациента, получающего лечение против ВИЧ-инфекции.

13. Соединения по п.1 для получения медикамента для ингибирования ВИЧ-протеазы у пациента, получающего лечение против ВИЧ-инфекции.

Приоритет по пунктам:

08.11.91 - по п.5;

15.05.92 - по пп.1 - 4 и 6 - 13.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к соединениям, которые ингибируют протеазу, кодируемую вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), или к фармацевтически пригодным их солям, которые имеют значение в предотвращении заражения ВИЧ, лечении заражения ВИЧ и лечении полученного синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). Оно также относится к фармацевтическим композициям, содержащим данные соединения, и к способу использования данных соединений и других агентов для лечения СПИДа и вирусной инфекции ВИЧ.

Известный уровень техники

Ретровирус, обозначаемый как вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), представляет собой этиологический агент комплексного заболевания, которое включает прогрессирующее разрушение иммунной системы (синдром приобретенного иммунодефицита, СПИД) и дегенерацию центральной и периферической нервной системы. Этот вирус был первоначально известен как A, HT V - III, или АРУ. Общим признаком репликации ретровируса является экстенсивный посттрансляционный процессинг предшественников полипротеинов с помощью вирусно кодируемой протеазы с получением зрелых вирусных протеинов, необходимых для вирусной сборки и функционирования. Ингибирование этого процессинга предотвращает получение нормального инфекционного вируса. Например, Kohl, N.E. et al., Proc. Nat"l Acad Sci. 85, 4686 (1988), сообщает, что генетическая инактивация ВИЧ кодированной протеазы приводит к получению незрелых, незаразных вирусных частиц. Эти результаты указывают, что ингибирование ВИЧ-протеазы представляет жизнеспособный способ лечения СПИДа и предотвращения или лечения заражения ВИЧ.

Нуклеотидная последовательность ВИЧ указывает на присутствие pol гена в одной открытой рамке считывания (Rather, L. et fl., Nature, 313, 277 (1985). Гомология аминокислотной последовательности обеспечивает доказательство того, что pol последовательность кодирует обратную транскриптазу, эндонуклеазу и ВИЧ-протеазу [Toh, H. et al., EMBO J. 4, 1267, (1985); Power, M.D. et al., Science, 231, 1567 (1986); Pearl, L.H. et al., Nature, 329, 351 (1987)]. Ранние попытки найти ингибиторы ВИЧ-протеазы включают EPA 432 695; EPA 435 365; J. Med. Chem. 34, 1228 (1991) и Science, 248, 358 (1990). Заявители показывают, что соединения этого изобретения являются ингибиторами ВИЧ-протеазы.

Краткое описание изобретения

Раскрываются охарактеризованные здесь соединения формулы I. Эти соединения являются полезными при ингибировании ВИЧ-протеазы, предотвращении заражения ВИЧ, при лечении инфекции ВИЧ и при лечении СПИДа, либо в виде соединений как таковых, фармацевтически приемлемых солей фармацевтических ингредиентов композиции, либо в комбинации с другими антивирусами, иммуномодуляторами, антибиотиками или вакцинами, либо без них. Также раскрываются способы лечения СПИДа, способы предотвращения заражения ВИЧ и способы лечения заражения ВИЧ.

Ниже указаны некоторые аббревиатуры, которые встречаются в данной заявке.

Аббревиатуры

Обозначение - Защищающая группа

BOC (Boc) - т-бутилоксикарбонил

CBZ (Cbz) - бензилоксикарбонил (карбобензокси)

TBS (TBDMS) - T-бутил-диметилсилил - Активирующая группа

HBT (HOBT или HOBt) - 1-гидроксибензотриазол гидрат - Связующий реагент

BOP реагент - бензотриазол-1-ил-окситрис (диметиламино)- фосфоний гексафторфосфат

BOP-Cl - хлорид бис(2-оксо-3-оксазолидинил) фосфиновой кислоты

ЭДК (EDC) - 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид

Другие

(BOC)₂O (BOC₂O) - ди-т-бутил-дикарбонат

n-Bu₄N⁺F^- - тетрабутиламмоний фторид

nBuLi (n-Buli) - н-бутиллитий

ДМФ (DMF) - диметилформамид

Et₃N - триэтиламин

ЭА (EtOAc) - этилацетат

ТФУК (TFA) - трифторуксусная кислота

DMAP - диметиламинопиридин

ДМЭ (DME) - диметоксиэтан

ЛДА (LDA) - литий диизопропиламид

ТГФ (THF) - тетрагидрофуран

Аминокислота

Ile - L - изолейцин

Val - L - валин

Подробное описание изобретения и предпочтительные варианты воплощения изобретения

Это изобретение относится к соединениям формулы I, их комбинациям или их фармацевтически пригодным солям, для ингибирования ВИЧ-протеазы, для предотвращения или лечения заражения ВИЧ и для лечения возникающего в результате синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). Соединения формулы I описываются следующим образом:



где X - OH или -NH₂;

Z - O, S, или NH;

R - H или C_1-4-алкил;

R¹ и R² независимо:

1) водород,

2) - C_1-4-алкил, незамещенный или замещенный одним или более

a) галоидом,

b) гидрокси,

c) C_1-3-алкокси,

d) арилом, незамещенным или замещенным одним или более C_1-4-алкилом, гидрокси или арилом,

e) -W-арилом или -W-бензилом, где W представляет -O-, -S-, или -NH-;

f) 5 - 7-членной циклоалкильной группой, незамещенной или замещенной одним или более

i) галоидом,

ii) гидрокси,

iii) C_1-3-алкокси, или

iv) арилом,

g) гетероциклом, незамещенным или замещенным одним или более гидрокси, C_1-4-алкилом, возможно замещенным гидрокси, или Boc,

h) алкилом,

i) алкилом,

j) -NH-SO₂C_1-3-алкилом,

k) -NR₂

l) -COOR, или

m) -((CH₂)_mO)_nR, где m равно 2-5 и n равно 0, 1, 2 или 3, или

3) арил, незамещенный или замещенный одним или более

a) галоидом,

b) гидрокси,

c) -NO₂ или -NR₂,

d) C_1-3-алкилом,

e) C_1-3-алкокси, незамещенной или замещенной одной или более - OH или C_1-3-алкокси,

f) -COOR,

g)

h) -CH₂NR₂,

i)

j) -CN,

k) -CF₃,

l)

m) арил C_1-3-алкокси,

n) арилом,

o) -NRSO₂R,

p) -OP(O)(OR_x)₂, или

q) -R⁵, как определено ниже; или

R¹ и R² могут соединяться вместе, образуя с азотом, к которому R¹ присоединен, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому R¹ присоединен, и от 2 до 9 углеродных атомов, и которая является незамещенной или замещенной

1) гидрокси,

2) C_1-4-алкилом, незамещенным или замещенным одним или более

a) галоидом,

b) гидрокси,

c) C_1-3-алкокси,

d) арилом,

e) 5 - 7-членной циклоалкильной группой, незамещенной или замещенной одним или более

i) галоидом,

ii) гидрокси,

iii) C_1-3-алкокси, или

iv) арилом,

f) гетероциклом, или

g) -NR₂,

3) C_1-3-алкокси,

4) алкилом,

5) алкилом,

6) -NH-SO₂C_1-3-алкилом,

7) гетероциклом,

8) -W-арилом, или

9) арилом,

где W определен выше, или

R¹ и R² могут соединяться вместе, образуя с азотом, к которому R¹ присоединен, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому R¹ присоединен, и 1 - 8 углеродных атомов и одного или более незамещенного или замещенного гетероатома, выбранного из

1)

где V отсутствует или , или SO₂-Q-;

R¹ определен выше для тех случаев, когда R¹ не зависит от и не связан с R², и где O отсутствует или -O-, -NR- или гетероцикл, произвольно замещенный -C_1-4-алкилом,

2)

3) незамещенный или замещенный арилом,

4) незамещенный или замещенный арилом,

5) S(O)_p-,

где p равен 0, 1 или 2, или

6) -O-; или

R¹ и R² могут соединяться вместе, образуя с азотом, к которому R¹ присоединен, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому R¹ присоединен, и 2 - 9 углеродных атомов, и эта насыщенная кольцевая система конденсирована с фенильным кольцом и это фенильное кольцо является незамещенным или замещено одним или более

1) галоидом,

2) C_1-3-алкокси,

3) гидрокси,

4) C_1-4-алкилом,

5) -NHR¹,

где R¹ определен выше для тех случаев, когда R¹ не зависит от и не связан с R², или

6) - гетероциклом;

R³

1) -(CH₂)_r-R⁴;

где r равно 0 - 5,

2) C_1-4-алкенил - R⁴, или

3) C_1-4-алкинил - R⁴;

R⁴

1) водород,

2) C_1-4-алкил,

3) C₅-C₁₀-циклоалкил, возможно замещенный гидрокси,

4) C₆-C₁₀-арил, незамещенный или замещенный одним или более

a) галоидом,

b) гидрокси,

c) NO₂ или -NR₂;

d) C_1-4-алкилом,

e) C_1-3-алкокси, незамещенной или замещенной одной или более -OH или C_1-3-алкокси,

f) -COOR,

d)

h) -CH₂NR₂,

i)

j) -CN,

k) -CF₃,

l)

m) арил C_1-3-алкокси,

n) арилом,

o) -NRSO₂R,

p) -OP(O) (OR_x)₂, или

q) R⁵, как определено ниже, или

5) моноциклический или бициклический гетероцикл, содержащий от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, O, и S, и который не замещен или замещен R⁵ и возможно одним или более

a) галоидом,

b) C_1-4-алкилом, или

c) C_1-3-алкокси; R_xH или арил;

R₅

1) -W-(CH₂)NR⁶R⁷,

где W определено выше,

m равно 2 - 5, и

R⁶ и R⁷ представляют независимо

a) водород,

b) C_1-6-алкил, незамещенный или замещенный одним или более

i) C_1-3-алкокси,

ii) -OH, или

iii) -NR₂,

c) те же самые или различные и соединены вместе, образуя 5 - 7-членный гетероцикл, такой как морфолино, содержащий до двух дополнительных гетероатомов, выбранных из -O-, -S-, или -SO₂- и гетероцикл произвольно замещен C_1-4-алкилом, или

d) ароматический гетероцикл, незамещенный или замещенный

i) C_1-4 алкилом, или

ii) -NR₂,

2) - (CH₂)_q-NR⁶R⁷, где q равно 1 - 5, и R⁶ и R⁷ определены выше, за исключением того, что R⁶ или R⁷ не являются H или не замещены C_1-6-алкилом, или

3) бензофурил, индолил, азациклоалкил, азабицикло C_7-11-циклоалкил, или бензопиперидинил, незамещенный или замещенный C_1-4-алкилом;

В отсутствует, или

где R⁸ представляет собой 1) - CH(CH₃)₂,

2) CH(CH₃) (CH₂CH₃), или

3) - фенил;

J¹ и J² независимо

1) YR⁹, где Y представляет собой -O- или - NH, и

R⁹ представляет собой

a) водород,

b) C_1-6-алкил, незамещенный или замещенный одним или более

i) -NR₂,

ii) -OR,

iii) -NHSO₂C_1-4-алкилом,

iv) -NHSO₂-арилом, или NHSO₂ (диалкиламиноарилом),

v) CH₂OR,

vi) C_1-4-алкилом,

vii)

viii)



x) , где R¹³ представляет собой

A) - H,

B) C_1-4-алкил,

C) - арил,

D) гетероцикл, или

E) -NH-, -O-, или (CH₂)_n-, где n - 0, 1, 2 или 3, замещенный

I) - C_1-4-алкилом, незамещенным или замещенным одним или более арилом или гетероциклом, или

II) арилом, незамещенным или замещенными гетероциклом,

xi) -NR⁺₃A^-, где A^- противоион,

xii) -NR¹⁰R¹¹, где R¹⁰ и R¹¹ те же самые или различные и являются C_1-5-алкилами, непосредственно связанными вместе с образованием 5 - 7-членного гетероцикла, содержащего один дополнительный гетероатом, выбранный из -O-, -S-, или -NR-

xiii) арилом

xiv) -CHO,

xv) -OP(O)(OR_x)₂,

xvi) -алкилом, замещенным одним или более амином или четвертичным амином, или -O-((CH₂)_mO)-R- или - OP(O) (OR_x)₂,

xvii) или

xviii) гетероциклом, или

c) -((CH₂)_m)O)_nCH₃ или - ((CH₂)_m)O)_nH,

где m и n определены выше,

2) - N(R⁹)₂,

3) NR¹⁰R¹¹, где R¹⁰ и R¹¹ определены выше, или

4) где Y, R⁹ и n определены выше, и

R¹²

1) водород,

2) арил, незамещенный или замещенный одним или более

a) R¹⁴, где R¹⁴ представляет собой

i) галоид,

ii) -OR,

iii)

iv) -CH₂NR₂,

v) SO₂NR₂,

vi) -NR₂,

vii)

viii) C_1-4-алкил,

ix) фенил,

x) -CF₃,

xi)

xii) OP(O)(OR_x)₂, или

xiii)

b) C_1-4 алкил- NR₂, или

c) -алкилом, замещенным одним или более амином или четвертичным амином или - OP(O)(OR_x)₂,

3) гетероцикл, такой как изохроман, хроман, изотиохроман, тиохроман, бензимидазол, бензотиопиран, оксобензотиопиран, бензопиран, бензотиопиранилсульфон, бензотиопиранилсульфоксид, причем кольцо или кольца не замещены или замещены одним или более

a) R¹⁴, как определено выше,

b) -OC_1-4-алкенилом,

c) фенил - C_1-4-алкилом,

d) -алкилом, замещенным одним или более амином или четвертичным амином, или - OP(O)(OR_x)₂, или - O((CH₂)_mO)_n - R, или

e) или

4) 5 - 7-членное карбоциклическое или 7 - 10-членное бициклическое карбоциклическое кольцо, такое как циклопентан, циклогексан, индан, норборнен, нафталин, тиопиран, изотиопиран, или бензопиран, причем карбоциклическое кольцо является незамещенным или замещенным одним или более

a) R¹⁴, как определено выше,

b) -CH₂OR,

c) -(CH₂)_n-NR₂ - C_5-16-алкилом, пиридином, -(CH₂)_n-NR₂-(CH₂)_n- NR₂, - (CH₂) -((CH₂)_mO)_n-R, хинуклидиниумилом,

замещенным R, пиперазин C_1-4-алкил-бензилом, замещенным одним или более R, или морфолино - C_1-4-алкил-бензилом,

d) -алкилом, замещенным одним или более амином или четвертичным амином, -OP(O)(OR_x)₂, или -O((CH₂)_mO)_n-R,

e) или

f) -C_1-4-алкил-фенилом;

или фармацевтически приемлемая его соль.

В предпочтительном варианте воплощения изобретения, R¹ и R² соединены вместе, образуя вместе с азотом, к которому прикреплен R¹, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому присоединен R¹, и 2 - 9 углеродных атомов и которая не замещена или замещена

1) гидрокси,

2) C_1-4-алкилом, незамещенным или замещенным одним или более

a) гидрокси,

b) C_1-3-алкокси,

c) арилом,

d) 5 - 7-членной циклоалкильной группой, незамещенной или замещенной одним или более

i) галоидом,

ii) гидрокси,

iii) C_1-3-алкокси, или

iv) арилом,

e) гетероциклом, или

f) -NR₂,

3) C_1-3-алкокси,

4) -алкилом,

5) -алкилом,

6) -NH-SO₂ C_1-3-алкилом,

7) -W-арилом, или

8)

где W представляет -O-, -S- или -NH; или

R¹ и R² соединены вместе, образуя вместе с азотом, к которому прикреплен R¹, 3-10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому присоединен R¹, и 1 - 8 углеродных атомов и с одним или более незамещенным или замещенным гетероатомом, выбранным из

1)

где V отсутствует, или , или SO₂-Q-;

R¹ определен как выше для случая, когда R¹ не зависит от и не соединен с R² и где Q отсутствует или -O-, NR, или гетероцикл, произвольно замещенный -C_1-4-алкилом,

2) -алкенила, незамещенного или замещенного арилом,

3) S(O)_p - где p равно 0, 1 или 2, или

4) -O-; или

R¹ и R² соединены вместе, образуя вместе с азотом, к которому прикреплен R¹, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому присоединен R¹, и 2 - 9 углеродных атомов, и эта насыщенная кольцевая система конденсирована с фенильным кольцом, и это фенильное кольцо не замещено или замещено одним или более

1) C_1-3-алкокси,

2) гидрокси,

3) C_1-4-алкилом, или

4) -NHR¹,

где R¹ определен как выше для случая, когда R¹ не зависит от и не связан с R².

Второй, более предпочтительный вариант воплощения этого изобретения, кроме того, ограничен соединениями, в которых:

R¹ и R² соединены вместе, образуя вместе с азотом, к которому прикреплен R¹, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому присоединен R¹, и 2 - 9 углеродных атомов и которая не замещена или замещена

1) гидрокси,

2) C_1-4-алкилом, незамещенным или замещенным одним или более

a) гидрокси,

b) C_1-3-алкокси,

c) арилом,

d) 5 - 7-членной циклоалкильной группой, незамещенной или замещенной одним или более

i) галоидом,

ii) гидрокси,

iii) C_1-3-алкокси, или

iv) арилом,

e) гетероциклом, или

f) -NR₂,

3) C_1-3-алкокси,

4) -алкилом,

5) -алкилом,

6) -NH-SO₂C_1-3-алкилом,

7) -W-арилом, или

8)

где W представляет собой -O-, -S- или NH; или

R¹ и R² соединены вместе, образуя вместе с азотом, к которому прикреплен R¹, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому присоединен R¹, и 1 - 8 углеродных атомов и с одним или более незамещенным или замещенным гетероатомом, выбранным из

1)

V отсутствует, или , или SO₂-Q-;

R¹ определен как выше для случая, когда R¹ не зависит от и не соединен с R² и где Q отсутствует или -O-, NR, или гетероцикл произвольно замещенный -C_1-4-алкилом,

2) S(O)_p-, где p равно 0, 1 или 2, или

3) -O-;

R₃ представляет собой бензил, незамещенный или замещенный одним или более

a) гидрокси,

b) NO₂, или -NR₂,

c) C_1-4-алкилом,

d) C_1-3-алкокси, незамещенный или замещенный одним или более -OH или C_1-3-алкокси,

e)

f) -CH₂NR₂,

g)

h) CF₃,

i)

j) -NRSO₂R,

k) -OP(O)(OR_x)₂, или

1) -R⁵;

и B отсутствует.

Третий, наиболее предпочтительный вариант воплощения этого изобретения ограничен соединениями, в которых:

X представляет собой OH;

Z - O;

R¹ и R² соединены вместе, образуя вместе с азотом, к которому прикреплен R¹, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому присоединен R¹, и 2 - 9 углеродных атомов и которая не замещена или замещена -W-арилом или или R¹ и R² соединены вместе, образуя вместе с азотом, к которому прикреплен R¹, 3 - 10-членную моноциклическую или бициклическую насыщенную кольцевую систему, которая состоит из азота, к которому присоединен R¹, и 1 - 8 углеродных атомов и которая не замещена или замещена одним из ,

где V отсутствует, или , или SO₂-Q-;

R¹ определен как выше для случая, когда R¹ не зависит от или не связан с R² и где Q отсутствует или -O-, -NR- или гетероцикл, возможно замещенный -C_1-4-алкилом;

R³ представляет собой бензил, незамещенный или замещенный одним или более из (1) гидрокси, (2) C_1-3-алкокси, замещенной одним или более из - OH или (3)



J¹ представляет -NH-C_1-4-алкил; и

J² представляет



Наиболее предпочтительными соединениями данного изобретения являются соединения от A до H и J, представленные ниже.

Соединение A:



N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5- (2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)- пентанамид.

Соединение B:



N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5- (1-(4-карбобензилокси-2-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))- пентанамид.

Соединение C:



N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-(2-(4-морфолинил)этокси) фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)- (4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамид.

Соединение D:



N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-(2-(-морфолинил) этокси)-фенил)метил-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-карбобензилокси-2-(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид.

Соединение E:



N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-((2-гидрокси)этокси) фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)- (4aS,8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамид.

Соединение F:



N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-((2-гидрокси) этокси)фенил)метил-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-карбобензилокси-2-(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид.

Соединение G:



N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)-2(R)- фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)- (4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамид.

Соединение H:



N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)-2(R)- фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)-пентанамид.

Соединение J:



N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5 -(1-(4-(3-пиридилметил)-2-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))- пентанамид.

Новые соединения данного изобретения также включают, но не ограничиваются следующими соединениями:

N(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5- (1-N"-(т-бутил)-4(S)-(феноксипролинамид)ил)-пентанамид,

N(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5- (1-N"-(т-бутил)-4(S)-2-нафтилоксипролинамид)ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5- (1-N"-(т-бутил)-4(S)-1-нафтилоксипролинамид)ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)-амино-5- (2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин) ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5- (1-(4-(3-фенилпропионил)-2-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))- пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5- (1-(4-бензоил-2-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))- пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5- (1-(4-(3-фенилпропил)-2- (S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)- гидрокси-5-(1-(4-карбобензоилокси-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-(2-(4-морфолинил)- этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)- 4(S)-феноксипролинамид)-ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-(2-(4-морфолинил) этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)- 4(S)-2-нафтилоксипролинамид)-ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-(2-(4-морфолинил)- этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)- -4(S)-1-нафтилоксипролинамид)ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-(2-(4-морфолинил)- этокси)фенил)метил)-4(S)-амино-5-(2-(3-(S)-(N"-(т-бутилкарбоксамидо)- (4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-(2-(4-морфолинил) этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-(3-фенилпропионил)- 2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-(2-(4-морфолинил)- этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-бензоил-2(S)-(N"- (т-бутил-карбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-(2-(4-морфолинил)- этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-(3-фенилпропил)-2(S)-(N"- (т-бутилкарбоксамидо))-пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-(2-(4-морфолинил)- этокси)фенил)метил)-4(S)-амино-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-(N"- (т-бутилкарбоксамидо))-пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-((2-гидрокси)- этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)-4(S)- феноксипролинамид)ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-((2-гидрокси)- этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)-4(S)-2 нафтилокси-пролинамид)ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-((2-гидрокси)- этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)-4(S)-1 нафтилокси-пролинамид)ил)-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-((2-гидрокси)- этокси)фенил)метил)-4(S)-амино-5-(2-3(S)-(N"- (т-бутилкарбоксамидо)-(4aS,8aS)-декагидроизохинолин)ил)- пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-((2-гидрокси)- этокси)фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-4-(3-фенилпропионил)-2(S)- (N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-((2-гидрокси)- этокси)фенил)метил)-4-(S)-гидрокси-5-(1-(4-бензоил-2(S)- (N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-((2-гидрокси)- этокси)фенил)метил)-4-(S)-гидрокси-5-(1-(4-(3-фенилпропил-2(S)- (N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид,

N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-((2-гидрокси)- этокси)фенил)метил)-4-(S)-амино-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)- (N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)-пентанамид,

N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)-2-(R)- фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)-4(S)феноксипролинамид)ил)- пентанамид,

N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)-2(R)- фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)-4-(2-нафтилокси- пролинамид)ил)-пентанамид,

N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)-2-(R)- фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)-4-(S)-1-нафтилокси- пролинамид)ил)-пентанамид,

N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)- 2(R)-фенилметил-4(S)-амино-5-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)- 4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамид,

N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-(2,2-диоксобензотиопиранил)-2-(R)- фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-(3-фенилпропионил)-2(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)-пентанамид,

N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)- 2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-бензоил)-2(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид,

N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)- 2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-(3-фенилпропил)-2(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо))-пиперазинил)-пентанамид, или

N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)- 2(R)-фенилметил-(4S)-амино-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид.

Соединения данного изобретения могут иметь асимметрические центры и встречаться как в виде рацематов, рацемических смесей, так и в виде индивидуальных диастереоизомеров или энантиомеров, поскольку все изомерные формы включены в данное изобретение. В тех случаях, когда какая-либо переменная (например, арил, гетероцикл, R, R¹, R², A, n, Z и так далее) встречается более чем один раз в каком-либо заместителе или в формуле I, ее значение в каждом положении не зависит от ее значения в каждом другом положении. Кроме того, комбинации заместителей и/или переменных допустимы, только если такие комбинации приводят к стабильным соединениям.

Предполагается, если не оговорено особо, что используемый здесь термин "алкил" включает как разветвленные, так и неразветвленные насыщенные алифатические углеводородные группы, имеющие определенное число углеродных атомов (Me - метил, Et - этил, Pr - пропил, Bu - бутил); "алкокси" представляет собой алкильную группу с указанным числом углеродных атомов, присоединенную через кислородный мостик; и, предполагается, что "циклоалкил" включает насыщенные кольцевые группы, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил (Cyh) и циклогептил. Имеется в виду, что "алкенил" включает углеродные группы либо неразветвленной, либо разветвленной конфигурации с одной или более углерод-углеродными двойными связями, которые могут встречаться в любой стабильной точке вдоль цепи, такой как этенил, пропенил, бутенил, пентенил и т.п. Имеется в виду, что "алкинил" включает углеводородные группы либо неразветвленной, либо разветвленной конфигурации с одной или более углерод-углеродными тройными связями, которые могут встречаться в любой стабильной точке вдоль цепи, такой как этинил, пропинил, бутинил, пентинил и т. п. "Галоид", используемый здесь, означает фтор, хлор, бром или иод, и "противоион" используют для обозначения маленького, единичного отрицательно заряженного иона, такого как хлорид, бромид, гидроксид, ацетат, трифторацетат, перхлорат, нитрат, бензоат, малеат, тартрат, гемитетртрат, бензосульфонат и т.п.

Имеется в виду, если специально не оговорено, что используемый здесь термин "арил" означает фенил (Ph) или нафтил. Имеется в виду, что термин "карбоциклический" означает любое стабильное 5 - 7-членное углеродное кольцо или 7 - 10-членное бициклическое углеродное кольцо, любое кольцо которого может быть насыщенным или ненасыщенным.

Используемый здесь, если не оговорено особо, термин гетероцикл или гетероциклический означает стабильную 5 - 7-членную моно- или бициклическую или стабильную 7 - 10-членную бициклическую гетероциклическую кольцевую систему, любое кольцо которой может быть насыщенным или ненасыщенным, и которая состоит из углеродных атомов и из от одного до трех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, и в которой гетероатомы азота и серы могут быть произвольно окислены, и гетероатом азота может быть произвольно кватернизован, и включает любую бициклическую группу, в которой любое из вышеопределенных гетероциклических колец конденсировано с бензольным кольцом. Гетероциклическое кольцо может быть присоединено к любому гетероатому или углеродному атому, что приводит к образованию стабильной структуры. Примерами таких гетероциклических элементов являются пиперидинил, пиперазинил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролодинил, 2-оксоазепинил, азепинил, пирролил, 4-пиперидонил, пирролидинил, пиразолил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиразинил, оксазолил, оксазолидинил, изоксазолил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолил, тиазолидинил, изотиазолил, хинуклидинил, изотиазолидинил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, тиадиазоил, бензопиранил, бензотиазолил, бензоксазолил, фурил, тетрагидрофурил, тетрагидропиранил, тиенил, бензотиенил, тиаморфолинил, тиаморфолинил сульфохлорид, тиаморфолинил сульфон и оксадиазолил. Морфолино означает то же, что и морфолинил.

Фармацевтически пригодные соли соединений формулы I (в форме водо- или маслорастворимых продуктов или способных к диспергированию продуктов) включают обычные нетоксичные соли или четвертичные аммониевые соли, которые образуются, например, из неорганических или органических кислот или оснований. Примерами таких кислых солей присоединения являются ацетат, адипат, альгинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, цитрат, камфорат, камфорсульфонат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, глюкогептаноат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тертрат, тиоцианат, тозилат и ундеканоат. К основным солям относятся соли аммония, соли щелочных металлов, такие как соли натрия и калия, соли щелочно-земельных металлов, такие как соли кальция и магния, соли с органическими основаниями, такие как соли дициклогексиламина, N-метил-D-глюкамин, и соли с аминокислотами, такими как аргинин, лизин, и так далее. Кроме того, основные азотсодержащие группы, могут быть кватернизованы такими агентами, как низшие галоидалкилы, такие как метил-, этил-, пропил- и бутилхлорид, бромиды и иодиды, диалкилсульфаты, такие как диметил, диэтил, дибутил, и диамилсульфаты, длинноцепные галогениды, такие как децил, лаурил, миристил и стеарил хлориды, бромиды и иодиды, аралкил галогениды, такие как бензил и фенетил бромиды и другие.

Схемы I-III для получения новых соединений данного изобретения приведены в конце описания. Табл. I и II иллюстрируют соединения, которые могут быть синтезированы согласно схемам I-III, но схемы I-III не ограничиваются соединениями в таблицах и не ограничиваются какими-либо конкретными заместителями, применяемыми в схемах с иллюстративными целями. Примеры иллюстрируют применение следующих схем для конкретных соединений.

Амидное связывание, используемое для получения соединений этого изобретения, обычно проводят карбодиимидным способом с помощью реагентов, таких как дициклогексилкарбодиимид, или 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид. Другие способы образования амидной или пептидной связи включают, но не ограничиваются синтетическими путями через хлорангидрид, азид, смешанный ангидрид или активированный сложный эфир. Обычно амидное связывание проводят в растворе, но может быть применен твердофазный синтез согласно классическим методам Merrifield. Практикуется также присоединение и удаление одной или более защищающих групп.

Дополнительные родственные сведения по синтезу содержатся в EPO 0337714.

Один способ получения соединений формулы I иллюстрируется схемой I.

Дигидро-5(S)-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3(2H)- фуранон (соединение 1 ниже) получают стандартными методами, известными в данной области, из коммерчески доступного дигидро-5(S)- (гидроксиметил)-2(3H)-фуранона. После алкилирования соединения 1 с получением соединения 2, защищающую группу лактона 2 удаляют водным HF, получая соединение 3.

Спиртовую группу 3 активируют путем превращения в отщепляемую группу, такую как мезилат, тозилат или трифилат, путем обработки спирта сульфонилхлоридом или ангидридом сульфокислоты, таким как ангидрид трифторметансульфокислоты, в присутствии объемного аминового основания, такого как триэтиламин, диэтилизопропиламин или 2,6 лутидин, получая соединение, такое как соединение 4. Отщепляемую группу соединения 4 замещают амином 5, таким как N"-т-бутил-(4aS,8aS)-(декагидроизохинолин)-3(S)-карбоксамид, в высококипящем растворителе, таком как ДМФ или ксилол, получая соединение, такое как 6. Трифторметансульфонилокси группа может быть замещена амином при комнатной температуре в растворителе, таком как изопропанол, обработкой N,N-диизопропилэтиламином.

Соединение 6 гидролизуют водным гидроксидом лития или натрия и образовавшуюся гидроксикислоту 7 превращают в защищенную гидроксикислоту 8. Гидроксильную группу обычно защищают стандартной силильной защищающей группой, такой как т-бутилдиметилсилил или т-бутилдифенилсилил.

Защищенную гидроксикислоту 8 затем связывают с требуемым R¹² амином, получая соединение 9, и силильную защищающую группу удаляют с помощью фтор-иона, получая соединение 10.

Второй способ получения продуктов общей формулы I представлен схемой II. В схеме II алкилирование II проводят при помощи первой стадии депротонирования II н-бутиллитием или диизопропиламидом лития (LDA) и следующей за ней второй стадии добавления галоидалкенила (такого как аллилбромид), получая 12.

Дигидроксилированием олефина 12 тетроксидом осмия и N-метилморфолин-N-оксидом (NMO) получают диастериомерную смесь диолов 13. Селективное мезилирование первичного спирта 13 металсульфонилхлоридом и либо триэтиламином, либо пиридином дает мезилат 14.

Нагревание мезилата 14 с амином при кипячении с обратным холодильником в спиртовом растворителе, таком как метанол или изопропанол, содержащем избыток карбоната калия, приводят к получению аминоспирта, такого как соединение 15. Диастериомеры можно разделить на этой стадии стандартными методиками, хорошо известными специалистам в данной области. Альтернативно, разделение можно осуществить после удаления кеталя.

Удаление кеталя в соединении 15 проводят путем обработки кислотой в присутствии метанола, или водной кислоты или с помощью IN HCl в ТГФ, получая соединение 16.

Третий способ получения продуктов общей формулы I иллюстрируется схемой III. Защиту пирролидиновой -NH-группы соединения 17 проводят BOC-ангидридом и диметиламинопиридином, получая защищенное соединение 18. Алкилирование 18 осуществляют с помощью первой стадии депротонирования 18 сильным основанием, таким как гексаметилдисилиламид лития (LHMDS) или диизопропиламидом лития (LDA) и следующей за ней второй стадии добавления галоидалкила (такого как бензилбромид), получая соединение 19.

TBS защищающую и BOC защищающую группу 19 удаляют обработкой водным HF в ацетонитриле, получая спирт 20. Мезилирование первичного спирта 20 метансульфонилхлоридом и либо триэтиламином, либо пиридином дает мезилат 21, который кипятят с амином с обратным холодильником в спиртовом растворителе, таком как метанол или изопропанол, содержащем избыток карбоната калия, получая амино-пирролидинон, такой как соединение 22. Пирролидиновую -NH-группу 22 повторно защищают с помощью BOC группы, как описано выше, и образовавшееся соединение 23 гидролизуют с раскрытием основанием, таким как гидроксид лития или натрия, получая кислоту 24. Затем соединение 24 связывают с NH₂R¹² амином стандартным способом, и BOC удаляют газообразным HCl или трифторуксусной кислотой, получая требуемый продукт, иллюстрированный соединением 25.

Соединение формулы 26



где P - группа, защищающая азот, такая как -BOC или -CBZ, предпочтительно получают согласно способу, описанному схемой I, предпочтительно применяя в нем 5-трифторметансульфонилоксиметильный аналог лактона 4 (см. пример 15, стадия 1).

Соединение формулы 27



можно получить различными путями из соединения 28.

которое получают после удаления группы, защищающей азот, в 26, используя способы, хорошо известные в данной области, например каталитическое гидрирование, чтобы удалить CBZ-группу, или обработка триметилсилилтрифлатом и 2,6 лутидином при около 0^oC в растворителе, таком как CH₂Cl₂, чтобы удалить BOC-группу.

Например, пиперазильный азот в 4-положении соединения 28 можно алкилировать соединением формулы R¹ - X в растворителе, таком как DMF в присутствии Et₃N при комнатной температуре, где X - Cl, Br или - I, или сульфонамидную группу можно получить обработкой 28 соединением сульфонилхлорида формулы R¹SO₂Cl в аналогичных условиях. Кроме того, для получения амидной группы в положении - 4 пиперазинила можно использовать стандартные методики амидного связывания. Техника выполнения таких процедур хорошо известна специалистам в данной области. R¹ группа для R¹ - X или R¹SO₂Cl определены выше при определении соединений формулы I, в которых R¹ не зависит от и не связан с R², за исключением того, что R¹ не может быть водородом или группой со свободным гидроксизаместителем, такой как -C_1-4-алкил, замещенным гидрокси, и, кроме того, за исключением того, что R¹ может быть арилом, замещенным гидроксигруппой.

Соединения данного изобретения, кроме того, иллюстрируются табл. I-IV.

Соединения данного изобретения используют при ингибировании ВИЧ-протеазы, предотвращения или лечения заражения вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) и лечении последующих патологических изменений, таких как СПИД. Считают, что лечение СПИДа или предотвращение или лечение заражения ВИЧ включает, но не ограничивает, лечение широкого диапазона состояний инфекции ВИЧ: СПИД, ARC (СПИД-ассоциированный комплекс), как симптоматическое, так и асимптоматическое, действительное или потенциальное воздействие ВИЧ. Например, соединения данного изобретения используют при лечении заражения ВИЧ у подозреваемых после воздействия ВИЧ, например, при переливания крови, трансплантации органа, обмене общем жидкостей организма, укусах, травматическом повреждении иглой или при воздействии на пациента крови во время операционного вмешательства.

Для этих целей соединения данного изобретения могут вводиться орально, парентерально (включая подкожные инъекции, внутривенные, внутримышечные, внутригрудинные инъекции или методику инфузий), путем ингаляционного разбрызгивания или ректально, в составах с единичными дозами, содержащими обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители.

Таким образом, согласно данному изобретению разработан также способ лечения и фармацевтическая композиция для лечения ВИЧ-инфекции и СПИДа. Лечение включает введение пациенту при необходимости такого лечения фармацевтической композиции, включающей фармацевтический носитель и терапевтически эффективное количество соединения данного изобретения, или фармацевтически приемлемую его соль.

Эти фармацевтические композиции могут быть в форме орально вводимых суспензий или таблеток; назальных аэрозолей; стерильных препаратов для инъекций, например в виде стерильных инъекцируемых водных или маслянистых суспензий или суппозиториев.

При введении орально в виде суспензий эти композиции получают согласно хорошо известным в данной области методикам фармацевтических составов и могут содержать микрокристаллическую целлюлозу для придания массы, альгининовую кислоту или альгинат натрия в качестве суспендирующего агента, метилцеллюлозу в качестве агента, повышающего вязкость, и агенты, придающие сладость, запах и вкус, известные в данной области. В случае таблеток с немедленным выделением эти композиции могут включать микрокристаллическую целлюлозу, дикальций фосфат, крахмал, стеарат магния и лактозу и/или другие наполнители, связующие, разбавители, дезинтеграторы, разбавители и смазывающие вещества, известные в данной области техники.

Инъецируемые растворы или суспензии могут быть сформулированы согласно известным в данной области методикам, используя нетоксичные, парентерально приемлемые разбавители или растворители, такие как маннит, 1,3-бутандиол, вода, раствор Рингера или изотонический раствор хлорида натрия, или подходящие диспергирующие или смачивающие и суспендирующие агенты, такие как стерильные, успокаивающие, нелетучие масла, включая синтетические моно- или диглицериды, и жирные кислоты, включая олеиновую кислоту.

При ректальном введении в виде суппозиториев эти композиции могут быть приготовлены путем смешения лекарственного препарата с подходящим нераздражающим наполнителем, таким как масло какао, синтетические сложные эфиры глицерина или полиэтиленгликоли, которые являются твердыми при обычных температурах, но становятся жидкими и/или растворимыми в ректальной полости, выделяя лекарственный препарат.

Уровень доз порядка от 0,02 до 5,0 или 10,0 г в день используют при лечении или профилактике и вышеуказанных условиях, причем оральные дозы в два - пять раз выше. Например, заражение ВИЧ эффективно лечат путем введения от 10 до 50 мг соединения на 1 кг веса тела при приеме от одного до трех раз в день. Следует иметь в виду, однако, что характерный уровень дозы и частота приема дозы для конкретного пациента может варьироваться и будет зависеть от ряда факторов, включая активность конкретного применяемого соединения, метаболическую стабильность и продолжительность действия этого соединения, возраст, вес тела, общее состояние здоровья, пол, диету, способ и время приема, скорость выведения, комбинации лекарственных средств, серьезность конкретного состояния, и пациента, подвергающегося лечению.

Настоящее изобретение обеспечивает комбинацию соединений, ингибирующих ВИЧ-протеазу, с одним или более агентами, используемыми при лечении СПИДа. Например, соединения данного изобретения можно эффективно применять независимо от периода воздействия инфекции, или до воздействия и/или после воздействия, в комбинации с эффективными количествами противовирусных препаратов против СПИДа, иммуномодуляторами, антиинфекционными препаратами или вакцинами, хорошо известными специалисту в данной области.

Следует иметь в виду, что объем комбинаций соединений данного изобретения с противовирусными препаратами против СПИДа, иммуномодуляторами, антиинфекционными препаратами или вакцинами включает, в принципе, любую комбинацию с любой фармацевтической композицией, используемой при лечении СПИДа.

Испытание на ингибирование микробной экспрессированной вирусной протеазы

Исследования ингибирования реакции протеазы, экспрессируемой в Eschericia coli, пептидным субстратом [Val-Ser-Gln-Asn-(бетанафтил) Ala-Pro-Ile-Val 0,5 мг/мл во время инициирования реакции] проводят в 50 мМ ацетата Na, pH 5,5, при 30^oC в течение 1 часа. К 25 ul раствора пептида в воде добавляют различные концентрации ингибитора в 1,0 ul ДСМО. Реакцию инициируют добавлением 15 ul 0,33 нМ протеазы (0,11 нг) в растворе 0,133 М ацетата Na pH 5,5 и 0,1% сыворотки бычьего альбумина. Реакцию гасят 160 ul 5% фосфорной кислоты. Продукты реакции разделяют с помощью ЖХВР (VIDAC широкопористая 5 см C-18 обращенная фаза, градиент ацетонитрила, 0,1% фосфорная кислота). Степень ингибирования реакции определяли по высоте пиков продуктов. ЖХВР продуктов, независимо синтезированных, дает количественное содержание и подтверждение состава продукта. Продукты синтеза в примерах 1-7 включительно дают IC₅₀ значения в диапазоне 1-100 нМ. Соединения A, B и J демонстрируют IC₅₀ значения между около 0,3 и около 6 нМ.

Пример 1.

Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил-2(R)-фенилметил-4(S)- гидрокси-5-(1-(т-бутил)-4(S)-феноксипролинамид)ил)-пентанамида.

Стадия 1: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил-3-фенил-пропанамида.

К холодному (0^oC) раствору метиленхлорида (30 мл), содержащего 2(R)-гидрокси-1(S)-аминоиндана (750 мг, 5,0 ммоль) и триэтиламин (606 мг, 6 ммоль), добавляют раствор гидроциннамоил хлорида (843 мг, 5,0 ммоль) в 5 мл метиленхлорида. Через 2 часа реакционную смесь выливают в делительную воронку, содержащую 50 мл метиленхлорида, и промывают 10% раствором лимонной кислоты (2 х 30 мл). Органический слой сушат, фильтруют и концентрируют, получая белое твердое вещество.

Стадия 2: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиденил)-3-фенил-пропанамида.

Неочищенное белое твердое вещество, полученное по вышеупомянутой стадии 1, растворяют в 50 мл метиленхлорида, добавляют 5 мл диметоксипропана и затем добавляют 100 мг п-толуолсульфокислоты. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов и затем выливают в делительную воронку и промывают насыщенным раствором NaHCO₃ (2 x 30 мл). Органический слой сушат, фильтруют и концентрируют, получая масло, которое разделяют путем хроматографирования (SiO₂, 40% ЭА/гексан, с получением масла, в конечном счете, кристаллизуемого).

Стадия 3: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиден-ил)-2-(S)- фенилметил-пент-4-енамида.

К раствору N-(2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N, O-изопропилен-ил)-3-фенил-пропанамида (1,03 г, 2,9 ммоль) в 20 мл ТГФ, охлажденному до - 78^oC, добавляют н-BuLi (2,5 М, 1,40 мл, 3,5 ммоль). Через 20 мин добавляют аллилбромид (0,48 г, 3,9 ммоль), реакционную смесь перемешивают при -78^oC в течение 1 часа и затем добавляют насыщенный раствор NH₄Cl, чтобы погасить реакцию. Реакционную смесь разбавляют 50 мл воды, экстрагируют этилацетатом (2 х 50 мл), органический слой промывают насыщенным раствором NH₄Cl (50 мл), сушат, фильтруют и концентрируют, получая сырой продукт. Сырой продукт очищают на силикагеле, получая названное соединение.

Стадия 4: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиден-ил)-2-(S)-фенилметил- (4(RS).5-дигидрокси)-пентанамида.

К 800 мг (2,2 ммоль) N-2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиден-ил)-2(S)-фенилметил- пент-4-енамида, растворенного в 40 мл 9: 1 смеси ацетон/вода, добавляют 0,8 мл 60% раствора N-метилморфолин-N-оксида в воде, а затем 4 мл 2,5% раствора тетроксида осмия в т-BuOH. Через 18 часов добавляют избыток твердого бисульфата натрия, реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов и затем фильтруют через прокладку целита. Фильтрат концентрируют, разбавляют 50 мл воды, экстрагируют метиленхлоридом (2 х 50 мл), органическую фазу сушат, фильтруют и концентрируют, получая продукт в виде пены.

Стадия 5: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиден-ил)-2(S)-фенилметил-4(RS)- гидрокси-5-метансульфонилоксипентанамида.

К 200 мг (0,527 ммоль) N-(2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиден-ил)-2(S)-фенилметил- (4(RS),5-дигидрокси)-пентанамида, растворенного в 7 мл метиленхлорида, при 0^oC добавляют триэтиламин (59 мг, 0,58 ммоль), а затем метансульфонил хлорид (66 мг, 0,579 ммоль). Через 4 часа реакционную смесь обрабатывают путем промывания 10% раствором лимонной кислоты (2 х 50 мл), и органический слой сушат, фильтруют и концентрируют, получая мономезилат в виде смеси спиртов.

Стадия 6: Получение N"-т-бутил-N-BOC-4(R)-гидрокси-L-пролинамида.

К раствору N-BOC-4(R)-гидроксипролина (2,00 г) в ДМФ (20 мл), охлажденному до 0^oC, добавляют ЭДК (1,987 г) HOBt (1,40 г), трет.бутиламин (1,09 мл) и триэтиламин (2,41 мл). Через 18 часов реакционную смесь разбавляют этилацетатом (150 мл) и промывают 10% HCl, насыщенным NaHCO₃, водой и соляным раствором. Затем раствор сушат над MgSO₄ и концентрируют, получая белое твердое вещество.

Стадия 7: Получение N"-т-бутил-N-BOC-4(S)-фенокси-L-пролинамида.

К раствору N"-т-бутил-N-BOC-4(R)-гидрокси-L-пролинамида (0,6 г) в ТГФ (5 мл) добавляют фенол (0,295 г), трифенилфосфин (0,824 г) и затем по каплям диэтилазодикарбоксилат (0,495 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 часов и разбавляют этилацетатом (200 мл) и промывают насыщенным NaHCO₃, водой, соляным раствором и сушат над MgSO₄. Концентрированием в вакууме получают желтое масло, которое очищают с помощью флеш-хроматографии (элюирование гексан:ЭА 1:1, колонка 30 мм).

Стадия 8: Получение соли трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-фенокси-L-пролинамида.

К раствору N"-т-бутил-N-BOC-4(S)-фенокси-L-пролинамида (0,596 г) в метиленхлориде (4 мл) при 0^oC добавляют трифторуксусную кислоту (2 мл). После 30 мин реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение двух часов. Растворитель удаляют в вакууме и получают светло-желтое масло.

Стадия 9: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиден-ил)-2- (R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-(т-бутил)-4(S)-феноксипролинамид)-ил)- пентанамида.

К раствору соли трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-фенокси-L-пролинамида (0,36 г) и N-(2-(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиден-ил)-2(S)-фенилметил-4-(RS)- гидрокси-5-метансульфонилокси-пентанамида (0,226 г) в 3 мл изопропанола добавляют карбонат калия (0,441 г) и реакционную смесь нагревают до 80^oC. После 18 часов реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через целит, который промывают далее порциями ЭА. Фильтрат концентрируют, осадок растворяют в ЭА (100 мл) и промывают водой, соляным раствором и сушат над MgSO₄. Растворитель удаляют в вакууме и получающееся масло очищают с помощью флеш-хроматографии, получая продукт в виде смеси диастереомеров.

Стадия 10: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4-(S)-гидрокси-5-(1-N"- т-бутил-4(S)-феноксипролинамид)-ил)-пентанамида.

К раствору N-(2(R)-гидрокси-1(S)-индан-N,O-изопропилиден-ил)-2-(R)-фенилметил-4-(S)- гидрокси-5(1-N"-(т-бутил)-4(S)-феноксипролинамид)-ил)-пентанамида (0,13 г) в MeOH (5 мл) добавляют камфорсульфокислоту (КСК) (0,070 г) при комнатной температуре. После 5 часов добавляют еще КСК (0,025 г) и реакционную смесь перемешивают суммарно 18 часов. Реакцию гасят насыщенным NaHCO₃ (5 мл), и растворитель удаляют до объема 4 мл. Водный слой тщательно экстрагируют ЭА, и органический слой промывают водой, соляным раствором и сушат. После удаления растворителя в вакууме полученное масло очищают с помощью флеш-хроматографии, получая названное соединение в виде белой пены. Пену растворяют в ЭА : гексаны, и маточный раствор декантируют с масла. Масло затем сушат в эксикаторе под высоким вакуумом, получая белую пену.

Пример 2.

Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-N"- т-бутил-4(S)-2-нафтилокси-пролинамид)-ил)-пентанамида.

Стадия 1: Получение соли трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-2-нафтилокси-L-пролинамида.

Следуя в основном той же самой методике синтеза соли трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-фенокси-L-пролинамида описанной в общих чертах в примере 1, стадия с 6 по 8, но замещая фенол, используемый в ней, на 2-нафтол, получают 2-нафтилокси пролинамид.

Стадия 2: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-N"- т-бутил-4(S)-2-нафтилокси-пролинамид)ил-пентанамида.

Названное соединение получают, следуя в основном той же самой методике, описанной в общих чертах в примере 1, стадия 9 и 10, не заменяя соль трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-фенокси-L-пролинамида, используемую в ней на стадии 9, на соль трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-2-нафтилокси-L-пролинамида.

Пример 3.

Получение N-(2(R)-гидрокси-1-(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил 4(S)-гидрокси-5-(1-(N"-т-бутил-4(S)-1-нафтилокси-пролин-амид)ил)-пентанамида.

Стадия 1: Получение соли трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4-(S)-1-нафтилокси-L-пролинамида.

Следуя в основном той же самой методике синтеза соли трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-фенокси-L-пролинамида, описанной в общих чертах в примере 1, стадии с 6 по 8, но заменяя фенол, используемый в ней, на 1-нафтол, получают 1-нафтилокси пролинамид.

Стадия 2: Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил 4(S)-гидрокси-5-(1-N"-т-бутил-4(S)-2-нафтилокси-пролин амид)ил)-пентанамида.

Названное соединение получают, следуя методике, описанной в общих чертах в примере 1, стадии 9 и 10, но заменяя соль трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-фенокси-L-пролинамида, используемую в ней на стадии 9, на соль трифторуксусной кислоты N-т-бутил-4(S)-1-нафтилокси-L-пролинамида.

Пример 4.

Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(2-(3(S)-(т-бутил-карбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамида.

Стадия 1: Получение дигидро-5(S)-(т-бутилдифенилсилил)-оксиметил)-3(R)фенилметил-3(2H)-фуранона.

Раствор диизопропиламида лития (ЛДА) генерируют путем добавления 1,55 мл н-BuLi (2,5 М в гексане) к 0,55 мл (3,9 ммоль) диизопропиламина в 10 мл ТГФ при - 78^oC. Через 30 минут добавляют раствор дигидро-5-(S)-((т-бутилдифенилсилил)-оксиметил)-3(2H)-фуранона (1,38 г, 3,89 ммоль) в 5 мл ТГФ. После перемешивания в течение 30 минут добавляют бензилхлорид (0,68 г, 3,9 ммоль) и продолжают перемешивание в течение 3 часов, и после этого времени реакцию останавливают добавлением 10% водного раствора лимонной кислоты. Раствор экстрагируют этилацетатом (2 х 50 мл), который промывают обратной струей соляным раствором, сушат, фильтруют и концентрируют, получая масло. Продукт очищают с помощью хроматографии (SiO₂, 20% ЭА/гексан, получая названное соединение).

Стадия 2: Получение дигидро-5(S)-(гидроксиметил)-3(R) фенилметил-3-(2H)-фуранона.

К 5,26 г дигидро-5(S)-((т-бутилдифенилсилил)оксиметил)-3(R)- фенилметил-3(2H)-фуранона в 40 мл ацетонитрила добавляют 1,34 мл 49% водного раствора HF. Через 18 часов при комнатной температуре реакционную смесь концентрируют до сухого остатка, и остаток распределяют между водой (50 мл) и этилацетатом (50 мл). Органический слой промывают соляным раствором, сушат, фильтруют и концентрируют, получая продукт в виде желтовато-коричневого твердого вещества (т.пл. 69 - 72^oC).

Стадия 3: Получение дигидро-5(S)-((метансульфонил)оксиметил)-3(R)-фенилметил-3(2H)-фуранона.

К раствору 2,93 г (14 ммоль) дигидро-5(S)-(дигидрометил)-3-(R)- фенилметил-3(2H)-фуранона в метиленхлориде, охлажденному до 0^oC, добавляют триэтиламин (1,98 мл, 15,6 ммоль), а затем метансульфонил хлорид (1,20 мл, 15,6 ммоль). Через 1 час при 0^oC реакционную смесь выливают в 10% водный раствор лимонной кислоты, промывают этилацетатом (2 х 100 мл), которую промывают обратной струей воды (100 мл), соляным раствором (100 мл), сушат, фильтруют и концентрируют, получая продукт в виде воскообразного коричневого твердого вещества.

Стадия 4: Получение дигидро-5(S)-(2-(3-(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)- (декагидроизохинолин)ил)метил)-3(R)-фенил-метил-3(2H)-фуранона.

К 70 мг дигидро-5(S)-((метансульфонил)-(оксиметил)- 3-(R)-фенилметил-3(2H)-фуранона (0,25 ммоль) в 10 мл ксилола, содержащего 100 мг карбоната калия, добавляют 65 мг (0,27 ммоль) N-т-бутил-(4aS,8aS)-(декагидроизохинолин)-3(S)-карбоксамида и реакционную смесь нагревают до 140^oC. Через 6 часов реакционную смесь охлаждают, выливают в 30 мл воды и промывают этилацетатом (2 х 30 мл). Органическую фазу сушат, фильтруют и концентрируют, получая осадок, который хроматографируют (50/50 ЭА/гексан), получая указанный продукт.

Стадия 5: Получение 2(R)-фенилметил-4(S)-(т-бутилдиметилсилилокси)-5-(2-(3(S)-N-(т- бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентановой кислоты.

К 130 мг (0,305 ммоль) дигидро-5(S)-(2-(3-(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS,8aS)- (декагидроизохинолин)ил)метил)-3-(R)-фенил-метил-3(2H)-фуранона в 2 мл ДМЭ добавляют 1 мл раствора гидроксида лития. Через 4 часа при комнатной температуре реакционную смесь концентрируют до сухого остатка и сушат путем азеотропной перегонки с толуолом (3X) для удаления избытка воды. Остаток растворяют в 5 мл ДМФ и добавляют 414 мг (6,10 ммоль) имидазола и 465 мг (3,05 ммоль) т-бутилдиметилсилил хлорида. Через два дня при комнатной температуре к реакционной смеси добавляют 1 мл метанола и через 1 час раствор выпаривают досуха. Остаток распределяют между насыщенным раствором NH₄Cl (водн. ) и промывают этилацетатом, который сушат, фильтруют и концентрируют, получая масло, которое является смесью продукта и фуранона - исходного вещества. Это вещество в неочищенном виде используют в следующей реакции.

Стадия 6: Получение N-(2-(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-(т- бутилдиметилсилилокси)-5(2-(3(S)-N-(т-бутил-карбоксамидо)-(4aS, 8aS)- декагидроизо-хинолин)ил)-пентанамида.

Вышеупомянутый неочищенный продукт стадии 5 растворяют в 3 мл ДМФ вместе с 47 мг (0,246 ммоль) ЭДК, 33 мг (0,246 ммоль) НОВТ и 37 мг (2(R)-гидрокси-1(S)-аминоиндана. pH раствора доводят до 8,5 - 9,0 триэтиламином и через 18 часов его концентрируют до сухого остатка, остаток растворяют в 10% водн. растворе лимонной кислоты и промывают водный слой этилацетатом. Органический слой сушат, фильтруют и концентрируют и образовавшееся масло хроматографируют (SiO₂, 30% ЭА/гексан), получая названное соединение.

Стадия 7: Получение N-(2-(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(2-3(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамида.

Продукт вышеописанной стадии 6 растворяют в 1 мл ТГФ и добавляют 1 мл 1 М раствора тетрабутиламмоний фторида в ТГФ. Через 18 часов при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют 20 мл насыщенного раствора NaHCO₃ (водн. ), и продукт экстрагируют этилацетатом, который сушат, фильтруют и концентрируют, получая пену. Полученное вещество хроматографируют на препаративной пластинке (0,5 мм, 5% MeOH/CHCl₃), и названный продукт выделяют обычным способом в виде твердого вещества с т.пл. 105 - 107^oC.

Пример 5.

Получение N-2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил 4(S)-амино-5-(2-3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)- декагидроизохинолин)ил)-пентанамида.

Стадия 1: Получение 5(S)-((т-бутил-диметилсилилокси)метил)-3(R)- фенилметил-N-BOC-2-пирролидинона.

Раствор 5(S)-((т-бутил-диметилсилилокси)метил)-N-BOC-2- пирролидинона (400 мг, 1,26 ммоль) в 2 мл ТГФ добавляют к предварительно охлажденному (-78^oC) 1 М раствору гексаметилдисилазида лития (1,3 мл) в 5 мл ТГФ. Через 45 минут добавляют 0,15 мл бензил бромида (1,3 ммоль) и продолжают перемешивание. Через 5 часов реакционную смесь выливают в разделительную воронку, содержащую 30 мл 10% водного раствора лимонной кислоты. Водный слой экстрагируют (2 х 30 мл ЭА) и это промывают обратной струей соляного раствора (50 мл), сушат, фильтруют и концентрируют до масла. Остаток хроматографируют (SiO₂, 20% ЭА/гексан), получая продукт в виде масла.

Стадия 2: Получение 5(S)-гидроксиметил-3(R)-фенилметил-2-пирролидинона.

К 130 мг (0,34 ммоль) 5(S)-((т-бутил-диметилсилилокси)метил)-3(R)-фенилметил)-N-BOC-2- пирролидинона в 5 мл ацетонитрила добавляют 0,1 мл раствора 48% HF в воде. Через 3 часа при комнатной температуре реакционную смесь концентрируют до сухого состояния и разбавляют 30 мл водного 10% раствора NaHCO₃. Смесь экстрагируют ЭА (2 х 30 мл), сушат, фильтруют и концентрируют, получая неочищенный продукт.

Стадия 3: Получение 5(S)-(метансульфонилокси)-метил-3(R)-фенилметил-2-пирролидинона.

К раствору неочищенного продукта из стадии 2 в 5 мл метиленхлорида, охлажденного до 0^oC, добавляют триэтиламин (42 мл, 0,41 ммоль) и метансульфонил хлорид (47 мг, 0,41 ммоль). Реакционной смеси дают возможность медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 18 часов, и после этого ее разбавляют 30 мл метиленхлорида, промывают 30 мл 10% раствора лимонной кислоты, сушат, фильтруют и концентрируют, получая продукт в виде масла.

Стадия 4: Получение 5(S)-(2-(3(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)- (4aS,8aS)-(декагидроизохинолин)ил)-метил)-3(R)-фенилметил-2- пирролидинона.

К раствору 380 мг (1,34 ммоль) 5(S)-(метансульфонилокси) метил-3(R)-фенилметил-2-пирролидинона в 20 мл изопропанола добавляют 350 мг карбоната калия и 360 мг N-т-бутил-(4aS,8aS)- (декагидроизохинолин)-3(S)-карбоксамида и реакционную смесь нагревают до 85^oC. Через 18 часов охлажденную реакционную смесь фильтруют через целит, выпаривают досуха и остаток растворяют в воде, что и экстрагируют ЭА (2 х 50 мл). Органический слой сушат, фильтруют и концентрируют, и остаток хроматографируют (SiO₂ 50/50 ЭА/гексан), получая продукт в виде масла.

Стадия 5: Получение 5(S)-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS,8aS)-(декагидроизохинолин) ил)-метил)-3(R)-фенилметил-N-BOC-2-пирролидинона.

К раствору вышеупомянутого продукта стадии 4 (260 мг, 0,611 ммоль) в 10 мл метиленхлорида добавляют диметиламинопиридин (74 мг, 0,6 ммоль) и 133 мг (0,61 ммоль) BOC-ангидрида. Через 18 часов при комнатной температуре реакционную смесь обрабатывают путем разбавления 30 мл метиленхлорида и органический слой промывают 30 мл 10%-ного раствора лимонной кислоты, соляным раствором (30 мл), сушат, фильтруют и концентрируют, получая масло. Хроматографирование (SiO₂, 40% ЭА/гексан) дает названное соединение.

Стадия 6: Получение 5-(2-(3-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-(декагидроизохинолин) ил)-4(S)-[(1", 1")-(диметилэтоксикарбонил)-амино]-2-(R)- фенилметилпентановой кислоты.

К раствору вышеуказанного продукта стадии 5 (260 мг, 0,495 ммоль), растворенному в 3 мл диметоксиэтана, добавляют 1,5 мл 1 М водного раствора гидроксида лития (1,5 ммоль). Реакционную смесь обрабатывают спустя 2 часа путем концентрирования досуха, растворения остатка в насыщенном водном растворе хлорида аммония и водную фазу промывают этилацетатом (2 х 50 мл), который сушат, фильтруют и концентрируют, получая неочищенную кислоту.

Стадия 7: Получение N-(2-(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-[(1", 1")- (диметилэтоксикарбонил)амино] -5-(2-3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо) -(4aS,8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамида.

К раствору вышеупомянутого продукта стадии 6 (260 мг, 0,49 ммоль) в метиленхлориде добавляют EDS (94 мг, 0,49 ммоль), HOBT (66 мг, 0,49 ммоль), 2(R)-гидрокси-1(S)-аминоиндан (73 мг, 0,49 ммоль) и pH реакционной смеси доводят до 8,5 - 9,0 используя триэтиламин. Через 5 часов при комнатной температуре реакционную смесь обрабатывают путем разбавления 50 мл метиленхлорида и промывания органики насыщенным водным раствором хлорида аммония. Органическую фазу сушат, фильтруют и концентрируют и остаток хроматографируют, получая названное соединение в виде пены.

Стадия 8: Получение -N-(2-(R)-гидрокси-1(S)инданил)-2(R)- фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(2-(3-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)- (4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)-пентанамида.

К раствору вышеупомянутого продукта стадии 7 (180 мг, 0,28 ммоль) в 5 мл метиленхлорида, охлажденного до 0^oC, добавляют 1 мл трифторуксусной кислоты. Через 4 часа реакционную смесь концентрируют досуха и остаток растворяют в 50 мл метиленхлорида и промывают 10% водным раствором NaHCO₃. Органический слой сушат, фильтруют и концентрируют, получая продукт в виде твердого вещества, которое хроматографируют (SiO₂, 7% MeOH/CH₂Cl₂), получая названное соединение, т.пл. = 92 - 95^oC.

Пример 6.

Получение N-(2-(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил- 4(S)-гидрокси-5(1-(4-карбобензилокси-2 (S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамида.

Используя в основном ту же самую методику, что в примере 1, но заменяя N-т-бутил-4 (S)-фенокси-L-пролинамид, используемый в ней на стадии 9, на N-т-бутил-4-CBZ-пиперазин-2(S)-карбоксамид, получают названное соединение.

Пример 7.

Получение N""-(N(2-пиридил)-валил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(2-(3(S)-(N" -т-бутил-карбоксамидо)-(4aS,8aS)-декагидроизохинолин)-ил)пентанамида.

Используя в основном ту же самую методику, что в примере 4, но заменяя 2(R)-гидрокси-1(S)аминоиндан, применяемый в ней на стадии 6, на 2-пиридил-валин, получают названное соединение.

Пример 8.

Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(2(S)-N" -т-бутил-3-фенилпропионамид)амино)-пентанамида.

Используя в основном ту же самую методику, что и в примере 1, но заменяя N"-т-бутил-4(S)-фенокси-L-пролинамид, применяемый в ней на стадии 9, на N-т-бутил-фенил-аланин амид, получают названное соединение.

Пример 9.

Получение N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)-2-(R)-фенилметил-4(S) -гидрокси-5-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамида.

Стадия 1: Получение N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-бензотиопиранил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(2-(3 (S)-т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамида.

Используя в основном ту же самую методику, что в примере 4, но заменяя 2(R)-гидрокси-1(S)-аминоиндан, используемый в стадии 6, на 4(S)-амино-3,4-дигидро-1H-бензотиопиран, получают вышеназванное соединение.

Стадия 2: Получение N(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)-2(R)-фенилметил-4(S)- гидрокси-5-(2-(3-(S)-т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамида.

Соединение из вышеупомянутой стадии 1 растворяют в смеси 1:1 метанола и воды. К ней добавляют 10 экв. OXONE, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. По завершении реакции реакционную смесь концентрируют до сухого состояния, добавляют воду и экстрагируют этилацетатом, экстракт сушат, фильтруют и концентрируют, получая названное соединение.

Пример 10.

Получение N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил-2(R)-фенилметил-4(S) -гидрокси-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)) -пентанамида.

Стадия 1: Получение дигидро-5(S)-(1-4 - карбобензилокси-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)метил)-3(R) -фенилметил-3(2H)-фуранона.

Используя в основном ту же самую методику, что в примере 4, стадия 4, но замещая N"-т-бутил-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)-3(S)-карбоксамид, используемый в ней, на 4-карбобензилокси-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазин, получают названное соединение.

Стадия 2: Получение 2(R)-фенилметил-4(S)-(т-бутилдиметилсилилокси)-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-N"- (т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентановой кислоты.

Используя в основном ту же самую методику, как в примере 4, стадия 5, но заменяя дигидро-5(S)-2-(2-(3-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)метил)-3(R)-фенилметил-3(2H)-фуранон, используемый в ней, на дигидро-5(S)-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил) метил-3(R)-фенилметил-3(2H)-фуранон, получают названное соединение.

Стадия 3: Получение N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-бензотиопиринил)-2(R)-фенилметил-(4(S)- (т-бутилдиметилсилилокси)-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил))-пентанамида.

Неочищенную 2(R)-фенилметил-4(S)-(т-бутилдиметилсилилокси)-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)- N"(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентановую кислоту растворяют в 3 мл ДМФ вместе с 1 экв. ЭДК, 1 экв. НОВТ и 1 экв. 4(S)-амино-3,4-дигидро-1H-бензотиопирана. pH раствора доводят до 8,5 - 9,0 триэтиламином, и через 18 часов реакционную смесь подвергают обработке путем концентрирования досуха, растворения остатка в 10%-ом водном растворе лимонной кислоты и промывки водного слоя этилацетатом. Органический слой сушат, фильтруют и концентрируют, и получающийся остаток хроматографируют, получая названное соединение.

Стадия 4: Получение N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-бензотиопиранил)-2(R)-фенилметил-(4(S)-гидрокси)-5-1- (4-карбобензилокси-2(S)-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамида.

Продукт из вышеописанной стадии 3 растворяют в 1 мл ТГФ и добавляют 1 мл 1 М раствора фторида тетрабутиламмония в ТГФ. Через 18 часов при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют 20 мл насыщенного (водного) раствора NaHCO₃, и продукт экстрагируют этилацетатом, экстракт сушат, фильтруют и концентрируют, получая остаток. Остаток хроматографируют, получая продукт.

Стадия 5: Получение N-(4(S)-3,4-дигидро-1H-2,2-диоксобензотиопиранил)-2(R)-фенилметил-(4(S) -гидрокси)-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)) -пентанамида.

Соединение из вышеприведенной стадии 4 растворяют в смеси 1:1 метанола и воды. К ней добавляют 10 экв. OXONE, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. По завершении реакции реакционную смесь концентрируют досуха, добавляют воду и экстрагируют этилацетатом, экстракт сушат, фильтруют и концентрируют, получая названное соединение.

Пример 11.

Получение N-(2(R)гидркоси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-((2-гидрокси)этокси)фенил)метил-4(S)- гидрокси-5-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)пентанамида.

Стадия 1: Получение N-(2(R)гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-(2-аллилокси)фенил)метил)-4-(S)- гидрокси-5-(2-(3(S)-т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)пентанамида.

К раствору N-(2(R)гидрокси-1(S)-инданил)-2-(R)-((4-гидроксифенил)метил)-4(S)-гидрокси- 5(2-(3(S)-т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8as)-декагидроизохинолин)ил)пентанамида в диоксане добавляют 6 экв. аллилбромида и 6 экв. карбоната цезия. Реакционную смесь нагревают до 90^oC. По завершении реакции осадок отфильтровывают, диоксан отгоняют досуха, и остаток разбавляют водой, и эту смесь промывают этилацетатом. Органическую фазу сушат, фильтруют и концентрируют, получая продукт.

Стадия 2: Получение N-(2(R)гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-((2-гидрокси)этокси)фенил)метил) -4-(S)-гидрокси-5-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)пентанамида.

Продукт стадии 1 растворяют в метаноле, добавляют 1 экв. п-толуолсульфокислоты, и реакционную смесь охлаждают до -78^oC. Через реакционную смесь пропускают озон до тех пор, пока не появится устойчивый синий цвет. Сосуд продувают азотом для удаления следов озона и добавляют избыток раствора боргидрида натрия. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и затем добавляют насыщенный раствор NaHCO₃. Метанол удаляют на роторном испарителе, и водный остаток промывают этилацетатом, экстракт сушат, фильтруют и концентрируют, получая названное соединение.

Пример 12.

Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-((2-гидрокси)-этокси)фенил)метил) -4(S)гидрокси-5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо) -пиперазинил)-пентанамида.

Используя в основном ту же самую методику, как в примере 11, но заменяя N-(2(R)гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-гидроксифенил)-метил-4(S)-гидрокси-5 -(2-(3(S)-т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)- пентанамид, используемый в ней, на N-(2(R)гидрокси-1-(S)-инданил)-2(R)-((4-гидроксифенил)метил)-4(S)-гидрокси- 5-(1-(4-карбобензилокси-2(S)-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)-пентанамид, получают названное соединение.

Пример 13.

Получение N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-((4-(2-(4-морфолинил)этокси)фенил)метил) -4(S)-гидрокси-5-(2-(3(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)-декагидроизохинолин)ил)-пентанамида.

К раствору N-(2R)гидрокси-1-(S)-инданил)-2(R)-((4-гидроксифенил)- метил)-4(S)-гидрокси-5-(2-(3(S)N"-(т-бутилкарбоксамидо)-(4aS, 8aS)- декагидроизохинолин)ил)пентанамида в диоксане добавляют 6 экв. хлорэтилморфолина и 6 экв. карбоната цезия. Реакционную смесь нагревают до 90^oC. По завершении реакции осадок отфильтровывают, отгоняют диоксан, и остаток разбавляют водой, затем промывают этилацетатом. Органическую фазу сушат, фильтруют и концентрируют, получая названное соединение.

Пример 14.

Получение N-(2(R)гидрокси-1-(S)-инданил)-2(R)-((4-(2-(4-морфолинил)-этокси) фенил)метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-карбобензилокси- 2-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамида.

К раствору N-(2(R)гидрокси-1-(S)-инданил)-2(R)-((4-гидроксифенил)- метил)-4(S)-гидрокси-5-(1-(4-карбобензилокси- 2-(S)-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)-пентанамида в диоксане добавляют 6 экв. хлорэтил морфолина и 6 экв. карбоната цезия. Реакционную смесь нагревают до 90^oC. По завершении реакции осадок отфильтровывают, отгоняют диоксан, и остаток разбавляют водой, затем промывают этилацетатом. Органическую фазу сушат, фильтруют и концентрируют, получая названное соединение.

Пример 15.

Получение N-(2(R)гидрокси-1-(S)-инданил)-2(R)-(фенилметил)-4-(S)-гидрокси-5- (1-(4-(3-пиридилметил)-2 (S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамида.

Стадия 1: Получение дигидро-5(S)-((трифторметансульфонил) оксиметил)-3(R)-фенилметил-3(2H)-фуранона.

К раствору 18,4 г (89,2 ммоль) дигидро-5(S)-(гидроксиметил)-3(R)-фенилметил-3(2H)-фуранона в 350 мл метиленхлорида, охлажденному до 0^oC, добавляют 13,51 мл 2,6-литидина (115,98 ммоль), а затем по каплям добавляют 16,51 мл ангидрида трифторметансульфокислоты (98,1 ммоль). Через 1,5 часа при 0^oC реакционную смесь выливают в смесь 300 мл лед/соляной раствор и перемешивают в течение 0,5 часов. Затем водный слой экстрагируют метиленхлоридом (3 х 150 мл), органические слои промывают 10% HCl (2 х 75 мл), насыщенным NaHCO₃ (100 мл), водой (100 мл), сушат над MgSO₄, фильтруют и концентрируют, получая твердое вещество. Очистка с помощью флеш-хроматографии (колонка 120 х 150 мм, градиент элюирования смесью гексаны:EtOAc, 4:1 - 3:1) приводит к получению названного продукта, т.пл. 53-54^oC.

Стадия 2: Получение 4-(1,1-диметилэтил)-1-(фенилметил)-1,2(S), 4-пиперазинтрикарбоксилата.

Названное соединение получают, следуя способу Bigge C.F.; Hays, S.J. Novak, P. M.; Drummond < J.T.; Johnson, G.; Bobovski, T.P.; Tetrahedron Lett, 1989, 30, 5193. исходя из 2 ( ) - пиперазинкарбоновой кислоты (смотри Felder. E.; Maffei, S.; Pietra, S.; Pitre, D.; Helv. Chim. Acta 1960, 117, 888.

Стадия 3: Получение N-т-бутил-4-(1,1-диметилэтоксикарбониламино)-1- (фенилметилкарбониламино)пиперазин-2(S)-карбоксамида.

К 9,90 г (27,16 ммоль) 4-(1,1-диметилэтил)-1-(фенилметил)-1,2(S), 4-пиперазинтрикарбоксилату, растворенному в 75 мл ДМФ, и охлажденному до 0^oC, добавляют 5,73 г (29,88 ммоль) ЭДК, 4,03 г (29,88 ммоль) HOBt 3,14 мл (29,88 ммоль) т-бутиламина и, наконец, 4,16 мл (29,88 ммоль) триэтиламина. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 часов, и реакционный объем концентрируют наполовину. Затем смесь разбавляют ЭА и промывают 10% HCl (2 х 75 мл), насыщенный NaHCO₃ (1 х 75 мл), водой (3 х 75 мл) и соляным раствором (1 х 50 мл), сушат над MgSO₄ и концентрируют до твердого вещества. Это твердое вещество растирают в порошок в смеси ЭА:гексан (1:2) и фильтруют, получая названный продукт в виде твердого белого вещества; т.пл. 134 - 135^oC.

Стадия 4: Получение N-т-бутил-4-(1,1-диметилэтоксикарбониламино)-пиперазин-2(S)- карбоксамида.

К 1,20 г (2,86 ммоль) N-т-бутил-4-(1,1-диметилэтоксикарбониламино)-1- (фенилметилкарбониламино)пиперезин-2(S)-карбоксамида и 1,1 г (0,086 ммоль) 10% Pd/C добавляют 15 мл метанола. Сосуд продувают водородом, и реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов, фильтруют через целит и промывают этанолом. Растворители удаляют в вакууме, получая названный продукт в виде пены.

¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 6,65 (ш, 1H), 4,10 (м, 1H), 3,81 (ш, 1H), 3,21 (дд, J = 18 и 7 Гц, 1H), 3,02 - 2,70 (м, 4H), 2,10 - 2,0 (ш, 1H), 1,50 (с, 9H), 1,41 (с, 9H).

Стадия 5: Получение дигидро-5(S)-(4-(1,1-диметилэтоксикарбониламино))-2(S)-N- (т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил)метил)-3(R)-фенилметил-3(2H)- фуранона.

К раствору 22,40 г (0,0662 моль) дигидро-5(S)-((трифторметансульфонил)оксиметил)-3(R)-фенилметил- 3(2H)-фуранона (получен на стадии 1) и 18,0 г (0,063 ммоль) n-т-бутил-4-(1,1-диметилэтоксикарбониламино)пиперазин-2(S)- карбоксамида, растворенных в 10 мл изопропанола, добавляют 11,53 мл (0,0662 моль) N,N-диизопропилэтиламина. Через 2,5 часа добавляют еще 1,2 г дигидро-5(S)-((трифторметансульфонил)оксиметил-3(R)- фенилметил-3(2H)-фуранона. Реакция завершается через 3,5 часа контролем с помощью тонкослойной хроматографии (тсх) и реакционную смесь концентрируют до получения густого масла. Растирание в смеси ЭА : гексаны (1:2, 200 мл) приводит к получению белого твердого вещества, которое фильтруют и выгружают. Масло очищают с помощью флеш-хроматографии (колонка 120 х 150 мм, ЭА : гексаны, градиент элюирования 1:1, 2:1, 3:1, до чистого ЭА), получая названное соединение.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) : 7,34 - 7,17 (м, 5H), 6,31 (ш.с. 1H), 4,38 (ш. м, 1H), 3,96 - 3,92 (м, 1H), 3,79 (ш.м, 1H), 3,16 (дд, J = 13,6 и 8,9 Гц, 1H), 2,78 (м, 1H), 2,32 - 2,04 (м, 1H), 1,99 - 1,92 (м, 1H), 1,45 (с, 9H), 1,29 (с, 9H).

Стадия 6: Получение 2(R)-фенилметил-4(S)-(т-бутилдиметилсилилокси)-5-(1-(4-(1,1- диметилэтоксикарбониламино)))-2(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил))-пентанамида.

К 25,50 г (52,50 ммоль) дигидро-5(S)-(4-(1,1- диметилэтоксикарбониламино))-2(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил) метил)-3(R)-фенилметил-3(2H)-фуранона, растворенного в 120 мл ДМЭ, охлажденном до 0^oC, добавляют раствор 60 мл воды и 1,512 г (63,01 ммоль) гидроксида лития. Через 0,5 часа реакцию останавливают путем добавления 10% HCl до pH 6, и раствор концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в 50 мл воды и экстрагируют ЭА (4 х 75 мл), и органические соли промывают водой (1 х 20 мл), соляным раствором (1 х 20 мл). Водный слой снова экстрагируют ЭА (2 х 75 мл), и объединенные вместе органические слои сушат над MgSO₄ и концентрируют, получая желтое твердое вещество. Этот неочищенный продукт растворяют в 100 мл ДМФ и добавляют 17,87 г (0,262 моль) имидазола, охлаждают до 0^oC и затем добавляют 31,50 г (0,21 моль) т-бутилдиметилсилилхлорида. Реакционную смесь перемешивают 1 час при 0^oC и затем нагревают до комнатной температуры. Через 20 часов реакцию останавливают 10 мл метанола, и реакционную смесь концентрируют до половины объема. Добавляют 100 мл водного буфера с pH 7, и водный слой экстрагируют ЭА (4 х 100 мл), объединенные органические слои промывают 10% HCl (2 х 50 мл), водой (3 х 75 мл) и соляным раствором (1 х 50 мл), сушат над MgSO₄ и концентрируют, получая названное соединение. Это вещество непосредственно используют в следующей стадии.

Стадия 7: Получение N-(2(R)гидрокси-1-(S)инданил)-2(R)- фенилметил-4-(S)-(т-бутилдиметилсилилокси)-5-(1-(4-(1,1- диметилэтоксикарбониламино)))-2-(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил))-пентанамида.

К 27,0 г (0,0446 моль) неочищенного вещества из стадии 6, растворенного в 180 мл ДМФ и охлажденного до 0^oC, добавляют 8,98 г (0,0468 моль) ЭДК, 6,32 г (0,0468 моль) HOBt и 7,31 г (0,049 моль) аминогидрокси индана. Добавляют триэтиламин (6,52 мл, 0,0468 моль), и реакционную смесь перемешивают при 0^oC в течение 2 часов, при комнатной температуре в течение 16 часов и гасят путем разбавления 500 мл ЭА. Органический слой промывают 10% HCl (2 х 100 мл), насыщенным NaHCO₃ (1 х 100 мл), водой (3 х 150 мл), соляным раствором (1 х 75 мл), сушат над MgSO₄ и концентрируют, получая названное соединение в виде белой пены.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) : 7,4 - 7,17 (м, 9H), 6,51 (ш.с, 1H), 5,79 (ш. с. , 1H), 5,23 (м, 1H), 4,23 (ш.с, 1H), 4,06 (м, 1H), 3,96 - 3,84 (м, 2H), 3,07 - 2,78 (м, 8H), 3,65 (дд, J = 9,6 и 4,1 Гц, 1H), 2,56 - 2,44 (м, 2H), 2,29 (дд, J = 12,0 и 4,5 Гц, 1H), 2,17 - 2,09 (м, 1H), 1,79 (ш.с, 1H), 1,44 (с, 9H), 1,35 (с, 9H), 1,10 (с, 1H), 0,84 (с, 9H), 0,12 (с, 3H), 0,08 (с, 3H).

Стадия 8: Получение N-(2(R)гидрокси-1-(S)инданил)-2(R)- фенилметил-4-(S)-(гидрокси)-5-(1-(4-(1,1-диметилэтоксикарбониламино))) -2-(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамида.

К 32,20 г (0,0437 моль) N-(2(R)гидрокси-1-(S)-инданил (2(R)-фенилметил-4(S)-(т-бутилдиметилсилилокси)-5-(1-(4- (1,1-диметилэтоксикарбониламино)))-2(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил))-пентанамида добавляют 437 мл (0,437 моль) фторида тетрабутиламмония (1,0 М раствора в ТГФ, Aldrich). Реакционную смесь перемешивают в течение 18 часов, затем концентрируют до 200 мл и разбавляют 700 мл ЭА. Смесь промывают водой (2 х 100 мл), соляным раствором (1 х 50 мл), и водные слои снова экстрагируют ЭА (2 х 200 мл). Объединенные органические слои сушат над MgSO₄ и концентрируют до масла. Очистка флеш-хроматографией (120 х 150 мл колонка, градиентное элюирование CH₂Cl₂:CHCl₃ /насыщенный NH₃ : метанол, при увеличении метанола от 1%, 1,5%, 2%) приводит к получению названного соединения в виде белой пены.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) : 7,31 - 7,11 (м, 9H), 6,41 (ш.с, 1H), 6,23 (д, J = 8,6 Гц, 1H), 5,25 (дд, J = 8,6 и 4,7 Гц, 1H), 4,21 (м, 1H) 3,83 - 3,82 (м, 2H), 3,78 - 3,61 (м, 2H), 3,22 - 3,19 (м, 2H), 3,03 - 2,78 (м, 8H), 2,62 - 2,58 (м, 1H), 2,41 - 2,35 (м, 2H), 2,04 - 2,02 (м, 1H), 1,57 - 1,50 (м, 1H), 1,45 (с, 9H), 1,32 (с, 9H).

Стадия 9: Получение N-(2(R)гидрокси-1(S)инданил (2(R)-фенилметил-4(S)-(гидрокси)-5-(1-(2-(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил)-пентанамида.

К 21,15 г (0,34 моль) N-(2(R)гидрокси-1(S)-инданил) (2(R)-фенилметил-4(S)-(гидрокси)-5-(1-(4-(1,1- диметилэтоксикарбониламино)))-2(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил))-пентанамида, растворенного в 350 мл метиленхлорида и охлажденного до 0^oC, добавляют 22,43 мл (0,204 моль) 2,6 - лутидина и затем 32,85 мл (0,170 моль) триметилсилилтрифлата на протяжении 5 минут. Через 0,5 часа реакционную смесь гасят 10% HCl (80 мл) и смесь перемешивают в течение 0,5 часа. К смеси добавляют 100 мл насыщенного NaHCO₃ и затем твердый NaHCO₃ до pH 8. Затем водный слой экстрагируют ЭА (4 х 100 мл), и объединенные органические слои промывают водой (1 х 50 мл), соляным раствором (1 х 75 мл), сушат над MgSO₄ и концентрируют. Остаток очищают при помощи колоночной хроматографии (колонка 120 х 150 мм, градиентное элюирование CH₂Cl₂ : CHCl₃, насыщенный NH₃ : MeOH, при медленном увеличении метанола от 2%, 3%, 4%, 5%, 6% до 10%). При этом получают названный продукт в виде белой пены.

¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) : 7,53 (с, 1H), 7,29 - 7,09 (м, 9H), 6,52 (д, J = 8,3 Гц, 1H), 5,24 (дд, J = 8,2 и 4,9 Гц, 1H), 4,23 (дд, J = 4,7 и 4,03 Гц, 1H), 4,25 - 4,00 (ш.с, 1H), 3,83 - 3,81 (м, 1H), 3,03 - 2,88 (м, 4H), 2,82 - 2,73 (м, 7H), 2,50 - 1,60 (ш.с, 2H), 2,45 (д, J = 6,2 Гц, 2H), 2,32 - 2,29 (м, 1H), 1,98 (м, 1H), 1,51 (м, 1H), 1,33 (с, 9H).

Стадия 10: Получение N-(2(R)гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси -5-(1-(4-(3-пиридилметил)-2(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил)))-пентанамида.

К 10 г (0,019 моль) N-(2(R)гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси -5-(1-(2-(S)-N-(т-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамида и 3,45 г (0,021 моль) 3-пиколилхлорида, растворенным в 40 мл ДМФ, добавляют 5,85 мл (0,042 моль) триэтиламина. Через 3 часа добавляют дополнительно 0,313 г -3-пиколилхлорида. После последующих 2 часов реакционную смесь разбавляют 400 мл ЭА и промывают водой (3 х 75 мл), соляным раствором (1 х 100 мл), сушат над MgSO₄ и концентрируют. Остаток растирают в порошок в 30 мл ЭА, и собирают образующийся белый осадок. Последующей перекристаллизацией из ЭА получают названный продукт (т.пл. 167,5 - 168^oC).

Пример 16.

Используя в основном ту же самую методику, как описано в примере 15, но обрабатывая N-(2(R)гидрокси-1(S)-инданил)- 2-(R)-фенилметил-4(S)-гидрокси-5-(1-(2-(S)-N"-(т-бутилкарбоксамидо) -пиперазинил))-пентанамид, используемый в ней (соединение (i)), алкилирующим агентом (ii) вместо 3-пиколилхлорида, используемого на стадии 10 в ней, получают продукты, определяемые формулой (iii) (см. в конце описания).

Пример 17.

Получение дигидро-5(S)-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3(2H)-фуранона.

К раствору 3,00 г (25,8 ммоль) дигидро-5(S)-(гидроксиметил)-2-(3H)-фуранона, растворенного в 25 мл дихлорметана, добавляют 3,51 г (51,6 ммоль) имидазола и затем 4,67 г (31,0 ммоль) трет-бутилдиметилсилилхлорида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 8 часов и гасят 2 мл метанола. Смесь концентрируют до получения масла и затем разбавляют 150 мл эфира и промывают 5% HCl (2 x 10 мл), насыщенным NaHCO₃ (1 x 10 мл), водой (1 x 10 мл) и соляным раствором (1 x 10 мл), сушат над MgSO₄ и концентрируют. Остаток очищают флеш-хроматографией (колонка 40 х 150 мм, градиентное элюирование, гексаны : этилацетат от 5:1 до 4:1), получая продукт в виде прозрачного масла.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) : 4,68 - 4,60 (м, 1H), 3,89 (дд. J = 3,3 и 11,3 Гц, 1H), 3,71 (дд. J = 3,2 и 11,3 Гц, 1H), 2,71 - 2,45 (м, 2H), 2,35 - 2,16 (м, 2H), 0,91 (с, 9H), 0,10 (с, 3H), 0,09 (с, 3H).

Пример получения индинавир-сульфата.

К раствору N-(2(R)-гидрокси-1(S)-инданил)-2(R)-фенилметил-4(S)- гидрокси-5-(1-(4-(3-пиридилметил)-2(S)-N"-(T-бутилкарбоксамидо)- пиперазинил-пентамида (соединения J) (индинавира) (1,77 г, 2,805 ммоля) в 4 мл этанола (95%) добавляют концентрированную H₂SO₄ (0,149 мл, 2,805 ммоля) и смесь упаривают до пены. Остаток повторно растворяют в горячем изопропиловом спирте, медленно охлаждают до комнатной температуры, затем перемешивают при 0^oC в течение 1 часа и фильтруют под потоком аргона. Белые кристаллы сушат под высоким вакуумом при 40^oC, в результате получают кристаллическую соль - сульфат гидрат: т.пл. 150-153^oC (размягчается при 135^oC).

ПМР (400 МГц, CDCl₃/CD₃OD, 9/1) : 1,19 (д, (CH₃)₂ CHOH, J = 6,05 Гц), 1,30 (с, 9H), 1,51 - 1,57 (м, 1H) 1,90 (т, J = 11,2 Гц, 1H), 2,77 - 3,17 (м, 15H), 3,27 (дд, J = 9,1, 9,5 Гц, 1H), 3,60 (д, J = 12,1 Гц, 1H), 3,83 (д, J = 13,9 Гц, 1H), 3,90 (д, J = 13,9 Гц, 1H), 3,97 - 4,04 (м, (CH₃)₂CHOH), 4,05 - 4,11 (м, 2H), 4,30 - 4,33 (м, 1H), 5,19 (д, J = 4,9 Гц, 1H), 7,12 - 7,32 (м, 9H), 7,49 (дд, J = 2,3, 5,3 Гц, 1H), 8,01 (д, J = 7,7 Гц, 1H), 8,55 (д, J = 4,4 Гц, 1H), 8,76 (с, 1H). Анал. (C₃₆H₄N₅O₄ 1,0 H₂SO₄ 1,0 H₂O 0,2 C₃H₈O) C, H, N.

Испытание на ингибирование вируса

Индинавир испытывают на способность ингибировать распространение вируса в опыте острой инфекции. Опыт проводят с использованием МТ-4 Т-лимфоидных клеток человека, периферических мононуклеарных клеток крови человека (PBMC) или первичных моноцитов/макрофагов человека. МТ-4 клетками (2,5 х 105 клеток на мл) инфицируют при множественности заражения 0,01 и инкубируют в течение ночи в культуральной среде RPM1 1640 содержащей 10% (объем/объем) фетальной бычьей сыворотки. Инфицированные клетки затем дважды промывают в свежей культуральной среде и высевают на 96-ячеечные культуральные платы с концентрацией 5,0 х 104 клеток на ячейку. Серийные разбавления 1:2 соединения добавляют в ячейки. Испытываемые культуры дополнительно инкубируют 72 часа при 37^oC, в течение которых оценивают содержание вируса.

Результаты (табл. V) показывают, что соединение является эффективным ингибитором как адаптированных к Т-лимфоидным клеткам вариантов ВИЧ-1, так и первичных вирусных изолятов. Чувствительность вируса к ингибитору протеазы не связана с чувствительностью к 3"-азидо-3"-деокситимидину (AZT) или ингибитору ненуклеозидной обратимой транскриптазы (RT). Индинавир эффективен также для профилактики распространения острой инфекции вируса имунодефицита обезьяны (SIVmac 251) и моноцитотропного варианта ВИЧ-1.

ВИЧ-линии: IIIb, MN и RF11, варианты, адаптированные к Т-лимфоидным клеткам: 112, 139-8, 421, 5002, 5003, 5004, первичные изоляты; 139-8, высокоустойчивый к нескольким ненуклеозидным RT ингибиторам; 421, устойчивый к AZT; SF 162, моноцитотропный вариант.

95% ингибирующую концентрацию (IC95) определяют как концентрацию испытуемого соединения, при которой рост вируса подавляется по меньшей мере на 95% по сравнению с необработанными инфицированными контрольными культурами. Приведенные выше значения представляют собой результат многократных измерений.

Способность индинавира предотвращать расщепление корового белка оценивают используя линии персистентно-инфицированных Т-лимфоидных клеток человека. При концентрациях ингибитора 0,5 и 12,0 мкМ, количество зрелых вирионовых матриц (p17) и капсидных (p24) белков существенно снижается относительно количества, присутствующего в необработанных варионах (см. чертеж). Относительное количество p55 корового предшественника (core precursor) и промежуточных продуктов процессинга возрастает. Кроме того, ингибитор предотвращает введение в вирусные частицы зрелых RT субъединиц (p51 и p66) и зрелых вирусных ферментов интегразы (p31). Обе субъединицы образуются процессингом вирусной протеазы из полипротеинового предшественника.

Индинавир используют в концентрациях 12,0 мкМ (зоны A и C) или 0,5 мкМ (зоны B и L). Зона E представляет собой зрелый вирус из необработанных клеток. P24 - процессированный вирусный капсидный белок, P1 представляет промежуточные продукты корового процессинга (the core processing intermediates), p66 и p51 - процессированные RT субъединицы и p31 - зрелый процессированный фермент интегразы вируса.