питательная среда для выращивания культуры ткани glycyrrhiza uralensis - продуцента сапонинов

Формула изобретения

Питательная среда для выращивания культуры ткани Glycyrrhiza uralensis-продуцента сапонинов, содержащая макро- и микроэлементы по Линсмайеру и Скугу, тиамин, мезоинозит, сахарозу, нафтилуксусную кислоту и 6-бензиламинопурин, отличающаяся тем, что она содержит, мг/л: тиамин 0,5 - 2,0, мезоиноизит 100 - 5100, сахарозу 30000 - 50000, нафтилуксусную кислоту 10,0 - 20,0, 6-бензиламинопурин 1,0 - 2,0 и дополнительно содержит, мг/л: ниацин 1,0 - 2,5, пиридоксин 1,0 - 3,0, биотин 0,05 - 0,1, фолиевую кислоту 0,5 - 1,0, гидролизат казеина 100 - 500.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицинской, пищевой промышленности.

Известна питательная среда для выращивания культуры тканей Polycsias Y. R.ET G. Forst - продуцента сапонинов, содержащая макросоли NH₄NO₃, MgSO₄7H₂O, KH₂PO₄, KNO₃, CaCl₂ и микросоли, сахар, агар-агар, гидролизат казеина, -нафтилуксусную кислоту (1). Однако, известная среда не обеспечивает быстрого роста культуры ткани и высокого выхода сапонинов.

Наиболее близким является образование соясопанинов в суспензионных культурах клеток солодки, культивированных на питательной среде Линсмайера - Скуга, содержащей НУК и 6-БАП.

Содержание соясопанинов 0,017 - 1,1% на сухой вес клеток (2). Недостатком прототипа является низкий выход соясопанинов.

Цель изобретения - ускорение роста культуры ткани и повышение выхода сапонинов.

Указанная цель достигается тем, что для культивирования каллусов солодки уральской Glyccyriza uralensis - продуцента сапонинов, содержащая макро- и микроэлементы.

Согласно изобретению дополнительно содержат витамины, гормоны, мезоинозит, гидролизат казеина, альфа-нафтилуксусную кислоту, 6-бензиламинопурин, сахарозу при следующем соотношении компонентов, мг/л:

тиамин - 0,5 - 2

ниацин - 1 - 2,5

пиридоксин - 1 - 3

биотин - 0,05 - 0,1

фолиевая кислота - 0,5 - 1

мезоинозит - 100 - 5100

гидролизат казеина - 100 - 500

-нафтилуксусная кислота ( -НУК) - 10 - 20

6-бензиламинопурин (6-БАП) - 1 - 2

сахароза - 39000 - 50000

Отличительные признаки заявленного изобретения в решениях, известных в науке и технике, авторами не обнаружены.

Для экспериментальной проверки заявленного состава были подготовлены 3 состава питательной среды.

Пример 1. Приготовленная питательная среда содержит компоненты в следующем количественном соотношении, мг/л:

KNO₃ - 1900

NH₄NO₃ - 1650

MgSO₄7H₂O - 370

CaCl₂2H₂O - 440

KH₂PO₄ - 170

MnSO₄4H₂O - 845

KJ - 415

H₃BO₃ - 310

CoCl₂ - 12,50

ZnSO₄7H₂O - 430

Na₂MoO₄2H₂O - 125

CuSO₄5H₂O - 12

Na₂ЭДТА2H₂O - 7460

FeSO₄7H₂O - 5560

ниацин - 1

пиридоксин HCl - 1

тиамин HCl - 0,5

мезоинозит - 100

гидролизат казеина - 100

сахароза - 30000

-НУК - 20

6-БАП - 2

фолиевая кислота - 0,5

Прирост каллусной массы за 30 дней культивирования составил 94,30%. Содержание сапонинов в каллусной культуре солодки уральской составил 1,8168% от сухого веса.

Пример 2. Питательная среда содержит компоненты в следующем количественном соотношении, мг/л:

тиамин - 1

ниацин - 1,5

пиридоксин - 1,5

биотин - 0,075

фолиевая кислота - 0,75

мезоинозит - 2500

гидролизат казеина - 250

-НУК - 15

6-БАП - 1,5

сахароза - 40000

Микро- и макроэлементы как в примере 1.

Прирост каллусной массы за 30 дней культивирования составил 100%. Содержание сапонинов в каллусной культуре солодки составил 2,8057% от сухого веса.

Пример 3. Питательная среда содержит компоненты в следующем количественном соотношении, мг/л:

тиамин - 2

ниацин - 2,5

пиридоксин - 3

биотин - 0,1

фолиевая кислота - 1

мезоинозит - 5100

гидролизат казеина - 500

-НУК - 10

6-БАП - 1

сахароза - 50000

Микро- и макроэлементы как в примере 1.

Прирост каллусной массы за 30 дней культивирования составил 100%. Содержание сапонинов в каллусной культуре солодки составил 3,0022% от сухого веса.

При значении параметров ниже наименьших и выше наибольших наблюдается уменьшение накопления сапонинов.

Приведенные в примерах данные подтверждаются актом испытаний заявляемой питательной среды, прилагаемым к настоящей заявке.

Использование предлагаемого состава обеспечивает следующие преимущества:

- повышение выхода сапонинов;

- ускорение роста культуры.

Источники информации

1. А.С. N 765358, 1980. Питательная среда для выращивания культуры ткани Polyscias Y.R.ET.G. Forst - продуцента сапонинов.

2. Образование соясапонинов в суспензионных культурах клеток солодки. Р. Ж. Биотехнология, N 5, 1991.