аттенурованный холодоадаптированный штамм вируса гриппа, используемый для получения живой интраназальной гриппозной вакцины

Формула изобретения

Аттенуированный холодоадаптированный штамм вируса гриппа ГКВ N 2309, используемый для получения живой интраназальной гриппозной вакцины.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для производства живой гриппозной вакцины и получения производственных штаммов живой гриппозной вакцины для профилактики гриппа у детей и взрослых.

Известно, что живая вакцина против гриппа производится из аттенуированных (ослабленных) штаммов вируса, безвредных для людей и обладающих способностью стимулировать противогриппозный иммунитет, т.е. защищать людей от гриппа.

Учитывая изменчивость возбудителя гриппа, вакцинные штаммы приходится заменять в период появления новых возбудителей гриппа. Ранее для получения вакцинных штаммов отбирали новый эпидемический вирус и проводили ряд пассажей его на развивающихся куриных эмбрионах, которые культивировали при оптимальной (32^oC) температуре. Варианты, полученные через 10, 15, 20 и т.д. пассажей изучали по ряду лабораторных тестов (маркеров) для выявления отличий от исходного эпидемического вируса, а затем проверяли на людях в отношении безвредности и иммуногенности для людей. Вирусы, удовлетворяющие требованиям фармакопейных статей на живую гриппозную вакцину для взрослых или детей использовали в производстве указанных вакцин. Эти штаммы, как правило, не отличались по биологическим свойствам от исходных эпидемических вирусов, что затрудняло отбор аттенуированных вариантов перед их испытанием на людях и обусловливало необходимость повторных проверок вариантов, полученных после проведения ряда дополнительных пассажей в развивающихся куриных эмбрионах.

Известен эпидемический вирус B/СССР/69 [1] прототип, вызвавший эпидемию в 1969 г. Для профилактики гриппа необходимо было создать аттенуированный штамм вируса гриппа, который, наряду с ареактогенностью, имел бы холодоадаптированность (xa маркер).

Получение аттенуированного штамма вируса гриппа B/СССР/60/69 достигается проведением пассажей вируса B/СССР/69 не при оптимальной (32 33^oC), а при температуре, пониженной до 25^oC. Эта процедура позволила изменить свойства вируса, придав ему характер, и сделать его безвредным для взрослых и для детей 1 15 лет, сохранив способность к стимуляции иммунитета.

Для этого эпидемический вирус был подвергнут 60 пассажам в развивающихся куриных эмбрионах при 25^oC.

Предметом изобретения является вариант штамм B/СССР/60/69.

Характеристика штамма

Гемагглютинирующая активность: 1 64 1 256.

Инфекционная активность: 6,0 7,5 lg ЭИД 50/0,2 мл (инфекционных эмбриональных доз).

Xa маркер (маркер холодоадаптированности), т.е. повышенной способности к репродукции в куриных эмбрионах при 25^oC в lg ЭИД 50/0,2 мл, 4,0 lg, т.е. штамм является холодоадаптированным (xa₊).

Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков, т.е. не меняет свойств (маркеров) после 5 пассажей в куриных эмбрионах при оптимальной температуре.

Штамм обладает ареактогенностью и иммуногенностью для взрослых и детей.

Пример 1. Группе из 20 серонегативных детей 3 15 лет был введен интраназально в объеме 0,5 мл вакцинный штамм B/СССР/60/69 с инфекционным титром 7 lg ЭИД 50/0,2 мл. В группе привитых детей не регистрируется ни одной температурной реакции выше 37,5^oC (показатель реактогенности 0).

Процент четырех и более кратных сероконверсий: иммуногенность составила по группе 80%

Пример 2. Была организована интраназальная вакцинация детей 3 6 лет (637 детей) вакциной из штамма B/СССР/60/69. Реактогенность, рассчитанная по числу температурных реакций (температурные реакции более 37,6^oC) составила 1,2% Показатели иммуногенности (т.е. процент прироста антител в крови) превышали 68%

Пример 3. Была организована интраназальная вакцинация 120 взрослых серонегативных добровольцев вакциной на основе вируса B/СССР/60/69. Реактогенность, рассчитанная по числу температурных реакций (температура более 37,6^oC) составила менее 1% что соответствовало требованиям на живую гриппозную вакцину для взрослых. Иммуногенность (т.е. процент четырех и более кратных сероконверсий, прироста антител в крови) была 66,5%