штамм а/17/шангдонг/93/3/5 (h3n2) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых

Формула изобретения

1 Штамм А(17) Шангдонг (93)3/5 (Н3N2) ГИСК N 132 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики эпидемического гриппа среди взрослых людей живой интраназальной гриппозной вакциной из штамма А/17/Шангдонг/93/3/5 (H3N2). Известный штамм утратил антигенную актуальность и вследствие этого не может вызывать защитную реакцию во время эпидемии гриппа А (H3N2).

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение вакцинного штамма актуальной антигенной разновидности на основе эпидемического вируса А/Шангдонг/9/93 (H3N2).

Вакцинный штамм А/17/Шангдонг/93/3/5 (H3N2) получен методом генетической реассортации эпидемического вируса А/Шангдонг/9/93 (H3N2) c холодоадаптированным штаммом /Ленинград/134/17 (H2N2) донором аттенуации, с последующей селекцией в присутствии антисыворотки к вирусу А/Ленинград/134/17/57 (H2N2).

Методом сравнения электрофоретической подвижности геномных фрагментов родительских и реассортантного вакцинного вирусов в полиакриламидном геле установлено, что вакцинный штамм А/17/Шангдонг/93/3/5 (H3N2) унаследовал 6 генов, кодирующих внутренние белки РВ1, РВ2, РА, NP, M, NS, от донора аттенуации и 2 гена, кодирующих поверхностные белки на (гемагглютинин) и NA (нейраминидазу) от эпидемического вируса. Методом рестрикционного анализа ДНК копий генов вакцинного штамма установлено наличие мутаций в генах, кодирующих негликозилированные белки, унаследованных от донора аттенуации А/Ленинград/134/47.

Вакцинный штамм A/17/Шангдонг/93/3/5 (H3N2) является температурочувствительным (разность титров при 32^o и 40^oC 6,0 lg ЭИД 50/0,2 мл) и холодоадаптированным (разность титров при 32^o и 25^oC - 3,5 lg ЭИД 50/0,2 мл).

Таким образом, представленный вакцинный штамм А/17/Шангдонг/93/3/5 (H3N2) характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму: антигенной специфичностью поверхностных белков эпидемического вируса А/Шангдонг/9/93 (H3N2), структурой генома, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, температурочувствительностью и холодоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека, характерной для донора аттенуации.

Морфология штамма полиморфная типичная для вируса гриппа.

Характеристика штамма.

Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 32^oC в течение 48 часов 7,0 lg ЭИД 50/0,2 мл.

Гемагглютинирующая активность 1:256 1:512.

Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).

Штамм ареактогенен при интраназальном введении взрослым людям.

Пример. Группу из 78 людей в возрасте 18 20 лет, вакцинировали интраназально в объеме 0,5 мл реассортантным штаммом А/17/Шангдонг/ 93/3/5 (H3N2) c инфекционной активностью 7,0 lg ЭИД 50/0,2 мл. Группа людей того же возраста из 66 человек получила плацебо (таблица).

Средние реакции с кратковременным повышением температуры свыше 37,6^oC не наблюдались. Показатель реактогенности составил 0% Слабые температурные реакции до 37,5^oC были зарегистрированы в 1 случае среди привитых вакциной и в 5 случаев среди получивших плацебо.

Таким образом, вакцинный штамм А/17/Шангдонг/93/3/5 (H3N2) по показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам фармакопейной статьей ФС 42-298 ВС-89 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения взрослым старше 15 лет.