способ исследования инфицированного биологического материала (варианты)

Формула изобретения

1. Способ исследования инфицированного биологического материала, в том числе крови и ткани, включающий заключение исследуемого материала в контейнер, по меньшей мере часть которого выполнена из полупроницаемой мембраны, и контактирование с тестовым реагентом, отличающийся тем, что контактирование осуществляют путем погружения контейнера в реагент, в качестве реагента используют тестовый или дезинфицирующий раствор, при этом используют мембрану с порогом проницаемости ниже молекулярного веса вирусов и патогенных микроорганизмов.

2. Способ исследования инфицированного биологического материала, в том числе крови и ткани, включающий заключение исследуемого материала в контейнер, по меньшей мере часть которого выполнена из полупроницаемой мембраны, и контактирование с тестовым реагентом, отличающийся тем, что исследованию подвергают вещества, проникающие из контейнера в тестовый реагент, при этом порог проницаемости мембраны выше молекулярного веса тестового реагента.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что используют контейнер с заданным объемом.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что погружают несколько контейнеров в раствор реагента.

5. Способ по п.1, или 2, или 3, отличающийся тем, что контактирование осуществляют путем погружения контейнера в фиксированный объем реагента на заданный период времени.

6. Способ по пп.1 5, отличающийся тем, что в качестве тестового реагента используют такой реагент, который позволяет визуально обнаружить результат контактирования с реагентом.

Описание изобретения к патенту

Изобретение касается исследования инфицированного биологического материала, в том числе, крови и ткани, и может применяться к продуктам, используемым в медицине, садоводстве, промышленности, сельском хозяйстве и других подобных отраслях, и к которым предъявляются требования стерильности.

Под стерильной средой или стерильным материалом в настоящем описании понимается среда или материал, свободный от патогенных микроорганизмов, а также от токсинов и токсических веществ, молекулярный вес которых выше конкретной пороговой точки проницаемости полупроницаемых мембран.

Известен способ исследования инфицированного биологического материала, в том числе, крови и ткани, включающий заключение исследуемого материала в контейнер, по меньшей мере часть которого изготовлена из полупроницаемой мембраны, и контактирование с реагентом (патент ЕР 0, 379,788 А1, А 61 М 39/02, 1990).

Однако известный способ так же, как и другие исследовательские системы, не решает проблему поддержания стерильности аналитического раствора или окружающей среды во время проведения исследований.

Изобретение позволяет значительно улучшить известный способ благодаря тому, что контактирование, согласно изобретению, осуществляют путем погружения контейнера в реагент, причем в качестве реагента используют тестовый или дезинфицирующий раствор, и используют мембрану с порогом проницаемости ниже молекулярного веса вирусов и патогенных микроорганизмов.

Возможно, осуществляют сразу несколько экспериментов посредством погружения в раствор реагента одновременно нескольких контейнеров.

Альтернативно изобретение обеспечивает способ исследования инфицированного биологического материала, в том числе, крови и ткани, предусматривающий заключение исследуемого материала в контейнер, по меньшей мере часть которого выполнена из полупроницаемой мембраны, и контактирование с тестовым реагентом, усовершенствованный посредством того, что исследованию подвергают вещества, проникающие из контейнера в тестовый реагент, при этом порог проницаемости мембраны выше молекулярного веса вирусов и патогенных микроорганизмов. Предпочтительно при этом использовать контейнер с заданным заранее объемом.

В обоих упомянутых вариантах выполнения изобретения контактирование предпочтительно осуществлять погружением контейнера в фиксированный объем реагента на заданный период времени.

Удобно использовать такой реагент, который позволяет обнаружить результат исследования визуально, например, путем изменения окраски.

Использование полупроницаемых мембран различных типов позволяет предотвратить прохождение через них различных контаминантов (загрязняющих компонентов), к которым в данном случае относятся такие контаминанты, как патогенные и непатогенные микроорганизмы, микробные споры, цисты и т.д. включая специфические типы клеток и тканевых веществ.

Принцип, на котором основано настоящее изобретение, хорошо демонстрирует следующий эксперимент:

В градуированный цилиндр помещают 10 мл фенолового красного раствора, который исследуют спектрометром при длине волн 550 нм. Затем 10 мл воды помещают в диализную трубку (то есть в трубку из полупроницаемого материала) длиной около 15 см (6 дюймов) и диаметром 1,6 см. Затем эту трубку запаивают и погружают в градуированный цилиндр с феноловым красным.

Через определенные промежутки времени из градуированного цилиндра и из трубки берут образцы, и после соответствующего разведения определяют спектральное поглощение при длине волн 550 нм. Полученные результаты приведены в нижеследующей таблице.

Молекулярный вес фенолового красного составляет 354, тогда как пороговый молекулярный вес веществ, способных пройти через полупроницаемую диализную трубку, составляет 12000. Таким образом, эксперимент показывает, что вещества с низким молекулярным весом легко проникают в запаянную диализную трубку, причем равновесное состояние растворов вне трубки и внутри нее достигается уже через 6 часов. Результаты ранее проведенных исследований, описанных в заявке РСТ GB/01119, уже доказали, что бактерии, вирусы и прочие микроорганизмы не могут проникать через материал упомянутой трубки. Следовательно, субстанции низкого молекулярного веса можно асептическим образом вводить в раствор, содержащийся внутри диализной трубки, содержащей, например, патогенные микроорганизмы, без нарушения ее герметичности и соответственно без загрязнения окружающей среды этими микроорганизмами.

Таким образом можно также обеспечить защиту для операторов, которые занимаются тестированием и идентификацией потенциально токсичных материалов.

Безопасность обращения с потенциально патогенными биологическими тканями и жидкостями для операторов можно повысить за счет использования нижеописанной методики по изобретению. Для этого, чтобы гарантировать надежную защиту персонала, жидкие или тканевые образцы потенциально патогенного материала собирают в контейнер, по меньшей мере часть которого выполнена из мембраны, имеющей соответствующий порог проницаемости, выбранный с учетом потенциальной патогенности образца.

Такой контейнер может иметь фиксированный (заранее заданный) объем, позволяющий провести количественный анализ. Интересующие оператора субстанции, являющиеся объектом исследования, но не являющиеся микроорганизмами, будут иметь молекулярный вес ниже выбранной пороговой точки мембраны и потому смогут проходить через мембрану. Участвующие в анализе реагенты могут иметь такую же характеристику и также могут проходить через мембрану.

Анализ проводят, например, по такой схеме.

Контейнер помещают в непосредственном контакте с желаемым реагентом с возможностью непосредственно (визуально) считывать результат. Например, оператор может исследовать фекалии на наличие в них крови, которые помещены в закрытый контейнер. Контактирование мембраны контейнера с пробным реагентом позволяет этому реагенту проходить через мембрану в контейнер и вступать в реакцию с находящейся в контейнере скрытой кровью, в результате чего оператор получит индикацию о присутствии или отсутствии крови в фекалиях. Эта процедура надежно защищает оператора от любых патогенных микроорганизмов, которые могут содержаться в фекальном материале и которые неспособны проникнуть через мембрану.

Эта методика обеспечивает и другое преимущество, заключающееся в том, что в общий раствор с реагентом можно помещать сразу несколько тестируемых контейнеров без опасения перекрестного заражения образцов.

С другой стороны, контейнер можно погружать в жидкий реагент известного объема, и по истечении заданного периода времени, за который субстанции рассеиваются в жидкости, получают результат анализа, совершенно безопасного для оператора. К исследованиям подобного типа относятся в первую очередь анализы крови или мочи на присутствие в них электролитов, например, калия или натрия. Таким же образом можно определять содержание сахара в моче качественно или количественно.

Во многих случаях можно обеспечить визуальную оценку результатов исследования, особенно когда пробный реагент оказывает свое действие на внешней стороне мембраны.

Результат исследования может быть получен посредством рассеивания испытуемых субстанций в упаковке, в герметичной камере или в контейнере, имеющих прозрачную или полупрозрачную секцию для визуального наблюдения, например, изменения цвета.