ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ
НОВЫЕ ПАТЕНТЫ, ЗАЯВКИ НА ПАТЕНТ
БИБЛИОТЕКА ПАТЕНТОВ НА ИЗОБРЕТЕНИЯ

способ приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы

Классы МПК:A61K9/08 растворы
A61K31/728 гиалуроновая кислота
A61K38/04 пептиды, имеющие до 20 аминокислот в полностью определенной последовательности; их производные
A61P27/02 офтальмологические агенты
Автор(ы):, , ,
Патентообладатель(и):Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный университет" (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2013-08-20
публикация патента:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой способ приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы, включающий растворение исходного терапевтического компонента с избыточной вязкостью в фосфатном буфере, фильтрацию и стерилизацию до получения требуемого значения вязкости, отличающийся тем, что в качестве исходного терапевтического компонента используют 3% раствора нативной гиалуроновой кислоты, после растворения вводят 1% пептидный комплекс, состоящий из аминокислоты десмозин и следующих короткоцепочных пептидов-олигопептидов: GlyTrpIle; IleAspIle; PheArgPro; GlnHisHis; ProHisTyr; ThrTrpTrp; LysPheThr; LysArgMet; PheCysMet; IleIle; AspLysLys; TrpPro; GluThr, а стерилизацию проводят ионизирующим излучением в диапазоне радиационного излучения от 78×107 Мрад до 11×108 Мрад. Изобретение обеспечивает восстановление биохимических процессов в эндотелиальном слое роговицы при постоянном увлажнении роговицы глаза и повышение биосовместимости, что способствует быстрой реабилитации после травм и/или оперативного лечения. 2 табл.

Изобретение относится к химии природных соединений, в частности к способу приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы, и может найти свое применение в производстве вискоэластиков для офтальмологии.

Известна фармацевтическая композиция на основе гликозаминогликанов, в частности глазные капли, действующими веществами которых являются гликозоаминогликаны в количестве 0.1 мас.% в физиологическом растворе, выделенные из плаценты человека (патент РФ 2216331, МКИ7 A61K 31/726, A61K 9/08, A61F 9/00, A61P 27/00). Данные гликозоаминогликаны представляют собой смесь, состоящую из гиалуроновой кислоты (46-57%) и гепарина с гепарансульфатом (2-7%).

Известен протектор эндотелия роговицы «Визитон-1», содержащий сульфатированные гликозоаминогликаны, производное целлюлозы, буферные соли и воду (патент РФ 2114587, МКИ6 A61F 9/00, A61K 31/715), предназначенный для защиты эндотелия роговицы от повреждения при экстракции катаракты с имплантацией ИОЛ.

Известен препарат "Глекомен", содержащий сульфатированные гликозоаминогликаны и ионы меди (патент РФ № 215158 от 28.10.1999 г.), предназначенный для активации пролиферации эндотелия роговицы.

Одним из лучших вискоэластиков является раствор натрия гиалуроната в сбалансированном солевом буфере. В мировой практике широко применяются следующие вискоэластичные протекторы на основе натрия гиалуроната: "Vislube" (Chemedica AG, Германия); "Amvisc", "Amvisc plus" (Chiron vision, Франция); "Oculocrom" (Croma Pharma GmbH, Австрия); "Healon" (Pharmacia & Upjohn, Швеция).

Однако все перечисленные вискоэластики не включают в свой состав вещества, способные нормализовать биохимические процессы в стекловидном теле, кроме того, они мало доступны из-за высокой стоимости.

Известна фармацевтическая композиция, содержащая водорастворимую смесь гликозоаминогликанов, выделенных из роговицы глаз крупного рогатого скота, в которых гликозоаминогликаны взяты в количестве 0,1-1,0 мас.%, остальное - физиологический раствор (патент РФ 2062079, МКИ6 A61F 9/06).

Недостатком этой фармацевтической композиции на основе гликозоаминогликанов является то, что она имеет ограниченный срок хранения, требует определенной осторожности при хранении и транспортировке.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому техническому решению является способ приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы (Патент RU № 2234310, опубл. 20.08.2004). Фармацевтическую композицию готовят: 2,0 г натриевой соли гиалуроновой кислоты (источник получения - бактериальная ферментация, фирма "Sigma-Aldrich", США) растворяют в 98,0 мл фосфатного буферного раствора с pH 7,0-7,4. Растворение ведется при температуре 20°C в течение 48 часов. В процессе растворения раствор подвергают двукратному перемешиванию в течение 8 часов. Получают раствор с вязкостью 290 Па/с. Раствор подогревают на водяной бане до 70°C, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 2,0 мкм, расфасовывают в стеклянные шприцы по 1 мл и автоклавируют при 120°C в течение 8 минут. Получают стерильный раствор с вязкостью 85 Па/с.

Недостатком такого способа приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы является то, что не обеспечивают нормализацию биохимических процессов в стекловидном теле.

Технический результат изобретения - восстановление биохимических процессов в эндотелиальном слое роговицы при постоянном увлажнении роговицы глаза и повышение биосовместимости, что способствует быстрой реабилитации после травм и/или оперативного лечения.

Задача решается тем, что в способе приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы, включающем растворение исходного терапевтического компонента с избыточной вязкостью в фосфатном буфере, фильтрацию и стерилизацию до получения требуемого значения вязкости, в качестве исходного терапевтического компонента используют 3% раствора нативной гиалуроновой кислоты, после растворения вводят 1% пептидного комплекса, состоящий из короткоцепочных пептидов - олигопептидов, а стерилизацию проводят ионизирующим излучением в диапазоне радиационного излучения от 78×10 7 до 11×108 Мрад.

Для деструкции гиалуроновой кислоты применяли способ приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы, патент № 2535137 -излучение в диапазоне от 78×107 до 11×10 8 Мрад, что позволило получить гиалуроновую кислоту с молекулярной массой (Mw) 40-80 кДа. При этом воздействие на водный раствор гиалуроновой кислоты способ приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы, патент № 2535137 -излучения до 78×107 Мрад не позволяет получить низкомолекулярную гиалуроновую кислоту, а воздействие выше 11×108 Мрад вызывает полное разрушение ГК, что и в том, и в другом случае ведет к отсутствию лечебного эффекта, так как повышенная вязкость протектора может вызывать катаракту, а полное разрушение ГК не дает лечебного эффекта.

Способ осуществляют следующим образом. Готовят 3% раствор нативной гиалуроновой кислоты. Гиалуроновую кислоту разводят в 100 мл фосфатного буферного раствора с pH 7,0-7,4. Получают раствор с вязкостью 300 Па/с. Добавляют 1% пептидного комплекса, состоящего из короткоцепочных пептидов - олигопептидов, состав которых представлен в таблице 1.

Таблица 1
Исследуемые параметрыХим. формула МассаДельта массы в нанопотоковом режиме Масса в отн.ед.
GlyTrpIleC19H26N4O4 374.19541-2.3310.692
IleAspIleC16H29N3O6 359.2056412.97 8.674
PheArgPro C20H30N6O4418.23285 -0.299.024
GlnHisHisC17H24N8O5 420.18697-5.7417.732
AlaTrpLysC20H29N5O4 403.22195-5.76 8.934
ProHisTyr C20H25N5O5415.18557 -11.1014.407
ThrTrpTrpC26H29N5O5 491.21687-12.849.460
LysPheThrC19H30N4O5 394.22162-7.25 8.854
LysArgMet C17H35N7O4S433.24712 10.739.102
PheCysMetC17H25N3O4S2 399.128654.1911.108
IleIleC12H24N2O3 244.178698.67 11.038
AspLysLys C16H31N5O6389.22743 16.598.863
TrpProC16H19N3O3301.14264 -18.3810.672
GluThrC9H16N2O6 248.100843.47 5.500
Desmosine C24H40N5O8526.28769 -15.379.523

Как видно из таблицы 1, пептидные комплексы имеют различный аминокислотный состав с варьирующей молекулярной массой 244-459 кДа. В обнаруженных пептидах превалируют алифатические (лейцин, изолейцин, аланин, глицин) и полярные незаряженные аминокислотные остатки: треонин, пролин, гистидин, серина, также полярные заряженные аминокислотные остатки: аргинин, глутамин, аспарагин, лизин, аргинин. Кроме того, присутствуют димеры изолейцинов, и полимерные трипептиды, в том числе пептиды, содержащие ароматические аминокислотные остатки (триптофан) и полярные незаряженные аминокислотные остатки.

Важно, что в пептидной фракции присутствует десмозин (аминокислота, производная лизина). Благодаря своей разветвленной структуре, которая имеет четыре аминокислотные группы, одна молекула десмозина может входить одновременно в четыре пептидные цепи. Благодаря этому дисахаридные остатки деструктурированной гиалуроновой кислоты стабилизируются и не образуют вновь макромолекулярные комплексы в процессе стерилизации ионизирующим излучением.

Далее раствор подогревают на водяной бане до 70°C, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 2,0 мкм, расфасовывают в стеклянные шприцы по 1 мл и стерилизуют радиационным методом по ГОСТ Р ISO 11137 в центре радиационной медицины (г. Москва) в диапазоне гамма излучения от 78×107 до 11×10 8 Мрад. Стерилизацию проводят ионизирующим излучением, вследствие чего вязкость раствора снижается, происходит деструкция гиалуроновой кислоты в свою очередь входящие в состав препарата пептиды стабилизируют гиалуроновую кислоту. Получают стерильный раствор с вязкостью 90 Па/с.

Стерилизацию ионизирующим излучением проводят в диапазоне радиационного излучения от 78×10 7 до 11×108 Мрад, т.к. при этом снижается молекулярная масса и вязкость раствора, что отражено в таблице 2, где показана зависимость параметров сред немассовой молекулярной массы (Mw) от поглощенной дозы радиационного излучения.

Таблица 2
Доза, МрадMw, кДа Статистическая вязкость водного раствора ГК, дл/г
01800 21,0
78×107 1808,5
11×108150 5,2
18×108 901,3

Для изучения влияния созданного препарата, содержащего пептидный комплекс, на роговицу и другие структуры переднего отрезка глаза, на базе вивария Оренбургского государственного университета проведены экспериментальные исследования на 12 кроликах (24 глаза) породы Шиншилла с использованием ранее разработанных стандартных токсико-гигиенических методов изучения полимерных материалов для внутриглазного использования. Для этого все кролики были поделены на 2 группы: контрольную группу (6 кроликов), использующую препарат по прототипу, и вторую группу из 6-ти кроликов, которым применяли препарат вискоэластичный протектор эндотелия роговицы. Для контрольной группы животных применяли вископротектор "Вискомет", представляющий собой раствор гидроксипропилметилцеллюлозы (производитель - Юнимед Технолоджис Лтд., Индия). В переднюю камеру глаз вводили препараты в количестве 0,2 мл.

Были поставлены 3 серии эксперимента. Исследование выполнено совместно с д.м.н., профессором Нотовой С.В.

1. Биопроба - введение препарата в переднюю камеру глаза кролика с последующей биомикроскопией.

Исследования проводились на 12 животных. Биомикроскопия проводилась через 24 часа после введения препаратов. Воспалительной реакции или каких-либо признаков раздражения не наблюдалось. Конъюктива оставалась спокойной, без инъекции сосудов. Роговица была прозрачной, блестящей, зеркальной. Влага передней камеры прозрачна. Радужка рельефна. Имплантированный материал интактен. Отека эпителия роговицы, преципитации и гиперемии не наблюдалось. Разницы между опытом и контролем не отмечено.

2. Для исследования эндотелиального слоя роговицы применяли контактный зеркальный эндотелиальный микроскоп "TOPCON SP-3000P". Исследования эндотелия роговицы кроликов проводились через 3, 7, 14, и 30 дней после введения препаратов.

Экспериментальные исследования эндотелиального пласта роговицы животных свидетельствовали об отсутствии качественных и количественных изменений эндотелиальных клеток и об идентичности микроскопической картины на опытных и контрольных глазах кроликов. Количество эндотелиальных клеток составило в среднем 3035±20 кл/мм, что соответствует среднестатистической норме.

3. Патогистологическое изучение глаз опытных и контрольных кроликов в сроки 3 и 30 дней после введения "Вискомет" и разработанного препарата вискоэластичного протектора эндотелия роговицы в переднюю камеру показало, что во всех глазах роговица оставалась без изменений, эпителий ее сохранился на всем протяжении, параллельность роговичных коллагеновых пластин и клеточных элементов не нарушена. Десцеметова оболочка хорошо выражена на всем протяжении, слой эндотелиальных клеток без патологических изменений.

Таким образом, по сравнению с прототипом, заявляемый способ позволяет получить эффективный биосовместимый стерильный вискоэластичный протектор с заданной вязкостью. Изобретение обеспечивает нормализацию биохимических процессов в стеловидном теле (за счет входящих в состав пептидов), предупреждает тяжелые осложнения, быструю реабилитацию после операций (за счет содержания деструктурированной гиалуроновой кислоты), препарат способен длительное время пребывать в глазу, а при необходимости легко вымывается, не токсичен.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ приготовления вискоэластичного протектора эндотелия роговицы, включающий растворение исходного терапевтического компонента с избыточной вязкостью в фосфатном буфере, фильтрацию и стерилизацию до получения требуемого значения вязкости, отличающийся тем, что в качестве исходного терапевтического компонента используют 3% раствора нативной гиалуроновой кислоты, после растворения вводят 1% пептидный комплекс, состоящий из аминокислоты десмозин и следующих короткоцепочных пептидов-олигопептидов: GlyTrpIle; IleAspIle; PheArgPro; GlnHisHis; ProHisTyr; ThrTrpTrp; LysPheThr; LysArgMet; PheCysMet; IleIle; AspLysLys; TrpPro; GluThr, а стерилизацию проводят ионизирующем излучением в диапазоне радиационного излучения от 78×107 Мрад до 11×108 Мрад.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2535137

patent-2535137.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K9/08 растворы

Патенты РФ в классе A61K9/08:
стабильные составы бортезомиба -  патент 2529800 (27.09.2014)
офтальмологический ирригационный раствор -  патент 2529787 (27.09.2014)
вискоэластичный раствор для контрастирования задней гиалоидной мембраны -  патент 2527767 (10.09.2014)
способ получения комплексного иммунометаболического препарата с антиинфекционной активностью -  патент 2527329 (27.08.2014)
лекарственные средства, содержащие фторхинолоны -  патент 2527327 (27.08.2014)
способ получения комплексного антибактериального иммуномодулирующего препарата -  патент 2526184 (20.08.2014)
биоматериал и средство с биоматериалом, стимулирующие противоопухолевую активность -  патент 2526160 (20.08.2014)
оздоровительная композиция для введения в форме капель и способ ее получения -  патент 2524656 (27.07.2014)
фармацевтическая композиция в форме раствора для инъекций и способ ее получения -  патент 2524651 (27.07.2014)
фармацевтическая композиция лигандов рецепторов секретагогов гормона роста -  патент 2523566 (20.07.2014)

Класс A61K31/728 гиалуроновая кислота

Патенты РФ в классе A61K31/728:
вискоэластичный раствор для контрастирования задней гиалоидной мембраны -  патент 2527767 (10.09.2014)
низкомолекулярное полисульфатированное производное гиалуроновой кислоты и содержащее его лекарственное средство -  патент 2519781 (20.06.2014)
композиция для лечения цистита -  патент 2519010 (10.06.2014)
композиция для костной пластики (варианты) -  патент 2516921 (20.05.2014)
раствор для получения покрытия на имплантатах и биоматериалах -  патент 2509554 (20.03.2014)
средство для стимуляции роста волос -  патент 2505301 (27.01.2014)
способ комплексной переработки рыбного сырья для получения гиалуроновой кислоты и коллагена -  патент 2501812 (20.12.2013)
новые фармацевтические композиции -  патент 2501566 (20.12.2013)
глазные композиции на основе полисахарида семян тамаринда и гиалуроновой кислоты -  патент 2493855 (27.09.2013)
стерилизуемая путем нагрева инъецируемая композиция, содержащая гиалуроновую кислоту или одну из ее солей, полиолы и лидокаин -  патент 2493815 (27.09.2013)

Класс A61K38/04 пептиды, имеющие до 20 аминокислот в полностью определенной последовательности; их производные

Патенты РФ в классе A61K38/04:
фармацевтическое средство, содержащее эпитопные пептиды hig2 и urlc10, для лечения рака, способы и средства для индукции антигенпрезентирующей клетки и цитотоксического т-лимфоцита (цтл), антигенпрезентирующая клетка и цтл, полученные таким способом, способ и средство индукции иммунного противоопухолевого ответа -  патент 2529373 (27.09.2014)
способ профилактики и лечения химиолучевых стоматитов при химиолучевой терапии рака орофарингеальной области -  патент 2519164 (10.06.2014)
композиции и способы лечения расстройств почки -  патент 2519124 (10.06.2014)
способ стимулирования регенерации нерва с помощью наноструктурированного матрикса и генетических конструкций -  патент 2517117 (27.05.2014)
новые пептиды для лечения и профилактики иммунопатологических заболеваний, включая лечение и профилактику инфекции посредством модулирования врожденного иммунитета -  патент 2507213 (20.02.2014)
пептиды со способностью связываться со скурфином и их применение -  патент 2502741 (27.12.2013)
композиция для улучшения функции мозга и способ улучшения функции мозга -  патент 2501808 (20.12.2013)
иммуномодуляторные соединения и лечение заболеваний, связанных со сверхпродукцией воспалительных цитокинов -  патент 2498813 (20.11.2013)
композиции для восстановления кожи, содержащие активаторы циркадных генов и синергическую комбинацию активаторов гена sirt1 -  патент 2494756 (10.10.2013)
способы и фармакологические композиции для заживления ран -  патент 2491952 (10.09.2013)

Класс A61P27/02 офтальмологические агенты

Патенты РФ в классе A61P27/02:
глазные капли на основе композиции фармацевтически приемлемой аддитивной соли кислоты и метилэтилпиридинола, содержащие композицию витаминов группы в -  патент 2528912 (20.09.2014)
способ комбинированного лечения ретиноваскулярного макулярного отека -  патент 2527360 (27.08.2014)
фармацевтическая антиангиогенная композиция для лечения заболеваний глаз -  патент 2526825 (27.08.2014)
способ лечения монокулярного оптического неврита при рассеянном склерозе -  патент 2523146 (20.07.2014)
профилактика и лечение патологических состояний глаз, вызванных комплементом -  патент 2522976 (20.07.2014)
способ лечения кератоконуса у пациентов с тонкой роговицей -  патент 2522386 (10.07.2014)
способ лечения трофических эрозий роговицы -  патент 2522381 (10.07.2014)
способ лечения атрофической возрастной макулярной дегенерации -  патент 2521338 (27.06.2014)
стабилизированные фармацевтические субмикронные суспензии и способы их получения -  патент 2521258 (27.06.2014)
офтальмологическое фармацевтические композиции для неоангиогенных патологий глаза -  патент 2519739 (20.06.2014)


Наверх