Поиск патентов
ПАТЕНТНЫЙ ПОИСК В РФ

способ дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи по относительному объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток

Классы МПК:G01N33/483 физический анализ биологических материалов
G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого
Автор(ы):, ,
Патентообладатель(и):ГАРИФУЛЛИНА ЭЛЬМИРА ФАНИСОВНА (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2013-08-14
публикация патента:

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи. Для этого проводят гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата, дополнительные морфометрические исследования базальных кератиноцитов в гистологических препаратах биоптатов пораженной кожи. При этом при схожей гистологической картине, описываемой при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи как акантоз, гиперкератоз, паракератоз, отек и расширение сосудов дермы, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы, одинаковом иммунофенотипе клеток инфильтрата при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи, представленном CD2+, CD3+, CD4+, CD5+, CD43+, CD45RO+ лимфоцитами, проводят дополнительно морфометрические исследования всех клеток эпидермиса. Далее рассчитывают относительный объем эпидермиса и митотический индекс эпидермальных клеток. При увеличении относительного объема эпидермиса в 2,2 и более раза по сравнению с нормальной кожей и увеличении митотического индекса эпидермальных клеток в 2,7 и более раза по сравнению с нормальной кожей диагностируют эритродермическую форму грибовидного микоза, а при неизмененных по сравнению с нормальной кожей относительном объеме эпидермиса и митотическом индексе эпидермальных клеток диагностируют синдром псевдолимфомы кожи. Изобретение обеспечивает ускорение и точность дифференциальной диагностики указанных видов лимфом кожи, что позволяет выбрать тактику раннего адекватного рационального лечения пациента. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к дерматологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи.

Грибовидный микоз относят к T-клеточному типу лимфом кожи (Robert Schwartz Skin cancer: recognition and management // 2008 by Blackwell Publishing - first published 2008 - P.242). Одним из вариантов разновидности грибовидного микоза является эритродермическая форма грибовидного микоза, которую трудно дифференцировать от синдрома псевдолимфомы кожи, клинически также проявляющегося эритродермией, морфологически оба заболевания на ранних стадиях имеют черты неспецифического хронического воспаления. Значительная сложность дифференциальной диагностики и принципиальные различия в подходах к лечению выдвигают на первый план проблему верификации диагноза при эритродермической форме грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы.

Известен способ гистологической диагностики различных клинических типов грибовидного микоза путем микроскопического исследования биоптатов пораженной кожи [Ламоткин И.А., Бурлаченко О.В., Тарасенко Ю.Г. Результаты гистологических исследований биоптатов кожи различных клинических типов грибовидного микоза // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2006, № 1, стр.4-6]. Авторы проводят гистологическую диагностику различных форм грибовидного микоза на светооптическом уровне, основываясь на следующих основных морфологических критериях: 1) изменение структуры эпидермиса в виде наличия акантоза, гиперкератоза в первой и второй стадиях и атрофии эпидермиса в опухолевой стадии; 2) изменение в дерме, где на всех стадиях болезни авторы выявляли диффузный инфильтрат сосочкового слоя, представленный как моно-, так и полиморфноклеточным пролифератом; 3) наличие в дерме полиморфноклеточного инфильтрата, включающего атипичные лимфоциты; наличие диффузного или очагового (абсцессы Потрие) проникновения лимфоцитов в эпидермис. Данный способ визуально учитывает морфологические изменения, происходящие в коже при различных стадиях грибовидного микоза, но не проводит их количественной оценки, не включает иммунофенотипирования клеток инфильтрата, не позволяет объективизировать и дифференцировать наблюдаемые в коже изменения, не позволяет провести дифференциальную диагностику эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы на ранних стадиях заболевания, в отличие от предлагаемого способа.

Известен способ клинико-лабораторной диагностики лимфом от псевдолимфом кожи, основанный на иммунофенотипировании клеток инфильтрата [Клинико-лабораторная диагностика лимфом кожи. Медицинская технология № ФС-2006/299-У от 26 октября 2006 года. ФГУ «Уральский научно-исследовательский институт дерматовенерологии и иммунологии» г. Екатеринбург // «Вестник дерматологии и венерологии». - 2009. № 4. С.27-34]. Авторы разделяют обследование пациентов на два этапа, на первом этапе предлагают провести изучение анамнеза, особенностей клинических проявлений, общеклинические методы исследования. Результатом первого этапа обследования, по заключению авторов, является предварительный диагноз доброкачественного дерматоза, псевдолимфомы, первично злокачественной лимфомы кожи. На втором этапе авторами проводится патоморфологическое исследование биоптата пораженной кожи, лимфоузла, костного мозга в светооптическом микроскопе, иммунофенотипирование клеток инфильтрата с использованием моноклональных антител: CD 45(LCA), CD45RO, CD45RA, CD3, CD8, CD20, CD30(ki1), ki 67 (фирмы Becton Dickinson), после чего устанавливается окончательный нозологический диагноз псевдолимфомы или злокачественной лимфомы кожи. Однако следует учитывать, что клетки лимфоидного инфильтрата проходят дифференцировку в эпидермисе, меняя при этом свой иммунофенотип как при лимфомах, так и при псевдолимфомах кожи [Burg G., Zwingers T., Staegemeiz E. Et al. Intrarater variabilities in the evolution of cutaneous lymphoma project group // Derm. http://Clin.-1994.-Vol.12-p 311-314]. Следовательно, иммунофенотипирование клеток инфильтрата позволяет оценить природу клеток T и B линий, позволяет диагностировать лимфомы кожи на поздних стадиях заболевания, когда сформировался иммунофенотип клеток инфильтрата, но этот способ не позволяет решить проблему ранней дифференциальной диагностики начальных клинических проявлений эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи, количественно не учитывает отличительные морфологические изменения, проходящие в коже, в частности в эпидермисе, при этих заболеваниях, в отличие от предлагаемого способа. Наши контраргументы согласуются с данными других авторов [Молочков В.А., Лезвинская Е.М., Молочков А.В. Псевдолимфомы-прелимфомы-лимфомы кожи // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2004. № 5. С.4-7].

Наиболее близким аналогом изобретения является способ дифференциальной диагностики лимфопролиферативных заболеваний кожи по морфометрическому профилю базальных кератиноцитов, включающий гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата, и при схожей гистологической картине при лимфомах и псевдолимфомах, описываемой как выраженный акантоз, гиперкератоз, наличие в дерме расширения сосудов, переваскулярных лимфогистиоцитарных инфильтратов с проникновением лимфоцитов в эпидермис, а также одинаковом имунофенотипе клеток инфильтрата, а именно CD3 +, CD4+, CD43+, CD45RQ+ , дополнительно проводят морфометрию базальных кератиноцитов в гистологических препаратах биоптатов пораженной кожи, измеряют их площадь и ядерно-цитоплазматическое соотношение и при увеличении площади базальных кератиноцитов в 1,5 и более раза по сравнению с нормой, ядерно-цитоплазматического соотношения базальных кератиноцитов в 2 и более раза по сравнению с нормой диагностируют лимфомы кожи, а при неизмененных морфометрических показателях базальных кератиноцитов - псевдолимфомы кожи» [патент РФ № 2476879 от 27.02.2013 г., авторы: Гарифуллина Э.Ф. (Ru), Хисматуллина З.Р. (Ru), Тухватуллина З.Г (Uz)].

В прототипе авторы проводят дифференциальную диагностику лимфом кожи и псевдолимфом кожи, не уточняя критериальные оценки каких-либо видов лимфом. При этом из уровня техники (Burg G. Atlas of cancer of the skin, - New York. - 2006. - 368 p.) известно о существовании различных видов лимфом и псевдолимфом кожи.

Задачей изобретения является разработка способа дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи.

Технический результат - повышение точности дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи за счет объективизации, количественного учета наблюдаемых в коже изменений при этих заболеваниях, путем включения в обследование пациентов не только гистологических, иммунофенотипических, но и морфометрических исследований всех клеток эпидермиса, для обоснования выбора тактики раннего адекватного рационального лечения.

Предлагаемый способ дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи осуществляется следующим образом. Проводят гистологические исследования биоптатов пораженной кожи, иммунофенотипирование клеток инфильтрата по общепринятым методикам [Цветкова Г.М., Мордовцев В.В. Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи. - Москва. Изд-во Медицина. - 1996. - 263 с.; Кунгуров Н.В., Кохан М.М., Сазонов С.В. и др. Алгоритмы клинико-лабораторной диагностики злокачественных лимфом кожи // Клиническая дерматология и венерология. - 2002. № 6. С.16-19]. Для проведения световой микроскопии биоптаты кожи фиксируют в 10% растворе нейтрального формалина (pH 7,3). После обезвоживания в спиртах восходящей концентрации биоптаты кожи заливают в парафиновые блоки, срезы толщиной 4 мкм, полученные с блоков, окрашивают гематоксилином и эозином, просматривают в световом микроскопе, описывают морфологические изменения. Для иммуногистохимического исследования повторные срезы с парафиновых блоков предварительно обрабатывают на водяной бане, высушивают и наносят антитела [Izban K.F., Hsi E.D., Ackan S. Immunohistochemical analysis of mycosis fungoides on paraffin - embedded tissue sections. // Mod. Pathol. - 2008. - V.11. p.978-982]. В работе используют панель моноклональных антител CD2, CD3, CD4, CD5, CD45RO, CD43, набора «Fast immune», фирмы «Becton Dickinson», США. Результаты иммуногистохимических реакций визуализируют с помощью системы "Enviston (Dako)". Полученные результаты интерпретируют согласно классификации ВОЗ/EORTC [Молочков В.А., Ковригина A.M., Овсянникова Г.В. Т-клеточные лимфомы кожи: современные подходы к клинико-морфологической диагностике (согласно классификации ВОЗ/EORTC) и лечению // Росс. журн. кож. вен. болезней. - 2009. - № 2. - С.4-15.; Белоусова, И.Э., Казаков Д.В., Криволапое Ю.А. Современные подходы к диагностике и лечению первичных лимфом кожи на основе новой ВОЗ-EORTC классификации B-клеточных лимфом кожи. // Архив патологии. - 2007. - № 6 - С.48-50]. Микрофотографирование проводят с помощью камеры «Leica DFS 420» и обрабатывают с помощью пакета компьютерного анализа изображения Leica Qwin standart v3.1.0. Статистическую обработку данных проводят с помощью Statistica 7.0 с применением методов непараметрической статистики. При схожей гистологической картине, описываемой при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы как акантоз, гиперкератоз, паракератоз, в дерме отек, расширение сосудов, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы, одинаковом иммунофенотипе клеток инфильтрата при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы, представленном CD2+, CD3+, CD4+, CD5+ , CD43+, CD45RO+ лимфоцитами, дополнительно проводят морфометрические исследования клеток эпидермиса в гистологических препаратах биоптатов пораженной кожи с помощью компьютера, совмещенного со световым микроскопом «Leica» фирмы «Leitz Biomed» (Германия), используя окуляр-микрометр и окулярную сетку на 100 точек пересечения [Автандилов Г.Г. Компьютерная морфометрия. - Москва. Изд-во Медицина. - 1999. 320 с.]. Определяют процентное соотношение эпидермиса и дермы в общем объеме микропрепарата, рассчитывают относительный объем эпидермиса; считают митотический индекс эпидермальных клеток путем подсчета количества митозов в эпидермисе, приходящихся на 100 эпидермальных клеток. При увеличении относительного объема эпидермиса в 2,2 и более раза по сравнению с нормальной кожей и увеличении митотического индекса эпидермальных клеток в 2,7 и более раза по сравнению с нормальной кожей диагностируют эритродермическую форму грибовидного микоза. При неизмененном по сравнению с нормой относительном объеме эпидермиса и неизмененном по сравнению с нормой митотическом индексе эпидермальных клеток диагностируют синдром псевдолимфомы кожи (табл.1). Полученные результаты можно объяснить повышением по сравнению с нормой пролиферативной активности эпидермальных клеток при эритродермической форме грибовидного микоза и, напротив, интактностью эпидермиса при синдроме псевдолимфомы.

Таким образом, в предлагаемом способе проводится конкретная дифференциальная морфометрическая диагностика одного из вариантов T-клеточных лимфом кожи - эритродермической формы грибовидного микоза и одного из вариантов разнообразной группы псевдолимфом кожи - синдрома псевдолимфомы кожи. Для этого дополнительно используют при иммунофенотипировании клеток инфильтрата CD2 +, CD5+ моноклональные антитела. В прототипе проводят морфометрические исследования только базальных кератиноцитов, измеряя их площадь и ядерно-цитоплазматическое соотношение. Тогда как в предлагаемом способе дополнительно рассчитывают относительный объем эпидермиса, включая измерения всех клеток эпидермиса, и дополнительно рассчитывают митотический индекс всех клеток эпидермиса.

В доступной научно-медицинской и патентной литературе не было обнаружено сведений об использовании морфометрических исследований клеток эпидермиса с расчетом относительного объема эпидермиса и подсчетом митотического индекса эпидермальных клеток для морфометрической дифференциальной диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «новизна».

Исследованиями авторов была впервые доказана возможность дифференциальной диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи путем морфометрических исследований эпидермальных клеток с расчетом относительного объема эпидермиса и подсчетом митотического индекса эпидермальных клеток. Таким образом, заявляемое изобретение соответствует критерию «изобретательский уровень».

Предлагаемое изобретение поясняется следующими примерами.

Пример № 1. Больной К., 60 лет, водитель горюче-смазочных материалов, поступил в клинику ГАУЗ Республиканского кожно-венерологического диспансера № 1 (ГАУЗ РКВД № 1) на стационарное лечение с жалобами на высыпания по всему кожному покрову, нестерпимый зуд. Считал себя больным в течение 10 лет. Первые высыпания появились на коже рук, был диагностирован контактный дерматит от горюче-смазочных материалов. Наружная мазевая терапия приводила к временному регрессу заболевания. После переохлаждения, перенесенного ОРВИ высыпания стали распространяться по всему кожному покрову, сливаясь, образовали сплошную эритродермию. Неоднократно обращался в КВД по месту жительства, где назначалась десенсибилизирующая, симптоматическая терапия, не приводящая к клиническому улучшению. Для уточнения диагноза направлен в ГАУЗ РКВД № 1 с направительными диагнозами: эритродермическая форма грибовидного микоза? синдром псевдолимфомы кожи? При поступлении кожно-патологический процесс носил распространенный характер, в виде пятен розово-красной окраски, различных размеров и форм, сливающихся в сплошной очаг гиперемии, инфильтрации, лихенификации. Кожные покровы на нижней трети живота и ногах были инфильтрированы, утолщены, застойно гиперемированны, с буровато-синюшным оттенком. Поверхность кожного покрова была горячая на ощупь, с мелко пластинчатым шелушением. Отмечались ладонно-подошвенный гиперкератоз, диффузная алопеция. Периферические лимфоузлы были увеличены до величины крупной фасоли, неспаяны с окружающими тканями. Гистологически в биоптатах пораженной кожи отмечался акантоз, гиперкератоз, паракератоз. В дерме имелись расширенные сосуды, отек дермы, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы. Иммунофенотип клеток инфильтрата был представлен: CD2 +, CD3+, CD4+, CD5+, CD43 +, CD45RO+ лимфоцитами, что не позволило установить диагноз, выбрав из двух направительных диагнозов (эритродермическая форма грибовидного микоза? синдром псевдолимфомы кожи?) один окончательный. Для уточнения диагноза и морфологической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи было проведено морфометрическое исследование эпидермальных клеток. Относительный объем эпидермиса у данного больного составил 27,98%, митотический индекс 15,83, что превышало аналогичные показатели нормы в 2,2 и 3,14 раза соответственно и соответствовало морфометрическим параметрам эпидермальных клеток при эритродермической форме грибовидного микоза (табл.1). На основании комплексных клинико-лабораторного, гистологического, иммунофенотипического, морфометрического исследований у данного пациента установлен диагноз эритродермическая форма грибовидного микоза. Это позволило обосновать выбор тактики специфической цитостатической терапии (проспидин). После получения 3-х курсов специфической проспидинотерапии совместно с кортикостероидами, препаратами кальция, аевитом и наружной терапии целестодермом элементы регрессировали. В течение года рецидив заболевания не наблюдался. Больной находится на активном диспансерном наблюдении.

Пример № 2. Больная А., 45 лет, строитель-маляр, поступила в клинику ГАУЗ РКВД № 1 с предположительными диагнозами эритродермическая форма грибовидного микоза? синдром псевдолимфомы кожи? При поступлении предъявляла жалобы на сильный постоянный зуд, всего тела, озноб, повышение температуры тела до 39°C, общее недомогание, слабость, покраснение всего кожного покрова, отслойку рогового слоя эпидермиса. Считала себя больной в течение месяца, когда после лечения противосудорожными средствами, которые получала по поводу эпилепсии, появилось покраснение кожи туловища, отслойка рогового слоя эпидермиса. Объективно при поступлении: кожно-патологический процесс универсального характера, по типу эритродермии. Кожные покровы ярко-красного цвета с ливидным оттенком, были инфильтрированы, лихенифицированны в области кожных складок, обильно покрыты крупнопластинчатыми чешуйками. Подчелюстные, заднешейные, подмышечные, кубитальные, паховые лимфоузлы были увеличены до 2 см в диаметре, плотноэластической консистенции при пальпации, подвижные, безболезненные, неспаянные с окружающей тканью. При гистологическом исследовании пораженной кожи было обнаружено: акантоз, гиперкератоз, паракератоз, в дерме сосуды расширены, отек дермы, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы. Иммунофенотип клеток инфильтрата был представлен CD2+, CD3+, CD4+ , CD5+, CD43+, CD45RO+ лимфоцитами, что не позволило установить диагноз, выбрав из двух направительных диагнозов (эритродермическая форма грибовидного микоза? синдром псевдолимфомы?) один окончательный. Для уточнения диагноза и дифференциальной морфологической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы было проведено морфометрическое исследование эпидермальных клеток. Морфометрические исследования эпидермальных клеток отклонений их параметров от нормы не выявили: относительный объем эпидермиса составил 12,46%, митотический индекс 4,2, что соответствовало морфометрическому профилю эпидермальных клеток при псевдолимфомах кожи (табл.1) С учетом анамнестических данных, клинико-гистологической картины, иммунофенотипирования клеток инфильтрата, морфометрических исследований клеток эпидермиса был установлен диагноз синдрома псевдолимфомы. Это позволило обосновать выбор тактики детоксикационной терапии, включающий курс плазмофереза в сочетании с энтеросорбентами и антигистаминными препаратами. В результате проведенного лечения гиперемия, инфильтрация стали менее выраженными, шелушение отсутствовало, появились участки здоровой кожи, лимфатические узлы уменьшились, температура нормализовалась. После однократной инъекции дипроспана удалось добиться клинического излечения. В дальнейшем пациентка к дерматологу не обращалась.

Как видно из приведенных примеров, диагностика эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи сложна, необходимы комплексные клинико-лабораторные методы исследования. Проведение гистологических исследований, иммунофенотипирование клеток дермального инфильтрата показало схожую гистологическую картину, описываемую как акантоз, гиперкератоз, паракератоз, в дерме отек, расширение сосудов, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней части дермы, схожий иммунофенотип клеток инфильтрата, представленный CD2+, CD3+, CD4+, CD5+ , CD43+, CD45RO+ лимфоцитами, как при эритродермической форме грибовидного микоза, так и при псевдолимфомах кожи. Применение морфометрических исследований эпидермальных клеток позволило отдифференцировать эритродермическую форму грибовидного микоза и синдром псевдолимфомы кожи, что в свою очередь, позволило обосновать выбор тактики раннего адекватного рационального лечения, приведшего к полному регрессу заболевания. Количественная оценка морфологических изменений в коже при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи по относительному объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток полностью совпали с клинической оценкой заболевания во всех наблюдаемых случаях. Следовательно, на наш взгляд, диагностика эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи должна осуществляться с использованием мультиспектра диагностических методов: клинических, гистологических, иммунофенотипических и морфометрических.

Заявленным способом была проведена дифференциальная диагностика у 15 больных с эритродермической формой грибовидного микоза и 18 с синдромом псевдолимфомы кожи, и во всех случаях был достигнут указанный технический результат. Способ воспроизводим в условиях гистологической лаборатории стационара, следовательно, заявляемое изобретение соответствует критерию патентоспособности «промышленная применимость».

Таким образом, отличие от прототипа (табл.2) заявленного нами способа дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи по относительному объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток заключается в следующем:

1) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ конкретизирует вид лимфомы кожи, в частности эритродермическую форму грибовидного микоза и вид псевдолимфомы кожи, в частности синдрома псевдолимфомы и проводит дифференциальную морфометрическую диагностику между этими двумя конкретными нозологическими формами;

2) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ дополнительно использует при иммунофенотипировании клеток инфильтрата CD2, CD5 моноклональные антитела;

3) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ рассчитывает относительный объем эпидермиса и митотический индекс всех эпидермальных клеток;

4) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ объективизирует, количественно учитывает наблюдаемые в коже изменения при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи путем морфометрических исследований эпидермальных клеток;

5) при проведении дифференциальной диагностики заявленный нами способ проводит дифференциальную морфологическую диагностику начальных клинических проявлений эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи путем измерения относительного объема эпидермиса и подсчета митотического индекса эпидермальных клеток;

6) заявленный нами способ обосновывает выбор тактики раннего адекватного рационального лечения, в зависимости от установленного диагноза;

7) заявленный нами способ ускоряет диагностику эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи более чем в 2 раза путем включения в обследование пациентов не только гистологических, иммунофенотипических, но и морфометрических исследований всех клеток эпидермиса на более ранних стадиях заболеваний.

Таблица 1
Морфометрические исследования эпидермальных клеток при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи
НозологияОтносительный объем эпидермиса (М±m) (%)Митотический индекс эпидермальных клеток (М±m)
Эритродермическая форма грибовидного микоза (n=15) 27,94±1,61**13,42±1,41***
Синдром псевдолимфомы кожи (n=18) 12,94±1,554,7±1,82
Контроль (здоровая кожа) (n=10) 12,88±0,35,03±1,11
Примечание: * - достоверность различий показателей с контролем при p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001; в остальных случаях p>0,05

Таблица 2
Сравнительные данные технических результатов прототипа и предлагаемого способа
Результат Предлагаемый способ (общее количество обследованных - 33) Наиболее близкий аналог (количество больных - 61)
Конкретизирует вид диагностируемой лимфомы кожи, как эритродермической формы грибовидного микоза и вид псевдолимфомы кожи, как синдрома псевдолимфомы кожи конкретизируетне конкретизирует
Дополнительно использует CD2, CD5 моноклональные антитела при иммунофенотипировании клеток инфильтрата используетне использует
Проводит морфометрию клеток всего эпидермисатолько базальных клеток или ангитегенпредставляющих клеток
Морфометрически рассчитываетотносительный объем эпидермиса иплощадь и ядерно-цитоплазматическое соотношение

Продолжение таблицы 2
способ дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической   формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи по относительному   объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток, патент № 2526180 митотический индекс всех клеток эпидермиса только базальных клеток или только ангитегенпредставляющих клеток
Объективизация, количественная оценка, учет изменений в коже, проходящих при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи по относительному объему эпидермиса и митотическому индексу эпидермальных клеток позволяетне позволяет
Дифференциальная морфометрическая диагностика эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи путем измерения относительного объема эпидермиса и подсчета митотического индекса эпидермальных клеток проводитне проводит
Обоснование выбора тактики раннего адекватного рационального лечения для эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожиобосновывает не обосновывает
Срок проведения диагностикипервая неделя заболевания через 3-4 недели от начала заболевания

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ дифференциальной морфометрической диагностики эритродермической формы грибовидного микоза и синдрома псевдолимфомы кожи, включающий гистологическое исследование биоптатов пораженной кожи путем световой микроскопии, иммунофенотипирование клеток инфильтрата, дополнительные морфометрические исследования базальных кератиноцитов в гистологических препаратах биоптатов пораженной кожи при схожей гистологической картине и одинаковом иммунофенотипе клеток инфильтрата, отличающийся тем, что при схожей гистологической картине, описываемой при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи как акантоз, гиперкератоз, паракератоз, отек и расширение сосудов дермы, лимфогистиоцитарные инфильтраты, расположенные в верхней трети дермы, одинаковом иммунофенотипе клеток инфильтрата при эритродермической форме грибовидного микоза и синдроме псевдолимфомы кожи, представленном CD2+, CD3+, CD4 +, CD5+, CD43+, CD45RO+ лимфоцитами, проводят дополнительно морфометрические исследования всех клеток эпидермиса, причем рассчитывают относительный объем эпидермиса и митотический индекс эпидермальных клеток и при увеличении относительного объема эпидермиса в 2,2 и более раза по сравнению с нормальной кожей и увеличении митотического индекса эпидермальных клеток в 2,7 и более раза по сравнению с нормальной кожей диагностируют эритродермическую форму грибовидного микоза, а при неизмененных по сравнению с нормальной кожей относительном объеме эпидермиса и митотическом индексе эпидермальных клеток диагностируют синдром псевдолимфомы кожи.


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2526180

patent-2526180.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс G01N33/483 физический анализ биологических материалов

Патенты РФ в классе G01N33/483:
способ диагностики функционального почечного резерва -  патент 2528903 (20.09.2014)
способ количественного определения углеродных наноструктур в биологических образцах и их распределения в организме -  патент 2528096 (10.09.2014)
способ прогнозирования эффективности лечения больных неходжкинскими лимфомами с поражением костного мозга -  патент 2526796 (27.08.2014)
способ управления биохимическими реакциями -  патент 2525439 (10.08.2014)
способ диагностики стеноза артериовенозной фистулы у больных с терминальной стадией хронической болезни почек, находящихся на программном гемодиализе -  патент 2522397 (10.07.2014)
способ прогноза развития бактериальных осложнений на фоне острой респираторной вирусной инфекции -  патент 2522202 (10.07.2014)
способ определения глубины проникновения света в кожу и устройство для его реализации -  патент 2521838 (10.07.2014)
способ и прибор для сортировки клеток -  патент 2520848 (27.06.2014)
способ активизации роста лейкоцитарной массы и комплексной коррекции состава крови в акустическом поле in vitro -  патент 2518534 (10.06.2014)
способ определения оптических и биофизических параметров биоткани -  патент 2510506 (27.03.2014)

Класс G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого

Патенты РФ в классе G01N33/53:
способ диагностики поражения вегетативных парасимпатических узлов головы вирусной этиологии -  патент 2529795 (27.09.2014)
способ диагностики поражения вегетативных парасимпатических узлов головы вирусной этиологии -  патент 2529794 (27.09.2014)
способ оценки острой соматической боли -  патент 2529793 (27.09.2014)
способ оценки эффективности противогерпетического действия фотодинамического воздействия на вирус простого герпеса (впг) in vitro -  патент 2529792 (27.09.2014)
способ прогнозирования самопроизвольного выкидыша -  патент 2529788 (27.09.2014)
способ идентификации вызывающих муковисцидоз мутаций в гене cftr человека, набор праймеров, биочип, набор мишеней и тест-система, используемые в способе -  патент 2529717 (27.09.2014)
способ прогнозирования инфекционного осложнения атопического дерматита у ребенка -  патент 2528908 (20.09.2014)
способ прогнозирования риска развития тяжелого поражения нервной системы у новорожденных детей с различным сроком гестации в неонатальном периоде -  патент 2528907 (20.09.2014)
способ получения иммуносорбента для диагностики вируса простого герпеса 1 типа -  патент 2528896 (20.09.2014)
способ прогнозирования развития психической дезадаптации -  патент 2528886 (20.09.2014)

Наверх