мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или ее производные

Классы МПК:A61K31/015  карбоциклические
A61K9/06 мази; основы для них
A61P31/04 антибактериальные средства
A61P31/10 противогрибковые средства
A61P31/12 противовирусные средства
Патентообладатель(и):Клопотенко Леонид Леонидович (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2012-11-09
публикация патента:

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к композиции, содержащей инкапсулированную тритерпеновую кислоту: бетулиновую кислоту, урсоловую кислоту или их производные в виде солей и эфиров или тритерпеновый спирт - бетулин, которая может быть использована в медицине для лечения и профилактики вирусных инфекций, вызываемых ДНК- и РНК-содержащими вирусами, такими как вирусы гриппа, онковирусы, герпес, опоясывающий лишай, а также инфекций, вызываемых грамположительными и грамотрицательными бактериями: Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp., патогенными грибами рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобными грибами рода Candida, в т.ч. полирезистентные штаммы, а также Actinomycetes и некоторыми патогенными простейшими: Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis. В изобретении предложена композиция, включающая в себя в качестве активного ингредиента 0,5 мас.% бетулин или 0,5 мас.% инкапсулированную тритерпеновую кислоту: бетулиновую кислоту, урсоловую кислоту или их производные в виде солей, эфиров и др., в качестве носителей: мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрины, фуллерены, лецитины и полимеры, способные связываться с компонентами с образованием комплексов компонент-носитель и эксципиенты. 3 н.п. ф-лы.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к композиции, содержащей инкапсулированную тритерпеновую кислоту: бетулиновую кислоту, урсоловую кислоту или их производные в виде солей и эфиров или тритерпеновый спирт - бетулин, которая может быть использована в медицине для лечения и профилактики вирусных инфекций, вызываемых ДНК- и РНК-содержащими вирусами, такими как вирусы гриппа, онковирусы, герпес, опоясывающий лишай, а также инфекций, вызываемых грамположительными и грамотрицательными бактериями: Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp., патогенными грибами рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, дрожжеподобными грибами рода Candida, в т.ч. полирезистентными штаммами, а также Actinomycetes и некоторыми патогенными простейшими: Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis.

Известны лекарственные средства для местного применения, используемые для лечения и профилактики герпесвирусных инфекций, содержащие противовирусные компоненты, не являющиеся ферментами, например крем Зовираксмазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 (ацикловир) (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/zovirax~27174.htm); капсулы и лиофилизат для приготовления раствора для внутривенного введения Фосфогливмазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 (фосфолипиды и тринатриевая соль глицирризиновой кислоты) (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/phosphogliv.htm); спрей Эпиген-интиммазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 (глицирризиновая кислота) (http://www.vidal. ru/poisk_preparatov/epigen-intim.htm); мази: алпизарин (http://alpizarin.ru/), хелепин (http://www.vidal.ru/poisk preparatov/helepin-d_20830.htm). флакозид (http://ru.wikipedia.org/wiki/%D4%EB%E0%EA%EE%E7%E8%E4), содержащие экстракты растений.

Известен препарат Интерферон альфа-2а, идентичный человеческому лейкоцитарному интерферону альфа-2 и обладающий иммуномодулирующим, противовирусным и противоопухолевым действием (Справочник "Лекарственные средства" под редакцией М.А. Клюева, 2001 г.).

Известно косметическое средство бальзам для губ Ла-Кримазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 , содержащее экстракт солодки и бисаболол, используемое для смягчения кожи губ. (http://vertex.spb.ru/catalog/68/34/la-kri_balyzam_dlya_gub.html)

Известен бальзам для губ Uriage Barierderm, содержащий масло каритэ, масло огуречника, неомыляемые фракции масла авокадо, стеарилглицирретинат, аскорбилпальмитат, токоферол, используемое для восстановления поврежденной кожи губ. (http://www.krason.ru/catalog-bariederm/1740-3620-balzam-dlya-gub.aspx?perf=1)

Известен препарат Глицирам (глициррризинат аммония), используемый в виде таблеток для лечения бронхиальной астмы и гипофункции надпочечников. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/glycyram-tablets-0.05_27575. htm)

Известен комбинированный препарат Гексализ, содержащий в качестве противомикробных компонентов - биклотимол и лизоцим, эноксолон, выделенный из глицирризиновой кислоты в качестве противовоспалительного компонента. (http://www.vidal.ru/poisk_preparatov/hexalyse~22640.htm)

Известны косметические средства для местного применения, используемые для профилактики герпеса, содержащие противовирусные компоненты, не являющиеся ферментами, например, экстракты лекарственных растений и германийорганические соединения (Помада профилактическая противогерпетическая "Антигерпес" (Р16 9158 915854 71.100.70) 292472. ТУ 9124-001-00358210-96), глицирризиновая кислота «Герпинат» мазь; бан. 20 мл; № 77.01.12.915.П.02970.02.00 от НИИ атеросклероза РАЕН (Россия), ИНАТ-ФАРМА (Россия) (http://www.biomedservice.ru/publish/pub16.htm)

Известна косметическая фермент-содержащая композиция, где фермент выбран из группы протеиназ, включающей в себя трипсин, химотрипсин, бромелаин, папаин и фицин, а также из лизоцима, эластазы, мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -липазы и мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -амилазы, которая применяется для лечения акне, ухода за кожей и очистки кожи (DE 4305460). Описанная композиция не содержит ферментов нуклеаз, обладающих прямой противовирусной активностью, и, следовательно, не может быть использована для профилактики вирусных инфекций.

Известны лекарственные и косметические средства для местного применения, используемые для лечения и профилактики рубцов, язв и ран, содержащие ферменты, например мазь Ируксолмазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 , содержащий фермент: клостридиопептидазу А и антибиотик: хлорамфеникол, (http://www.rlsnet.ru/tn_index_id_1605.htm); порошок Карипазиммазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 , содержащий ферменты: папаин и лизоцим, для профилактики рубцов, (http://www.caripazymum.ru/instruction.html); гель Ферменкол, содержащий комплекс коллагенолитических протеаз (http://fermencol.ru/); бальзам Морикрол, содержащий фермент: морикразу (http://ekogoods.ru/catalog/11-balzam_%ABmorikrol%BB), крем Содермикс, содержащий фермент: суперроксиддисмутазу (http://sodermix.ru/).

Известен фармацевтический препарат «Дезоксирибонуклеаза», выпускаемый в виде лиофилизированного порошка в герметично укупоренных флаконах и ампулах по 0,005; 0,01; 0,025 и 0,05 г. Этот препарат назначают при герпетических кератитах, аденовирусных конъюктивитах, для уменьшения вязкости и улучшения эвакуации мокроты и гноя при бронхоэктатической болезни и используют местно в виде 0,2% раствора на изотоническом растворе натрия хлорида (Справочник "Лекарственные средства" под редакцией М.А. Клюева, 2001 г.).

Известен фармацевтический препарат «Рибонуклеаза», выпускаемый в виде лиофилизированного порошка в герметично укупоренных флаконах по 0,01 г. Этот препарат назначают при заболеваниях дыхательных путей с трудно отделяемой мокротой, пародонтозе, гингивите, гнойных ранах, трофических язвах, клещевом энцефалите, тромбофлебите, при местном применении присыпают раневую поверхность в количестве 0,025-0,05 г. (Справочник "Лекарственные средства" под редакцией М.А. Клюева 2001 г.).

Известна бетулиновая кислота (3мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -гидрокси-20(29)-лупаен-28-овая кислота)-природный пентациклический тритерпеноид. Содержится в коре некоторых видов растений, главным образом березы пушистой (Betula pubescens), от которой и получила свое название. Бетулиновая кислота и ее производные обладают противовоспалительной, противоопухолевой и анти-ВИЧ-активностью. (Pisha E. Method for selectivity inhibiting melanoma, using betulinic acid. Nat. Med. 1995. Vol.1. P.1046-1051 Fujioka T. Compounds and methods of use to treat HIV infections. J. Nat. Prod. 1994. Vol.57. P.243-247.)

Известна урсоловая кислота - пентациклическое тритерпеновое соединение, выделяемое из растительного сырья, проявляет физиологическую активность как при наружном, так и при внутреннем применении. Ее противовоспалительные, противоопухолевые и антимикробные свойства позволяют ее использование в косметических средствах. Урсоловая кислота и ее изомер, сопутствующий ей в большинстве растений, олеаноловая кислота были рекомендованы для терапии и профилактики рака кожи в ряде стран. Оба тритерпеновых соединения способствуют росту волос посредством стимуляции периферического тока крови в коже головы и активации материнских клеток волос. Обработка кожи препаратами, включающими эти соединения, препятствует выпадению волос и образованию перхоти. Для урсоловой кислоты и ее производных выявлен широкий спектр биологической активности: противовоспалительная, гипохолестеринемическая, противоатеросклеротическая, противомикробная, гиполипидемическая, кардиостимулирующая. Кроме того, урсоловую кислоту возможно применять как модификатор протеинового синтеза, как косметическое средство, как средства против лимфоцитной лейкемии и противоопухолевого препарата. http://www.nioch.nsc.ru/russ/research/res_6.htm

Известные данные о противовирусной активности помоловой кислоты. (http://www.ijpbs.net/vol-2_issue-3/pharma_science/44.pdf)

Из WO 2012106188, US 2011313191, US 2012101098 известны производные бетулиновой кислоты, используемые для лечения вирусных инфекций, в частности ВИЧ-инфекции.

Из KR 20110018671 известны фармацевтические композиции, содержащие тритерпеновые кислоты для профилактики и лечения кардиоваскулярных расстройств, вызванных гиперхолестеринемией.

ИЗ KR 2010040107 известны композиции, содержащие тритерпеновую кислоту для устранения морщин.

Из JP 2011020989 известен способ стабилизации тритерпеновой кислоты N-метипирролидоном.

Из RU 2445317 известны производные бетулиновой кислоты, используемые в качестве противоопухолевого средства.

Из WO 2011051520 известны композиции, содержащие тритерпеновые кислоты в качестве вспомогательного компонента в составе протеиновых вакцин.

Из RU 2098135 известна мазь, содержащая кортикостероид и бета-циклодекстрин, обладающая противовоспалительным и противоаллергическим действием, в которой применение бета-циклодекстрина обеспечивает повышение биодоступности препарата, пролонгирование действия, снижение количества действующего вещества в два раза и уменьшение побочных явлений, а также удешевление продукта.

Из US 20110098261 А1 известна композиция, содержащая производное бетулиновой кислоты для лечения и/или профилактики вирусных инфекций, а именно против вируса гриппа. Композиция может быть выполнена в форме для локального применения и инкапсулирована.

Из WO 2012106188 А1 известна композиция, обладающая противовирусной активностью, в частности для лечения ВИЧ-инфекций, содержащая бетулиновую кислоту. Композиция может быть выполнена в форме мази.

В А.В. Сымон. Молекулярная модификация бетулиновой кислоты антимеланомного средства и подходы к ее солюбилизации // Автореферат, 2004, заключение, изучена эффективность включения бетулиновой кислоты и ее производных в липосомы.

Из KR 100757043 В1 известна мазь, содержащая нанокапсулу на основе тритерпеновых кислот (урсоловая, олеаноловая кислота).

Из GAO D. Et all. Oleanolic acid liposomes with polyethelene glycol mmodification: promising antitumor drug delivery // Int J Nanomedicine, 2012 Jul 6, 7:3517, реферат, известна капсула, содержащая олеаноловую кислоту, которая является мощным средством доставки.

Из US 20010018459 А1 известно, что тритерпеовые кислоты (бетулиновая кислота, урсоловая кислота, олеаноловая кислота) и их производные (эфиры) обладают противогрибковым действием.

Из Kazakova О.В. et all. Synthesis oftriterpenoid acylates - an effective reproduction inhibitors of influenza A (H1N1) and papilloma veruses // Bioorg Khim., 2010 Nov-Dec, 36(6)841-8, PMID: 21317951, реферат, известно, что производные олеаноловой, гли-цирризиновой, урсоловой и бетулиновой кислот обладают действием против вируса папилломы человека.

Отличием заявленной композиции от US 20110098261 А1; WO 2012106188 А1; A.B. Сымон. Молекулярная модификация бетулиновой кислоты антимеланомного средства и подходы к ее солюбилизации // Автореферат, 2004, заключение; KR 100757043 В1; GAO D. Et all. Oleanolic acid liposomes with polyethelene glycol mmodification: promising antitumor drug delivery // Int J Nanomedicine, 2012 Jul 6,7:3517, реферат; US 20010018459 A1; Kazakova O.B. et all. Synthesis of triterpenoid acylates - an effective reproduction inhibitors of influenza A (H1N1) and papilloma veruses // Bioorg Khim., 2010 Nov-Dec, 36(6)841-8, PMID: 21317951, реферат, является то, что она содержит дополнительно в качестве активного ингредиента 0,001 мас.% интерферона, или 5,0 мас.% лизоцима, или 5,0 мас.% сангвиритрина. Присутствие в композиции интерферона усиливает противовирусное действие тритерпеновой кислоты; наличие лизоцима или сангвиритрина - противомикробное действие тритерпеновой кислоты, что в итоге обеспечивает большую эффективность композиции по сравнению с композициями, в которых в качестве активного ингредиента присутствует только тритерпеновая кислота.

Композиции, содержащие инкапсулированную тритерпеновую кислоту: бетулиновую кислоту, урсоловую кислоту или их производные в виде солей и эфиров, тритерпеновый спирт - бетулин и дополнительно интерферон, или сангвиритрин, или лизоцим, используемые при профилактике вирусных инфекций, не описаны.

Таким образом, задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить композицию, содержащую инкапсулированную тритерпеновую кислоту: бетулиновую кислоту, урсоловую кислоту или их производные в виде солей и эфиров и дополнительно интерферон или сангвиритрин или лизоцим, которая может быть использована для профилактики вирусных инфекций, вызываемых ДНК- и РНК-содержащими вирусами, такими как вирусы гриппа, онковирусы, герпес, опоясывающий лишай.

Согласно настоящему изобретению предложена композиция, содержащая в качестве активного ингредиента инкапсулированную тритерпеновую кислоту: бетулиновую кислоту, урсоловую кислоту или их производные в виде солей 0,5 мас.% и дополнительно 0,001 мас.% интерферона, или 5,0 мас.% сангвиритрина, или 5,0 мас.% лизоцима и приемлемые носители и эксципиенты.

Наиболее предпочтительной является композиция, содержащая инкапсулированную бетулиновую кислоту, в качестве активного ингредиента и, дополнительно, сангвиритрин и приемлемые носители и эксципиенты, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

бетулиновая кислота 0,5
мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин5,0
эмульгатор0,5
консервант1,0
сангвиритрин5,0
полимерный носитель1,0
гидрофобная основа80,5
регулятор рН1,0
вода деминерализованная5,5

Активным ингредиентом заявленной фармацевтической композиции является бетулиновая кислота или ее производные: бетулин, стеарилбетулинат, бетулинат аммония, или калия, или натрия, а также лизоцим. Бетулин, бетулиновая кислота и ее соли используются как противовирусное средство для наружного и местного применения. Бетулиновая кислота активна в отношении ДНК- и РНК-содержащих вирусов, включая различные штаммы вирусов Herpes simplex, Varicella zoster, вирусов папилломы человека, цитомегаловирусов. Противовирусное действие связано, по-видимому, с индукцией образования интерферона. Прерывает репликацию вирусов на ранних стадиях, вызывает выход вириона из капсида, тем самым не допуская его проникновение в клетки. Это обусловлено селективным дозозависимым ингибированием фосфорилирующей киназы Р. Взаимодействует со структурами вируса, изменяя различные фазы вирусного цикла, что сопровождается необратимой инактивацией вирусных частиц (находящихся в свободном состоянии вне клеток), блокированием внедрения активных вирусных частиц через клеточную мембрану внутрь клетки, а также нарушением способности вирусов к синтезу новых структурных компонентов. Ингибирует вирусы в концентрациях, нетоксичных для нормально функционирующих клеток. Штаммы вирусов, резистентные к ацикловиру и йодоуридину, высокочувствительны к бетулиновой кислоте. Оказывает также противовоспалительное, анальгезирующее и улучшающее регенерацию тканей действие, как при ранних проявлениях вирусной инфекции, так и при язвенных формах. (Fujioka Т. Compounds and methods of use to treat HIV infections. J. Nat. Prod. 1994. Vol.57. P.243-247).

Таким образом, осуществляется разнонаправленное противовирусное действие: прерывание репликации вируса на ранних стадиях, стимуляция выхода вириона из капсида, индукция образования интерферона, а также подавление вторичной микрофлоры и воспаления в области поражения и ускорение эпителизации.

Для приготовления композиции используют субстанции, полученные из измельченного растительного сырья путем экстракции с последующей очисткой и сушкой и, по необходимости, этерификацией или гидролизом.

Неожиданно обнаружено, что тритерпеновые кислоты и их производные: бетулиновая кислота, урсоловая кислота, тритерпеновый спирт - бетулин и бета-циклодекстрин могут быть включены в состав стабильной композиции, обладающей способностью проникать в ядра инфицированных клеток и нивелировать побочные эффекты со стороны эндокринной системы при использовании тритерпеновых кислот.

Композицию по настоящему изобретению обычно изготавливают общепринятыми способами, используя твердые или жидкие приемлемые носители или эксципиенты, выбранные из эмульгаторов, диспергирующих агентов, консервантов, ароматизаторов, регуляторов рН, полимерных носителей и других эксципиентов, которые целесообразны для приготовления композиций для местного применения. Композиция по настоящему изобретению может быть приготовлена в форме мази на различных основах: гидрофильной, гидрофобной и комбинированной.

Дополнительными преимуществами указанной композиции являются снижение количества действующего вещества в два раза, уменьшение побочных явлений, а также удешевление продукта, повышенная стабильность, разнонаправленное противовирусное действие, удобство применения, а также легкость дозирования.

Заявленная композиция обладает стабильностью в отношении компонентов, входящих в ее состав, при длительном хранении, которая достигается путем иммобилизации компонентов на носителях, содержащихся в указанной композиции. В качестве указанных носителей могут быть использованы любые лецитины, циклодекстрины, фулерены и полимеры, способные связываться с компонентами с образованием комплексов компонент-носитель. Примерами таких полимерных носителей являются камеди, поливинилпирролидон, каррагинаны, натрия альгинат, полиэтиленгликолевый эфир хитозана, натрий карбоксиметилцеллюлоза, полиакрилат, циклодекстрины, фуллерены, лецитины.

Активность заявленной композиции обусловлена активностью входящего в ее состав тритерпеновой кислотой или ее производными. Обнаружено, что композиция, содержащая бетулин или тритерпеновую кислоту 0,5 мас.%, обладает стабильностью при ее длительном хранении, следовательно, заявленная композиция может быть использована для эффективной профилактики ДНК- и РНК-содержащих вирусов, таких как вирусы гриппа, онковирусы, герпес, опоясывающий лишай.

Настоящее изобретение иллюстрируется следующими примерами.

ПРИМЕР 1

Композиция в виде геля с гидрофильной основой на основе бетулина имеет следующий состав:

бетулин0,5
мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин5,0
эмульгатор0,5
консервант1,0
лизоцим5,0
полимерный носитель1,0
регулятор рН1,0
вода деминерализованная86,00

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин, бетулин, лизоцим, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, регулятор рН. Полученный гель перемешивают, вакуумируют и гомогенизируют.

ПРИМЕР 2

Композиция в виде линимента на основе урсолата натрия имеет следующий состав:

урсолат натрия0,001
гидрогенизированный лецитин 0,001
эмульгатор 0,5
консервант 1,0
интерферон 0,001
полимерный носитель 1,0
регулятор рН 1,0
вода деминерализованная 96,497

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют урсолат натрия, интерферон, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, гидрогенизированный лецитин, регулятор рН. Полученный линимент фильтруют.

ПРИМЕР 3

Композиция в виде крема с гидрофобной основой на основе бетулиновой кислоты имеет следующий состав:

бетулиновой кислоты стеариловый эфир 0,5
мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин5,0
эмульгатор0,5
консервант1,0
сангвиритрин5,0
полимерный носитель1,0
гидрофобная основа80,5
регулятор рН1,0
вода деминерализованная5,5

Указанную композицию готовят по следующей методике. Расплавляют суппозиторную основу при температуре 40°С, в деминерализованной воде растворяют мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин, бетулиновой кислоты стеариловый эфир, сангвиритрин, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, регулятор рН. Полученную массу перемешивают, гомогенизируют, охлаждают и фасуют.

ПРИМЕР 4

Композиция в виде крема с комбинированной основой на основе бетулината аммония имеет следующий состав:

бетулинат аммония 0,001
гидрогенизированный лецитин 0,001
эмульгатор 0,5
консервант 1,0
интерферон 0,001
полимерный носитель1,0
регулятор рН1,0
вода деминерализованная96,497

Указанную композицию готовят по следующей методике. В деминерализованной воде растворяют бетулинат аммония, интерферон, добавляют эмульгатор, консервант, полимерный носитель, гидрогенизированный лецитин, регулятор рН. Полученный крем фильтруют и фасуют.

ПРИМЕР 5

Оценка стабильности бетулина и тритерпеновой кислоты

Для оценки стабильности бетулина и тритерпеновой кислоты была проведена сравнительная оценка сохранения бетулина и тритерпеновой кислоты в композиции (на примере геля и линимента). Определение содержания тритерпеновой кислоты проводили методом неводного титрования, бетулина - методом ВЭЖХ.

Результаты приведены в следующей таблице.

Таблица 1
Исследуемые образцыОсновные ингредиенты Стабильность при хранении
123
Гель № 1Согласно Примеру 1 Содержание бетулина 99% в течение 5 лет наблюдения
Линимент № 2Согласно Примеру 2 Содержание тритерпеновой кислоты 99% в течение 5 лет наблюдения
Гель № 3Согласно Примеру 1 (без мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрина)Содержание бетулина 70% в течение 5 лет наблюдения
Линимент № 4Согласно Примеру 2 (без гидрогенизированного лецитина)Содержание тритерпеновой кислоты 68% в течение 5 лет наблюдения

Как видно из представленной таблицы, использование полимерных носителей и стабилизаторов в композиции позволяет получить стабильные композиции с сохранением бетулина и тритерпеновой кислоты в течение 5-х лет наблюдения. Аналогичные данные получены при использовании композиций из ПРИМЕРОВ 3, 4.

ПРИМЕР 5

Оценка антимикробной активности композиции

Антимикробную активность композиции из ПРИМЕРА 1 определяли методом серийных разведении. В качестве тест-микроорганизмов - культуры: Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp., грибы рода Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes, простейшие: Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis. В каждую пробирку вносили односуточную культуру в количестве 1000 клеток/мл. Все культуры микроорганизмов, кроме Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes, выращивали в пробирках на среде с мясопептонным бульоном при 37°С в течение суток, а культуры Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes на агаризированной среде Сабуро при 24°С двое суток. Титрование начинали с концентрации 10 мг/мл (с разведения 1/10). В качестве контроля использовали пробирку, в которую вносилась только питательная среда и микроорганизм. Концентрацию в последней пробирке с отсутствием роста принимали за минимальную ингибирующую концентрацию. Для оценки бактерицидного действия (минимальная подавляющая концентрация) из пробирок с отсутствием роста сделали пересев на чашки с мясопептонным бульоном. Чашки термостатировали при 37°С в течение суток. Бактерицидное действие отмечали в случае отсутствия роста на плотной питательной среде.

Таблица 2
Наименование культурыМИК (минимальная ингибируюшая концентрация) мг/млМПК (минимальная подавляющая концентрация) мг/мл
Staphylococcus spp.12,5 25
Streptococcus spp. 12,525
Enterococcus spp.12,5 25
Shigella spp. 12,525
Escherichia spp.12,5 25
Salmonella spp. 12,525
Proteus spp.12,5 25
Acinetobacter spp. 12,525
Citrobacter spp.12,5 25
Pseudomonas 12,525

spp.мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133
Serratia spp. 12,525
Klebsiella spp.12,5 25
Antracoides spp. 12,525
Cryptococcus spp.12,5 25
Microsporum 2550
Trichophyton25 50
Nocardia 2550
Aspergillus25 50
Candida 2550
Actinomycetes25 50
Entamoeba histolytica 2550
Trichomonas vaginalis 2550

Как видно из таблицы 2, минимальная ингибирующая концентрация составляет: для Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Kiebsieila spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp. - 12,5 мг/мл; для Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes, Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis - 25 мг/мл; минимальная подавляющая концентрация составляет: для Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp., Shigella spp., Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp., Acinetobacter spp., Citrobacter spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Klebsiella spp., Antracoides spp., Cryptococcus spp. - 25 мг/мл; для Microsporum, Trichophyton, Nocardia, Aspergillus, Candida, Actinomycetes, Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis - 50 мг/мл. Аналогичные результаты получены при определении антимикробной активности композиций из ПРИМЕРОВ 2-4.

ПРИМЕР 6

Оценка эффективности композиции в отношении вирусов простого герпеса и вируса Varicella zoster

Для оценки эффективности композиции было проведено открытое сравнительное исследование композиции из ПРИМЕРА 3. В исследовании принимали участие 39 пациентов в возрасте от 18 до 45 лет, имеющих клинические проявления герпесвирусной инфекции. По полу группа разделилась следующим образом: мужчины - 11 человек, женщины - 28 человек. Давность заболевания варьировала от 2 лет до 12 лет. При этом у подавляющего большинства пациентов отмечалось легкое и среднетяжелое течение герпетической инфекции - 2-3 раза в год - 14 человек, 4-6 раз в год - у 22 и 6-8 раз в год у 3 пациентов.

Среди женщин в наблюдаемой группе орофациальные проявления отмечались у 18, генитальная локализация у 10 человек. В группе мужчин у 7 пациентов зарегистрирован генитальный герпес и герпес зостер, и у 4 наблюдаемых отмечалось поражение в зоне лица. При этом у 7 человек (мужчин - 2, женщин - 5) отмечалось присоединение к проявлениям герпеса условно-патогенной бактериальной флоры с развитием осложнений в виде стрепто-стафилодермии.

У большинства пациентов регистрировалась небольшая площадь поражения, составляющая от 0,5 до 1,0 см у 29 человек, очаги площадью 1,5 см у 9 наблюдаемых.

В группе сравнения находились 11 пациентов с проявлениями герпетической инфекции, получавшие наружную терапию кремом «Ацикловир». По полу группа сравнения разделилась следующим образом: мужчин было - 7, женщин - 4 человека. Проявления герпеса у 4 мужчин находились в генитальной локализации, у 7 мужчин в генитальной и поясничной области, у 1 женщины герпес также имел генитальную локализацию, и у 3 женщин наблюдались орофациальные герпетические высыпания. По тяжести течения 8 пациентов контрольной группы имели легкое течение, 3 - средней степени тяжести.

До начала лечения и через 4 недели после окончания терапии всем пациентам были выполнены следующие исследования:

- Опрос и осмотр.

- Исследование материала из очага поражения с помощью полимеразной цепной реакции для выявления вируса простого герпеса человека.

- Исследование соскобов из урогенитального тракта для выявления хламидий, мико- и уреаплазм (при поражении урогенитального тракта.

- Тестирование сыворотки крови на сифилис; исследование на ВИЧ после проведения дотестового собеседования.

- Клинический анализ крови

Всем пациентам после получения информированного согласия для наружного лечения была назначена композиция из ПРИМЕРА 3 4-6 аппликаций в сутки, трем пациентам с тяжелым течением одновременно проводилась системная терапия препаратами ациклических нуклеозидов течение 5 дней. В группе сравнения пациенты получали наружную терапию кремом «Ацикловир» 6 аппликаций в сутки.

Лечение закончил 31 пациент. 8 пациентов после достижения ремиссии не явились для последующего наблюдения. Большинство из наблюдаемых пациентов (28 человек) отмечали хорошую переносимость препарата. В процессе наблюдения ни у одного из пациентов не отмечалось аллергических реакций на композицию из ПРИМЕРА 3. Положительный эффект от применения композиции из ПРИМЕРА 3 наблюдался у всех пациентов и выражался в ускорении эпителизации очагов и влиянии на условно-патогенную бактериальную флору с разрешением инфекционных осложнений.

При осмотре пациентов основной группы на фоне проводимого лечения положительный клинический эффект отмечался у большинства наблюдаемых в виде прекращения новых высыпаний в среднем на 3±1,2 день, начало эпителизации на 6±2,1 день, полная эпителизация наблюдалась к 11±2,3 дню. Сроки эпителизации зависели от размеров первоначального очага и степени тяжести течения герпетической инфекции. Положительный лечебный эффект получен также у пациентов с бактериальными осложнениями герпетической инфекции, что, вероятно, обусловлено входящими в состав действующими компонентами. Обращает на себя внимание тот факт, что достаточно хорошие результаты получены у пациентов с тяжелым течением герпетической инфекции. При этом сроки эпителизации очагов у этих пациентов были сравнимы с группой пациентов, имеющих легкое течение герпеса.

В группе пациентов, где применялся крем «Ацикловир» получены сходные результаты по срокам прекращения появления новых высыпаний (6±1,4 дня), по времени начала эпителизации (9±2,3 дня), тогда как полная эпителизация очагов высыпаний наступала медленнее и составила 18±2,1 дней. Общеклиническое обследование, проведенное до начала лечения, отклонений от нормы не выявило как у лиц основной группы, так и в группе сравнения.

Таким образом, исследование, проведенное на небольшой группе пациентов, позволяет сделать следующие выводы:

1. Установлено, что использование композиции из ПРИМЕРА 3 возможно при лечении поражений, вызванных вирусом герпеса 1,2 типа и вирусом Varicella zoster.

2. Препарат хорошо переносится пациентами.

3. Побочные явления в зоне нанесения композиции из ПРИМЕРА 3 в виде аллергических реакций при проведении исследования не встречались.

4. Возможно применение композиции из ПРИМЕРА 3 при бактериальных осложнениях герпетической инфекции, что обусловлено наличием в его составе компонентов, обладающих противомикробным действием.

5. Применение композиции из ПРИМЕРА 3 способствует более быстрой эпителизации очагов по сравнению с применением крема «Ацикловир».

6. Композиция из ПРИМЕРА 3 также может использоваться в комбинированной терапии пациентов с тяжелым течением рецидивирующей герпетической инфекции, способствуя при этом более быстрой эпителизации.

7. Ввиду того, что активные компоненты воздействуют на ДНК вирусов, причину заболеваний, вызываемых ДНК-содержащими вирусами, можно сделать вывод об эффективности композиции в отношении лечения и профилактики заболеваний, вызываемых вирусами герпеса, опоясывающего лишая, папилломы человека. Аналогичные данные получены при испытании композиций из ПРИМЕРОВ 1, 2, 4.

ПРИМЕР 7

Оценка эффективности композиции в отношении онковирусов на примере лечения меланомы

Фармакологическую эффективность полученных композиций из ПРИМЕРОВ 1-4 изучали на белых мышах, которым подкожно перевивали опухоль меланому В 16. Животных разделяли на 5 групп. Первую контрольную группу составляли животные, не получавшие препарат. Животным со второй по четвертую группы трижды в сутки местно наносили: вторая группа - композицию согласно ПРИМЕРУ 1, третья группа - - композицию согласно ПРИМЕРУ 2, четвертая группа - композицию согласно ПРИМЕРУ 3, пятая группа - композицию согласно ПРИМЕРУ 4. Препараты начинали применять через 48 часов после перевивки опухоли в течение 10 дней. Измерение объема опухолей проводили на 3, 7, 10 и 13 дни после окончания лечения. По результатам измерений рассчитывали показатель торможения роста опухоли (ТРО), который вычисляли по формуле:

ТРО(%)=(Vk-Vo)/Vk×100,

где Vk и Vo - средний объем опухолей (мм 3) в контрольной и опытной группах, который определялся как производное размеров трех перпендикулярных диаметров опухолевого узла. Увеличение продолжительности жизни (УПЖ) леченых животных по сравнению с контролем вычисляли по формуле:

УПЖ%=(Мо-Мк)/Мк×100,

где Мо и Мк - средняя продолжительность жизни (сутки) в опытных и контрольных группах животных.

Активными в противоопухолевом отношении считали препараты, вызывающие торможение роста опухоли 50% в течение 7 дней после окончания лечения. О токсическом действии препаратов судили по числу павших животных до начала гибели мышей в контрольной группе. Статистическую обработку полученных данных проводили по методу Фишера-Стьюдента. Различия сравниваемых величин считали достовернымы при р=0,05. Результаты оценки противоопухолевой активности композиций из ПРИМЕРОВ 1-4 в отношении перевиваемой опухоли мышей - меланомы В 16 распределились следующим образом: выявлено, что непосредственно после окончания лечения наблюдается торможение роста опухоли в 2-5 группах по сравнению с контрольной группой животных; максимальный эффект получен у композиции из ПРИМЕРА 3 при ежедневном трехразовом применении в течение 10 дней: 80% ТРО непосредственно после окончания лечения, 67% ТРО в течение 7 дней и сохранение более 50% ТРО в течение 13 дней. Несколько меньшим эффектом обладали композиции из ПРИМЕРОВ 1, 2 и 4: 75% ТРО непосредственно после окончания лечения, 60% ТРО в течение 7 дней и сохранение более 50% ТРО в течение 13 дней. Гибели от токсичности ни в одной группе леченых животных не отмечено. Таким образом, на основании полученных данных можно сделать вывод о противовирусном действии композиций из ПРИМЕРОВ 1-4 в отношении онковирусов, вызывающих меланому.

ПРИМЕР 8

Оценка эффективности композиции в отношении вируса гриппа

Для оценки эффективности композиции было проведено исследование композиции из ПРИМЕРА 4. В исследовании принимали участие 50 пациентов в возрасте от 18 до 50 лет, имеющих клинические проявления гриппа. 25 пациентам интраназально вводили трижды в день композицию из ПРИМЕРА 4, 25 пациентам было назначено симптоматическое лечение. В данном исследовании выявлены следующие клинические эффекты композиции из ПРИМЕРА 4: отмечено ускорение купирования лихорадки и преобладание во всех возрастных группах критического типа снижения температуры (в среднем у 53% пациентов). Этот эффект объясняется противовирусным действием композиции и подтверждается в сокращении длительности выявления вирусного антигена в мазках со слизистой оболочки носа. Достоверно сокращается длительность насморка и кашля. Выраженная клиническая эффективность композиции из ПРИМЕРА 4 сопровождалась протективным эффектом в отношении последующих заболеваний в течение 6 месяцев. Число эпизодов гриппа на одного наблюдаемого пациента оказалось в 3 раза меньше у получавших терапию композиции из ПРИМЕРА 4. Важным преимуществом терапии композицией из ПРИМЕРА 4 явился профилактический эффект в отношении наслоения вторичной бактериальной флоры: у получавших композицию из ПРИМЕРА 4 осложнения регистрировались достоверно реже (23,7%) в отличие от группы сравнения (45%) (р<0,05). Оценка трансформации формы ринита в гнойный достоверно подтвердила указанный эффект - 7,9% на фоне терапии композицией из ПРИМЕРА 4 и 20% - группа сравнения.

Оценка противовирусного эффекта композиции из ПРИМЕРА 4 проводилась на основании данных ПЦР-диагностики, осуществляемой в 1-2-й и 5-6-й дни болезни. У половины пациентов, получавших композицию из ПРИМЕРА 4, этиологический агент на 5-6-й день болезни не обнаруживался, тогда как в группе плацебо - у трети больных (р<0,05).

Аналогичные данные получены при исследовании композиций из ПРИМЕРОВ 1-3. Таким образом, на основании полученных данных можно сделать вывод о противовирусном действии композиций из ПРИМЕРОВ 1-4 в отношении вируса гриппа.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Композиция, обладающая противовирусной, противомикробной активностью, включающая бетулин, мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин, эмульгатор, консервант, лизоцим, полимерный носитель, регулятор рН, воду деминерализованную, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

бетулин0,5
мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин5,0
эмульгатор0,5
консервант1,0
лизоцим5,0
полимерный носитель1,0
регулятор рН1,0
вода деминерализованная86,00

2. Композиция, обладающая противовирусной, противомикробной активностью, включающая урсолат натрия или бетулинат аммония, гидрогенизированный лецитин, эмульгатор, консервант, интерферон, полимерный носитель, регулятор рН, воду деминерализованную при следующем соотношении компонентов, мас.%:

урсолат натрия или бетулинат аммония 0,001
гидрогенизированный лецитин0,001
эмульгатор0,5
консервант1,0
интерферон0,001
полимерный носитель1,0
регулятор рН1,0
вода деминерализованная96,497

3. Композиция, обладающая противовирусной, противомикробной активностью, включающая бетулиновую кислоту, мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин, эмульгатор, консервант, сангвиритрин, полимерный носитель, гидрофобную основу, регулятор рН, воду деминерализованную при следующем соотношении компонентов, мас.%:

бетулиновая кислота 0,5
мазь, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или   ее производные, патент № 2519133 -циклодекстрин5,0
эмульгатор0,5
консервант1,0
сангвиритрин5,0
полимерный носитель1,0
гидрофобная основа80,5
регулятор рН1,0
вода деминерализованная5,5


Скачать патент РФ Официальная публикация
патента РФ № 2519133

patent-2519133.pdf
Патентный поиск по классам МПК-8:

Класс A61K31/015  карбоциклические

Патенты РФ в классе A61K31/015:
композиция на основе диацетата бетулина -  патент 2517157 (27.05.2014)
фармацевтическая композиция, содержащая инкапсулированную тритерпеновую кислоту или ее производные -  патент 2516952 (20.05.2014)
способ лечения кровоизлияний сетчатки глаза и стекловидного тела -  патент 2513473 (20.04.2014)
противоишемическое средство -  патент 2499593 (27.11.2013)
средство с 5-аминосалициловой кислотой кверцетином и экстрактом прополиса, обладающее антиоксидантной активностью -  патент 2498810 (20.11.2013)
имплантируемое лекарственное средство на основе налтрексона для лечения пациентов, зависимых от алкоголя или опиатов -  патент 2476209 (27.02.2013)
ранозаживляющее средство -  патент 2475259 (20.02.2013)
фармакологическая антимикробная композиция пролонгированного действия -  патент 2463066 (10.10.2012)
способ получения бетулиновой кислоты -  патент 2463041 (10.10.2012)
средство для лечения ран, ожогов и инфекционно-воспалительных заболеваний кожи, придатков кожи и слизистых оболочек -  патент 2452475 (10.06.2012)

Класс A61K9/06 мази; основы для них

Патенты РФ в классе A61K9/06:
мазь доктора рустамова -  патент 2527335 (27.08.2014)
мазь с витамином а, восстанавливающая кожу и препятствующая ее избыточному ороговению -  патент 2527333 (27.08.2014)
эмульсия "масло-в-воде" мометазона и пропиленгликоля -  патент 2526911 (27.08.2014)
композиции, включающие по меньшей мере одно производное нафтойной кислоты, бензоилпероксид и по меньшей мере один пленкообразующий компонент, способы их получения и их применения -  патент 2526905 (27.08.2014)
гемостатическая противоожоговая ранозаживляющая композиция -  патент 2526183 (20.08.2014)
стабилизированная композиция для лечения псориаза -  патент 2526162 (20.08.2014)
мазь для лечения ожогов, фолликулита, фурункулеза, васкулита и заживления ран -  патент 2526152 (20.08.2014)
имплантируемые продукты, содержащие наночастицы -  патент 2524644 (27.07.2014)
способ приготовления противовоспалительной ветеринарной мази -  патент 2524643 (27.07.2014)
лекарственное средство для лечения туберкулеза -  патент 2523792 (27.07.2014)

Класс A61P31/04 антибактериальные средства

Патенты РФ в классе A61P31/04:
способ получения алкилбензилдиметиламмонийфторидов, обладающих противовирусным и антибактериальным действием -  патент 2529790 (27.09.2014)
вакцины на основе солюбилизированных и комбинированных капсулярных полисахаридов -  патент 2528066 (10.09.2014)
производные 5-гидроксиметилоксазолидин-2-она для лечения бактериальных кишечных заболеваний -  патент 2527769 (10.09.2014)
способ комплексного лечения некротического энтероколита у новорожденных и детей младшего грудного возраста -  патент 2527348 (27.08.2014)
композиции карбонатных соединений, препятствующих образованию биопленки, для использования при уходе за полостью рта -  патент 2526912 (27.08.2014)
способ получения комплексного антибактериального иммуномодулирующего препарата -  патент 2526184 (20.08.2014)
антибактериальные соединения -  патент 2525915 (20.08.2014)
производные 5-амино-2-(1-гидроксиэтил)тетрагидропирана -  патент 2525541 (20.08.2014)
композиции и способы лечения, включающие цефтаролин -  патент 2524665 (27.07.2014)
антимикробные/антибактериальные медицинские устройства, покрытые традиционными средствами китайской медицины -  патент 2524635 (27.07.2014)

Класс A61P31/10 противогрибковые средства

Патенты РФ в классе A61P31/10:
фунгицидное средство -  патент 2525911 (20.08.2014)
композиция в качестве бактерицидного и антифунгального средства (варианты) и макропористый бактерицидный материал на ее основе -  патент 2522986 (20.07.2014)
вагинальные суппозитории (варианты) -  патент 2514630 (27.04.2014)
2-нитрогетерилтиоцианаты для лечения грибковых инфекций, фармацевтическая композиция для местного применения -  патент 2504541 (20.01.2014)
производное амида салициловой кислоты, обладающее антибактериальной, противогрибковой и антилизоцимной активностью -  патент 2504536 (20.01.2014)
конъюгаты госсипола и натрийкарбоксиметилцеллюлозы, способы их получения и противовирусные средства на их основе -  патент 2499002 (20.11.2013)
фармацевтическая композиция, обладающая противогрибковой активностью, и способ ее получения -  патент 2497521 (10.11.2013)
фотосенсибилизатор для антимикробной фотодинамической терапии -  патент 2497518 (10.11.2013)
состав для антисептической обработки кожи -  патент 2491108 (27.08.2013)
снижение сопутствующих инфекций у свиней с помощью антигена pcv2 -  патент 2491092 (27.08.2013)

Класс A61P31/12 противовирусные средства

Патенты РФ в классе A61P31/12:
способ получения алкилбензилдиметиламмонийфторидов, обладающих противовирусным и антибактериальным действием -  патент 2529790 (27.09.2014)
5-метил-6-нитро-7-оксо-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-альфа]пиримидинид l-аргининия моногидрат -  патент 2529487 (27.09.2014)
новое производное пиразол-3-карбоксамида, обладающее антагонистической активностью в отношении рецептора 5-нт2в -  патент 2528406 (20.09.2014)
фармацевтическая композиция и способ получения противовирусных фракций (антивирус-с) -  патент 2526799 (27.08.2014)
средство для снижения репродукции вируса гепатита с -  патент 2526179 (20.08.2014)
применение соли ацетилсалициловой кислоты для лечения вирусных инфекций -  патент 2524304 (27.07.2014)
пептидные производные 1-(1-адамантил)этиламина и их противовирусное действие -  патент 2524216 (27.07.2014)
способ получения противовирусного средства и противовирусное средство -  патент 2522880 (20.07.2014)
способ изготовления вакцины против ящура -  патент 2522868 (20.07.2014)
способ получения антирабической вакцины -  патент 2522866 (20.07.2014)


Наверх