способ приготовления реагента для получения меченого технецием-99м норфлоксацина

Формула изобретения

Способ приготовления реагента для получения меченого технецием-99м норфлоксацина, заключающийся в приготовление солянокислого раствора олова (II) хлорида дигидрата и его смешивании с порошком норфлоксацина гидрохлорида, отличающийся тем, что полученную смесь замораживают при температуре жидкого азота, затем подвергают лиофильной сушке при температуре Т=-50°С в вакууме 0,0015 Торр в течение не менее 20,5 ч с последующим досушиванием в течение не менее 5,5 ч при температуре +16±2°С.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области фармацевтической химии, в частности к способам получения реагентов для приготовления радиофармпрепаратов (РФП), применяемых для диагностики бактериальных воспалений.

Возможность использования противомикробных препаратов из группы фторхинолонов в ядерной медицине была впервые продемонстрирована на ципрофлоксацине гидрохлориде. Введение изотопной метки технеция-99m (^99mТс) в его структуру явилось новым подходом к проблеме визуализации воспалительных очагов. Обосновывается это тем, что фторхинолоны связывают и ингибируют фермент ДНК-гиразу, присутствующий в делящихся бактериях. Вследствие этого нарушается репликация ДНК и синтез клеточных белков микроорганизмов. Считается, что фторхинолоны не связываются с мертвыми бактериями и не накапливаются в участках асептического воспаления. Эти свойства обеспечивают высокую специфичность РФП на их основе к воспалительным очагам [В.С. Скуридин, Н.В. Варламова, М.Л. Белянин, С.И. Сазонова, Ю.Н. Конковская. Получение меченого технецием-99 м ципрофлоксацина для диагностических исследований // "Химико-фармацевтический журнал". - 2009. - № 9. - С.35-39].

Известен способ получения реагента для приготовления меченого технецием-99 м норфлоксацина [В. Варламова, В.С. Скуридин, С.И. Сазонова. Получение и медико-биологические испытания меченого технецием-99 м норфлоксацина гидрохлорида. // Бюллетень сибирской медицины, 2010. - т.9, № 6. - С.108-115], заключающийся в приготовлении солянокислого раствора олова (II) хлорида дигидрата с концентрацией олова 7 мг/мл путем осторожного смешивания 0,07 мг олова (II) хлорида дигидрата и 0,2 мл 1М соляной кислоты с последующим доведением объема дистиллированной водой до 10 мл; 0,25-0,3 мг приготовленного раствора упаривают во флаконах до суха при температуре 100°С, добавляют 4-5 мг порошка норфлоксацина гидрохлорида, укупоривают, стерилизуют в автоклаве и хранят в холодильнике.

Данный способ является наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату и выбран в качестве прототипа.

Недостатком способа прототипа является упаривание раствора олова (II) хлорида дигидрата до суха при температуре 100°С, что снижает стабильность и срок годности реагента для приготовления радиофармпрепарата за счет изменения химических свойств олова (II) хлорида дигидрата, вследствие воздействия высокой температуры.

Задача изобретения - создание способа приготовления реагента для получения меченого технецием-99 м норфлоксацина, позволяющего увеличить срока годности реагента.

Технический результат заключается в повышении стабильности реагента для получения меченого технецием-99 м норфлоксацина.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе приготовления реагента для получения меченого технецием-99 м норфлоксацина, включающем приготовление солянокислого раствора олова (II) хлорида дигидрата и его смешивание с порошком норфлоксацина гидрохлорида, согласно изобретению, полученную смесь замораживают при температуре жидкого азота, затем подвергают лиофильной сушке при температуре Т=-50ºС в вакууме - 0,0015 Торр, в течение не менее 20,5 часов, с последующим досушиванием в течение не менее 5,5 часов при температуре +16±2°С.

Новым в предлагаемом способе является лиофилизация порошка норфлоксацина гидрохлорида и раствора хлорида олова, включающая в себя заморозку и выдерживание в http://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%92%D0%B0%D0%BA%D1%83%D1%83%D0%BC" o "Вакуумой камере, где происходит возгонка растворителя и удаление основной массы Н₂О, с последующим удалением связанной влаги (досушивание).

Лиофилизация раствора хлорида олова увеличивает стабильность и срок годности реагента для приготовления радиофармпрепарата на основе меченого технецием-99 м норфлоксацина, а также не влияет на качество и радиохимическую чистоту указанного радиофармпрепарата.

Новые признаки проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста. Идентичной совокупности признаков в известных технических решениях не обнаружено.

Изобретение может быть использовано в химико-фармацевтической промышленности при разработке новых радиофармпрепаратов на основе меченого технецием-99 м норфлоксацина.

На фиг. 1 изображена сцинтиграмма тела крысы через 1 ч после внутривенного введения радиофармпрепарата на основе меченого технецием-99 м норфлоксацина, который был получен из реагента, приготовленного по предлагаемому способу.

Осуществление способа рассмотрим на примере конкретного выполнения. В мерную пробирку вносят навеску олова (II) хлорида дигидрата (SnCl₂·2Н₂О) массой 0,07 г, осторожно приливают 0,2 мл 1М соляной кислоты (НСl). По окончании растворения доводят объем кипяченой дистиллированной водой до 10 мл. Полученный раствор имеет концентрацию олова 7 мг/мл. Использовали только свежеприготовленный раствор.

Во флакон вместимостью 10 мл вносят 0,25-0,30 мг приготовленного раствора олова и 4-5 мг порошка норфлоксацина гидрохлорида. Содержимое флакона замораживают при температуре жидкого азота, погружая его в контейнер с жидким азотом. После этого флакон помещают в камеру сублиматора и подвергают лиофильной сушке при заданных параметрах лиофилизатора: Т=-50ºС, вакуум - 0,0015 Торр. При этих условиях проводят лиофильную сушку в течение не менее 20,5 часов. Затем флакон перемещают в верхнюю лиофильую камеру и проводят досушивание в течение не менее 5,5 ч при температуре +16±2°С.

В первой фазе процесса лиофилизации глубокая и быстрая заморозка важна для получения качественного продукта, т.к. размеры кристаллов льда получаются меньше и они быстрее испаряются на следующем этапе.

В ходе лиофилизации лед удаляется из замороженного образца в процессе возгонки. Процесс осуществляется за счет работы коллектора и вакуумного насоса. Для обеспечения этого процесса в рабочей камере создается высокий вакуум (0,0015 Торр) Температура коллектора, в котором конденсируется пары воды и растворителя, должна быть минимум на 15÷20°С ниже, чем температура плавления образца.

Такие параметры процесса как температура сушки, величина вакуума, температура конденсации взаимозависимы, и изменения одного из них неизбежно ведет за собой изменение других параметров.

Процесс досушивания при температуре ниже +16±2°С протекает более длительное время, при температуре выше +20°С происходит агломерация частиц.

В работе использовали лиофильную сушилку FreeZone (Labconco).

Из приготовленного реагента получили радиофармпрепарат, путем внесения во флакон с реагентом 5 мл раствора натрия пертехнетата, ^99mTc с активностью 110-1480 МБк/мл с последующим инкубированием в течение 20 мин до полного растворения. Радиохимическая чистота полученного радиофармпрепарата составила 98,8% на момент приготовления и через 4 часа после приготовления. Испытания, проведенные на экспериментальных животных, показали, что после внутривенного введения накопление радиофармпрепарата в печени меньше, чем в почках (фиг. 1), что соответствует должному и свидетельствует о сохранении качества радиофармпрепарата.

Определение срока хранения реагентов проводилось на опытной партии из 24 флаконов. Образцы хранились при температуре от +2 до +10ºС. Для определения срока хранения из приготовленных образцов реагента получали радиофармпрепарат с последующим определением в нем радиохимической примеси (РХП) невосстановленного ^99m Тс (IV), которая по существующим нормам не должна превышать 1%. Изготовление радиофармпрепарата, с последующим определением в нем радиохимической примеси невосстановленного ^99m Тс (IV), проводили с интервалом 30 суток. Было показано, что реагенты сохраняют свои свойства в течение 1 года, что соответствует требованиям предъявляемым к сроку их хранения. Таблица 1 - определение радиохимической примеси в РФП «Норфлоксацин, ^99m Тс» при определении срока хранения реагента.

Описанный выше способ по сравнению с известными имеет преимущество, заключающееся в увеличении срока годности реагентов для приготовления радиофармпрепарата на основе меченого технецием-99 м норфлоксацина.

Таблица 1

№ пробы	Срок испытаний реагента, сутки	РХП,%
1 2	30	0,51 0,5
3 4	60	0,49 0,54
5 6	90	0,44 0,51
7 8	120	0,62 0,59
9 10	160	0,47 0,58
11 12	180	0,54 0,58
13 14	210	0,60 0,62
15 16	240	0,59 0,61
17 18	270	0,64 0,68
19 20	300	0,73 0,78
21 22	330	0,78 0,79
23 24	360	0,69 0,72