4-(4-бромфенил)-4-оксо-2-{[3-(этоксикарбонил)-4,5-диметилтиен-2-ил]амино}-2-бутеновая кислота, обладающая противовоспалительной и анальгетической активностью

Формула изобретения

4-(4-Бромфенил)-4-оксо-2-{[3-(этоксикарбонил)-4,5-диметилтиен-2-ил]амино}-2- бутеновая кислота



обладающая противовоспалительной и анальгетической активностью.

Описание изобретения к патенту

Изобретения относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот, а именно к 4-(4-бромфенил)-4-оксо-2-{[3-(этоксикарбонил)-4,5-диметилтиен-2-ил]амино}-2-бутеновой кислоте (1) формулы:

Обладающая противовоспалительной и анальгетической активностью, что позволяет предположить ее использование в медицине в качестве лекарственных средств с противовоспалительными и анальгетическими свойствами.

Аналогом по структуре заявляемым соединениям является 4-(4-метилфенил)-4-оксо-2-[3-этоксикарбонил-4,5-диметилтиофен-2-иламино]бут-2-еновая кислота (2) [4-(4-метилфенил)-4-оксо-2-[3-этоксикарбонил-4,5-диметилтиофен-2-иламино]бут-2-еновые кислоты, обладающие противовоспалительной и анальгетической активностью: пат. 2389724 Рос. Федерация. № 2008151813/04; заявл. 25.12.08; опубл. 20.05.10, бюл. № 14] формулы:

Приведены данные по противовоспалительной и анальгетической активности:

Соединение	% торможения каррагенинового отека через 4 часа	Латентный период оборонительного рефлекса, через 2 часа в с
2	35,3	23,5

Эталоном сравнения выбран ортофен формулы:

который широко применяется в лечебной практике и является аминопроизводным алифатической кислоты и аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - с.170].

Задачей изобретения является поиск в ряду производных 4-арил-2,4-диоксобутановых кислот веществ с выраженным противовоспалительным и анальгетическим действием и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением 4-(4-бромфенил)-4-оксо-2-{[3-(этоксикарбонил)-4,5-диметилтиен-2-ил]амино}-2- бутеновой кислоты, которая обладает противовоспалительной и анальгетической активностью. Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием 4-(4-бромфенил)-2,4-диоксобутановой кислоты с этиловым эфиром 2-амино-4,5-диметилтиофен-3-карбоновой кислоты в среде этилового спирта при 60°C с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме:

Пример получения соединения 1. К раствору 2.7 г (0.01 моль) 4-(4-бромфенил)-2,4-диоксобутановой кислоты в 20 мл спирта этилового прибавляют раствор 1.85 г (0.01 моль) этилового эфира 2-амино-4,5-диметилтиофен-3-карбоновой кислоты в 20 мл того же растворителя и выдерживают при комнатной температуре 24 часа. Смесь охлаждают до 0°С, выпавший осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из ацетонитрила. Выход 2.00 г (92.17%). Т.пл. 179-180°С. Найдено, %: С 49.35; Н 3.69; N 3.22; О 18.23; S 67.29; Br 18.23 C18H16BrNO₅S. Вычислено, %: С 49.33; Н 3.68; N 3.20; О 18.25; S 67.32; Br 18.23. ИК спектр (ФСМ 1201, вазелиновое масло, , см^-1): 3189.39 (NH), 1676.30 (COO). Спектр ЯМР ¹Н (Varian Mercury300 (300 MHz), ДМСО-d₆ , ГМДС, , м.д.): 1,33 (т, J 7,2 Гц, 3Н, Me), 2,19 (с, 3Н, Me), 2,24 (с, 3Н, Me), 4,33 (кв, J 7,2 Гц, 2Н, СН₂О), 6,47 (с, 1Н, С=СН), 7,72 (д, J 8,7 Гц, 2Н, аром.), 7,43 (д, J 8,7 Гц, 2Н, аром.), 12,71 (с, 1Н, NH).

Полученное соединение 1 представляет собой ярко-красное кристаллическое вещество, растворимое в хлороформе, толуоле, ацетоне, нерастворимое в воде и гексане.

Исследование противовоспалительной, анальгетической активности и острой токсичности проводили в научно-исследовательской лаборатории БАВ Естественнонаучного института Пермского государственного национального исследовательского университета

Острую токсичность (ЛД₅₀, мг/мл) соединения (1) определяли по методу Г.Н.Першина [Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотерапии // М., С.100, 109-117 (1971)]. Соединение (1) вводили внутрибрюшинно белым мышам массой 16-18 г в виде взвеси в 2% крахмальной слизи. Для исследуемого соединения (1) ЛД₅₀ составляет >1500 мг/кг.

Согласно классификации токсичности препаратов соединение (1) относятся к V классу практически нетоксичных препаратов [Измеров Н.Ф., Сапоцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977. - с.196].

Противовоспалительную активность изучали на белых крысах линии Wistar массой 170-200 г. Антиэкссудативное действие соединений (I) оценивали на модели острого воспалительного отека лапки, вызванного путем субплантарного введения 0,1 мл 1% раствора каррагенина. Показателем действия исследуемых соединений, вводимых внутрь в дозе 50 мг/кг в 2% растворе крахмальной слизи, служила величина отека лапки, определяемая онкометрически. О силе антиэкссудативного действия судили по степени ингибирования воспалительной реакции в % к контролю [Методические рекомендации по экспериментальному доклиническому изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ. - М., 1982. - 17 с. Одобрено Фармакологическим комитетом МЗ СССР 11 ноября 1992 г. Протокол № 22]. Сравнивали эффект с ортофеном в дозе 10 мг/кг [Неугодова В.П., Цариченко Г.В., Рындина С.Е. Токсикологическая оценка вольтарена // Фармаколог, и токсиколог. - 1986. Т.49. - № 1. С.123].

Анальгетическую активность соединения (I изучали на беспородных мышах массой 18-22 г с помощью теста «горячая пластинка» [Radell Z.O., Selitto J.J. A method for measurement of analgesic activity on inflamed tissue. // Arch. Intermat. Pharmacodun. Et ther. 1957. - Vol.11. - № 4 - S.409-419].

Исследуемые соединения вводили внутрибрюшинно в виде 2% крахмальной слизи в дозе 50 мг/кг за 0,5 ч до помещения животных на нагретую до 53,5°С металлическую пластинку. Показателем болевой чувствительности служила длительность пребывания животного на горячей пластинке до момента облизывания задних лапок, измеряемая в секундах.

Результаты испытаний представлены в таблице

Противовоспалительная, анальгетическая активность и острая токсичность соединения 1
Соединение	Доза, мг/кг	ЛД50 мг/кг	% торможения* каррагенинового отека	Латентный период оборонительного рефлекса, с
4 часа	1,5 часа
Контроль	-	-	0,0	10,0
1	50	>1000	44,0	29,5
Ортофен	10	74	61,0	26,2
*по сравнению с контролем

Как видно из таблицы, заявляемое соединение (1) проявляет выраженную противовоспалительную и анальгетическую активность и менее токсичен, чем препарат сравнения - ортофен. Следовательно, заявляемое соединения (I) может найти применение в медицинской практике в качестве противовоспалительного и анальгетического лекарственного средства.